(19) 대한민국특허청(KR) (12) 공개특허공보(A) - Questel

(19) 대한민국특허청(KR) 

(12) 공개특허공보(A) 

(51) 국제특허분류(Int. Cl.) 

C07K 16/28 (2006.01) C12N 15/13 (2006.01) 

A61K 39/395 (2006.01) A61P 35/00 (2006.01) 

(21) 출원번호 10-2012-7012405 

(22) 출원일자(국제) 2010년10월15일 

심사청구일자 없음 

(85) 번역문제출일자 2012년05월14일 

(86) 국제출원번호 PCT/US2010/052849 

(87) 국제공개번호 WO 2011/047266 

국제공개일자 2011년04월21일 

(30) 우선권주장 

61/251,856 2009년10월15일 미국(US) 

전체 청구항 수 : 총 67 항 

(54) 발명의 명칭 IL?1 결합 단백질 

(57) 요 약 

(11) 공개번호 10-2012-0104542 

(43) 공개일자 2012년09월21일 

(71) 출원인 

아보트 러보러터리즈 

미국 일리노이주 60064-6008 아보트 파크 아보트 

파크 로드 100 디파트먼트 377 빌딩 에이피6 

에이-1 

(72) 발명자 

시에 충-밍 

미국 매사추세츠주 02459 뉴턴 올데 필드 로드 22 

우 청빈 

미국 매사추세츠주 01545 슈루즈베리 프로스펙트 

스트리트 386 

(뒷면에 계속) 

(74) 대리인 

본 발명은 IL-1β에 결합하는 키메라 항체, CDR 이식된 항체 및 사람화된 항체를 포함한 IL-1β 결합 단백질에 

관한 것이다. 본 발명의 결합 단백질은 IL-1β에 대한 높은 친화도를 가지며 IL-1β 활성을 중화시킨다. 본 발 

명의 결합 단백질은 전장 항체 또는 이의 IL-1β 결합 부분일 수 있다. 또한, 본 발명은 본 발명의 결합 단백질 

을 제조하는 방법 및 이를 사용하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 IL-1β 결합 단백질은 IL-1β가 해를 끼치 

는 질환 또는 장애를 앓고 있는 사람 피험자에서 IL-1β를 검출하고 IL-1β 활성을 억제하는데 유용하다. 

- 1 - 

장훈 

공개특허 10-2012-0104542

(72) 발명자 

밀러 러네 

미국 코네티컷주 06255 엔. 그로스베노르데일 블레 

인 로드 47 

- 2 - 

엠브로시 도미닉 제이. 

공개특허 10-2012-0104542 

미국 매사추세츠주 01545 슈루즈베리 아버 드라이 

브 4231

특허청구의 범위 

청구항 1 

IL-1β에 결합할 수 있는 항체 또는 이의 항원 결합 부분으로서, 

상기 IL-1β에 결합할 수 있는 항체 또는 이의 항원 결합 부분이 서열번호 28, 서열번호 29, 서열번호 30, 서열 

번호 31, 서열번호 32, 서열번호 33, 서열번호 34, 서열번호 35, 서열번호 36, 서열번호 37, 서열번호 38, 서열 

번호 39 및 서열번호 40으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 아미노산 서열을 포함하는, IL-1β에 결합할 수 있는 

항체 또는 이의 항원 결합 부분. 

청구항 2 

IL-1β에 결합할 수 있는 항체 또는 이의 항원 결합 부분으로서, 

상기 IL-1β에 결합할 수 있는 항체 또는 이의 항원 결합 부분이 서열번호 26의 잔기 31-35번(CDR-H1), 서열번 

호 26의 잔기 50-65번(CDR-H2), 서열번호 26의 잔기 98-111번(CDR-H3), 서열번호 27의 잔기 24-34번(CDR-L1), 

서열번호 27의 잔기 50-56번(CDR-L2) 및 서열번호 27의 잔기 89-97번(CDR-L3)으로 이루어진 그룹으로부터 선택 

된 아미노산 서열을 포함하는 하나 이상의 CDR을 포함하는, IL-1β에 결합할 수 있는 항체 또는 이의 항원 결합 

부분. 

청구항 3 

제2항에 있어서, 상기 결합 단백질이 3개 이상의 CDR을 포함하는, 결합 단백질. 

청구항 4 

제3항에 있어서, 상기 3개 이상의 CDR이 가변 도메인 CDR 세트로부터 선택되고, 상기 가변 도메인 CDR 세트가 

서열번호 26의 잔기 31-35번(CDR-H1), 서열번호 26의 잔기 50-65번(CDR-H2) 및 서열번호 26의 잔기 98-111번 

(CDR-H3)을 포함하는 VH CDR 세트와 서열번호 27의 잔기 24-34번(CDR-L1), 서열번호 27의 잔기 50-56번(CDR- 

L2) 및 서열번호 27의 잔기 89-97번(CDR-L3)을 포함하는 VL CDR 세트로 이루어진 그룹 중에서 선택되는, 결합 

단백질. 

청구항 5 

제4항에 있어서, 2개 이상의 가변 도메인 CDR 세트를 포함하는, 결합 단백질. 

청구항 6 

제5항에 있어서, 상기 2개 이상의 가변 도메인 CDR 세트가 서열번호 26의 잔기 31-35번(CDR-H1), 서열번호 26의 

잔기 50-65번(CDR-H2) 및 서열번호 26의 잔기 98-111번(CDR-H3)을 포함하는 VH CDR 세트와 서열번호 27의 잔기 

24-34번(CDR-L1), 서열번호 27의 잔기 50-56번(CDR-L2) 및 서열번호 27의 잔기 89-97번(CDR-L3)을 포함하는 VL 

CDR 세트인, 결합 단백질. 

청구항 7 

제6항에 있어서, 사람 수용체 골격을 추가로 포함하는, 결합 단백질. 

청구항 8 

제7항에 있어서, 상기 사람 수용체 골격이 서열번호 10 내지 17 및 서열번호 18 내지 25로 이루어진 그룹 중에 

서 선택된 아미노산 서열을 포함하는, 결합 단백질. 

청구항 9 

제7항 또는 제8항에 있어서, 상기 사람 수용체 골격이 하나 이상의 골격 영역 아미노산 치환을 포함하고, 상기 

골격의 아미노산 서열이 상기 사람 수용체 골격의 서열과 65% 이상 동일하며 상기 사람 수용체 골격과 동일한 

70개 이상의 아미노산 잔기를 포함하는, 결합 단백질. 

- 3 - 


청구항 10 

제8항에 있어서, 상기 사람 수용체 골격이 주요 잔기에서 하나 이상의 골격 영역 아미노산 치환을 포함하고, 상 

기 주요 잔기가 CDR에 인접한 잔기, 글리코실화 부위 잔기, 희귀 잔기, 사람 IL-1β와 상호작용할 수 있는 

잔기, CDR과 상호작용할 수 있는 잔기, 정준(canonical) 잔기, 중쇄 가변 영역과 경쇄 가변 영역 사이의 접촉 

잔기, 버니어 존(Vernier zone) 내의 잔기, 및 초티아(Chothia) 정의된 가변 중쇄 CDR1과 캐뱃(Kabat) 정의된 

제1 중쇄 골격 사이에서 중첩하는 영역 내의 잔기로 이루어진 그룹 중에서 선택되는, 결합 단백질. 

청구항 11 

제10항에 있어서, 상기 주요 잔기가 1H, 12H, 24H, 27H, 29H, 37H, 48H, 49H, 67H, 71H, 73H, 76H, 78H, 94H, 

1L, 2L, 3L, 4L, 43L, 49L, 64L 및 83L로 이루어진 그룹 중에서 선택되는, 결합 단백질. 

청구항 12 

제11항에 있어서, 상기 결합 단백질이 공통 사람 수용체를 포함하는, 결합 단백질. 

청구항 13 

제1항에 있어서, 서열번호 28, 서열번호 29, 서열번호 30, 서열번호 31, 서열번호 32 및 서열번호 33으로 이루 

어진 그룹 중에서 선택된 아미노산 서열을 포함하는 가변 중쇄 폴리펩타이드와 서열번호 34, 서열번호 35, 서열 

번호 36, 서열번호 37, 서열번호 38, 서열번호 39 및 서열번호 40으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 아미노산 

서열을 포함하는 가변 경쇄 폴리펩타이드를 포함하는, 결합 단백질. 

청구항 14 

제13항에 있어서, 상기 결합 단백질이 서열번호 30 및 서열번호 36; 서열번호 30 및 서열번호 37; 서열번호 30 

및 서열번호 39; 서열번호 30 및 서열번호 40; 서열번호 33 및 서열번호 36; 서열번호 33 및 서열번호 37번; 서 

열번호 33 및 서열번호 39; 및 서열번호 33 및 서열번호 40으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 각각의 아미노산 

서열을 포함하는 가변 중쇄 폴리펩타이드 및 가변 경쇄 폴리펩타이드를 포함하는, 결합 단백질. 

청구항 15 

제1항에 있어서, 상기 결합 단백질이 면역글로불린 분자, 디설파이드 결합된 Fv, 단클론 항체, scFv, 키메라 항 

체, 단일 도메인 항체, CDR 이식된 항체, 디아바디, 사람화된 항체, 다중 특이적 항체, Fab, 이중 특이적 항체, 

DVD-Ig 단백질, Fab', 양특이적 항체, F(ab')2 및 Fv로 이루어진 그룹 중에서 선택되는, 결합 단백질. 

청구항 16 

제1항에 있어서, 상기 결합 단백질이 사람 IgM 불변 도메인, 사람 IgG4 불변 도메인, 사람 IgG1 불변 도메인, 

사람 IgE 불변 도메인, 사람 IgG2 불변 도메인, 사람 IgG3 불변 도메인 및 사람 IgA 불변 도메인으로 이루어진 

그룹 중에서 선택된 중쇄 면역글로불린 불변 도메인을 포함하는, 결합 단백질. 

청구항 17 

제1항에 있어서, 서열번호 2 및 서열번호 3으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 아미노산 서열을 갖는 중쇄 불변 

영역을 추가로 포함하는, 결합 단백질. 

청구항 18 

제1항에 있어서, 서열번호 4 및 서열번호 5로 이루어진 그룹 중에서 선택된 아미노산 서열을 갖는 경쇄 불변 영 

역을 추가로 포함하는, 결합 단백질. 

청구항 19 

제1항에 있어서, 상기 결합 단백질이 사람 IL-1β의 생물학적 기능을 조절할 수 있는, 결합 단백질. 

청구항 20 

- 4 - 


제1항에 있어서, 상기 결합 단백질이 사람 IL-1β를 중화시킬 수 있는, 결합 단백질. 

청구항 21 

제1항에 있어서, 상기 결합 단백질이, 표면 플라스몬 공명에 의한 측정시, 약 10 2 

M -1 

s -1 

약 10 4 

M -1 

s -1 

이상, 약 10 5 

M -1 

s -1 

이상 및 약 10 6 

M -1 

s -1 

합 속도 상수(on rate constant; Kon)를 갖는, 결합 단백질. 

청구항 22 

이상, 약 10 3 

M -1 

s -1 

이상, 

이상으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 상기 표적에 대한 결 

제1항에 있어서, 상기 결합 단백질이, 표면 플라스몬 공명에 의한 측정시, 약 10 -3 

s -1 

이하, 약 10 -4 

s -1 

이하, 약 

10 -5 

s -1 

이하 및 약 10 -6 

s -1 

constant; Koff)를 갖는, 결합 단백질. 

청구항 23 

이하로 이루어진 그룹 중에서 선택된 상기 표적에 대한 해리 속도 상수(off rate 

제1항에 있어서, 상기 결합 단백질이 약 10 -7 

M 이하, 약 10 -8 

M 이하, 약 10 -9 

M 이하, 약 10 -10 

M 이하, 약 10 -11 

M 이 

하, 약 10 -12 

M 이하 및 10 -13 

M 이하로 이루어진 그룹 중에서 선택된 상기 표적에 대한 해리 상수(KD)를 갖는, 결 

합 단백질. 

청구항 24 

제23항에 있어서, 상기 결합 단백질이 약 1.31 × 10 -10 

M, 약 1.47 × 10 -10 

M, 약 1.61 × 10 -10 

M, 약 1.86 × 10 - 

10 

M, 약 2.02 × 10 -10 

M, 약 2.06 × 10 -10 

M, 약 2.3 × 10 -10 

M 및 약 2.84 × 10 -10 

M으로 이루어진 그룹 중에서 선 

택된 IL-1α에 대한 해리 상수(KD)를 갖는, 결합 단백질. 

청구항 25 

제1항에 있어서, 상기 결합 단백질이 면역부착 분자, 조영제, 치료제 및 세포독성제로 이루어진 그룹 중에서 선 

택된 제제를 추가로 포함하는, 결합 단백질. 

청구항 26 

제25항에 있어서, 상기 제제가 방사성 표지, 효소, 형광 표지, 발광 표지, 생물발광 표지, 자성 표지 및 비오틴 

으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 조영제인, 결합 단백질. 

청구항 27 

제25항에 있어서, 상기 조영제가 3 

H, 14 

C, 35 

S, 90 

Y, 99 

Tc, 111 

In, 125 

I, 131 

I, 177 

Lu, 166 

Ho 및 153 

Sm으로 이루어진 그 

룹 중에서 선택된 방사선 표지인, 결합 단백질. 

청구항 28 

제25항에 있어서, 상기 제제가 항대사물질, 알킬화제, 항생제, 성장 인자, 사이토킨, 항혈관형성제, 항유사분열 

제, 안트라사이클린, 독소 및 아폽토시스제로 이루어진 그룹 중에서 선택된 치료제 또는 세포독성제인, 결합 단 

백질. 

청구항 29 

제1항에 있어서, 상기 결합 단백질이 사람 글리코실화 패턴을 보유하는, 결합 단백질. 

청구항 30 

제1항에 있어서, 상기 결합 단백질이 결정화된 결합 단백질인, 결합 단백질. 

- 5 - 


청구항 31 

제30항에 있어서, 상기 결정화된 결합 단백질이 담체 무함유의 약제학적 제어 방출되는 결정화된 결합 

단백질인, 결합 단백질. 

청구항 32 

제31항에 있어서, 상기 결합 단백질이 가용성 대응물보다 생체내 반감기가 보다 긴, 결합 단백질. 

청구항 33 

제31항에 있어서, 상기 결합 단백질이 생물학적 활성을 보유하는, 결합 단백질. 

청구항 34 

제1항의 결합 단백질 아미노산 서열을 암호화하는 분리된 핵산. 

청구항 35 

제1항의 결합 단백질 아미노산 서열을 암호화하는 분리된 핵산을 포함하는 벡터. 

청구항 36 

제35항에 있어서, 상기 벡터가 pcDNA, pTT, pTT3, pEFBOS, pBV, pJV, pHybE 및 pBJ로 이루어진 그룹 중에서 선 

택되는, 벡터. 

청구항 37 

제35항의 벡터를 포함하는 숙주 세포. 

청구항 38 

제37항에 있어서, 상기 숙주 세포가 원핵 세포인, 숙주 세포. 

청구항 39 

제38항에 있어서, 상기 숙주 세포가 에세리키아 콜라이(Escherichia. coli)인, 숙주 세포. 

청구항 40 

제37항에 있어서, 상기 숙주 세포가 진핵 세포인, 숙주 세포. 

청구항 41 

제40항에 있어서, 상기 진핵 세포가 원생생물 세포, 동물 세포, 식물 세포 및 진균 세포로 이루어진 그룹 중에 

서 선택되는, 숙주 세포. 

청구항 42 

제40항에 있어서, 상기 진핵 세포가 포유동물 세포, 조류 세포 및 곤충 세포로 이루어진 그룹 중에서 선택된 동 

물 세포인, 숙주 세포. 

청구항 43 

제40항에 있어서, 상기 숙주 세포가 CHO 또는 COS 세포인, 숙주 세포. 

청구항 44 

제41항에 있어서, 상기 숙주 세포가 HEK 293-6E 세포인, 숙주 세포. 

청구항 45 

제40항에 있어서, 상기 숙주 세포가 효모 세포인, 숙주 세포. 

- 6 - 


청구항 46 

제45항에 있어서, 상기 효모 세포가 사카로마이세스 세레비지아에(Saccharomyces cerevisiae)인, 숙주 세포. 

청구항 47 

제40항에 있어서, 상기 숙주 세포가 곤충 Sf9 세포인, 숙주 세포. 

청구항 48 

IL-1β에 결합할 수 있는 단백질을 생산하는 방법으로서, 

상기 방법이 IL-1β에 결합할 수 있는 결합 단백질을 생산하기에 충분한 조건하에 배양 배지에서 제37항에 기재 

된 숙주 세포를 배양하는 단계를 포함하는, IL-1β에 결합할 수 있는 단백질을 생산하는 방법. 

청구항 49 

제48항의 방법에 따라 생산된 단백질. 

청구항 50 

(a) 제30항의 결정화된 결합 단백질을 포함하는 제형 및 성분; 및 

(b) 하나 이상의 중합체 담체를 포함하는, 결합 단백질 방출용 조성물. 

청구항 51 

제50항에 있어서, 상기 중합체 담체가 폴리(아크릴산), 폴리(시아노아크릴레이트), 폴리(아미노산), 폴리(무수 

물), 폴리(뎁시펩타이드), 폴리(에스테르), 폴리(락트산), 폴리(락트-코-글리콜산) 또는 PLGA, 폴리(b-하이드록 

시부티레이트), 폴리(카프로락톤), 폴리(디옥사논), 폴리(에틸렌 글리콜), 폴리((하이드록시프로필)메타크릴아 

미드), 폴리[(오가노)포스파젠], 폴리(오르토 에스테르), 폴리(비닐 알코올), 폴리(비닐피롤리돈), 말레산 무수 

물-알킬 비닐 에테르 공중합체, 플루로닉 폴리올, 알부민, 알기네이트, 셀룰로즈 및 셀룰로즈 유도체, 콜라겐, 

피브린, 젤라틴, 히알루론산, 올리고사카라이드, 글리카미노글리칸, 황산화 폴리사카라이드, 및 이들의 블렌드 

및 공중합체로 이루어진 그룹 중에서 선택된 중합체인, 결합 단백질 방출용 조성물. 

청구항 52 

제50항에 있어서, 상기 성분이 알부민, 수크로스, 트레할로즈, 락티톨, 젤라틴, 하이드록시프로필-β-사이클로 

덱스트린, 메톡시폴리에틸렌 글리콜 및 폴리에틸렌 글리콜로 이루어진 그룹 중에서 선택되는, 결합 단백질 방출 

용 조성물. 

청구항 53 

제50항의 조성물의 유효량을 포유동물에게 투여하는 단계를 포함하는, 포유동물의 치료 방법. 

청구항 54 

제1항의 결합 단백질 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물. 

청구항 55 

제54항에 있어서, 상기 약제학적으로 허용되는 담체가 상기 결합 단백질의 흡수 또는 분산을 증가시키는데 유용 

한 보조제로서 기능하는, 약제학적 조성물. 

청구항 56 

제55항에 있어서, 상기 보조제가 히알루로니다제인, 약제학적 조성물. 

청구항 57 


제54항에 있어서, IL-1β활성이 해를 끼치는 장애를 치료하기 위한 하나 이상의 첨가제를 추가로 포함하는, 약 

- 7 -

제학적 조성물. 

청구항 58 

제57항에 있어서, 상기 첨가제가 치료제, 조영제, 세포독성제, 혈관형성 억제제, 키나제 억제제, 공자극 분자 

차단제, 부착 분자 차단제, 항사이토킨 항체 또는 이의 기능적 단편, 메토트렉세이트, 사이클로스포린, 라파마 

이신, FK506, 검출가능한 표지 또는 리포터, TNF 길항제, 항류마티스제, 근이완제, 마약, 비스테로이드성 소염 

약물(NSAID), 진통제, 마취제, 진정제, 국소 마취제, 신경근 차단제, 항미생물제, 항건선제, 코르티코스테로이 

드, 단백동화 스테로이드, 에리트로포이에틴, 면역화, 면역글로불린, 면역억제제, 성장 호르몬, 호르몬 대체 약 

물, 방사능약물, 항우울제, 항신경병제, 자극제, 천식 약물, 베타 작용제, 흡입 스테로이드, 경구 스테로이드, 

에피네프린 또는 이의 유사체, 사이토킨 및 사이토킨 길항제로 이루어진 그룹 중에서 선택되는, 약제학적 조성 

물. 

청구항 59 

사람 IL-1β 활성이 감소하도록 사람 IL-1β를 제1항의 결합 단백질과 접촉시킴을 포함하는, 사람 IL-1β 활성 

의 감소 방법. 

청구항 60 

사람 피험자에서 사람 IL-1β 활성이 감소하도록 제1항의 결합 단백질을 상기 사람 피험자에게 투여함을 포함하 

는, 사람 IL-1β 활성이 해를 끼치는 장애를 앓고 있는 사람 피험자에서 사람 IL-1β 활성의 감소 방법. 

청구항 61 

치료가 달성되도록 제1항의 결합 단백질을 피험자에게 투여함에 의해, IL-1β 활성이 해를 끼치는 질환 또는 장 

애에 대해 피험자를 치료하는 방법. 

청구항 62 


제61항에 있어서, 상기 장애가 류마티스 관절염, 골관절염, 소아 만성 관절염, 패혈성 관절염, 라임(Lyme) 관절 

염, 건선 관절염, 반응성 관절염, 척추관절병증, 전신 홍반 루푸스, 크론병, 궤양성 대장염, 염증성 장 질환, 

인슐린 의존성 당뇨병, 갑상선염, 천식, 알레르기병, 건선, 피부 경화증, 이식편 대 숙주병, 기관 이식 거부, 

기관 이식과 관련된 급성 또는 만성 면역 질환, 사르코이드증, 죽상경화증, 파종 혈관내 응고, 가와사키병 

(Kawasaki's disease), 그레이브스병(Grave's disease), 신증후군, 만성 피로 증후군, 베게너 육아종증, 헤노 

흐-쇤라인 자반증(Henoch-Schoenlein purpura), 신장의 현미경적 혈관염, 만성 활성 간염, 포도막염, 패혈성 쇼 

크, 독성 쇼크 증후군, 패혈증 증후군, 악액질, 감염성 질환, 기생충 질환, 후천성 면역결핍 증후군, 급성 횡단 

척수염, 헌팅톤 무도병(Huntington's chorea), 파킨슨병(Parkinson's disease), 알츠하이머병(Alzheimer's 

disease), 뇌졸중, 원발성 담관 간경화증, 용혈 빈혈, 악성 암종, 심부전, 심근 경색, 애디슨병(Addison's 

disease), 산발성, 제I형 다선성 결핍증 및 제II형 다선성 결핍증, 슈미트 증후군(Schmidt's syndrome), 성인 

(급성) 호흡곤란 증후군, 탈모증, 원형탈모증, 혈청음성 관절병증, 관절병증, 라이터병(Reiter's disease), 건 

선성 관절병증, 궤양성 대장 관절병증, 장병원성 활액막염, 클라미디아(chlamydia), 예르시니아(yersinia) 및 

살모넬라(salmonella) 관련 관절병증, 척추관절병증, 죽상 질환/동맥경화증, 아토피성 알레르기, 자가면역 수포 

성 질환, 보통천포창, 낙엽천포창, 유사천포창, 선상 IgA 질환, 자가면역성 용혈 빈혈, 쿰즈 양성 용혈 빈혈 

(Coombs positive haemolytic anaemia), 후천성 악성 빈혈, 소아 악성 빈혈, 근통성 뇌염/로얄 프리병(Royal 

Free Disease), 만성 점막피부 칸디다증, 거대세포동맥염, 원발성 경화성 간염, 잠복성 자가면역 간염, 후천성 

면역결핍 질환 증후군, 후천성 면역결핍 관련 질환, B형 간염, C형 간염, 공통 가변성 면역결핍증(공통 가변성 

저감마글로불린혈증), 확장심장근육병, 여성 불임, 난소 기능상실, 조기성숙 난소 기능상실, 섬유성 폐병, 원인 

불명의 섬유성 폐포병, 염증후 간질성 폐병, 간질성 폐렴, 결합 조직병 관련 간질성 폐병, 혼합된 결합 조직병 

관련 폐병, 전신 경화증 관련 간질성 폐병, 류마티스 관절염 관련 간질성 폐병, 전신 홍반 루푸스 관련 폐병, 

피부근염/다발근육염 관련 폐병, 쇼그렌병 관련 폐병, 강직척추염 관련 폐병, 혈관염 범발성 폐병, 혈철소증 관 

련 폐병, 약물-유도된 간질성 폐병, 섬유증, 방사선 섬유증, 폐쇄세기관지염, 만성 호산구성 폐렴, 림프구 침윤 

성 폐병, 감염후 간질성 폐병, 통풍 관절염, 자가면역 간염, 제1형 자가면역 간염(전형적 자가면역 또는 루포이 

드 간염), 제2형 자가면역 간염(항-LKM 항체 간염), 자가면역 매개된 저혈당증, 흑색극세포증을 지닌 제B형 인 

슐린 내성, 부갑상선저하증, 기관 이식 관련 급성 면역병, 기관 이식 관련 만성 면역병, 골관절염, 원발성 경화 

- 8 -


성 담관염, 건선 제1형, 건선 제2형, 특발성 백혈구감소, 자가면역성 호중구감소증, 신장병 NOS, 사구체신염, 

신장의 현미경적 혈관염, 라임병, 원반모양 홍반루푸스, 특발성 남성 불임 또는 NOS, 정자 자가면역성, 다발경 

화증(모든 아형), 교감눈염증, 결합 조직 병에 속발성인 폐동맥고혈압, 굿패스튜어 증후군(Goodpasture's 

syndrome), 결절다발동맥염의 폐 증상, 급성 류마티스열, 류마티스 척추염, 스틸병(Still's disease), 전신 경 

화증, 쇼그렌 증후군, 다카야스병/동맥염, 자가면역 저혈소판증, 특발성 저혈소판증, 자가면역 갑상선병, 갑상 

선기능항진증, 갑상선종 자가면역 갑상선기능저하증(하시모토병), 아토피성 자가면역 갑상선기능저하증, 원발성 

점액부종, 수정체성 포도막염, 원발성 혈관염, 백반증 급성 간 질환, 만성 간 질환, 알코올성 간경화증, 알코올 

-유도된 간 손상증, 콜레오사타티스(choleosatatis), 특이체질성 간 질환, 약물-유도된 간염, 비-알코올성 지방 

간염, 알레르기 및 천식, B 그룹 스트렙토코커스(GBS) 감염, 정신장애(예를 들면, 우울증 및 정신분열병), Th2 

유형 및 Th1 유형 매개된 질환, 급성 및 만성 통증(통증의 상이한 형태), 및 폐암, 유방암, 위암, 방광암, 결장 

암, 췌장암, 난소암, 전립선암 및 직장암과 같은 암, 및 조혈성 악성암(백혈병 및 림프종), 

아베타지질단백혈증, 말단청색증, 급성 및 만성 기생충 또는 감염 과정, 급성 백혈병, 급성 림프모구백혈병 

(ALL), 급성 골수성 백혈병(AML), 급성 또는 만성 세균 감염, 급성 췌장염, 급성 신장부전, 선암, 공기 주기외 

박동, AIDS 치매 합병증, 알코올-유도된 간염, 알레르기결막염, 알레르기성 접촉 피부염, 알레르기성 비염, 동 

종이식거부, 알파-1-항트립신 결핍증, 근위축성 측삭 경화증, 빈혈, 협심증, 척추 전각세포 변성, 항-CD3 치료 

요법, 항인지질증후군, 항-수용체 과민 반응, 대동맥류 및 말초동맥류, 대동맥박리, 동맥고혈압, 동맥경화증, 

동정맥루, 실조, 심방세동(지속적 또는 발작), 심방조동, 방실차단, B 세포 림프종, 골 이식거부, 골수이식 

(BMT) 거부, 각차단, 버킷 림프종(Burkitt's lymphoma), 화상, 심장부정맥, 심장발육장애 증후군, 심장 종양, 

심근병증, 심폐 우회 염증 반응, 연골 이식거부, 소뇌 피질 변성, 소뇌장애, 혼란 또는 다소성 심방빈맥, 화학 

치료요법 관련 장애, 만성 골수구성 백혈병(CML), 만성 알코올 중독, 만성 염증성 병리학, 만성 림프성백혈병 

(CLL), 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 만성 살리실레이트 중독, 결장직장 암종, 울혈성 심장병, 결막염, 접촉성 피 

부염, 폐성심, 심장동맥병, 크로이츠펠트-야콥병(Creutzfeldt-Jakob disease), 배양 음성 패혈증, 낭성 섬유증, 

사이토킨 치료요법 관련 장애, 권투선수치매, 탈수초병, 뎅기출혈열, 피부병, 피부과 상태, 당뇨병, 

진성당뇨병, 당뇨병성 동맥경화병, 미만성 루이체 질환, 확장된 울혈성 심근병증, 기저핵의 질환, 중년의 다운 

증후군(Down's Syndrome in middle age), CNS 도파민 수용체를 차단하는 약물에 의해 유도된 약물-유도된 운동 

장애, 약물 민감성, 습진, 뇌척수염, 심내막염, 내분비병증, 후두개염, 엡슈타인-바르 바이러스(Epstein-Barr 

virus) 감염, 홍색사지통증, 추체외로 및 대뇌 장애, 가족성 적혈구포식성 림프조직구증식증, 태아 흉선 이식거 

부, 프리이드라이히 운동실조증(Friedreich's ataxia), 기능성 말초 동맥 장애, 진균성 패혈증, 가스 괴저, 위 

궤양, 사구체신염, 임의의 기관 또는 조직의 이식거부, 그람 음성 패혈증, 그람 양성 패혈증, 세포내 기관으로 

인한 육아종, 털세포 백혈병, 할레르보르덴-스파츠병(Hallervorden-Spatz disease), 하시모토 갑상선염, 

건초열, 심장 이식거부, 혈색소침착증, 혈액투석, 용혈요독증후군/혈전저혈소판혈증자반증병, 출혈, A형 간염, 

히스 다발 부정맥, HIV 감염/HIV 신경병증, 호지킨병(Hodgkin's disease), 운동과다 활동장애, 과민반응, 과민 

성 폐렴, 고혈압, 운동감소 활동 장애, 시상하부-뇌하수체-부신축 평가, 특발성 애디슨병, 특발성 폐 섬유증, 

항체 매개된 세포독성, 무력증, 영아진행성 척수성 근위축증, 대동맥의 염증, 인플루엔자 A, 이온화 조사 노출, 

홍채섬모체염/포도막염/시신경염, 허혈-재관류 손상, 허혈성 뇌졸중, 소아 류마티스관절염, 소아척수근위축증, 

카포시육종, 신장 이식거부, 레지오넬라, 리슈만편모충증, 나병, 피질척수 시스템의 병변, 지방부종, 간 이식거 

부, 림프부종, 말라리아, 악성 림프종, 악성 조직구증, 악성 흑색종, 수막염, 수막구균혈증, 대사/특발성, 편두 

통, 미토콘드리아 다중-시스템 장애, 복합 결합 조직병, 단클론 감마글로불린혈증, 다발골수종, 다중 시스템 변 

성(Mencel Dejerine- Thomas Shi-Drager 및 Machado-Joseph), 중증근육무력증, 마이코박테리움 아비움 인트라 

셀룰라레(mycobacterium avium intracellulare), 결핵균, 골수형성이상증후군, 심근경색, 심근허혈성장애, 비 

인강악성종양, 신생아 만성 폐병, 신장염, 신장증, 신경변성질환, 신경성 I 근위축증, 호중성백혈구감소열, 비- 

호지킨 림프종, 복부대동맥 및 이의 분지의 폐색, 동맥폐쇄성 장애, OKT3 치료요법, 고환염/부고환염, 고환염 

/정관절단술 역 수술, 장기비대, 골다공증, 췌장 이식거부, 췌장 암종, 부수종양성 증후군/암의 고칼슘혈증, 부 

갑상선 이식거부, 골반염 질환, 연중비염, 심장막병, 말초 죽상경화성질병, 말초 혈관 질환, 복막염, 악성빈혈, 

주폐포자층 폐렴, 폐렴, POEMS 증후군(다발신경병, 장기비대, 내분비병, 단클론 감마글로불린병증, 및 피부변화 

증후군), 관류후증후군, 펌프후 증후군(post pump syndrome), MI 후 심장절개 증후군, 전자간증, 진행핵상마비, 

원발폐고혈압증, 방사선 치료요법, 레이노드 현상, 레이노드 질환, 레프섬병(Refsum's disease), 조절성 협소 

QRS 빈맥, 신장혈관고혈압, 재관류손상, 제한심근병증, 육종, 피부경화증, 노년무도병, 루이체형 노인성치매, 

혈청음성 관절병증, 쇼크, 겸상적혈구빈혈, 피부 동종이식거부, 피부 변화 증후군, 소장 이식거부, 고형 종양, 

특이적인 부정맥, 척수운동실조, 척수소뇌변성, 스트렙토코커스 근염, 소뇌의 구조적 병변, 아급성경화범뇌염, 

- 9 -

실신, 심혈관계의 매독, 전신 아나필락시스, 전신 염증반응 증후군, 전신적으로 발병된 소아 류마티스 관절염, 

T 세포 또는 FAB ALL, 모세혈관확장증, 폐쇄성 혈전혈관염, 혈소판감소증, 독성, 이식, 외상/출혈, 제III형 과 

민반응, 제IV형 과민반응, 불안정한 협심증, 요독증, 요로성패혈증, 두드러기, 판막성 심장병, 정맥류, 혈관염, 

정맥병, 정맥 혈전증, 심실세동, 바이러스 및 진균 감염, 바이러스성 뇌염/무균 수막염, 바이러스-관련 적혈구 

포식성 증후군, 베르니케-코르사코프(Wernicke-Korsakoff) 증후군, 윌슨병(Wilson's disease), 임의의 기관 또 

는 조직의 이종이식거부, 급성 관상동맥 증후군, 급성 특발성 다발신경염, 급성 염증성 탈수초 다발성신경병증, 

급성 허혈, 성인 스틸병, 원형탈모증, 과민증, 항-인지질 항체 증후군, 재생불량빈혈, 동맥경화증, 아토피성 습 

진, 아토피성 피부염, 자가면역 피부염, 스트렙토코커스 감염과 관련된 자가면역 장애, 자가면역 장병증, 자가 

면역 청력장애, 자가면역 림프세포증식증후군(ALPS), 자가면역 심근염, 자가면역 조기성숙 난소기능상실, 안검 

염, 기관지확장증, 수포성 유천포창, 심혈관병, 격변성 항인지질 증후군, 복강질환, 경추증, 만성 허혈, 흉터유 

사물집증, 다발경화증 위험이 있는 임상적으로 분리된 증후군(CIS), 결막염, 유아발생정신장애, 만성 폐쇄성 폐 

병(COPD), 누낭염, 피부근염, 당뇨병성 신경병증, 진성당뇨병, 추간판탈출증, 척추원반탈출, 약물 유도된 면역 

용혈빈혈, 심내막염, 자궁내막증, 안구내염, 상공막염, 다형홍반, 주요 다형홍반, 임신유사천포창, 길랑-바레 

증후군(Guillain-Barre syndrome: GBS), 건초열, 휴즈 증후군(Hughes syndrome), 특발성 파킨슨병, 특발성 간 

질폐렴, IgE-매개된 알레르기, 면역 용혈빈혈, 봉입체 근염, 감염성 눈염증병, 염증성 탈수초병, 염증성 

심장병, 염증성 신장병, IPF/UIP, 홍채염, 각막염, 건성각결막염, 쿠스마울병(Kussmaul disease) 또는 쿠스마울 

-마이어병(Kussmaul-Meier disease), 랜드리 마비(Landry's paralysis), 랑게르한스 세포 조직구증, 망울혈반, 

황반변성, 현미경다발혈관염, 모르부스 베크테레브(morbus bechterev), 운동 신경 장애, 점막 유천포창, 다중 

기관부전, 중증근육무력증, 골수형성이상증후군, 심근염, 신경근장애, 신경병증, 비-A 비-B 간염, 시신경염, 골 

용해, 소수관절 JRA, 말초동맥폐쇄병(PAOD), 말초혈관병(PVD), 말초동맥병(PAD), 정맥염, 결절다발동맥염(또는 

결절동맥주위염), 다발연골염, 류마티스성 다발성 근육통, 백모증, 다관절 JRA, 다중내분비 결핍증후군, 다발근 

육염, 류마티스성 다발성근육통(PMR), 펌프 후 증후군, 원발성 파킨슨병, 전립선염, 적혈구계무형성증, 원발성 

부신피질부전, 재발 시신경척수염, 재협착, 류마티스성심장병, 사포(SAPHO)(윤활막염, 여드름, 농포증, 골과다 

증, 및 낭성섬유골염), 공피증, 속발성 아밀로이드증, 쇼크 폐, 공막염, 좌골신경통, 속발성 부신 기능부전, 실 

리콘 관련 결합 조직병, 스네던-윌킨슨 피부병(Sneddon-Wilkinson dermatosis), 강직척추염, 스티븐스-존슨 증 

후군(Stevens-Johnson syndrome: SJS), 전신성 염증반응 증후군, 일시적인 동맥염, 톡소플라스마성 망막염, 독 

성표피괴사용해, 횡단척수염, TRAPS(제1형 종양 괴사 인자 수용체(TNFR) 관련 주기성 증후군), 흑색 가시세포증 

을 동반한 B형 인슐린 저항, 제1형 알레르기성 반응, 제II형 당뇨병, 두드러기, 일반적인 간질폐렴(UIP), 혈관 

염, 봄철 결막염, 바이러스성 결막염, 보그트-고야나기-하라다 증후군(Vogt-Koyanagi-Harada syndrome: VKH 증 

후군), 습성 황반 변성 및 상처 치유로 이루어진 그룹 중에서 선택되는, IL-1β 활성이 해를 끼치는 질환 또는 

장애에 대해 피험자를 치료하는 방법. 

청구항 63 

제1항에 기재된 결합 단백질을, 제2 제제의 투여 전, 투여와 동시 또는 투여 후에, 투여하는 단계를 포함하는, 

IL-1β가 해를 끼치는 장애를 앓고 있는 환자의 치료 방법으로서, 


상기 제2 제제가 TNF 길항제, TNF 수용체의 가용성 단편, ENBREL , TNF 효소 길항제, TNF 전환 효소(TACE) 억 

제제, 무스카린성 수용체 길항제, TGF-β 길항제, 인터페론 γ, 퍼페니돈, 화학치료제, 메토트렉세이트, 레플루 

노마이드; 시롤리무스(라파마이신) 또는 이의 유사체; CCI-779; COX2 또는 cPLA2 억제제; NSAID, 면역조절제, 

p38 억제제; TPL-2, MK-2 및 NFkB 억제제; 부데노사이드, 상피 성장 인자, 코르티코스테로이드, 

사이클로스포린, 설파살라진, 아미노살리실레이트, 6-머캅토퓨린, 아자티오프린, 메트로니다졸, 리폭시게나제 

억제제, 메살라민, 올살라진, 발살라지드, 항산화제, 트롬복산 억제제, IL-1 수용체 길항제, 항-IL-1β 항체, 

항 IL-6 항체, 성장 인자, 엘라스타제 억제제, 피리디닐-이미다졸 화합물; TNF, LT, IL-1β, IL-2, IL-3, IL- 

4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-14, IL-15, IL-16, IL-17, IL-18, IL-19, IL-20, 

IL-21, IL-22, IL-23, IL-24, IL-25, IL-26, IL-27, IL-28, IL-29, IL-30, IL-31, IL-32, IL-33, EMAP-II, 

GM-CSF, FGF 또는 PDGF의 항체 또는 작용제; CD2, CD3, CD4, CD8, CD25, CD28, CD30, CD40, CD45, CD69, CD90 

또는 이들의 리간드의 항체; FK506, 라파마이신, 미코페놀레이트 모페틸, 이부프로펜, 프레드니솔론, 포스포디 

에스테라제 억제제, 아데노신 작용제, 항혈전제, 보체 억제제, 아드레날린성 제제; IRAK, NIK, IKK, p38 또는 

MAP 키나제 억제제; IL-1β 전환 효소 억제제, TNFα 전환 효소 억제제, T 세포 신호전달 억제제, 메탈로프로테 

이나제 억제제, 6-머캅토퓨린, 안지오텐신 전환 효소 억제제, 가용성 사이토킨 수용체, 가용성 p55 TNF 수용체, 

가용성 p75 TNF 수용체, sIL-1RI, sIL-1RII, sIL-6R, 소염성 사이토킨 및 TGFβ로 이루어진 그룹 중에서 선택 

- 10 -

[0001] 

[0002] 

[0003] 

[0004] 

[0005] 

되는, IL-1β가 해를 끼치는 장애를 앓고 있는 환자의 치료 방법. 

청구항 64 

제61항에 있어서, 상기 피험자에 대한 투여가 비경구, 피하, 근육내, 정맥내, 동맥내, 기관지내, 복부내, 관절 

낭내, 연골내, 강내, 복내, 소뇌내, 뇌실내, 결장내, 경부내, 위장내, 간내, 심근내, 골내, 골반내, 

심장주위내, 복강내, 흉막내, 전립선내, 폐내, 직장내, 신장내, 망막내, 척수내, 윤활막내, 흉부내, 자궁내, 방 

광내, 볼루스(bolus), 질, 직장, 구강, 설하, 비강내 및 경피 투여로부터 선택된 하나 이상의 방식에 의해 수행 

되는, IL-1β가 해를 끼치는 장애를 앓고 있는 환자의 치료 방법. 

청구항 65 

샘플 중의 사람 IL-1β의 검출 방법으로서, 

(i) 상기 샘플을 제1항에 기재된 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 IL-1β 결합 부분과 접촉시키는 단계; 및 

(ii) 상기 항-IL-1β 결합 단백질 또는 이의 결합 부분과 상기 샘플 중의 IL-1β 사이의 복합체 형성을 검출하 

는 단계를 포함하는, 샘플 중의 사람 IL-1β의 검출 방법으로서, 

대조 샘플중에서의 상기 복합체의 형성에 대한 또는 보다 이전의 시점에서 취한 또 다른 시험 샘플 중에서의 상 

기 복합체 형성에 대한 상기 샘플 중에서의 복합체의 형성에서의 통계학적으로 유의한 변화가, 상기 샘플 중의 

사람 IL-1β의 존재를 나타내는 것인, 샘플 중의 사람 IL-1β의 검출 방법. 

