F1- Praktikum Mikrobiologie Block N: Molekulare mikrobielle Ãkologie
F1- Praktikum Mikrobiologie Block N: Molekulare mikrobielle Ãkologie
F1- Praktikum Mikrobiologie Block N: Molekulare mikrobielle Ãkologie
Erfolgreiche ePaper selbst erstellen
Machen Sie aus Ihren PDF Publikationen ein blätterbares Flipbook mit unserer einzigartigen Google optimierten e-Paper Software.
8.1 Restriktionsverdau<br />
Ansatz:• H 2 O bidest.<br />
• Puffer<br />
• PCR-Produkt<br />
• Hae III<br />
7 μl<br />
2 μl<br />
10 μl<br />
1 μl (2 units)<br />
Das bei der RFLP verwendete Enzym Hae III schneidet DNA immer zwischen GG<br />
und CC. Den Ansatz zunächst 2 Stunden bei 37 o C inkubieren, dann die Reaktion mit<br />
5 μl Stop-Puffer beenden. Die Proben werden auf ein 3 %iges Agarosegel<br />
aufgetragen und bei 150 V laufen gelassen. Als Marker wird ein 100 bp DNA Ladder<br />
verwendet.<br />
8.2 RFLP-Gel-Auswertung<br />
Welche Klone würden sie in gleiche OTU’S (operational taxonomic units) einordnen?<br />
Welche Klone würden Sie zur Sequenzierung wählen?<br />
36
Change language