Compendio_2009.pdf - INTA

podría ser explotada para desarrollar nuevas
herramientas moleculares para discriminar aislamientos
de B. bovis de bovinos infectados naturalmente. En este
trabajo se describe un método denominado PCR de
restricción. Esta técnica se basa en la amplificación de
secuencias específicas de ADN seguida por la digestión
con enzimas de restricción. Los fragmentos obtenidos
se separan mediante electroforesis y los tamaños
comparados después de la visualización facilitada por
la tinción con sales de plata o bromuro de etidio. La
interpretación de los resultados de esta técnica se basó
en un código binario establecido para cada cepa, donde
se asignó el numeral 1 o 0 para la presencia o ausencia
de un fragmento producto de la digestión de
determinado tamaño. Este método fue evaluado en
diferentes cepas y aislamientos de B. bovis. La
electroforesis permitió definir un patrón de bandas,
específicas para diferentes para aislamientos
geográficamente distantes, lo que sugiere la presencia
de sitios de restricción diferenciales para BspMI. Este
sencillo método permitiría la diferenciación de cepas
de B. bovis Americanas.
Descripción de Amblyomma boeroi n. sp. (Acari:
Ixodidae), un parásito de Catagonus wagneri
(Rusconi) (Artiodactyla: Tayassuidae) en
Argentina.
Nava S.; Mangold AJ.; Mastropaolo, M.; Venzal,
J.M.; Oscherov, B.; Guglielmone, A.A.
snava@rafaela.inta.gov.ar
Systematic Parasitology. 73, 161-174.
En este trabajo se describieron todos los estadios
parasíticos de una nueva especie de garrapata,
Amblyomma boeroi n. sp. (Acari: Ixodidae). Junto con
la descripción se analizó su posición filogenética con
respecto a las restantes especies del género
Amblyomma a través de la comparación de las
secuencias de los genes 16S y 18S. Los caracteres
diagnósticos para el macho son una combinación de
ojos orbitados, fórmula dentaria 2/2, coxa IV
considerablemente más grande que las coxas I-III y con
una espina en forma de gancho dirigida posteromedialmente,
ausencia de surco post-anal y la
ornamentación del escudo. Los caracteres diagnósticos
para las hembras son ojos orbitados, fórmula dentaria
2/2, ausencia de surco post-anal, y la forma de las setas
del notum. La ninfa se caracteriza por un palpo corto,
un fórmula dentaria 2/2, ojos orbitados y ausencia de
surco post-anal. Un basis capituli dorsalmente
rectangular, ojos orbitados y el margen posterior del
escudo sinuoso permiten distinguir a la larva. El
hospedador principal para todos los estadios de A.
boeroi es Catagonus wagneri (Rusconi) (Artiodactyla:
Tayassuidae). Filogenéticamente, A. boeroi podría
estar representado un linaje independiente dentro de los
Amblyomma neotropicales.
Compendio 2009 - INTA Rafaela
Desarrollo de un sistema de tipificación basado en
secuencias repetitivas para diferenciar aislamientos
de Babesia bovis de diferentes regiones geográficas.
Pérez-Llaneza, A.; Caballero, M.; Baravalle, E.;
Mesplet, M.; Mosqueda, J.; Suárez, C. E.; Echaide, E.;
Katzer, F.; Pacheco, G.M.; Florín-Christensen, M.;
Schnittger, L.
lschnittger@cnia.inta.gov.ar
Vet. Parasitol. (2010); 167:196-204.
Las secuencias de mini y microsatélites son excelentes
herramientas para la diferenciación de cepas y
poblaciones de numerosos protozoarios parásitos
debido a su variabilidad. Para este trabajo hemos
analizado el genoma de Babesia bovis, hemoparásito
del orden piroplasmida transmitido por garrapatas, para
identificar secuencias repetidas en serie (TRs)
potencialmente útiles para un sistema de tipificación de
locus múltiples. Un listado de 119 secuencias fueron
testeadas en 5 cepas de referencia originados de
distintas áreas geográficas de América del Norte,
T2Bo, (EEUU), RAD y Mo7 (Méjico) y América del
Sur R1A y S2P (Argentina). Las secuencias satélites
fueron amplificadas mediante PCR, separadas
mediante electroforesis en geles de acrilamida y teñidas
con sales de plata para su visualización y evaluación de
su tamaño. Las catorce secuencias con TR que se
amplificaron en todas las cepas usadas, mostraron
polimorfismo en su longitud. Todos los primers usados
amplificaron secuencias específicas de B. bovis y no
amplificaron DNA genómico del bovino hospedador o
de Babesia bigemina, hemoparásito que con mayor
frecuencia co-infecta bovinos en América. Esto
favorece su utilización en futuros relevamientos
epidemiológicos en zonas de babesiosis endémica. Los
14 marcadores moleculares identificados están
dispersos en los 4 cromosomas (Cr) de B. bovis,
correspondiendo 3, 2, 5 y 4 marcadores a los Cr1, Cr2,
Cr3, y Cr4 respectivamente. Dentro de las 5 cepas de
B. bovis identificamos 9, 3, 1 y 1 marcadores satélites
con 2, 3, 4 y 5 alelos respectivamente. En comparación
con Theileria parva, hemoprotozoario perteneciente al
mismo orden y con un genoma de tamaño similar, el
número de TRs polimórficos y el número promedio de
alelos por TR locus, parecen estar significativamente
reducidos en el genoma de B. bovis. Además, la
proporción entre micro- y minisatélites tanto en B.
bovis como en T. parva es considerablemente menos
numeroso que en otros eucariotas, como fue
confirmado mediante análisis de bioinformática. Se
evaluó además el genotipo de los locus múltiples y la
distancia genética entre cada una de las 5 cepas de B.
bovis y se realizó el análisis de grupos basado en el
método de “neighbor joining”. El fenograma resultante
mostró que las cepas de B. bovis se segregan dentro de
3 grupos de acuerdo a su origen geográfico. Este
sistema de marcación es adecuado para explorar varios
parámetros de las poblaciones de B. bovis como
diversidad genética, dinámica de infección y estructura
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