白术多糖的溶液构象及其变化 - 陕西师范大学学报

第 40 卷 第 3 期 陕 西 师 范 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ) Vol.40 No.3
2012 年 5 月 JournalofShaanxiNormalUniversity (NaturalScienceEdition) May,2012
文 章 编 号 :16724291(2012)03009806
白 术 多 糖 的 溶 液 构 象 及 其 变 化
王 艳 丽 , 张
静
( 陕 西 师 范 大 学 食 品 工 程 与 营 养 科 学 学 院 , 陕 西 西 安 710062)
摘 要 : 采 用 刚 果 红 实 验 判 断 白 术 多 糖 WAM 在 溶 液 中 的 构 象 特 征 , 通 过 测 定 不 同 溶 液 体 系 中 多
糖 分 子 的 黏 度 、 比 旋 度 、 紫 外 吸 收 光 谱 和 圆 二 色 谱 的 变 化 来 研 究 多 糖 构 象 及 其 变 化 规 律 . 实 验 结 果
表 明 :WAM 不 具 有 螺 旋 结 构 , 温 度 、 金 属 离 子 、 变 性 剂 均 可 以 使 WAM 构 象 发 生 改 变 .WAM 在 溶
液 中 以 无 规 则 线 团 形 式 存 在 .
关 键 词 : 构 象 ; 黏 度 ; 旋 光 度 ; 圆 二 色 性
中 图 分 类 号 :TS201.2 文 献 标 志 码 :A
犜 犺 犲 犮 狅 狀 犳 狅 狉 犿 犪 狋 犻 狅 狀 犻 狀 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀 犪 狀 犱 犻 狋 狊 犮 犺 犪 狀 犵 犲 犳 狉 狅 犿
犃 狋 狉 犪 犮 狋 狔 犾 狅 犱 犲 狊 犿 犪 犮 狉 狅 犮 犲 狆 犺 犪 犾 犪 犓 狅 犻 犱 狕
WANG Yanli,ZHANGJing
(ColegeofFoodEngineeringandNutritionScience,
ShaanxiNormalUniversity,Xi′an710062,Shaanxi,China)
犃 犫 狊 狋 狉 犪 犮 狋 :Congo red experimentsis used to determine conformation of WAM in solution
preliminarily.Viscosity,therotationchanges,UVspectroscopyandcirculardichroismofWAMin
diferentsolutionaremeasuredtostudythemolecularchainconformationandvariation.Results
showthatWAM don′thavespiralstructure,temperature,metalions,anddenaturantscancause
theWAMconformationalchange.WAM haverandomcoilforminsolution.
犓 犲 狔 狑 狅 狉 犱 狊 :conformation;viscosity;rotation;circulardichroism
白 术 为 菊 科 植 物 白 术 ( 犃 狋 狉 犪 犮 狋 狔 犾 狅 犱 犲 狊
犿 犪 犮 狉 狅 犮 犲 狆 犺 犪 犾 犪 犓 狅 犻 犱 狕 ) 的 干 燥 根 茎 , 具 有 健 脾 益 气 、
燥 湿 利 水 、 止 汗 安 胎 之 效 [1] . 现 代 药 理 学 表 明 , 多 糖
是 中 草 药 发 挥 独 特 疗 效 的 重 要 物 质 基 础 . 目 前 对 白
术 多 糖 的 研 究 主 要 以 提 取 分 离 纯 化 及 结 构 为 主 , 侯
[2]
轩 等 采 用 复 合 酶 法 提 取 白 术 多 糖 , 对 其 进 行 分 离
[3]
纯 化 并 测 得 白 术 多 糖 分 子 质 量 . 梁 中 焕 等 测 得 白
术 多 糖 主 要 以 葡 萄 糖 、 半 乳 糖 、 甘 露 糖 、 鼠 李 糖 为 主
体 , 通 过 β1→4,1→6 糖 苷 键 相 连 的 杂 多 糖 , 但 目 前
对 白 术 多 糖 溶 液 行 为 及 构 象 的 研 究 尚 未 见 报 道 . 为
了 更 全 面 地 认 识 和 利 用 白 术 这 一 珍 贵 的 植 物 资 源 ,
本 文 对 白 术 多 糖 的 溶 液 行 为 及 构 象 进 行 研 究 , 为 白
术 多 糖 的 临 床 应 用 和 开 发 研 究 提 供 依 据 .
