Lebenslauf - OPUS - Universität Würzburg

5. Diskussion 57
Deutschland die Richtlinien der DIN-Norm ISO 10993-5 (Biologische Beurteilung von
Medizinprodukten). Bei diesen Prüfungen werden die nach dieser Norm vorgeschrie-
benen Zelllinien eingesetzt, wie zum Beispiel die Fibroblastenzelllinie L-929. Es wer-
den aber auch andere, dem späteren Anwendungsort entsprechende Zelllinien ver-
wendet; so kam es in der vorliegenden Arbeit zum Einsatz der Osteoblastenzelllinie
MG-63, um die Verhältnisse nachzuahmen, die bei einem eventuellen späteren Ein-
satz am Patienten vorliegen.
Bei Zytotoxizitätsüberprüfungen kommt es neben der Bestimmung einfacher Para-
meter wie Vitalität und Morphologie der Zellen auch zum Einsatz von molekularbio-
logischen, mikroskopischen und durchflusszytometrischen Methoden, wie z.B. das
Monitoring der Zellproliferation und der Zelldifferenzierung auf Proteinebene. Somit
können beispielsweise freigesetzte Entzündungsmediatoren nachgewiesen werden
oder es kann die Hämokompatibilität (Gerinnung, Hämolyse, Komplementaktivierung)
überprüft werden; außerdem können morphologische Veränderungen (z.B. bei Zell-
schädigungen), die Proliferation und Differenzierung der Zellen oder auch zellspezi-
fische Parameter (z.B. Enzymaktivitäten) genauer untersucht werden. Das Ziel all
dieser Versuchsreihen ist die große Anzahl an Tierversuchen und die damit verbun-
denen hohen Kosten für die Industrie auf ein Mindestmaß zu begrenzen.
Viele Produktaussagen von Herstellern zur Biokompatibilität medizinischer oder
zahnmedizinischer Werkstoffe basieren auf Zellkulturuntersuchungen; bei diesen
Testmethoden werden isolierte Zellen aus tierischen oder menschlichen Geweben in
einer Kulturschale angezüchtet. Am häufigsten werden dazu heute permanent wach-
sende Zellen (permanente Zelllinien oder Dauerzellkulturen) verwendet, da sich die-
se Zellen besonders leicht vermehren und in ihrem Verhalten allgemein bekannt und
vergleichsweise konstant sind [26, 33]. Häufig verwendete Zellen aus diesem Bereich
sind beispielsweise Fibroblasten von Mäusen (L-929), menschliche Epithelzellen
(HBE 16) oder auch die in dieser Arbeit benutzten humanen Osteoblasten (MG-63)
[43, 44]. Es werden aber auch Zellen verwendet, die aus Explantaten des Ziel-
gewebes, wie etwa der Gingiva oder der Pulpa, gewonnen werden; diese Zellen, die
direkt aus dem Explantat stammen, werden als Primärkulturen bezeichnet [45].
Neuerdings werden solche Zellen durch Transfektion mit bestimmten Virus-Partikeln
immortalisiert, d.h. man versucht, die Eigenschaften des ursprünglichen Gewebes zu
erhalten und dabei eine möglichst lange Kultivierbarkeit der Zellen zu erreichen [46].