Génétique de la Levure

Identifier le gène muté
-dans le cas d’une mutation dominante: il faut construire 1) une banque d’ADN génomique
à partir de chaque souche mutante, 2) transformer une souche sauvage et 3) cribler pour
le phénotype attendu. Réisoler le plasmide d’intérêt et le séquencer.
-dans le cas d’une mutation récessive: clonage par complémentation qui consiste à
transformer la souche mutée avec une banque génomique et sélectionner les clones qui
ont perdu le phénotype mutant. le plasmides est alors ré-isolé puis séquencé.
Attention: le gène isolé par cette approche peut être un suppresseur multicopie.
Il faut donc vérifier que la délétion de ce gène provoque le même
phénotype que la mutation d’origine. La mutation et la délétion doivent
aussi appartenir au même groupe de complémentation.