Lebenslauf - OPUS - Universität Würzburg
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3. Material und Methode 23<br />
3.1.5 Prüfkörper<br />
Die Prüfkörper wurden als Rundproben mit einem Durchmesser von 15,5 mm und ei-<br />
ner Höhe von ca. 0,2 mm (passend für 24-Well-Zellkulturplatten) angefertigt.<br />
3.1.6 Polystyrol als Referenzmaterial<br />
Als Negativkontrolle diente das Zellkultur-Polystyrol (Fa. Nunc A/S, Dänemark); diese<br />
Referenzoberfläche wurde direkt als Zellkulturplatte mit 24 Vertiefungen verwendet,<br />
welche gebrauchsfertig geliefert wurde. Auf der Polystyrol-Oberfläche konnte wäh-<br />
rend den Versuchsreihen das Wachstum bzw. das Ablöseverhalten der Zellkulturen<br />
unter dem Mikroskop kontrolliert werden.<br />
3.1.7 Osteoblastenzelllinie MG-63<br />
Die Osteosarkomzelllinie MG-63 wurde von der American Type Culture Collection<br />
(ATCC, Rockville, MD, USA) bezogen. Erstmals beschrieben wurde sie 1977 (Billiau<br />
et al, 1977). Ursprung dieser stabilen, reproduzierbaren Zelllinie sind Zellen, die aus<br />
dem Osteosarkom eines 14-jährigen männlichen Kaukasiers isoliert wurden. In Kultur<br />
gebracht wachsen die Zellen adhärent und zeigen fibroblastoide Morphologie. Es<br />
handelt sich dabei um eine hypotriploide menschliche Zelllinie; bei 44% der Zellen<br />
trat eine Chromosomenanzahl von 66 auf. Die fungierenden Rezeptoren sind der<br />
transforming growth factor (TGF) RI und der TGF RII.<br />
Vor der Verwendung der Zelllinie wurden alle Zellen auf das Vorhandensein von<br />
Mycoplasmen geprüft; belastete Zellkulturen wurden daraufhin verworfen.<br />
Die Kultivierung der Zelllinie erfolgte wie unten beschrieben bei einer Temperatur<br />
von 37°C in einer wasserdampfgesättigten Atmosphäre unter einer 5%igen CO2 –Be-<br />
gasung. Als Kulturmedium wurde Dulbecco`s Mod Eagle Medium (Fa. Invitrogen<br />
GmbH) benutzt.