MICROBIOLOGIA GENERAL Guia de Trabajos Prácticos

CUESTIONARIO T.P. 31) Calcule la tasa de crecimiento medio (k) y el tiempo de generación medio (g) de un cultivo que seincrementa desde 5 x 10 2 hasta 1 x 10 9 células en 10 hs.2) Si el tiempo de generación media para un cultivo es de 180 min. y se inicia el cultivo con 3 x 10 3células, cuantas bacterias habrá despues de 24 hs de cultivo en fase exponencial? Cuántas generacioneshabrán transcurrido?3) Discuta la siguiente afirmación: ”en una colonia todas las células crecen a la misma velocidad”.4) Usted necesita obtener un cultivo con 5 x 10 9 células totales. Como conoce la tasa de crecimientomedio y el tiempo de generación, realiza sus cálculos y se da cuenta de que requiere 12 horas de cultivopara llegar a dicha masa partiendo de un stock con 10 3 células/ml. Descongela el stock con la semillaestandarizada e inocula el cultivo, se va a su casa a descansar y a las 12 horas regresa al laboratorio.Retira el cultivo de la incubadora y estima el número de células en 2 x 10 7 . Qué es lo que ha ocurrido?5) Se dispone de 6 ml de un cultivo bacteriano con 8,4 x 10 8 UFC/ml. ¿Qué diluciones debería realizarpara contar aproximadamente 40 colonias por placa, si se siembra 0,1 ml de dicha dilución ?6) Partiendo de un cultivo bacteriano que tiene 4 x 10 8 UFC/ml : ¿Cómo procedería para obtener 80colonias en una placa de agar nutritivo ? Indique los volúmenes a utilizar.7) ¿Qué dilución debería realizar para obtener 2 ml de una suspensión de bacterias que contenga 2 x 10 5UFC totales, si parte de un cultivo que contiene 2 x 10 9 UFC/ml ?.8) Un cultivo bacteriano de 10 ml tiene un recuento de 250 UFC cuando se plaquea 0,1 ml de la dilución10-4. Si 2 ml de ese cultivo se inoculan en 100 ml de medio fresco para realizar una curva de crecimiento:¿Cuál es la concentración bacteriana inicial ? ¿Qué diluciones realizaría del mismo para contar 100colonias si sembrara 0,1 ml ?9) Un fabricante de yogurt afirma que sus productos contienen 4 x 10 6 bacterias lácticas viables /ml. ¿Quémétodo de recuento utilizaría para corroborar ese número? Describa el protocolo, condiciones ymateriales que utilizaría para realizar dicha determinación.10) Enumere las ventajas y desventajas de los siguientes métodos de recuento de bacterias: i) turbidez, ii)recuento en placa, iii) conteo directo al microscopio.11). Para un cultivo exponencial de Escherichia coli se realiza una curva de calibración de recuento enplaca vs. turbidez (D.O. leída a 600 nm). A partir de la misma se establece una relación UFC./ml porunidad de D.O. de 4 x 10 7 .a) ¿Qué ventajas tiene realizar una curva de calibración de recuento vs. turbidez?b) ¿Qué diluciones debería realizar para contar 100 colonias en una placa de agar nutritivo sembrada con0,1 ml de un nuevo cultivo de E. coli con una D.O. de 0.5.12) Un investigador dispone de una curva de calibración de DO vs UFC/ml para E. coli en caldo nutritivo¿Podría utilizar la misma curva para uncultivo de: Bacillus megaterium y otro de Micrococcus luteus?Justifique su respuesta.13) ¿A qué se llama crecimiento diauxico? Dibuje una curva de crecimiento diauxica indicando lasdistintas fases de crecimiento.14) a)Explique la causa del crecimiento diauxico de E. coli en un medio de crecimiento que contienecomo fuente de carbono glucosa y lactosa en una relación 1:3 respectivamente.