청구항 66 

제65항에 있어서, 상기 샘플이 전혈, 혈장, 혈청, 소변, 타액 및 조직 생검으로 이루어진 그룹 중에서 

선택되는, 샘플에서 사람 IL-1β의 검출 방법. 

청구항 67 

(i) IL-1β 결합 단백질 또는 이의 IL-1β 결합 부분을 사람 IL-1β에 결합할 수 있게 하는 조건하에 제1항에 

기재된 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 IL-1β 결합 부분을 시험 피험자 또는 대조 피험자에게 투여하는 단계; 

및 

(ii) 상기 결합 단백질 또는 이의 결합 부분과 IL-1β 사이의 복합체 형성을 검출하는 단계를 포함하는, 사람 

피험자에서 사람 IL-1β의 검출 방법으로서, 

상기 대조 피험자에 대한 또는 보다 이전의 시점에서의 상기 시험 피험자에서의 상기 복합체 형성에 대한 상기 

시험 피험자에서의 상기 복합체 형성에서의 통계학적으로 유의한 변화가 사람 IL-1β의 존재를 나타내는 것인, 

사람 피험자에서 사람 IL-1β의 검출 방법. 

명 세 서 

기 술 분 야 

관련 출원에 대한 상호 참조 

본 출원은 2009년 10월 15일자로 출원되고 전문이 임의의 목적으로 본원에 참조로 인용되는 미국 가출원 제 

61/251,856호에 대한 우선권을 주장한다. 

기술 분야 

본 발명은 IL-1 결합 단백질, 및 구체적으로 IL-1 매개 질환의 예방 및/또는 치료에서 이의 용도에 관한 

것이다. 

배 경 기 술 


인터류킨-1(IL-1) 및 종양 괴사 인자(TNF)와 같은 사이토킨은 염증 과정의 매개체인 단핵구 및 대식세포와 같은 

각종 세포에 의해 생산되는 분자이다. 인터류킨-1은 열, 프로스타글란딘 합성(예를 들면, 섬유아세포, 근육 세 

포 및 내피 세포에서), T 림프구 활성화 및 인터류킨-2 생산을 비롯하여 광범위한 생물학적 및 생리학적 효과를 

- 11 -

[0006] 

[0007] 

[0008] 

[0009] 

[0010] 

갖는 사이토킨이다. 

인터류킨-1 상과(superfamily): IL-1 상과의 본래 구성원은 IL-1α, IL-1β 및 IL-1 수용체 길항제(IL-1RA)이 

다. IL-1α 및 IL-1β는 감염에 대한 면역 방어에 관련된 염증촉진성(pro-inflammatory) 사이토킨이다. IL- 

1Rα는 IL-1α 및 IL-1β와 수용체 결합에 대해 경쟁하는 분자로서, 이들의 면역 활성화에서의 역할을 

차단한다. 최근에는 IL-18[참조: Dinarello (1994) FASEB J. 8(15): 1314-3225; Huising et. al., (2004) 

Dev. Comp. Immunol. 28(5): 395-413] 및 IL-1α, IL-1β 또는 IL-1RA와 구조적 상동성을 갖는 6개 이상의 유 

전자를 비롯한 다른 분자들이 IL-1 상과에 추가되었다. 후자의 6개의 구성원들은 IL1F5, IL1F6, IL1F7, IL1F8, 

IL1F9 및 IL1F10이라 명명된다. 따라서, IL-1α, IL-1β 및 IL-1RA는 각각 IL-1F1, IL-1F2 및 IL-1F3으로 재 

명명되었다[참조: Sims et al., (2001) Trends Immunol. 22(10): 536-537; Dunn et al.,(2001) Trends 

Immunol. 22(10): 533-536]. IL-1 계열의 또 다른 추정상의 구성원으로서, 최근에 IL-33 또는 IL-1F11로 불리 

는 구성원이 기술되었지만, 이들 명칭은 HGNC 유전자 계열 명명 데이터베이스에 공식적으로 인정되지 못했다. 

IL-1α와 IL-1β 모두는 대식세포, 단핵구 및 수지상 세포에 의해 생산된다. 이들은 감염에 대한 신체의 염증 

반응에서 중요한 부분을 구성한다. 이들 사이토킨들은 내피 세포 상에서 부착 인자의 발현을 증가시켜 병원체 

와 싸우는 세포인 백혈구를 감염 부위로 이주시킬 수 있게 하고, 시상하부의 열조절 중심을 재설정하여 열로서 

발현되는 체온을 증가시킨다. 따라서, IL-1은 내인성 발열원이라 불린다. 체온 증가는 감염과 싸우는 신체의 

면역계를 돕는다. IL-1은 또한 조혈작용의 조절에도 중요하다. IL-1α는 각종 면역 반응, 염증 과정 및 조혈 

작용에 관련된 다면발현성 사이토킨이다. IL-1α는 활성화된 대식세포에 의해 생산되고, IL-2 방출, B 세포 성 

숙 및 증식, 및 섬유아세포 성장 인자 활성을 유도하여 흉선세포 증식을 자극한다. IL-1α 단백질은 염증 반응 

에 관련되며, 내인성 발열원으로 확인되어 있고, 활막 세포로부터 프로스타글란딘 및 콜라게나제의 방출을 자극 

하는 것으로 보고되어 있다. 이것은 전단백질로서 생산되며, 이러한 전단백질은 칼파인에 의해 단백분해적으로 

가공(processing)되어 아직 충분한 연구가 되어 있지 않은 기전으로 방출된다. 이러한 유전자와 8개의 다른 인 

터류킨-1 계열 유전자는 염색체 2 상에서 사이토킨 유전자군을 형성한다. IL-1α 및 이의 질환 유발 효과는 문 

헌[참조: Ibelgaufts, Lexikon Zytokine(Cytokine Dictionary), Medikon Verlag, Munich 1992] 및 여기에 인 

용된 문헌에 상세하게 기재되어 있다. 또한, 예를 들어, 문헌[참조: Oppenheim et al., (1986) Immunol. 

Today 7: 45-56; Durum et al., (1985) Ann. Rev. Immunol. 3: 263-287; 및 Synnons et al., (1989) 

Lymphokine Res. 8: 365-372]에는 IL-1α의 바람직하지 않은 효과에 대해 언급되어 있다. IL-1α는 본래 연골 

재흡수를 증가시키는 효과로 인하여 "카타볼린(catabolin)"이라 불렸고, 활막 세포에서 콜라게나제 및 프로스타 

글란딘에 미치는 자극 효과로 인해 "단핵구 세포 인자"(MCF)로도 불렸으며, 급성기 반응에 대해 자극 효과를 갖 

는 "백혈구 내인성 인자"(LEM)로도 불렸다. 또한, IL-1α는 많은 여러 세포들, 예를 들면, 단핵구, 대식세포, 

섬유아세포, 내피 세포 및 림프구에 의해 합성될 수 있고, 많은 세포들이 IL-1α에 대한 특이적 수용체를 보유 

하기 때문에, 광범위한 생물학적 활성 스펙트럼을 보유한다. 따라서, IL-1α는 각종 장애 및 장애의 증상에서 

유발인자로서 중심 위치를 차지하고 있다. 이러한 장애들은 종종 약간 치료하거나 치료할 수 없는 주로 중증 

장애이다. 이러한 유전자들의 다형성은 류마티스성 관절염 및 알츠하이머병과 연관이 있는 것으로 제안되었다. 

일반적으로, IL-1은 다수의 사람 질환, 예를 들면, 관절염, 폐 섬유증, 중추 신경계 질환, 진성당뇨병 및 특정 

심혈관 질환에 연관되어 있다. 


또한, 말초 조직에서의 IL-1β 생산은 열 관련 통각과민(통증에 대한 감수성 증가)과도 연관이 있다[참조: 

Morgan et al., (2004) Brain Res. 1022(1-2): 96-100]. 통상, 이러한 2가지 형태의 IL-1은 동일한 세포 수용 

체에 결합한다. 이 수용체는 다른 특정 수용체와 대부분 공유하는 경로를 통해 세포내 신호를 전달하는 2개의 

서브유닛으로 구성되며, 이들 서브유닛은 관련되어 있지만 동일하지는 않다. 이들은 선천 면역 수용체의 Toll 

계열 및 IL-18에 대한 수용체를 포함한다. 또한, IL-1α 및 IL-1β는 생물학적 성질이 유사한데, 그 예로는 열 

유도, 서파수면 및 호중구증가, T 림프구 및 B 림프구 활성화, 섬유아세포 증식, 특정 세포에 대한 세포독성, 

콜라게나제 유도, 간의 급성기 단백질 합성, 및 콜로니 자극 인자 및 콜라겐의 생산 증가를 포함한다. 

뚜렷한 2가지 형태의 IL-1을 암호화하는 cDNA는 분리 및 발현되었고; 이러한 cDNA는 IL-1β[참조: Auron et 

al., (1984) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81:7909] 및 IL-1α[참조: Lomedico et al., (1984) Nature 

312:458]라는 2가지의 상이한 유전자 산물을 나타낸다. IL-1β는 mRNA 및 단백질 수준 모두에서 사람 단핵구에 

의해 생산되는 주요 형태이다. 2가지 형태의 사람 IL-1은 26%의 아미노산 상동성만을 공유한다. 이들의 뚜렷 

한 폴리펩타이드 서열에도 불구하고, 2가지 형태의 IL-1은 아미노산 상동성이 IL-1 분자의 독특한 영역에 국한 

된다는 점에서 구조적 유사성이 있다[참조: Auron et al., (1985) J. Mol. Cell Immunol. 2:169]. 

IL-1α 및 IL-1β는 전구체 펩타이드로서 생산된다. 환언하면, 이들은 긴 단백질로서 생산되고, 그 다음 가공 

- 12 -

[0011] 

[0012] 

[0013] 

[0014] 

[0015] 

[0016] 

[0017] 

[0018] 


[0020] 

[0021] 

되어 성숙 단백질이라 불리는 보다 짧은 활성 분자로 방출된다. 예를 들면, 성숙 IL-1β는 카스파제-1 또는 인 

터류킨-1 전환 효소(ICE)라 불리는 카스파제 계열 단백질의 특정 구성원에 의해 절단된 후 Pro-IL-1β로부터 방 

출된다. 사람 IL-1 상과의 각 구성원은 성숙 형태의 3차원 구조가 배럴형 단백질을 생산하는 12-14 β 쇄로 구 

성되어 있다. 

당업계에는 IL-1β 관련 질환에 대한 신규한 치료요법에서 사용하고 샘플 및 조직에서 IL-1β를 검출하는데 사 

용하기 위해 IL-1β에 결합하는 향상된 항체가 필요한 실정이다. 

발명의 내용 

본 발명은 사람 IL-1β에 결합할 수 있고, 높은 친화성으로 결합할 수 있으며, IL-1β에 결합하여 중화시킬 수 

있는, 단클론 항체(mAb), CDR 이식 항체, 사람화된 항체, 친화성 성숙 항체 및 이들의 단편을 비롯한 신규한 계 

열의 결합 단백질을 제공한다. 본 발명은 사람 IL-1β를 억제하는 치료 수단을 제공하며, IL-1β의 수준 증가 

와 관련된 질환 및 장애, 특히 염증성 장애를 치료하기 위한 조성물 및 방법을 제공한다. 또한, 본 발명은 IL- 

1β에 결합할 수 있는 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 제공하는 것으로, 상기 IL-1β에 결합할 수 있는 항체 

또는 이의 항원 결합 부분은 서열번호 28, 서열번호 29, 서열번호 30, 서열번호 31, 서열번호 32, 서열번호 33, 

서열번호 34, 서열번호 35, 서열번호 36, 서열번호 37, 서열번호 38, 서열번호 39 및 서열번호 40으로 이루어진 

그룹 중에서 선택된 아미노산 서열을 포함한다. 또 다른 양태에서, 본 발명은 샘플, 혼합물 및 조직에서 사람 

IL-1β를 검출하고/하거나 측정하기 위한 수단을 제공한다. 

본 발명의 한 양태에서, 분리된 결합 단백질은 사람 IL-1β에 결합할 수 있으며, 서열번호 26의 잔기 31-35번 

(CDR-H1), 서열번호 26의 잔기 50-65번(CDR-H2), 서열번호 26의 잔기 98-111번(CDR-H3), 서열번호 27의 잔기 

24-34번(CDR-L1), 서열번호 27의 잔기 50-56번(CDR-L2) 및 서열번호 27의 잔기 89-97번(CDR-L3)으로 이루어진 

그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 하나 이상의 CDR을 포함한다. 

또 다른 양태에서, 결합 단백질은 가변 도메인 CDR 세트로부터 선택되는 3개 이상의 CDR을 포함하며, 상기 가변 

도메인 CDR 세트는 서열번호 26의 잔기 31-35번(CDR-H1), 서열번호 26의 잔기 50-65번(CDR-H2) 및 서열번호 26 

의 잔기 98-111번(CDR-H3)을 포함하는 VH CDR 세트와 서열번호 27의 잔기 24-34번(CDR-L1), 서열번호 27의 잔 

기 50-56번(CDR-L2) 및 서열번호 27의 잔기 89-97번(CDR-L3)을 포함하는 VL CDR 세트로 이루어진 그룹 중에서 

선택된다. 

한 양태에서, 결합 단백질은 3개의 CDR의 가변 중쇄(VH) 세트를 포함하며, 3개의 CDR의 가변 경쇄(VL) 세트도 

또한 포함한다. 

본 발명의 또 다른 양태에서, 상기 기재된 하나 이상의 CDR을 포함하는 IL-1β 결합 단백질은 (CDR-H1, CDR-H2 

및 CDR-H3 서열에 대하여) 상응하는 사람 중쇄 수용체 골격 서열 및/또는 (CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3 서열에 대 

하여) 상응하는 사람 경쇄 수용체 골격 서열을 추가로 포함한다. 한 양태에서, 본 발명의 결합 단백질의 사람 

중쇄 수용체 골격 서열은 표 3의 임의의 사람 중쇄 수용체 골격 서열로부터 선택되며, 본 발명의 결합 단백질의 

사람 경쇄 수용체 골격 서열은 표 4의 임의의 사람 경쇄 수용체 골격 서열로부터 선택된다. 따라서, 한 양태에 

서, 본 발명에 따른 결합 단백질의 사람 수용체 골격 서열은 서열번호 10 내지 17(사람 중쇄 수용체 골격 서열) 

및 서열번호 18 내지 25(사람 경쇄 수용체 골격 서열)로 이루어진 그룹 중에서 선택된다. 한 양태에서, 사람 

수용체 골격 서열은 서열번호 10 내지 13(중쇄), 서열번호 14 내지 17(중쇄), 서열번호 18 내지 21(경쇄) 및 서 

열번호 22 내지 25(경쇄)로 이루어진 그룹 중에서 선택된다. 

IL-1β 결합 단백질은 하나 이상의 골격 영역(FR) 아미노산 치환을 포함하는 사람 수용체 골격을 포함할 수 있 

으며, 상기 골격의 아미노산 서열은 상기 사람 수용체 골격의 서열과 65% 이상 동일하며 상기 사람 수용체 골격 

과 동일한 70개 이상의 아미노산 잔기를 포함한다. 

또 다른 양태에서, 본 발명의 IL-1β 결합 단백질은 사람 수용체 골격을 포함하며, 상기 수용체 골격은 주요 잔 

기에서 하나 이상의 골격 영역 아미노산 치환을 포함하고, 상기 주요 잔기가 다음으로 이루어진 그룹 중에서 선 

택된다: 

CDR에 인접한 잔기; 

글리코실화 부위 잔기; 

희귀 잔기; 

- 13 - 


[0022] 

[0023] 

[0024] 

[0025] 

[0026] 

[0027] 

[0028] 

[0029] 

[0030] 

[0031] 

[0032] 

[0033] 

[0034] 

사람 IL-1β와 상호작용할 수 있는 잔기; 

CDR과 상호작용할 수 있는 잔기; 

표준 잔기; 

중쇄 가변 영역과 경쇄 가변 영역 사이의 접촉 잔기; 

버니어 존(Vernier zone) 내의 잔기; 및 

초티아(Chothia) 정의된 가변 중쇄 CDR1과 캐뱃(Kabat) 정의된 제1 중쇄 골격 사이에서 중첩하는 영역 내의 잔 

기. 

한 양태에서, IL-1β 결합 단백질은 주요 잔기를 포함할 수 있으며, 상기 주요 잔기는 1H, 12H, 24H, 27H, 29H, 

37H, 48H, 49H, 67H, 71H, 73H, 76H, 78H, 94H, 1L, 2L, 3L, 4L, 43L, 49L, 64L 및 83L(모두 캐뱃 번호 부 

여)로 이루어진 그룹 중에서 선택된다. 또 다른 양태에서, 본 발명에 따른 IL-1β 결합 단백질은 본원에 기재 

된 공통 사람 가변 도메인인 공통 사람 가변 도메인을 포함한다. 또 다른 양태에서, 본 발명은 서열번호 28, 

서열번호 29, 서열번호 30, 서열번호 31, 서열번호 32, 서열번호 33, 서열번호 34, 서열번호 35, 서열번호 36, 

서열번호 37, 서열번호 38, 서열번호 39 및 서열번호 40으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 아미노산 서열을 포 

함하는 하나 이상의 가변 도메인을 포함하는 IL-1β 결합 단백질을 제공한다. 

또 다른 양태에서, 본 발명은 서열번호 28, 서열번호 29, 서열번호 30, 서열번호 31, 서열번호 32 및 서열번호 

33으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 아미노산 서열을 포함하는 가변 중쇄 폴리펩타이드를 포함하는 IL-1β 결 

합 단백질을 제공하며, 상기 결합 단백질은 사람 IL-1β에 결합할 수 있다. 또 다른 양태에서, 본 발명은 서열 

번호 34, 서열번호 35, 서열번호 36, 서열번호 37, 서열번호 38, 서열번호 39 및 서열번호 40으로 이루어진 그 

룹 중에서 선택된 아미노산 서열을 포함하는 가변 경쇄 폴리펩타이드를 포함하는 IL-1β 결합 단백질을 제공하 

며, 상기 결합 단백질은 사람 IL-1β에 결합할 수 있다. 

또 다른 양태에서, 본 발명은 서열번호 28, 서열번호 29, 서열번호 30, 서열번호 31, 서열번호 32 및 서열번호 

33으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 아미노산 서열을 포함하는 가변 중쇄 폴리펩타이드와 서열번호 34, 서열번 

호 35, 서열번호 36, 서열번호 37, 서열번호 38, 서열번호 39 및 서열번호 40으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 

아미노산 서열을 포함하는 가변 경쇄 폴리펩타이드를 포함하는 결합 단백질을 제공하며, 상기 결합 단백질들은 

사람 IL-1β에 결합할 수 있다. 

또 다른 양태에서, 결합 단백질은 서열번호 30 및 서열번호 36; 서열번호 30 및 서열번호 37; 서열번호 30 및 

서열번호 39; 및 서열번호 30 및 서열번호 40으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 가변 중쇄 폴리펩타이드 및 가 

변 경쇄 폴리펩타이드를 포함한다. 

또 다른 양태에서, 결합 단백질은 서열번호 33 및 서열번호 36; 서열번호 33 및 서열번호 37; 서열번호 33 및 

서열번호 39; 및 서열번호 33 및 서열번호 40으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 가변 중쇄 폴리펩타이드 및 가 

변 경쇄 폴리펩타이드를 포함한다. 

또 다른 양태에서, 본 발명은 상기 기재된 결합 단백질을 제공하며, 상기 결합 단백질은 면역글로불린 분자, 디 

설파이드 결합된 Fv, 단클론 항체, scFv, 키메라 항체, 단일 도메인 항체, CDR 이식된 항체, 디아바디 

(diabody), 사람화된 항체, 다중 특이적 항체, Fab, 이중 특이적 항체, DVD-Ig 결합 단백질, Fab', 양특이적 

항체, F(ab')2 또는 Fv이다. 

또 다른 양태에서, 상기 기재된 결합 단백질은 사람 IgM 불변 도메인, 사람 IgG4 불변 도메인, 사람 IgG1 불변 

도메인, 사람 IgE 불변 도메인, 사람 IgG2 불변 도메인, 사람 IgG3 불변 도메인 및 사람 IgA 불변 도메인으로 

이루어진 그룹 중에서 선택된 중쇄 면역글로불린 불변 도메인을 포함한다. 또 다른 양태에서, 본 발명의 결합 

단백질은 서열번호 2 및 서열번호 3으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 아미노산 서열을 갖는 중쇄 불변 영역을 

추가로 포함하며, 서열번호 4 및 서열번호 5로 이루어진 그룹 중에서 선택된 아미노산 서열을 갖는 경쇄 불변 

영역을 추가로 포함한다. 본 발명의 또 다른 양태에서, 본 발명의 결합 단백질은 사람 IL-1β의 생물학적 기능 

을 조절할 수 있으며, 사람 IL-1β를 추가로 중화시킬 수 있다. 본 발명의 양태에서, 본 발명의 결합 단백질은 

표면 플라스몬 공명에 의한 측정시, 약 10 2 

M -1 

s -1 

약 10 6 

M -1 

s -1 

이상, 약 10 3 

M -1 

s -1 

이상, 약 10 4 

M -1 

s -1 


이상, 약 10 5 

M -1 

s -1 

이상 및 

이상으로 이루어진 그룹 중에서 선택된 상기 표적에 대한 결합 속도 상수(on rate constant; Kon)를 

- 14 -

[0035] 

[0036] 

[0037] 

[0038] 

[0039] 

[0040] 

[0041] 

[0042] 

[0043] 

갖는다. 

또 다른 양태에서, 본 발명의 IL-1β 결합 단백질은 표면 플라스몬 공명에 의한 측정시, 약 10 -3 

s -1 

이하, 약 10 - 

4 

s -1 

이하, 약 10 -5 

s -1 

이하 및 약 10 -6 

s -1 

이하로 이루어진 그룹 중에서 선택된 상기 표적에 대한 해리 속도 상수 

(off rate constant; Koff)를 갖는다. 

또 다른 양태에서, 본 발명의 IL-1β 결합 단백질은 약 10 -7 

M 이하, 약 10 -8 

M 이하, 약 10 -9 

M 이하, 약 10 -10 

M 이 

하, 약 10 -11 

M 이하, 약 10 -12 

M 이하 및 10 -13 

M 이하로 이루어진 그룹 중에서 선택된 상기 IL-1β 표적 분자에 대 

한 해리 상수(KD)를 갖는다. 추가로, 상기 결합 단백질은 약 1.31 × 10 -10 

M, 약 1.47 × 10 -10 

M, 약 1.61 × 

10 -10 

M, 약 1.86 × 10 -10 

M, 약 2.02 × 10 -10 

M, 약 2.06 × 10 -10 

M, 약 2.3 × 10 -10 

M 및 약 2.84 × 10 -10 

M으로 이 

루어진 그룹 중에서 선택된 IL-1β에 대한 해리 상수(KD)를 갖는다. 

본 발명의 또 다른 양태에서, 본 발명의 결합 단백질은 면역부착 분자, 조영제, 치료제 및 세포독성제로 이루어 

진 그룹 중에서 선택된 제제를 추가로 포함한다. 상기 조영제는 방사선 표지( 3 

H, 14 

C, 35 

S, 90 

Y, 99 

Tc, 111 

In, 

125 

I, 131 

I, 177 

Lu, 166 

Ho 및 153 

Sm를 포함하지만 이에 한정되지 않음), 효소, 형광 표지, 발광 표지, 생물발광 

표지, 자성 표지 또는 비오틴 분자를 포함한 당업계에 공지된 임의의 조영제일 수 있지만, 이에 한정되는 것은 

아니다. 상기 치료제 또는 세포독성제는 항대사물질, 알킬화제, 항생제, 성장 인자, 사이토킨, 항혈관형성제, 

항유사분열제, 안트라사이클린, 독소 또는 아폽토시스제일 수 있다. 

또 다른 양태에서, 본 발명의 IL-1β 결합 단백질은 글리코실화된다. 한 양태에서, 상기 글리코실화는 사람 글 

리코실화 패턴이다. 

본 발명의 한 양태에서, IL-1β 결합 단백질은 결정이다. 한 양태에서, 상기 결정은 담체 무함유의 약제학적 

제어 방출되는 결정이다. 또 다른 양태에서, 상기 결정화된 결합 단백질은 가용성 대응물보다 생체내 반감기가 

보다 길다. 또 다른 양태에서, 상기 결정화된 결합 단백질은 결정화 후 생물학적 활성을 보유한다. 

본 발명의 한 양태는 상기 기재된 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분 중 어느 하나를 암호화하는 분리된 핵 

산에 관한 것이다. 한 양태에서, 본 발명은 중쇄 가변 도메인(VH)을 포함하는 폴리펩타이드, 경쇄 가변 도메인 

(VL)을 포함하는 폴리펩타이드 및 이들 폴리펩타이드의 조합물로 이루어진 그룹 중에서 선택된 폴리펩타이드를 

암호화하는 분리된 핵산을 제공하며, 상기 중쇄 가변 도메인은 본원에 기재된 CDR-H1, CDR-H2 및/또는 CDR-H3을 

포함하고, 상기 경쇄 가변 도메인은 본원에 기재된 CDR-L1, CDR-L2 및/또는 CDR-L3을 포함한다. 

본 발명의 추가 양태는 위에 개시된 분리된 핵산을 포함하는 벡터를 제공하며, 상기 벡터는 pcDNA, pTT[참조: 

Durocher et al., (2002) Nucl. Acids Res. 30(2e9):1-9], pTT3(추가의 다중 클로닝 부위를 갖는 pTT), 

pEFBOS[참조: Mizushima and Nagata, (1990) Nucl. Acids Res. 18(17):5322], pBV, pJV, pBJ 및 pHybE로 이루 

어진 그룹 중에서 선택된다. 

또 다른 양태에서, 숙주 세포는 본원에 개시된 벡터로 형질전환된다. 한 양태에서, 상기 숙주 세포는 에세리키 

아 콜라이(Escherichia. coli)를 포함한 원핵 세포이지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 또 다른 양태에서, 상 

기 숙주 세포는 원생생물 세포, 동물 세포, 식물 세포 및 진균 세포를 포함한 진핵 세포이지만, 이에 한정되는 

것은 아니다. 또 다른 양태에서, 상기 숙주 세포는 포유동물 세포, 예를 들면, CHO 세포 및 COS 세포; 또는 진 

균 세포, 예를 들면, 사카로마이세스 세레비지애(Saccharomyces cerevisiae); 또는 곤충 세포, 예를 들면, Sf9 

이다. 


또 다른 양태에서, 본 발명은 IL-1β에 결합하는 결합 단백질을 생산하기에 충분한 조건 하에 배양 배지에서 위 

에 개시된 숙주 세포 중 임의의 하나를 배양함을 포함하는, IL-1β에 결합하는 결합 단백질을 생산하는 방법을 

제공한다. 또 다른 양태에서, 본 발명은 본원에 개시된 방법에 따라 생산된 결합 단백질을 제공한다. 한 양태 

에서, 본 발명은 결합 단백질을 방출하기 위한 조성물을 제공는 것에 관한 것으로, 상기 조성물은 본원에 개시 

된 바와 같은 결정화된 결합 단백질, 결정화된 항체 작제물 또는 결정화된 항체 접합체를 포함하는 제형, 성분 

및 하나 이상의 중합체 담체를 포함한다. 한 양태에서, 상기 중합체 담체는 폴리(아크릴산), 폴리(시아노아크 

릴레이트), 폴리(아미노산), 폴리(무수물), 폴리(뎁시펩타이드), 폴리(에스테르), 폴리(락트산), 폴리(락트-코- 

글리콜산) 또는 PLGA, 폴리(b-하이드록시부티레이트), 폴리(카프로락톤), 폴리(디옥사논), 폴리(에틸렌 글리 

- 15 -

[0044] 

[0045] 

[0046] 

[0047] 

콜), 폴리((하이드록시프로필)메타크릴아미드), 폴리[(오가노)포스파젠], 폴리(오르토 에스테르), 폴리(비닐 알 

코올), 폴리(비닐피롤리돈), 말레산 무수물-알킬 비닐 에테르 공중합체, 플루로닉 폴리올, 알부민, 알기네이트, 

셀룰로즈 및 셀룰로즈 유도체, 콜라겐, 피브린, 젤라틴, 히알루론산, 올리고사카라이드, 글리카미노글리칸, 황 

산화 폴리사카라이드, 및 이들의 블렌드 및 공중합체로 이루어진 그룹 중에서 선택된 하나 이상의 중합체이다. 

또 다른 양태에서, 상기 성분은 알부민, 수크로스, 트레할로스, 락티톨, 젤라틴, 하이드록시프로필-β-사이클로 

덱스트린, 메톡시폴리에틸렌 글리콜 및 폴리에틸렌 글리콜로 이루어진 그룹 중에서 선택된다. 또 다른 양태에 

서, 본 발명은 본원에 개시된 조성물의 유효량을 포유동물에게 투여하는 단계를 포함하는, 포유동물의 치료 방 

법을 제공한다. 

또한, 본 발명은 본원에 개시된 바와 같은 IL-1β 결합 단백질(또는 이의 IL-1β 결합 부분) 및 약제학적으로 

허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 본 발명의 이러한 약제학적 조성물은 하나 이상의 첨 

가제를 추가로 포함할 수 있다. 특정 양태에서, 본 발명의 약제학적 조성물은 IL-1β 활성이 해를 끼치는 장애 

를 치료하기 위한 하나 이상의 첨가제를 포함한다. 또 다른 양태에서, 첨가제는 치료제, 조영제, 세포독성제, 

혈관형성 억제제, 키나제 억제제, 공자극 분자 차단제, 부착 분자 차단제, 항사이토킨 항체, 항사이토킨의 기능 

적 단편, 메토트렉세이트, 사이클로스포린, 라파마이신, FK506, 검출가능한 표지 또는 리포터, TNF 길항제, 항 

류마티스제, 근이완제, 마약, 비스테로이드성 소염 약물(NSAID), 진통제, 마취제, 진정제, 국소 마취제, 신경근 

차단제, 항미생물제, 항건선제, 코르티코스테로이드, 단백동화 스테로이드, 에리트로포이에틴, 면역화, 면역글 

로불린, 면역억제제, 성장 호르몬, 호르몬 대체 약물, 방사능약물, 항우울제, 항신경병제, 자극제, 천식 약물, 

베타 작용제, 흡입 스테로이드, 경구 스테로이드, 에피네프린 또는 이의 유사체, 사이토킨 및 사이토킨 길항제 

로 이루어진 그룹 중에서 선택된다. 

사람 IL-1β 활성이 억제되도록 사람 IL-1β를 본원에 개시된 결합 단백질과 접촉시킴을 포함하는, 사람 IL-1β 

활성의 억제 방법을 제공한다. 또 다른 양태에서, 본 발명은 사람 피험자에서 사람 IL-1β 활성이 억제되고 치 

료가 달성되도록 본원에 개시된 결합 단백질을 상기 사람 피험자에게 투여함을 포함하는, IL-1β 활성이 해를 

끼치는 장애를 앓고 있는 사람 피험자에서 사람 IL-1β 활성의 억제 방법을 제공한다. 

또 다른 양태에서, 본 발명은 피험자에서 IL-1β 관련 장애를 치료하는(예를 들면, 치유, 억제, 호전, 저해 또 

는 지연시키거나, 이러한 장애의 발병을 예방하거나, 재발 또는 도지는 것을 방지하는) 방법을 제공한다. 한 

양태에서, 상기 방법은 본원에 기재된 바와 같은 IL-1β 결합 단백질, 예를 들면, 항-IL-1β 항체 또는 이의 단 

편과 같은 IL-1β 길항제를 IL-1β 관련 장애를 치료하거나 예방하기에 충분한 양으로 피험자에게 투여함을 포 

함한다. 상기 IL-1β 길항제는 단독으로 또는 본원에 기재된 바와 같은 기타 치료 방식과 조합하여 피험자에게 

투여될 수 있다. 본 발명의 양태에서, IL-1β 결합 단백질 또는 이의 결합 부분은 목적하는 표적 항원(또는 이 

의 에피토프)을 검출하기 위해 항체를 사용하는 분야에서 이용할 수 있는 임의의 각종 항체 기반 면역검출 시스 

템을 사용하여 사람 IL-1β를 검출하기 위해 사용될 수 있다. 이러한 면역검출 시스템에는 면역침전, 면역블롯 

팅(웨스턴 블롯, 면역도트 블롯), 효소 결합 면역흡착 검정법(ELISA), 방사선면역 검정법(RIA), 조직 면역조직 

화학법, 표면 플라스몬 공명(SPR), 샌드위치 면역검정법, 친화성 방법(예를 들면, 친화성 비드, 친화성 칼럼), 

면역경쟁 검정법, 면역칩 검정법(실리콘 칩에 부착된 결합 단백질을 사용함) 및 형광 활성화 세포 분류법(FAC 

S)이 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 일부 면역검출 시스템의 경우, 본원에 기재된 바와 같은 IL-1β 

결합 단백질(또는 이의 결합 부분)은 항체 분자를 고체 기재에 부착하기 위해 당업계에 이용될 수 있는 방법을 

사용하여 동일한 고체 기재에 부착되어, 부착된 결합 단백질은 특정 면역검출 시스템에서의 사용 동안 사람 IL- 

1β에 결합하는 능력을 보유한다. 이러한 고체 기재에는 셀룰로즈계 여과지(예를 들면, 셀룰로즈, 니트로셀룰 

로즈 및 셀룰로즈 아세테이트 필터), 나일론 필터 또는 막, 플라스틱 표면(예를 들면, 미세적정 플레이트 또는 

딥 스틱의 플라스틱 표면), 유리 기재(예를 들면, 비드, 슬라이드 및 유리솜), 중합체 입자(예를 들면, 아가로 

즈 및 폴리아크릴아미드) 및 실리콘 칩이 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 또 다른 양태에서, 본 발명 

은 시험관내 샘플(예를 들면, 전혈, 혈청, 혈장, 소변, 타액 및 조직 생검과 같은 생물학적 샘플)에서 IL-1β의 

존재를 검출하기 위한 방법을 제공한다. 상기 방법은 질환 또는 장애, 예를 들면, 면역 세포 관련 장애를 진단 

하는데 사용될 수 있다. 상기 방법은 (i) 시험 샘플 또는 대조 샘플을 본원에 기재된 바와 같은 IL-1β 결합 

단백질(또는 이의 결합 부분)과 접촉시키는 단계; 및 (ii) 상기 결합 단백질 또는 이의 결합 부분과 시험 샘플 

또는 대조 샘플 사이의 복합체 형성을 검출하는 단계를 포함하며, 대조 샘플에 대한 샘플에서 복합체 형성 또는 

초기 시점에서 취한 또 다른 시험 샘플에 대한 상기 복합체의 형성에 대한 시험 샘플에서 상기 복합체 형성에서 

의 통계학적으로 유의한 변화는 샘플에서 IL-1β의 존재를 나타낸다. 


또 다른 양태에서, 본 발명은 생체 내에서(예를 들면, 피험자에서 생체내 이미징에서) IL-1β의 존재를 검출하 

- 16 -

[0048] 


기 위한 방법을 제공한다. 상기 방법은 질환 또는 장애, 예를 들면, IL-1β 관련 장애를 진단하는데 사용된다. 

상기 방법은 (i) IL-1β 결합 단백질 또는 이의 결합 부분을 IL-1β에 결합할 수 있게 하는 조건하에 본원에 기 

재된 바와 같은 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 결합 부분을 시험 피험자 또는 대조 피험자에게 투여하는 단계; 

및 (ii) 상기 결합 단백질 또는 이의 결합 부분과 IL-1β 사이의 복합체 형성을 검출하는 단계를 포함하며, 상 

기 대조 피험자에 대한 시험 피험자에서의 복합체 형성 또는 초기 시점에서의 시험 피험자에서의 복합체 형성에 

대한 시험 피험자에서 상기 복합체 형성에서의 통계학적으로 유의한 변화는 IL-1β의 존재를 나타낸다. 

또 다른 양태에서, 본 발명의 결합 단백질은 류마티스 관절염, 골관절염, 소아 만성 관절염, 패혈성 관절염, 라 

임(Lyme) 관절염, 건선 관절염, 반응성 관절염, 척추관절병증, 전신 홍반 루푸스, 크론병, 궤양성 대장염, 염증 

성 장 질환, 인슐린 의존성 당뇨병, 갑상선염, 천식, 알레르기 질환, 건선, 피부 경화증, 이식편 대 숙주 질환, 

기관 이식 거부, 기관 이식과 관련된 급성 또는 만성 면역 질환, 사르코이드증, 죽상경화증, 파종 혈관내 응고, 

가와사키병(Kawasaki's disease), 그레이브스병(Grave's disease), 신증후군, 만성 피로 증후군, 베게너 육아 

종증, 헤노흐-쇤라인 자반증(Henoch-Schoenlein purpura), 신장의 현미경적 혈관염, 만성 활성 간염, 포도막염, 

패혈성 쇼크, 독성 쇼크 증후군, 패혈증 증후군, 악액질, 감염성 질환, 기생충 질환, 후천성 면역결핍 증후군, 

급성 횡단 척수염, 헌팅톤 무도병(Huntington's chorea), 파킨슨병(Parkinson's disease), 알츠하이머병 

(Alzheimer's disease), 뇌졸중, 원발성 담관 간경화증, 용혈 빈혈, 악성 암종, 심부전, 심근 경색, 애디슨병 

(Addison's disease), 산발성 제I형 다선성 결핍증 및 제II형 다선성 결핍증, 슈미트 증후군(Schmidt's 

syndrome), 성인(급성) 호흡곤란 증후군, 탈모증, 원형탈모증, 혈청음성 관절병증, 관절병증, 라이터병 

(Reiter's disease), 건선성 관절병증, 궤양성 대장 관절병증, 장병원성 활액막염, 클라미디아(chlamydia), 예 

르시니아(yersinia) 및 살모넬라(salmonella) 관련 관절병증, 척추관절병증, 죽상 질환/동맥경화증, 아토피성 

알레르기, 자가면역 수포성 질환, 보통천포창, 낙엽천포창, 유사천포창, 선상 IgA 질환, 자가면역성 용혈 빈혈, 

쿰즈 양성 용혈 빈혈(Coombs positive haemolytic anaemia), 후천성 악성 빈혈, 소아 악성 빈혈, 근통성 뇌염/ 

로얄 프리병(Royal Free Disease), 만성 점막피부 칸디다증, 거대세포동맥염, 원발성 경화성 간염, 잠복성 자가 

면역 간염, 후천성 면역결핍 질환 증후군, 후천성 면역결핍 관련병, B형 간염, C형 간염, 공통 가변성 면역결핍 

증(공통 가변성 저감마글로불린혈증), 확장심장근육병, 여성 불임, 난소 기능상실, 조기성숙 난소 기능상실, 섬 

유성 폐병, 원인불명의 섬유성 폐포병, 염증후 간질성 폐병, 간질성 폐렴, 결합 조직병 관련 간질성 폐병, 혼합 

된 결합 조직병 관련 폐병, 전신 경화증 관련 간질성 폐병, 류마티스 관절염 관련 간질성 폐병, 전신 홍반 루푸 

스 관련 폐병, 피부근염/다발근육염 관련 폐병, 쇼그렌병 관련 폐병, 강직척추염 관련 폐병, 혈관염 범발성 폐 

병, 혈철소증 관련 폐병, 약물-유도된 간질성 폐병, 섬유증, 방사선 섬유증, 폐쇄세기관지염, 만성 호산구성 폐 

렴, 림프구 침윤성 폐병, 감염후 간질성 폐병, 통풍 관절염, 자가면역 간염, 제1형 자가면역 간염(전형적 자가 

면역 또는 루포이드 간염), 제2형 자가면역 간염(항-LKM 항체 간염), 자가면역 매개된 저혈당증, 흑색극세포증 

을 지닌 제B형 인슐린 내성, 부갑상선저하증, 기관 이식 관련 급성 면역병, 기관 이식 관련 만성 면역병, 골관 

절염, 원발성 경화성 담관염, 건선 제1형, 건선 제2형, 특발성 백혈구감소, 자가면역성 호중구감소증, 신장병 

NOS, 사구체신염, 신장의 현미경적 혈관염, 라임병, 원반모양 홍반루푸스, 특발성 남성 불임 또는 NOS, 정자 자 

가면역성, 다발경화증(모든 아형), 교감눈염증, 결합 조직 병에 속발성인 폐동맥고혈압, 굿패스튜어 증후군 

(Goodpasture's syndrome), 결절다발동맥염의 폐 증상, 급성 류마티스열, 류마티스 척추염, 스틸병(Still's 

disease), 전신 경화증, 쇼그렌 증후군, 다카야스병/동맥염, 자가면역 저혈소판증, 특발성 저혈소판증, 자가면 

역 갑상선병, 갑상선기능항진증, 갑상선종 자가면역 갑상선기능저하증(하시모토병), 아토피성 자가면역 갑상선 

기능저하증, 원발성 점액부종, 수정체성 포도막염, 원발성 혈관염, 백반증 급성 간 질환, 만성 간 질환, 알코올 

성 간경화증, 알코올-유도된 간 손상증, 콜레오사타티스(choleosatatis), 특이체질성 간 질환, 약물 유도된 간 

염, 비알코올성 지방간염, 알레르기 및 천식, B 그룹 스트렙토코커스(GBS) 감염, 정신장애(예를 들면, 우울증 

및 정신분열병), Th2 유형 및 Th1 유형 매개된 질환, 급성 및 만성 통증(통증의 상이한 형태), 및 폐암, 

유방암, 위암, 방광암, 결장암, 췌장암, 난소암, 전립선암 및 직장암과 같은 암, 및 조혈성 악성암(백혈병 및 

림프종), 아베타지질단백혈증, 말단청색증, 급성 및 만성 기생충 또는 감염 과정, 급성 백혈병, 급성 림프모구 

백혈병(ALL), 급성 골수성 백혈병(AML), 급성 또는 만성 세균 감염, 급성 췌장염, 급성 신장부전, 선암, 공기 

주기외박동, AIDS 치매 합병증, 알코올-유도된 간염, 알레르기결막염, 알레르기성 접촉 피부염, 알레르기성 비 

염, 동종이식거부, 알파-1-항트립신 결핍증, 근위축성 측삭 경화증, 빈혈, 협심증, 척추 전각세포 변성, 항-CD3 

치료요법, 항인지질증후군, 항-수용체 과민 반응, 대동맥류 및 말초동맥류, 대동맥박리, 동맥고혈압, 동맥경화 

증, 동정맥루, 실조, 심방세동(지속적 또는 발작), 심방조동, 방실차단, B 세포 림프종, 골 이식거부, 골수이식 

(BMT) 거부, 각차단, 버킷 림프종(Burkitt's lymphoma), 화상, 심장부정맥, 심장발육장애 증후군, 심장 종양, 

심근병증, 심폐 우회 염증 반응, 연골 이식거부, 소뇌 피질 변성, 소뇌장애, 혼란 또는 다소성 심방빈맥, 화학 

- 17 -


치료요법 관련 장애, 만성 골수구성 백혈병(CML), 만성 알코올 중독, 만성 염증성 병리학, 만성 림프성백혈병 

(CLL), 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 만성 살리실레이트 중독, 결장직장 암종, 울혈성 심장병, 결막염, 접촉성 피 

