Untitled - Red Temática de investigación cooperativa en cáncer

P-10
MOLECULAR PATHWAYS REGULATED BY ETV5 TRANSCRIPTION FACTOR
IN THE INVASION OF ENDOMETRIAL CARCINOMA
PEDROLA N 1 , COLAS C 1 , CASTELLVÍ J 2 , GIL-MORENO A 3 , XERCAVINS J 3 , REVENTÓS J 1 , RUIZ A 1
1
INSTITUT RECERCA VALL HEBRÓN, BARCELONA (RD06/0020/0058)
2
PATOLOGÍA HOSPITAL VALL HEBRÓN, BARCELONA (RD06/0020/0058)
3
GINECOLOGÍA HOSPITAL VALL HEBRÓN BARCELONA (RD06/0020/0058)
Our group has described the ETV5 transcription factor associated with the early steps of
endometrial cancer invasion. Here, we aim to identify ETV5 downstream target genes involved
in myometrial infiltration.
Material and Methods: We have performed a gene expression analysis to compare Hec1a
endometrial cancer cells against its stable population overexpressing ETV5. Statistical and
literature mining were performed to select ETV5 candidate target genes. Selected genes
were analysed by chromatin immunoprecipitation and promoter-regulation was confirmed
by luciferase reporter assays. Cell migration and invasion assays were performed to examine
the role of NID1 and NUPR1genes in Hec1A ETV5 overexpressing cells. Tumor invasion
was also analysed in an orthotopic mouse model. Finally, human endometrial tumor samples
were analysed by RTqPCR and IHC to determine levels of gene and protein expression.
Results: ChIP analysis and luciferase reporter assays confirmed NID1 and NUPR1 as ETV5
transcriptional targets. Inhibition of NID1 and NUPR1 in Hec1A cells overexpressing ETV5
reduces cell migration and invasion both in vitro and in vivo. Expression of NID1 and NUPR1
in human endometrial tumor samples shows an increase of expression in the endometrial
invasion front.
Conclusions: We have identified Nidogen1 (NID1) and NUPR1 as direct transcriptional targets
of ETV5. Both genes mediate some of the migratory and invasive capabilities induced
by ETV5 overexpression in endometrial cancer cells both in vitro and in vivo. The identification
of new players in the myometrial infiltration step represents a valuable tool for the
molecular classification of patients as well as for the design of rational target
P-11
ANÁLISIS DE LA EXPRESIÓN DE MKP1 Y MKP3 EN MUESTRAS DE
PACIENTES DE CÁNCER DE MAMA
TORMO E 1 , SÁNCHEZ L 1 , FURRIOL J 1 , FERRER J 1 , BURGUÉS O 2 , ALONSO E 1 , NAVARRO L 2 , BRAGA-
DO R 3 , ROJO F 3 , ROVIRA A 4 , ALBANELL J 4 , EROLES P 1 , LLUCH A 5
1
FUNDACIÓN INVESTIGACIÓN CLÍNICO VALENCIA / INCLIVA (RD06/0020/0080)
2
SERVICIO DE PATOLOGÍA, HOSPITAL CLÍNICO UNIVERSITARIO DE VALENCIA
3
FUNDACIÓN JIMÉNEZ DÍAZ
4
CANCER RESEARCH PROGRAM, IMIM-HOSPITAL DEL MAR, BARCELONA (RD06/0020/0109)
5
SERVICIO DE HEMATOLOGÍA Y ONCOLOGÍA, HOSPITAL CLÍNICO UNIVERSITARIO DE VALENCIA
(RD06/0020/0080)
El cáncer de mama es el tumor maligno más frecuente entre las mujeres de todo el mundo.
Entre las nuevas dianas terapéuticas recientemente propuestas se encuentra la familia de
las MKPs (mitogen-activated protein kinase phospaphatases) conocidas también como fosfatasas
de especificidad dual. El miembro prototipo de esta familia, MKP-1, es una fosfatasa
nuclear inducible capaz de desfosforilar MAPKs (ERK, JNK, y p-38). Las MAPKs (mitogenactivated
protein kinase), los sustratos de MKPs, juegan un papel importante en proliferación,
respuestas a estrés, apoptosis, y respuesta inmune, y se ha visto que MKP-1 y MKP-3
pueden desempeñar un papel importante en tumorigénesis y contrarrestar la citotoxicidad
de varios agentes anticancerígenos.
En este trabajo se estudió la expresión de MKP-1 y MKP-3 en muestras parafinadas de pacientes
en terapia adyuvante y neoadyuvante, en tumores primarios y sus recaídas metastásicas,
así como la expresión en muestras de tejido sano. Se obtuvo el cDNA y se analizó
mediante PCR real-time por el método ΔCt. Los resultados se analizaron estadísticamente
mediante el test de kruskal –Wallis.
Se observó un descenso generalizado de la expresión de MKP-1 y MKP-3 en las muestras
de tejido tumoral respecto a las muestras de tejido sano. La expresión de MKP-1 y MKP-3
aumentó en las recaídas metastásicas respecto a sus parejas primarias. En las muestras de
terapia neoadyuvante, MKP-1 aumentó significativamente (p=0,009) en las muestras procedentes
de cirugías respecto a sus parejas de biopsias, mientras que MKP-3 no presentó
cambios significativos.
Conclusiones: MKP-1 y MKP-3 se encuentran infraexpresadas en muestras tumorales.
Las muestras procedentes de pacientes tratadas, bien sean metástasis o cirugía en el caso
de tratamiento neoadyuvante, presentan aumento de los niveles de expresión de MKP-1
respecto a sus parejas previo tratamiento. MKP-3 incrementa su expresión en las muestras
metastásicas respecto al tumor primario.
54 55