1 材 料 与 方 法
1.1 材 料 与 试 剂
白 术 购 于 西 安 市 中 药 材 店 , 经 陕 西 师 范 大 学 生
命 科 学 学 院 植 物 学 研 究 室 鉴 定 ; 化 学 试 剂 均 为 分
析 纯 .
1.2 仪 器 与 设 备
恒 温 水 浴 锅 (HH—SA 型 ), 北 京 科 伟 永 兴 仪 器
有 限 公 司 ; 乌 氏 黏 度 计 , 上 海 玻 璃 仪 器 一 厂 ;JB—3
型 定 时 恒 温 磁 力 搅 拌 器 , 上 海 雷 磁 新 泾 仪 器 有 限 公
司 ;Alphal—4 型 真 空 冷 冻 干 燥 机 , 德 国 CHRIST 公
司 ; 圆 二 色 谱 仪 , 英 国 应 用 光 物 理 公 司 ; 不 锈 钢 超 声
水 浴 加 热 提 取 器 , 上 海 宁 商 超 声 仪 器 有 限 公 司 ;
收 稿 日 期 :20110929
基 金 项 目 : 国 家 自 然 科 学 基 金 资 助 项 目 (10874108); 陕 西 省 自 然 科 学 基 础 研 究 计 划 (SJ08A16).
第 一 作 者 : 王 艳 丽 , 女 , 硕 士 研 究 生 , 主 要 研 究 方 向 为 天 然 产 物 有 效 成 分 的 化 学 研 究 .Email:yanliwang1025@163.com.
通 信 作 者 : 张 静 , 女 , 副 教 授 .Email:zhangjin@snnu.edu.cn.

第 3 期 王 艳 丽 等 : 白 术 多 糖 的 溶 液 构 象 及 其 变 化 99
PHS—3C 精 密 酸 度 计 , 上 海 实 验 仪 器 厂 有 限 公 司 ;
WZZ—15 数 字 式 自 动 旋 光 仪 , 杭 州 科 博 仪 器 有 限 公
司 ;TU—1810 紫 外 可 见 分 光 光 度 计 , 北 京 普 析 通 用
仪 器 有 限 责 任 公 司 .
1.3 方 法
1.3.1 白 术 多 糖 的 提 取 白 术 干 燥 茎 → 真 空 干 燥
24h→ 粉 碎 过 20 目 筛 →75% 乙 醇 脱 脂 → 浸 提 ( 料 液
比 1∶30, 提 取 温 度 60 ℃)→4020r/min 离 心 20
min→ 上 清 液 浓 缩 →3 倍 体 积 95% 乙 醇 沉 淀 12h→
4020r/min 离 心 20min→ 沉 淀 透 析 →4020r/min
离 心 20min→ 上 清 冷 冻 干 燥 → 白 术 粗 多 糖 (AM).
1.3.2 白 术 多 糖 的 分 离 纯 化 及 纯 度 鉴 定 采 用
DEAE—Celulose—52 色 谱 柱 (2.5cm×80cm) 和
SephadexG—200 葡 聚 糖 凝 胶 柱 层 析 对 AM 进 行 分
离 纯 化 , 凝 胶 柱 层 析 洗 脱 曲 线 呈 现 单 一 对 称 峰 , 经 高
效 液 相 色 谱 法 鉴 定 为 单 一 对 称 峰 , 确 定 其 为 均 一 组
分 (WAM).
[4]
1.3.3 刚 果 红 试 验 刚 果 红 溶 液 浓 度 为 80
mg/mL,WAM 溶 液 浓 度 为 10mg/mL,NaOH 依 次
配 成 不 同 浓 度 (0.1~1.0 mol/L, 用 邻 苯 二 甲 酸 氢
钾 标 定 ), 将 WAM 溶 液 、 刚 果 红 溶 液 、NaOH 溶 液
按 体 积 比 1∶1∶2 混 合 并 摇 匀 ,25 ℃ 下 静 置 10min
后 用 紫 外 分 光 光 度 仪 于 400~600nm 进 行 扫 描 , 依
次 测 定 混 合 液 在 不 同 浓 度 的 NaOH 下 最 大 吸 收 波
长 的 变 化 .
[5]
1.3.4 WAM 黏 度 的 测 定 用 乌 氏 黏 度 计 , 在
不 同 条 件 下 测 定 WAM 的 比 浓 黏 度 ( η ) sp .
η sp= ( η / η 0-1)/ 犆 .
式 中 : η 0
为 蒸 馏 水 的 黏 度 ; 犆 为 待 测 溶 液 的 浓 度 ; η
为 待 测 溶 液 的 黏 度 .
