(19) 대한민국특허청(KR) (12) 공개특허공보(A) - Questel

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개질 카복시메틸 덱스트란을 참조 표면으로서 사용하였다. 반응속도론적 분석의 경우, Biaevaluation 4.0.1 소
프트웨어를 사용하여 1:1 랭뮤어(Langmuir) 결합 모델 유래의 속도 방정식을 총 8개 주입물의 결합 및 해리 상
에 동시에 적합화시켰다(글로벌 피트 분석을 사용함). 염소 항-마우스 IgG 특이적 반응 표면을 따라 포획하기
위해, 정제된 항체를 HEPES 완충 식염수에 희석하였다. 리간드(25㎍/ml)로서 포획되는 마우스 항체를 5㎕/분의
유속으로 반응 매트릭스 위에 주입하였다. 25㎕/분의 연속 유속 하에 결합 속도 상수(Kon; 단위 M -1
s -1
) 및 해리
속도 상수(koff; 단위 s -1
)를 측정하였다. 속도 상수는 10 내지 200 nM 범위의 10가지 상이한 항원 농도에서 반
응속도론적 결합을 측정하여 수득된다. 그 다음, 항체와 표적 항원 사이의 반응의 평형 해리 상수(단위 M)는
KD = koff/kon 식에 의해 반응속도론적 속도 상수로부터 계산하였다. 결합을 시간의 함수로 기록하고 반응속도론
적 속도 상수를 계산한다. 본 검정에서, 10 6
M -1
s -1
만큼 빠른 결합 속도와 10 -6
s -1
만큼 느린 해리 속도가 측정될
수 있다. 표 11은 사람 항-IL-1β 항체에 대한 친화성 측정을 나타낸다.
표 11
본 발명은 분자생물학 분야에 공지된 모든 기술을 참조로 인용한다. 이러한 기술에는 다음의 문헌에 기재된 기
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참조 인용
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않는다면, 본 발명의 실시는 면역학, 분자생물학 및 세포생물학의 통상적인 기술을 적용할 것이며, 이는 당업계
에 익히 공지되어 있다.
등가물
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공개특허 10-2012-0104542