La dimérisation des récepteurs couplés aux protéines G (2008) - M2 ...

RésuméLes GPCRs ou récepteurs couplés aux protéines G permettent lacommunication intercellulaire de par leur diversité. En effet, ils sont capables dereconnaître différentes molécules transportant l’information extracellulaire ainsi quedes stimuli sensoriels. Tous les GPCRs possèdent une structure communeconstituée de 7 hélices transmembranaires, une extrémité N-terminale extracellulaireet une extrémité C-terminale intracellulaire permettant l’interaction avec les protéinesG qui leur sont spécifiques.Malgré leur grande diversité, le mécanisme de transduction du signal estconservé. Le GPCR est activé par fixation de son agoniste, ce qui induit deschangements conformationnels. Il peut alors interagir avec sa protéine G partenaire,qui une fois activée, pourra réguler l’activité de divers effecteurs.Il y a encore une vingtaine d’années, le modèle d’activation des protéines Gdécrivait un récepteur monomérique. Cependant, de nombreuses études ont depuismis en évidence l’homo- et l’hétérodimérisation des GPCRs.En particulier, pour le récepteur au leukotriène B 4 : BLT1, il a été montré qu’ilhomodimérise quand il est solubilisé dans du détergent après expression chez E.coli. En effet, il semblerait que ce récepteur interagisse avec sa protéine G associéesous forme d’un complexe pentamérique impliquant un dimère de BLT1 et uneprotéine G hétérotrimérique. Cependant, le récepteur monomérique est capabled’activer la protéine G, mais l’activation complète de cette dernière nécessite ladimérisation.Les études antérieures ont été menées uniquement in vitro, mais aucunepreuve n’a été apportée sur le fait que BLT1 homodimériserait in vivo. Notre projet derecherche présente différentes expériences dont le but est de démontrer la validitédu modèle de BLT1 dimérique in vitro puis in vivo. Pour cela, nous proposons deréaliser de l’immunoprécipitation sur des membranes de leucocytes humains ainsique des expériences de BRET menées sur des cellules Cos-7 exprimant notrerécepteur recombinant.2