1.3.5 WAM 旋 光 度 的 测 定 用 WZZ—15 数 字
式 自 动 旋 光 仪 在 20 ℃ 和 589nm 钠 光 下 测 不 同 条
件 WAM 溶 液 的 比 旋 光 度 .
[6]
1.3.6 WAM 的 紫 外 吸 收 光 谱 和 圆 二 色 谱 测 定
将 WAM 配 制 成 1.0 mg/mL 的 溶 液 , 以 紫 外 吸
收 光 谱 仪 和 圆 二 色 谱 仪 进 行 测 定 , 波 长 范 围 180~
400nm. 通 过 改 变 温 度 、pH 值 、 添 加 金 属 离 子 、 络 合
剂 及 溶 剂 二 甲 基 亚 砜 (DMSO) 等 不 同 外 界 因 素 观 察
WAM 的 紫 外 吸 收 光 谱 和 圆 二 色 谱 的 变 化 , 进 而 观
察 其 构 象 的 变 化 .
2 结 果 与 分 析
2.1 刚 果 红 试 验 结 果
刚 果 红 是 一 种 酸 性 染 料 , 可 与 具 有 多 股 螺 旋 构
象 的 多 糖 形 成 配 合 物 , 配 合 物 的 最 大 吸 收 波 长 会 发
生 红 移 . 在 一 定 的 NaOH 浓 度 范 围 内 , 配 合 物 出 现
亚 稳 区 [7] .
图 1
犉 犻 犵 .1
犠 犃 犕 刚 果 红 复 合 物 的 最 大 吸 收 波 长 变 化
犆 犺 犪 狀 犵 犲 狅 犳 狋 犺 犲 犿 犪 狓 犻 犿 狌 犿 犪 犫 狊 狅 狉 狆 狋 犻 狅 狀 狑 犪 狏 犲 犾 狀 犵 狋 犺
狅 犳 狋 犺 犲 犆 狅 狀 犵 狅 狉 犲 犱 犠 犃 犕 犮 狅 犿 狆 犾 犲 狓
a. 刚 果 红 +WAM;b. 刚 果 红 .
如 图 1 所 示 ,NaOH 的 浓 度 在 0~0.5mol/L 之
间 变 化 时 , 刚 果 红 与 WAM 结 合 形 成 的 配 合 物 虽 然
也 发 生 红 移 , 但 其 配 合 物 的 紫 外 吸 收 没 有 发 生 大 的
改 变 , 即 未 出 现 亚 稳 区 , 说 明 WAM 不 具 有 三 螺 旋
结 构 .WAM 与 已 报 道 的 主 要 由 线 性 和 分 支 的 (1→
[6]
3)-β-D- 葡 聚 糖 构 成 的 多 糖 如 香 菇 多 糖 在 碱
性 溶 液 中 呈 三 股 螺 旋 构 象 不 同 , 而 与 通 过 β1→4,1
→6 糖 苷 键 相 连 的 杂 多 糖 茶 多 糖 TPS41 [7] 相 类 似 ,
可 能 为 无 规 线 团 链 构 象 .
2.2 犠 犃 犕 溶 液 比 浓 黏 度 测 定 结 果
2.2.1 浓 度 对 WAM 溶 液 比 浓 黏 度 的 影 响 不 同
浓 度 WAM 溶 液 在 25 ℃ 恒 温 水 浴 锅 中 保 温 30min
后 测 定 其 比 浓 黏 度 , 结 果 如 图 2 所 示 .
犉 犻 犵 .2
图 2
浓 度 对 犠 犃 犕 溶 液 比 浓 黏 度 的 影 响
犈 犳 犲 犮 狋 狅 犳 犮 狅 狀 犮 犲 狀 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀 狅 狀 狏 犻 狊 犮 狅 狊 犻 狋 狔 狅 犳 犠 犃 犕 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀
可 以 看 出 WAM 的 浓 度 较 低 (1~6 mg/mL)
时 , 比 浓 黏 度 随 着 浓 度 的 增 长 幅 度 较 小 ; 在 浓 度 6~
8mg/mL 的 范 围 内 , 增 长 的 幅 度 较 大 , 说 明 随 着 溶
液 中 WAM 含 量 的 增 加 , 多 糖 分 子 之 间 相 互 聚 合 的
程 度 逐 渐 增 加 . 这 种 现 象 与 一 般 高 分 子 溶 液 的 比 浓
黏 度 特 性 相 符 [9] .
