Biologia Molecular – QBQ3401 Química-Noturno 2009

5. Centrifugar 5 minutos a 5000 rpm.
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QBQ-3401 / Biologia Molecular – 2008
6. Remover delicadamente a fase aquosa (fase superior) com pipeta Pasteur de ponta grossa para uma
proveta. Estimar o volume e transferir para um cálice graduado.
7. Medir, na mesma proveta, 2 volumes de etanol resfriado a -20°C e adicioná-lo lentamente com
pipeta Pasteur, pela parede do cálice.
8. "Enrolar" o DNA com uma pipeta Pasteur de ponta curva. Transferí-lo para um tubo de ensaio
contendo 10mL de Solução IV (NaCl 1%). Aquecer a 50 o C, por 10-20 minutos, até completa
dissolução.
9. Identificar o tubo com o número do grupo. Tomar uma alíquota e diluir em 1 mL de água. Medir a
D.O.260nm e D.O.280nm e calcular a relação D.O.260nm /D.O.280nm. Estimar a quantidade de DNA obtida
assumindo que D.O.260nm (Densidade Óptica a 260nm) = 1 equivale a 50µg DNA/mL.