Aus dem Institut für Hygiene und Umweltmedizin (Direktor Prof. Dr ...

auf 37°C erwärmt . Die Lösungen werden für den Versuch frisch
zubereitet.
Das Medium wird etwa 30min vor dem Mediumwechsel hergestellt
und nach dem Abkühlen im Kühlschrank gelagert. Von der
Antibiotika - Lösung aus Penizillin und Streptomycin wird 1 ml auf
100 ml Medium gegeben. Die Vorratslösungen von Antibiotika und
Serum werden im Tiefkühlschrank bei - 18°C gelagert.
Eine 24stündige Inkubation der Zellkultur schliesst sich an .
Prüfsubstanzen
s. Abschnitt 2.1.2.1. ; für beide Prüfsubstanzen wurden folgende
Mischungen mit dem Inkubationsmedium geprüft :
75% NaCl - bzw. Ringerlösung und 25% Inkubationsmedium,
50% NaCl - bzw. Ringerlösung und 50% Inkubationsmedium,
25% NaCl - bzw. Ringerlösung und 75% Inkubationsmedium.
Als Kontrolle diente Inkubationsmedium (s.o.).
Auswertung
Nach der 24stündigen Exposition wird das Medium dekantiert, der
Zellrasen mit 0,3 ml der Enzymlösung (0,05% 1:250 Trypsin und
0,02% EDTA in Ca 2+ und Mg 2+ und freies PBS) gleichmässig
benetzt und die Lösung dekantiert. Nach etwa 10 min Inkubation
der Röhrchen bei 37°C werden die abgelösten Zellen in jeweils 1
ml MEM und 1% Serum suspendiert und die Zellzahlen mit Hilfe
des Universal - Zählers 87001 (Môlab) ermittelt. Von 3
Parallelansätzen wird die durchschnittliche Zellzahl ermittelt und
die Zellzahl der behandelten Proben in Prozent zur Zellzahl in den
Kontrollröhrchen angegeben.
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