MICROBIOLOGIA GENERAL Guia de Trabajos Prácticos

TP Nº 1 METODOLOGÍA GENERAL DE TRABAJOObjetivo 1: Aprendizaje de la técnicas básicas que se utilizan para el cultivo de microorganismos.a) Preparación de medios de cultivo. Uso de balanzas, mediciónde pH.b) Técnicas de esterilización.c) Trabajo en condiciones de asepsia. Preparación de placas dePetri, tubos con medio de cultivosólido y líquido.d) Técnicas de siembra en cultivo líquido y en cultivo sólido:estriamiento, punción, rastrillado,volcado.Objetivo 2: Detección de contaminantes, presencia de microorganismos en el medio ambiente.a) Observación de la presencia de microorganismos en nuestroambiente.b) Control de trabajo en condiciones de asepsiac) Control de asepsia.Desarrollo:1) Para realizar trabajos en condiciones de asepsia se deberá limpiar el area de trabajo (mesada) con lasustancia desinfectante provista por el docente, acto seguido se deberá encender el mechero bunsen.2) Se prepararán placas de Petri con agar nutritivo fundido y mantenido a 45-50ºC. Volcar el medio encondiciones de asepsia (20-30 ml/placa) y esperar a que solidifique. Luego secar las placas invertidas enestufa a 42ºC.3) Se prepararán tubos de ensayo con agar nutritivo fundido por volcación (10 ml/tubo). Se taparán con latorunda de algodón, se dejaran enfriar y se secarán en estufa a 42ºC.4) Se harán diluciones seriadas de agua previamente autoclavada: 1/10, 1/100, 1/1000, y se sembrarán0,1ml de cada dilución en distintas placas de Petri por la técnica del rastrillado.5) Con un hisopo se tomarán muestras de distintos lugares: mesada, mano, etc. y se aplicará sobre unaplaca de medio nutritivo sólido.f) Se comparará el crecimiento que resulta de apoyar en un medio de cultivo sólido la yema del dedoantes y después de un lavado con etanol 70%.Las placas y tubos sembrados se cultivarán 24-48 h a 37ºC. Se deberán observar las coloniasdesarrolladas teniendo en cuenta las siguientes características macroscópicas: