Dosage des protÃ©ines et electrophorÃ¨se - IBMC

More documents

Recommendations

Info

Dosage des protéines: absorption aux UV (~ 190 nm)Tous les peptides pourraient absorber l'UV aux environs de 190-200nm, mais la plupart destampons absorbent aussi massivement dans cette région...Formes de résonance de la liaison peptidique.Absorbance à 191-194 nm.Cette mesure est moins dépendante de la composition en acides aminées des protéines.NB Toutes les mesures dabsorbance aux UV sont effectuées avec des cuves en quartz, car ellesont les seules à ces longueurs donde à permettre 100% de transmission des rayons.
Dosage des protéines: par méthodes colorimétriques.Ces techniques demandent un traitement del'échantillon à mesurer par une substancechimique qui, au contact des protéines, produiraun changement de couleur que l'on peut quantifierpar spectrophotométrie si on dispose d'unecourbe standard fiable.Méthode du biuretTechnique pour détecter les protéines dans une solution, qui prends son nom de la substancebiuret (H2NCONHCONH2), formée quand l’urée est chauffée (elle présente une liaison de typepeptidique).En conditions alcalines le cuivre (Cu 2+ ) apporté sous forme de sel (sulfate de cuivre) réagit avecles liaisons peptidiques des protéines et la solution se colore en violet avec une absorptionmaximum à 550 nm. Cette coloration ne se développe pas en présence de acides aminées libres.Méthode linéaire : couleur ---> complexe liaison peptidique et ion cuivre Cu 2+ , pas dedépendance de la composition en aa.Peu sensible (1-6 mg/mL): complexe à bas coefficient dextinction.Interférence avec les sels d'ammonium.
Page 2 and 3: Dosage des protéinesPendant une pu
Page 4 and 5: Loi de Beer-LambertLorsqu’un fais
Page 6 and 7: Remarques-La loi de Beer-Lambert es
Page 8 and 9: Dosage des protéines: absorption a
Page 12 and 13: Dosage des protéines: par méthode
Page 14 and 15: Purification des protéinesTout le
Page 16 and 17: Suivi de purification: dosage d’a
Page 18 and 19: ELECTROPHORESE
Page 20 and 21: Electrophorèse sur gel de polyacry
Page 22 and 23: Electrophorèse sur gel dénaturant
Page 24 and 25: Electrophorèse sur gel dénaturant
Page 26 and 27: Focalisation isoélectrique (FIE)Le
Page 28 and 29: Electrophorèse bidimensionnelle200
Page 30: Western blotCette technique permet

Dosage des protÃ©ines et electrophorÃ¨se - IBMC

Create successful ePaper yourself

Delete template?

Save as template?