Dosage des protéines et electrophorèse - IBMC

Focalisation isoélectrique (FIE)Le principe de base de la focalisation isoélectrique (FIE) est de créer un gradient de pH danslequel les protéines pourront se déplacer soumises à un champ électrique.Arrivées au pH correspondant à leur pHi, les protéines s'immobiliseront puisque leur charge nettesera nulle.De cette façon, il est possible de séparer les protéines d'une préparation selon leur pHi.On peut créer un tel gradient de pH avec desampholytes.Ampholytes = oligomères de faible massemoléculaire (300 à 600 Da) qui portent desgroupes amino (+) et carboxyliques (-)aliphatiques ---> éventail de pHi sous l’effet de E.Ampholytes-CH 2 -N-(CH 2 ) n -N-CH 2(CH2) n RNR 2n = 2 ou 3R = H ou -(CH 2 ) n -COOHAcide phosphoriqueH 3PO 4triéthanoamine