CamSep 2 S
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
SPRZĘŻENIE HPLC-TLC W CHROMATOGRAFII PREPARATYWNEJ<br />
EKSTRAKTÓW ROŚLINNYCH<br />
Grzegorz JÓŹWIAK, Łukasz CIEŚLA, Łukasz PRAJZNER, Justyna ADRIANEK<br />
/Preparatywna HPLC i TLC/<br />
Zakład Chemii Nieorganicznej, Wydział Farmaceutyczny, Uniwersytet Medyczny w Lublinie<br />
e-mail: g.jozwiak@umlub.pl<br />
Celem niniejszych badań było przygotowanie warunków rozdzielenia chromatograficznego<br />
ekstraktu z szałwii na kolumnie HPLC, na skale preparatywną oraz późniejsza rozdzielenie<br />
otrzymanych frakcji za pomocą innych technik chromatograficznych. Jako obiekt rozdzielania<br />
zastosowano metanolowy ekstrakt z Salvia officinalis. Konieczność zastosowania rechromatografii<br />
założono już na samym początku prowadzonych badań i związane to było z tym, że rozdzielany<br />
ekstrakt stanowi złożoną matrycę. Do ustalenia warunków rozdzielania wykorzystano<br />
chromatografię cienkowarstwową jak również pilotażowe rozdzielenie preparatywne.<br />
Optymalizację procesu rozdzielania ekstraktu przeprowadzono przy wykorzystaniu układów TLC-<br />
RP. Badano układy rozpuszczalników woda – metanol oraz woda – acetonitryl na płytkach<br />
chromatograficznych pokrytych żelem krzemionkowym modyfikowanym łańcuchami węglowymi<br />
RP-18. Preparatywna chromatografia kolumnowa została wykonana w układzie RP-18 / acetonitryl<br />
– woda. Do frakcjonowania ekstraktu wykorzystano kolumnę do zastosowań pół-preparatywnych<br />
200 x 10 mm. Bogata matryca jaką był badany ekstrakt zawierała w swoim składzie substancje o<br />
zróżnicowanej polarności. Ponieważ priorytetami w chromatografii preparatywnej są jak najniższy<br />
koszt oraz jak najkrótszy czas prowadzonego procesu zdecydowano się na zastosowanie elucji<br />
gradientowej, co w przypadku dużej różnicy polarności rozdzielanych składników stanowi dobre<br />
rozwiązanie. Zastosowano elucję gradientową skokową, zmiana rozpuszczalnika na następny o<br />
wyższej sile elucyjnej prowadzona była przy zatrzymanym przepływie w układzie<br />
chromatograficznym.<br />
W związku z dużym zainteresowaniem substancjami o charakterze przeciwutleniaczy<br />
wykorzystano roztwór 1,1-difenylo-2-pikrylohydrazylu (DPPH) do identyfikacji tych substancji.<br />
Substancje o charakterze antyoksydantów w wyniku reakcji prawie natychmiast odbarwiają<br />
intensywnie purpurowy odczynnik, pozwoliło to na ocenę ich zawartości w poszczególnych<br />
frakcjach otrzymanych z rozdzielenia chromatograficznego.<br />
47
Change language