2.2.2 温 度 对 WAM 溶 液 比 浓 黏 度 的 影 响 5
mg/mL WAM 溶 液 在 不 同 温 度 的 水 浴 锅 中 保 温 30
min 后 测 定 其 比 浓 黏 度 , 结 果 如 图 3 所 示 .

100 陕 西 师 范 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ) 第 40 卷
增 大 , 这 可 能 是 由 于 多 糖 分 子 链 中 存 在 的 羟 基 与 某
些 金 属 离 子 发 生 络 合 作 用 , 形 成 蛋 一 箱 结 构 , 导 致 溶
液 比 浓 黏 度 增 加 , 也 有 可 能 是 金 属 离 子 的 加 入 使
WAM 溶 液 的 构 象 发 生 变 化 造 成 溶 液 比 浓 黏 度
增 加 .
图 3
温 度 对 犠 犃 犕 溶 液 黏 度 的 影 响
犉 犻 犵 .3 犈 犳 犲 犮 狋 狅 犳 狋 犲 犿 狆 犲 狉 犪 狋 狌 狉 犲 狅 狀 狏 犻 狊 犮 狅 狊 犻 狋 狔 狅 犳 犠 犃 犕 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀
a. 温 度 上 升 ;b. 温 度 下 降 .
可 以 看 出 , 在 25~35 ℃ 时 WAM 的 比 浓 黏 度
变 化 不 显 著 ,35~70 ℃ 时 WAM 的 比 浓 黏 度 随 温 度
的 增 加 而 减 小 , 这 可 能 是 由 于 热 力 作 用 破 坏 了
WAM 分 子 侧 链 间 的 氢 键 和 离 子 键 , 使 WAM 的 多
聚 体 结 构 变 为 低 聚 体 . 温 度 上 升 和 下 降 过 程 中 溶 液
比 浓 黏 度 曲 线 并 不 重 合 , 即 黏 度 不 完 全 成 弹 性 恢 复 .
这 可 能 由 黏 度 变 化 的 滞 后 现 象 和 热 力 破 坏 作 用 共 同
引 起 [10] .
2.2.3 pH 值 对 WAM 溶 液 比 浓 黏 度 的 影 响 用
盐 酸 溶 液 调 节 WAM 溶 液 酸 性 , 氢 氧 化 钠 溶 液 调 节
碱 性 , 测 定 不 同 pH 值 下 WAM 溶 液 的 比 浓 黏 度 , 结
图 5 金 属 离 子 对 犠 犃 犕 溶 液 比 浓 黏 度 的 影 响
犉 犻 犵 .5 犈 犳 犲 犮 狋 狅 犳 犿 犲 狋 犪 犾 犻 狅 狀 狊 狅 狀 狏 犻 狊 犮 狅 狊 犻 狋 狔 狅 犳 犠 犃 犕 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀
a.NaCl;b.KCl;c.CaCl2;d.MgCl2.
2.2.5 变 性 剂 对 WAM 溶 液 黏 度 的 影 响 不 同 浓
度 的 脲 溶 液 与 5 mg/mLWAM 溶 液 等 体 积 混 合 后 ,
在 25℃ 恒 温 水 浴 中 保 温 30 min 后 测 定 其 比 浓 黏
度 , 测 定 结 果 如 图 6 所 示 .
果 如 图 4 所 示 .
图 6
变 性 剂 对 犠 犃 犕 溶 液 比 浓 黏 度 的 影 响
犉 犻 犵 .6 犈 犳 犲 犮 狋 狅 犳 犱 犲 狀 犪 狋 狌 狉 犪 狀 狋 狅 狀 狏 犻 狊 犮 狅 狊 犻 狋 狔 狅 犳 犠 犃 犕 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀
图 4 狆 犎 值 对 犠 犃 犕 溶 液 比 浓 黏 度 的 影 响
犉 犻 犵 .4 犈 犳 犲 犮 狋 狅 犳 狆 犎 狏 犪 犾 狌 犲 狅 狀 狏 犻 狊 犮 狅 狊 犻 狋 狔 狅 犳 犠 犃 犕 狊 狅 犾 狌 狋 犻 狅 狀
可 以 看 出 , 随 着 pH 值 的 增 加 WAM 溶 液 的 比
浓 黏 度 呈 先 增 加 后 减 小 的 趋 势 , 在 pH 值 为 7 时 达
到 最 大 值 12.886 mL/g, 这 可 能 是 由 于 添 加 的 氢 离
子 和 氢 氧 根 离 子 对 WAM 的 结 构 均 有 一 定 的 破 坏
作 用 , 导 致 了 溶 液 比 浓 黏 度 的 降 低 . 在 酸 性 溶 液 中 ,
WAM 比 浓 黏 度 基 本 保 持 不 变 , 说 明 其 在 酸 性 溶 液
中 稳 定 性 良 好 , 可 用 于 酸 性 食 品 中 .