부염, 폐성심, 관상동맥질환, 크로이츠펠트-야콥병(Creutzfeldt-Jakob disease), 배양 음성 패혈증, 낭성 섬유 

증, 사이토킨 치료요법 관련 장애, 권투선수치매, 탈수초병, 뎅기출혈열, 피부병, 피부과 상태, 당뇨병, 진성당 

뇨병, 당뇨병성 동맥경화병, 미만성 루이체 질환, 확장된 울혈성 심근병증, 기저핵의 장애, 중년의 다운 증후군 

(Down's Syndrome in middle age), CNS 도파민 수용체를 차단하는 약물에 의해 유도된 약물-유도된 운동 장애, 

약물 민감성, 습진, 뇌척수염, 심내막염, 내분비병증, 후두개염, 엡슈타인-바르 바이러스(Epstein-Barr virus) 

감염, 홍색사지통증, 추체외로 및 소뇌 장애, 가족성 적혈구포식성 림프조직구증식증, 태아 흉선 이식거부, 프 

리이드라이히 운동실조증(Friedreich's ataxia), 기능성 말초 동맥 장애, 진균성 패혈증, 가스 괴저, 위궤양, 

사구체신염, 임의의 기관 또는 조직의 이식거부, 그람 음성 패혈증, 그람 양성 패혈증, 세포내 기관으로 인한 

육아종, 털세포 백혈병, 할레르보르덴-스파츠병(Hallervorden-Spatz disease), 하시모토 갑상선염, 건초열, 심 

장 이식거부, 혈색소침착증, 혈액투석, 용혈요독증후군/혈전저혈소판혈증자반증병, 출혈, A형 간염, 히스 다발 

부정맥, HIV 감염/HIV 신경병증, 호지킨병(Hodgkin's disease), 운동과다 활동장애, 과민반응, 과민성 폐렴, 고 

혈압, 운동감소 활동 장애, 시상하부-뇌하수체-부신축 평가, 특발성 애디슨병, 특발성 폐 섬유증, 항체 매개된 

세포독성, 무력증, 영아진행성 척수성 근위축증, 대동맥의 염증, 인플루엔자 A, 이온화 조사 노출, 홍채섬모체 

염/포도막염/시신경염, 허혈-재관류 손상, 허혈성 뇌졸중, 소아 류마티스관절염(JRA), 소아척수근위축증, 카포 

시육종, 신장 이식거부, 레지오넬라, 리슈만편모충증, 나병, 피질척수 시스템의 병변, 지방부종, 간 이식거부, 

림프부종, 말라리아, 악성 림프종, 악성 조직구증, 악성 흑색종, 수막염, 수막구균혈증, 대사/특발성, 편두통, 

미토콘드리아 다중-시스템 장애, 복합 결합 조직병, 단클론 감마글로불린혈증, 다발골수종, 다중 시스템 변성 

(Mencel Dejerine- Thomas Shi-Drager 및 Machado-Joseph), 중증근육무력증, 마이코박테리움 아비움 인트라셀 

룰라레(mycobacterium avium intracellulare), 결핵균, 골수형성이상증후군, 심근경색, 심근허혈성장애, 비인 

강악성종양, 신생아 만성 폐병, 신장염, 신장증, 신경변성질환, 신경성 I 근위축증, 호중성백혈구감소열, 비-호 

지킨 림프종, 복부대동맥 및 이의 분지의 폐색, 동맥폐쇄성 장애, OKT3 치료요법, 고환염/부고환염, 고환염/ 

정관절단술 역 수술, 장기비대, 골다공증, 췌장 이식거부, 췌장 암종, 부수종양성 증후군/고칼슘혈증, 부갑상선 

이식거부, 골반염 질환, 연중비염, 심장막병, 말초 죽상경화성질환, 말초 혈관 장애, 복막염, 악성빈혈, 주폐포 

자층 폐렴, 폐렴, POEMS 증후군(다발신경병, 장기비대, 내분비병, 단클론 감마글로불린병증, 및 

피부변화증후군), 관류후증후군, 펌프후 증후군(post pump syndrome), MI 후 심장절개 증후군, 전자간증, 진행 

핵상마비, 원발폐고혈압증, 방사선 치료요법, 레이노드 현상, 레이노드 질환, 레프섬병(Refsum's disease), 조 

절성 협소 QRS 빈맥, 신장혈관고혈압, 재관류손상, 제한심근병증, 육종, 피부경화증, 노년무도병, 루이체형 노 

인성치매, 혈청음성 관절병증, 쇼크, 겸상적혈구빈혈, 피부 동종이식거부, 피부 변화 증후군, 소장 이식거부, 

고형 종양, 특이적인 부정맥, 척수운동실조, 척수소뇌변성, 스트렙토코커스 근염, 소뇌의 구조적 병변, 아급성 

경화범뇌염, 실신, 심혈관계의 매독, 전신 아나필락시스, 전신 염증반응 증후군, 전신적으로 발병된 소아 류마 

티스 관절염, T 세포 또는 FAB ALL, 모세혈관확장증, 폐쇄성 혈전혈관염, 혈소판감소증, 독성, 이식, 

외상/출혈, 제III형 과민반응, 제IV형 과민반응, 불안정한 협심증, 요독증, 요로성패혈증, 두드러기, 판막성 심 

장병, 정맥류, 혈관염, 정맥병, 정맥 혈전증, 심실세동, 바이러스 및 진균 감염, 바이러스성 뇌염/무균 수막염, 

바이러스-관련 적혈구포식성 증후군, 베르니케-코르사코프(Wernicke-Korsakoff) 증후군, 윌슨병(Wilson's 

disease), 임의의 기관 또는 조직의 이종이식거부, 급성 관상동맥 증후군, 급성 특발성 다발신경염, 급성 염증 

성 탈수초 다발성신경병증, 급성 허혈, 성인 스틸병, 원형탈모증, 과민증, 항-인지질 항체 증후군, 재생불량빈 

혈, 동맥경화증, 아토피성 습진, 아토피성 피부염, 자가면역 피부염, 스트렙토코커스 감염과 관련된 자가면역 

장애, 자가면역 장병증, 자가면역 청력장애, 자가면역 림프세포증식증후군(ALPS), 자가면역 심근염, 자가면역 

조기성숙 난소기능상실, 안검염, 기관지확장증, 수포성 유천포창, 심혈관병, 격변성 항인지질 증후군, 

복강질환, 경추증, 만성 허혈, 흉터유사물집증, 다발경화증 위험이 있는 임상적으로 분리된 증후군(CIS), 결막 

염, 유아발생정신장애, 만성 폐쇄성 폐병(COPD), 누낭염, 피부근염, 당뇨병성 신경병증, 진성당뇨병, 추간판탈 

출증, 척추원반탈출, 약물 유도된 면역 용혈빈혈, 심내막염, 자궁내막증, 안구내염, 상공막염, 다형홍반, 주요 

다형홍반, 임신유사천포창, 길랑-바레 증후군(Guillain-Barre syndrome: GBS), 건초열, 휴즈 증후군(Hughes 

syndrome), 특발성 파킨슨병, 특발성 간질폐렴, IgE-매개된 알레르기, 면역 용혈빈혈, 봉입체 근염, 감염성 눈 

염증병, 염증성 탈수초병, 염증성 심장병, 염증성 신장병, IPF/UIP, 홍채염, 각막염, 건성각결막염, 쿠스마울병 

(Kussmaul disease) 또는 쿠스마울-마이어병(Kussmaul-Meier disease), 랜드리 마비(Landry's paralysis), 랑 

게르한스 세포 조직구증, 망울혈반, 황반변성, 현미경다발혈관염, 모르부스 베크테레브(morbus bechterev), 운 

동 신경 장애, 점막 유천포창, 다중 기관부전, 중증근육무력증, 골수형성이상증후군, 심근염, 신경근장애, 신경 

- 18 -

[0049] 

[0050] 

[0051] 

[0052] 

[0053] 

병증, 비-A 비-B 간염, 시신경염, 골용해, 소수관절 JRA, 말초동맥폐쇄병(PAOD), 말초혈관병(PVD), 말초동맥병 

(PAD), 정맥염, 결절다발동맥염(또는 결절동맥주위염), 다발연골염, 류마티스성 다발성 근육통, 백모증, 다관절 

JRA, 다중내분비 결핍증후군, 다발근육염, 류마티스성 다발성근육통(PMR), 펌프 후 증후군, 원발성 파킨슨병, 

전립선염, 적혈구계무형성증, 원발성 부신피질부전, 재발 시신경척수염, 재협착, 류마티스성심장병, 사포 

(SAPHO)(윤활막염, 여드름, 농포증, 골과다증, 및 낭성섬유골염), 공피증, 속발성 아밀로이드증, 쇼크 폐, 공막 

염, 좌골신경통, 속발성 부신 기능부전, 실리콘 관련 결합 조직병, 스네던-윌킨슨 피부병(Sneddon-Wilkinson 

dermatosis), 강직척추염, 스티븐스-존슨 증후군(Stevens-Johnson syndrome: SJS), 전신성 염증반응 증후군, 

일시적인 동맥염, 톡소플라스마성 망막염, 독성표피괴사용해, 횡단척수염, TRAPS(제1형 종양 괴사 인자 수용체 

(TNFR) 관련 주기성 증후군), 흑색 가시세포증을 동반한 B형 인슐린 저항, 제1형 알레르기성 반응, 제II형 당뇨 

병, 두드러기, 일반적인 간질폐렴(UIP), 혈관염, 봄철 결막염, 바이러스성 결막염, 보그트-고야나기-하라다 증 

후군(Vogt-Koyanagi-Harada syndrome: VKH 증후군), 습성 황반 변성 및 상처 치유로 이루어진 그룹 중에서 선 

택된 장애를 치료하는데 유용하다. 

한 양태에서, 본 발명의 결합 단백질은 류마티스 관절염, 골관절염, 크론병, 다발경화증, 인슐린 의존성 당뇨병 

및 건선을 치료하는데 사용된다. 또 다른 양태에서, 본 발명의 결합 단백질은 또한 강직척추염, 알레르기, 자 

가면역 당뇨병 및 자가면역 포도막염을 비롯한 자가면역 질환, 특히 염증 관련 자가면역 질환을 앓고 있는 사람 

을 치료하는데 또한 사용된다. 

또 다른 양태에서, 본 발명은 상기 논의된 바와 같은 제2 제제의 투여 전, 투여와 동시 또는 투여 후에 본원에 

기재된 결합 단백질 중 임의의 하나를 투여하는 단계를 포함하는, 사람 IL-1β가 해를 끼치는 장애를 앓고 있는 

환자의 치료 방법을 제공한다. 또 다른 양태에서, 하나 이상의 IL-1β 길항제(예를 들어, 항-IL-1β 항체 또는 

이의 단편)와 동시 투여되고/되거나 동시 제형화될 수 있는 추가의 치료제에는 TNF 길항제, TNF 수용체의 가용 

성 단편, ENBREL (에타너셉트), TNF 효소 길항제, TNF 전환 효소(TACE) 억제제, 무스카린성 수용체 길항제, 

TGF-β 길항제, 인터페론 γ, 퍼페니돈, 화학치료제, 메토트렉세이트, 레플루노마이드, 시롤리무스(라파마이신) 

또는 이의 유사체, CCI-779, COX2 또는 cPLA2 억제제, NSAID, 면역조절제, p38 억제제; TPL-2, MK-2 및 NFkB 

억제제; 부데노사이드, 상피 성장 인자, 코르티코스테로이드, 사이클로스포린, 설파살라진, 

아미노살리실레이트, 6-머캅토퓨린, 아자티오프린, 메트로니다졸, 리폭시게나제 억제제, 메살라민, 올살라진, 

발살라지드, 항산화제, 트롬복산 억제제, IL-1 수용체 길항제, 항-IL-1β 항체, 항 IL-6 항체, 성장 인자, 엘라 

스타제 억제제, 피리디닐-이미다졸 화합물; TNF, LT, IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, 

IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-14, IL-15, IL-16, IL-17, IL-18, IL-19, IL-20, IL-21, IL-22, IL-23, 

IL-24, IL-25, IL-26, IL-27, IL-28, IL-29, IL-30, IL-31, IL-32, IL-33, EMAP-II, GM-CSF, FGF 또는 PDGF의 

항체 또는 작용제; CD2, CD3, CD4, CD8, CD25, CD28, CD30, CD40, CD45, CD69, CD90 또는 이들의 리간드의 항 

체; FK506, 라파마이신, 미코페놀레이트 모페틸, 이부프로펜, 프레드니솔론, 포스포디에스테라제 억제제, 아데 

노신 작용제, 항혈전제, 보체 억제제, 아드레날린성 제제; IRAK, NIK, IKK, p38 또는 MAP 키나제 억제제; IL- 

1β 전환 효소 억제제, TNFα 전환 효소 억제제, T 세포 신호전달 억제제, 메탈로프로테이나제 억제제, 6-머캅 

토퓨린, 안지오텐신 전환 효소 억제제, 가용성 사이토킨 수용체, 가용성 p55 TNF 수용체, 가용성 p75 TNF 수용 

체, sIL-1RI, sIL-1RII, sIL-6R, 소염성 사이토킨, IL-4, IL-10, IL-11 및 TGFβ가 포함되지만, 이에 한정되는 

것은 아니다. 

한 양태에서, 본원에 기술된 약제학적 조성물은, 비경구, 피하, 근육내, 정맥내, 관절내, 기관지내, 복강내, 관 

절낭내, 연골내, 강내, 복내, 소뇌내, 뇌실내, 결장내, 경관내, 위내, 간내, 심근내, 골내, 골반내, 심장막공간 

내, 복강내, 흉막내, 전립선내, 폐내, 직장내, 신장내, 망막내, 척수내, 활액내, 흉관내, 자궁내, 방광내, 볼루 

스(bolus), 질, 직장, 구강, 설하, 비강내, 및 경피 경로로 이루어진 그룹에서 선택된 적어도 하나의 방식으로 

피험자에게 투여된다. 

본 발명의 한 양태는 하나 이상의 본 발명의 IL-1β 결합 단백질에 대한 하나 이상의 IL-1β 항이디오타입 

(idiotype) 항체를 제공한다. 항이디오타입 항체는 본 발명의 결합 단백질에 도입될 수 있는, 면역글로불린 분 

자의 적어도 일부, 예를 들면, 중쇄, 경쇄 또는 이들의 리간드 결합 부분의 하나 이상의 상보성 결정 영역 

(CDR), 중쇄 또는 경쇄 가변 영역, 중쇄 또는 경쇄 불변 영역, 골격 영역 또는 이의 임의 부분을 포함하지만 이 

에 한정되지 않은 임의의 단백질 또는 펩타이드 함유 분자를 포함한다. 

발명을 실시하기 위한 구체적인 내용 


본 발명은 사람 IL-1β에 결합하는 IL-1β 결합 단백질, 특히 항-IL-1β 항체 또는 이의 항원 결합 부분에 관한 

- 19 -

[0054] 

[0055] 

[0056] 

[0057] 

[0058] 

[0059] 

[0060] 

것이다. 본 발명의 각종 양태는 항체, 항체 단편 및 이들의 약제학적 조성물 뿐만 아니라 이러한 항체 및 이의 

IL-1β 결합 부분을 제조하기 위한 핵산, 재조합 발현 벡터 및 숙주 세포에 관한 것이다. 또한,시험관내 또는 

생체내에서 사람 IL-1β를 검출하고, 사람 IL-1β 활성을 억제하고, 유전자 발현을 조정하기 위해 본 발명의 결 

합 단백질을 사용하는 방법도 본 발명에 포함된다. 

본원에서 달리 정의되지 않는 한, 본 발명과 관련하여 사용된 과학 및 기술 용어들은 당업자가 일반적으로 이해 

하고 있는 의미를 갖는다. 그러나, 상기 용어들의 의미 및 범위는, 임의의 잠재적인 모호함이 있는 경우, 임의 

의 사전적 정의 또는 외적 정의보다 본원에 제공된 정의가 우선되어야 하는 것은 명백하다. 또한, 문맥상 달리 

필요가 없는 한, 용어의 단수 표현은 복수를 포함하며, 복수 표현은 단수를 포함하는 것이다. 본원에서, 

"또는"은 달리 언급되지 않는 한 "및/또는"을 포함한다. 또한, 용어 "포함하는" 및 기타 형태, 예를 들면, "포 

함한다" 및 "포함된"의 사용은 제한적 의미가 아니다. 또한, "요소" 또는 "성분"과 같은 용어도 달리 구체적으 

로 언급되지 않는 한 하나의 유니트를 포함하는 요소 및 성분과 하나 이상의 서브 유니트를 포함하는 요소 및 

성분을 포함한다. 

일반적으로, 본원에 기재된 세포 및 조직 배양, 분자 생물학, 면역학, 미생물학, 유전학, 단백질 및 핵산 화학, 

및 핵산 하이브리드화와 관련하여 사용된 용어 및 기술들은 당업계에 익히 공지되어 있고 일반적으로 사용되는 

것들이다. 본 발명의 방법 및 기술은 당업계에 익히 공지되어 있고, 달리 나타내지 않는 한 본 명세서 전체에 

서 인용되고 논의된 각종 일반 문헌들 및 보다 구체적인 문헌들에서 기재된 바와 같은 통상의 방법에 따라 일반 

적으로 수행된다. 효소 반응 및 정제 기술은 당업계에서 일반적으로 수행되거나 본원에 기재된 바와 같이 제조 

자의 지침에 따라 수행한다. 본원에 기재된 분석 화학, 합성 유기 화학 및 의학 및 약제 화학과 관련하여 사용 

된 용어와 실험 절차 및 기술은 당업계에 익히 공지되어 있으며 일반적으로 사용되는 것들이다. 화학 합성, 화 

학 분석, 약제 제조, 제형 및 전달 및 환자 치료에 대해서 표준 기술을 사용한다. 

본 발명을 더욱 용이하게 이해할 수 있도록 하기에 정의된 용어들을 선택한다. 

"폴리펩타이드"란 용어는 아미노산의 임의의 중합체 쇄를 의미한다. "펩타이드" 및 "단백질"이란 용어는 폴리 

펩타이드란 용어와 혼용할 수 있으며, 또한 아미노산의 중합체 쇄를 의미한다. "폴리펩타이드"란 용어는 천연 

또는 인공 단백질, 단백질 단편 및 단백질 서열의 폴리펩타이드 유사체를 포함한다. 폴리펩타이드는 단량체 또 

는 중합체일 수 있다. 

"분리된 단백질" 또는 "분리된 폴리펩타이드"란 용어는 그 기원이나 어원의 근원으로 인해 자연 상태에서 동반 

되는 자연적으로 관련된 성분과 결합되어 있지 않거나, 동일한 종 유래의 다른 단백질이 실질적으로 없거나, 다 

른 종 유래의 세포에 의해서 발현되거나, 자연 상태에서 발생되지 않는 단백질 또는 폴리펩타이드를 의미한다. 

따라서, 자연적으로 유래하는 세포와 상이한 세포 시스템에서 합성되거나 화학적으로 합성된 폴리펩타이드는 자 

연적으로 관련된 성분으로부터 "분리된" 것이다. 또한, 단백질은 당업계에 익히 공지된 단백질 정제 기술을 사 

용하여 분리를 통해 자연적으로 관련된 성분이 실질적으로 없도록 제공될 수 있다. 

"회수하는"이란 용어는, 예를 들면, 당업계에 익히 공지된 단백질 정제 기술을 사용하여 분리를 통해 자연적으 

로 관련된 성분이 실질적으로 없는 폴리펩타이드와 같은 화학종을 제공하는 과정을 의미한다. 

"사람 IL-1β"(hIL-1β 또는 IL-1β로도 약칭됨)란 용어는 각종 면역 반응, 염증 과정 및 조혈에 연관된 다면발 

현성 사이토킨을 포함한다. 사람 IL-1β란 용어는 표준 재조합 발현 방법에 의해 제조될 수 있는 재조합 사람 

IL-1β(rh IL-1β)를 포함한다. 

- 20 - 


[0061] 

[0062] 

[0063] 

[0064] 

[0065] 

[0066] 

표 1 

"생물학적 활성"이란 IL-1β의 모든 고유 생물학적 성질을 의미한다. IL-1β의 생물학적 성질은 IL-1β 수용체 

에 대한 결합을 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다(다른 예로는 열 유도, 서파수면 및 호중구증가, T 림프 

구 및 B 림프구 활성화, 섬유아세포 증식, 특정 세포에 대한 세포독성, 콜라게나제 유도, 간의 급성기 단백질 

합성, 및 콜로니 자극 인자 및 콜라겐의 생산 증가가 포함된다). 

항체, 단백질 또는 펩타이드와 제2 화학종의 상호작용과 관련하여 "특이적 결합" 또는 "특이적으로 결합하는"이 

란 용어는 그 상호작용이 화학종 상의 특정 구조(예를 들면, 항원 결정인자 또는 에피토프)의 존재에 의존하는 

것을 의미하는데, 예를 들면, 항체는 일반적으로 단백질보다는 특이적 단백질 구조를 인식하여 여기에 

결합한다. 항체가 에피토프 "A"에 특이적이라면, 표지된 "A"와 항체를 포함하는 반응에서 에피토프 A(또는 유 

리된 미표지 A)를 포함하는 분자의 존재는 항체에 결합된 표지된 A의 양을 감소시킬 것이다. 

"항체"란 용어는 대략적으로 4개의 폴리펩타이드 쇄, 즉 2개의 중쇄(H) 및 2개의 경쇄(L)로 이루어진 임의의 면 

역글로불린(Ig) 분자를 의미하거나, Ig 분자의 필수적인 에피토프 결합 특징을 보유하는 이의 임의의 기능성 단 

편, 돌연변이체, 변이체 또는 유도체를 의미한다. 이러한 돌연변이체, 변이체 또는 유도체의 항체형은 당업계 

에 공지되어 있고, 이의 양태는 하기에 논의되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 

전장 항체에서, 각각의 중쇄는 중쇄 가변 영역(본원에서 HCVR 또는 VH로 약칭됨) 및 중쇄 불변 영역으로 이루어 

진다. 중쇄 불변 영역은 3개의 도메인, 즉 CH1, CH2 및 CH3으로 이루어진다. 각각의 경쇄는 경쇄 가변 영역 

(본원에서 LCVR 또는 VL로 약칭됨) 및 경쇄 불변 영역으로 이루어진다. 경쇄 불변 영역은 1개의 도메인, 즉 CL 

로 이루어진다. VH 및 VL 영역은 상보성 결정 영역(CDR)이라 불리는 초가변성 영역들로 추가로 세분될 수 

있고, 이들 사이에는 골격 영역(FR)이라 불리는 더 보존적인 영역들이 배치되어 있다. 각각의 VH 및 VL은 3개 

의 CDR 및 4개의 FR로 이루어지며, 아미노 말단에서 카복시 말단까지 다음과 같은 순서에 따라 배열된다: FR1, 

CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. 면역글로불린 분자는 임의의 유형(예를 들면, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA 및 

IgY), 클래스(예를 들면, IgG 1, IgG2, IgG 3, IgG4, IgA1 및 IgA2) 또는 서브클래스일 수 있다. 


항체의 "항원 결합 부분"이란 용어는 항원(예를 들면, hIL-1α)에 대해 특이적 결합하는 능력을 보유하는 항체 

의 하나 이상의 단편을 의미한다. 항체의 항원 결합 기능은 전장 항체의 단편에 의해 수행될 수 있다. 이러한 

항체 양태들은 또한 2개 이상의 상이한 항원에 특이적으로 결합할 수 있는 양특이적, 이중특이적 또는 다중특이 

적 형일 수 있다. 항체의 "항원 결합 부분"이라는 용어에 포함되는 결합 단편의 예에는 (i) VL, VH, CL 및 CH1 

도메인으로 이루어진 1가 단편인 Fab 단편; (ii) 경첩(hinge) 영역에서 이황화 가교에 의해 결합되어 있는 2개 

의 Fab 단편을 포함하는 2가 단편인 F(ab')2 단편; (iii) VH 및 CH1 도메인으로 이루어진 Fd 단편; (iv) 항체의 

한팔(single arm)의 VL 및 VH 도메인으로 이루어진 Fv 단편; (v) 단일 가변 도메인을 포함하는 dAb 단편[참조: 

Ward et al., (1989) Nature 341: 544-546; 및 국제 특허 출원 공보 제WO 90/05144호); 및 (vi) 분리된 상보성 

결정 영역(CDR)이 포함된다. 또한, Fv 단편의 2개의 도메인, 즉 VL 및 VH는 다른 유전자에 의해 암호화되지만, 

VL 및 VH 영역이 쌍을 이루어 1가 분자(단일 쇄 Fv(scFv)로 알려짐)[예를 들어, 참조: Bird et al., (1998) 

Science 242: 423-426; 및 Huston et al., (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 5879-5883]를 형성하고 있 

는 단일 단백질 쇄로서 제조될 수 있게 하는 합성 링커에 의해, VL 및 VH 영역은 재조합법을 사용하여 결합될 

수 있다. 이러한 단일 쇄 항체(scFv)는 또한 항체의 "항원 결합 부분"이라는 용어에도 포함되는 것으로 의도된 

다. 다른 형태의 단일 쇄 항체, 예를 들면, 디아바디도 포함된다. 디아바디는, VH 및 VL 도메인이 단일 폴리 

- 21 -

[0067] 

[0068] 

[0069] 

[0070] 

펩타이드 쇄 상에서 발현되지만, 동일 쇄 상에서 2개의 도메인 사이에 쌍을 이루기에는 너무 짧은 링커를 사용 

하여 상기 도메인들이 다른 쇄의 상보성 도메인과 쌍을 이루어 2개의 항원 결합 부위를 생성하는 2가의 양특이 

적 항체이다[참조: Holliger, et al., (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 6444-6448; Poljak, et al., 

(1994) Structure 2: 1121-1123]. 이러한 항체 결합 부분은 당업계에 공지되어 있다[참조: Kontermann and 

Dubel eds., Antibody Engineering (2001) Springer-Verlag. New York. 790 pp. (ISBN 3-540-41354-5)]. 

"항체 작제물"이란 용어는 링커 폴리펩타이드 또는 면역글로불린 불변 도메인에 결합된 본 발명의 항원 결합 부 

분을 하나 이상 포함하는 폴리펩타이드를 의미한다. 링커 폴리펩타이드는 펩타이드 결합에 의해 결합된 2 이상 

의 아미노산 잔기를 포함하며, 하나 이상의 항원 결합 부분을 연결하는데 사용된다. 이러한 링커 폴리펩타이드 

는 당업계에 익히 공지되어 있다[참조: Holliger, et al., (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 6444-6448; 

Poljak, et al., (1994) Structure 2: 1121-1123]. 면역글로불린 불변 도메인은 중쇄 또는 경쇄 불변 도메인 

을 의미한다. 사람 IgG 중쇄(γ) 및 경쇄(κ 및 δ) 불변 도메인 아미노산 서열은 당업계에 공지되어 있으며, 

표 2에 제시한다. 

표 2 

또한, 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 항체 또는 이의 항원 결합 부분과 하나 이상의 다른 단백질 또는 펩타 

이드의 공유 결합 또는 비공유 결합에 의해 형성된 거대 면역부착 분자의 일부일 수 있다. 이러한 면역부착 분 

자의 예에는 사량체 scFv 분자를 제조하기 위한 스트렙타비딘 코어 영역의 사용[참조: Kipriyanov, et al., 

(1995) Human Antibodies and Hybridomas 6: 93-101] 및 2가의 비오틴화된 scFv 분자를 제조하기 위한 시스테 

인 잔기, 마커 펩타이드 및 C 말단 폴리히스티딘 태그의 사용[참조: Kipriyanov, et al., (1994) Mol. 

Immunol. 31: 1047-1058]이 포함된다. 항체의 항원 결합 부분, 예를 들면, Fab 및 F(ab')2 단편은 전체 항체의 

각각 파파인 또는 펩신 분해와 같은 통상의 기술을 사용하여 전체 항체로부터 제조할 수 있다. 또한, 항체, 이 

의 항원 결합 부분 및 면역부착 분자는 본원에 기재된 바와 같이 표준 재조합 DNA 기술을 사용하여 수득될 수 

있다. 


"분리된 항체"란 상이한 항원 특이성을 갖는 다른 항체가 실질적으로 없는 항체를 의미하는 것이다(예를 들면, 

hIL-1β에 특이적으로 결합하는 분리된 항체는 hIL-1β 이외에 항원에 특이적으로 결합하는 항체가 실질적으로 

없다). 그러나, hIL-1β에 특이적으로 결합하는 분리된 항체는 다른 종 유래의 IL-1β 분자와 같은 다른 항원 

- 22 -

[0071] 

[0072] 

[0073] 

[0074] 

[0075] 

[0076] 

과 교차반응성을 가질 수도 있다. 더욱이, 분리된 항체는 다른 세포 물질 및/또는 화학물질이 실질적으로 없을 

수도 있다. 

"사람 항체"란 용어는 사람 생식계열 면역글로불린 서열로부터 유래하는 가변 및 불변 영역을 갖는 항체를 포함 

하는 것으로 의도된다. 본 발명의 사람 항체는, 예를 들면, CDR, 특히 CDR3에서 사람 생식계열 면역글로불린 

서열에 의해 암호화되지 않은 아미노산 잔기(예를 들면, 시험관 내에서 무작위 또는 부위 특이적 돌연변이에 의 

해 또는 생체 내에서 체세포 돌연변이에 의해 도입된 돌연변이)를 포함할 수 있다. 그러나, "사람 항체"란 용 

어는 마우스와 같은 또 다른 포유동물 종의 생식계열로부터 유래하는 CDR 서열이 사람 골격 서열에 이식된 항체 

를 포함하지 않는다. 

"재조합 사람 항체"란 용어는 재조합 수단에 의해 제조되거나, 발현되거나, 생성되거나, 분리된 모든 사람 

항체, 예를 들면, 숙주 세포내로 형질감염된 재조합 발현 벡터를 사용하여 발현된 항체(하기 섹션 II C에서 추 

가로 기재됨), 재조합의 조합 사람 항체 라이브러리로부터 분리된 항체[참조: Hoogenboom, (1997) Trends 

Biotechnol. 15: 62-70; Azzazy and Highsmith, (2002) Clin. Biochem. 35: 425-445; Gavilondo and Larrick, 

(2000) BioTechniques 29: 128-145; Hoogenboom and Chames, (2000) Immunology Today 21: 371-378], 사람 면 

역글로불린 유전자로 유전자 도입된 동물(예를 들면, 마우스)로부터 분리된 항체[예를 들어, 참조: Taylor et 

al., (1992) Nucl. Acids Res. 20: 6287-6295; Kellermann and Green, (2002) Curr. Opin. Biotechnol. 13: 

593-597; Little et al., (2000) Immunol. Today 21: 364-370] 또는 사람 면역글로불린 유전자 서열을 기타 

DNA 서열에 스플라이싱함을 포함하는 임의의 기타 수단에 의해 제조되거나, 발현되거나, 생성되거나, 분리된 항 

체를 포함한다. 상기 재조합 사람 항체는 사람 생식계열 면역 글로불린 서열로부터 유래된 가변 및 불변 영역 

을 갖는다. 그러나, 특정 양태에서, 상기 재조합 사람 항체는 시험관내 돌연변이(또는, 사람 Ig 서열의 유전자 

도입 동물이 사용되는 경우, 생체내 체세포 돌연변이) 처리되고, 따라서 재조합 항체의 VH 및 VL 영역의 아미노 

산 서열은 사람 생식계열 VH 및 VL 서열로부터 유래하고 이와 관련되지만 생체내 사람 항체 생식계열 레퍼토리 

내에 천연적으로 존재하지 않을 수 있는 서열이다. 

"키메라 항체"란 용어는 한 종에서 유래되는 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열과 또 다른 종에서 유래되는 불변 영 

역 서열을 포함하는 항체, 예를 들면, 쥐의 중쇄 및 경쇄 가변 영역이 사람 불변 영역에 결합된 항체를 의미한 

다. 

"CDR 이식된 항체"란 용어는 한 종에서 유래되는 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열을 포함하지만, VH 및/또는 VL의 

CDR 영역 중 하나 이상의 서열들이 또 다른 종의 CDR 서열로 교체된 항체, 예를 들면, 하나 이상의 사람 CDR(예 

를 들면, CDR3)이, 예를 들면, 사람 IL-1β에 대한 쥐의 단클론 항체로부터 수득된 쥐의 CDR 서열로 교체된 사 

람 중쇄 및 경쇄 가변 영역을 갖는 항체를 의미한다. 

"CDR"이란 용어는 항체 가변 서열 내의 상보성 결정 영역을 의미한다. 중쇄 및 경쇄의 가변 영역 각각에는 3개 

의 CDR이 있으며, 가변 영역 각각에 대해 CDR1, CDR2 및 CDR3으로서 명명된다. "CDR 세트"란 용어는 항원 결합 

부위의 단일 가변 영역(즉, VH 또는 VL)에서 발생하는 3개의 CDR 그룹을 의미한다. 이들 CDR의 정확한 경계선 

은 상이한 시스템에 따라 상이하게 정의되었다. 캐뱃(Kabat)[참조: Kabat et al., (1987, 1991) Sequences of 

Proteins of Immunological Interest (National Institutes of Health, Bethesda, Maryland)]에 의해 기술된 

시스템은 항체의 임의의 가변 영역에 적용될 수 있는 명확한 잔기 번호 부여 시스템을 제공할 뿐만 아니라 3개 

의 CDR을 정의하는 정확한 잔기 경계선을 제공한다. 이들 CDR은 캐뱃 CDR로서 언급될 수 있다. 초티아 등[참 

조: Chothia and Lesk(1987), J. Mol. Biol. 196: 901-917; Chothia et al., (1989) Nature 342: 877-883]은 

아미노산 서열 수준에서 다양성이 비록 크지만 캐뱃 CDR 내의 특정 하위 부위가 거의 동일한 펩타이드 골격 형 

태를 취하고 있음을 밝혔다. 이들 하위 부위는 L1, L2 및 L3로서 명명되거나 H1, H2 및 H3로서 명명되었고, 여 

기서, "L" 및 "H"는 각각 경쇄 및 중쇄 영역을 지칭한다. 이들 영역은 초티아 CDR로서 언급될 수 있으며, 이는 

캐뱃 CDR과 중복되는 경계선을 갖는다. 캐뱃 CDR과 중복하는 CDR을 정의하는 또 다른 경계선은 문헌[참조: 

Padlan et al., (1995) FASEB J. 9: 133-139; MacCallum (1996) J. Mol. Biol. 262(5): 732-745]에 기재되어 

있다. 또 다른 CDR 경계선 정의는 상기 시스템 중 하나를 엄격하게 따르지는 않을 수도 있지만, 특정 잔기 또 

는 잔기 그룹, 또는 심지어 전체 CDR이 항원 결합에 현저하게 영향을 주지 않는다는 예측 또는 실험적 발견의 

견지에서 이들이 비록 단축되거나 연장될 수 있을지라도 캐뱃 CDR과 중복될 것이다. 본원에 사용된 방법은 상 

기 시스템 중 어느 하나에 따라 정의된 CDR을 사용할 수 있지만, 특정 양태는 캐뱃 또는 초티아에 의해 정의된 

CDR을 사용한다. 


"캐뱃 번호 부여", "캐뱃 정의" 및 "캐뱃 표지"란 용어는 본원에서 상호교환적으로 사용된다. 이러한 용어는 

- 23 -

[0077] 

[0078] 

[0079] 

[0080] 

[0081] 

[0082] 

[0083] 

[0084] 

[0085] 

[0086] 

[0087] 

[0088] 

[0089] 

[0090] 

[0091] 

[0092] 

[0093] 

[0094] 

[0095] 

[0096] 

[0097] 

[0098] 

[0099] 

[0100] 

항체 또는 이의 항원 결합 부분의 중쇄 및 경쇄 가변 영역에서 다른 아미노산 잔기보다 더욱 가변적인(즉, 초가 

변적인) 아미노산 잔기의 번호 부여 시스템을 의미한다[참조: Kabat et al., (1971) Ann. NY Acad. Sci. 190: 

382-391; Kabat et al., (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. 

Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242]. 중쇄 가변 영역의 경우, 초가변 

영역은 CDR1에서 아미노산 31-35번 위치, CDR2에서 아미노산 50-65번 위치 및 CDR3에서 아미노산 95-102번 위치 

의 범위이다. 경쇄 가변 영역의 경우, 초가변 영역은 CDR1에서 아미노산 24-34번 위치, CDR2에서 아미노산 50- 

56번 위치 및 CDR3에서 아미노산 89-97번 위치의 범위이다. 

지난 20년 동안 가변 중쇄 및 경쇄 영역의 아미노산 서열에 대한 광범위한 공개용 데이터베이스의 성장 및 분석 

으로, 가변 영역 서열 내의 골격 영역(FR)과 CDR 서열 사이의 전형적인 경계선이 이해되었고, 이로 인해 당업자 

는 캐뱃 번호 부여, 쵸티아 번호 부여 또는 다른 시스템에 따라 CDR을 정확히 결정할 수 있게 되었다[참조: 

Martin, In Kontermann and Dubel, eds., Antibody Engineering (Springer-Verlag, Berlin, 2001), chapter 

31, pages 432-433]. 가변 중쇄 (VH) 및 경쇄 (VL) 영역의 아미노산 서열 내에서 캐뱃 CDR의 아미노산 서열을 

결정하는 유용한 방법은 아래에 제시된다. 

CDR-L1 아미노산 서열의 동정: 

VL 영역의 아미노 말단으로부터 약 24개 아미노산 잔기로 출발하고; 

CDR-L1 서열 이전의 잔기는 항상 시스테인(C)이며; 

CDR-L1 서열 이후의 잔기는 항상 트립토판(W) 잔기이고, 전형적으로는 Trp-Tyr-Gln(W-Y-Q)이지만, 추가로 Trp- 

Leu-Gln(W-L-Q), Trp-Phe-Gln(W-F-Q) 및 Trp-Tyr-Leu(W-Y-L)이며; 

길이는 전형적으로 10 내지 17개의 아미노산 잔기이다. 


CDR-L1의 말단 이후에 항상 16개 잔기로 출발하고: 

CDR-L2 서열 이전의 잔기는 일반적으로 Ile-Tyr(I-Y)이지만, 추가로 Val-Tyr(V-Y), Ile-Lys(I-K) 및 Ile- 

Phe(I-F)이며; 

길이는 항상 7개의 아미노산 잔기이다. 


CDR-L2의 말단 이후에 항상 33개의 아미노산으로 출발하고; 

CDR-L3 아미노산 서열 이전의 잔기는 항상 시스테인(C)이며; 

CDR-L3 아미노산 서열 이후의 잔기는 항상 Phe-Gly-X-Gly(F-G-X-G)(서열번호 6)이고, 여기서, X는 임의의 아미 

노산이며; 


CDR-H1 아미노산 서열의 동정: 

VH 영역의 아미노 말단으로부터 약 31개 아미노산 잔기로 및 시스테인(C) 이후에 항상 9개의 잔기로 출발하고; 

CDR-H1 서열 이전의 잔기는 항상 Cys-X-X-X-X-X-X-X-X(서열번호 7)이고, 여기서, X는 임의의 아미노산이며; 

CDR-H1 서열 이후의 잔기는 Trp(W)이고, 전형적으로는 Trp-Val(W-V)이지만, 추가로 Trp-Ile(W-I) 및 Trp- 

Ala(W-A)이고; 

길이는 전형적으로 5-7개의 아미노산 잔기이다. 


CDR-H1의 말단 이후에 항상 15개의 아미노산 잔기로 출발하고; 

CDR-H2 서열 이전에 잔기는 전형적으로 Leu-Glu-Trp-Ile-Gly(L-E-W-I-G)(서열번호 8)이지만, 추가로 다른 변이 

도 가능하며; 


CDR-H2 서열 이후에 잔기는 

- 24 -

[0101] 

[0102] 

[0103] 

[0104] 

[0105] 

[0106] 

[0107] 

[0108] 

[0109] 

[0110] 

[0111] 

Lys/Arg-Leu/Ile/Val/Phe/Thr/Ala-Thr/Ser/Ile/Ala(K/R-L/I/V/F/T/A-T/S/I/A)이고; 

길이는 전형적으로 16 내지 19개의 아미노산 잔기이다. 


CDR-H2의 말단 이후에 항상 33개의 아미노산 잔기로 및 시스테인(C) 이후에 항상 3개의 잔기로 출발하고; 

CDR-H3 서열 이전의 잔기는 항상 Cys-X-X(C-X-X)이고, 여기서, X는 임의의 아미노산이며, 전형적으로는 Cys- 

Als-Arg(C-A-R)이고; 

CDR-H3 서열 이후의 잔기는 항상 Trp-Gly-X-Gly(W-G-X-G)(서열번호 9)이며, 여기서, X는 임의의 아미노산이고; 


"수용체" 및 "수용체 항체"란 용어는 하나 이상의 골격 영역의 아미노산 서열 중 80% 이상, 85% 이상, 90% 

이상, 95% 이상, 98% 이상 또는 100%를 제공하거나 암호화하는 항체 또는 핵산 서열을 의미한다. 일부 양태에 

서, "수용체"란 용어는 불변 영역(들)을 제공하거나 암호화하는 항체 아미노산 또는 핵산 서열을 의미한다. 또 

다른 양태에서, "수용체"란 용어는 하나 이상의 골격 영역 및 불변 영역(들)을 제공하거나 암호화하는 항체 아 

미노산 또는 핵산 서열을 의미한다. 특정 양태에서, "수용체"란 용어는 하나 이상의 골격 영역의 아미노산 서 

열 중 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 98% 이상 또는 100%를 제공하거나 암호화하는 사람 항체 아미 

노산 또는 핵산 서열을 의미한다. 이러한 양태에 따라, 수용체는 사람 항체의 하나 이상의 특정 위치에서 생기 

지 않는 1개 이상, 2개 이상, 3개 이상, 4개 이상, 5개 이상 또는 10개 이상의 아미노산 잔기를 함유할 수 

있다. 수용체 골격 영역 및/또는 수용체 불변 영역(들)은, 예를 들면, 생식계열 항체 유전자, 성숙 항체 유전 

자 또는 기능성 항체(예를 들면, 당업계에 익히 공지된 항체, 개발 중인 항체 또는 시판중인 항체)로부터 유래 

되거나 수득될 수 있다. 

