PLATELIATM CHLAMYDIA IgG TMB - Bio-Rad

6.4. TESTDURCHFÜHRUNG
Bitte das Testverfahren strikt befolgen.
Für jeden Test auf jeder Mikrotiterplatte Kontrollseren verwenden.
Alle Reagenzien müssen vor der Verwendung auf Raumtemperatur (+18-30°C)
gebracht werden.
1. Zur Identifizierung der Kontroll- und Testseren in der Mikrotiterplatte ein
Pipettierschema (s.u.) erstellen.
2. Die Waschlösung (verdünntes R2) vorbereiten (siehe Abschnitt 6.2).
3. Den Halterahmen und die Streifen (R1) aus der Schutzhülle nehmen.
4. Die Streifen der Mikrotiterplatte einmal mit Arbeitswaschlösung
(verdünntes R2) waschen. Die Mikrotiterplatte umdrehen und die
Vertiefungen durch Ausklopfen der Platte auf saugfähigem Papier trocknen.
5. Die Kontrollen und Proben im Verhältnis 1:21 mit Probenverdünnungsmittel
(R7) entweder direkt in der Mikrotiterplatte oder in separaten Teströhrchen
verdünnen:
a) Verdünnung in der Platte: 200 µI Probenverdünnungsmittel (R7) in jede
Vertiefung pipettieren.
Vertiefung A1 10 µl des negativen Kontrollserums (R3)
Vertiefung B1, C1 10 µl des positiven Serumstandards I (R4a)
Vertiefung D1 10 µl des positiven Serumstandards II (R4b)
Proben: 10 µl jeder Probe in die Vertiefungen angefangen bei E1
pipettieren.
Bei den folgenden Schritten muss unbedingt eine unspezifische
Proteinbindung vermieden werden. Zunächst 200 µI Probenverdünnungsmittel
(R7) in die Vertiefung pipettieren und anschließend
10 µI der Probe bzw. der Kontrollen zugeben und 5 bis 7 mal mischen.
b) Vorverdünnung in Röhrchen:
Die Kontrollen und Proben im Verhältnis 1 : 21 vorverdünnen (zum
Beispiel: 25 µI Serum + 500 µI Probenverdünnungsmittel). Gründlich
mischen. Die vorverdünnten Seren gemäß folgendem Schema
pipettieren:
Vertiefung A1 200 µl des verdünnten negativen Kontrollserums (R3)
Vertiefung B1, C1 200 µl der verdünnten Grenzwertkontrolle (R4a)
Vertiefung D1 200 µl der verdünnten positiven Serumkontrolle (R4b)
Proben: 200 µl jeder Probe in die Vertiefungen angefangen bei E1
pipettieren.
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