Modulatoren der Hyaluronsäurematrix im Rahmen der extrinsischen ...
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7.1 NEGATIVE MODULATION DER HA-MATRIX: KOLLAGENFRAGMENTE<br />
Ergebnisse<br />
7.1.1 EINFLUSS VON KOLLAGENFRAGMENTEN AUF APOPTOSE UND<br />
PROLIFERATION<br />
KF wurden durch Verdau mit Kollagenase Typ 3 aus polymerisierten Kollagen Typ 1-Gelen<br />
hergestellt. Es ist bekannt, dass KF dosisabhängig apoptotische Prozesse in glatten<br />
Muskelzellen hervorrufen können [113]. Um in späteren Versuchen pro-apoptotische<br />
Prozesse und anti-proliferative Effekte zu vermeiden, wurden in einer vorbereitenden<br />
Versuchsreihe zunächst Konzentrationswirkungsbeziehungen, in einer<br />
Konzentrationsspanne von 50-250 µg/ml KFuntersucht.<br />
Abbildung 7 Konzentrationsabhängige Induktion <strong>der</strong> Apoptose <strong>der</strong>maler Fibroblasten durch KF.<br />
Humane <strong>der</strong>male Fibroblasten wurden für 24 Stunden mit KF (KF, 50-250 µg/ml) inkubiert. (A)<br />
Apoptose wurde per Annexin-V FACS-Analyse untersucht. Staurosporin (St, 2 µM, 24h) diente als<br />
Positiv-Kontrolle. Repräsentative Flussdiagramme demonstrieren die Platzierung des Gate anhand<br />
<strong>der</strong> Kontrolle (K) zur Analyse von Annexin-V-negativen beziehungsweise -positiven Zellen. (B) PARP-<br />
Spaltung wurde per Immunoblot analysiert, um auf Apoptose in Antwort auf KF zu testen. β-Tubulin<br />
diente als Ladungskontrolle. n=3-6, Mittelwert ± SEM; *, p
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