"정준(canonical)" 잔기란 용어는 초티아 등[참조: Chothia et al., (1987) J. Mol. Biol. 196: 901-917; 

Chothia et al., (1992) J.Mol.Biol. 227: 799]에 의해 정의된 바와 같은 특정 정준 CDR 구조를 정의하는 CDR 

또는 골격에서의 잔기를 의미한다. 초티아 등에 따르면, 많은 항체의 CDR의 중요 부위는 아미노산 서열 수준에 

서 다양성이 비록 크지만 거의 동일한 펩타이드 골격 형태를 갖는다. 각각의 정준 구조는 루프를 형성하는 아 

미노산 잔기의 인접 분절에 대해 한 세트의 펩타이드 골격 비틀림 각을 주로 규정한다. 

"공여체" 및 "공여체 항체"란 용어는 하나 이상의 CDR을 제공하는 항체를 의미한다. 한 양태에서, 공여체 항체 

는 골격 영역이 수득되거나 유래되는 항체와 상이한 종으로부터 유래하는 항체이다. 사람화된 항체의 

맥락에서, "공여체 항체"란 용어는 하나 이상의 CDR을 제공하는 비-사람 항체를 의미한다. 

"골격" 또는 "골격 서열"이란 용어는 CDR을 제외한 가변 영역의 나머지 서열을 의미한다. CDR 서열의 정확한 

정의는 상이한 시스템에 의해 결정될 수 있기 때문에, 이에 따라 골격 서열의 의미는 상이하게 해석된다. 6개 

의 CDR(경쇄의 CDR-L1, CDR-L2 및 CDR-L3 및 중쇄의 CDR-H1, CDR-H2 및 CDR-H3)은 또한 경쇄 및 중쇄 상의 골 

격 영역을 각 쇄 상에 4개의 하위 영역(FR1, FR2, FR3 및 FR4)으로 나누고, 여기서 CDR1은 FR1과 FR2 사이에 

위치하고, CDR2는 FR2와 FR3 사이에 위치하고 CDR3은 FR3과 FR4 사이에 위치한다. FR1, FR2, FR3 또는 FR4로 

서 특정 하위 영역으로 구체화하지 않고, 달리 언급된 골격 영역은 단일의 천연 발생 면역글로불린 쇄의 가변 

영역 내의 조합 FR을 나타낸다. FR은 4개의 하위 영역 중 하나를 나타내며, FR들은 골격 영역을 구성하는 4개 

의 하위 영역 중 2개 이상을 나타낸다. 

사람 중쇄 및 경쇄 수용체 서열은 당업계에 공지되어 있다. 본 발명의 한 양태에서, 사람 중쇄 및 경쇄 수용체 

서열은 표 3 및 표 4에 기재된 서열 중에서 선택된다. 

- 25 - 



[0113] 

[0114] 

[0115] 

[0116] 

표 3 

표 4 

"생식계열 항체 유전자" 또는 "유전자 단편"이란 용어는 특정 면역글로불린의 발현을 위해 유전자 재배열 및 돌 

연변이를 유발하는 성숙 과정을 거치지 않는 비-림프성 세포에 의해 암호화된 면역글로불린 서열을 의미한다[예 

를 들어, 참조: Shapiro et al., (2002) Crit. Rev. Immunol. 22(3): 183-200; Marchalonis et al., (2001) 

Adv. Exp. Med. Biol. 484: 13-30]. 본 발명의 각종 양태에 의해 제공되는 이점 중 하나는 생식계열 항체 유 

전자가 성숙 항체 유전자보다 종에서 개체의 필수 아미노산 서열 구조 특징을 보존할 가능성이 높고, 따라서 상 

기 종에서 치료학적으로 사용될 때 이물원으로서 인지될 가능성이 적다는 인식으로부터 유래한다. 

"주요(key)" 잔기란 용어는 항체, 특히 사람화된 항체의 결합 특이성 및/또는 친화성에 보다 더 영향을 미치는 

가변 영역 내의 특정 잔기를 의미한다. 주요 잔기에는 다음 중 하나 이상이 포함되지만, 이에 한정되는 것은 

아니다: CDR에 인접한 잔기, 잠재적 글리코실화 부위(N- 또는 O-글리코실화 부위일 수 있음), 희귀 잔기, 항원 

과 상호작용할 수 있는 잔기, CDR과 상호작용할 수 있는 잔기, 정준 잔기, 중쇄 가변 영역과 경쇄 가변 영역 사 

이의 접촉 잔기, 버니어 구역 내의 잔기, 및 가변 중쇄 CDR1의 초티아 정의와 제1 중쇄 골격의 캐뱃 정의 간에 

중첩하는 영역 내의 잔기. 


"사람화된 항체"란 용어는 사람을 제외한 종(예를 들면, 마우스)으로부터 유래하는 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서 

열을 포함하지만 VH 및/또는 VL 서열의 적어도 일부가 더욱 "사람과 유사한", 즉 사람 생식계열 가변 서열과 더 

욱 유사한 서열로 변형된 항체를 의미한다. 사람화된 항체의 한 유형은 비-사람 CDR 서열이 사람 VH 및 VL 서 

열에 도입되어 상응하는 비-사람 골격(FR) 서열을 대체하는 CDR 이식된 항체이다. 예를 들면, "사람화된 항 

체"는 목적하는 항원과 면역특이적으로 결합하고 실질적으로 사람 항체의 아미노산 서열을 갖는 골격(FR) 영역 

및 실질적으로 비-사람 항체의 아미노산 서열을 갖는 상보성 결정 영역(CDR)을 포함하는 항체, 또는 이의 변이 

체, 유도체, 유사체 또는 단편이다. CDR의 맥락에서 "실질적으로"란 용어는 비-사람 항체 CDR의 아미노산 서열 

과 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 95% 이상, 98% 이상 또는 99% 이상 동일한 아미노산 서열을 갖는 CDR을 의미 

한다. 사람화된 항체는 1개 이상, 전형적으로 2개 이상의 가변 도메인(Fab, Fab', F(ab')2, FabC, Fv)을 실질 

- 26 -

[0117] 

[0118] 


[0120] 




적으로 전부 포함하며, 여기서, CDR 영역의 전부 또는 실질적으로 전부는 비-사람 면역글로불린(즉, 공여체 항 

체)의 것에 상응하며, 골격 영역의 전부 또는 실질적으로 전부는 사람 면역글로불린 공통 서열의 것이다. 한 

양태에서, 사람화된 항체는 또한 면역글로불린 불변 영역(Fc)의 적어도 일부, 전형적으로 사람 면역글로불린 불 

변 영역의 적어도 일부를 포함한다. 일부 양태에서, 사람화된 항체는 적어도 중쇄의 가변 도메인뿐만 아니라 

경쇄를 모두 포함한다. 또한, 상기 항체는 중쇄의 CH1, 경첩, CH2, CH3 및 CH4 영역을 포함할 수 있다. 일부 

양태에서, 사람화된 항체는 사람화된 경쇄만을 포함한다. 일부 양태에서, 사람화된 항체는 사람화된 중쇄만을 

포함한다. 특정 양태에서, 사람화된 항체는 경쇄의 사람화된 가변 도메인 및/또는 사람화된 중쇄만을 

포함한다. 

사람화된 항체는 IgM, IgG, IgD, IgA 및 IgE를 포함한 면역글로불린의 임의의 클래스와, IgG1, IgG2, IgG3 및 

IgG4를 포함하지만 이에 한정되지 않는 임의의 이소형 중에서 선택될 수 있다. 사람화된 항체는 1개 이상의 클 

래스 또는 이소형으로부터 유래하는 서열을 포함할 수 있으며, 특정 불변 도메인은 당업계에 익히 공지된 기술 

을 사용하여 바람직한 효과기(effector) 기능을 최적화하도록 선택될 수 있다. 

사람화된 항체의 골격 및 CDR 영역은 모 서열에 정확하게 상응할 필요는 없으며, 예를 들면, 공여체 항체 CDR 

또는 공통 골격은 1개 이상의 아미노산 잔기의 치환, 삽입 및/또는 결실에 의해 돌연변이되어, 그 부위에서의 

CDR 또는 골격 잔기는 공여체 항체 또는 공통 골격에 상응하지 않을 수 있다. 그러나, 한 양태에서, 이러한 돌 

연변이는 광범위한 것이 아니다. 일반적으로, 사람화된 항체 잔기의 80% 이상, 85% 이상, 90% 이상, 및 95% 이 

상은 모 FR 및 CDR 서열에 상응할 것이다. "공통 골격"이란 용어는 공통 면역글로불린 서열 내의 골격 영역을 

의미한다. "공통 면역글로불린 서열"이란 용어는 관련된 면역글로불린 서열 계열 중에서 가장 빈번하게 나타나 

는 아미노산(또는 뉴클레오타이드)으로부터 형성된 서열을 의미한다[예를 들어, 참조: Winnaker (1987) From 

Genes to Clones(Verlagsgesellschaft, Weinheim, Germany]. 따라서, "공통 면역글로불린 서열"은 "공통 가 

변 도메인" 및/또는 "공통 불변 도메인"을 포함할 수 있다. "공통 가변 도메인"은 하나 이상의 "공통 골격 영 

역" 및/또는 하나 이상의 "공통 CDR"을 포함할 수 있다. 면역글로불린 계열 중에서, 공통 서열에서 각각의 위 

치는 계열에서 상기 위치에서 가장 빈번하게 일어나는 아미노산이 차지한다. 2개의 아미노산이 동일한 빈도로 

일어난다면, 둘 중 어느 하나가 공통 서열에 포함될 수 있다. 

"버니어" 구역이란 용어는 문헌[참조: Foote and Winter, (1992), J. Mol. Biol. 224: 487-499]에 기술된 바와 

같이 CDR 구조를 조정하고 항원에 대한 적합도를 미세조정할 수 있는 골격 잔기의 서브세트를 의미한다. 버니 

어 구역 잔기는 CDR의 기반 층을 형성하고 CDR의 구조 및 항체의 친화성에 영향을 미칠 수 있다. 

"다가 결합 단백질"이란 용어는 2개 이상의 항원 결합 부위를 포함하는 결합 단백질을 나타내기 위해 본 명세서 

에 사용되고 있다. 다가 결합 단백질은 3개 이상의 항원 결합 부위를 보유하도록 조작되며, 일반적으로 자연 

발생 항체가 아니다. "다중 특이적 결합 단백질"이란 용어는 2개 이상의 관련 또는 비관련 표적에 결합할 수 

있는 결합 단백질을 의미한다. 이중 가변 도메인(DVD) 결합 단백질은 2개 이상의 항원 결합 부위를 포함하는 

결합 단백질이며, 4가 또는 다가 결합 단백질이다. 이러한 DVD 결합 단백질은 단일 특이적, 즉 1개의 항원에 

결합할 수 있거나 다중 특이적, 즉 2개 이상의 항원에 결합할 수 있다. 2개의 중쇄 DVD 폴리펩타이드와 2개의 

경쇄 DVD 폴리펩타이드를 포함하는 DVD 결합 단백질은 DVD-Ig 분자로서 언급된다. DVD-Ig 분자의 절반은 각 

각 중쇄 DVD-Ig 폴리펩타이드, 경쇄 DVD 폴리펩타이드 및 2개의 항원 결합 부위를 포함한다. 각각의 결합 부위 

는 항원 결합 부위마다 항원 결합에 연관된 총 6개의 CDR을 갖는 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인을 포함 

한다. DVD 결합 단백질 및 DVD 결합 단백질의 제조 방법은 미국 특허 공보 제7,612,181호에 개시되어 있으며, 

이는 본원에 참조로 인용된다. 

본 발명의 한 양태는 사람 IL-1β에 결합할 수 있는 결합 단백질을 포함하는 DVD 결합 단백질에 관한 것이다. 

또 다른 양태에서, DVD 결합 단백질은 IL-1β 및 제2 표적에 결합할 수 있다. 한 양태에서, DVD 결합 단백질은 

IL-1α 및 IL-1β에 결합할 수 있다. 

"중화하는"이란 용어는 결합 단백질이 사이토킨에 특이적으로 결합할 때 사이토킨의 생물학적 활성의 중화를 의 

미한다. 한 양태에서, 중화 결합 단백질은 hIL-1β에 대한 결합이 hIL-1β의 생물학적 활성을 억제하는 중화 

항체이다. 바람직하게는, 중화 결합 단백질은 hIL-1β에 결합하여 hIL-1β의 생물학적 활성을 약 20% 이상, 약 

40% 이상, 약 60% 이상, 약 80% 이상, 약 85% 이상, 약 90% 이상, 약 95% 이상 또는 약 100% 이상 감소시킨다. 

중화 결합 단백질에 의한 hIL-1β의 생물학적 활성의 억제는 당업계에 익히 공지된 hIL-1β 생물학적 활성의 하 

나 이상의 지표인자를 측정하여 평가할 수 있다. 


"에피토프"란 용어는 면역글로불린 또는 T 세포 수용체에 특이적으로 결합할 수 있는 임의의 폴리펩타이드 결정 

- 27 -







[0130] 

인자를 포함한다. 특정 양태에서, 에피토프 결정인자는 아미노산, 당 측쇄, 포스포릴 또는 설포닐과 같은 분자 

의 화학적 활성 표면 그룹들을 포함하고, 특정 양태에서는 특이적인 3차원 구조 특징 및/또는 특이적인 하전 특 

징을 가질 수 있다. 에피토프는 항체에 의해 결합되는 항원의 영역이다. 따라서, 에피토프는 특이적 결합 파 

트너 상의 상보적 부위에 결합하는 것으로 공지된 항원 영역의 아미노산 잔기(또는 이의 단편)로 이루어진다. 

항원 단편은 1개 이상의 에피토프를 포함할 수 있다. 특정 양태에서, 항체는 단백질 및/또는 거대분자의 복합 

혼합물에서 자신의 표적 항원을 인식할 때 항원에 특이적으로 결합한다고 말한다. 항체가 교차 경쟁(하나는 다 

른 것의 결합 또는 조절 효과를 방해함)하는 경우, 항체는 "동일한 에피토프에 결합한다"고 말한다. 또한, 에 

피토프의 구조적 정의(중첩, 유사, 동일)는 유용한 정보를 제공하지만, 기능적 정의는 구조적(결합) 및 기능적 

(조절, 경쟁) 매개변수를 포함하므로 종종 보다 적절하다. 

"표면 플라스몬 공명"이란 용어는, 예를 들면, BIACOREa 시스템(Biacore International AB, GE Healthcare 

company, Uppsala, Sweden and Piscataway, New Jersey)을 사용하여 바이오센서 매트릭스 내의 단백질 농도의 

변화를 검출하여 생체특이적 상호작용을 실시간 분석할 수 있는 광학 현상을 의미한다. 추가의 상세한 설명은 

문헌[Jonsson, U., et al., (1993) Ann. Biol. Clin. 51: 19-26; Jonsson, U., et al., (1991) 

BioTtechniques 11: 620-627; Johnsson, B., et al.(1995) J. Mol. Recognit. 8: 125-131; 및 Johnnson, B., 

et al., (1991) Anal. Biochem. 198: 268-277]에 기술되어 있다. 

"Kon"이란 용어는 당업계에 공지된 바와 같이, 예를 들면, 항체/항원 복합체를 형성하기 위한 항원에 대한 결합 

단백질(예를 들면, 항체)의 결합을 나타내는 결합 속도 상수(on rate constant)를 의미한다. "Kon"은 또한 본 

원에서 상호교환적으로 사용된 용어 "결합 속도 상수" 또는 "ka"로 공지되어 있다. 상기 값은 자신의 표적 항 

원에 대한 항체의 결합 속도 또는 항체와 항원 사이의 복합체 형성의 속도를 나타내며, 하기 식으로 또한 나타 

낸다: 

항체("Ab") + 항원("Ag") → Ab-Ag. 

"Koff"란 용어는 당업계에 공지된 바와 같이, 예를 들면, 항체/항원 복합체로부터 결합 단백질(예를 들면, 항 

체)의 해리를 나타내는 해리 속도 상수(off rate constant)를 의미한다. "Koff"는 또한 본원에서 상호교환적으 

로 사용된 용어 "해리 속도 상수" 또는 "kd"로 공지되어 있다. 상기 값은 자신의 표적 항원으로부터 항체의 해 

리 속도 또는 시간에 따른 Ab-Ag 복합체의 유리 항체 및 항원으로의 분리를 나타내며, 하기 식으로 나타낸다: 

Ab + Ag ← Ab-Ag. 

본원에서 상호교환적으로 사용되는 "평형 해리 상수" 또는 "KD"란 용어는 평형시 적정 측정으로 수득된 값, 또는 

해리 속도 상수(Koff)를 결합 속도 상수(Kon)로 나누어 수득된 값을 의미한다. 결합 속도 상수, 해리 속도 상수 

및 평형 해리 상수는 항원에 대한 항체의 결합 친화성을 나타내기 위해 사용된다. 결합 및 해리 속도 상수의 

측정 방법은 당업계에 익히 공지되어 있다. 형광 기반 기술의 사용은 평형시 생리학적 완충액 중에서 샘플의 

검사 능력 및 고 민감성을 제공한다. BIACOREa(생체분자 상호작용 분석) 검정과 같은 다른 실험 방법 및 장치 

를 사용할 수 있다(예를 들면, Biacore International AB, GE Healthcare company, Uppsala, Sweden)로부터 입 

수가능한 장치). 추가로, 사피다인 인스트루먼츠(Sapidyne Instruments, Boise, Idaho)로부터 입수가능한 

KinExA 

(속도론적 배제 검정) 검정도 또한 사용할 수 있다. 


"표지된 결합 단백질"이란 용어는 결합 단백질을 확인하기 위해 제공하는 혼입된 표지를 갖는 단백질을 의미한 

다. 한 양태에서, 표지는 검출가능한 마커, 예를 들면, 방사성 표지된 아미노산의 혼입 또는, 표지된 아비딘 

(예를 들면, 광학적 또는 비색계적 방법으로 검출할 수 있는 효소 활성 또는 형광성 마커를 함유하는 스트렙타 

비딘)에 의해 검출될 수 있는 비오티닐 잔기의 폴리펩타이드에 대한 부착을 의미한다. 폴리펩타이드에 대한 표 

지의 예에는 다음이 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다: 방사성동위원소 또는 방사성핵종(예를 들면, 3 

H, 

14 

C, 35 

S, 90 

Y, 99 

Tc, 111 


I, 131 

I, 177 

Lu, 166 

Ho 및 153 

Sm), 형광 표지(예를 들면, FITC, 로다민, 란타나이드 

인), 효소 표지(예를 들면, 서양고추냉이 퍼옥시다제, 루시퍼라제, 알칼리성 포스파타제), 화학발광성 마커, 비 

오티닐 그룹, 2차 리포터(예를 들면, 류신 지퍼 쌍 서열(leucine zipper pair sequence), 2차 항체에 대한 결 

합 부위, 금속 결합 도메인, 에피토프 태그)에 의해 인식된 소정의 폴리펩타이드 에피토프, 및 자성 제제(예를 

- 28 -

[0131] 

[0132] 

[0133] 

[0134] 

[0135] 

[0136] 

들면, 가돌리늄 킬레이트). 

"항체 접합체"란 용어는 치료제 또는 세포독성제와 같은 제2 화학 잔기에 화학적으로 결합된 결합 단백질, 예를 

들면, 항체를 의미한다. "제제"란 용어는 화학적 화합물, 화학적 화합물의 혼합물, 생물학적 거대분자, 또는 

생물학적 물질로부터 제조된 추출물을 나타낸다. 한 양태에서, 치료제 또는 세포독성제에는 백일해 독소, 

탁솔, 사이토칼라신 B, 그라미시딘 D, 에티디움 브로마이드, 에메틴, 미토마이신, 에토포시드, 테노포시드, 빈 

크리스틴, 빈블라스틴, 콜히친, 독소루비신, 다우노루비신, 디하이드록시 안트라신 디온, 미톡산트론, 미트라마 

이신, 악티노마이신 D, 1-데하이드로테스토스테론, 글루코코르티코이드, 프로카인, 테트라카인, 리도카인, 프로 

프라놀롤, 푸로마이신 및 이의 유사체 또는 동족체가 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 

"결정" 및 "결정화된"이란 용어는 결정의 형태로 존재하는 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 의미한다. 결정은 

무정형 고체 상태 또는 액체 결정 상태와 같은 다른 형태와 구별되는 물질의 고체 상태의 한 형태이다. 결정은 

원자, 이온, 분자(예를 들면, 항체와 같은 단백질) 또는 분자 조립체(예를 들면, 항원/항체 복합체)의 규칙적이 

고 반복적인 3차원 배열로 이루어진다. 이들 3차원 배열은 당업계에 익히 공지된 특정한 수학적 관계에 따라 

정렬된다. 결정 내에서 반복되는 기본 단위 또는 빌딩 블록은 비대칭 단위로 일컬어진다. 소정의 명확한 결정 

학적 대칭에 따르는 배열 내에서 비대칭 단위의 반복은 결정의 "단위 셀"을 제공한다. 모든 3차원 내에서 규칙 

적인 해독에 의한 단위 셀의 반복은 결정을 제공한다[참조: Giege and Ducruix, (1999) Chapter 1, In 

Crystallization of Nucleic Acids and Proteins, a Practical Approach, 2nd ed., (Ducruix and Giege, 

eds.) (Oxford University Press, New York, 1999) pp. 1-16]. 

"폴리뉴클레오타이드"란 용어는 2개 이상의 뉴클레오타이드, 즉 리보뉴클레오타이드, 데옥시뉴클레오타이드 또 

는 한가지 유형의 뉴클레오타이드의 변형된 형태의 중합체 형태를 의미한다. 상기 용어는 일본쇄 및 이본쇄 형 

태의 DNA 또는 RNA를 포함하지만, 한 양태에서는 이본쇄 DNA이다. 

"분리된 폴리뉴클레오타이드"란 용어는 천연적으로 결합되거나, 작동가능하게 결합되거나, 거대 서열의 일부로 

서 천연적으로 발생하는 폴리뉴클레오타이드의 전부 또는 일부와 결합되지 않은 폴리뉴클레오타이드(예를 들면, 

게놈, cDNA 또는 합성 기원, 또는 이들의 조합)를 의미한다. 

"벡터"란 용어는 연결되어 있는 또 다른 핵산을 수송할 수 있는 핵산 분자를 의미한다. 한가지 유형의 벡터는 

"플라스미드"이며, 이는 추가의 DNA 분절을 결합할 수 있는 환형의 이본쇄 DNA 루프를 의미한다. 또 다른 유형 

의 벡터는 바이러스 벡터이며, 여기서, 추가의 DNA 분절은 바이러스 게놈에 결합될 수 있다. 특정 벡터는 도입 

되는 숙주 세포 내에서 자가 복제할 수 있다(예를 들면, 세균의 복제 원점을 갖는 세균 벡터 및 에피솜 포유동 

물 벡터). 다른 벡터(예를 들면, 비-에피솜 포유동물 벡터)는 숙주 세포내로 도입시 숙주 세포의 게놈내로 통 

합됨으로써 숙주 게놈과 함께 복제될 수 있다. 또한, 특정 벡터는 작동가능하게 연결되어 있는 유전자의 발현 

을 유도할 수 있다. 이러한 벡터는 본원에서 "재조합 발현 벡터"(또는 간단히 "발현 벡터")로 언급된다. 일반 

적으로, 재조합 DNA 기술에서 이용하는 발현 벡터는 종종 플라스미드의 형태이다. 본 명세서에서, 

"플라스미드" 및 "벡터"는, 플라스미드가 가장 일반적으로 사용된 형태의 벡터이므로 상호교환적으로 사용될 수 

있다. 그러나, 본 발명은 동등한 기능을 제공하는 바이러스 벡터(예를 들면, 복제 결함 레트로바이러스, 아데 

노바이러스 및 아데노 관련 바이러스)와 같은 기타 형태의 발현 벡터를 포함하는 것으로 의도된다. 

"작동가능하게 결합된"이란 용어는 의도된 방식으로 기능하도록 성분을 배치하는 것을 의미한다. 암호화 서열 

에 "작동가능하게 결합된" 조절 서열은 조절 서열과 양립하는 조건하에 암호화 서열의 발현을 달성하는 방식으 

로 결합된다. "작동가능하게 결합된" 서열에는 트랜스로 작동하지만(즉, 목적하는 핵산이 아닌 상이한 핵산 분 

자상에 위치하지만) 목적하는 핵산에 대하여 조절을 발휘하는 발현 조절 서열, 및 목적하는 핵산과 동일한 핵산 

분자에 위치하지만 목적하는 핵산과 일정한 거리에 위치하는 발현 조절 서열이 포함된다. "발현 조절 서열"이 

란 용어는 이들이 결합되어 있는 암호화 서열의 발현과 가공을 수행하는데 필요한 폴리뉴클레오타이드 서열을 

의미한다. 발현 조절 서열은 적절한 전사 개시, 종결, 프로모터 및 인핸서 서열; 스플라이싱 및 폴리아데닐화 

신호와 같은 효율적인 RNA 가공 신호; 세포질 mRNA를 안정화시키는 서열; 해독 효율을 증강시키는 서열(즉, 코 

작 공통 서열); 단백질 안정성을 증강시키는 서열; 필요한 경우, 단백질 분비를 증강시키는 서열이 포함한다. 

이러한 조절 서열의 성질은 숙주 유기체에 따라 상이하며; 원핵생물인 경우, 이러한 조절 서열은 일반적으로 프 

로모터, 리보솜 결합 부위 및 전사 종결 서열을 포함하고; 진핵생물의 경우, 이러한 조절 서열은 프로모터 및 

전사 종결 서열을 포함한다. "조절 서열"이란 용어는 발현 및 가공에 필수적으로 존재하는 성분을 포함하는 것 

으로 의도되며, 또한 존재하면 유리할 수 있는 추가의 성분, 예를 들면, 리더 서열 및 융합 파트너 서열을 포함 

할 수도 있다. 

- 29 - 


[0137] 

[0138] 

[0139] 

[0140] 

[0141] 

[0142] 

[0143] 

[0144] 

[0145] 

"형질전환"은 외인성 DNA가 숙주 세포에 유입되는 임의의 과정을 의미한다. 형질전환은 외부 핵산 서열을 원핵 

또는 진핵 숙주 세포에 삽입하기 위해 당업계에 익히 공지된 각종 방법을 사용하여 천연 또는 인공 조건 하에서 

실시될 수 있다. 형질전환은 이종 핵산 서열을, 예를 들어, 원핵생물 또는 진핵생물 숙주 세포로 삽입하기 위 

한 임의의 공지된 방법에 따라 달라질 수 있다. 상기 방법은 형질전환되는 숙주 세포에 따라 선택되며, 바이러 

스 감염, 전기천공, 리포펙션(lipofection) 및 유전자총을 포함할 수 있지만 이에 한정되는 것은 아니다. 이러 

한 "형질전환된" 세포는 삽입된 DNA가 자가 복제성 플라스미드로서 또는 숙주 염색체의 일부로서 복제할 수 있 

는 안정적으로 형질전환된 세포를 포함한다. 또한, 이들 세포는 삽입된 DNA 또는 RNA를 한정된 시간 동안 일시 

적으로 발현하는 세포도 포함한다. 

"재조합 숙주 세포"(또는 간단히 "숙주 세포")란 용어는 외인성 DNA가 도입된 세포를 의미한다. 이러한 용어는 

특정 해당 세포뿐만 아니라 이러한 세포의 후손도 의미하는 것으로 의도된다. 돌연변이 또는 환경적 영향으로 

인해 후대에 특정 변형이 일어날 수 있기 때문에, 이러한 후손은 사실상 모세포와 동일하지 않을 수 있지만 본 

원에서 사용된 "숙주 세포"란 용어의 범위에는 여전히 포함된다. 한 양태에서, 숙주 세포는 임의의 생물계에서 

선택된 원핵 및 진핵 세포를 포함한다. 또 다른 양태에서, 진핵 세포는 원생생물, 진균, 식물 및 동물 세포를 

포함한다. 또 다른 양태에서, 숙주 세포는 원핵 세포주 에세리키아 콜라이; 포유동물 세포주 CHO, HEK 293 및 

COS; 곤충 세포주 Sf9; 및 진균 세포 사카로마이세스 세레비지애를 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 

표준 기술은 재조합 DNA, 올리고뉴클레오타이드 합성, 및 조직 배양 및 형질전환(예를 들면, 전기천공 및 리포 

펙션)에 사용될 수 있다. 효소 반응 및 정제 기술은 제조업자의 설명에 따라 또는 당업계에서 일반적으로 달성 

된 바와 같이 또는 본원에 기재된 바와 같이 수행될 수 있다. 상기 기술 및 방법은 일반적으로 당업계에 익히 

공지되고 본 명세서 전체에서 인용되고 논의된 각종 일반 및 특정 문헌에 기재된 바와 같은 통상의 방법에 따라 

수행될 수 있다[참조: Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2d ed. (Cold Spring 

Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York 1989]. 

"유전자 이식 유기체"란 용어는 전이유전자를 함유하는 세포를 갖는 유기체를 의미하며, 상기 유기체(또는 유기 

체의 조상)에 도입된 전이유전자는 유기체에서 자연적으로 발현되지 않는 폴리펩타이드를 발현한다. "전이유전 

자"는, 유전자 이식 유기체가 발달하면서 하나 이상의 세포 유형 또는 유전자 이식 유기체의 조직에서 암호화된 

유전자 생성물의 발현을 유도하는 세포의 게놈 내로 안정하고 작동가능하게 통합된 DNA 작제물이다. 

"조정하다" 및 "조절하다"는 상호교환적으로 사용되며, 목적하는 분자의 활성(예를 들면, hIL-1β의 생물학적 

활성)에서의 변화 또는 변경을 의미한다. 조절은 목적하는 분자의 특정 활성 또는 기능의 크기에서의 증가 또 

는 감소일 수 있다. 예시적인 분자의 활성 및 기능은 결합 특성, 효소 활성, 세포 수용체 활성화 및 신호 전달 

을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 

이에 따라, "조절인자"란 용어는 목적하는 분자의 활성 또는 기능(예를 들면, hIL-1β의 생물학적 활성)을 변화 

시키거나 변경시킬 수 있는 화합물이다. 예를 들면, 조절인자는 조절인자의 부재하에서 관측된 활성 또는 기능 

의 크기와 비교하여 분자의 특정 활성 또는 기능의 크기를 증가시키거나 감소시킬 수 있다. 특정 양태에서, 조 

절인자는 분자의 하나 이상의 활성 또는 기능의 크기를 감소시키는 억제제이다. 예시적인 억제제에는 단백질, 

펩타이드, 항체, 펩티바디(peptibody), 탄수화물 또는 소형 유기 분자가 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니 

다. 펩티바디는 국제 특허 출원 공보 제WO 01/83525호에 기재되어 있다. 

본원에 사용된 용어 "작용제"는, 목적 분자와 접촉시 작용제의 부재하에서 관측된 활성 또는 기능의 크기와 비 

교하여 분자의 특정 활성 또는 기능의 크기에 있어서 증가를 유발하는, 조절인자를 말한다. 목적한 특정 작용 

제는 IL-1β 폴리펩타이드 또는 폴리펩타이드, 핵산, 탄수화물, 또는 hIL-1β에 결합하는 임의의 다른 분자를 

포함할 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. 

"길항제" 또는 "억제제"란 용어는 목적하는 분자와 접촉시 길항제의 부재하에서 관측된 활성 또는 기능의 크기 

와 비교하여 분자의 특정 활성 또는 기능의 크기를 감소시키는 조절인자를 의미한다. 길항제에는 IL-1β의 생 

물학적 활성 또는 면역학적 활성을 차단하거나 조절하는 것들이 포함된다. IL-1β의 길항제 또는 억제제에는 

단백질, 핵산, 탄수화물, 및 IL-1β에 결합하는 임의의 기타 분자가 포함될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아 

니다. 


"유효량"이란 용어는 장애 또는 이의 하나 이상의 증상의 중증도 및/또는 지속을 감소 또는 개선시키거나, 장애 

의 진행을 방지하거나, 장애의 퇴행을 유발하거나, 장애와 관련된 하나 이상의 증상의 재발, 발달, 발병 또는 

진행을 방지하거나, 장애를 검출하거나, 또 다른 치료요법(예를 들면, 예방제 또는 치료제)의 예방 또는 치료 

- 30 -

[0146] 

[0147] 

[0148] 

[0149] 

[0150] 

[0151] 

[0152] 

[0153] 

[0154] 

[0155] 

효과(들)를 증강시키거나 개선시키기에 충분한 치료요법의 양을 의미한다. 

"샘플"이란 용어는 가장 광범위한 의미로 사용된다. "생물학적 샘플"이란 용어는 생물 또는 예전의 생물로부터 

의 임의의 양의 물질을 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 이러한 생물에는, 사람, 마우스, 래트, 원숭 

이, 개, 토끼 및 기타 동물이 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 이러한 물질에는 혈액, 혈청, 소변, 윤 

활액, 세포, 기관, 조직, 골수, 림프절 및 비장이 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 

I. 사람 IL-1α에 결합하는 항체 

본 발명의 한 양태는 IL-1β에 결합하고, 친화성이 높고, 해리 속도가 느리고, 중화능이 높은 분리된 단클론 항 

체 또는 이의 항원 결합 부분을 제공한다. 본 발명의 제2 양태는 IL-1β에 결합하는 키메라 항체를 제공한다. 

본 발명의 제3 양태는 IL-1β에 결합하는 CDR 이식된 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 제공한다. 본 발명의 

제4 양태는 IL-1β에 결합하는 사람화된 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 제공한다. 한 양태에서, 상기 항체 

또는 이의 부분은 분리된 항체이다. 한 양태에서, 본 발명의 항체는 중화성 사람 항-IL-1β 항체이다. 

A. 항-IL-1β 항체의 제조방법 

본 발명의 항체는 당업계에 공지된 다수의 기술 중 임의의 기술로 제조될 수 있다. 

1. 하이브리도마 기술을 사용한 항-IL-1β 단클론 항체 

단클론 항체는 하이브리도마, 재조합 및 파지 디스플레이 기술 또는 이의 조합의 사용을 포함한 당업계에 공지 

된 각종 기술을 사용하여 제조될 수 있다. 예를 들면, 단클론 항체는 당업계에 공지되고, 예를 들면, 문헌[참 

조: Harlow and Lane, Antibodies: A Laboratory Manual, 2d ed., (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 

Cold Spring Harbor, 1988); Hammerling et al., eds., "Monoclonal Antibodies and T-Cell Hybridomas," In 

Research Monographs in Immunology, vol. 3 (J.L. Turk, General Editor) (Elsevier, N.Y., 1981) pp. 563- 

587]에 교시된 것들을 비롯한 하이브리도마 기술을 사용하여 제조될 수 있다. "단클론 항체"란 용어는 하이브 

리도마 기술을 통해 생산된 항체에 한정되는 것은 아니다. "단클론 항체"란 용어는 이를 생산하는 방법이 아니 

라, 임의의 진핵, 원핵 또는 파지 클론을 비롯한 단클론으로부터 유래되는 항체를 의미한다. 

하이브리도마 기술을 사용하여 특이적인 항체를 생산 및 선별하는 방법은 통상적이며 당업계에 익히 공지되어 

있다. 한 양태에서, 본 발명은 단클론 항체를 생산하는 방법뿐 아니라 본 발명의 항체를 분비하는 하이브리도 

마 세포를 배양하는 단계를 포함하는 방법에 의해 생산된 항체를 제공하며, 상기 하이브리도마는 본 발명의 항 

원으로 면역화된 마우스에서 분리한 비장세포를 골수종 세포와 융합시킨 후, 본 발명의 폴리펩타이드에 결합할 

수 있는 항체를 분비하는 하이브리도마 클론을 위해 상기 융합으로부터 생성된 하이브리도마를 선별하여 생산된 

다. 간략히 설명하면, 마우스를 Il-1β 항원으로 면역화할 수 있다. 특정 양태에서, 면역 반응을 자극하기 위 

해 보조제(adjuvant)와 함께 IL-1α 항원을 투여한다. 이러한 보조제에는 완전 또는 불완전 프로인트 보조제, 

RIBI(뮤라밀 디펩타이드) 또는 ISCOM(면역자극 복합체)이 포함된다. 이러한 보조제는 폴리펩타이드를 국소 침 

착물에 봉쇄시켜 신속한 분산으로부터 폴리펩타이드를 보호할 수 있거나, 대식세포 및 면역계의 기타 성분에 대 

해 화학주성인 인자를 분비하도록 숙주를 자극하는 물질을 함유할 수 있다. 한 양태에서, 폴리펩타이드가 투여 

되는 경우, 면역화 계획은 수주 동안에 걸쳐서 폴리펩타이드의 2회 이상의 투여를 포함할 것이다. 

IL-1β 항원으로 동물을 면역화한 후, 상기 동물로부터 항체 및/또는 항체 생산 세포를 수득할 수 있다. 상기 

동물을 방혈하거나 희생시켜 상기 동물로부터 항-IL-1β 항체 함유 혈청을 수득한다. 상기 혈청을 상기 동물로 

부터 수득된 그대로 사용할 수 있거나, 상기 혈청으로부터 면역글로불린 분획을 수득할 수도 있거나, 상기 혈청 

으로부터 항-IL-1β 항체를 정제할 수 있다. 이러한 방식으로 수득한 혈청 또는 면역글로불린은 다클론성이고, 

따라서 불균일한 다수의 성질을 보유한다. 


면역반응이 검출되면, 예를 들면, 항원 IL-1β에 특이적인 항체가 마우스 혈청에서 검출되면, 마우스 비장을 수 

확하여 비장세포를 분리한다. 그 다음, 익히 공지된 기술로 비장세포를 임의의 적당한 골수종 세포, 예를 

들면, ATCC에서 입수가능한 세포주 SP20으로부터의 세포와 융합시킨다. 하이브리도마를 선택하고 한계 희석법 

으로 클로닝한다. 그 다음, IL-1β에 결합할 수 있는 항체를 분비하는 세포에 대해 당업계에 공지된 방법으로 

- 31 -

[0156] 

[0157] 

[0158] 

[0159] 

[0160] 

[0161] 

[0162] 

[0163] 

하이브리도마 클론을 분석한다. 양성 하이브리도마 클론으로 마우스를 면역화하여 일반적으로 고수준의 항체를 

함유하는 복수액을 생산할 수 있다. 

또 다른 양태에서, 항체 생산성 무한증식된 하이브리도마를 면역화된 동물로부터 제조할 수 있다. 면역화 후, 

동물을 희생시키고 당업계에 익히 공지된 바와 같이 무한증식된 골수종 세포와 비장 B 세포를 융합시킨다[참조: 

Harlow and Lane의 상기 문헌). 특정 양태에서, 골수종 세포는 면역글로불린 폴리펩타이드를 분비하지 않는다 

(비분비성 세포주). 융합 및 항생제 선택 후, IL-1β, 또는 이의 부분 또는 IL-1β 발현 세포를 사용하여 하이 

브리도마를 선별한다. 특정 양태에서, 효소 결합 면역분석법(ELISA) 또는 방사선면역분석(RIA)을 사용하여 초 

기 선별을 수행한다. ELISA 선별의 예는 국제 특허 출원 공보 제WO 00/37504호에 제시되어 있다. 

항-IL-1β 항체 생산성 하이브리도마를 선택하고, 클로닝하고, 하기에 추가로 논의된 바와 같이 왕성한 하이브 

리도마 성장, 높은 항체 생산 및 바람직한 항체 특성을 포함한 바람직한 특성을 위해 추가로 선별한다. 동계 

동물, 면역계 결핍 동물, 예를 들면, 누드 마우스에서 생체내에서 또는 시험관내 세포 배양에서 하이브리도마를 

배양 및 증대시킬 수 있다. 하이브리도마를 선택, 클로닝 및 증대시키는 방법은 당업자에게 익히 공지되어 있 

다. 

한 양태에서, 하이브리도마는 마우스 하이브리도마이다. 또 다른 바람직한 양태에서, 하이브리도마를 래트, 

양, 돼지, 염소, 소 또는 말과 같은 비-사람 또는 비-마우스 종에서 생산한다. 또 다른 양태에서, 하이브리도 

마는 사람 하이브리도마이고, 사람 비분비성 골수종을 항-IL-1β 항체 발현 사람 세포와 융합시킨다. 

특정 에피토프를 인식하는 항체 단편을 공지의 기술로 수득할 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 Fab 및 F(ab')2 

단편을 파파인(Fab 단편을 생산함) 또는 펩신(F(ab')2 단편을 생산함)과 같은 효소를 사용한 면역글로불린 분자 

의 가단백분해적 절단에 의해 생산될 수 있다. F(ab')2 단편은 가변 영역, 경쇄 불변 영역 및 중쇄 CH1 도메인 

을 함유한다. 

2. SLAM을 사용한 항-IL-1β 단클론 항체 

본 발명의 또 다른 양태에서, 재조합 항체는 미국 특허 공보 제5,627,052호, 국제 특허 출원 공보 제WO 

92/02551호 및 문헌[참조: Babcook, et al., (1996) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93:7843-7848]에 기재된 바와 

같이, 선택된 림프구 항체 방법(SLAM)으로서 당업계에 언급된 절차를 사용하여 분리된 단일 림프구로부터 생산 

된다. 본 방법에서, 목적하는 항체를 분비하는 단세포, 예를 들면, 면역화된 동물로부터 유래된 림프구는 항원 

특이적인 용혈 플라크 검정법을 사용하여 선별되는데, 이러한 검정법에서는 비오틴과 같은 링커를 사용하여 항 

원 IL-1β 또는 이의 단편을 양의 적혈구 세포에 커플링시킨 뒤 IL-1β에 대한 특이성이 있는 항체를 분비하는 

단세포를 확인하는데 사용한다. 목적하는 항체 분비 세포를 확인한 후, 역전사효소 PCR에 의해 상기 세포로부 

터 중쇄 및 경쇄 가변 영역 cDNA를 수득하고, 이어서 적절한 면역글로불린 불변 영역(예를 들면, 사람 불변 영 

역)의 맥락에서 COS 또는 CHO 세포와 같은 포유동물 숙주 세포에서 이들 가변 영역을 발현시킬 수 있다. 이어 

서, 생체내 선별된 림프구로부터 유래된 증폭 면역글로불린 서열로 형질감염된 숙주 세포를, 예를 들면, 형질감 

염된 세포를 패닝(panning)하여 IL-1β에 대한 항체를 발현하는 세포를 분리함으로써 추가로 분석하고 시험관내 

선택할 수 있다. 증폭 면역글로불린 서열은 국제 특허 출원 공보 제WO 97/29131호 및 제WO 00/56772호에 기재 

된 바와 같은 시험관내 친화성 성숙화 방법에 의해 추가로 시험관내 조작될 수 있다. 