2.2.4 金 属 离 子 对 WAM 溶 液 比 浓 黏 度 的 影 响
不 同 浓 度 的 NaCl、KCl、MgCl 2
、CaCl 2
溶 液 与 5 mg/
mL WAM 溶 液 等 体 积 混 合 后 , 在 25℃ 恒 温 水 浴 中
保 温 30min 后 测 定 其 比 浓 黏 度 , 测 定 结 果 如 图 5
所 示 .
可 以 看 出 ,Na + 、K + 对 WAM 溶 液 的 比 浓 黏 度
影 响 较 大 , 而 Ca 2+ 、Mg 2+ 对 其 影 响 较 小 . 在 实 验 浓
度 范 围 内 随 着 金 属 离 子 浓 度 的 增 加 其 比 浓 黏 度 逐 渐
可 以 看 出 , 在 脲 浓 度 从 0.1 mol/L 升 至 0.6
mol/L 时 WAM 溶 液 的 比 浓 黏 度 逐 渐 增 大 , 而 浓 度
高 于 0.6mol/L 时 比 浓 黏 度 有 所 下 降 , 当 脲 的 浓 度
为 0.6mol/L 时 ,WAM 溶 液 的 比 浓 黏 度 出 现 最 大
值 , 这 可 能 是 由 于 变 性 剂 使 WAM 分 子 中 存 在 的 一
些 氢 键 发 生 断 裂 , 造 成 WAM 的 结 构 有 所 伸 展 , 导
致 溶 液 比 浓 黏 度 增 大 .
2.3 不 同 浓 度 的 犖 犪 犗 犎 对 犠 犃 犕 比 旋 度 的 影 响
图 7 犖 犪 犗 犎 浓 度 对 犠 犃 犕 比 旋 度 的 影 响
犉 犻 犵 .7 犈 犳 犲 犮 狋 狊 狅 犳 狏 犪 狉 犻 狅 狌 狊 犮 狅 狀 犮 犲 狀 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀 狊 狅 犳 犖 犪 犗 犎
狅 狀 狅 狆 狋 犻 犮 犪 犾 狉 狅 狋 犪 狋 犻 狅 狀 狊 狅 犳 犠 犃 犕
如 图 7 所 示 , 随 NaOH 浓 度 的 增 加 ,WAM 的

第 3 期 王 艳 丽 等 : 白 术 多 糖 的 溶 液 构 象 及 其 变 化 101
比 旋 光 度 呈 线 性 下 降 趋 势 , 在 一 定 NaOH 浓 度 范 围
内 比 旋 度 值 是 不 断 发 生 变 化 的 , 表 明 在 溶 液 中 以 无
[12]
规 线 团 结 构 形 式 存 在 . 张 翼 伸 等 研 究 表 明 NaOH
浓 度 在 0~0.15mol/L 范 围 内 树 舌 多 糖 CF2a 水 溶
液 的 比 旋 度 值 基 本 不 变 , 大 于 0.15mol/L 后 比 旋 度
值 急 剧 下 降 , 至 0.25 mol/L 后 不 再 变 化 , 这 表 明
CF2a 在 NaOH 浓 度 小 于 0.15 mol/L 前 为 有 序 构
象 , 在 0.15~0.25mol/L 之 间 为 有 序 向 无 序 构 象 转
化 过 程 , 大 于 0.25 mol/L 后 则 为 无 序 构 象 , 而
WAM 在 所 测 定 的 NaOH 浓 度 范 围 内 不 存 在 这 种
特 征 变 化 , 揭 示 其 可 能 为 无 规 线 团 链 构 象 .
2.4 圆 二 色 谱 和 紫 外 光 谱 测 定 犠 犃 犕 构 象 的 转 变
2.4.1 浓 度 对 WAM 构 象 的 影 响 分 别 配 置 浓 度
为 1.0 和 0.1mg/mL WAM 水 溶 液 , 测 定 其 紫 外 吸
收 光 谱 和 圆 二 色 谱 , 观 察 WAM 在 不 同 浓 度 下 溶 液
构 象 的 转 变 , 测 定 结 果 如 图 8 所 示 .
