CamSep 2 S

CHROMATOGRAFICZNE OZNACZANIE CAŁKOWITEGO POTENCJAŁU
ANTYOKSYDACYJENGO MIODÓW
Paweł WANTUSIAK, Paweł PISZCZ, Dorota ZAJĄC, Iwona KIERSZTYN,
Bronisław K. GŁÓD
Zakład Chemii Analitycznej, Instytut Chemii, Akademia Podlaska, ul. 3 Maja 54, 08-110 Siedlce
W literaturze można znaleźć wiele prac poświęconych powstawaniu, charakterystyce i
oddziaływaniu na żywe organizmy wolnych rodników. Z pośród całej gamy rodników najbardziej
reaktywnym jest rodnik hydroksylowy, dlatego jego oznaczenie pozwala uzyskać informacje o
całkowitym stresie oksydacyjnym. Rodniki hydroksylowe mogą reagować z szeregiem związków
organicznych w wyniku reakcji addycji, substytucji nukleofilowej lub wolnorodnikowej.
Antyoksydanty mogą być oznaczane wieloma metodami, w tym za pomocą HPLC. Okazuje
się, że często istotniejsze informacje można uzyskać oznaczając sumaryczną moc antyoksydacyjną
wszystkich antyoksydantów zawartych w próbce (całkowity potencjał antyoksydacyjny, CPA) niż
stężenia poszczególnych antyoksydantów. W literaturze opisanych jest wiele metod oznaczania
CPA. Metody oparte na HPLC wykorzystywały detekcję elektrochemiczną, fluorymetryczną czy
konduktometryczną. Najczęściej stosowanym w HPLC detektorem jest detektor fotometryczny
(UV). W pracy wykazaliśmy możliwość zastosowania detekcji UV do oznaczania CPA. Układ
pomiarowy zawierał zarówno badany związek (próbkę miodu) oraz będący pułapką spinową
„sensor” - kwas p-hydroksybenzoesowy. Reagowały one z, wygenerowanymi w reakcji Fentona,
rodnikami hydroksylowymi. Zmiana pola powierzchni piku produktu reakcji sensora, w tym
przypadku kwasu 3,4-dihydroksybenzoesowego, z rodnikami hydroksylowymi jest miarą CPA.
Alternatywna metoda pomiaru CPA oparta jest na wyznaczeniu całkowitego pola powierzchni
wszystkich zarejestrowanych pików na detektorze amperometrycznym w zakresie potencjałów
utleniania elektrody pracującej (węgiel szklisty).
Opracowane metody zastosowane zostały do oznaczania CPA miodów i miodów pitnych.
Wyniki skorelowane zostały z uzyskanymi za pomocą różnicowej woltametrii pulsowej (DPV) oraz
z całkowitą zawartością polifenoli (metoda Folina-Ciocalteu’a).
44