3. 유전자 이식 동물을 사용한 항-IL-1β 단클론 항체 

본 발명의 또 다른 양태에서, 항체는 사람 면역글로불린 유전자좌의 일부 또는 전부를 포함하는 사람을 제외한 

동물을 IL-1β 항원으로 면역화하여 제조된다. 한 양태에서, 사람을 제외한 동물은 사람 면역글로불린 유전자 

좌의 대형 단편을 포함하고 마우스 항체 생산이 결핍된 유전자 조작 마우스 계통인 XENOMOUSE 


유전자 이식 마우스이다[참조: Green et al., (1994) Nature Genet. 7: 13 21; 미국 특허 공보 

제5,916,771호, 제5,939,598호, 제5,985,615호, 제5,998,209호, 제6,075,181호, 제6,091,001호, 제6,114,598호 

및 제6,130,364호; 국제 특허 출원 공보 제WO 91/10741호, 제WO 94/02602호, 제WO 96/34096호, 제WO 96/33735 

호, 제WO 98/16654호, 제WO 98/24893호, 제WO 98/50433호, 제WO 99/45031호, 제WO 99/53049호, 제WO 00/09560 

- 32 -

[0164] 

[0165] 

[0166] 

[0167] 

[0168] 

호 및 제WO 00/37504호]. XENOMOUSE 

유전자 이식 마우스는 완전한 사람 항체의 성인성 사람 레퍼토리를 생성하고, 항원 특이적인 사람 단클론 항체 

를 생산한다. XENOMOUSE 

유전자 이식 마우스는 사람 중쇄 유전자좌 및 x 경쇄 유전자좌의 메가염기 크기의 생식계열 배열 YAC 단편의 

도입을 통해 사람 항체 레퍼토리의 약 80%를 포함한다[참조: Mendez et al., (1997) Nature Genet. 15: 146- 

156; Green and Jakobovits (1998) J. Exp. Med. 188: 483-495]. 

4. 재조합 항체 라이브러리를 사용한 항-IL-1β 단클론 항체 

시험관내 방법도 또한 본 발명의 항체의 제조에 사용될 수 있으며, 이러한 방법에서는 항체 라이브러리를 선별 

하여 목적하는 결합 특이성을 갖는 항체를 확인한다. 재조합 항체 라이브러리의 이러한 선별 방법은 당업계에 

익히 공지되어 있으며, 예를 들어, 문헌[참조: 미국 특허 공보 제5,223,409호, 국제 특허 출원 공보 제WO 

92/18619호, 제WO 91/17271호, 제WO 92/20791호, 제WO 92/15679호, 제WO 93/01288호, 제WO 92/01047호, 제WO 

92/09690호, 제WO 97/29131호; Fuchs et al., (1991) Bio/Technology 9: 1369-1372; Hay et al., (1992) Hum. 

Antibod. Hybridomas 3: 81-85; Huse et al., (1989) Science 246: 1275-1281; McCafferty et al., (1990) 

Nature 348: 552-554; Griffiths et al., (1993) EMBO J. 12: 725-734; Hawkins et al., (1992) J. Mol. 

Biol. 226: 889-896; Clackson et al., (1991) Nature 352: 624-628; Gram et al., (1992) Proc. Natl. Acad. 

Sci. USA 89: 3576-3580; Garrad et al., (1991) Bio/Technology 9: 1373-1377; Hoogenboom et al., (1991) 

Nucl. Acids Res. 19: 4133-4137; 및 Barbas et al., (1991) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88: 7978-7982; 및 

미국 특허 출원 공보 제2003/0186374호]에 기재된 방법을 포함한다. 

재조합 항체 라이브러리는 IL-1β 또는 IL-1β의 부분으로 면역화된 피험자로부터 유래될 수 있다. 또는, 재조 

합 항체 라이브러리는 순수 피험자, 즉 IL-1β로 면역화된 적이 없는 피험자로부터 유래될 수 있는데, 예를 들 

면, 사람 항체 라이브러리는 사람 IL-1β로 면역화된 적이 없는 사람 피험자로부터 유래될 수 있다. 본 발명의 

항체는 재조합 항체 라이브러리를 사람 IL-1β를 포함하는 펩타이드로 선별하고, 이로 인해 IL-1β를 인식하는 

항체를 선택함으로써 선택된다. 이러한 선별과 선택을 수행하는 방법은 앞 문단의 문헌에 기재된 바와 같이 당 

업계에 익히 공지되어 있다. hIL-1β에 대한 특정한 결합 친화성이 있는 본 발명의 항체, 예를 들면, 특별한 

koff 속도 상수로 사람 IL-1β로부터 해리하는 항체를 선택하기 위해, 당업계에 공지된 표면 플라스몬 공명 방법 

은 목적하는 koff 속도 상수를 갖는 항체를 선택하는데 사용될 수 있다. hIL-1β에 대한 특정한 중화 활성이 있 

는 본 발명의 항체, 예를 들면, 특정 IC50을 갖는 항체를 선택하기 위해, hIL-1β 활성의 억제를 평가하기 위해 

당업계에 공지된 표준 방법을 사용할 수 있다. 

한 양태에서, 본 발명은 사람 IL-1β에 결합하는 분리된 항체 또는 이의 항원 결합 부분에 관한 것이다. 특정 

양태에서, 항체는 중화 항체이다. 각종 양태에서, 항체는 재조합 항체 또는 단클론 항체이다. 


예를 들면, 본 발명의 항체는 또한 당업계에 공지된 각종 파지 디스플레이 방법을 사용하여 생산될 수 있다. 

파지 디스플레이 방법에서, 기능성 항체 도메인은 파지 입자를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 갖는 파 

지 입자의 표면상에 디스플레이된다. 특히, 상기 파지는 레퍼토리 또는 조합 항체 라이브러리(예를 들면, 사람 

또는 쥐)로부터 발현된 항원 결합 도메인을 디스플레이하는데 사용될 수 있다. 목적하는 항원에 결합하는 항원 

결합 도메인을 발현하는 파지는, 예를 들면, 표지된 항원이나 고체 표면 또는 비드에 결합되거나 포획된 항원을 

사용하여 선별 또는 확인될 수 있다. 이러한 방법에서 사용되는 파지는 전형적으로 파지 유전자 III 또는 유전 

자 VIII 단백질에 재조합적으로 융합된 Fab, Fv 또는 이황화 안정화된 Fv 항체 도메인을 갖는 파지로부터 발현 

된 fd 및 M13 결합 도메인을 포함하는 필라멘트형 파지이다. 본 발명의 항체를 제조하는데 사용될 수 있는 파 

지 디스플레이 방법의 예는 문헌[참조: Brinkmann et al., (1995) J. Immunol. Methods 182: 41-50; Ames et 

al., (1995) J. Immunol. Methods 184: 177-186; Kettleborough et al., (1994) Eur. J. Immunol. 24: 952- 

958; Persic et al., (1997) Gene 187: 9-18; Burton et al., (1994) Adv. Immunol. 57: 191-280; 국제출원 

제PCT/GB91/01134호, 국제 특허 출원 공보 제WO 90/02809호, 제WO 91/10737호, 제WO 92/01047호, 제WO 

92/18619호, 제WO 93/11236호, 제WO 95/15982호, 제WO 95/20401호, 및 미국 특허 공보 제5,698,426호, 제 

5,223,409호, 제5,403,484호, 제5,580,717호, 제5,427,908호, 제5,750,753호, 제5,821,047호, 제5,571,698호, 

제5,427,908호, 제5,516,637; 5,780,225호, 제5,658,727호, 제5,733,743호 및 제5,969,108호]에 기재된 것들을 

- 33 -

[0169] 

[0170] 

[0171] 

[0172] 

[0173] 

[0174] 

[0175] 

포함한다. 

파지 선택 후, 파지로부터의 항체 암호화 영역은 분리될 수 있고, 사람 항체를 비롯한 모든 항체 또는 임의의 

기타 목적하는 항원 결합 단편을 생산하는데 사용될 수 있으며, 예를 들어, 본원에 상세히 기재된 바와 같이 포 

유동물 세포, 곤충 세포, 식물 세포, 효모 및 세균을 포함한 임의의 목적하는 숙주에서 발현될 수 있다. 예를 

들면, Fab, Fab' 및 F(ab')2 단편을 재조합으로 생산하기 위한 기술도 문헌[참조: 국제 특허 출원 공보 제WO 

92/22324호; Mullinax et al., (1992) BioTechniques 12(6): 864-869; Sawai et al., (1995) Am. J. Reprod. 

Immunol. 34: 26-34; 및 Better et al., (1988) Science 240: 1041-1043]에 기재된 방법들과 같은 당업계에 공 

지된 방법을 사용하여 사용될 수 있다. 단일 쇄 Fv 및 항체를 생산하기 위해 사용할 수 있는 기술의 예는 문헌 

[참조: 미국 특허 공보 제4,946,778호 및 제5,258,498호; Huston et al., (1991) Methods Enzymol. 203: 46- 

88; Shu et al., (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 7995-7999; 및 Skerra et al., (1988) Science 240: 

1038-1041]에 기재된 방법들을 포함한다. 

파지 디스플레이에 의한 재조합 항체 라이브러리의 선별에 대한 대안으로, 대형 조합 라이브러리를 선별하기 위 

해 당업계에 공지된 기타 방법을 적용하여 본 발명의 이중 특이성 항체를 확인할 수 있다. 한가지 유형의 대체 

발현 시스템은 문헌[참조: 국제 특허 출원 공보 제WO 98/31700호; 및 Roberts and Szostak (1997) Proc. Natl. 

Acad. Sci. USA 94: 12297-12302]에 기재된 바와 같이 재조합 항체 라이브러리가 RNA 단백질 융합체로서 발현되 

는 것이다. 상기 시스템에서, 공유 융합체는 mRNA와 3' 말단에서 펩티딜 수용체 항생제인 퓨로마이신을 갖는 

합성 mRNA의 시험관내 해독에 의해 암호화하는 펩타이드 또는 단백질 사이에서 형성된다. 따라서, 특이적 mRNA 

는 암호화된 펩타이드 또는 단백질, 예를 들면, 항체 또는 이의 부분의 성질, 예를 들면, 항체 또는 이의 부분 

의 이중 특이성 항원에 대한 결합에 기초하여 mRNA의 복합 혼합물(예를 들면, 조합 라이브러리)로부터 집적될 

수 있다. 이러한 라이브러리의 선별로부터 회수된 항체 또는 이의 부분을 암호화하는 핵산 서열은 상기한 바와 

같은 재조합 수단(예를 들면, 포유동물 숙주 세포에서)에 의해 발현될 수 있고, 또한 최초 선택된 서열(들)에 

돌연변이가 도입된 mRNA 펩타이드 융합체의 추가적 라운드 선별에 의해 또는 상기된 바와 같은 재조합 항체의 

시험관내 친화성 성숙화를 위한 기타 방법에 의해 추가로 친화성 성숙화 처리될 수 있다. 

또 다른 방법에서, 본 발명의 항체는 또한 당업계에 공지된 효모 디스플레이 방법을 사용하여 제조될 수도 

있다. 효모 디스플레이 방법에서, 유전학적 방법은 항체 도메인을 효소 세포벽에 부착시키고 이들을 효모의 표 

면상에 디스플레이하는데 사용된다. 특히, 상기 효모를 사용하여 레퍼토리 또는 조합 항체 라이브러리(예를 들 

면, 사람 또는 쥐)로부터 발현되는 항원 결합 도메인을 디스플레이할 수 있다. 본 발명의 항체를 제조하는데 

사용될 수 있는 효모 디스플레이 방법의 예는 미국 특허 공보 제6,699,658호에 기재된 방법들을 포함한다. 

B. 재조합 IL-1β 항체의 생산 

본 발명의 항체는 당업계에 공지된 임의의 다수의 기술로 생산될 수 있다. 예를 들면, 숙주 세포로부터의 발현 

의 경우, 중쇄 및 경쇄를 암호화하는 발현 벡터(들)를 표준 기술에 의해 숙주 세포에 형질감염시킨다. 각종 형 

태의 "형질감염"이란 용어는 외인성 DNA를 원핵 또는 진핵 숙주 세포에 도입시키 위해 통용되는 광범위한 기술, 

예를 들면, 전기침투, 인산칼슘 침전, DEAE-덱스트란 형질감염 등을 포함하는 것으로 의도된다. 원핵 또는 진 

핵 숙주 세포에서 본 발명의 항체를 발현시킬 수 있지만, 진핵 세포에서 항체의 발현이 바람직하고, 포유동물 

숙주 세포에서 항체의 발현이 가장 바람직한데, 그 이유는 상기 진핵 세포(특히 포유동물 세포)가 원핵 세포보 

다 적당하게 폴딩되고 면역학적으로 활성인 항체를 조립하고 분비하도록 할 가능성이 더 많기 때문이다. 

본 발명의 재조합 항체를 발현시키기 위한 예시적인 포유동물 숙주 세포는 중국 햄스터 난소(CHO 세포)(예를 들 

면, 문헌[참조: Kaufman and Sharp (1982) J. Mol. Biol. 159: 601-621]에 기술된 바와 같은 DHFR 선택성 마커 

와 함께 사용된, 문헌[참조: Urlaub and Chasin, (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 4216-4220]에 기술된 

dhfr-CHO 세포를 포함함), NS0 골수종 세포, COS 세포 및 SP2 세포를 포함한다. 항체 유전자를 암호화하는 재 

조합 발현 벡터가 포유동물 숙주 세포에 도입될 때, 숙주 세포에서 항체를 발현하거나 숙주 세포가 성장하는 배 

양 배지에 항체를 분비하기에 충분한 시간 동안 상기 숙주 세포를 배양하여 항체를 생산한다. 표준 단백질 정 

제 방법을 사용하여 항체를 배양 배지로부터 회수할 수 있다. 


기능성 항체 단편, 예를 들면, Fab 단편 또는 scFv 분자를 생산하는 데에도 숙주 세포를 또한 사용할 수 있다. 

상기 절차의 변형도 본 발명의 범위에 속하는 것으로 이해될 것이다. 예를 들면, 본 발명의 항체의 경쇄 및/또 

는 중쇄 중 어느 하나의 기능성 단편을 암호화하는 DNA로 숙주 세포를 형질감염시키는 것이 바람직할 수 있다. 

- 34 -

[0176] 

[0177] 

[0178] 

[0179] 

[0180] 

[0181] 

[0182] 

[0183] 

또한, 재조합 DNA 기술도 목적하는 항원에 결합하기 위해 필요하지 않은 경쇄 및 중쇄 중 어느 하나 또는 둘 모 

두를 암호화하는 DNA의 일부 또는 전부를 제거하기 위해 사용할 수 있다. 이러한 절두형 DNA 분자로부터 발현 

된 분자도 또한 본 발명의 항체에 포함된다. 또한, 하나의 중쇄 및 하나의 경쇄가 본 발명의 항체이고 다른 중 

쇄 및 경쇄가 사람 IL-1β 이외의 다른 항원에 특이적인 이작용기성 항체도 표준 화학적 가교 방법에 의해 본 

발명의 항체를 제2 항체에 가교결합시켜 생산될 수 있다. 

본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 재조합 발현시키기 위한 특정 시스템에서, 항체 중쇄 및 항체 경쇄 

를 암호화하는 재조합 발현 벡터는 인산칼슘 매개된 형질감염에 의해 dhfr-CHO 세포 내로 도입된다. 재조합 발 

현 벡터 내에서, 항체 중쇄 및 경쇄 유전자는 각각 고수준의 유전자 전사를 유도하기 위해 CMV 인핸서/AdMLP 프 

로모터 조절 인자에 작동가능하게 결합된다. 재조합 발현 벡터는 또한 DHFR 유전자도 운반하고, 이러한 유전자 

는 메토트렉세이트 선택/증폭을 사용하여 벡터로 형질감염된 CHO 세포를 선택할 수 있게 해준다. 항체 중쇄 및 

경쇄를 발현하도록 선택된 형질감염 숙주 세포를 배양하고, 이 배양 배지로부터 완전한 항체를 회수한다. 재조 

합 발현 벡터를 제조하고, 숙주 세포를 형질감염시키고, 형질전환체를 선택하고, 숙주 세포를 배양하고, 배양 

배지로부터 항체를 회수하기 위해, 표준 분자생물학 기술을 사용한다. 또한, 본 발명은, 본 발명의 재조합 항 

체가 합성될 때까지, 본 발명의 숙주 세포를 적합한 배양 배지에서 배양함으로써 본 발명의 재조합 항체를 합성 

하는 방법을 제공한다. 또한, 상기 방법은 배양 배지로부터 재조합 항체를 분리하는 단계를 추가로 포함할 수 

도 있다. 

1. 항 IL-1β 항체 

표 5는 본 발명의 마우스 항 hIL-1β 단클론 항체(mAb)의 VH 및 VL 영역의 아미노산 서열을 제공한다. 

2. 항 IL-1β 키메라 항체 

표 5 

키메라 항체는 항체의 상이한 부위가 상이한 동물 종에서 유래하는 분자, 예를 들면, 쥐의 단클론 항체 유래의 

가변 영역과 사람의 면역글로불린 불변 영역을 갖는 항체이다. 키메라 항체의 생산 방법은 당업계에 공지되어 

있으며, 실시예에서 논의된다[예를 들어, 참조: Morrison, (1985) Science 229: 1202-1207; Oi et al., (1986) 

BioTechniques 4: 214-221; Gillies et al., (1989) J. Immunol. Methods 125: 191-202; 및 미국 특허 공보 

제5,807,715호, 제4,816,567호 및 제4,816,397호]. 또한, 적당한 생물학적 활성의 사람 항체 분자 유래의 유전 

자와 함께 적당한 항원 특이성의 마우스 항체 분자 유래의 유전자를 스플라이싱시켜 "키메라 항체"를 생산하기 

위해 개발된 기술도 사용할 수 있다[참조: Morrison et al., (1984) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81: 6851- 

6855; Neuberger et al., (1984) Nature 312: 604-608; 및 Takeda et al., (1985) Nature 314: 452-454]. 

3. 항 IL-1β CDR 이식된 항체 


본 발명의 CDR 이식된 항체는 VH 및/또는 VL의 CDR 영역 중 하나 이상이 본 발명의 쥐 항체의 CDR 서열로 대체 

된 사람 항체 유래의 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열을 포함한다. 임의의 사람 항체로부터의 골격 서열은 CDR 이 

- 35 -

[0184] 

[0185] 

[0186] 

[0187] 

[0188] 

식을 위한 주형으로서 작용할 수 있다. 그러나, 상기 골격으로의 직쇄 대체는 종종 항원에 대한 결합 친화성을 

약간 손실한다. 사람 항체가 최초의 쥐 항체와 더욱 상동성일수록, 쥐 CDR과 사람 골격의 조합이 CDR내에서 뒤 

틀림을 유발하여 친화성을 감소시킬 가능성이 보다 적어진다. 따라서, 한 양태에서, CDR을 제외하고 쥐 가변 

골격을 대체하도록 선택된 사람 가변 골격은 쥐 항체 가변 영역 골격과 약 65% 이상, 약 70% 이상, 약 75% 

이상, 약 80% 이상, 약 85% 이상, 약 90% 이상, 약 95% 이상, 약 100%의 서열 동일성을 갖는다. CDR 이식된 

항체의 생산 방법은 당업계에 공지되어 있으며, 실시예에서 이러한 CDR 이식된 항체의 사람화[참조: 유럽 특허 

공보 제EP0 239 400호, 국제 특허 출원 공보 제WO 91/09967호, 미국 특허 공보 제5,225,539호, 제5,530,101호 

및 제5,585,089호], 베니어링 또는 재표면화[참조: 유럽 특허 공보 제EP 0 592 106호 및 제EP 0 519 596호; 

Padlan, (1991) Mol. Immunol. 28(4/5):489-498; Studnicka et al., (1994) Protein Eng. 7(6): 805-814; 

Roguska et al., (1994) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91: 969-973] 및 쇄 셔플링(shuffling)[참조: 미국 특허 

공보 제5,565,352호]과 함께 상세히 기재된다. 

4. 항-IL-1β 사람화된 항체 

사람화된 항체는 사람을 제외한 종 유래의 하나 이상의 상보성 결정 영역(CDR) 및 사람 면역글로불린 분자 유래 

의 골격 영역을 갖는 항체 분자이다. 공지된 사람 Ig 서열은, 예를 들면, 참조[인터넷 주소: 

및 문헌(Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, U.S. Dept. Health (1983)]에 기 

재되어 있다. 당업계에 공지된 바와 같이, 이러한 입수된 서열을 사용하여 면역원성을 감소시키거나, 결합, 친 

화성, 결합 속도, 해리 속도, 항원항체결합력(avidity), 특이성, 반감기 또는 임의의 기타 적합한 특성을 감소, 

증진 또는 변형시킬 수 있다. 


사람 골격 영역내의 골격 잔기를 CDR 공여체 항체로부터의 상응하는 잔기로 대체하여 항원 결합을 변경, 예를 

들면, 향상시킬 수 있다. 이러한 골격 대체는 당업계에 널리 공지된 방법, 예를 들면, CDR과 골격 잔기의 상호 

작용을 모델링하고 항원 결합과 서열 비교에 중요한 골격 잔기를 확인하여 특정 위치에서 특정 골격 잔기를 확 

인하는 방법에 의해 확인된다[참조: 미국 특허 공보 제5,585,089호; 및 Riechmann et al., (1988) Nature 332: 

- 36 -

[0189] 





323-327]. 3차원 면역글로불린 모델은 일반적으로 이용가능하고, 당업자에게 익숙하다. 선택된 후보 면역글로 

불린 서열의 가능한 3차원 형태 구조를 설명하고 표시하는 컴퓨터 프로그램을 이용할 수 있다. 이러한 디스플 

레이의 연구는 후보 면역글로불린 서열의 기능에서 잔기의 역할의 분석, 즉 항원에 결합하는 후보 면역글로불린 

의 능력에 영향을 미치는 잔기의 분석을 가능하게 한다. 이러한 방식으로, 표적 항원(들)에 대한 친화성 증가 

와 같은 목적하는 항체 특성이 달성되도록 공통 및 입수 서열로부터 FR 잔기를 선택할 수 있고 공통 및 입수 서 

열로부터 조합할 수 있다. 일반적으로, CDR 잔기는 직접적이고 가장 실질적으로 항원 결합에 영향을 주는데 관 

여한다. 항체는 당업계에 공지된 각종 기술들, 그러나 이에 한정되지 않게 사용하여 사람화될 수 있다[참조: 

Jones et al., (1986) Nature 321: 522-525; Verhoeyen et al., (1988) Science 239: 1534-1536); Sims et 

al., (1993) J. Immunol. 151: 2296-2308; Chothia and Lesk (1987) J. Mol. Biol. 196: 901-917; Carter et 

al., (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89: 4285-4289; Presta et al., (1993) J. Immunol. 151: 2623- 

2632; Padlan (1991) Mol. Immunol. 28(4/5): 489-498; Studnicka et al., (1994) Protein Eng. 7(6): 805- 

814; Roguska. et al., (1994) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91: 969-973; 국제 특허 출원 공보 제WO 91/09967 

호, 제WO 99/06834호(국제출원 제PCT/US98/16280호), 제WO 97/20032호(국제출원 제PCT/US96/18978호), 제WO 

92/11272호(국제출원 제PCT/US91/09630호), 제WO 92/03461호(국제출원 제PCT/US91/05939호), 제WO 94/18219호 

(제PCT/US94/01234호), 제WO 92/01047호(제PCT/GB91/01134호), 제WO 93/06213호(국제출원 제PCT/GB92/01755 

호), 제WO 90/14443호, 제WO 90/14424호 및 제WO 90/14430호; 유럽 특허 공보 제EP 0 592 106호, 제EP 0 519 

596호 및 제EP 0239400호; 미국 특허 공보 제5,565,332호, 제5,723,323호, 제5,976,862호, 제5,824,514호, 제 

5,817,483호, 제5,814,476호, 제5,763,192호, 제5,723,323호, 제5,766,886호, 제5,714,352호, 제6,204,023호, 

제6,180,370호, 제5,693,762호, 제5,530,101호, 제5,585,089호, 제5,225,539호 및 제4,816,567호]. 

C. 항체 및 항체 생산 세포주의 생산 

한 양태에서, 본 발명의 항-IL-1β 항체는, 예를 들면, 당업계에 공지된 몇가지의 시험관내 및 생체내 검정법 

중 어느 하나에 의해 평가시, IL-1β 활성을 감소시키거나 중화시키는 높은 능력을 나타낸다. 한 양태에서, 본 

발명의 항-IL-1β 항체는 또한 IL-1β 활성을 감소시키거나 중화시키는 높은 능력을 나타낸다. 

특정 양태에서, 분리된 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 사람 IL-1β에 결합하며, 상기 항체 또는 이의 항원 

결합 부분은 표준 플라스몬 공명으로 측정시 약 0.1s -1 

이하의 koff 속도 상수로 사람 IL-1β로부터 해리하거나, 

약 1 x 10 -6 

M 이하의 IC50으로 사람 IL-1β 활성을 억제한다. 또는, 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 표면 플 

라스몬 공명으로 측정시 약 1x10 -2 

s -1 

이하의 koff 속도 상수로 사람 IL-1β로부터 해리할 수 있거나, 약 1x10 -7 

M 

이하의 IC50으로 사람 IL-1β 활성을 억제할 수 있다. 또는, 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 표면 플라스몬 

공명으로 측정시 약 1x10 -3 

s -1 


M 이하의 

IC50으로 사람 IL-1β를 억제할 수 있다. 또는, 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 표면 플라스몬 공명으로 측정 

시 약 1x10 -4 

s -1 


M 이하의 IC50으로 IL- 

1β 활성을 억제할 수 있다. 또는, 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 표면 플라스몬 공명으로 측정시 약 1x10 - 

5 

s -1 


M 이하의 IC50으로 사람 IL-1β 활 

성을 억제할 수 있다. 또는, 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 표면 플라스몬 공명으로 측정시 약 1x10 -5 

s -1 

하의 koff 속도 상수로 사람 IL-1β로부터 해리할 수 있거나, 약 1x10 -11 

M 이하의 IC50으로 사람 IL-1β 활성을 억 

제할 수 있다. 

특정 양태에서, 항체는 중쇄 불변 영역, 예를 들면, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgE, IgM 또는 IgD 불변 영 

역을 포함한다. 한 양태에서, 중쇄 불변 영역은 IgG1 중쇄 불변 영역 또는 IgG4 중쇄 불변 영역이다. 또한, 

항체는 경쇄 불변 영역, 즉 κ 경쇄 불변 영역 또는 λ 경쇄 불변 영역을 포함할 수 있다. 한 양태에서, 항체 

는 κ 경쇄 불변 영역을 포함한다. 또는, 항원 결합 부분은, 예를 들면, Fab 단편 또는 단일 쇄 Fv 단편일 수 

있다. 

항체 효과기 기능을 변경시키기 위한 Fc 부분에서 아미노산 잔기의 치환은 당업계에 공지되어 있다[참조: 미국 

- 37 - 


이







특허 공보 제5,648,260호 및 제5,624,821호]. 항체의 Fc 부분은 몇가지 중요한 효과기 기능, 예를 들면, 사이 

토킨 유도, 항체 의존성 세포 매개된 세포독성(ADCC), 식세포작용, 보체 의존성 세포독성(CDC) 및 항체와 항원- 

항체 복합체의 반감기/제거율을 매개한다. 일부 경우에는 이러한 효과기 기능이 치료 항체에 바람직하지만, 다 

른 경우에는 치료 목적에 따라 불필요하거나 심지어 유해할 수도 있다. 특정 사람 IgG 이소형, 특히 IgG1 및 

IgG3은 각각 FcγR 및 보체 C1q에 대한 결합을 통해 ADCC 및 CDC를 매개한다. 신생아 Fc 수용체(FcRn)는 항체 

의 혈행 반감기를 결정하는 중요한 성분이다. 또 다른 양태에서는, 항체의 불변 영역, 예를 들면, 항체의 Fc 

영역에서 하나 이상의 아미노산 잔기가 치환되어 항체의 효과기 기능이 변경된다. 

한 양태는 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분이 유도체화되거나 또 다른 기능성 분자(예를 들면, 또 다 

른 펩타이드 또는 단백질)에 결합된 표지된 결합 단백질을 제공한다. 예를 들면, 본 발명의 표지된 결합 단백 

질은 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 (화학적 커플링, 유전자 융합, 비공유 결합 등에 의해) 하나 

이상의 기타 분자 실체, 예를 들면, 또 다른 항체(예를 들면, 양특이적 항체 또는 디아바디), 검출성 제제, 세 

포독성제, 약제, 및/또는 또 다른 분자와 항체 또는 이의 항원 결합 부분의 결합을 매개할 수 있는 단백질이나 

펩타이드(예를 들면, 스트렙타비딘 코어 영역 또는 폴리히스티딘 태그) 등에 기능적으로 결합시켜 유도될 수 있 

다. 

본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분이 유도체화될 수 있는 유용한 검출성 제제는 형광 화합물을 

포함한다. 예시적인 검출성 형광 제제에는 플루오레세인, 플루오레세인 이소티오시아네이트, 로다민, 5-디메틸 

아민-1-나프탈렌설포닐 클로라이드, 피코에리트린 등이 포함된다. 또한, 항체는 검출성 효소, 예를 들면, 알칼 

리성 포스파타제, 서양고추냉이 퍼옥시다제, 글루코스 옥시다제 등에 의해 유도체화될 수 있다. 항체가 검출성 

효소로 유도체화될 때, 이는 검출성 반응 생성물을 생성하기 위해 효소가 사용하는 추가 시약을 첨가하여 검출 

된다. 예를 들면, 검출성 제제 서양고추냉이 퍼옥시다제가 존재할 때, 과산화수소 및 디아미노벤지딘의 첨가는 

검출가능한 착색 반응 생성물을 유도한다. 항체는 또한 비오틴으로 유도체화될 수도 있으며, 아비딘 또는 스트 

렙타비딘 결합의 간접 측정을 통해 검출된다. 

본 발명의 또 다른 양태는 결정화된 결합 단백질을 제공한다. 한 양태에서, 본 발명은 본 명세서에 개시된 모 

든 항-IL-1β 항체 및 이의 단편의 결정, 및 이러한 결정을 함유하는 제형 및 조성물에 관한 것이다. 한 양태 

에서, 결정화된 결합 단백질은 이에 대응하는 가용성 결합 단백질보다 생체내 반감기가 더 길다. 또 다른 양태 

에서, 결합 단백질은 결정화 후 생물학적 활성을 보유한다. 

본 발명의 결정화된 결합 단백질은 당업계에 공지되어 있으며, 국제 특허 출원 공보 제WO 02/72636호에 개시된 

방법에 따라 생산될 수 있다. 

본 발명의 또 다른 양태는 항체 또는 이의 항원 결합 부분이 하나 이상의 탄수화물 잔기를 포함하는 글리코실화 

된 결합 단백질을 제공한다. 신생아 생체내 단백질 생산은 해독후 변형으로 알려진 가공에 의해 추가로 처리될 

수 있다. 특히, 당(글리코실) 잔기는 글리코실화로 알려진 과정에 의해 효소적으로 첨가될 수 있다. 공유 결 

합된 올리고사카라이드 측쇄를 갖는 생성되는 단백질은 글리코실화된 단백질 또는 당단백질로서 공지되어 있다. 

단백질 글리코실화는 목적하는 단백질의 아미노산 서열뿐만 아니라, 상기 단백질이 발현되는 숙주 세포에 좌우 

된다. 상이한 유기체는 상이한 글리코실화 효소를 생산할 수 있고(예를 들면, 글리코실트랜스퍼라제 및 글리코 

시다제), 입수할 수 있는 상이한 기질(예를 들면, 뉴클레오타이드 당)을 가질 수 있다. 이러한 요인으로 인해, 

단백질 글리코실화 패턴 및 글리코실 잔기의 조성은 특정 단백질이 발현되는 숙주 시스템에 따라 상이할 수 있 

다. 본 발명에 유용한 글리코실 잔기에는 글루코스, 갈락토스, 만노스, 푸코스, n-아세틸글루코사민 및 시알산 

이 포함될 수 있지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 한 양태에서, 이러한 글리코실화된 결합 단백질은 글리코실 

화 패턴이 사람이 되도록 글리코실 잔기를 포함한다. 


상이한 단백질 글리코실화가 상이한 단백질 특성을 제공할 수 있음은 당업자에게 공지되어 있다. 예를 들면, 

효모와 같은 미생물 숙주에서 생산되고 효모 내인성 경로를 사용하여 글리코실화된 치료 단백질의 효능은 CHO 

세포주와 같은 포유동물 세포에서 발현된 동일 단백질 효능에 비해 저하될 수 있다. 이러한 당단백질은 또한 

사람에서 면역원성일 수도 있고 투여 후 생체내 반감기를 감소시킬 수도 있다. 사람 및 기타 동물에서의 특이 

적인 수용체는 특이적인 글리코실화 잔기를 인식하고 혈류로부터 단백질의 신속 제거를 촉진할 수 있다. 다른 

부작용으로, 단백질 폴딩, 가용성, 프로테아제에 대한 민감성, 트래피킹(trafficking), 수송, 구획화, 분비, 다 

른 단백질이나 인자에 의한 인식, 항원성 또는 알레르기원성에서의 변화가 포함될 수 있다. 따라서, 당업자는 

특정 조성과 글리코실화 패턴을 갖는 치료 단백질, 예를 들면, 사람 세포 또는 의도된 피험자 동물의 종 특이적 

세포에서 생산된 것과 동일하거나 적어도 유사한 글리코실화 조성 및 패턴을 갖는 치료 단백질을 선호할 수 있 

- 38 -

[0200] 

[0201] 

[0202] 

[0203] 

[0204] 

다. 

숙주 세포와 상이한 글리코실화된 단백질의 발현은 숙주 세포를 유전자 변형시켜 이종 글리코실화 효소를 발현 

시킴으로써 달성될 수 있다. 당업자는 당업계에 공지된 기술을 사용하여 사람 단백질 글리코실화를 나타내는 

항체 또는 항원 결합 부분을 생산할 수 있다. 예를 들면, 효모 균주는 비자연 발생 글리코실화 효소를 발현하 

도록 유전자 변형되어, 이 효모 균주에서 생산된 글리코실화된 단백질(당단백질)은 동물 세포, 특히 사람 세포 

에서 생산된 것과 동일한 단백질 글리코실화를 나타낸다[참조: 미국 특허 공보 제7,449,308호 및 

제7,029,872호]. 

또한, 당업자는 목적하는 단백질이 각종 글리코실화 효소를 발현하도록 유전자 조작된 숙주 세포의 라이브러리 

를 사용하여 발현되어, 이 라이브러리의 구성원 숙주 세포가 변형체 글리코실화 패턴을 갖는 목적하는 단백질을 

생산할 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 이어서, 당업자는 신규한 특정 글리코실화 패턴을 갖는 목적하는 단 

백질을 선택 및 분리할 수 있다. 한 양태에서, 특별하게 선택된 신규 글리코실화 패턴을 갖는 단백질은 생물학 

적 성질을 향상시키거나 변화시킨다. 

D. 항-IL-1β 항체의 용도 

사람 IL-1β에 결합하는 능력이 있다면, 본 발명에 따른 결합 단백질, 예를 들면, 항-IL-1β 항체 및 이의 항원 

결합 부분은 당업계에서 입수가능한 방대한 항체 기반 면역검출 시스템 중 하나를 사용하여 (예를 들면, 전혈, 

혈청, 혈장, 소변, 타액, 조직 샘플과 같은 생물학적 샘플에서) IL-1β를 검출하는데 사용될 수 있다. 이러한 

면역검출 시스템에는 면역침전, 면역블롯팅(웨스턴 블롯), 효소 결합 면역흡착 검정법(ELISA), 방사선면역 검정 

법(RIA), 조직 면역조직화학법, 표면 플라스몬 공명(SPR), 샌드위치 면역검정법, 항체 기반 친화성 방법(예를 

들면, 친화성 비드, 친화성 칼럼), 면역경쟁 검정법, 면역칩 검정법(실리콘 칩에 부착된 결합 단백질) 및 형광 

활성화 세포 분류법(FACS)이 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 일부 면역검출 시스템의 경우, 본 발명 

의 IL-1β 결합 단백질(또는 이의 결합 부분)(또는 이의 부분)은 항체 분자를 고체 기재에 부착하기 위해 당업 

계에 이용될 수 있는 방법을 사용하여 동일한 고체 기재에 부착되어, 부착된 결합 단백질은 특정 면역검출 시스 

템에서의 사용 동안 사람 IL-1β에 결합하는 능력을 보유한다. 이러한 고체 기재에는 셀룰로즈계 여과지(예를 

들면, 셀룰로즈, 니트로셀룰로즈, 셀룰로즈 아세테이트), 나일론 필터, 플라스틱 표면(예를 들면, 미세적정 플 

레이트, 항체 딥 스틱), 유리 기재(예를 들어, 필터, 비드, 슬라이드, 유리솜), 중합체 입자(예를 들면, 아가로 

즈 및 폴리아크릴아미드) 및 실리콘 칩이 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 예를 들면, 면역검출 시스 

템은 시험관내 샘플(예를 들면, 전혈, 혈청, 혈장, 조직, 소변, 타액 및 조직 생검과 같은 생물학적 샘플)에서 

IL-1β의 존재를 검출하기 위한 방법에 사용될 수 있다. 이러한 방법은 질환 또는 장애, 예를 들면, 면역 세포 

관련 장애를 진단하는데 사용될 수 있다. 상기 방법은 (i) 시험 샘플 또는 대조 샘플을 본원에 기재된 바와 같 

은 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 IL-1β 결합 부분과 접촉시키는 단계; 및 (ii) 시험 샘플 또는 대조 샘플에서 

항-IL-1β 결합 단백질(또는 이의 결합 부분)과 IL-1β 사이의 복합체의 형성을 검출하는 단계를 포함하며, 대 

조 샘플에 대한(또는 초기 시점에서 취한 또 다른 시험 샘플에서 상기 복합체의 형성에 대한) 시험 샘플에서 상 

기 복합체 형성에서의 통계학적으로 유의한 변화는 샘플에서 IL-1β의 존재를 나타낸다. 


또 다른 예로서, 생체 내에서(예를 들면, 피험자에서 생체내 이미징에서) 사람 IL-1β의 존재를 검출하기 위한 

방법이 사용될 수 있다. 상기 방법은 질환 또는 장애, 예를 들면, IL-1β 관련 장애를 진단하는데 사용될 수 

있다. 상기 방법은 (i) 상기 결합 단백질 또는 이의 IL-1β 결합 부분을 IL-1β에 결합할 수 있게 하는 조건하 

에 본원에 기재된 바와 같은 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 IL-1β 결합 부분을 시험 피험자 또는 대조 피험자 

에게 투여하는 단계; 및 (ii) 상기 결합 단백질 또는 이의 결합 부분과 IL-1β 사이의 복합체 형성을 검출하는 

단계를 포함하며, 상기 대조 피험자에 대한 또는 초기 시점에서의 시험 피험자에서의 복합체 형성에 대한 시험 

피험자에서의 상기 복합체 형성에서의 통계학적으로 유의한 변화는 IL-1β의 존재를 나타낸다. 본 발명에 따른 

샘플(예를 들면, 생물학적 샘플) 중에서의 IL-1β의 검출 방법은 샘플을 본원에 기재된 IL-1β 결합 단백질(또 

는 이의 IL-1β 결합 부분)과 접촉시키는 단계 및 IL-1β에 결합된 결합 단백질(또는 이의 결합 부분) 또는 미 

결합된 결합 단백질(또는 이의 미결합된 결합 부분)을 검출하여 샘플 중에서 IL-1β를 검출하는 단계를 포함한 

다. 결합 단백질은(또는 이의 부분)은 결합되거나 미결합된 결합 단백질(또는 이의 부분)의 검출을 용이하게 

하기 위해 검출성 물질로 직간접적으로 표지된다. 이러한 검출성 물질은 당업계에 공지되어 있으며, 그 예에는 

각종 효소, 보결분자단, 형광 물질, 발광 물질 및 방사성 물질이 포함되지만 이에 한정되는 것은 아니다. 적합 

한 효소의 예에는 서양고추냉이 퍼옥시다제, 알칼리성 포스파타제, β-갈락토시다제 또는 아세틸콜린에스테라제 

- 39 -

[0205] 

[0206] 

[0207] 

[0208] 

[0209] 

가 포함된다. 적합한 보결분자단 복합체의 예에는 스트렙타비딘/비오틴 및 아비딘/비오틴이 포함된다. 적합한 

형광 물질의 예에는 움벨리페론, 플루오레세인, 플루오레세인 이소티오시아네이트, 로다민, 디클로로트리아지닐 

아민 플루오레세인, 단실 클로라이드 또는 피코에리트린이 포함된다. 발광 물질의 예에는 루미놀이 포함된다. 

적합한 방사성 물질의 예에는 3 

H, 14 

C, 35 

S, 90 

Y, 99 

Tc, 111 


I, 131 

I, 177 

Lu, 166 

Ho, 및 153 

Sm이 포함된다. 결합 

단백질 표지화 대안으로, 검출성 물질로 표지된 재조합 사람 (rh) IL-1β 표준물질과 미표지된 IL-1β 결합 단 

백질(또는 이의 IL-1β 결합 부분)을 사용하여 경쟁 면역검정법으로 사람 IL-1β를 샘플(예를 들어, 생물학적 

유체) 중에서 검정할 수 있다. 이러한 검정에서, 샘플, 표지된 rh IL-1β 표준물질 및 IL-1β 결합 단백질을 

배합하고, 미표지된 결합 단백질에 결합된 표지된 rh IL-1β 표준물질의 양을 측정한다. 샘플 중에서 사람 IL- 

1β의 양은 IL-1β 결합 단백질에 결합된 표지된 rh IL-1β 표준물질의 양에 반비례한다. 마찬가지로, 검출성 

물질로 표지된 rh IL-1β 표준물질과 본원에 기재된 미표지된 IL-1β 결합 단백질을 사용하여 경쟁 면역검정법 

으로 사람 IL-1β를 또한 샘플 중에서 검정할 수 있다. 

