h) O único aminoácido que possui um alfa-amino grupo substituído. Influencia o dobramentoda proteína forçando uma curvatura na ca<strong>de</strong>ia.i) O grupo R tem pKa próximo <strong>de</strong> 4 e assim está carregado negativamente em pH 7.j) Tem grupo R aromático, capaz <strong>de</strong> formar pontes <strong>de</strong> hidrogênio; tem pKa perto <strong>de</strong> 10.k) Forma ligações cruzadas <strong>de</strong> dissulfeto (pontes <strong>de</strong> dissulfeto) entre ca<strong>de</strong>ias polipeptídicas,o pKa do seu grupo funcional é cerca <strong>de</strong> 8.l) O grupo R tem pKa próximo <strong>de</strong> 12, fazendo-o positivamente carregado em todos os pHsfisiológicos. Sua carga positiva é importante em algumas proteínas para a ligação comgrupos fosfatos negativamente carregados.m) Quando seu grupo R polar não carregado é hidrolisado, este aminoácido converte-se emoutro que possui uma carga negativa em seu grupo R quando em pH ao redor <strong>de</strong> 7.06.Wood et al., Biochemistry: A Problems Approach, Capítulo 2, Problema 2-2. Analisandoas estruturas dos aminoácidos, indique qual <strong>de</strong>les se adapta às seguintes <strong>de</strong>scrições:a) ______________________ altera o dobramento da ca<strong>de</strong>ia polipeptídica porque não é umverda<strong>de</strong>iro aminoácido. Nas ca<strong>de</strong>ias polipeptídicas da mioglobina e hemoglobina nemtodo dobramento tem ________________, mas todo(a) _________ produz umdobramento. (Todos os três espaços vazios correspon<strong>de</strong>m ao mesmo resíduo <strong>de</strong>aminoácido, o qual é único na maneira pela qual ele forma ligações peptídicas).b) ________________ tem uma ca<strong>de</strong>ia lateral não polar e interage com outros anéisaromáticos. (Os anéis aromáticos têm a tendência a se empilhar (estaquear) com outrosanéis aromáticos).c) ______________ é pequeno(a), e não contém enxofre. Ele (ela) po<strong>de</strong> formar pontes <strong>de</strong>hidrogênio internas numa proteína enovelada.d) O par <strong>de</strong> elétrons solitário em um dos nitrogênios do anel no(a) ______________, o(a)torna, como metionina um ligante potencial, importante na união dos íons <strong>de</strong> ferro nahemoglobina.e) ______________________ <strong>de</strong>sempenha um papel crucial na estabilização da estrutura <strong>de</strong>muitas proteínas em virtu<strong>de</strong> da habilida<strong>de</strong> <strong>de</strong> dois <strong>de</strong> tais resíduos formar uma ligaçãocovalente entre suas ca<strong>de</strong>ias laterais, quando estes resíduos estão presentes na mesma ouem diferentes ca<strong>de</strong>ias polipeptídicas.f) Os carbonos em um aminoácido são <strong>de</strong>signados por letras do alfabeto grego começandocom o carbono alfa e exten<strong>de</strong>ndo pela ca<strong>de</strong>ia lateral: beta, gama, <strong>de</strong>lta, ... Se dois ou trêsgrupos (não átomos <strong>de</strong> hidrogênio) são ligados ao carbono beta, a molécula é ditaramificada no carbono beta. Dois resíduos adjacentes que têm ramificações no carbono βtornam a estrutura do polipeptí<strong>de</strong>o conhecido como alfa hélice instável. Por este critério__________, ________ e ________ <strong>de</strong>vem interromper a α-hélice quando adjacentes.g) Nas proteínas, sob condições fisiológicas normais (próximo ao pH = 7), as ca<strong>de</strong>ias laterais<strong>de</strong> ________ e __________ são quase totalmente positivamente carregadas, mas asca<strong>de</strong>ias laterais <strong>de</strong> __________ estão somente em parte positivamente carregadas.PEPTÍDEOS1. Baseado em Marzzoco e Torres, Bioquímica Básica, Página 220, Problema 3.Para o tripeptí<strong>de</strong>o H 3 N + -Ala-Lys-Ser-COO -a) Classifique os grupos R segundo suas polarida<strong>de</strong>s.b) Diga para que tipo <strong>de</strong> ligação esses grupos po<strong>de</strong>riam contribuir na estrutura terciária <strong>de</strong>uma proteína.c) Calcule o pI sabendo que:
