Untersuchungen zum Überflussmetabolismus in Escherichia coli

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Membranprotein, welches bei vielen Bakterienarten hoch konserviert auftritt, dessen
Funktion aber unbekannt ist (Gimenez et al., 2003).
Um zu überprüfen, ob die Expression der Gene actP (yjcG) und yjcH für die aerobe
Acetatbildung von Bedeutung ist, wurden diese Gene, welche unmittelbar benachbart sind, in
E. coli MG1655 nach der Methode von Datsenko und Wanner (2000) deletiert (s. Abschnitt
II, 5.8.), die Deletion mittels PCR verifiziert und der Stamm bezüglich der aeroben
Acetatbildung charakterisiert. Dazu wurden die Stämme MG1655∆yjcGH und MG1655 WT in
Minimalmedium und LB-Medium mit jeweils 100 mM Glucose kultiviert und in regelmäßigen
Abständen Proben für die Acetatbestimmung entnommen.
A
B
Abb. 19: Wachstum der Stämme MG1655 WT ( ) und MG1655∆yjcGH ( ) bei aerober
Kultivierung in Minimalmedium + 100 mM Glucose (A) oder LB-Medium + 100 mM Glucose
(B) im Schüttelkolben
Die Stämme MG1655 WT und MG1655∆yjcGH zeigten keine Unterschiede im Wachstum,
unabhängig von der gewählten Kultivierungsbedingung. Wachstumsrate und Biomassebildung
waren bei beiden Stämmen gleich (s. Abb. 19; Tab. 16 und Tab. 17). Die aerobe
Acetatbildung unterschied sich in der Mutante MG1655∆yjcGH ebenfalls nicht signifikant vom
Wildtyp. Beide Stämme haben im Verlauf der Kultivierung gleiche Mengen Glucose
umgesetzt.