(19) 대한민국특허청(KR) (12) 공개특허공보(A) - Questel

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다.
숙주 세포와 상이한 글리코실화된 단백질의 발현은 숙주 세포를 유전자 변형시켜 이종 글리코실화 효소를 발현
시킴으로써 달성될 수 있다. 당업자는 당업계에 공지된 기술을 사용하여 사람 단백질 글리코실화를 나타내는
항체 또는 항원 결합 부분을 생산할 수 있다. 예를 들면, 효모 균주는 비자연 발생 글리코실화 효소를 발현하
도록 유전자 변형되어, 이 효모 균주에서 생산된 글리코실화된 단백질(당단백질)은 동물 세포, 특히 사람 세포
에서 생산된 것과 동일한 단백질 글리코실화를 나타낸다[참조: 미국 특허 공보 제7,449,308호 및
제7,029,872호].
또한, 당업자는 목적하는 단백질이 각종 글리코실화 효소를 발현하도록 유전자 조작된 숙주 세포의 라이브러리
를 사용하여 발현되어, 이 라이브러리의 구성원 숙주 세포가 변형체 글리코실화 패턴을 갖는 목적하는 단백질을
생산할 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 이어서, 당업자는 신규한 특정 글리코실화 패턴을 갖는 목적하는 단
백질을 선택 및 분리할 수 있다. 한 양태에서, 특별하게 선택된 신규 글리코실화 패턴을 갖는 단백질은 생물학
적 성질을 향상시키거나 변화시킨다.
D. 항-IL-1β 항체의 용도
사람 IL-1β에 결합하는 능력이 있다면, 본 발명에 따른 결합 단백질, 예를 들면, 항-IL-1β 항체 및 이의 항원
결합 부분은 당업계에서 입수가능한 방대한 항체 기반 면역검출 시스템 중 하나를 사용하여 (예를 들면, 전혈,
혈청, 혈장, 소변, 타액, 조직 샘플과 같은 생물학적 샘플에서) IL-1β를 검출하는데 사용될 수 있다. 이러한
면역검출 시스템에는 면역침전, 면역블롯팅(웨스턴 블롯), 효소 결합 면역흡착 검정법(ELISA), 방사선면역 검정
법(RIA), 조직 면역조직화학법, 표면 플라스몬 공명(SPR), 샌드위치 면역검정법, 항체 기반 친화성 방법(예를
들면, 친화성 비드, 친화성 칼럼), 면역경쟁 검정법, 면역칩 검정법(실리콘 칩에 부착된 결합 단백질) 및 형광
활성화 세포 분류법(FACS)이 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 일부 면역검출 시스템의 경우, 본 발명
의 IL-1β 결합 단백질(또는 이의 결합 부분)(또는 이의 부분)은 항체 분자를 고체 기재에 부착하기 위해 당업
계에 이용될 수 있는 방법을 사용하여 동일한 고체 기재에 부착되어, 부착된 결합 단백질은 특정 면역검출 시스
템에서의 사용 동안 사람 IL-1β에 결합하는 능력을 보유한다. 이러한 고체 기재에는 셀룰로즈계 여과지(예를
들면, 셀룰로즈, 니트로셀룰로즈, 셀룰로즈 아세테이트), 나일론 필터, 플라스틱 표면(예를 들면, 미세적정 플
레이트, 항체 딥 스틱), 유리 기재(예를 들어, 필터, 비드, 슬라이드, 유리솜), 중합체 입자(예를 들면, 아가로
즈 및 폴리아크릴아미드) 및 실리콘 칩이 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 예를 들면, 면역검출 시스
템은 시험관내 샘플(예를 들면, 전혈, 혈청, 혈장, 조직, 소변, 타액 및 조직 생검과 같은 생물학적 샘플)에서
IL-1β의 존재를 검출하기 위한 방법에 사용될 수 있다. 이러한 방법은 질환 또는 장애, 예를 들면, 면역 세포
관련 장애를 진단하는데 사용될 수 있다. 상기 방법은 (i) 시험 샘플 또는 대조 샘플을 본원에 기재된 바와 같
은 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 IL-1β 결합 부분과 접촉시키는 단계; 및 (ii) 시험 샘플 또는 대조 샘플에서
항-IL-1β 결합 단백질(또는 이의 결합 부분)과 IL-1β 사이의 복합체의 형성을 검출하는 단계를 포함하며, 대
조 샘플에 대한(또는 초기 시점에서 취한 또 다른 시험 샘플에서 상기 복합체의 형성에 대한) 시험 샘플에서 상
기 복합체 형성에서의 통계학적으로 유의한 변화는 샘플에서 IL-1β의 존재를 나타낸다.
공개특허 10-2012-0104542
또 다른 예로서, 생체 내에서(예를 들면, 피험자에서 생체내 이미징에서) 사람 IL-1β의 존재를 검출하기 위한
방법이 사용될 수 있다. 상기 방법은 질환 또는 장애, 예를 들면, IL-1β 관련 장애를 진단하는데 사용될 수
있다. 상기 방법은 (i) 상기 결합 단백질 또는 이의 IL-1β 결합 부분을 IL-1β에 결합할 수 있게 하는 조건하
에 본원에 기재된 바와 같은 IL-1β 결합 단백질 또는 이의 IL-1β 결합 부분을 시험 피험자 또는 대조 피험자
에게 투여하는 단계; 및 (ii) 상기 결합 단백질 또는 이의 결합 부분과 IL-1β 사이의 복합체 형성을 검출하는
단계를 포함하며, 상기 대조 피험자에 대한 또는 초기 시점에서의 시험 피험자에서의 복합체 형성에 대한 시험
피험자에서의 상기 복합체 형성에서의 통계학적으로 유의한 변화는 IL-1β의 존재를 나타낸다. 본 발명에 따른
샘플(예를 들면, 생물학적 샘플) 중에서의 IL-1β의 검출 방법은 샘플을 본원에 기재된 IL-1β 결합 단백질(또
는 이의 IL-1β 결합 부분)과 접촉시키는 단계 및 IL-1β에 결합된 결합 단백질(또는 이의 결합 부분) 또는 미
결합된 결합 단백질(또는 이의 미결합된 결합 부분)을 검출하여 샘플 중에서 IL-1β를 검출하는 단계를 포함한
다. 결합 단백질은(또는 이의 부분)은 결합되거나 미결합된 결합 단백질(또는 이의 부분)의 검출을 용이하게
하기 위해 검출성 물질로 직간접적으로 표지된다. 이러한 검출성 물질은 당업계에 공지되어 있으며, 그 예에는
각종 효소, 보결분자단, 형광 물질, 발광 물질 및 방사성 물질이 포함되지만 이에 한정되는 것은 아니다. 적합
한 효소의 예에는 서양고추냉이 퍼옥시다제, 알칼리성 포스파타제, β-갈락토시다제 또는 아세틸콜린에스테라제
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