iv. mezioborové setkênè mladðch biologů ... - Chemické listy

Chem. Listy 98, 271 – 314 (2004) IV. Amerika 2004.
CH 3 O
RO
OH
O
(P,1S)-(+)-5 (R=CH 3
)
(P,1S)-(+)-6 (R=H)
I
c, d
CH 3 O
CH 3 O
TIPS
(1S)-(-)-4
O *
1 (1S)-(-)-2
O
*
Tol
3
a, b
O *
(a) Pd(PPh3)4, CuI (kat.); (b) Bu4NF; (c) CpCo(CO)2 (kat.);
(d) EtSNa (20 ekv.)
Podporováno GA ČR (reg. č. 203/02/0248) a ÚOCHB AV ČR
(výzkumný projekt č. Z4 055 905).
LITERATURA
1. Urbano A.: Angew. Chem. Int. Ed. 42, 3986 (2003).
2. Teplý F., Stará I. G., Starý I., Kollárovič A., Šaman D.,
Rulíšek L., Fiedler P.: J. Am. Chem. Soc. 124, 9175
(2002).
3. Teplý F., Stará I. G., Starý I., Kollárovič A., Šaman D.,
Vyskočil Š., Fiedler P.: J. Org. Chem. 68, 5193 (2003).
VYUŽITÍ FLUORESCENČNÍCH TECHNIK K
DETEKCI BUNĚČNÉ VIABILITY TERMOFILNÍCH
BAKTERIÍ
BARBORA SEKAVOVÁ a KAREL MELZOCH
Ústav kvasné chemie a bioinženýrství, Vysoká škola chemickotechnologická
v Praze, Technická 5, 166 28 Praha 6
barbora.sekavova@vscht.cz
Fluorescenční mikroskopie a průtoková cytometrie dnes
nachází velmi široké uplatnění při studiu fyziologického stavu
a růstové dynamiky mikroorganismů. V celé řadě
biotechnologických procesů se uplatňují převážně pro svoji
rychlost a jednoduchost a pomalu nahrazují klasické kultivační
techniky, které již nestačí stále se zvyšujícím požadavkům.
Většina studií týkající se problematiky fluorescenčního barvení
bakterií je zaměřena na mikroorganismy mezofilní, příp. na
hypertermofilní archaea, termofilní bakterie s optimální
teplotou růstu 55–85 °C jsou opomíjeny, i přes stoupající
možnosti jejich využití převážně při degradaci a
dekontaminaci průmyslových odpadů.
Předmětem této studie bylo nalezení vhodných parametrů
a optimalizace metodik stanovení buněčné viability termofilů
pomocí různých fluorescenčních barviv, jak pro čisté kultury
na komplexních médiích, tak pro nedefinovanou směsnou
populaci termofilních mikroorganismů z aerobní degradace
lihovarských výpalků. Testována byla barviva propidium jodid
Tol
Tol
(PI), calcein acetoxymethyl ester (Calcein-AM), fluorescein
diacetát (FDA) a BCECF-AM (2',7'-bis-(2-carboxyethyl)-5-
(and-6)-carboxyfluorescein, acetoxymethyl ester), pro bakterie
Bacillus acidocaldarius, B. stearothermophilus, Thermus
species, T. aquaticus a T. ruber.
K vyhodnocení experimentů byl použit průtokový
cytometr PAS III (Partec) a mikroskop Olympus BX-51
vybavený fluorescenčním systémem a digitálním systémem
záznamu obrazu. Podmínky značení byly stanoveny takto:
koncentrace PI 15 µg.ml -1 , t inkubace 10 min, fluorescein diacetát
10 µg.ml -1 FDA, t inkubace 30 min, Calcein-AM 10 µg.ml -1 ,
t inkubace 30 min a BCECF-AM koncentrace 5 µg.ml -1 , t inkubace 30
min, při teplotě 25 °C. Dále byly jednotlivé metodiky
fluorescenčního značení porovnány z hlediska jejich vhodnosti
k determinaci viability výše zmíněných termofilů, a nakonec
aplikovány na reálný proces aerobní degradace lihovarských
výpalků. Digitální záznamy obrazů byly upraveny a
vyhodnoceny počítačovou analýzou obrazu.
Tento projekt byl realizován za podpory Grantové agentury
České republiky, grant č. 525/03/0375.
LITERATURA
1. Beck P., Huber R.: EMS Microbiol. Lett. 148, 11 (1997).
2. Breeuwer P., Abee T.: Int. J. Food Microbiol. 55, 193
(2000).
3. Joux F., Lebaron P.: Microbes and Ifection 2, 1523
(2000).
4. Kristjansson J. K.: Thermophilic bacteria. CRC Press,
USA.
5. Slavík J.: J. Lumin. 72-74, 575 (1997).
6. http://www.probes.com/handbook/, staženo 2. 3. 2004.
DIPEPTIDYL PEPTIDASE IV ACTIVITY AND/OR
STRUCTURE HOMOLOGUES (DASH): THE NOVEL
PLAYERS IN THE PATHOGENESIS OF
RHEUMATOID AND PSORIATIC ARTHRITIDES?
E. SCHOLZOVA
Joint Laboratory of Cancer Cell Biology of the Institute of
Biochemistry and experimental Oncology of the 1st Faculty of
Medicine, Charles University Prague and the Institute of
Physiology, Academy of Sciences of Czech Republic
Dipeptidyl peptidase-IV (EC 3.4.14.5, DPP-IV/CD26)
was shown to play a role in many physiological and
pathological events, mostly due to its potential to cleave
regulatory peptides as neuropeptide Y, substance P,
chemokines etc. Such proteolytic processing can either
terminate biological effect of the peptide or change its receptor
preference, leading to its signalling potential modification.
Changes of DPP-IV enzymatic activity as well as alterations of
its biologically active substrates in some rheumatic diseases
were observed by several authors. Subsequently, a number of
molecules constituting a group of “Dipeptidyl peptidase-IV
Activity and/or Structure Homologues” (DASH) was
discovered1. Because of their common capacity to cleave
303