한 양태에서, 본 발명에 따른 IL-1β 결합 단백질 및 이의 IL-1β 결합 부분은 시험관내 및 생체내 모두에서 

IL-1β 활성을 중화시킬 수 있다. 따라서, 본 발명의 이러한 결합 단백질 및 이의 IL-1β 결합 부분은, 예를 

들면, IL-1β 함유 세포 배양물에서, 사람 피험자에서 또는 본 발명의 결합 단백질이 교차반응하는 IL-1β를 갖 

는 기타 포유동물 피험자에서 IL-1β 활성을 억제하는데 사용될 수 있다. 한 양태에서, 본 발명은 IL-1β 활성 

이 억제되도록 IL-1β를 본 발명의 결합 단백질 또는 이의 결합 부분과 접촉시키는 단계를 포함하는, IL-1β 활 

성을 억제하는 방법을 제공한다. 예를 들면, IL-1β를 함유하는 세포 배양물에서 또는 IL-1β를 함유하는 것으 

로 의심되는 세포 배양물에서, 본 발명의 결합 단백질(또는 이의 결합 부분)을 배양물 중의 IL-1β 활성을 억제 

하기 위해 배양 배지에 첨가할 수 있다. 

또 다른 양태에서, 본 발명은 피험자, 유리하게는 IL-1β 활성이 해를 끼치는 질환 또는 장애를 앓고 있는 피험 

자에서 IL-1β 활성을 감소시키기 위한 방법을 제공한다. 본 발명은 상기 질환 또는 장애를 앓고 있는 피험자 

에서 IL-1β 활성을 감소시키기 위한 방법을 제공하는 것으로, 상기 방법은 상기 피험자에서의 IL-1β 활성이 

감소하도록 상기 피험자에게 본 발명의 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분을 투여함을 포함한다. 한 양태 

에서, 상기 IL-1β는 사람 IL-1β이며, 상기 피험자는 사람 피험자이다. 또는, 상기 피험자는 본 발명의 결합 

단백질이 결합할 수 있는 IL-1β를 발현하는 포유동물일 수 있다. 또한, 상기 피험자는 (예를 들면, IL-1β의 

투여에 의해 또는 IL-1β 전이유전자의 발현에 의해) IL-1β가 도입된 포유동물일 수 있다. 본 발명의 결합 단 

백질은 치료 목적으로 사람 피험자에게 투여될 수 있다. 더욱이, 본 발명의 결합 단백질은 수의학적 목적으로 

또는 사람 질환의 동물 모델로서 상기 결합 단백질이 결합할 수 있는 IL-1β를 발현하는 사람을 제외한 포유동 

물에게 투여될 수 있다. 후자와 관련하여, 이러한 동물 모델은 본 발명의 항체의 치료 효능(예를 들면, 투여량 

및 투여 시간 과정의 시험)을 평가하는데 유용할 수 있다. 

"IL-1β 활성이 해를 끼치는 장애"란 용어는 장애를 앓는 피험자에서 IL-1β의 존재가 장애의 병태생리에 책임 

이 있거나 장애의 악화에 기여하는 인자인 것으로 밝혀져 있거나 의심되는 질환 및 기타 장애를 포함한다. 따 

라서, IL-1β 활성이 해를 끼치는 장애는 IL-1β 활성의 감소가 장애의 증상 및/또는 진행을 완화시킬 것으로 

예상되는 장애이다. 이러한 장애는, 예를 들면, 장애를 앓는 피험자의 생물학적 유체 중의 IL-1β 농도 증가 

(예를 들면, 피험자의 혈청, 혈장, 윤활액 등 중의 IL-1β 농도 증가)에 의해 입증될 수 있고, 이러한 농도 증 

가는, 예를 들면, 상기한 바와 같은 항-IL-1β 결합 단백질을 사용하여 검출될 수 있다. 본 발명의 결합 단백 

질로 치료될 수 있는 장애의 예에는 본 발명의 결합 단백질의 약제학적 조성물에 관한 하기 섹션에서 논의되는 

장애가 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 

E. 약제학적 조성물 


또한, 본 발명은 본 발명의 결합 단백질(예를 들면, 항체 또는 이의 항원 결합 부분) 및 약제학적으로 허용되는 

담체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 본 발명의 결합 단백질을 포함하는 약제학적 조성물은 장애를 

진단, 검출 또는 모니터링하거나, 장애 또는 이의 하나 이상의 증상을 예방, 치료, 억제, 관리 또는 호전시키고 

/시키거나, 연구에 사용하기 위한 것이고, 이들에 한정되지 않는다. 특정 양태에서, 조성물은 본 발명의 하나 

이상의 결합 단백질을 포함한다. 또 다른 양태에서, 약제학적 조성물은 본 발명의 하나 이상의 결합 단백질 및 

IL-1β 활성이 해를 끼치는 장애를 치료하기 위한 본 발명의 결합 단백질 이외에 하나 이상의 예방제 또는 치료 

제를 포함한다. 특히, 상기 예방제 또는 치료제는 장애 또는 이의 하나 이상의 증상을 예방, 치료, 관리 또는 

호전시키기는데 유용한 것으로 공지되어 있거나, 이에 사용되었거나, 현재 사용중이다. 이러한 양태에 따르면, 

- 40 -

[0210] 

[0211] 


[0213] 

상기 조성물은 담체, 희석제 또는 부형제를 추가로 포함할 수 있다. 

본 발명의 결합 단백질은 피험자에 투여하기에 적합한 약제학적 조성물에 혼입될 수 있다. 일반적으로, 약제학 

적 조성물은 본 발명의 결합 단백질(예를 들면, 항체 또는 이의 항원 결합 부분) 및 약제학적으로 허용되는 담 

체를 포함한다. "약제학적으로 허용되는 담체"란 용어에는 생리학적으로 혼화성인 임의의 모든 용매, 분산 매 

질, 피복제, 항균제 및 항진균제, 등장제 및 흡수 지연제 등이 포함된다. 약제학적으로 허용되는 담체의 예에 

는 물, 식염수, 인산염 완충 식염수, 덱스트로스, 글리세롤, 에탄올 등 및 이들의 배합물 중의 하나 이상이 포 

함된다. 상기 조성물에 등장제, 예를 들면, 당, 폴리알콜, 예를 들면, 만니톨 또는 소르비톨, 또는 염화나트륨 

을 포함하는 것이 바람직할 수 있다. 약제학적으로 허용되는 담체는 추가로 항체 또는 이의 항원 결합 부분의 

수명이나 효과를 증강시키는 보조 물질, 예를 들면, 습윤제, 유화제, 보존제 또는 완충액을 소량 포함할 수 있 

다. 

각종 전달 시스템은 공지되어 있으며, 장애 또는 이의 하나 이상의 증상을 예방, 관리, 치료 또는 호전시키는데 

유용한 본 발명의 하나 이상의 결합 단백질 또는 본 발명의 하나 이상의 항체와 예방제 또는 치료제의 

배합물을, 예를 들면, 리포솜 캡슐제, 미세입자, 미세캡슐제, 항체 또는 항체 단편을 발현할 수 있는 재조합 세 

포, 수용체 매개된 세포내이입[참조: Wu and Wu, (1987) J. Biol. Chem. 262: 4429-4432], 레트로바이러스 또 

는 기타 벡터의 일부로서 핵산의 작제물 등을 투여하는데 사용될 수 있다. 본 발명의 예방제 또는 치료제의 투 

여 방법에는 비경구 투여(예를 들면, 피내, 근육내, 복강내, 정맥내 및 피하), 경막외 투여, 종양내 투여 및 점 

막 투여(예를 들면, 비내 및 경구 경로)가 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 또한, 폐 투여는, 예를 들 

면, 흡입기 또는 네블라이저 및 분무제를 함유하는 제형의 사용에 의해 적용될 수 있다[참조: 미국 특허 공보 

제6,019,968호, 제5,985,320호, 제5,985,309호, 제5,934,272호, 제5,874,064호, 제5,855,913호, 제5,290,540호 

및 제4,880,078호; 및 국제 특허 출원 공보 제WO 92/19244호, 제WO 97/32572호, 제WO 97/44013호, 제WO 

98/31346호 및 제WO 99/66903호]. 한 양태에서, 본 발명의 결합 단백질, 병용 치료제 또는 본 발명의 조성물은 

Alkermes AIR 

폐 약물 전달 기술(Alkermes, Inc., Cambridge, Massachusetts)을 사용하여 투여된다. 상기 예방제 또는 치 

료제는 임의의 간편한 경로, 예를 들면, 주입 또는 일시 주사(bolus injection), 상피 또는 점막 내층(예를 들 

면, 경구 점막, 직장 및 장내 점막 등)을 통한 흡수 등에 의해 투여될 수 있으며, 기타 생물학적 활성제와 함께 

투여될 수 있다. 투여는 전신성 또는 국소성일 수 있다. 

특정 양태에서, 치료를 필요로 하는 영역에 본 발명의 예방제 또는 치료제를, 예를 들면, 국소 주입, 주사 또는 

임플란트에 의해 국소적으로 투여하는 것이 바람직할 수 있다. 임플란트는 막 및 매트릭스, 예를 들면, 시알라 

스틱 막, 중합체, 섬유성 매트릭스(예를 들면, TISSUEL 

) 또는 콜라겐 매트릭스를 포함한 다공성 또는 비다공성 물질일 수 있다. 한 양태에서, 본 발명의 유효량의 하 

나 이상의 항체는 장애 또는 이의 증상을 예방, 치료, 관리 및/또는 호전시키기 위해 피험자의 환부에 국소적으 

로 투여된다. 또 다른 양태에서, 본 발명의 유효량의 하나 이상의 항체는 장애 또는 이의 하나 이상의 증상을 

예방, 치료, 관리 및/또는 호전시키기 위해 본 발명의 결합 단백질 이외에 유효량의 하나 이상의 치료제(예를 

들면, 하나 이상의 예방제 또는 치료제)와 병용하여 피험자의 환부에 국소적으로 투여된다. 


또 다른 양태에서, 상기 예방제 또는 치료제는 제어 방출 또는 지연 방출 시스템으로 전달될 수 있다. 한 양태 

에서, 펌프를 사용하여 제어 또는 지연 방출을 달성할 수 있다[참조: Langer, (1990) Science 249: 1527-1533; 

Sefton, (1987) CRC Crit. Rev. Biomed. Eng. 14: 201-240; Buchwald et al., (1980) Surgery 88: 507-516; 

Saudek et al., (1989) N. Engl. J. Med. 321: 574-579]. 또 다른 양태에서, 중합체 물질을 사용하여 본 발명 

의 치료제의 제어 또는 지연 방출을 달성할 수 있다[참조: Medical Applications of Controlled Release, 

(Langer and Wise, eds.) (CRC Press, Inc., Boca Raton, 1984); Controlled Drug Bioavailability, Drug 

Product Design and Performance, (Smolen and Ball, eds.) (Wiley, New York, 1984); Langer and Peppas, 

(1983) J. Macromol. Sci. Rev. Macromol. Chem. Phys. C23: 61-126; Levy et al., (1985) Science 228: 190- 

192; During et al., (1989) Ann. Neurol. 25: 351-356; Howard et al., (1989) J. Neurosurg. 71: 105-112; 

미국 특허 공보 제5,679,377호, 제5,916,597호, 제5,912,015호, 제5,989,463호 및 제5,128,326호; 및 국제 특 

허 출원 공보 제WO 99/15154호 및 제WO 99/20253호]. 지연 방출 제형에 사용되는 중합체의 예에는 폴리(2-하이 

드록시 에틸 메타크릴레이트), 폴리(메틸 메타크릴레이트), 폴리(아크릴산), 폴리(에틸렌-코-비닐 아세테이트), 

폴리(메타크릴산), 폴리글리콜리드(PLG), 폴리무수물, 폴리(N-비닐 피롤리돈), 폴리(비닐 알콜), 폴리아크릴아 

미드, 폴리(에틸렌 글리콜), 폴리락티드(PLA), 폴리(락티드-코-글리콜리드)(PLGA) 및 폴리오르토에스테르가 포 

- 41 -

[0214] 

[0215] 

[0216] 

[0217] 

[0218] 


함되지만 이에 한정되는 것은 아니다. 한 양태에서, 지연 방출 제형에 사용되는 중합체는 불활성이고, 침출성 

불순물이 없고, 저장시 안정하고, 멸균성이고, 생분해성이다. 또 다른 양태에서, 제어 또는 지연 방출 시스템 

은 예방 또는 치료 표적의 근처에 배치되고, 따라서 전신 투여량의 일부만을 필요로 한다[참조: Goodson, J.M., 

Chapter 6, In Medical Applications of Controlled Release, Vol. II, Applications and Evaluation, 

(Langer and Wise, eds.)(CRC Press, Inc., Boca Raton, 1984), pp. 115-138]. 

제어 방출 시스템은 문헌[참조: Langer, (1990) Science 249: 1527-1533]에 논의되어 있다. 당업자에게 공지 

된 임의의 기술을 사용하여 본 발명의 하나 이상의 치료제를 포함하는 지연 방출 제형을 제조할 수 있다[참조: 

미국 특허 공보 제4,526,938호; 국제 특허 출원 공보 제WO 91/05548호 및 제WO 96/20698호; 및 Ning et al., 

(1996) Radiother. Oncol. 39: 179-189; Song et al., (1996) PDA J. Pharm. Sci. Technol. 50: 372-377; 

Cleek et al., (1997) Proceed Int'l. Symp. Control. Rel. Bioact. Mater. 24: 853-854; 및 Lam et al., 

(1997) Proceed. Int'l. Symp. Control Rel. Bioact. Mater. 24: 759-760]. 

본 발명의 조성물이 예방제 또는 치료제를 암호화하는 핵산인 특정 양태에서, 암호화된 예방제 또는 치료제의 

발현을 촉진시키기 위해 상기 핵산을 생체내 투여할 수 있으며, 이는 상기 핵산을 적당한 핵산 발현 벡터의 일 

부로서 작제하고, 예를 들면, 레트로바이러스 벡터(미국 특허 공보 제4,980,286호)를 사용하거나, 직접 주사하 

거나, 미세입자 충격(예를 들면, 유전자총; Biolistic, Dupont)을 사용하거나, 지질, 세포 표면 수용체 또는 형 

질감염제로 피복하거나, 핵으로 진입하는 것으로 공지된 호메오박스형 펩타이드에 연결시켜 투여함으로써 이를 

세포내에 유입되도록 상기 핵산을 투여함으로써 이루어진다[참조: Joliot et al., (1991) Proc. Natl. Acad. 

Sci. USA 88: 1864-1868]. 또는, 핵산을 세포 내로 도입하고 상동 재조합에 의해 발현용 숙주 세포 DNA 내에 

통합시킬 수 있다. 

본 발명의 약제학적 조성물은 의도된 투여 경로에 적합하도록 제형화된다. 투여 경로의 예에는 비경구, 예를 

들면, 정맥내, 피내, 피하, 경구, 비내(예를 들면, 흡입), 경피(예를 들면, 국소), 경점막 및 직장 투여가 포함 

되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 특정 양태에서, 상기 조성물은 사람에게 정맥내, 피하, 근육내, 경구, 비 

내 또는 국소 투여하기에 적합한 약제학적 조성물로서 통상적인 절차에 따라 제형화된다. 전형적으로, 정맥내 

투여용 조성물은 멸균 등장 수성 완충액 중의 용액이다. 필요한 경우, 상기 조성물은 또한 가용화제 및 국소 

마취제, 예를 들면, 주사 부위에서 통증을 완화하기 위한 리그노캠도 포함할 수 있다. 

본 발명의 조성물이 국소적으로 투여되는 경우, 상기 조성물은 연고, 크림, 경피 패치, 로션, 젤, 샴푸, 

분무제, 에어로졸, 용액, 에멀젼, 또는 당업자에게 널리 공지된 기타 형태로 제형화될 수 있다[참조: 

Remington's Pharmaceutical Sciences and Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, 19th ed., (Mack 

Publishing Co., Easton, Pennsylvania, 1995]. 비분무성 국소 투여 형태의 경우, 통상적으로 국소 적용에 적 

합한 담체 또는 하나 이상의 부형제를 포함하고 바람직하게는 물보다 큰 동점도를 갖는 점성 내지 반고체 또는 

고체 제형을 국소적으로 사용한다. 기타 적합한 제형에는 현탁액, 분말, 도찰제, 고약 등이 포함되지만, 이에 

한정되는 것은 아니다. 한 양태에서, 이러한 제형은, 예를 들면, 삼투압과 같은 각종 특성에 영향을 미치기 위 

해 보조제(예를 들면, 보존제, 안정제, 습윤제, 완충제 또는 염)와 함께 멸균되거나 혼합된다. 기타 적합한 국 

소 투여 형태에는 분무성 에어로졸 제제가 포함되며, 여기서, 예를 들면, 고체 또는 액체 불활성 담체와 배합된 

활성 성분은 가압 휘발성 물질(예를 들면, FREON 

과 같은 가스 분사제)과 혼합하여 포장되거나 스퀴즈 보틀에 포장된다. 보습제 또는 습윤제도 또한 필요하다면 

약제학적 조성물 및 투여 형태에 첨가될 수 있다. 이러한 추가 성분의 예는 당업계에 널리 공지되어 있다. 

본 발명의 방법이 조성물의 비내 투여를 포함하는 경우, 상기 조성물은 에어로졸 형태, 분무, 연무 또는 점적액 

형태로 제형화될 수 있다. 특히, 본 발명에 따라 사용되는 예방제 또는 치료제는 가압 팩 또는 네블라이저로부 

터의 에어로졸 분무 제공 형태로 적합한 분사제(예를 들면, 디클로로디플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 

디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소 또는 기타 적합한 가스)의 사용에 의해 간편하게 전달될 수 있다. 가 

압 에어로졸의 경우, 용량 단위는 계량된 양을 전달하기 위해 밸브를 구비함으로써 측정될 수 있다. 흡입기 또 

는 취입기에 사용하기 위한 캡슐제 및 카트리지(예를 들면, 젤라틴으로 이루어짐)는 화합물과 적합한 분말 

기제, 예를 들면, 락토스 또는 전분의 분말 혼합물을 포함하도록 제형화될 수 있다. 


본 발명의 방법이 경구 투여를 포함하는 경우, 상기 조성물은 정제, 캡슐제, 카세제, 젤캡, 용액, 현탁액 등의 

형태로 경구적으로 제형화될 수 있다. 정제 또는 캡슐제는 결합제(예를 들면, 예비젤화된 옥수수 전분, 폴리비 

닐피롤리돈 또는 하이드록시프로필 메틸셀룰로스), 충전제(예를 들면, 락토스, 미세결정 셀룰로스 또는 인산수 

소칼슘), 윤활제(예를 들면, 마그네슘 스테아레이트, 탈크 또는 실리카), 붕해제(예를 들면, 감자 전분 또는 나 

- 42 -

[0220] 

[0221] 

[0222] 

[0223] 

[0224] 

[0225] 

트륨 전분 글리콜레이트) 또는 습윤제(예를 들면, 나트륨 라우릴 설페이트)와 같은 약제학적으로 허용되는 부형 

제로 통상적인 수단에 의해 제조될 수 있다. 정제는 당업자에게 익히 공지된 방법으로 피복될 수 있다. 경구 

투여용 액상 제제는 이에 한정되지 않는 용액, 시럽 또는 현탁액의 형태를 취할 수 있거나, 사용전에 물 또는 

기타 적합한 비히클과 구성하기 위해 무수 생성물로서 제공될 수 있다. 상기 액상 제제는 현탁제(예를 들면, 

소르비톨 시럽, 셀룰로스 유도체 또는 수소화 식용 지방), 유화제(예를 들면, 레시틴 또는 아카시아), 비수성 

비히클(예를 들면, 아몬드유, 오일성 에스테르, 에틸 알콜 또는 분획된 식물성 오일) 및 보존제(예를 들면, 메 

틸-p-하이드록시벤조에이트, 프로필-p-하이드록시벤조에이트 또는 소르브산)와 같은 약제학적으로 허용되는 첨 

가제로 통상적인 수단에 의해 제조될 수 있다. 상기 제제는 또한 완충염, 풍미제, 착색제 및 감미제도 적절하 

게 포함할 수 있다. 경구 투여용 제제는 예방제 또는 치료제(들)의 서방출, 제어 방출 또는 지연 방출용으로 

적합하게 제형화될 수 있다. 

본 발명의 방법은 에어로졸성 제제로 제형화된 조성물을, 예를 들면, 흡입기 또는 네블라이저의 사용에 의해 폐 

투여함을 포함할 수 있다[참조: 미국 특허 공보 제6,019,968호, 제5,985,320호, 제5,985,309호, 

제5,934,272호, 제5,874,064호, 제5,855,913호, 제5,290,540호 및 제4,880,078호; 및 국제 특허 출원 공보 제 

WO 92/19244호, 제WO 97/32572호, 제WO 97/44013호, 제WO 98/31346호 및 제WO 99/66903호]. 특정 양태에서, 

본 발명의 항체, 병용 치료제 및/또는 본 발명의 조성물은 Alkermes AIR 

폐 약물 전달 기술(Alkermes, Inc., Cambridge, Massachusetts)을 사용하여 투여한다. 

본 발명의 방법은 주사(예를 들면, 일시 주사 또는 연속 주입)에 의해 비경구 투여용으로 제형화된 조성물의 투 

여를 포함할 수 있다. 주사용 제형은 보존제를 첨가한 단위 용량 형태(예를 들면, 앰풀 또는 다용량 용기)로 

제공될 수 있다. 상기 조성물은 오일성 또는 수성 비히클 중의 현탁액, 용액 또는 유화액과 같은 형태를 취할 

수 있으며, 현탁제, 안정제 및/또는 분산제와 같은 제형화제를 함유할 수 있다. 또는, 활성 성분은 사용전에 

적합한 비히클(예를 들면, 멸균 발열원 제거수)로 구성하기 위한 분말 형태일 수 있다. 

본 발명의 방법은 데포제로서 제형화된 조성물의 투여를 추가로 포함할 수 있다. 상기 지속성 제형은 이식(예 

를 들면, 피하 또는 근육내)에 의해 또는 근육내 주사에 의해 투여될 수 있다. 따라서, 예를 들면, 상기 조성 

물은 적합한 중합체 물질 또는 소수성 물질(예를 들면, 허용되는 오일 중의 유화액으로서) 또는 이온 교환 수지 

로 제형화되거나, 난용성 유도체(예를 들면, 난용성 염으로서)로서 제형화될 수 있다. 

본 발명의 방법은 중성 형태 또는 염 형태로서 제형화된 조성물의 투여를 포함한다. 약제학적으로 허용되는 염 

에는 염산, 인산, 아세트산, 옥살산, 타르타르산 등으로부터 유도된 음이온에 의해 형성된 염과 나트륨, 칼륨, 

암모늄, 칼슘, 수산화제2철, 이소프로필아민, 트리에틸아민, 2-에틸아미노 에탄올, 히스티딘, 프로카인 등으로 

부터 유도된 양이온에 의해 형성된 염이 포함된다. 

일반적으로, 조성물의 성분은 별도로 또는 함께 혼합되어 단위 용량 형태, 예를 들면, 활성제의 양을 나타내는 

앰풀 또는 사세트와 같은 완전 밀폐 용기 중의 건조한 동결건조 분말 또는 무수 농축물로서 제공된다. 투여 방 

식이 주입인 경우, 멸균 약제학적 등급 수 또는 식염수를 함유하는 주입병에 조성물을 분배할 수 있다. 투여 

방식이 주입에 의한 경우, 투여 전에 성분을 혼합할 수 있도록 주사용 멸균수 또는 식염수의 앰풀을 제공할 수 

있다. 


특히, 본 발명은 제제의 양을 나타내는 앰풀 또는 사세트와 같은 완전 밀폐 용기에 포장된 본 발명의 예방제 또 

는 치료제 및 약제학적 조성물 중의 하나 이상을 또한 제공한다. 한 양태에서, 본 발명의 예방제 또는 치료제 

및 약제학적 조성물 중의 하나 이상은 완전 밀폐 용기 중의 건조된 멸균 동결건조 분말 또는 무수 농축물로서 

제공되며, 피험자에게 투여하기에 적당한 농도로 (예를 들면, 물 또는 식염수에 의해) 재구성될 수 있다. 한 

양태에서, 본 발명의 예방제 또는 치료제 또는 약제학적 조성물 중의 하나 이상은 완전 밀폐 용기 중의 건조된 

멸균 동결건조 분말로서 약 5mg 이상, 약 10mg 이상, 약 15mg 이상, 약 25mg 이상, 약 35mg 이상, 약 45mg 이 

상, 약 50mg 이상, 약 75mg 이상 또는 약 100mg 이상의 단위 용량으로 공급된다. 본 발명의 동결건조 예방제 

또는 치료제 또는 약제학적 조성물은 약 2℃ 내지 약 8℃에서 최초 용기에 보관되어야 하며, 본 발명의 예방제 

또는 치료제 또는 약제학적 조성물은 재구성 후 1주 이내, 5일 이내, 72시간 이내, 48시간 이내, 24시간 이내, 

12시간 이내, 6시간 이내, 5시간 이내, 3시간 이내 또는 1시간 이내에 투여되어야 한다. 대체 양태에서, 본 발 

명의 예방제 또는 치료제 및 약제학적 조성물 중의 하나 이상은 제제의 양 및 농도를 나타내는 완전 밀폐 용기 

에 액체 형태로 공급된다. 한 양태에서, 투여 조성물의 액체 형태는 완전 밀봉 용기에 약 0.25mg/ml 이상, 약 

0.5mg/ml 이상, 약 1mg/ml 이상, 약 2.5mg/ml 이상, 약 5mg/ml 이상, 약 8mg/ml 이상, 약 10mg/ml 이상, 약 

15mg/ml 이상, 약 25mg/ml 이상, 약 50mg/ml 이상, 약 75mg/ml 이상 또는 약 100mg/ml 이상으로 공급된다. 액 

- 43 -

[0226] 

[0227] 

[0228] 

[0229] 

[0230] 

[0231] 

체 형태는 최초 용기에서 약 2℃ 내지 약 8℃에서 보관되어야 한다. 

본 발명의 결합 단백질은 비경구 투여에 적합한 약제학적 조성물에 혼입될 수 있다. 한 양태에서, 결합 단백질 

은 약 0.1mg/ml 내지 약 250mg/ml의 항체를 함유하는 주사 용액으로 제조된다. 주사 용액은 플린트 또는 앰버 

바이알, 앰풀 또는 미리충전된 주사기 중의 액체 또는 동결건조 용량 형태로 이루어질 수 있다. 완충액은 L-히 

스티딘(약 1mM 내지 약 50mM, 최적으로는 약 5mM 내지 약 10mM 및 pH 5.0 내지 7.0, 최적으로는 pH 약 6.0)일 

수 있다. 기타 적합한 완충액에는 석신산나트륨, 시트르산나트륨, 인산나트륨 또는 인산칼륨이 포함되지만, 이 

에 한정되는 것은 아니다. 염화나트륨은 약 0 내지 약 300mM(예를 들면, 액체 용량 형태의 경우에는 약 150m 

M)의 농도로 용액의 독성을 완화시키기 위해 사용될 수 있다. 동결건조 용량 형태는 동해방지제를 포함할 수 

있으며, 원칙적으로 약 0 내지 약 10%(예를 들면, 약 0.5% 내지 약 1.0%)의 수크로스를 포함할 수 있다. 기타 

적합한 동해방지제에는 트레할로스 및 락토스가 포함된다. 동결건조 용량 형태는 벌킹제(bulking agent)를 포 

함할 수 있으며, 주로 약 1% 내지 약 10%(예를 들면, 약 2% 내지 약 4%)의 만니톨을 포함할 수 있다. 액체 및 

동결건조 용량 형태 모두는 안정제를 사용할 수 있으며, 주로 약 1mM 내지 약 50mM의 L-메티오닌(최적으로는 약 

5mM 내지 약 10mM)을 사용할 수 있다. 기타 적합한 벌킹제에는 글리신 및 아르기닌이 포함되며, 약 0 내지 약 

0.05%(최적으로는 약 0.005% 내지 약 0.01%)의 폴리소르베이트 80을 포함할 수 있다. 추가 계면활성제에는 폴 

리소르베이트 20 및 BRIJ 계면활성제가 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 

본 발명의 조성물은 다양한 형태일 수 있다. 그 예에는 액체, 반고체 및 고체 용량 형태, 예를 들면, 액체 용 

액(예를 들면, 주사 용액 및 주입 용액), 분산액 또는 현탁액, 정제, 환제, 분말, 리포솜 및 좌약이 포함된다. 

특정 형태는 의도한 투여 방식 및 치료 용도에 좌우된다. 전형적인 조성물은 주사 용액 또는 주입 용액 형태, 

예를 들면, 다른 항체에 의한 사람의 수동 면역화에 사용된 것과 유사한 조성물이다. 투여 방식은 비경구(예를 

들면, 정맥내, 피하, 복강내, 근육내)이다. 한 양태에서, 항체는 정맥내 주입 또는 주사에 의해 투여된다. 또 

다른 양태에서, 항체는 근육내 또는 피하 주사에 의해 투여된다. 

치료 조성물은 일반적으로 제조 및 보관 조건 하에서 멸균되고 안정해야 한다. 상기 조성물은 용액, 마이크로 

에멀젼, 분산액, 리포솜, 또는 고농도의 약물에 적합한 기타 규칙 구조로 제형화될 수 있다. 멸균 주사 용액은 

활성 화합물(예를 들면, 항체 또는 이의 항원 결합 부분)을 적당한 용매에 필요량으로 필요에 따라 상기에 열거 

된 하나의 성분 또는 성분들의 배합물과 함께 혼입한 후 멸균 여과함으로써 제조될 수 있다. 일반적으로, 분산 

액은 상기에 열거된 것과 다른 필요 성분 및 염기성 분산 매질을 함유하는 멸균 비히클에 활성 화합물을 혼입함 

으로써 제조된다. 멸균 주사 용액을 제조하기 위한 멸균 동결건조 분말의 경우, 예시적인 제조 방법은 미리 멸 

균 여과된 용액으로부터 활성 성분과 임의의 추가 필요 성분의 분말을 생산하는 진공 건조 및 분무 건조이다. 

용액의 적당한 유동성은, 예를 들면, 레시틴과 같은 피복제를 사용하고, 분산액의 경우에는 필요한 입자 크기를 

유지하고, 계면활성제를 사용함으로써 유지될 수 있다. 주사용 조성물의 지속적인 흡수는 흡수를 지연시키는 

제제, 예를 들면, 모노스테아레이트 염 및 젤라틴을 조성물에 포함시킴으로써 달성될 수 있다. 

본 발명의 결합 단백질은 당업계에 공지된 각종 방법에 의해 투여될 수 있지만, 다수의 치료 적용의 경우, 예시 

적인 투여 경로/방식은 피하 주사, 정맥내 주사 또는 주입이다. 당업자가 이해할 수 있는 바와 같이, 투여 경 

로 및/또는 방식은 목적하는 결과에 따라 달라진다. 특정 양태에서, 활성 화합물은 신속 방출에 대해 화합물을 

보호하는 담체와 함께 제조될 수 있으며, 그 예로는 이식물, 경피 패치 및 마이크로캡슐화 전달 시스템과 같은 

제어 방출 제형이 있다. 생체분해성의 생체적합성 중합체를 사용할 수 있으며, 그 예로는 에틸렌 비닐 아세테 

이트, 폴리무수물, 폴리글리콜산, 콜라겐, 폴리오르토에스테르 및 폴리락트산이 있다. 이러한 제형을 제조하는 

다수의 방법은 특허되어 있거나 당업자에게 통상적으로 공지되어 있다[참조: Sustained and Controlled Release 

Drug Delivery Systems, J.R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978]. 

특정 양태에서, 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분은, 예를 들면, 불활성 희석제 또는 동화성 식용 담체 

와 함께 경구 투여될 수 있다. 화합물(및 필요한 경우 기타 성분)은 또한 경질 또는 연질 외피 젤라틴 캡슐에 

포함되거나, 정제로 압축되거나, 피험자의 식이에 직접 혼입될 수도 있다. 경구 치료적 투여의 경우, 화합물은 

부형제와 혼합될 수 있으며, 섭취정, 구강정, 구중정, 캡슐제, 엘릭시르제, 현탁액, 시럽, 웨이퍼 등의 형태로 

사용될 수 있다. 비경구 투여 이외의 방식으로 본 발명의 화합물을 투여하기 위해, 상기 화합물을 실활 방지제 

로 피복하거나, 실활 방지제와 함께 동시투여할 필요가 있을 수 있다. 


또한, 보충 활성 화합물도 조성물에 혼입될 수 있다. 특정 양태에서, 본 발명의 결합 단백질(또는 항체) 또는 

이의 항원 결합 부분은 IL-1β 활성이 해를 끼치는 장애를 치료하는데 유용한 하나 이상의 추가 치료제와 함께 

공동제형화 및/또는 동시투여된다. 예를 들면, 본 발명의 항-hIL-1β 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분은 

- 44 -

[0232] 

[0233] 

[0234] 

[0235] 

다른 표적에 결합하는 하나 이상의 추가 항체(예를 들면, 다른 사이토킨에 결합하거나 세포 표면 분자에 결합하 

는 항체)와 함께 공동제형화 및/또는 동시투여될 수 있다. 또한, 본 발명의 하나 이상의 결합 단백질은 2종 이 

상의 전술한 치료제와 함께 사용될 수 있다. 이러한 병용 치료요법은 저용량의 치료제의 투여를 사용할 수 있 

게 하여 각종 단독치료요법과 관련된 가능한 독성 또는 합병증을 피할 수 있어 유리할 수 있다. 

특정 양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 IL-1β 결합 부분은 당업계에 공지된 

반감기 연장 비히클에 결합된다. 이러한 비히클에는 Fc 도메인, 폴리에틸렌 글리콜 및 덱스트란이 포함되지만, 

이에 한정되는 것은 아니다. 이러한 비히클은, 예를 들면, 미국 특허 공보 제6,660,843호 및 국제 특허 출원 

공보 제WO 99/25044호에 기재되어 있다. 

특정 양태에서, 본 발명의 결합 단백질의 하나 이상의 폴리펩타이드를 암호화하는 뉴클레오타이드 서열을 포함 

하는 핵산 분자 또는 본 발명의 또 다른 예방제 또는 치료제는 유전자 치료요법에 의해 장애 또는 이의 하나 이 

상의 증상을 치료, 예방, 관리 또는 호전시키기 위해 투여된다. 유전자 치료요법은 발현된 핵산 또는 발현가능 

한 핵산을 피험자에게 투여하여 수행되는 치료요법을 의미한다. 본 발명의 이러한 양태에서, 상기 핵산은 예방 

또는 치료 효과를 매개하는 암호화된 본 발명의 결합 단백질의 결합 폴리펩타이드(들) 또는 예방제 또는 치료제 

를 생산한다. 

당업계에서 이용할 수 있는 유전자 치료요법의 임의의 방법은 본 발명에 따라 사용될 수 있다. 유전자 치료요 

법의 방법에 관한 일반적인 검토에 대해서는 문헌[참조: Goldspiel et al., (1993) Clin. Pharm. 12: 488-505; 

Wu and Wu, (1991) Biotherapy 3: 87-95; Tolstoshev, (1993) Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 32: 573-596; 

Mulligan, (1993) Science 260: 926-932; Morgan and Anderson, (1993) Ann. Rev. Biochem. 62: 191-217; 및 

Robinson, C., (1993) Trends Biotechnol. 11(5): 155]에 기재되어 있다. 사용될 수 있는 재조합 DNA 기술 분 

야에 일반적으로 공지된 방법은 문헌[참조: Ausubel et al., (eds.), Current Protocols in Molecular Biology 

(John Wiley & Sons, New York, 1993); 및 Kriegler, Gene Transfer and Expression, A Laboratory Manual, 

(Stockton Press, New York, 1990)]에 기재되어 있다. 유전자 치료요법의 각종 방법에 대한 상세한 설명은 미 

국 특허 출원 공보 제US 2005/0042664에 개시되어 있다. 


IL-1β는 면역 및 염증 인자를 수반하는 각종 질환과 관련된 병리에 중요한 역할을 한다. 이러한 질환에는 후 

천성 면역결핍 질환 증후군, 후천성 면역결핍 관련 질환, 후천성 악성 빈혈, 급성 심장 증후군, 급성 및 만성 

통증(여러 형태의 통증), 급성 특발성 다발신경염, 기관 이식과 연관된 급성 면역 질환, 기관 이식과 연관된 급 

성 또는 만성 면역 질환, 급성 염증성 탈수초 다발신경병증, 급성 허혈, 급성 간 질환, 급성 류마티스열, 급성 

횡단척수염, 애디슨병, 성인성(급성) 호흡 곤란 증후군, 성인 스틸병, 알콜성 경변, 알콜 유도 간 손상, 알레르 

기성 질환, 알레르기, 탈모, 원형 탈모, 알츠하이머 질환, 과민증, 강직척추염, 폐질환 연관된 강직척추염, 항- 

인지질 항체 증후군, 재생불량빈혈, 동맥경화증, 관절병증, 천식, 죽종질환/동맥경화증, 죽상동맥경화증, 아토 

피성 알레르기, 아토피성 발작, 아토피성 피부염, 위축성 자가면역 갑상선기능저하증, 자가면역 수포성 질환, 

자가면역 피부염, 자가면역 당뇨병, 스트렙토코커스 감염과 연관된 자가면역 장애, 자가면역 장병증, 자가면역 

용혈성 빈혈, 자가면역 간염, 자가면역 청각상실, 자가면역 림프증식성 증후군(ALPS), 자가면역 매개된 저혈당 

증, 자가면역 심근염, 자가면역 호중구감소증, 자가면역 조숙 난소 부전, 자가면역 혈소판감소증(AITP), 자가면 

역 갑상선 질환, 자가면역 포도막염, 폐쇄세기관지염, 베체트병, 안검염, 기관지확장증, 수포성 유천포창, 악액 

질, 심혈관 질환, 파국적 항인지질 증후군, 복강 질환, 경추증, 클라미디아, 콜레오사타티스(choleosatatis), 

만성 활성 간염, 만성 호산구 폐렴, 만성 피로 증후군, 기관 이식과 연관된 만성 면역 질환, 만성 허혈, 만성 

간 질환, 만성 점막피부 칸디다증, 흉터유사천포창, 다발성 경화증 위험이 있는 임상적 독립 증후군(CIS), 공통 

가변 면역결핍증(공통 가변 저감마글로불린혈증), 결합조직 질환 연관된 간질성 폐 질환, 결막염, 쿰즈 양성 용 

혈성 빈혈, 소아기 발병 정신장애, 만성 폐쇄 폐질환(COPD), 크론병, 잠복 자가면역 간염, 잠복 섬유화 폐포염, 

누낭염, 우울증, 피부염 공피증, 피부근육염, 피부근육염/다발근육염 연관 폐질환, 당뇨 망막병증, 진성당뇨병, 

확장심근병증, 원반상 홍반 루푸스, 요추간판 헤르니아증, 요추간판 탈출증, 파종 혈관내 응고, 약물-유도 간 

염, 약물-유도 간질성 폐질환, 약물 유도 면역 용혈 빈혈, 심내막염, 자궁내막증, 안구내염, 장병성 윤활막염, 

상공막염, 다형홍반, 주요다형홍반, 여성 불임증, 섬유증, 섬유성 폐 질환, 임신 유사천포창, 거대세포 동맥염 

(GCA), 사구체신염, 갑상선종성 자가면역 갑상선기능저하증(하시모토병), 굿파스처 증후군, 통풍성 관절염, 이 

식편대숙주 질환(GVHD), 그레이브스병, B 그룹 연쇄구균(GBS) 감염, 길랑-바레 증후군(Guillain-Barre 

Syndrome(GBS)), 혈철증 연관 폐질환, 건초열(Hay Fever), 심부전, 용혈빈혈, 헤노흐-쇤라인 자반증, B형 간염, 

C형 간염, 휴즈(Hughes) 증후군, 헌팅톤 무도병, 갑상선기능항진증, 부갑상선기능저하증, 특발성 백혈구감소증, 

특발성 혈소판감소증, 특발성 파킨슨병, 특발성 간질성 폐렴, 특발성 간 질환, IgE-매개 알레르기, 면역 용혈빈 

- 45 -

[0236] 

[0237] 

[0238] 

[0239] 

[0240] 

[0241] 

혈, 봉입체 근염, 감염성 질환, 감염성 안구 염증성 질환, 염증성 장 질환, 염증성 탈수초 질환, 염증성 심장 

질환, 염증성 신장 질환, 인슐린 의존성 진성당뇨병, 간질성 폐렴, IPF/UIP, 홍채염, 소아 만성 관절염, 소아 

악성 빈혈, 소아 류마티스성 관절염(JRA), 가와사키병, 각막염, 건조각막결막염, 쿠스마울 질환 또는 쿠스마울- 

마이어 질환, 랜드리 마비, 랑게르한스 세포 조직구증, 선형 IgA 질환, 망상피반, 라임 관절염, 림프구성 침윤 

폐 질환, 황반변성, 특발성 남성 불임 또는 NOS, 악성종양, 신장의 현미경적 혈관염, 현미경적 다발혈관염, 복 

합 결합조직 질환 연관 폐 질환, 모부스 베크테레브병, 운동 신경 장애, 점막 유천포창, 다발성경화증(모든 아 

형: 1차 진행성, 2차 진행성, 재발-이장성 등), 다발 기관 손상, 근통성 뇌염/로얄 프리(Royal Free) 질환, 중 

증근무력증, 골수형성이상 증후군, 심근경색, 심근염, 신증후군, 신경근 장애, 신경병, 비알콜성 지방간염, 비- 

A 비-B 간염, 시각신경염, 기관 이식 거부, 골관절염, 골용해, 난소암, 난소 부전, 췌장염, 기생충병, 

파킨슨병, 소수관절 JRA, 유천포창, 낙엽천포창, 보통천포창, 말초 동맥 폐색 질환(PAOD), 말초 혈관 질환 

(PVD), 말초 동맥 질환(PAD), 수정체성 포도막염, 정맥염, 결절성 다발동맥염(또는 결절성 동맥주위염), 다발연 

골염, 류마티스성 다발근육통, 백모증, 다관절 JRA, 다내분기결핍증후군, 다발근육염, 다분비선결핍 I형 및 다 

분비선결핍 II형: 류마티스성 다발성근육통(PMR), 감염후 간질성 폐 질환, 염증후 간질성 폐 질환, 펌프후 증후 

군, 조기난소 부전, 원발성 담즙성 간경변, 원발성 점액수종, 원발성 파킨슨증, 원발성 경화성 담관염, 원발성 

경화성 간염, 원발성 혈관염, 전립선 및 직장 암 및 조혈성 악성종양(백혈병 및 림프종), 전립선염, 건선, 건선 

I형, 건선 2형, 건선성 관절염, 건선성 관절병, 결합 조직 질환에 속발성인 폐 고혈압증, 결절성 다발성 동맥염 

의 폐 징후, 진정적혈구계 무형성, 원발성 부신기능 저하증, 방사성 섬유증, 반응성 관절염, 라이터 질환, 재발 

시신경척수염, 신장 질환 NOS, 재협착증, 류마티스성 관절염, 류마티스성 관절염 연관 간질성 폐 질환, 류마티 

스성 심장 질환, SAPHO(윤활막염, 여드름, 농포증, 골과다증 및 골염), 사르코이드증, 정신분열증, 슈미트 증후 

군, 공피증, 속발성 아밀로이드증, 쇼크 폐, 공막염, 좌골신경통, 2차 부신부전, 패혈증, 패혈성 관절염, 패혈 

성 쇼크, 혈청음성 관절병, 실리콘 관련 결합조직 질환, 쇼그렌 질환 관련 폐 질환, 쇼그렌 증후군, 스네던-윌 

킨슨 피부병, 정자 자가면역, 척추관절병증, 강직 척추염, 스티븐스-존슨 증후군(SJS), 스틸병, 발작, 교감눈염 

증, 전신 염증 반응 증후군, 전신 홍반성 루푸스, 전신 홍반성 루푸스 관련 폐 질환, 전신 경화증, 전신 경화증 

관련 간질성 폐 질환, 다카야스병/동맥염, 일시 동맥염, Th2형 및 Th1형 매개 질환, 갑상선염, 독성 쇼크 증후 

군, 톡소플라스마성 비염, 독소 표피 괴사용해, 횡단성 골수염, TRAPS(종양 괴사 인자 수용체 1형(TNFR)-관련 

주기적 증후군, 흑색극세포증 보유 B형 인슐린 내성, I형 알레르기 반응, 1형 자가면역 간염(고전적 자가면역 

또는 루푸스성 간염), 2형 자가면역 간염(항-LKM 항체 간염), II형 당뇨병, 궤양성 결장 관절병증, 궤양성 결장 

염, 두드러기, 일반 간질성 폐렴(UIP), 포도막염, 혈관염성 미만성 폐 질환, 혈관염, 봄철 결막염, 바이러스 비 

염, 백반증, 보그트-고야나기-하라다 증후군(VKH 증후군), 베게너 육아종증, 습성 황반 변성, 상처 치유, 예르 

시니아 및 살모넬라 관련 관절병이 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 

특정 양태에서, 본 발명의 IL-1β 결합 단백질 및 이의 항원 결합 부분은 류마티스성 관절염, 골관절염, 

크론병, 다발 경화증, 인슐린 의존성 진성당뇨병 및 건선을 치료하는데 사용된다. 

