Esquistossomose mansoni humana: Análise do papel da ... - Unifenas

MATERIAL E MÉTODOS
Índice de
Granuloma
Alterações Morfológicas
1 ≤ 1 célula aderida
2 Até 5 células aderidas
3 > 5 células aderidas
4 > 5 células aderidas +
migração celular
5 1 camada células +
migração celular
6 >1 camada células +
migração celular
Tabela 2 - Classificação dos granulomas em torno de cada esfera de Poliacrilamida
A média ponderada de classificação de 100 esferas em cada poço era
expressa como índice de granuloma (GI). Cada cultura era feita em triplicatas e a
média das triplicatas era apresentada, com respectivo desvio padrão.
4.4.3 – ANTICORPOS
O anticorpo monoclonal anti-IL-10 (JES3-9D7), assim como a IL-10
recombinante (rIL-10) foram gentilmente cedidos pelo DNAX Research Institute. Os
anticorpos eram adicionados às culturas no dia 0 , em volume de 25 µl previamente
diluídos para concentrações finais previamente estabelecidas de 20 µg para os
ensaios de formação de granuloma in vitro. A concentração de rIL-10 utilizada nos
ensaios de formação de granuloma foi estabelecida em estudos anteriores para 2
U/ml. Em paralelo, foi utilizado IgG de rato (GL113) anti-βgalactosidase de
Escherichia coli nas mesmas concentrações, como controle para os anticorpos anti-
IL-10.
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