Génétique de la Levure

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Les mutations synthétiques létales But: déterminer si les produits de deux gènes fonctionnent dans des voies parallèles. - Pratiquement, une souche portant une mutation x est transformée par un plasmide portant une copie du gène sauvage exprimée de façon conditionnelle. Après mutagénèse de cette souche, on recherche les mutations qui ne permettent pas une croissance en absence d’induction du gène sauvage. - Cette approche a été robotisée et réalisée à l’échelle génomique (soit 4,200 x 4,200 croisements, sporulations et analyse de tétrades.)
Analyse des relations épistatiques BUT: déterminer le nombre de gènes (protéines) impliqués dans un même processus et l’ordre dans lequel ils fonctionnent. L’approche consiste à combiner deux mutations dans une cellule et à analyser le phénotype du double mutant. X X common target w soit 4 gènes dont la délétion entraine une sensibilité modérée aux fortes concentrations salines w Si on combine les délétions ∆hog1 et ∆pbs2, le double mutant présente la meme sensibilité aux sels que les deux simples mutants: ils fonctionnent dans la même voie. w Si on combine les délétions ∆pbs2 et ∆cba1, le double mutant présente une sensibilité accrue aux sels par rapport à chaque simple mutant: ils fonctionnent donc dans deux voies parallèles pour controler le même processus.
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