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Material und Methoden 16
2. Material und Methoden
2.1 Versuchstiere und Haltung
Die Durchführung der Versuche erfolgte an juvenilen männlichen und weiblichen
„Wistar“-Ratten, die aus einer Zucht des zentralen Tierlabors der Universität
Essen-Duisburg stammten. Die Tiere wogen 65-105 g und waren bei
Versuchsdurchführung 21 bis 28 Tage alt. Drei bis fünf Tiere wurden zusammen in
Käfigen in einem 12h Hell-Dunkel-Zyklus gehalten. Wasser und Trockenpellets
standen ihnen ad libitum zur Verfügung.
Eine Genehmigung dieser Versuche wurde unter den Antragsnummern B714/02
und B864/06 erteilt.
2.2 Die “Working heart-brainstem preparation”
Die Präparation erfolgte in Anlehnung an die Erstbeschreibung der „Working
heart-brainstem preparation“, die 1995 von Paton erfolgte.
Präparation
Die Tiere wurden mit Isofluran so tief anästhesiert, dass keine Reaktion auf
gesetzte Schmerzreize erfolgte, daraufhin dezerebiert und ihr Unterleib
subdiaphragmal abgetrennt. Die Dezerebierung erfolgte auf präcolliculärer Ebene.
Unmittelbar nach der Dezerebierung wurde das Stammhirn mit eiskalter
Carbogen-begaster „artifizieller zerebrospinaler Flüssigkeit“ (= aCSF, s.u.) gekühlt.
Die Haut des Tieres wurde entfernt, um Verstopfungen der Schläuche durch
Haare zu vermeiden, Organreste bis auf die Höhe des Diaphragmas entfernt und
das Os occipitale sowie das Zerebellum entnommen.
Das rechte Schulterblatt wurde in einigen Versuchen aufgeklappt und der Plexus
brachialis freigelegt. Während der Präparation wurde das Stammhirn in
regelmässigen Abständen gekühlt. Durch wiederholtes Eintauchen in die
eisgekühlte und begaste aCSF wurde der Tierkörper während der Präparation
kühl gehalten.