Dosage des protÃ©ines et electrophorÃ¨se - IBMC

More documents

Recommendations

Info

Dosage des protéines: absorption aux UV (280 nm)Systèmes de chromatographie ---> cellule spectrophotométrique.Le tryptophane (Trp, W) et la tyrosine (Tyr, Y) absorbent la lumière UV avec un pic à 280 nmdintensité décroissante.HybrideTryptophaneOTyrosineOH 2 N CH COHH 2 N CH COHCH 2CH 2Formes de résonance de l’anneau benzénique.Il est présent dans le tryptophane et la tyrosine.Absorbance à 280 nm.HNOHLe coefficient d'extinction de chaque protéine variera selon sa richesse en W et Y.
Dosage des protéines: absorption aux UV (280 nm)Le coefficient d'extinction molaire de chaque protéine variera selon sa richesse en W et Y.Dosage de la concentration des protéines totales dun extrait: on utilise le coefficient dextinctionmassique générique pour toutes les protéines qui correspond à labsorbance à 280 nm dunesolution protéique de concentration de 1mg / mL mesuré dans une cuvette de 1 cm. Cette valeurest de 1. 1mg/mL = 1,0280nmMéthode de Warburg-Christian: lecture de labsorbance à 280 nm et à 260 nm (correction pourles acides nucléiques). On calcule le rapport des absorbances 280/260 et on détermine lepourcentage dacides nucléiques dans la solution en utilisant le tableau.RapportA 280nm /A 260nmTeneur en acidesnucléiques (%)1.75 0.01.52 0.51.36 1.01.25 1.51.16 2.01.03 3.00.94 4.00.82 6.00.75 8.00.67 12.0On calcule la concentration des protéines (mg /mL) par larelation suivante:C = d x ( A 280 nm x 1,55 - A 260 nm x 0,76)d = facteur de dilution de la solution protéiqueutilisé pour les mesures dabsorbance.
Page 2 and 3: Dosage des protéinesPendant une pu
Page 4 and 5: Loi de Beer-LambertLorsqu’un fais
Page 6 and 7: Remarques-La loi de Beer-Lambert es
Page 10 and 11: Dosage des protéines: absorption a
Page 12 and 13: Dosage des protéines: par méthode
Page 14 and 15: Purification des protéinesTout le
Page 16 and 17: Suivi de purification: dosage d’a
Page 18 and 19: ELECTROPHORESE
Page 20 and 21: Electrophorèse sur gel de polyacry
Page 22 and 23: Electrophorèse sur gel dénaturant
Page 24 and 25: Electrophorèse sur gel dénaturant
Page 26 and 27: Focalisation isoélectrique (FIE)Le
Page 28 and 29: Electrophorèse bidimensionnelle200
Page 30: Western blotCette technique permet

Dosage des protÃ©ines et electrophorÃ¨se - IBMC

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?