Untersuchungen zum Überflussmetabolismus in Escherichia coli
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52 Ergebnisse<br />
A<br />
Acetat<br />
B<br />
Acetat<br />
Abb. 13: 1 H-NMR-Spektren der Kulturüberstände e<strong>in</strong>er aeroben Batchkultivierung der<br />
Stämme MG1655 WT (A) und MG1655∆Psdh::Ptet (B) im Fermenter (MOPS-M<strong>in</strong>imalmedium<br />
+ 10 mM Glucose, exponentielle Wachstumsphase)<br />
Dazu wurden die Stämme MG1655∆Psdh::Ptet und der Wildtyp als Kontrolle <strong>in</strong> M<strong>in</strong>imalmedium<br />
+ 10 mM Glucose kultiviert. Mittels HPLC-Analysen konnten ke<strong>in</strong>e zu Acetat<br />
alternative organische Säuren <strong>in</strong> den Kulturüberständen nachgewiesen werden. Auch der<br />
Nachweis von Am<strong>in</strong>osäuren blieb negativ. Mittels 1 H-NMR-Messungen, welche von Frau Dr.<br />
S. Willbold (ZCH, Forschungszentrum Jülich) durchgeführt wurden, konnten ebenfalls ke<strong>in</strong>e<br />
Metabolite identifiziert werden, die alternativ zu Acetat gebildet wurden. In Abb. 13 s<strong>in</strong>d die<br />
entsprechenden 1 H-NMR-Spektren des Wildtyps und der Mutante gezeigt, die sich nur<br />
bezüglich des Acetatsignals unterscheiden.<br />
1.2.3. Kohlenstoffbilanz<br />
Es wurde bereits gezeigt, dass der Stamm MG1655∆Psdh::Ptet im Vergleich <strong>zum</strong> Wildtyp bei<br />
unverändertem Wachstum deutlich weniger Acetat bildete. Mittels NMR-Analysen und HPLC-<br />
Messungen konnte jedoch ke<strong>in</strong>e zu Acetat alternative Nebenproduktbildung nachgewiesen<br />
werden. Um Näheres über den Verbleib des Kohlenstoffs zu erfahren, wurde e<strong>in</strong>e