Modulatoren der Hyaluronsäurematrix im Rahmen der extrinsischen ...
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Ergebnisse<br />
Um dieses überraschende Ergebnis weiter zu untersuchen und die genaue Lokalisation von<br />
pERK1/2 nach KF-St<strong>im</strong>ulation in <strong>der</strong> Zelle zu evaluieren, wurden <strong>im</strong>munozytochemische<br />
Färbungen angefertigt und konfokal mikroskopiert. Wie in Abbildung 18 gezeigt, verursachte<br />
die St<strong>im</strong>ulation mit KF in <strong>der</strong>malen Fibroblasten eine signifikante Reduktion des pERK1/2-<br />
Signals <strong>im</strong> Nukleus <strong>im</strong> Vergleich zur unst<strong>im</strong>ulierten Kontrolle. Zusätzlich zur vermin<strong>der</strong>ten<br />
pERK1/2-Translokation konnte nachgewiesen werden, dass <strong>der</strong> Transkriptionsfaktor ELK-1<br />
ein Zielprotein von pERK1/2 in mit KF behandelten Zellen weniger phosphoryliert und somit<br />
wenig aktiviert vorlag.<br />
Abbildung 18 Hemmung <strong>der</strong> nukleären EKR1/2-Aktivität durch KF. (A) ERK und pERK nach 24stündiger<br />
KF-Behandlung; Analyse per Western Blot. (B) Konfokal mikroskopische Bil<strong>der</strong> und<br />
Quantifizierung <strong>der</strong> nukleären Translokation von pERK dargestellt durch Immunozytochemie; 63x<br />
Vergrößerung. Zur quantitativen Auswertung wurden vier Bil<strong>der</strong> pro Färbung aus drei individuellen<br />
Exper<strong>im</strong>enten mit Hilfe des Programms ImageJ ® ausgewertet. (C) Der Phosphorylierungsstatus von<br />
ELK-1, einem nukleären Effektorprotein von pERK1/2, wurde per Western Blot aus Zelllysat best<strong>im</strong>mt.<br />
n=3-5, Mittelwert ± SEM; *, p
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