Ala Lys Ser GlupK a1 2,34 2,18 2,21 2,19pK a2 9,69 8,95 9,15 9,67pK a3 (grupo R) 10,53 4,25d) Para que polo migraria o tripeptí<strong>de</strong>o numa eletroforese feita a pH = 7?e) Discuta a capacida<strong>de</strong> do peptí<strong>de</strong>o <strong>de</strong> atuar como tampão.f) Refaça os ítens anteriores para um tripeptí<strong>de</strong>o contendo ácido glutâmico no lugar <strong>de</strong>lisina.02. Stryer, Biochemistry, 3 a edição, Capítulo 3, Problema 1. Os seguintes reagentes sãocomumente usados na Química <strong>de</strong> Proteínas:CNBr (brometo <strong>de</strong> cianogênio) Cloreto <strong>de</strong> DabsilaUréiaHCl 6Nβ-MercaptoetanolNinhidrinaTripsinaFenil isotiocianatoÁcido PerfórmicoQuimiotripsinaQual(is) <strong>de</strong>le(s) é(são) o(s) mais a<strong>de</strong>quado(s) para executar cada uma das seguintes tarefas?a) Determinação da sequência <strong>de</strong> aminoácidos <strong>de</strong> um peptí<strong>de</strong>o pequeno.b) I<strong>de</strong>ntificação <strong>de</strong> um resíduo amino-terminal <strong>de</strong> um peptí<strong>de</strong>o (do qual dispõe-se somente<strong>de</strong> menos <strong>de</strong> 10 -7 g).c) Desnaturação reversível <strong>de</strong> uma proteína isenta <strong>de</strong> pontes <strong>de</strong> dissulfeto. Que outroreagente seria necessário se elas estivessem presentes?d) Hidrólise <strong>de</strong> ligações peptídicas no lado carboxílico <strong>de</strong> resíduos com R aromático.e) Clivagem <strong>de</strong> ligações peptídicas no lado carboxílico <strong>de</strong> metioninas.f) Hidrólise <strong>de</strong> ligações peptídicas no lado carboxílico <strong>de</strong> resíduos <strong>de</strong> lisina e arginina.03. Rawn, Biochemistry, Capítulo 3, Problema 4. Um peptí<strong>de</strong>o tem a composição: Ala, Arg,Asp 2 , Glu 2 , Gly 3 , Leu, Val 3 .Os seguintes peptí<strong>de</strong>os foram isolados após hidrólise ácida parcial e suas sequências<strong>de</strong>terminadas:(1) Asp-Glu-Val-Gly-Gly-Glu-Ala(2) Val-Asp-Val-Asp-Glu(3) Val-Asp-Val(4) Glu-Ala-Leu-Gly-Arg(5) Val-Gly-Gly-Glu-Ala-Leu-Gly-Arg(6) Leu-Gly-ArgCom estes dados, indique a sequência <strong>de</strong> aminoácidos no peptí<strong>de</strong>o original.04. Segel, Biochemical Calculations, Capítulo 2, Problema 2-3. A hidrólise parcial <strong>de</strong> umaproteína forneceu vários polipeptí<strong>de</strong>os. Um <strong>de</strong>les foi purificado. Deduza a sequência <strong>de</strong>aminoácidos neste polipeptí<strong>de</strong>o a partir das seguintes informações:a) A hidrólise ácida completa forneceu Ala + Arg + 2 Ser + Lys + Phe + Met + Trp + Pro.b) O tratamento com fluorodinitrobenzeno (FDNB, o reagente <strong>de</strong> Sanger) seguido dahidrólise ácida completa forneceu como únicos dinitrofenil <strong>de</strong>rivados (DNP <strong>de</strong>rivados), aalfa- dinitrofenilalanina (alfa-DNP-Ala) e a epsilon-dinitrofenilisina (epsilon-DNP-Lys).c) Carboxipeptidase A ou carboxipeptidase B não liberaram qualquer aminoácido Cterminal.d) O tratamento com brometo <strong>de</strong> cianogênio (CNBr) forneceu dois peptí<strong>de</strong>os. Um continhaSer + Trp + Pro. O outro continha todos os aminoácidos restantes (inclusive a segundaserina).e) O tratamento com quimiotripsina forneceu três peptí<strong>de</strong>os. Um continha somente Ser +Pro. Outro, somente Met + Trp. O terceiro Phe + Lys + Ser + Arg + Ala.