Modulatoren der Hyaluronsäurematrix im Rahmen der extrinsischen ...

Inhaltsverzeichnis
6.6 EGF ELISA ................................................................................................................30
6.7 [³H]-THYMIDIN-INKORPORATION ZUR BESTIMMUNG DER PROLIFERATION .......................30
6.8 PROTEINBESTIMMUNG .................................................................................................30
6.9 AFFINITÄTSZYTOCHEMIE ..............................................................................................31
6.10 IMMUNOZYTOCHEMIE ...................................................................................................31
6.11 IMMUNOHISTOCHEMIE ..................................................................................................32
6.11.1 ANFERTIGUNG DER KRYOSCHNITTE .......................................................................32
6.11.2 IMMUNOHISTOCHEMISCHE FÄRBUNGEN ..................................................................32
6.11.3 QUANTITATIVE AUSWERTUNG DER IMMUNOHISTOCHEMISCHEN FÄRBUNGEN ............33
6.11.4 QUANTIFIZIERUNG MAC2- UND KI-67-POSITIVER ZELLEN DURCH ZELLZÄHLUNG ........34
6.12 GESAMT-RNA-ISOLATION UND MESSUNG DER MRNA-KONZENTRATION ........................34
6.13 CDNA SYNTHESE UND QUANTITATIVE REALTIME-RT-PCR (QRT-PCR) .........................34
6.14 SDS-PAGE .................................................................................................................35
6.14.1 PROTEINE ............................................................................................................35
6.14.2 PROTEOGLYKANE .................................................................................................35
6.15 WESTERN-BLOT ..........................................................................................................36
6.16 FACS (FLUORESCENT ACTIVATED CELL SORTING)-ANALYSE ........................................37
6.17 LENTIVIRALE AUSSCHALTUNG DER HAS3-MRNA-EXPRESSION .....................................37
6.17.1 VERMEHRUNG DER PLASMIDE ...............................................................................37
6.17.2 PRODUKTION DER LENTIVIREN...............................................................................38
6.17.3 INFEKTION DER ZELLEN .........................................................................................38
6.18 STATISTISCHE AUSWERTUNG .......................................................................................38
7 ERGEBNISSE ........................................................................................................ 39
7.1 NEGATIVE MODULATION DER HA-MATRIX: KOLLAGENFRAGMENTE ................................40
7.1.1 EINFLUSS VON KOLLAGENFRAGMENTEN AUF APOPTOSE UND PROLIFERATION .........40
7.1.2 MORPHOLOGISCHE VERÄNDERUNGEN DURCH KF ...................................................41
7.1.3 VERÄNDERUNG DER HA-MATRIX DURCH KF ...........................................................42
7.1.4 Α VΒ3-INTEGRIN-VERMITTELTE SIGNALTRANSDUKTION REDUZIERT DIE HAS2-MRNA-
EXPRESSION ........................................................................................................44
7.1.5 EINFLUSS DER SIGNALMOLEKÜLE ROCK UND ERK AUF DIE KF-VERMITTELTE HAS2-
MRNA-REGULATION .............................................................................................45
7.1.6 DURCH UVB-BESTRAHLUNG ENTSTANDENE KF UND DEREN SIGNALTRANSDUKTION .49
7.1.7 DURCH UVB-STRAHLUNG HERVORGERUFENE KOLLAGENFRAGMENTIERUNG UND Α VΒ3-
AKTIVIERUNG REDUZIERT DIE HAS2-EXPRESSION IN DERMALEN ÄQUIVALENTEN. .....50
7.1.8 DIFFERENTIELLE REGULATION DER HAS1-GENEXPRESSION ...................................52
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