또한, 본 발명의 IL-1β 결합 단백질 및 이의 항원 결합 부분은 자가면역 질환, 특히 염증 관련 질환, 예를 들 

면, 강직척추염, 알레르기, 자가면역 당뇨병 및 자가면역 포도막염을 앓고 있는 사람을 치료하는데 사용할 수도 

있다. 

또한, 본 발명의 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분은 자가면역 질환 및 염증 질환을 치료하는데 유 

용한 하나 이상의 추가 치료제와 함께 투여될 수도 있다. 

본 발명의 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분은 상기 질환들을 치료하기 위해 단독으로 또는 배합되 

어 사용될 수도 있다. 본 발명의 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분이 단독으로 또는 추가의 제제, 예를 

들면, 치료제와 함께 배합되어 사용될 수도 있으며, 이러한 추가의 제제가 의도된 목적에 따라 당업자에 의해 

선택됨은 이해되어야 한다. 예를 들면, 추가의 제제는 본 발명의 항체에 의해 치료되는 질환 또는 병태를 치료 

하는데 유용한 것으로 당업계에서 인식된 치료제일 수 있다. 또한, 추가의 제제는 치료 조성물에 유익한 속성 

을 부여하는 제제, 예를 들면, 조성물의 점도에 영향을 미치는 제제일 수 있다. 

또한, 본 발명의 배합물은 본원에 기재된 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 단편과 하기에 열거된 하나 

이상의 추가의 제제를 포함한다. 또한, 배합물은 하나 이상의 추가의 제제, 예를 들면, 2개 또는 3개의 추가의 

제제를 포함할 수도 있는데, 단 형성된 조성물이 의도한 기능을 수행할 수 있어야 한다. 


예시적인 배합물은 본원에 기재된 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 단편과 비스테로이드성 소염 약물 

(들)(NSAID), 예를 들면, 이부프로펜을 포함한다. 예시적인 기타 배합물은 본원에 기재된 항체 또는 이의 항원 

- 46 -

[0242] 

[0243] 

[0244] 

결합 단편과 코르티코스테로이드, 예를 들면, 프레드니솔론을 포함한다. 스테로이드의 부작용은 본 발명의 항- 

IL-1β 결합 단백질과 배합되어 환자를 치료할 때 필요한 스테로이드 용량을 점차 줄임으로써 감소되거나 제거 

될 수도 있다. 본 발명의 항체 또는 항체 부분와 배합될 수 있는 류마티스성 관절염용 치료제의 예에는 다음이 

포함된다: 사이토킨 억제성 소염 약물(들)(CSAID), 다른 사람 사이토킨 또는 성장인자, 예를 들면, TNF, LT, 

IL-1α, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-15, IL-16, IL-18, IL-21, 인터페론, EMAP-II, GM- 

CSF, FGF 및 PDGF의 항체 또는 이들의 길항제. 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 CD2, CD3, CD4, 

CD8, CD25, CD28, CD30, CD40, CD45, CD69, CD80(B7.1), CD86(B7.2), CD90 및 CTLA와 같은 세포 표면 분자에 

대한 항체 또는 이들의 리간드, 예를 들면, CD154(gp39 또는 CD40L)와 배합될 수 있다. 

본 발명의 IL-1α 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 단편과 배합하기 위한 예시적인 치료제는 자가면역 및 후속 

적인 염증 캐스캐이드의 여러 지점에서 개입하며, 그 예에는 TNF 길항제, 예를 들면, 키메라, 사람화된 TNF 항 

체, 또는 사람 TNF 항체, D2E7(국제 특허 출원 공보 제WO 97/29131호), CA2(REMICADEa), CDP571 및 가용성 p55 

또는 p75 TNF 수용체, 이의 유도체(p75TNFR1gG (ENBRELa)) 또는 p55TNFR1gG(Lenercept) 및 또한 TNFα 전환 효 

소(TACE) 억제제 및 기타 IL-1 억제제(인터류킨-1-전환 효소 억제제, IL-1RA 등)가 있다. 항체 및 이의 항원 

결합 단편과 배합하기 위한 기타 제제에는 인터류킨 11, IL-1α 기능과 병행하거나 IL-1α 기능에 의존적이거나 

IL-1α 기능과 협동적인 작용을 하는 제제, 예를 들면, IL-18 길항제(예를 들면, IL-18 결합 단백질, 예를 

들면, 항체 또는 가용성 IL-18 수용체, 또는 이의 항원 결합 단편)이 포함된다. 항체 및 이의 항원 결합 단편 

과 배합하기 위한 추가 제제에는 비고갈성 항 CD4 억제제, 공동자극 경로 CD80(B7.1) 또는 CD86(B7.2)의 

길항제, 예를 들면, 항체, 가용성 수용체, 길항제성 리간드 또는 이의 항원 결합 단편이 포함된다. 

본 발명의 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분은 또한 류마티스성 관절염을 치료하기 위한 제제, 예를 들면, 

메토트렉세이트, 6-MP, 아자티오프린 설파살라진, 메살라진, 올살라진 클로로퀴닌/하이드록시클로로퀸, 펜실라 

민, 오로티오말레이트(근육내 및 경구), 아자티오프린, 콜히친, 코르티코스테로이드(경구, 흡입 및 국소 주사), 

베타-2 아드레날린수용체 작용제(살부타몰, 터부탈린 및 살메테랄), 크산틴(테오필린 및 아미노필린), 크로모글 

리케이트, 네도크로밀, 케토티펜, 이프라트로퓸 및 옥시트로퓸, 사이클로스포린, FK506, 라파마이신, 미코페놀 

레이트 모페틸, 레플루노미드, NSAID, 예를 들면, 이부프로펜, 코르티코스테로이드, 예를 들면, 프레드니솔론, 

포스포디에스테라제 억제제, 아데노신 작용제, 항혈전제, 보체 억제제, 아드레날린성 제제; 염증촉진성 사이토 

킨, 예를 들면, TNFα 또는 IL-1에 의한 신호 전달을 방해하는 제제(예를 들면, IRAK, NIK, IKK, p38 및 MAP 

키나제 억제제); IL-1β 전환효소 억제제, TNFα 전환효소(TACE) 억제제, T 세포 신호 전달 억제제, 예를 들면, 

키나제 억제제, 메탈로프로테이나제 억제제, 설파살라진, 아자티오프린, 6-머캅토퓨린, 안지오텐신 전환 효소 

억제제, 가용성 사이토킨 수용체 및 이의 유도체(예를 들면, 가용성 p55 또는 p75 TNF 수용체 및 유도체 

p75TNFRIgG(ENBREL 및 p55TNFRIgG(Lenercept)), sIL-1RI, sIL-1RII, sIL-6R), 소염성 사이토킨(예를 들면, 

IL-4, IL-10, IL-11, IL-13 및 TGFβ), 셀레콕시브, 엽산, 하이드록시클로로퀸 설페이트, 로페콕시브, 에타너셉 

트, 인플릭시마브, 나프록센, 발데콕시브, 설파살라진, 메틸프레드니솔론, 멜록시캄, 메틸프레드니솔론 아세테 

이트, 금 나트륨 티오말레이트, 아스피린, 트리암시놀론 아세토나이드, 프로폭시펜 나프실레이트/apap, 폴레이 

트, 나부메톤, 디클로페낙, 피록시캄, 에토돌락, 디클로페낙 나트륨, 옥사프로진, 옥시코돈 hcl, 하이드로코돈 

비타르트레이트/apap, 디클로페낙 나트륨/미소프로스톨, 펜타닐, 아나킨라, 사람 재조합체, 트라마돌 hcl, 살살 

레이트, 설린닥, 시아노코발라민/fa/피리독신, 아세트아미노펜, 알렌드로네이트 나트륨, 프레드니솔론, 모르핀 

설페이트, 리도카인 하이드로클로라이드, 인도메타신, 글루코사민 설프/콘드로이틴, 아미트립틸린 hcl, 설파디 

아진, 옥시코돈 hcl/아세트아미노펜, 올로파타딘 hcl, 미소프로스톨, 나프록센 나트륨, 오메프라졸, 사이클로포 

스파미드, 리툭시마브, IL-1 TRAP, MRA, CTLA4-IG, IL-18BP, 항-IL-18, 항-IL-15, BIRB-796, SCIO-469, VX- 

702, AMG-548, VX-740, 로플루밀라스트, IC-485, CDC-801 및 메소프람과 배합될 수도 있다. 


본 발명의 IL-1β 결합 단백질(예를 들면, 항체) 또는 이의 항원 결합 부분과 배합될 수 있는 염증성 장 질환에 

유용한 치료제의 예에는 부데노사이드, 표피 성장 인자, 코르티코스테로이드, 사이클로스포린, 설파살라진, 아 

미노살리실레이트, 6-머캅토퓨린, 아자티오프린, 메트로니다졸, 리폭시게나제 억제제, 메살라민, 올살라진, 발 

살라지드, 항산화제, 트롬복산 억제제, IL-1 수용체 길항제, 항-IL-1β 단클론 항체, 항-IL-6 단클론 항체, 성 

장 인자, 엘라스타제 억제제, 피리디닐-이미다졸 화합물, 다른 사람 사이토킨 또는 성장 인자, 예를 들면, TNF, 

LT, IL-1β, IL-2, IL-6, IL-7, IL-8, IL-15, IL-16, IL-17, IL-18, EMAP-II, GM-CSF, FGF 및 PDGF에 대한 항 

체 또는 이들의 길항제가 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분 

은 세포 표면 분자, 예를 들면, CD2, CD3, CD4, CD8, CD25, CD28, CD30, CD40, CD45, CD69, CD90 및 이들의 리 

간드에 대한 항체와 배합될 수 있다. 본 발명의 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분은 또한 

메토트렉세이트, 사이클로스포린, FK506, 라파마이신, 마이코페놀레이트 모페틸, 레플루노마이드, NSAID, 예를 

- 47 -

[0245] 

[0246] 

들면, 이부프로펜, 코르티코스테로이드, 예를 들면, 프레드니솔론, 포스포디에스테라제 억제제, 아데노신 작용 

제, 항혈전제, 보체 억제제, 아드레날린성 제제; TNFα 또는 IL-1과 같은 염증촉진성 사이토킨에 의한 신호 전 

달을 방해하는 제제(예를 들면, IRAK, NIK, IKK, p38 또는 MAP 키나제 억제제); IL-1β 전환효소 억제제, TNF 

α 전환 효소 억제제, T 세포 신호 전달 억제제, 예를 들면, 키나제 억제제, 메탈로프로테이나제 억제제, 설파 

살라진, 아자티오프린, 6-머캅토퓨린, 안지오텐신 전환 효소 억제제, 가용성 사이토킨 수용체 및 이의 유도체 

(예를 들면, 가용성 p55 또는 p75 TNF 수용체, sIL-1RI, sIL-1RII, sIL-6R) 및 소염성 사이토킨(예를 들면, 

IL-4, IL-10, IL-11, IL-13 및 TGFβ)과 같은 제제와 배합될 수도 있다. 

본원에 기재된 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분과 배합될 수 있는 예시적인 크론병용 치료제의 예 

에는 TNF 길항제, 예를 들면, 항 TNF 항체, D2E7(국제 특허 출원 공보 제WO 97/29131호, HUMIRA 

), CA2(REMICADE 

), CDP 571, TNFR-Ig 작제물, (p75TNFRIgG(ENBREL 

) 및 p55TNFRIgG(Lenercept) 억제제 및 PDE4 억제제가 포함된다. 본 발명의 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 

부분은 코르티코스테로이드, 예를 들면, 부데노사이드 및 덱사메타손과 배합될 수 있다. 본 발명의 결합 단백 

질 또는 이의 항원 결합 부분은 또한 설파살라진, 5-아미노살리실산 및 올살라진과 같은 제제, 및 염증촉진성 

사이토킨, 예를 들면, IL-1, 예를 들면, IL-1β 전환효소 억제제 및 IL-1RA의 합성 또는 작용을 방해하는 제제 

와 배합될 수도 있다. 본 발명의 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분은 또한 T 세포 신호 전달 억제제, 예 

를 들면, 타이로신 키나제 억제제 6-머캅토퓨린과 함께 사용될 수도 있다. 본 발명의 결합 단백질 또는 이의 

항원 결합 부분은 IL-11과 배합될 수 있다. 본 발명의 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분은 메살라민, 프 

레드니손, 아자티오프린, 머캅토퓨린, 인플릭시마브, 메틸프레드니솔론 나트륨 석시네이트, 디페녹실레이트/아 

트로프 설페이트, 로퍼아미드 하이드로클로라이드, 메토트렉세이트, 오메프라졸, 폴레이트, 시프로플록사신/덱 

스트로스-물, 하이드로코돈 비타르트레이트/apap, 테트라사이클린 하이드로클로라이드, 플루오시노나이드, 메트 

로니다졸, 티메로살/붕산, 콜레스티라민/수크로스, 시프로플록사신 하이드로클로라이드, 하이오시아민 

설페이트, 메페리딘 하이드로클로라이드, 미다졸람 하이드로클로라이드, 옥시코돈 hcl/아세트아미노펜, 프로메 

타진 하이드로클로라이드, 인산나트륨, 설파메톡사졸/트리메토프림, 셀레콕시브, 폴리카보필, 프로폭시펜 나프 

실레이트, 하이드로코르티손, 멀티비타민, 발살라지드 이나트륨, 코데인 포스페이트/apap, 콜레세벨람 hcl, 시 

아노코발라민, 엽산, 레보플록사신, 메틸프레드니솔론, 나탈리주마브 및 인터페론-γ와 배합될 수 있다. 

본 발명의 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분과 배합될 수 있는 다발성 경화증용 치료제 예에는 코 

르티코스테로이드, 프레드니솔론, 메틸프레드니솔론, 아자티오프린, 사이클로포스파미드, 사이클로스포린, 메토 

트렉세이트, 4-아미노피리딘, 티자니딘, 인터페론-β1a(AVONEX 

, Biogen), 인터페론-β1b(BETASERON 

, Chiron/Berlex), 인터페론 α-n3(Interferon Sciences/Fujimoto), 인터페론-α(Alfa Wassermann/J&J), 인터 

페론 β1A-IF(Serono/Inhale Therapeutics), 페그인터페론 α2b(Enzon/Schering-Plough), 공중합체 1(Cop-1, 

COPAXONE 


, Teva Pharmaceutical Industries, Inc.), 고압 산소, 정맥내 면역글로불린, 클라브리빈, 다른 사람 사이토킨 

또는 성장인자 및 이의 수용체, 예를 들면, TNF, LT, IL-1β, IL-2, IL-6, IL-7, IL-8, IL-1A, IL-15, IL-16, 

IL-18, EMAP-II, GM-CSF, FGF 및 PDGF에 대한 항체 또는 이들의 길항제 또는 억제제가 포함되지만, 이에 한정되 

는 것은 아니다. 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 CD2, CD3, CD4, CD8, CD19, CD20, CD25, CD28, 

CD30, CD40, CD45, CD69, CD80, CD86, CD90과 같은 세포 표면 분자 또는 이들의 리간드에 대한 항체와 배합될 

수 있다. 본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분은 또한 FK506, 라파마이신, 미코페놀레이트 모페틸, 레플 

루노마이드, NSAID, 예를 들면, 이부프로펜, 포스포디에스테라제 억제제, 아데노신 작용제, 항혈전제, 보체 억 

제제, 아드레날린성 제제, TNFα 또는 IL-1과 같은 염증촉진성 사이토킨에 의한 신호 전달을 방해하는 제제(예 

를 들면, IRAK, NIK, IKK, p38 또는 MAP 키나제 억제제), IL-1β 전환효소 억제제, TACE 억제제, T 세포 신호 

전달 억제제, 예를 들면, 키나제 억제제, 메탈로프로테이나제 억제제, 설파살라진, 아자티오프린, 

6-머캅토퓨린, 안지오텐신 전환 효소 억제제, 가용성 사이토킨 수용체 및 이의 유도체(예를 들면, 가용성 p55 

또는 p75 TNF 수용체, sIL-1RI, sIL-1RII, sIL-6R), 소염성 사이토킨(예를 들면, IL-4, IL-10, IL-13 및 

- 48 -

[0247] 

[0248] 

[0249] 

[0250] 

[0251] 

[0252] 

TGFβ), COPAXONE 

및 카스파제 억제제, 예를 들면, 카스파제-1 억제제와 같은 제제와 배합될 수도 있다. 

본 발명의 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분은 또한 알렘투주마브, 드로나비놀, 유니메드, 다클리 

주마브, 미토크산트론, 크살리프로덴 하이드로클로라이드, 팜프리딘, 글라티라머 아세테이트, 나탈리주마브, 신 

나비돌, a-이뮤노킨 NNSO3, ABR-215062, AnergiX.MS, 케모킨 수용체 길항제, BBR-2778, 칼라구알린, CPI-1189, 

LEM(리포솜 캡슐화된 미토크산트론), THC.CBD(칸나비노이드 작용제) MBP-8298, 메소프람(PDE4 억제제), MNA- 

715, 항 IL-6 수용체 항체, 뉴로박스, 피르페니돈, 알로트랩 1258(RDP-1258), sTNF-R1, 탈람파넬, 테리플루노 

마이드, TGF-β2, 티플리모타이드, VLA-4 길항제(예를 들면, TR-14035, VLA4 Ultrahaler, Antegran- 

ELAN/Biogen), 인터페론 감마 길항제 및 IL-4 작용제와 같은 제제와 배합될 수도 있다. 

본 발명의 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분과 배합될 수 있는 협심증 치료 또는 예방용 치료제 예 

에는 아스피린, 니트로글리세린, 이소소르비드 모노니트레이트, 메토프롤롤 석시네이트, 아테놀롤, 메토프롤롤 

타르트레이트, 암로디핀 베실레이트, 딜티아젬 하이드로클로라이드, 이소소르비드 디니트레이트, 클로피도그렐 

비설페이트, 니페디핀, 아토바스타틴 칼슘, 염화칼륨, 푸로세미드, 심바스타틴, 베라파밀 hcl, 디곡신, 프로프 

라놀롤 하이드로클로라이드, 카베딜롤, 리시노프릴, 스피로노락톤, 하이드로클로로티아지드, 에날라프릴 말레에 

이트, 나돌롤, 라미프릴, 에녹사파린 나트륨, 헤라핀 나트륨, 발사르탄, 소탈롤 하이드로클로라이드, 페노피브 

레이트, 에제티미브, 부메타니드, 로사탄 포타슘, 리시노프릴/하이드로클로로티아지드, 펠로디핀, 캅토프릴 및 

비소프롤롤 푸마레이트가 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 

본 발명의 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분과 배합될 수 있는 강직 척추염의 치료 또는 예방용 치료제의 

이부프로펜, 디클로페낙 및 미소프로스톨, 나프록센, 멜록시캄, 인도메타신, 디클로페낙, 셀레콕시브, 로페콕시 

브, 설파살라진, 메토트렉세이트, 아자티오프린, 미노사이클린, 프레드니손, 에타너셉트 및 인플릭시마브가 포 

함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 

본 발명의 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분과 배합될 수 있는 천식의 치료 또는 예방용 치료제의 

예에는 알부테롤, 살메테롤/플루티카손, 몬텔루카스트 나트륨, 플루티카손 프로피오네이트, 부데소니드, 프레드 

니손, 살메테롤 크시나포에이트, 레발부테롤 hcl, 알부테롤 설페이트/이프라트로퓸, 프레드니솔론 나트륨 포스 

페이트, 트리암시놀론 아세토나이드, 베클로메타손 디프로피오네이트, 이프라트로퓸 브로마이드, 아지트로마이 

신, 피르부테롤 아세테이트, 프레드니솔론, 무수 테오필린, 메틸프레드니솔론 나트륨 석시네이트, 클라리트로마 

이신, 자피르루카스트, 포르모테롤 푸마레이트, 인플루엔자 바이러스 백신, 메틸프레드니솔론, 아목시실린 트리 

하이드레이트, 플루니솔라이드, 알레르기 주사, 크로몰린 나트륨, 펙소페나딘 하이드로클로라이드, 플루니솔라 

이드/멘톨, 아목시실린/클라불라네이트, 레보플록사신, 흡입기 보조 장치, 구아이페네신, 덱사메타손 나트륨 포 

스페이트, 목시플록사신 hcl, 독시사이클린 하이클레이트, 구아이페네신/d-메토판, p-에페드린/cod/클로페니르, 

가티플록사신, 세티리진 하이드로클로라이드, 모메타손 푸로에이트, 살메테롤 신나포에이트, 벤조나테이트, 세 

팔렉신, pe/하이드로코돈/클로르페니르, 세티리진 hcl/슈도에페드, 페닐에프린/cod/프로메타진, 코데인/프로메 

타진, 세프프로질, 덱사메타손, 구아이페네신/슈도에페드린, 클로페니라민/하이드로코돈, 네도크로밀 나트륨, 

테르부탈린 설페이트, 에피네프린, 메틸프레드니솔론 및 메타프로테레놀 설페이트가 포함되지만, 이에 한정되는 

것은 아니다. 

본 발명의 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분과 배합될 수 있는 COPD 치료 또는 예방용 치료제의 예 

에는 알부테롤 설페이트/이프라트로퓸, 이프라트로퓸 브로마이드, 살메테롤/플루티카손, 알부테롤, 살메테롤 크 

시나포에이트, 플루티카손 프로피오네이트, 프레드니손, 무수 테오필린, 메틸프레드니솔론 나트륨 석시네이트, 

몬텔루카스트 나트륨, 부데소니드, 포르모테롤 푸마레이트, 트리암시놀론 아세토나이드, 레보플록사신, 구아이 

페네신, 아지트로마이신, 베클로메타손 디프로피오네이트, 레발부테롤 hcl, 플루니솔라이드, 세프트리악손 나트 

륨, 아목시실린 트리하이드레이트, 가티플록사신, 자피르루카스트, 아목시실린/클라불라네이트, 플루니솔라이드 

/멘톨, 클로르페니라민/하이드로코돈, 메타프로테레놀 설페이트, 메틸프레드니솔론, 모메타손 푸로에이트, p-에 

페드린/cod/클로르페니르, 피르부테롤 아세테이트, p-에페드린/로라타딘, 테르부탈린 설페이트, 티오트로퓸 브 

로마이드, (R,R)-포르모테롤, TgAAT, 실로밀라스트 및 로플루밀라스트가 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니 

다. 


본 발명의 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분과 배합될 수 있는 HCV 치료 또는 예방용 치료제의 예 

에는 인터페론-알파-2a, 인터페론-알파-2b, 인터페론-알파 con1, 인터페론-알파-n1, 페길화된 인터페론-알파- 

2a, 페길화된 인터페론-알파-2b, 리바비린, 페그인터페론 알파-2b + 리바비린, 우르소데옥시콜린산, 글리시리진 

- 49 -

[0253] 

[0254] 

[0255] 

[0256] 

[0257] 

[0258] 

산, 티말파신, 막사민, VX-497 및 표적, 즉 HCV 폴리머라제, HCV 프로테아제, HCV 헬리카제, 및 HCV IRES(내부 

리보솜 진입 부위)의 간섭을 통해 HCV를 치료하는데 사용되는 임의의 화합물이 포함되지만, 이에 한정되는 것은 

아니다. 

본 발명의 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분과 배합될 수 있는 특발 폐섬유증 치료 또는 예방용 치료제의 

예에는 프레드니손, 아자티오프린, 알부테롤, 콜히친, 알부테롤 설페이트, 디곡신, 감마 인터페론, 메틸프레드 

니솔론 sod succ, 로라제팜, 푸로세미드, 리시노프릴, 니트로글리세린, 스피로놀락톤, 사이클로포스파미드, 이 

프라트로퓸 브로마이드, 악티노마이신 d, 알테플라제, 플루티카손 프로피오네이트, 레보플록사신, 메타프로테레 

놀 설페이트, 몰핀 설페이트, 옥시코돈 HCl, 염화칼륨, 트리암시놀론 아세토나이드, 무수 태크롤리무스, 칼슘, 

인터페론-α, 메토트렉세이트, 마이코페놀레이트 모페틸 및 인터페론-감마-1β가 포함되지만, 이에 한정되는 것 

은 아니다. 

본 발명의 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분과 배합될 수 있는 심근경색 치료 또는 예방용 치료제 

의 예에는 아스피린, 니트로글리세린, 메토프롤롤 타르트레이트, 에녹사파린 나트륨, 헤파린 나트륨, 클로피도 

그렐 비설페이트, 카베딜롤, 아테놀롤, 몰핀 설페이트, 메토프롤롤 석시네이트, 워파린 나트륨, 리시노프릴, 이 

소소르비드 모노니트레이트, 디곡신, 푸로세미드, 심바스타틴, 라미프릴, 테넥테플라제, 에날라프릴 

말레에이트, 토르세미드, 레타바제, 로사탄 포타슘, 퀴나프릴 hcl/mag carb, 부메타니드, 알테플라제, 에날라프 

릴라트, 아미오다론 하이드로클로라이드, 티로피반 hcl m-하이드레이트, 딜티아젬 하이드로클로라이드, 캡토프 

릴, 이르베사탄, 발사탄, 프로프라놀롤 하이드로클로라이드, 포시노프릴 나트륨, 리도카인 하이드로클로라이드, 

엡티피바타이드, 세파졸린 나트륨, 아트로핀 설페이트, 아미노카프린산, 스피로노락톤, 인터페론, 소탈롤 하이 

드로클로라이드, 염화칼륨, 도큐세이트 나트륨, 도부타민 hcl, 알프라졸람, 프라바스타틴 나트륨, 아토바스타틴 

칼슘, 미다졸람 염산염, 메페리딘 하이드로클로라이드, 이소소르비드 디니트레이트, 에피네프린, 도파민 하이드 

로클로라이드, 비발리루딘, 로수바스타틴, 엑제티미브/심바스타틴, 아바시미브 및 카리포라이드가 포함되지만, 

이에 한정되는 것은 아니다. 

본 발명의 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분과 배합될 수 있는 건선 치료 또는 예방용 치료제의 칼 

시포트리엔, 클로베타솔 프로피오네이트, 트리암시놀론 아세토나이드, 할로베타솔 프로피오네이트, 타자로텐, 

메토트렉세이트, 플루오시노나이드, 베타메타손 디프로프 보강형, 플루오시놀론 아세토나이드, 아시트레틴, 타 

르 샴푸, 베타메타손 발레레이트, 모메타손 푸로에이트, 케토코나졸, 프라목신/플루오시놀론, 하이드로코르티손 

발레레이트, 플루안드레놀라이드, 우레아, 베타메타손, 클로베타솔 프로피오네이트/에몰, 플루티카손 프로피오 

네이트, 아지트로마이신, 하이드로코르티손, 보습 포뮬라, 엽산, 데소니드, 피메크롤리무스, 콜타르, 디플로라 

손 디아세테이트, 에타너셉트 폴레이트, 젖산, 메톡살렌, hc/비스무스 subgal/znox/resor, 메틸프레드니솔론 아 

세테이트, 프레드니손, 선스크린, 할시노나이드, 살리실산, 안트랄린, 클로코르톨론 피발레이트, 석탄 추출물, 

콜타르/살리실산, 콜타르/살리실산/황, 데속시메타손, 디아제팜, 피부연화제, 플루오시노나이드/피부연화제, 광 

유/피마자유/na lact, 광유/땅콩유, 석유/이소프로필 미리스테이트, 소랄렌, 살리실산, 비누/트리브롬살란, 티 

메로살/붕산, 셀레콕시브, 인플릭시마브, 사이클로스포린, 알레파셉트, 에팔리주마브, 태크롤리무스, 피메크롤 

리무스, PUVA, UVB 및 설파살라진이 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 

본 발명의 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분과 배합될 수 있는 건선 관절염의 치료 또는 예방용 치 

료제의 예에는 메토트렉세이트, 에타너셉트, 로페콕시브, 셀레콕시브, 엽산, 설파살라진, 나프록센, 레플루노미 

드, 메틸프레드니솔론 아세테이트, 인도메타신, 하이드록시클로로퀸 설페이트, 프레드니손, 설린닥, 베타메타손 

디프로프 보강형, 인플릭시마브, 메토트렉세이트, 폴레이트, 트리암시놀론 아세토나이드, 디클로페낙, 디메틸설 

폭사이드, 피록시캄, 디클로페낙 나트륨, 케토프로펜, 멜록시캄, 메틸프레드니솔론, 나부메톤, 톨메틴 나트륨, 

칼시포트리엔, 사이클로스포린, 디클로페낙 나트륨/미소프로스톨, 플루오시노나이드, 글루코사민 설페이트, 골 

드 나트륨 티오말레이트, 하이드로코돈 비타르트레이트/apap, 이부프로펜, 리세드로네이트 나트륨, 설파디아진, 

티오구아닌, 발데콕시브, 알레파셉트 및 에팔리주마브가 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 

본 발명의 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분과 배합될 수 있는 재협착증의 치료 또는 예방용 치료 

제의 예에는 시롤리무스, 파클리탁셀, 에버롤리무스, 태크롤리무스, ABT-578 및 아세트아미노펜이 포함되지만, 

이에 한정되는 것은 아니다. 


본 발명의 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분과 배합될 수 있는 좌골신경통의 치료 또는 예방용 치 

료제의 예에는 하이드로코돈 비타르트레이트/apap, 로페콕시브, 사이클로벤자프린 hcl, 메틸프레드니솔론, 나프 

록센, 이부프로펜, 옥시코돈 hcl/아세트아미노펜, 셀렉콕시브, 발데콕시브, 메틸프레드니솔론 아세테이트, 프레 

- 50 -

[0259] 

[0260] 

[0261] 

[0262] 

드니손, 코데인 포스페이트/apap, 트라마돌 hcl/아세트아미노펜, 메탁사론, 멜록시캄, 메토카르바몰, 리도카인 

하이드로클로라이드, 디플로페낙 나트륨, 가바펜틴, 덱사메타손, 카리소프로돌, 케토롤락 트로메타민, 인도메타 

신, 아세트아미노펜, 디아제팜, 나부메톤, 옥시코돈 hcl, 티자니딘 hcl, 디클로페낙 나트륨/미소프로스톨, 프로 

폭시펜 냅실레이트/apap, asa/oxycod/옥시코돈 ter, 이부프로펜/하이드로코돈 bit, 트라마돌 hcl, 에토돌락, 프 

로폭시펜 hcl, 아미트립틸린 hcl, 카리소프로돌/코데인 phos/asa, 몰핀 설페이트, 멀티비타민, 나프록센 

나트륨, 오르페나드린 시트레이트 및 테마제팜이 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 

본 발명의 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분과 배합될 수 있는 전신 홍반 루푸스(SLE) 치료 또는 

예방용 치료제의 예에는 NSAID, 예를 들면, 디클로페낙, 나프록센, 이부프로펜, 피록시캄, 인도메타신, COX2 억 

제제, 예를 들면, 셀레콕시브, 로페콕시브, 발데콕시브, 항말라리아제, 예를 들면, 하이드록시클로로퀸, 스테로 

이드, 예를 들면, 프레드니손, 프레드니솔론, 부데노사이드, 덱사메타손, 세포독성제, 예를 들면, 

아자티오프린, 사이클로포스파미드, 미코페놀레이트 모페틸, 메토트렉세이트, PDE4 억제제 또는 퓨린 합성 억제 

제, 예를 들면, 셀셉트(CELLCEPT 

)가 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분은 또한 설파살 

라진, 5-아미노살리실산, 올살라진, 이뮤란 및 IL-1과 같은 염증촉진성 사이토킨의 합성, 생산 또는 작용을 방 

해하는 제제, 예를 들면, IL-1β 전환효소 억제제 및 IL-1ra와 같은 카스파제 억제제와 배합될 수도 있다. 본 

발명의 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분은 또한 T 세포 신호 전달 억제제, 예를 들면, 티로신 키나제 억 

제제, 또는 T 세포 활성화 분자를 표적으로 하는 분자, 예를 들면, CTLA-4-IgG 또는 항-B7 계열 항체 및 항-PD- 

1 계열 항체와 함께 사용될 수도 있다. 본 발명의 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분은 IL-11 또는 항사이 

토킨 항체, 예를 들면, 포노토리주마브(항-IFNg 항체) 또는 항수용체 수용체 항체, 예를 들면, 항-IL-6 수용체 

항체 및 B 세포 표면 분자에 대한 항체와 배합될 수 있다. 본 발명의 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분은 

또한 LJP 394(아베티무스), B 세포를 불활성화시키거나 고갈시키는 제제, 예를 들면, 리툭시마브(항-CD20 항 

체), 림포스태트-B(항-BlyS 항체), TNF 길항제, 예를 들면, 항-TNF 항체, D2E7(국제 특허 출원 공보 제WO 

97/29131호; HUMIRA 

), CA2(REMICADE 

), CDP571, TNFR-Ig 작제물(p75TNFRIgG(ENBREL 

) 및 p55TNFRIgG(Lenercept))와 함께 사용할 수도 있다. 

본 발명의 약제학적 조성물은 "치료학적 유효량" 또는 "예방학적 유효량"의 본 발명의 IL-1β 결합 단백질 또는 

이의 항원 결합 부분을 포함할 수 있다. "치료학적 유효량"이란 용어는 목적하는 치료 결과를 수득하기 위한 

투여량과 필요 시간 동안의 유효한 양을 의미한다. 본원에 기재된 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분의 치 

료학적 유효량은 당업자에 의해 결정될 수 있으며, 질병 상태, 연령, 성별 및 개체의 체중과 개체 내에서 목적 

하는 반응을 유도해내는 항체 또는 이의 항원 결합 부분의 능력과 같은 요인에 따라 달라질 수 있다. 또한, 치 

료학적 유효량은 치료학적 유익 효과가 항체 또는 이의 항원 결합 부분의 임의의 독성 또는 유해 효과를 능가하 

는 양이다. "예방학적 유효량"은 목적하는 예방학적 결과를 수득하기 위한 투여량 및 필요 시간 동안의 유효한 

양을 의미한다. 일반적으로, 예방학적 용량은 질환의 초기 단계전이나 초기 단계에서 피험자에 사용되기 때문 

에 예방학적 유효량은 치료학적 유효량보다 적은 양일 것이다. 

투여 계획은 목적하는 최적 반응(예를 들면, 치료학적 또는 예방학적 반응)을 제공하도록 조정될 수 있다. 예 

를 들면, 1회의 볼루스(bolus)를 투여할 수 있거나, 여러 분할 용량을 경시적으로 투여할 수 있거나, 치료 상황 

의 위급성에 따라 비례하여 감소 또는 증가된 용량을 투여할 수 있다. 특히, 투여 용이성과 투여량의 균일성을 

위해 비경구 조성물을 용량 단위 형태로 제형화하는 것이 유리하다. 본 명세서에 사용된 용량 단위 형태는 치 

료하는 포유동물 피험자에 대하여 단일 투여량으로서 적당한 물리적으로 분리된 단위를 의미한다. 따라서, 각 

단위는 필요한 약제학적 담체와 관련하여 목적하는 치료 효과를 제공하도록 계산된 소정 양의 활성 화합물을 포 

함한다. 본 발명의 투여 단위 형태에 대한 세부사항은 (a) 활성 화합물의 독특한 특징 및 수득하고자 하는 특 

정 치료 또는 예방학적 효과, 및 (b) 개체의 감응도 치료에서 상기 활성 화합물을 배합하는 기술 고유의 제한에 

따라 결정되고 직접 좌우된다. 


본 발명의 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 항원 결합 부분의 치료학적 또는 예방학적 유효량에 대한 예시적인 범 

위는 약 0.1 내지 약 20mg/kg, 약 1 내지 약 10mg/kg이지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 투여량 값은 경감되 

- 51 -

[0263] 

[0264] 

[0265] 

[0266] 

[0267] 

[0268] 

[0269] 

[0270] 

[0271] 

[0272] 

[0273] 

[0274] 

[0275] 

어야 하는 병태의 종류 및 중증도에 따라 달라질 수 있다. 임의의 특정 피험자의 경우, 특정 투여 계획은 개체 

의 필요 및 조성물 투여를 관리하거나 감독하는 자의 전문가적 판단에 따라 경시적으로 조정되어야 한다. 본 

명세서에 제시된 투여량 범위는 예시적일 뿐이며 청구된 조성물의 범위 또는 실시를 제한하고자 하는 것이 아님 

을 명심해야 한다. 

본원에 기재된 본 발명의 조성물 및 방법의 기타 적합한 변형 및 적합화가 명백하고 본 발명의 범위 또는 본원 

에 기재된 양태를 벗어나지 않고서도 적합한 등가물을 사용하여 이루어질 수 있음은 당업자에게 자명할 것이다. 

본 발명은 다음의 실시예를 참조하여 보다 명백하게 이해될 수 있을 것이며, 이러한 실시예는 설명하기 위해서 

만 포함된 것이지 본 발명을 제한하는 것으로 의도되지 않는다. 

실시예 

실시예 1: 항-사람 IL-1β 단클론 항체의 생산 

마우스 항-사람 IL-1β 단클론 항체는 다음과 같이 수득된다: 

실시예 1.1: 사람 IL-1β 항원에 의한 마우스의 면역화 

완전 프로인트 보조제 또는 Immunoeasy 보조제(Qiagen, Valencia, CA)와 혼합된 재조합 정제된 사람 IL-1β 

(R&D Systems, Minneapolis, MN, USA) 20㎍을 5마리의 6 내지 8주령 Balb/C, 5마리 C57B/6 마우스 및 5마리 AJ 

마우스에게 1일째 피하 주사한다. 24일째, 38일째 및 49일째, 불완전 프로인트 보조제 또는 Immunoeasy 보조제 

와 혼합된 재조합 정제된 사람 IL-1β 변이체 20㎍을 동일한 마우스에게 피하 주사한다. 84일째 또는 112일째 

또는 144일째, 재조합 정제된 사람 IL-1β 변이체 1㎍을 정맥내 주사한다. 

실시예 1.2: 하이브리도마의 생성 

실시예 1.1에 기재된 면역화된 마우스로부터 수득한 비장세포를 SP2/O-Ag-14 세포와 5:1의 비율로 문헌[참조: 

Kohler, G. and Milstein, (1975) Nature, 256: 495]에 기재된 확립된 방법에 따라 융합시켜 하이브리도마를 

생성한다. 융합 산물은 96웰 플레이트 중의 아자세린 및 하이포크산틴 함유 선택 배지에 웰당 2.5x10 6 

비장 세 

포의 밀도로 평판배양한다. 융합 후 7일 내지 10일 동안 하이브리도마 콜로니를 육안 관찰한다. 하이브리도마 

콜로니를 함유하는 각각의 웰의 상청액을 IL-1β에 대한 항체의 존재에 대해 ELISA로 검사한다(실시예 3.1에 기 

재된 바와 같음). 그 다음, IL-1β 특이적 활성을 나타내는 상청액은 IL-8의 MRC-5 생검에서 IL-1β를 중화시 

키는 능력에 대해 시험한다(실시예 3.2에 기재된 바와 같음). 

실시예 1.3: 항-사람 IL-1β 단클론 항체의 동정 및 확인 

IL-1β에 결합하고 IL-1β에 특이적으로 결합할 수 있고 특히 MRC-5 생검에서 IC50 값이 5nM 이하인 항체를 생산 

하는 하이브리도마를 한계희석법으로 증량하고 클로닝한다. 

