F1-Praktikum in Mikrobiologie - Universität Würzburg

6-Zur Bestimmung der β-Galactosidaseaktivität werden folgende Ansätze hergestellt:900 µl 0.05 M Na/K-Phosphatpuffer pH 7.4+ 100 µl ONPG (5 mg/ml)+ 100 µl Zell-Lysat(Die Zell-Lysate werden erst zugegeben, wenn alle Ansätze Phosphatpuffer und ONPGenthalten).- Die Testansätze werden 15 min bei 37°C im Brutschrank inkubiert. Dann wird dieEnzymreaktion durch Zugabe von 40 µl Na 2 CO 3 -Lösung (10 %ig) gestoppt.- Die Extinktion der Proben wird bei 420 nm in Halbmikroküvetten bestimmt.Herstellung des Leerwerts:1 ml 0.05 M Na/K-Phosphatpuffer pH 7.4+ 100 µl ONPG (5 mg/ml)+ 40 µl Na 2 CO 3 -Lösung (10 %ig).Auswertung:Die Extinktionswerte der einzelnen Testansätze sind in die nachfolgende Tabelle einzutragen.Um welche Mutationen kann es sich bei den Stämmen E. coli W575 bzw. E. coli 1783handeln?Zeit E. coli B leu3 E. coli W575 E. coli 1783I II III I II III I II III--------------------------------------------------------------------------------------------------------------0 min--------------------------------------------------------------------------------------------------------------45 min--------------------------------------------------------------------------------------------------------------90 min--------------------------------------------------------------------------------------------------------------