(19) 대한민국특허청(KR) (12) 공개특허공보(A) - Questel

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인자를 포함한다. 특정 양태에서, 에피토프 결정인자는 아미노산, 당 측쇄, 포스포릴 또는 설포닐과 같은 분자
의 화학적 활성 표면 그룹들을 포함하고, 특정 양태에서는 특이적인 3차원 구조 특징 및/또는 특이적인 하전 특
징을 가질 수 있다. 에피토프는 항체에 의해 결합되는 항원의 영역이다. 따라서, 에피토프는 특이적 결합 파
트너 상의 상보적 부위에 결합하는 것으로 공지된 항원 영역의 아미노산 잔기(또는 이의 단편)로 이루어진다.
항원 단편은 1개 이상의 에피토프를 포함할 수 있다. 특정 양태에서, 항체는 단백질 및/또는 거대분자의 복합
혼합물에서 자신의 표적 항원을 인식할 때 항원에 특이적으로 결합한다고 말한다. 항체가 교차 경쟁(하나는 다
른 것의 결합 또는 조절 효과를 방해함)하는 경우, 항체는 "동일한 에피토프에 결합한다"고 말한다. 또한, 에
피토프의 구조적 정의(중첩, 유사, 동일)는 유용한 정보를 제공하지만, 기능적 정의는 구조적(결합) 및 기능적
(조절, 경쟁) 매개변수를 포함하므로 종종 보다 적절하다.
"표면 플라스몬 공명"이란 용어는, 예를 들면, BIACOREa 시스템(Biacore International AB, GE Healthcare
company, Uppsala, Sweden and Piscataway, New Jersey)을 사용하여 바이오센서 매트릭스 내의 단백질 농도의
변화를 검출하여 생체특이적 상호작용을 실시간 분석할 수 있는 광학 현상을 의미한다. 추가의 상세한 설명은
문헌[Jonsson, U., et al., (1993) Ann. Biol. Clin. 51: 19-26; Jonsson, U., et al., (1991)
BioTtechniques 11: 620-627; Johnsson, B., et al.(1995) J. Mol. Recognit. 8: 125-131; 및 Johnnson, B.,
et al., (1991) Anal. Biochem. 198: 268-277]에 기술되어 있다.
"Kon"이란 용어는 당업계에 공지된 바와 같이, 예를 들면, 항체/항원 복합체를 형성하기 위한 항원에 대한 결합
단백질(예를 들면, 항체)의 결합을 나타내는 결합 속도 상수(on rate constant)를 의미한다. "Kon"은 또한 본
원에서 상호교환적으로 사용된 용어 "결합 속도 상수" 또는 "ka"로 공지되어 있다. 상기 값은 자신의 표적 항
원에 대한 항체의 결합 속도 또는 항체와 항원 사이의 복합체 형성의 속도를 나타내며, 하기 식으로 또한 나타
낸다:
항체("Ab") + 항원("Ag") → Ab-Ag.
"Koff"란 용어는 당업계에 공지된 바와 같이, 예를 들면, 항체/항원 복합체로부터 결합 단백질(예를 들면, 항
체)의 해리를 나타내는 해리 속도 상수(off rate constant)를 의미한다. "Koff"는 또한 본원에서 상호교환적으
로 사용된 용어 "해리 속도 상수" 또는 "kd"로 공지되어 있다. 상기 값은 자신의 표적 항원으로부터 항체의 해
리 속도 또는 시간에 따른 Ab-Ag 복합체의 유리 항체 및 항원으로의 분리를 나타내며, 하기 식으로 나타낸다:
Ab + Ag ← Ab-Ag.
본원에서 상호교환적으로 사용되는 "평형 해리 상수" 또는 "KD"란 용어는 평형시 적정 측정으로 수득된 값, 또는
해리 속도 상수(Koff)를 결합 속도 상수(Kon)로 나누어 수득된 값을 의미한다. 결합 속도 상수, 해리 속도 상수
및 평형 해리 상수는 항원에 대한 항체의 결합 친화성을 나타내기 위해 사용된다. 결합 및 해리 속도 상수의
측정 방법은 당업계에 익히 공지되어 있다. 형광 기반 기술의 사용은 평형시 생리학적 완충액 중에서 샘플의
검사 능력 및 고 민감성을 제공한다. BIACOREa(생체분자 상호작용 분석) 검정과 같은 다른 실험 방법 및 장치
를 사용할 수 있다(예를 들면, Biacore International AB, GE Healthcare company, Uppsala, Sweden)로부터 입
수가능한 장치). 추가로, 사피다인 인스트루먼츠(Sapidyne Instruments, Boise, Idaho)로부터 입수가능한
KinExA
(속도론적 배제 검정) 검정도 또한 사용할 수 있다.
공개특허 10-2012-0104542
"표지된 결합 단백질"이란 용어는 결합 단백질을 확인하기 위해 제공하는 혼입된 표지를 갖는 단백질을 의미한
다. 한 양태에서, 표지는 검출가능한 마커, 예를 들면, 방사성 표지된 아미노산의 혼입 또는, 표지된 아비딘
(예를 들면, 광학적 또는 비색계적 방법으로 검출할 수 있는 효소 활성 또는 형광성 마커를 함유하는 스트렙타
비딘)에 의해 검출될 수 있는 비오티닐 잔기의 폴리펩타이드에 대한 부착을 의미한다. 폴리펩타이드에 대한 표
지의 예에는 다음이 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다: 방사성동위원소 또는 방사성핵종(예를 들면, 3
H,
14
C, 35
S, 90
Y, 99
Tc, 111
In, 125
I, 131
I, 177
Lu, 166
Ho 및 153
Sm), 형광 표지(예를 들면, FITC, 로다민, 란타나이드
인), 효소 표지(예를 들면, 서양고추냉이 퍼옥시다제, 루시퍼라제, 알칼리성 포스파타제), 화학발광성 마커, 비
오티닐 그룹, 2차 리포터(예를 들면, 류신 지퍼 쌍 서열(leucine zipper pair sequence), 2차 항체에 대한 결
합 부위, 금속 결합 도메인, 에피토프 태그)에 의해 인식된 소정의 폴리펩타이드 에피토프, 및 자성 제제(예를
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