하이브리도마 세포는 10% 이하의 IgG 소 태아 혈청을 함유하는 배지(Hyclone #SH30151, Logan, UT)에서 증대시 

킨다. 평균적으로, 각각의 하이브리도마 상청액(클론 집단으로부터 유래함) 250ml를 수확하고, 농축하고, 표준 

방법에 의해 단백질 A 친화성 크로마토그래피로 정제한다. IL-1β 활성을 억제하는 정제된 mAb의 능력을 실시 

예 3.2에 기재된 바와 같이 MRC-5 생검을 사용하여 측정한다. 

실시예 1.4: 각각의 쥐의 항-사람 IL-1β 단클론 항체에 대한 가변 영역의 아미노산 서열의 결정 

각각의 아미노산 서열 결정을 위해, 약 10x10 6 

개의 하이브리도마 세포를 원심분리하여 분리하고, Trizol(Gibco 

BRL/Invitrogen, Carlsbad, CA)로 제조업자의 지침에 따라 처리하여 총 RNA를 분리한다. 총 RNA는 

SuperScript First-Strand Synthesis System(Invitrogen, Carlsbad, CA)을 시용하여 제조업자의 지침에 따라 

제1 쇄 DNA 합성 처리한다. 올리고(dT)는 폴리(A) + 


RNA를 선택하기 위해 주요한 제1 쇄 합성에 사용한다. 그 

- 52 -

[0276] 

[0277] 

[0278] 

[0279] 

[0280] 

[0281] 

[0282] 

[0283] 

다음, 쥐의 면역글로불린 가변 영역의 증폭을 위해 설계한 프라이머(Ig-프라이머 세트, Novagen, Madison, WI) 

를 사용하여 제1 쇄 cDNA 산물을 PCR로 증폭시킨다. PCR 산물을 아가로스 겔에서 분리하고, 절제하여, 정제한 

후, TOPO 클로닝 키트로 pCR2.1-TOPO 벡터(Invitrogen, Carlsbad, CA)에 서브클로닝하고, TOP10 화학 적격 이. 

콜라이(Invitrogen, Carlsbad, CA)에 형질전환시킨다. 형질전환체에 콜로니 PCR을 수행하여 삽입체 함유 클론 

을 확인한다. QIAprep Miniprep 키트(Qiagen, Valencia, CA)를 사용하여 플라스미드 DNA를 삽입체 함유 클론 

으로부터 분리한다. 플라스미드 중의 삽입체를 양 쇄에 대해 서열분석하여, M13 정방향 및 M13 역방향 프라이 

머(Fermentas Life Sciences, Hanover MD)를 사용하여 가변 중쇄 또는 가변 경쇄 DNA 서열을 결정한다. 항- 

IL-1β 단클론 항체의 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열를 표 5에 니타낸다. 

실시예 2: 재조합 항-사람 IL-1β 항체 

실시예 2.1: 재조합 키메라 항-사람 IL-1β 항체의 작제 및 발현 

쥐의 항-사람 IL-1β 단클론 항체 1B12.4H4의 중쇄 불변 영역을 암호화하는 DNA는 세균에서 상동 재조합에 의해 

2개의 경첩 영역 아미노산 돌연변이를 함유하는 사람 IgG1 불변 영역을 암호화하는 cDNA 단편으로 교체하였다. 

이러한 돌연변이는 234번(EU 번호 부여) 위치에서 류신의 알라닌으로의 변화 및 235번 위치에서 류신의 알라닌 

으로의 변화이다[참조: Lund et al., (1991) J. Immunol. 147: 2657]. 상기 항체들 각각의 경쇄 불변 영역은 

사람 κ 불변 영역으로 교체하였다. pHybE 발현 플라스미드에 결합된 키메라 중쇄 및 경쇄 cDNA의 동시형질감 

염으로 전장 키메라 항체를 HEK 293-6E 세포에서 일시적으로 발현시켰다(미국 특허 출원 공보 제US 

2009/0239259호 참조). 재조합 키메라 항체를 함유하는 세포 상청액을 단백질 A 세파로스 크로마토그래피로 정 

제하고, 산 완충액을 첨가하여 결합된 항체를 용출시켰다. 항체를 중화시키고 PBS에 투석하였다. 

키메라 1B12.4H4를 암호화하는 중쇄 cDNA를 1B12.4H4 키메라 경쇄 cDNA(둘다 pHybE 벡터에 결합됨)와 함께 HEK 

293-6E 세포에 동시형질감염시켰다. 재조합 키메라 항체를 함유하는 세포 상청액을 단백질 A 세파로스 크로마 

토그래피로 정제하고, 산 완충액을 첨가하여 결합된 항체를 용출시켰다. 항체를 중화시키고 PBS에 투석하였다. 

그 다음, 정제된 키메라 항-사람 IL-1β 단클론 항체는 실시예 3.2에 기재된 바와 같이 MRC-5 세포에 의한 IL-8 

의 IL-1β 유도 생산을 억제하는 능력에 대해 시험하였다. 

실시예 2.2: 사람화된 항-사람 IL-1β 항체의 작제 및 발현 

실시예 2.2.1: 사람 항체 골격의 선택 

VH 및 VL CDR의 정준 구조를 문헌[참조: Huang et al., (2005) Methods 36: 35-42]의 방법에 따라 결정하였다. 

정준 구조에 근거하여, 적당한 수용체 사람 VH 골격 서열은 3-13, 3-53, 3-66, 4-34 및 4-59이었고, 적당한 수 

용체 사람 VL 골격 서열은 Vk1, 일부 Vk3, Vk5 및 Vk6 하위그룹을 포함하였다. hJH1-6 서열을 갖는 1B12VH 영 

역의 아미노산 109-122의 정렬에 근거하여 hJH4를 수용체 사람 FR4 서열로서 선택하였다. 

CDR 또는 골격 잔기를 "X"로 점진적으로 대체하여 4개의 추가의 VH 서열(1B12VHx, 1B12VHxx, 1B12VHxxx 및 

1B12VHxxxx)을 생성하였다. 1B12VH는 D 및 J 영역이 제거된 VH 서열이었다. Vector NTI 


소프트웨어의 Align X 프로그램(Invitrogen, Carlsbad, CA)으로 5개의 서열을 사람 VH 서열과 나란히 정렬하 

였다. 루프 형태 및 VH/VL 경계면에 중요한 전반적인 골격 또는 특정 잔기만에 집중하면, VH4-59는 1B12VH 서 

열과 전반적으로 가장 좋은 상동성을 가졌다. 1B12VH CDR 서열을 이식하기 위한 수용체 사람 생식계열 골격으 

로서 상기 골격을 선택하였다. 상이한 VH 계열로부터 대체 수용체 사람 골격으로서 VH3-53을 선택하였다. VH4 

서열을 정렬하여, 사람화된 서열의 면역원성 가능성을 최소화하기 위해 VH4 공통 서열로 변화될 수 있는 VH4-59 

의 골격 잔기를 확인하였다. VH4-59의 서열 정렬에 의해, VH4-59를 VH4 공통 서열로의 골격 잔기 변화를 도입 

할 필요는 없는 것으로 나타났다. 서열 정렬에 의해, 수용체 골격으로서 사용되는 VH4-59 서열은 우세한 공통 

서열인 것으로 나타났다. 마찬가지로, 모든 VH3 서열을 정렬하여, 면역원성 가능성을 최소화하기 위해 VH3 공 

통 서열로 변화될 수 있는 VH3-53의 골격 잔기를 확인하였다. 2개의 VH3 공통 서열 변화(I12V 및 V29F)가 확인 

되었다. 또한, 정렬에 의해, 수용체 골격으로서 사용되는 VH3-53 서열은 3개의 공지된 VH3-53 다형태로부터의 

제1 서열인 것으로 나타났다. Q1E 변화가 있거나 없는 모든 조합에서 9개의 제안된 역돌연변이 중에서 1 내지 

8개를 갖는 세트 1의 서열은 면연원성 가능성이 덜하거나, VH4-59 생식계열 서열로부터의 자연 발생 사람 VH 서 

열과 전반적으로 가장 좋은 동일성을 갖는 추가의 사람화된 1B12VH 서열을 생성하기 위해 이루어질 수 있다. 

- 53 -

[0284] 

[0285] 

[0286] 

[0287] 

[0288] 

[0289] 

[0290] 

VH4-59로부터 유래된 사람 항체에서 상기 제안된 역돌연변이의 발생률을 측정하기 위해, VH4-59로부터 유래된 

사람 VH 서열을 NCBI IgBlast 데이터베이스로부터 배치 파스타 파일(batch fasta file)에 다운로드하고, 

ClustalW로 정렬하고, 로고바(logobar)로 가시화하였다. 갭, 신호 펩타이드, CDR3 대부분 및 불변 영역 서열을 

제거하기 위해 output.eps 파일을 Adobe Illustrator로 편집하였다. 이러한 분석은 상기 제안된 역돌연변이 및 

마우스 VH CDR 잔기가 VH4-59로부터 유래될 수 있는 825개의 천연 사람 항체에서 제시되었는지를 이해하는데 유 

용하였다. 9개의 제안된(G27F, I29L, I48L, V67L, V71K, T73N, N76S, F78V 및 R94K) 역돌연변이 중에서, 

G27F, I29L, V67L, N76S, F78V 및 R94K는 이들 서열의 1% 이상에서 관찰되었다. 

2개의 I12V 및 V29F VH3 골격 공통 변화로부터 0 내지 2개를 갖는 모든 조합에서 10개의 제안된 역돌연변이 중 

에서 1 내지 9개를 갖는 세트 2의 서열은 면연원성 가능성이 덜하거나, VH3-53 생식계열 서열로부터의 자연 발 

생 사람 VH 서열과 전반적으로 가장 좋은 동일성을 갖는 추가의 사람화된 1B12VH 서열을 생성하기 위해 이루어 

질 수 있다. VH3-53로부터 유래된 사람 VH 서열을 NCBI IgBlast 데이터베이스로부터 배치 파스타 파일에 다운 

로드하고, ClustalW로 정렬하고, 로고바로 가시화하였다. 갭, 신호 펩타이드 및 불변 영역 서열을 제거하기 위 

해 output.eps 파일을 Adobe Illustrator로 편집하였다. 이러한 분석은 상기 제안된 역돌연변이 및 마우스 VH 

CDR 잔기가 VH3-53으로부터 유래될 수 있는 174개의 천연 사람 항체에서 제시되었는지를 이해하는데 

유용하였다. 10개의 제안된(A24V, F29L, V37I, V48L, S49G, F67L, R71K, N76S, L78V 및 R94K) 역돌연변이 중 

에서, A24V, F29L, R71K, N76S, L78V 및 R94K는 이들 서열의 1% 이상에서 관찰되었다. 

VL 서열에서 루프 구조 및 VH/VL 경계면을 지지하는 잔기는 국제 특허 출원 공보 제WO 2008/021156호에 요약되 

어 있다. CDR 또는 골격 잔기를 "X"로 점진적으로 대체하여 4개의 추가의 VL 서열(1B12VLx, 1B12VLxx, 

1B12VLxxx 및 1B12VLxxxx)을 생성하였다. 1B12VL은 J 영역이 제거된 VL 서열이다. Vector NTI 

소프트웨어의 Align X 프로그램으로 5개의 서열을 사람 Vk 서열과 나란히 정렬하였다. 2-1-1 정준 CDR 구조를 

갖는 사람 Vk 생식계열 서열만을 고려하였다. 1B12.4H4 VL 사람화를 위한 수용체 골격으로서 사람 Vk 생식계열 

1-33/018을 선택하였다. 상이한 하위그룹으로부터 사람화를 위한 백업 수용체 골격으로서 사람 Vk 생식계열 

6D41/A14를 선택하였다. 모든 사람 Vk1 생식계열 서열을 정렬하여, 면역원성 가능성을 최소화하기 위해 Vk1 공 

통 서열로 변화되어야 하는 1-33/018의 잠재적인 골격 잔기를 확인하였다. 2개의 Vk1 공통 서열 변화(F73L 및 

I83F)가 확인되었다. 이러한 변화는 사람화된 1B12VL 서열의 면역원성 가능성을 최소화하였다. 6D41/A14에 대 

하여 동일한 분석을 수행하지 않았는데, 이는 Vk6 하위그룹에서 2개의 상이한 생식계열 서열만이 존재하였기 때 

문이다. 

I83F Vk1 공통 서열 변화가 있거나 없는 모든 조합에서 7개의 제안된 역돌연변이(I2T, M4V, A43P, Y49S, G64S, 

D1E 및 Q3T) 중에서 1 내지 6개를 갖는 세트 1의 추가의 서열은 더 좋은 IgG 기능, 덜한 면연원성 가능성, 또는 

O18 생식계열 서열로부터의 자연 발생 사람 VL 서열과 전반적으로 더 좋은 동일성을 달성하기 위해 이루어질 수 

있다. 모든 조합에서 7개의 제안된 역돌연변이(V2T, M4V, A43P, K49S, G64S, D1E 및 V3T) 중에서 1 내지 6개 

를 갖는 세트 2의 추가의 서열은 더 좋은 IgG 기능, 덜한 면연원성 가능성, 또는 6D41/A14 생식계열 서열로부터 

의 자연 발생 사람 VL 서열과 전반적으로 더 좋은 동일성을 달성하기 위해 이루어질 수 있다. 

1-33/O18로부터 유래된 사람 Vk 서열을 NCBI IgBlast 데이터베이스로부터 배치 파스타 파일에 다운로드하고, 

ClustalW로 정렬하고, 로고바로 가시화하였다. 갭, 신호 펩타이드 및 불변 영역 서열을 제거하기 위해 

output.eps 파일을 Adobe Illustrator로 편집하였다. 이러한 분석은 상기 제안된 역돌연변이 및 마우스 VH 

CDR 잔기가 1-33/O18로부터 유래될 수 있는 260개의 천연 사람 항체에서 제시되었는지를 이해하는데 

유용하였다. 7개의 제안된 역돌연변이 중에서, D1E 및 Y49S는 이들 서열의 1% 이상에서 관찰되었다. 

실시예 2.2.2: 항-사람 IL-1β 단클론 항체 1B12.4H4의 사람화 

표 5에 기재된 항-IL-1β 항체 1B12.4H4 유래의 중쇄 CDR 서열을 2개의 사람 골격에 컴퓨터 모의실험으로(in 

silico) 이식시켰다. 제1 세트는 mAb h1B12VH.1z, h1B12VH.1 및 h1B12VH.1a를 포함한다. h1B12VH.1z는 VH4- 

59 및 JH4 골격 서열을 포함하는 CDR 이식된 사람화된 1B12 VH이다. h1B12VH.1은 N 말단 파이로글루타메이트 

형성을 방지하기 위해 Q1E 골격 변화를 추가로 도입한 사람화된 디자인이다. h1B12VH.1a는 Q1E 변화 및 모든 

가능한 골격 역돌연변이(G27F, I29L, I48L, V67L, V71K, T73N, N76S, F78V 및 R94K)를 포함하는 사람화된 디자 

인이다. 


제2 세트는 mAb h1B12VH.2z, h1B12VH.2 및 h1B12VH.2a를 포함한다. h1B12VH.2z는 VH3-53 및 hJH4 골격 서열을 

- 54 -

[0291] 

[0292] 

[0293] 

포함하는 CDR 이식된 사람화된 1B12 VH이다. h1B12VH.2는 I12V 및 V29F VH3 골격 공통 서열 변화를 도입한 사 

람화된 디자인이다. h1B12VH.2a는 VH3 골격 공통 서열 변화 및 모든 가능한 골격 역돌연변이[A24V, F29L (F는 

VH3 공통 서열이다), V37I, V48L, S49G, F67L, R71K, N76S, L78V 및 R94K]를 포함하는 사람화된 디자인이다. 

N 결합된 글리코실화 패턴(N-{P}-S/T)은 상기 제안된 작제물에서는 전혀 발견되지 않았다. 모든 역돌연변이가 

필요한 것은 아닐 수 있다. 세트 1에서의 역 돌연변이 I48L, V71K 및 T73N과 세트 2에서의 역돌연변이 F29L, 

V37I, V48L, S49G 및 F67L은 사람 항체에서 제시되지 않았다. 일부 역돌연변이는 원하는 경우에 후속적인 친화 

성 성숙 과정 동안 제거될 수 있다. 

표 5에 기재된 항-IL-1β 항체 1B12.4H4 유래의 경쇄 CDR 서열을 2개의 사람 골격에 컴퓨터 모의실험으로 이식 

시켰다. 제1 세트는 mAb h1B12VL.1z, h1B12VL.1, h1B12VL.1a 및 h1B12VL.1b를 포함한다. h1B12VL.1z는 O18 

및 Jk2 골격 서열을 포함하는 직접 CDR 이식된 사람화된 1B12 VL이다. h1B12VL.1은 I83F Vk1 골격 공통 서열 

변화를 도입한 사람화된 디자인이다. h1B12VL.1a는 공통 서열 변화 및 5개의 골격 역돌연변이(I2T, M4V, A43P, 

Y49S 및 G64S)를 포함하는 사람화된 디자인이다. h1B12VL.1b는 공통 서열 변화 및 7개의 골격 역돌연변이(5개 

의 상기 및 2개의 추가의 N 말단 역돌연변이 D1E 및 Q3T)를 포함하는 사람화된 디자인이다. 제2 세트는 mAb 

h1B12VL.2, h1B12VL.2a 및 h1B12VL.2b를 포함한다. h1B12VL.2는 A14 및 Jk2 골격 서열을 포함하는 직접 CDR 

이식된 사람화된 1B12 VL이다. h1B12VL.2a는 5개의 골격 역돌연변이(V2T, M4V, A43P, K49S 및 G64S)를 포함하 

는 사람화된 디자인이다. h1B12VL.2b는 7개의 골격 역돌연변이(5개의 상기 및 2개의 추가의 N 말단 역돌연변이 

D1E 및 V3T)를 포함하는 사람화된 디자인이다. N 결합된 글리코실화 패턴(N-{P}-S/T)은 상기 제안된 작제물에 

서는 전혀 발견되지 않았다. 모든 역돌연변이가 필요한 것은 아닐 수 있다. 세트 1에서의 역돌연변이 I2T, 

Q3T, M4V, A43P 및 G64S는 사람 항체에서 제시되지 않았다. 6D41/A14 생식계열 서열로부터 유래된 사람 항체는 

매우 적었다. 일부 역돌연변이는 원하는 경우에 후속적인 친화성 성숙 과정 동안 제거될 수 있다. 

표 6은 본 발명의 사람화된 항-hIL-1β의 VH 및 VL 영역의 아미노산 서열의 목록이다. 

표 6 

- 55 - 


[0294] 

[0295] 

[0296] 

[0297] 

실시예 2.2.3: 사람화된 항체의 작제 

상기 서열은 표준 DNA 합성 또는 증폭 기술을 사용하여 핵산을 합성하고, 세포에서 발현시키기 위해 표준 재조 

합 DNA 기술을 사용하여 목적하는 항체 단편을 발현 벡터에 조립하는데 사용될 수 있다. 예를 들면, 핵산 코돈 

은 아미노산 서열로부터 결정되며, 올리고뉴클레오타이드 DNA는 Blue Heron Biotechnology, Inc. 

(www.blueheronbio.com)(Bothell, WA USA)에 의해 합성된다. 올리고뉴클레오타이드를 300 내지 2000개 염기쌍 

의 이본쇄 DNA 단편으로 조립하고, 플리스미드 벡터에 클로닝하고, 서열 확인한다. 효소적 과정을 사용하여 클 

로닝된 단편을 조립하여 완전한 유전자를 수득하고 발현 벡터에 서브클로닝한다[참조: 미국 특허 공보 제 

7,306,914호, 제7,297,541호, 제7,279,159호, 제7,150,969호; 및 미국 특허 출원 공보 제2008/0115243호, 제 

2008/0102475호, 제2008/0081379호, 제2008/0075690호, 제2008/0063780호, 제2008/0050506호, 제2008/0038777 

호, 제2008/0022422호, 제2007/0289033호, 제2007/0287170호, 제2007/0254338호, 제2007/0243194호, 제 

2007/0225227호, 제2007/0207171호, 제2007/0150976호, 제2007/0135620호, 제2007/0128190호, 제2007/0104722 

호, 제2007/0092484호, 제2007/0037196호, 제2007/0028321호, 제2006/0172404호, 제2006/0162026호, 제 

2006/0153791호, 제2003/0215458호 및 제2003/0157643호]. 

예를 들면, 컴퓨터 모의실험으로 작제된 상기한 사람화된 항체를 pHybE 벡터의 다중 클로닝 부위에 삽입할 수 

있다(미국 특허 출원 공보 제US2009/0239259호 참조). 세균 콜로니를 분리하고, 플라스미드 DNA를 추출하고, 

cDNA 삽입체를 전부 서열 분석한다. 각각의 항체에 상응하는 정확한 사람화된 중쇄 및 경쇄를 HEK 293-6E 세포 

에 동시형질감염시켜 사람화된 전장 항-사람 IL-1β 항체를 일시적으로 생산한다. 중쇄 이식된 cDNA 및 경쇄 

이식된 cDNA를 함유하는 pHybE 벡터를 HEK 293-6E 세포에 동시형질감염시켰다. 재조합 키메라 항체를 함유하는 

세포 상청액을 단백질 A 세파로스 크로마토그래피로 정제하고, 산 완충액을 첨가하여 결합된 항체를 

용출시킨다. 항체를 중화시키고 PBS에 투석한다. 사람화된 항체를 표 7에 기재한다. 

- 56 - 


[0298] 

[0299] 

[0300] 

VH 및 VL 셔플링에 근거하여 사람화된 1B12 항체의 다양한 조합을 표 7에 열거한다. 

표 7 

표 8은 기능 특성화를 위해 IgG 발현 벡터에 클로닝된 쥐의 단클론 항체 1B12의 사람화된 가변 영역을 

제공한다. CDR은 굵은 글씨체로 나타낸다. 

- 57 - 


[0301] 

표 8 

- 58 - 


[0302] 

- 59 - 


[0303] 

- 60 - 


[0304] 

- 61 - 


[0305] 

[0306] 

[0307] 

[0308] 

실시예 3: 사람 IL-1β 항체의 기능 확인 

실시예 3.1: IL-1β 효소 결합된 면역흡착 검정 프로토콜 

항-IL-1β mAb가 사람 IL-1β에 결합하는지를 측정하기 위해, ELISA 플레이트(Nunc, MaxiSorp, Rochester, N 

Y)를 피어스 코트 완충액(Pierce Coat buffer) 중에 2㎍/ml로 희석된 항-사람 Fc 항체(Jackson 

Immunoresearch, West Grove, PA)와 함께 4℃에서 밤새 항온처리하였다. 플레이트를 세척 완충액(0.05%의 트 

윈 20을 함유하는 PBS)으로 5회 세척하고, 웰당 슈퍼블록 차단 완충액(Thermo scientific, #37515) 200㎕로 25 

℃에서 1시간 동안 차단하였다. 플레이트를 태핑(tapping)하여 차단 완충액을 제거하고, 10% 슈퍼블록 및 0.5% 

트윈 20을 함유하는 PBS 중의 2㎍/ml의 항체 각각을 웰당 100㎕로 웰에 첨가하고 25℃에서 1시간 동안 항온처리 

하였다. 웰을 1XPBST로 5회 세척하고, 1㎍/ml의 비오틴화된 항원을 1:6 연속 희석액으로 적정하였다(10% 슈퍼 

블록 및 0.05% 트윈 20을 함유하는 PBS 중의 pg 내지 ㎍의 범위 동안). 이어서, 항원의 각각의 희석액을 플레 

이트에 첨가하고 25℃에서 1시간 동안 항온처리하였다. 웰을 1XPBST로 5회 세척하고, polyHRP 스트렙타비딘 

(KPL #474-3000, Gaithersburg, MD)과 함께 25℃에서 1시간 동안 항온처리하였다. 웰을 1XPBST로 5회 세척하 

고, ULTRA-TMB ELISA(Pierce, Rockford, IL) 100㎕를 각각의 웰에 첨가하였다. 발색 현상에 따라, 반응을 1N 

HCl로 정지시키고, 450nM에서 흡광도를 측정하였다. 그 결과를 표 9에 나타내며, 수치는 사람 IL-1β에 대한 

사람 항-IL-1β 항체의 결합을 나타낸다. 

- 62 - 


[0309] 

[0310] 

[0311] 


[0313] 

[0314] 

실시예 3.2: 사람화된 IL-1β 항체의 중화 효능 

표 9 

본 발명의 항-사람 IL-1β 항체의 기능 활성을 검사하기 위해, IL-1β 활성을 억제하는 항체의 능력을 측정하는 

MRC-5 검정법에 항체를 사용하였다. MRC-5 세포주는 용량 의존적 방식으로 사람 IL-1β에 반응하여 IL-8을 생 

산하는 사람 폐 섬유아세포 세포주이다. MRC-5 세포는 처음에는 ATCC로부터 입수하였고, 10% FBS 완전 MEM에서 

계대배양하고, 5% CO2 항온배양기에서 37℃에서 증식시켰다. IL-1β에 대한 항체의 중화 효능을 측정하기 

위해, 항체(50㎕)를 96웰 플레이트(1x10 -7 

내지 1x10 -15 

M 최종 농도 범위)에 첨가하고, 사람 IL-1β(50pg/mL 최 

종 농도) 50㎕와 함께 37℃, 5% CO2에서 1시간 동안 예비항온처리했다. 그 다음, 항원-항체 복합체(100㎕)를 

MRC-5 세포(100㎕/웰에서 1E5/ml의 농도로 24시간 전에 플레이팅됨)에 첨가했다. 검정 플레이트를 5% CO2 항온 

배양기에서 37℃에서 밤새 항온처리하였다. IL-8 생산을 억제하는 능력에 의해 항체 효능을 측정했다. 화학발 

광 검정법에 의해 사람 IL-8 생산을 측정하였다. 표 10은 사람 IL-1β에 대한 항체 효능을 요약한다. 

표 10 

실시예 3.3: 표면 플라스몬 공명에 의한 IL-1β 항체의 친화성 측정 

BIACORE 검정(Biacore, Inc., Piscataway, NJ)은 결합 속도(on-rate) 및 해리 속도(off-rate) 상수의 반응속 

도론적 측정에 의해 항체의 친화성을 측정한다. 재조합 정제된 사람 IL-1β에 대한 항체의 결합은 25℃에서 전 

개 HBS-EP(10mM HEPES[pH 7.4], 150mM NaCl, 3mM EDTA 및 0.005% 계면활성제 P20)를 이용하는 Biacore 3000 

기구(Biacore AB, Uppsala, Sweden)에 의한 표면 플라스몬 공명 측정에 의해 측정된다. 달리 지시되지 않는 

다면, 모든 화학약품은 Biacore 


AB(Uppsala, Sweden)에서 입수하였다. 표준 아민 커플링 키트를 사용하여 제조업자의 지침 및 절차에 따라 

CM5 연구용 바이오센서 칩을 따라 10mM 아세트산나트륨(pH 4.5)으로 희석한 약 5000RU의 염소 항-마우스 IgG, 

(Fcγ), 단편 특이적 다클론 항체(Pierce Biotechnology Inc, Rockford, Illinois)를 25㎍/ml로 직접 고정화시 

켰다. 바이오센서 표면의 미반응 잔기를 에탄올아민으로 차단시켰다. 플로우 셀(flow cell) 2 및 4의 개질된 

카복시메틸 덱스트란 표면을 반응 표면으로서 사용하였다. 플로우 셀 1 및 3의 염소 항-마우스 IgG 무함유 비 

- 63 -

[0315] 

[0316] 

[0317] 

[0318] 


[0320] 

개질 카복시메틸 덱스트란을 참조 표면으로서 사용하였다. 반응속도론적 분석의 경우, Biaevaluation 4.0.1 소 

프트웨어를 사용하여 1:1 랭뮤어(Langmuir) 결합 모델 유래의 속도 방정식을 총 8개 주입물의 결합 및 해리 상 

에 동시에 적합화시켰다(글로벌 피트 분석을 사용함). 염소 항-마우스 IgG 특이적 반응 표면을 따라 포획하기 

위해, 정제된 항체를 HEPES 완충 식염수에 희석하였다. 리간드(25㎍/ml)로서 포획되는 마우스 항체를 5㎕/분의 

유속으로 반응 매트릭스 위에 주입하였다. 25㎕/분의 연속 유속 하에 결합 속도 상수(Kon; 단위 M -1 

s -1 

) 및 해리 

속도 상수(koff; 단위 s -1 

)를 측정하였다. 속도 상수는 10 내지 200 nM 범위의 10가지 상이한 항원 농도에서 반 

응속도론적 결합을 측정하여 수득된다. 그 다음, 항체와 표적 항원 사이의 반응의 평형 해리 상수(단위 M)는 

KD = koff/kon 식에 의해 반응속도론적 속도 상수로부터 계산하였다. 결합을 시간의 함수로 기록하고 반응속도론 

적 속도 상수를 계산한다. 본 검정에서, 10 6 

M -1 

s -1 

만큼 빠른 결합 속도와 10 -6 

s -1 

만큼 느린 해리 속도가 측정될 

수 있다. 표 11은 사람 항-IL-1β 항체에 대한 친화성 측정을 나타낸다. 

표 11 

본 발명은 분자생물학 분야에 공지된 모든 기술을 참조로 인용한다. 이러한 기술에는 다음의 문헌에 기재된 기 

술이 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다: 

참조 인용 

본원 전반에 걸쳐 인용될 수 있는 모든 인용 문헌(논문, 특허, 특허원 및 웹사이트를 포함함)의 내용은 본원에 

인용된 문헌 그 자체로 임의의 목적을 위해 전문이 본원에 참조로 분명하게 포함된다. 달리 지시되지 

않는다면, 본 발명의 실시는 면역학, 분자생물학 및 세포생물학의 통상적인 기술을 적용할 것이며, 이는 당업계 

에 익히 공지되어 있다. 

등가물 

- 64 - 


[0321] 

본 발명은 발명의 취지 또는 필수적인 특징을 벗어나지 않으면서 기타 특정 형태로 구현될 수 있다. 따라서, 

모든 관점에서 상기한 양태들은 본원에 기재된 발명을 한정하기보다는 예시하기 위해 제공된 것으로 간주되어야 

한다. 그러므로, 상기한 설명이 본 발명의 범위를 정하는 것이 아니라 첨부된 특허청구범위가 본 발명의 범위 

를 정하는 것이며, 이에 따라 특허청구범위와 균등한 의미 및 범위에 속하는 모든 변형은 본원에 포함되는 것으 

로 의도된다. 

서 열 목 록 

ABBOTT LABORATORIES 

IL-1 BINDING PROTEINS 

10201WO01 

61/251,856 

2009-10-15 

46 

KopatentIn 1.71 

1 

153 

PRT 

Homo sapiens 

1 

SEQUENCE LISTING 

Ala Pro Val Arg Ser Leu Asn Cys Thr Leu Arg Asp Ser Gln Gln Lys 

1 5 10 15 

Ser Leu Val Met Ser Gly Pro Tyr Glu Leu Lys Ala Leu His Leu Gln 

20 25 30 

Gly Gln Asp Met Glu Gln Gln Val Val Phe Ser Met Ser Phe Val Gln 

35 40 45 

Gly Glu Glu Ser Asn Asp Lys Ile Pro Val Ala Leu Gly Leu Lys Glu 

50 55 60 

Lys Asn Leu Tyr Leu Ser Cys Val Leu Lys Asp Asp Lys Pro Thr Leu 

65 70 75 80 

Gln Leu Glu Ser Val Asp Pro Lys Asn Tyr Pro Lys Lys Lys Met Glu 

85 90 95 

Lys Arg Phe Val Phe Asn Lys Ile Glu Ile Asn Asn Lys Leu Glu Phe 

- 65 - 


100 105 110 

Glu Ser Ala Gln Phe Pro Asn Trp Tyr Ile Ser Thr Ser Gln Ala Glu 

115 120 125 

Asn Met Pro Val Phe Leu Gly Gly Thr Lys Gly Gly Gln Asp Ile Thr 

130 135 140 

Asp Phe Thr Met Gln Phe Val Ser Ser 

145 150 

2 

330 

PRT 

Homo sapiens 

2 

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Phe Leu Ala Pro Ser Ser Lys 

1 5 10 15 

Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 

20 25 30 

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 

35 40 45 

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 

50 55 60 

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 

65 70 75 80 

Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 

85 90 95 

Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 

100 105 110 

Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 


Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 

130 135 140 

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 

145 150 155 160 

- 66 - 


Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 

165 170 175 

Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 

180 185 190 

His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 

195 200 205 

Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 

210 215 220 

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu 

225 230 235 240 

Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 

245 250 255 

Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 

260 265 270 

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 

275 280 285 

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn 

290 295 300 

Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 

305 310 315 320 

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 

3 

330 

PRT 

Homo sapiens 

3 

325 330 

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 

1 5 10 15 

Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 

20 25 30 

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 

- 67 - 


35 40 45 

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 

50 55 60 

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 

65 70 75 80 

Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 

85 90 95 

Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 

100 105 110 

Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 


Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 

130 135 140 

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 

145 150 155 160 

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 

165 170 175 

Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 

180 185 190 

His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 

195 200 205 

Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 

210 215 220 

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu 

225 230 235 240 

Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 

245 250 255 

Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 

260 265 270 

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 

275 280 285 

- 68 - 


Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn 

290 295 300 

Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 

305 310 315 320 

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 

4 

106 

PRT 

Homo sapiens 

4 

325 330 

Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 

1 5 10 15 

Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 

20 25 30 

Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 

35 40 45 

Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 

50 55 60 

Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 

65 70 75 80 

His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 

85 90 95 

Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 

5 

105 

PRT 

Homo sapiens 

5 

100 105 

Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu 

1 5 10 15 

- 69 - 


Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe 

20 25 30 

Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val 

35 40 45 

Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys 

50 55 60 

Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser 

65 70 75 80 

His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu 

85 90 95 

Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser 

6 

4 

PRT 

100 105 

Artificial Sequence 

Description of Artificial Sequence: Synthetic 

peptide 

MOD_RES 

(3)..(3) 

Any amino acid 

6 

Phe Gly Xaa Gly 

1 

7 

9 

PRT 



peptide 

MOD_RES 

(2)..(9) 


- 70 - 


7 

Cys Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa 

1 5 

8 

5 

PRT 



8 

peptide 

Leu Glu Trp Ile Gly 

1 5 

9 

4 

PRT 



peptide 

MOD_RES 

(3)..(3) 


9 

Trp Gly Xaa Gly 

1 

10 

30 

PRT 

Homo sapiens 

10 

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 

1 5 10 15 

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser 

20 25 30 

- 71 - 


11 

14 

PRT 

Homo sapiens 

11 

Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly 

1 5 10 

12 

32 

PRT 

Homo sapiens 


Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys 

1 5 10 15 

Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg 

13 

11 

PRT 

Homo sapiens 

13 

20 25 30 

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 

1 5 10 

14 

30 

PRT 

Homo sapiens 

14 

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Ile Gln Pro Gly Gly 

1 5 10 15 

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser 

15 

20 25 30 

- 72 - 


14 

PRT 

Homo sapiens 

15 

Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser 

1 5 10 

16 

32 

PRT 

Homo sapiens 

16 

Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln 

1 5 10 15 

Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg 

17 

11 

PRT 

Homo sapiens 

17 

20 25 30 

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 

1 5 10 

18 

23 

PRT 

Homo sapiens 

18 

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 

1 5 10 15 

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys 


15 

PRT 

20 

- 73 - 


Homo sapiens 


Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr 

1 5 10 15 

20 

32 

PRT 

Homo sapiens 

20 

Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 

1 5 10 15 

Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys 

21 

10 

PRT 

Homo sapiens 

21 

20 25 30 

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 

1 5 10 

22 

23 

PRT 

Homo sapiens 

22 

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Phe Leu Ser Val Thr Pro Gly 

1 5 10 15 

Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys 

23 

15 

PRT 

20 

Homo sapiens 

- 74 - 


23 

Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ala Pro Lys Leu Leu Ile Lys 

1 5 10 15 

24 

32 

PRT 

Homo sapiens 

24 

Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 

1 5 10 15 

Phe Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys 

25 

10 

PRT 

Homo sapiens 

25 

20 25 30 

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 

1 5 10 

26 


PRT 



26 

polypeptide 

Gln Val His Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Ala Pro Ser Gln 

1 5 10 15 

Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Asp Tyr 

20 25 30 

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 

35 40 45 

Gly Leu Ile Trp Gly Gly Gly Asp Thr Tyr Tyr Asn Ser Pro Leu Lys 

- 75 - 


50 55 60 

Ser Arg Leu Ser Ile Arg Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Leu 

65 70 75 80 

Lys Met Asn Ser Leu Gln Thr Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 

85 90 95 

Lys Gln Arg Thr Leu Trp Gly Tyr Asp Leu Tyr Gly Met Asp Tyr Trp 

100 105 110 

Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 

27 

107 

PRT 

115 120 



27 

polypeptide 

Glu Thr Thr Val Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Met Ala Ile Gly 

1 5 10 15 

Glu Lys Val Thr Ile Arg Cys Ile Thr Ser Thr Asp Ile Asp Val Asp 

20 25 30 

Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Glu Pro Pro Lys Leu Leu Ile 

35 40 45 

Ser Gln Gly Asn Thr Leu Arg Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Ser 

50 55 60 

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Val Phe Ile Ile Glu Asn Met Leu Ser 

65 70 75 80 

Glu Asp Val Ala Asp Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Asp Asn Leu Pro Leu 

85 90 95 

Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys 

28 

100 105 

- 76 - 



PRT 



28 

polypeptide 

Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 

1 5 10 15 

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Asp Tyr 

20 25 30 

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 

35 40 45 


50 55 60 

Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu 

65 70 75 80 

Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 

85 90 95 

Arg Gln Arg Thr Leu Trp Gly Tyr Asp Leu Tyr Gly Met Asp Tyr Trp 

100 105 110 

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 

29 


PRT 




29 

polypeptide 

Glu Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 

1 5 10 15 

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile Ser Asp Tyr 

- 77 - 


20 25 30 

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile 

35 40 45 


50 55 60 

Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu 

65 70 75 80 


85 90 95 


100 105 110 


30 


PRT 




30 

polypeptide 

Glu Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 

1 5 10 15 

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Asp Tyr 

20 25 30 

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 

35 40 45 


50 55 60 

Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Ser Leu 

65 70 75 80 


- 78 - 


85 90 95 


100 105 110 


31 


PRT 




31 

polypeptide 

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Ile Gln Pro Gly Gly 

1 5 10 15 

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser Asp Tyr 

20 25 30 

Gly Val Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 

35 40 45 

Ser Leu Ile Trp Gly Gly Gly Asp Thr Tyr Tyr Asn Ser Pro Leu Lys 

50 55 60 

Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 

65 70 75 80 

Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 

85 90 95 


100 105 110 


32 


PRT 



- 79 - 



32 

polypeptide 

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 

1 5 10 15 

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 

20 25 30 

Gly Val Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 

35 40 45 

Ser Leu Ile Trp Gly Gly Gly Asp Thr Tyr Tyr Asn Ser Pro Leu Lys 

50 55 60 

Ser Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 

65 70 75 80 


85 90 95 


100 105 110 


33 


PRT 




33 

polypeptide 

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 

1 5 10 15 

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Thr Leu Ser Asp Tyr 

20 25 30 

Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Leu 

35 40 45 

- 80 - 



50 55 60 

Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Thr Val Tyr Leu 

65 70 75 80 


85 90 95 


100 105 110 


34 

107 

PRT 




34 

polypeptide 


1 5 10 15 

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ile Thr Ser Thr Asp Ile Asp Val Asp 

20 25 30 

Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 

35 40 45 

Tyr Gln Gly Asn Thr Leu Arg Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 

50 55 60 

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 

65 70 75 80 

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Asp Asn Leu Pro Leu 

85 90 95 

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 

35 

100 105 

- 81 - 


107 

PRT 



35 

polypeptide 


1 5 10 15 


20 25 30 

Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 

35 40 45 

Tyr Gln Gly Asn Thr Leu Arg Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 

50 55 60 


65 70 75 80 

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Asp Asn Leu Pro Leu 

85 90 95 


36 

107 

PRT 

100 105 



36 

polypeptide 

Asp Thr Gln Val Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 

1 5 10 15 


20 25 30 

Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Pro Pro Lys Leu Leu Ile 

- 82 - 


35 40 45 


50 55 60 


65 70 75 80 


85 90 95 


37 

107 

PRT 

100 105 



37 

polypeptide 

Glu Thr Thr Val Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 

1 5 10 15 


20 25 30 

Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Pro Pro Lys Leu Leu Ile 

35 40 45 


50 55 60 


65 70 75 80 


85 90 95 


38 

107 

100 105 

- 83 - 


PRT 



38 

polypeptide 

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Phe Leu Ser Val Thr Pro Gly 

1 5 10 15 

Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Ile Thr Ser Thr Asp Ile Asp Val Asp 

20 25 30 

Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ala Pro Lys Leu Leu Ile 

35 40 45 

Lys Gln Gly Asn Thr Leu Arg Pro Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 

50 55 60 

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Glu Ala 

65 70 75 80 

Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Ser Asp Asn Leu Pro Leu 

85 90 95 


39 

107 

PRT 

100 105 



39 

polypeptide 

Asp Thr Val Val Thr Gln Ser Pro Ala Phe Leu Ser Val Thr Pro Gly 

1 5 10 15 


20 25 30 

Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile 

35 40 45 

- 84 - 



50 55 60 


65 70 75 80 


85 90 95 


40 

107 

PRT 

100 105 



40 

polypeptide 

Glu Thr Thr Val Thr Gln Ser Pro Ala Phe Leu Ser Val Thr Pro Gly 

1 5 10 15 


20 25 30 

Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile 

35 40 45 


50 55 60 


65 70 75 80 


85 90 95 


41 

5 

PRT 

100 105 

- 85 - 




41 

peptide 

Asp Tyr Gly Val Ser 

1 5 

42 

16 

PRT 



42 

peptide 

Leu Ile Trp Gly Gly Gly Asp Thr Tyr Tyr Asn Ser Pro Leu Lys Ser 

1 5 10 15 

43 

14 

PRT 



43 

peptide 

Gln Arg Thr Leu Trp Gly Tyr Asp Leu Tyr Gly Met Asp Tyr 

1 5 10 

44 

11 

PRT 



44 

peptide 

Ile Thr Ser Thr Asp Ile Asp Val Asp Met Asn 

1 5 10 

45 

- 86 - 


7 

PRT 



45 

peptide 

Gln Gly Asn Thr Leu Arg Pro 

1 5 

46 

9 

PRT 



46 

peptide 

Leu Gln Ser Asp Asn Leu Pro Leu Thr 

1 5 

- 87 -

(19) 대한민국특허청(KR) (12) 공개특허공보(A) - Questel

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?