А - Научно-медицинская библиотека СибГМУ

30
Предложен критерий разделения (разрешение) Rs, характеризующий
разделение двух соседних пиков на хроматограмме:
R
S
t
− t
t
− t
R 2 R1
R 2 R1
= = 2
(1.16),
( w 2 + w1
) w 2 + w1
2
где w1 и w2 – ширина пиков, измеренная у их основания.
Если для двух близких пиков w1 = w2 , то
Δt
R Δt
R
RS
= =
(1.17).
w w
2
1
Как видно из уравнения (1.16), разрешение пиков зависит от их ширины
и от расстояния между максимумами пиков.
Разрешение функция эффективности N, коэффициента селективности
α и ёмкости к І колонки:
I
1 ⎛ α −1⎞⎛
к ⎞
R S = N ⎜ ⎟⎜
⎟ (1.18).
I
4 ⎝ α ⎠⎝1
+ к ⎠
Из этого уравнения легко рассчитать число теоретических тарелок,
необходимое для разделения с заданным разрешением:
1
2⎛
к + 1⎞
⎛ α ⎞
N= 16R S⎜
⎟ 1 ⎜ ⎟ (1.19)
⎝ к ⎠ ⎝ α −1⎠
Оптимизация разделения сводится к выбору лучшего сочетания параметров,
входящих в уравнение (1.19). Например, для увеличения Rs в два
раза нужно увеличить эффективность N или длину колонки L в четыре
раза. На величину Rs в большей степени влияет коэффициент селективности:
при изменении α от 1,02 до 1,04 Rs увеличивается в два раза.
На рис.8 показано влияние изменения каждого из рассмотренных
факторов на общий характер хроматограмм. Как видно из этого рисунка,
увеличение эффективности колонки (при сохранении селективности на том
же уровне) приводит к сужению пиков и увеличению их высоты (wa > wб,
размытие зоны уменьшается).
Наоборот, уменьшение эффективности колонки приводит к расширению
пиков, к их размытию, пики постепенно переходят в “горбы”. Расстояние
между максимумами остается постоянным. Если же при постоянной
эффективности колонки увеличивать или снижать селективность
НЖФ, то пики на хроматограммах будут в первом случае раздвигаться, а
во втором сближаться без изменения их геометрической формы.
При использовании малоселективных фаз наблюдается перекрытие
пиков – частичное или полное (рис.10 а). В то же время следует помнить,
что при использовании селективных фаз может также произойти перекрытие
пиков – за счет неэффективной работы колонки (рис.10 б).
2
2