(19) 대한민국특허청(KR) (12) 공개특허공보(A) - Questel

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또한, 재조합 DNA 기술도 목적하는 항원에 결합하기 위해 필요하지 않은 경쇄 및 중쇄 중 어느 하나 또는 둘 모
두를 암호화하는 DNA의 일부 또는 전부를 제거하기 위해 사용할 수 있다. 이러한 절두형 DNA 분자로부터 발현
된 분자도 또한 본 발명의 항체에 포함된다. 또한, 하나의 중쇄 및 하나의 경쇄가 본 발명의 항체이고 다른 중
쇄 및 경쇄가 사람 IL-1β 이외의 다른 항원에 특이적인 이작용기성 항체도 표준 화학적 가교 방법에 의해 본
발명의 항체를 제2 항체에 가교결합시켜 생산될 수 있다.
본 발명의 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 재조합 발현시키기 위한 특정 시스템에서, 항체 중쇄 및 항체 경쇄
를 암호화하는 재조합 발현 벡터는 인산칼슘 매개된 형질감염에 의해 dhfr-CHO 세포 내로 도입된다. 재조합 발
현 벡터 내에서, 항체 중쇄 및 경쇄 유전자는 각각 고수준의 유전자 전사를 유도하기 위해 CMV 인핸서/AdMLP 프
로모터 조절 인자에 작동가능하게 결합된다. 재조합 발현 벡터는 또한 DHFR 유전자도 운반하고, 이러한 유전자
는 메토트렉세이트 선택/증폭을 사용하여 벡터로 형질감염된 CHO 세포를 선택할 수 있게 해준다. 항체 중쇄 및
경쇄를 발현하도록 선택된 형질감염 숙주 세포를 배양하고, 이 배양 배지로부터 완전한 항체를 회수한다. 재조
합 발현 벡터를 제조하고, 숙주 세포를 형질감염시키고, 형질전환체를 선택하고, 숙주 세포를 배양하고, 배양
배지로부터 항체를 회수하기 위해, 표준 분자생물학 기술을 사용한다. 또한, 본 발명은, 본 발명의 재조합 항
체가 합성될 때까지, 본 발명의 숙주 세포를 적합한 배양 배지에서 배양함으로써 본 발명의 재조합 항체를 합성
하는 방법을 제공한다. 또한, 상기 방법은 배양 배지로부터 재조합 항체를 분리하는 단계를 추가로 포함할 수
도 있다.
1. 항 IL-1β 항체
표 5는 본 발명의 마우스 항 hIL-1β 단클론 항체(mAb)의 VH 및 VL 영역의 아미노산 서열을 제공한다.
2. 항 IL-1β 키메라 항체
표 5
키메라 항체는 항체의 상이한 부위가 상이한 동물 종에서 유래하는 분자, 예를 들면, 쥐의 단클론 항체 유래의
가변 영역과 사람의 면역글로불린 불변 영역을 갖는 항체이다. 키메라 항체의 생산 방법은 당업계에 공지되어
있으며, 실시예에서 논의된다[예를 들어, 참조: Morrison, (1985) Science 229: 1202-1207; Oi et al., (1986)
BioTechniques 4: 214-221; Gillies et al., (1989) J. Immunol. Methods 125: 191-202; 및 미국 특허 공보
제5,807,715호, 제4,816,567호 및 제4,816,397호]. 또한, 적당한 생물학적 활성의 사람 항체 분자 유래의 유전
자와 함께 적당한 항원 특이성의 마우스 항체 분자 유래의 유전자를 스플라이싱시켜 "키메라 항체"를 생산하기
위해 개발된 기술도 사용할 수 있다[참조: Morrison et al., (1984) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81: 6851-
6855; Neuberger et al., (1984) Nature 312: 604-608; 및 Takeda et al., (1985) Nature 314: 452-454].
3. 항 IL-1β CDR 이식된 항체
공개특허 10-2012-0104542
본 발명의 CDR 이식된 항체는 VH 및/또는 VL의 CDR 영역 중 하나 이상이 본 발명의 쥐 항체의 CDR 서열로 대체
된 사람 항체 유래의 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열을 포함한다. 임의의 사람 항체로부터의 골격 서열은 CDR 이
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