Catalogue Lycée SVT 2013-2014 - sordalab

PROGRAMME TERMINALE
KITS TP LYCEE
KIT TEST ELISA - DOSAGE D’ANTIBSA
“ Détection et dosage d’anticorps sur plaque de micro-titration ”
Préciser la date de votre
TP sur la commande
Le protocole le plus proche
du programme scolaire
RÉF. ELISA
55,35 E TTC
Objectifs cognitifs
Aspect fondamentaux du fonctionnement du système immunitaire : Exemple
du SIDA. Technique identique au test du SIDA.
Détection et dosage d’anticorps par la technique du test ELISA (micro-titration
sur plaque).
Manipulation proposée
Doser un anticorps de lapin anti-BSA à l’aide d’un support tapissé de BSA et d’un
anticorps anti-Immunoglobuline de lapin couplé à la peroxydase.
Nous vous fournissons des plaques prêtes à l’emploi. Vous réalisez une gamme
étalon de dilution de l’anticorps à doser (anti-BSA) ainsi que quelques témoins
notamment un sérum non-immunisé contre la BSA. De plus, chaque binôme
pourra doser un sérum immunisé de concentration inconnue en le comparant à
la gamme étalon.
Chaque binôme dispose d’une barrette de huit puits et réalise le test. A chaque
puit correspond une concentration en anticorps à doser ou un témoin. Ensuite
un anticorps de détection est déposé dans tous les puits, cet anticorps est dirigé
contre les immuno-globulines de lapin et est couplé à la peroxydase.
Après lavage, la quantité d’anticorps couplés à la peroxydase fixés sera directement
proportionnelle à la concentration de l’anticorps anti-BSA à doser. La révélation
se fait en déposant un substrat de la peroxydase (le TMB = Tétra Méthyl
Benzidine) qui se colore rapidement en bleu en présence de peroxydase.
Résultats obtenus
Plus la concentration en anticorps anti-BSA déposée est importante, plus la coloration
bleue est intense.
Aspect visuel garanti!! Un dosage en colorimétrie peut compléter la manipulation
et permettre de tracer une courbe étalon (Absorbance/concentration d’anticorps
anti-BSA).
KIT ACTIVATION DU COMPLEMENT
“ Hémolyse des hématies de mouton ”
Objectifs cognitifs
Mettre en évidence le rôle du complément et utiliser ses propriétés pour montrer
l’intérêt de l’immunisation.
Manipulation proposée
La manipulation proposée consiste à réaliser une hémolyse in vitro.
RÉF. COMP1.
84 E TTC
Composition du KIT
Pour 20 binômes
- 20 barrettes de 8 cupules de micro-titration à fond
plat ou rond
- 2 supports de barrettes
- 600ml de tampon PBS-Tween
- 12ml de PBSx10 à diluer pour obtenir 120ml de PBS
- 110µl de sérum de lapin immunisé contre la BSA
- 110µl de sérum de lapin non-immunisé
- 50µL d'anticorps anti-immunoglobuline de lapin
couplé à la peroxydase
- 10ml d'eau stérile
- 8ml de solution révélatrice de TMB prête à l’emploi
sNotice technique et pédagogique
Matériel nécessaire
Micropipettes 0 à 200 µl (Référence MSR200)
Conservation
Conservation 6 MOIS
Sérums et anticorps au congélateur.
Le reste au réfrigérateur.
Les produits
sont proposés
au détail
Composition du KIT
(Pour 20 binômes)
Préciser la date de votre
TP sur la commande
- 5 ml d’hématies de mouton
- 1,5 ml de sérum hémolytique décomplémenté
- 150 ml de tampon
- Complément lyophilisé
- 80 tubes à hémolyse stériles
- 10 poires stériles calibrées
sNotice technique et pédagogique
Conservation
Les hématies de mouton se conservent 1 semaine ou deux à
4°C. Indiquer la date de TP est impératif
Les produits
sont proposés
au détail
P. 393
P. 393
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KITS TP LYCEE
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