(19) 대한민국특허청(KR) (12) 공개특허공보(A) - Questel

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고; j) 위치 102의 아미노산은 티로신이고; k) 위치 103의 아미노산은 이소루이신이고, 위치 105의 아미노산은
세린이다.
또다른 측면에서, 본 발명은 인플루엔자 바이러스에 의해 유발된 질환 또는 장애를 앓을 위험이 있는 인간에게
치료 유효량의 본원에 기재된 모노클로날 항체 또는 scFV 항체를 투여함으로써, 상기 질환 또는 장애를 예방 또
는 치료하는 방법을 제공한다. 모노클로날 항체 또는 scFV 항체는 인플루엔자 바이러스를 중화시키기에 충분한
용량으로 투여된다. 본 발명의 실시양태에서, 상기 방법은 또한, 항-바이러스 약물, 바이러스 진입 억제제 또
는 바이러스 부착 억제제를 투여하는 것을 포함한다. 항-바이러스 약물은 뉴라미니다제 억제제, 예컨대 자나미
비르, 또는 오셀타미비르 포스페이트, HA 억제제, 시알산 억제제 또는 M2 이온 채널, 예컨대 아만타딘 또는 리
만타딘이다. 항체는 인플루엔자 바이러스로의 노출 이전 또는 이후에 투여된다.
또다른 측면에서, 본 발명은 샘플을 본원에 기재된 모노클로날 항체와 접촉시키고 항체-항원 복합체의 존재 또
는 부재를 검출하여 샘플에서 인플루엔자 바이러스의 존재를 검출함으로써, 샘플에서 인플루엔자 바이러스의 존
재를 검출하는 방법을 제공한다. 시험 샘플은 일반적으로, 혈액, 모발, 볼(cheek)의 스크레이핑(scraping) 또
는 도찰물(swab), 타액, 생검, 소변, 대변, 가래, 비내 흡인물 또는 정액으로부터 얻어진다.
본 발명은 또한, HA의 줄기 영역에서의 고도로 보존된 에피토프를 표적으로 하는 광범위 중화성 인간 항체를 생
성하기 위한 프로토콜의 발견에 기초한다. 짧은 N-글리칸 및 비하전 만노스 (플라스틱 표면 상에 흡착됨)를 생
성하는, 바큘로바이러스에서 발현되는 트라이머 H5 엑토도메인을 사용함으로써, 줄기 에피토프가 우세하게 존재
하게 되었고, 통상적으로 면역우세한 구형 헤드(globular head)를 차폐할 수 있었다.
따라서, 본 발명은 또한, 단일 쇄 또는 Fab 발현 라이브러리를 바이러스의 막 융합 단백질에 노출시키고, 상기
단백질과 특이적으로 결합하는 라이브러리내 항체를 확인하고, 라이브러리로부터 항체를 단리함으로써, 병원성
외피(enveloped) 바이러스와 특이적으로 결합하는 단리된 항체를 제조하는 방법을 포함한다. 바람직하게는, 융
합 단백질은 고체 표면, 예를 들어 플라스틱 표면 상에 고정된다. 다양한 측면에서, 융합 단백질은 야생형 융
합 단백질에 비해 개질된 글리코실화를 갖는다. 예를 들어, 융합은 비-포유동물 세포, 예컨대 곤충 세포에서
생성된다. 융합 단백질은, 예를 들어 트라이머 헤마글루티닌(HA) 단백질이다.
본 발명은 또한, 생물학적으로 상용성인 매트릭스 내에 매입되거나 코팅된 막 융합 단백질 (예를 들어, 트라이
머 헤마글루티닌(HA) 단백질)을 대상체에게 투여함으로써, 인플루엔자 바이러스와 같은 병원성 외피 바이러스에
대하여 대상체에게 백신을 접종하는 방법을 제공한다. 다양한 측면에서, 융합 단백질은 야생형 융합 단백질에
비해 개질된 글리코실화를 갖는다.
또다른 측면에서, 본 발명은 본원에 기재된 모노클로날 항체를 포함하는 조성물, 및 하나 이상의 용기에 담긴
상기 조성물 및 사용설명서를 함유하는 키트를 제공한다.
달리 정의되지 않는다면, 본원에서 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 본 발명이 속한 분야의 통상의 기술자가
통상적으로 이해하는 바와 같은 의미를 갖는다. 본원에 기재된 것들과 유사하거나 동등한 방법 및 물질이 본
발명의 실시 또는 시험에 사용될 수 있지만, 적합한 방법 및 물질은 아래에 기재되어 있다. 본원에 언급된 모
든 출판물, 특허 출원, 특허 및 여타 참고문헌은 그 전문이 참고로 포함된다. 충돌하는 경우, 본 명세서 (정의
포함)가 우선할 것이다. 또한, 물질, 방법 및 실시예는 예시만을 목적으로 하며, 제한을 위한 것은 아니다.
본 발명의 여타 특징부 및 장점은 하기 상세한 설명 및 특허청구범위로부터 명백할 것이다.
도면의 간단한 설명
도 1a는 A/베트남 1203/04 트라이머의 구조의 도해이다. 수용체 결합 부위 및 항원 변이 부위는 모노머 상에
강조표시하였다.
도 1b는 양성 선택된 H5N1 인플루엔자 바이러스의 HA에 있는 아미노산 잔기들의 위치를 나타내는 도해이다.
도 2는 H5N1에 대한 수렴성 조합 면역요법의 도식화 도해이다.
도 3은 본 발명의 항-인플루엔자 항체의 VH 및 VL 둘 다에 대한, 프레임워크 영역 1-4 (FR1-4) 및 상보성 결정
영역 1-3 (CDR1-3)의 아미노산 서열 비교를 나타내는 도해이다. FR 및 CDR 영역은 카바트(Kabat) 데이타베이스
를 사용하여 정의된다. VH 및 VL 유전자 명칭은 오른쪽에 제시되어 있다 (IMGT 데이타베이스 사용). 점(.)은
컨센서스 서열에 대한 서열 동일성을 나타낸다. 하이픈(-)은 갭(gap)을 나타낸다.
공개특허 10-2010-0115346
도 4는 항-H5 항체의 시험관내 중화를 나타낸다. (a) (상단 패널) 10종의 nAb를 가용성 scFv-Fc (힌지, CH2 및
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