Lebenslauf - OPUS - Universität Würzburg

3. Material und Methode 28
3.2.6 Zellzahlbestimmung mit dem CASY-1 Zellanalysesystem
3.2.6.1 Messprinzip
Die Bestimmung der Zellzahl erfolgte mit dem Zellzähler CASY-1, Modell TTC Cell
Counter und Analyser (Schärfesystem GmbH, Reutlingen).
Das Messprinzip beruht auf einer Widerstandsmessung in Kombination mit einer Si-
gnalauswertung. Dabei wird die Zellsuspension in eine elektrolytgefüllte Kapillare de-
finierter Geometrie gesaugt, an der während der Messung über zwei Platinelektroden
eine Spannung angelegt wird. Ihrem Volumen entsprechend verdrängen die in der
Suspension enthaltenen Zellen beim Durchtritt durch die Messkapillare eine be-
stimmte Menge an Elektrolytlösung. Dies führt entlang der Kapillarstrecke zur Erhöh-
ung des Widerstandes, über den der Zellzähler die Zellzahl und das Zellvolumen er-
mitteln kann.
3.2.6.2 Durchführung
Abbildung 3.1: CASY-1 Zellzähler
Die Bestimmung der Zellzahl erfolgte ab Tag 3 nach der Zellaussaat und wurde an
den Tagen 5, 7, 10 und 13 nach Aussaat jeweils wiederholt.
Dabei wurde zuerst das Medium abgezogen und die Zellschicht mit je 1 ml PBS-
Puffer 2 x gewaschen. Anschließend wurden 500 µl Accutase zupipettiert. Nach ca. 7