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Catalogue Lycée SVT 2013-2014 - sordalab

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EX.A.O<br />

LES EXPÉRIENCES<br />

MPS EXAO<br />

LA RÉACTION DE HILL<br />

But : Etudier la nécessité d’un accepteur d’électrons dans la photosynthèse :<br />

Système expérimental : Des feuilles d’épinard sont broyées dans du tampon Phosphate-Saccharose afin de détruire les membranes cellulaires<br />

et libérer les chloroplastes. La solution est filtrée puis centrifugée 5 minutes à 1500 g pour isoler les chloroplastes. Le culot est placé<br />

dans de l’eau distillée afin de faire éclater les chloroplastes. On ajoute ensuite du tampon afin de rétablir la pression osmotique. L’accepteur<br />

d’électrons endogène (le NADP+) est fortement dilué.<br />

La solution de chloroplastes est placée dans notre enceinte cellulaire. Une sonde à Dioxygène et une sonde de température trempent dans<br />

la solution de chloroplastes et mesurent la concentration d’O 2 ainsi que la température dans l’enceinte. Un luxmètre mesure l’intensité lumineuse<br />

au niveau de l’enceinte.<br />

TALE<br />

Expérience : Lancer l’acquisition et observer l’absence de variations de la concentration de dioxygène dans l’enceinte pendant 90 secondes<br />

d’obscurité puis 90 secondes de lumière intense. Ensuite injecter du réactif de Hill dans l’enceinte et observer les variations de concentrations<br />

de dioxygène pendant 90 secondes d’obscurité puis 90 secondes de lumière intense afin de montrer que l’apport d’un accepteur<br />

d’électrons exogène rétablit la photosynthèse.<br />

Phénomènes mis en évidence :<br />

Lorsque l’enveloppe des chloroplastes est détruite, la chaîne photosynthétique ne fonctionne pas.<br />

L’apport d’un accepteur d’électron exogène (le réactif de Hill) rétablit la photosynthèse.<br />

Dans les chloroplastes intacts, il y a donc un accepteur d’électrons endogène (c’est le NADP+) qui participe au processus photosynthétique.<br />

Matériel nécessaire<br />

Interface (au choix)<br />

Interfaces fixes :<br />

Interface POWERLINK ou Interface SPARKLINK<br />

+ Interface USBLINK<br />

Interface fixe ou portable :<br />

Interface Portable GLX ou SPARK<br />

Sondes, capteurs, accessoires :<br />

Oxymètre liquide<br />

RÉF. PS-2108<br />

Sonde température<br />

RÉF. PS-2125<br />

Luxmètre<br />

RÉF. PS-2106<br />

Enceinte cellulaire<br />

RÉF. METABOX<br />

Centrifugeuse<br />

RÉF. CENTRI<br />

Lampe photosynthèse RÉF. METALIGHT<br />

Logiciel généraliste CAPSTONE OU SPARKVUE<br />

Matériel biologique :<br />

Kit réaction de Hill<br />

RÉF. HILL<br />

74<br />

+33 (0)1 69 92 26 72 +33 (0)1 69 92 26 74 info@<strong>sordalab</strong>.com www.<strong>sordalab</strong>.com<br />

15 Av. des grenots<br />

91150 Etampes

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