(19) 대한민국특허청(KR) (12) 공개특허공보(A) - Questel

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효과(들)를 증강시키거나 개선시키기에 충분한 치료요법의 양을 의미한다.
"샘플"이란 용어는 가장 광범위한 의미로 사용된다. "생물학적 샘플"이란 용어는 생물 또는 예전의 생물로부터
의 임의의 양의 물질을 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 이러한 생물에는, 사람, 마우스, 래트, 원숭
이, 개, 토끼 및 기타 동물이 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 이러한 물질에는 혈액, 혈청, 소변, 윤
활액, 세포, 기관, 조직, 골수, 림프절 및 비장이 포함되지만, 이에 한정되는 것은 아니다.
I. 사람 IL-1α에 결합하는 항체
본 발명의 한 양태는 IL-1β에 결합하고, 친화성이 높고, 해리 속도가 느리고, 중화능이 높은 분리된 단클론 항
체 또는 이의 항원 결합 부분을 제공한다. 본 발명의 제2 양태는 IL-1β에 결합하는 키메라 항체를 제공한다.
본 발명의 제3 양태는 IL-1β에 결합하는 CDR 이식된 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 제공한다. 본 발명의
제4 양태는 IL-1β에 결합하는 사람화된 항체 또는 이의 항원 결합 부분을 제공한다. 한 양태에서, 상기 항체
또는 이의 부분은 분리된 항체이다. 한 양태에서, 본 발명의 항체는 중화성 사람 항-IL-1β 항체이다.
A. 항-IL-1β 항체의 제조방법
본 발명의 항체는 당업계에 공지된 다수의 기술 중 임의의 기술로 제조될 수 있다.
1. 하이브리도마 기술을 사용한 항-IL-1β 단클론 항체
단클론 항체는 하이브리도마, 재조합 및 파지 디스플레이 기술 또는 이의 조합의 사용을 포함한 당업계에 공지
된 각종 기술을 사용하여 제조될 수 있다. 예를 들면, 단클론 항체는 당업계에 공지되고, 예를 들면, 문헌[참
조: Harlow and Lane, Antibodies: A Laboratory Manual, 2d ed., (Cold Spring Harbor Laboratory Press,
Cold Spring Harbor, 1988); Hammerling et al., eds., "Monoclonal Antibodies and T-Cell Hybridomas," In
Research Monographs in Immunology, vol. 3 (J.L. Turk, General Editor) (Elsevier, N.Y., 1981) pp. 563-
587]에 교시된 것들을 비롯한 하이브리도마 기술을 사용하여 제조될 수 있다. "단클론 항체"란 용어는 하이브
리도마 기술을 통해 생산된 항체에 한정되는 것은 아니다. "단클론 항체"란 용어는 이를 생산하는 방법이 아니
라, 임의의 진핵, 원핵 또는 파지 클론을 비롯한 단클론으로부터 유래되는 항체를 의미한다.
하이브리도마 기술을 사용하여 특이적인 항체를 생산 및 선별하는 방법은 통상적이며 당업계에 익히 공지되어
있다. 한 양태에서, 본 발명은 단클론 항체를 생산하는 방법뿐 아니라 본 발명의 항체를 분비하는 하이브리도
마 세포를 배양하는 단계를 포함하는 방법에 의해 생산된 항체를 제공하며, 상기 하이브리도마는 본 발명의 항
원으로 면역화된 마우스에서 분리한 비장세포를 골수종 세포와 융합시킨 후, 본 발명의 폴리펩타이드에 결합할
수 있는 항체를 분비하는 하이브리도마 클론을 위해 상기 융합으로부터 생성된 하이브리도마를 선별하여 생산된
다. 간략히 설명하면, 마우스를 Il-1β 항원으로 면역화할 수 있다. 특정 양태에서, 면역 반응을 자극하기 위
해 보조제(adjuvant)와 함께 IL-1α 항원을 투여한다. 이러한 보조제에는 완전 또는 불완전 프로인트 보조제,
RIBI(뮤라밀 디펩타이드) 또는 ISCOM(면역자극 복합체)이 포함된다. 이러한 보조제는 폴리펩타이드를 국소 침
착물에 봉쇄시켜 신속한 분산으로부터 폴리펩타이드를 보호할 수 있거나, 대식세포 및 면역계의 기타 성분에 대
해 화학주성인 인자를 분비하도록 숙주를 자극하는 물질을 함유할 수 있다. 한 양태에서, 폴리펩타이드가 투여
되는 경우, 면역화 계획은 수주 동안에 걸쳐서 폴리펩타이드의 2회 이상의 투여를 포함할 것이다.
IL-1β 항원으로 동물을 면역화한 후, 상기 동물로부터 항체 및/또는 항체 생산 세포를 수득할 수 있다. 상기
동물을 방혈하거나 희생시켜 상기 동물로부터 항-IL-1β 항체 함유 혈청을 수득한다. 상기 혈청을 상기 동물로
부터 수득된 그대로 사용할 수 있거나, 상기 혈청으로부터 면역글로불린 분획을 수득할 수도 있거나, 상기 혈청
으로부터 항-IL-1β 항체를 정제할 수 있다. 이러한 방식으로 수득한 혈청 또는 면역글로불린은 다클론성이고,
따라서 불균일한 다수의 성질을 보유한다.
공개특허 10-2012-0104542
면역반응이 검출되면, 예를 들면, 항원 IL-1β에 특이적인 항체가 마우스 혈청에서 검출되면, 마우스 비장을 수
확하여 비장세포를 분리한다. 그 다음, 익히 공지된 기술로 비장세포를 임의의 적당한 골수종 세포, 예를
들면, ATCC에서 입수가능한 세포주 SP20으로부터의 세포와 융합시킨다. 하이브리도마를 선택하고 한계 희석법
으로 클로닝한다. 그 다음, IL-1β에 결합할 수 있는 항체를 분비하는 세포에 대해 당업계에 공지된 방법으로
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