图 8 不 同 浓 度 的 犠 犃 犕 紫 外 吸 收 光 谱 图 ( 犃 ) 和 圆 二 色 谱 ( 犅 )
犉 犻 犵 .8 犈 犳 犲 犮 狋 狊 狅 犳 犮 狅 狀 犮 犲 狀 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀 狅 狀 狋 犺 犲 犝 犞 狊 狆 犲 犮 狋 狉 狌 犿 ( 犃 ) 犪 狀 犱 狋 犺 犲 犆 犇 狊 狆 犲 犮 狋 狉 狌 犿 ( 犅 ) 狅 犳 犠 犃 犕
a.1.0mg/mL;b.0.1mg/mL.
紫 外 吸 收 光 谱 中 , 随 着 浓 度 的 增 加 WAM 的 紫
外 吸 收 峰 发 生 了 红 移 且 吸 光 值 增 加 . 在 圆 二 色 谱 中 ,
所 致 .
2.4.2 温 度 对 WAM 构 象 的 影 响 测 定 20、60 和
在 较 高 浓 度 条 件 下 , 负 峰 发 生 了 红 移 , 这 说 明 浓 度 对
WAM 分 子 的 不 对 称 性 增 加 , 可 能 是 由 于 多 糖 分 子
链 间 的 相 互 作 用 较 大 , 导 致 分 子 的 缠 绕 和 无 规 聚 集
100 ℃ 下 WAM 水 溶 液 的 紫 外 吸 收 光 谱 和 圆 二 色
谱 , 观 察 WAM 在 不 同 温 度 下 溶 液 构 象 的 转 变 , 测
定 结 果 如 图 9 所 示 .
图 9 不 同 处 理 温 度 下 犠 犃 犕 的 紫 外 光 谱 图 ( 犃 ) 和 圆 二 色 谱 图 ( 犅 )
犉 犻 犵 .9 犈 犳 犲 犮 狋 狊 狅 犳 狋 犲 犿 狆 犲 狉 犪 狋 狌 狉 犲 狅 狀 狋 犺 犲 犝 犞 狊 狆 犲 犮 狋 狉 狌 犿 ( 犃 ) 犪 狀 犱 狋 犺 犲 犆 犇 狊 狆 犲 犮 狋 狉 狌 犿 ( 犅 ) 狅 犳 犠 犃 犕
a.100 ℃;b.60 ℃;c.20 ℃.
可 以 看 出 ,WAM 在 200nm 附 近 的 紫 外 吸 收
强 度 呈 现 60 ℃ 最 强 ,20 ℃ 次 之 ,100 ℃ 最 弱 , 但 峰
WAM 分 子 可 能 存 在 光 学 活 性 或 聚 集 态 结 构 上 的 突
变 点 .
的 位 置 未 发 生 明 显 变 化 . 圆 二 色 谱 中 210nm 的 负 2.4.3 钙 离 子 对 WAM 构 象 的 影 响 WAM 在
相 峰 强 度 为 60 ℃ 最 强 , 其 次 为 20 ℃,100 ℃ 最 弱 ,
这 与 紫 外 吸 收 光 谱 结 果 相 符 合 , 说 明 在 60 ℃ 时 ,
Ca 2+ 水 溶 液 中 的 紫 外 吸 收 光 谱 和 圆 二 色 谱 如 图 10
所 示 .

102 陕 西 师 范 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版 ) 第 40 卷
紫 外 吸 收 图 谱 中 ,WAM 与 CaCl 2
混 合 溶 液 的
紫 外 吸 收 略 有 红 移 , 表 明 WAM 与 钙 离 子 发 生 络
合 , 构 象 发 生 了 改 变 . 根 据 圆 二 色 谱 的 变 化 , 在 190
nm 处 正 峰 的 强 度 明 显 增 强 , 增 幅 达 65% 左 右 , 推 断
Ca 2+ 与 两 链 上 的 羧 基 作 用 , 引 起 两 链 间 的 聚 合 ,
Ca 2+ 可 与 含 羧 基 的 酸 性 多 糖 作 用 , 形 成 “ 蛋 箱 ” 结
构 , 导 致 分 子 的 不 对 称 性 增 强 , 以 上 结 果 说 明 WAM
经 钙 离 子 处 理 后 构 象 发 生 了 改 变 .
