süleyman demirel üniversitesi tıp fakültesi hastanesinde izole

yöntemlerini standardize eder (89). Son olarak 2008 yılında M27-A3 yönergesi
kullanıma sunulmuştur (90).
Antifungal duyarlılık test yöntemleri:
1) Dilüsyon temeline dayalı yöntemler:
a) Buyyon makrodilüsyon yöntemi: Genellikle pH indikatörlü RPMI 1640
besiyeri kullanılmaktadır. Antifungal ilaçlar önce uygun çözeltiler içerisinde
sulandırılıp filtrelerden süzülerek steril edilirler. Mayanın steril SF içerisinde
süspansiyonu hazırlanır. Hazırlanan antimikotiklerden 0,1 ml, üzerine de maya
içeren solüsyondan 0,9 ml deney tüplerine eklenir ve karıştırılır. 35°C’de 46- 50 saat
inkübasyon sonunda ilaçlı besiyeri tüpleri, üreme kontrol tüpleri ile kıyaslanarak
görsel olarak değerlendirilirler (91).
b) Buyyon mikrodilüsyon yöntemi: Makrodilüsyon yöntemine benzer.
Fakat yapılması daha kolay, daha ucuz ve daha az zaman alıcı olup 24 saatte sonuç
alınabilir. Önce ilaçların ve mantarlarının uygun sulandırımları hazırlanır. Deneyler
U tabanlı 96 kuyucuklu steril mikroplaklarda çalışılır. Kuyucuklara 100’er μl ilaç
solüsyonu ve 100’er μl maya solüsyonu dağıtılır. Plaklar 35°C’de 24- 48 saat inkübe
edilir. Test çukurları üreme kontrol çukuru ile görsel olarak değerlendirilir. Elde
edilen bulanıklık 0’dan 4’e kadar rakamla ifade edilir:
0: Bulanıklık yok
1: Hafif bulanık (kontrole göre % 0- 25 bulanıklık )
2: Bulanıklıkta belirgin azalma (kontrole göre %25- 50 bulanıklık)
3: Bulanıklıkta hafif azalma (kontrole göre %75- 100 bulanıklık)
4: Bulanıklıkta azalma yok (kontrole göre %100 bulanıklık)
Bu kriterler göz önüne alındığında MİK değeri amfoterisin B için hiç
bulanıklığın olmadığı 0 değeri, azoller için ise 2 değeridir (91).
c) Agar dilüsyon yöntemi: Agar besiyeri hazırlanırken içerisine 1/10
oranında ilaç dilüsyonları ilave edilir. Üreme kontrolü için de ilaçsız besiyeri
hazırlanır. Maya solüsyonu diğer yöntemlerdeki gibi hazırlanır. Besiyerine 1- 3 μl bu
solüsyonlardan ekim yapılır. Ekimler 30°C’de 24 saat inkübe edildikten sonra
23