图 10
2+
犆 犪 处 理 的 犠 犃 犕 紫 外 吸 收 光 谱 ( 犃 ) 和 圆 二 色 谱 ( 犅 )
2+
犉 犻 犵 .10 犈 犳 犲 犮 狋 狅 犳 犆 犪 狅 狀 狋 犺 犲 犝 犞 狊 狆 犲 犮 狋 狉 狌 犿 ( 犃 ) 犪 狀 犱 狋 犺 犲 犆 犇 狊 狆 犲 犮 狋 狉 狌 犿 ( 犅 ) 狅 犳 犠 犃 犕
2.4.4 络 合 物 刚 果 红 对 WAM 构 象 的 影 响
WAM 与 刚 果 红 溶 液 的 紫 外 吸 收 光 谱 和 圆 二 色 谱 如
图 11 所 示 .
WAM 与 刚 果 红 络 合 后 紫 外 吸 收 光 谱 的 峰 位 基
本 保 持 不 变 但 吸 收 峰 的 强 度 减 弱 , 圆 二 色 谱 峰 的 强
度 减 弱 , 其 他 峰 值 基 本 保 持 不 变 , 未 突 然 出 现 一 个 高
峰 ( 或 者 一 个 低 谷 ) 紧 跟 着 又 出 现 一 个 低 谷 ( 或 者 一
个 高 峰 ) 的 Coton 效 应 , 表 明 WAM 可 与 刚 果 红 产
生 络 合 反 应 但 未 能 与 刚 果 红 形 成 多 股 螺 旋 的 特 征 络
合 物 , 说 明 WAM 中 不 存 在 多 股 螺 旋 构 象 , 这 与 前
a.WAM;b.WAM+CaCl2.
2.4.5 DMSO 对 WAM 紫 外 吸 收 光 谱 和 圆 二 色 性
的 影 响 WAM 与 DMSO 溶 液 的 紫 外 吸 收 光 谱 和
圆 二 色 谱 如 图 12 所 示 .
DMSO 是 一 种 氢 键 破 坏 剂 , 其 对 大 分 子 有 变 性
作 用 ,WAM 与 DMSO 络 合 后 紫 外 吸 收 光 谱 发 生 了
明 显 的 红 移 且 吸 光 值 明 显 增 加 . 圆 二 色 谱 在 250nm
处 出 现 了 正 Coton 效 应 , 在 220nm 处 出 现 了 负
Coton 效 应 , 表 明 WAM 在 水 溶 液 中 和 在 DMSO
中 分 子 的 存 在 状 态 和 分 子 间 的 相 互 作 用 有 着 明 显 的
差 异 . 以 上 结 果 说 明 DMSO 可 以 使 WAM 构 象 发 生
面 的 刚 果 红 实 验 结 果 相 吻 合 .
改 变 .
图 11 刚 果 红 处 理 的 犠 犃 犕 紫 外 吸 收 光 谱 ( 犃 ) 和 圆 二 色 谱 ( 犅 )
犉 犻 犵 .11 犈 犳 犲 犮 狋 狅 犳 犮 狅 狀 犵 狅 狅 狀 狋 犺 犲 犝 犞 狊 狆 犲 犮 狋 狉 狌 犿 ( 犃 ) 犪 狀 犱 狋 犺 犲 犆 犇 狊 狆 犲 犮 狋 狉 狌 犿 ( 犅 ) 狅 犳 犠 犃 犕
a. 刚 果 红 ;b.WAM+ 刚 果 红 .

第 3 期 王 艳 丽 等 : 白 术 多 糖 的 溶 液 构 象 及 其 变 化 103
图 12 犇 犕 犛 犗 处 理 的 犠 犃 犕 紫 外 吸 收 光 谱 ( 犃 ) 和 圆 二 色 谱 ( 犅 )
犉 犻 犵 .12 犈 犳 犲 犮 狋 狅 犳 犇 犕 犛 犗 狅 狀 狋 犺 犲 犝 犞 狊 狆 犲 犮 狋 狉 狌 犿 ( 犃 ) 犪 狀 犱 狋 犺 犲 犆 犇 狊 狆 犲 犮 狋 狉 狌 犿 ( 犅 ) 狅 犳 犠 犃 犕
3 结 论
a.WAM;b.WAM+DMSO.
[8] 陈 海 霞 . 高 活 性 茶 多 糖 的 一 级 结 构 表 征 、 空 间 构 象 及 生
物 活 性 的 研 究 [D]. 武 汉 : 华 中 农 业 大 学 食 品 科 学 技 术 学
WAM 在 溶 液 中 是 以 无 规 则 线 团 链 存 在 , 在 溶
液 中 不 具 备 固 定 的 形 态 , 因 此 容 易 受 到 外 界 环 境 的
影 响 而 发 生 改 变 , 如 在 DMSO 溶 剂 体 系 中 时 WAM
分 子 不 对 称 性 改 变 . 温 度 改 变 对 白 术 多 糖 圆 二 色 性
的 影 响 表 明 ,WAM 多 糖 分 子 内 或 分 子 间 靠 氢 键 或
范 德 华 力 所 维 系 的 高 级 结 构 是 不 稳 定 的 , 一 定 强 度
的 热 运 动 就 足 以 使 这 种 结 构 发 生 大 的 改 变 .
参 考 文 献 :
[1] 董 岩 , 辛 炳 炜 . 白 术 化 学 成 分 研 究 新 进 展 [J]. 山 东 医 药
工 业 ,2003,22(3):3233.
[2] 侯 轩 , 周 家 容 , 田 允 波 . 白 术 多 糖 的 提 取 、 分 离 纯 化 及 分
子 量 测 定 [J]. 仲 恺 农 业 工 程 学 院 学 报 ,2009,22(2):
1821.
[3] 梁 中 焕 , 郭 志 欣 , 张 丽 萍 . 白 术 水 溶 性 多 糖 的 结 构 特 征
[J]. 分 子 科 学 学 报 ,2007,23(3):185188.
[4] 史 怀 , 刘 波 , 苏 明 星 , 等 . 淡 紫 拟 青 霉 胞 外 多 糖 的 分 离 、 纯
化 及 结 构 分 析 [J]. 生 物 工 程 学 报 ,2010,26(8):
10801087.
[5] 蒋 挺 大 . 甲 壳 素 [M]. 北 京 : 化 学 工 业 出 版 社 ,2003:
279280.
[6] 闫 景 坤 . 抗 氧 化 新 型 冬 虫 夏 草 胞 外 多 糖 制 备 结 构 与 溶 液
特 征 研 究 [D]. 广 州 : 华 南 理 工 大 学 轻 工 与 食 品 学
院 ,2010.
[7] 滕 利 荣 , 洪 水 声 , 孟 庆 繁 , 等 . 普 鲁 兰 多 糖 的 粘 度 性 质 研
院 ,2002.
[9] 倪 德 江 , 陈 玉 琼 , 谢 笔 钧 . 乌 龙 茶 多 糖 OTPS21 的 光 谱
特 性 、 形 貌 特 征 及 热 热 性 研 究 [J]. 高 等 化 学 学 报 ,2004,
25(12):22632268.
[10] 郑 良 , 卢 晓 黎 . 银 耳 溶 液 在 不 同 影 响 因 素 下 的 粘 度 特 性
[J]. 食 品 科 学 ,2003,24(8):4143.
[11] 张 熹 , 祖 国 仁 , 孙 浩 , 等 . 芽 胞 杆 菌 B-09 产 胞 外 多 糖 培
养 基 优 化 及 多 糖 黏 度 性 质 [J]. 中 国 酿 造 ,2011(1):
7477.
[12] 周 林 , 郭 祀 远 , 蔡 妙 颜 , 等 . 裂 褶 菌 胞 外 多 糖 的 粘 度 性 质
及 其 构 象 研 究 [J]. 食 品 与 发 酵 工 程 ,2005,31(11):14.
[13]Liang Z Y,Zhang Y S,Miao C Y,etal.Studieson
conformationbehaviorofglucanCF2afrom Ganoderma
applanatum in solution [J].Acta Biochemistry et
BiophysicaSinica,1994,26:411416.
[14] 吴 东 儒 . 糖 类 的 生 物 化 学 [M]. 北 京 : 高 等 教 育 出 版 社 ,
1988:582586.
[15] 李 盛 许 , 淑 琴 , 张 俐 娜 . 菌 类 多 糖 链 构 象 及 其 表 征 方 法
研 究 进 展 [J]. 高 分 子 学 报 ,2010,12(12):13591374.
[16] 陈 义 勇 . 桦 褐 孔 菌 多 糖 纯 化 、 结 构 及 其 抗 肿 瘤 机 制 研 究
[D]. 无 锡 : 江 南 大 学 食 品 学 院 ,2010.
[17] 段 金 友 . 圆 二 色 谱 在 糖 类 化 合 物 结 构 研 究 中 的 应 用
[J]. 天 然 产 物 研 究 与 开 发 ,2004,16(1):7175.
〔 责 任 编 辑 程 琴 娟 〕
究 [J]. 食 品 科 学 ,2003,24(10):3235.