Visualizza / Stampa - IDEXX Laboratories
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<strong>IDEXX</strong> Vet•Med•Lab<br />
Vet·Med·Lab<br />
Divisione di <strong>IDEXX</strong> <strong>Laboratories</strong> Italia s.r.l.<br />
Via Quasimodo, 46<br />
I-40013 Castel Maggiore (BO)<br />
Num. verde 800 011 822<br />
Tel. +39 051 709 4701<br />
Fax +39 051 709 4702<br />
www.idexx.it<br />
IT-116-0409<br />
Manuale<br />
<strong>IDEXX</strong> Vet•Med•Lab<br />
Manuale<br />
<strong>IDEXX</strong> Vet•Med•Lab
Manuale<br />
<strong>IDEXX</strong> Vet·Med·Lab
<strong>IDEXX</strong> Vet·Med·Lab, 1. Nuova versione 2009<br />
Gentili colleghe e colleghi,<br />
Maggio 2009<br />
siamo lieti di poterVi presentare la prima versione italiana del nostro Manuale, il catalogo<br />
dei servizi di <strong>IDEXX</strong> Vet·Med·Lab.<br />
Il laboratorio <strong>IDEXX</strong> Vi offre una vastissima gamma di esami nei vari settori di ematologia,<br />
biochimica, endocrinologia, tossicologia, sierologia, biologia molecolare, allergologia,<br />
istopatologia, microbiologia.<br />
Oltre ai singoli parametri mettiamo a Vostra disposizione numerosi profili per le diverse specie<br />
animali: dai profili ematochimici a quelli endocrinologici, dai profili per la malattie infettive ai<br />
profili allergologici ed altri ancora.<br />
All'interno delle varie procedure analitiche qui presentate, desidero portare la Vostra attenzione<br />
in particolare su alcuni parametri, a testimonianza dell'intenzione di <strong>IDEXX</strong> Vet·Med·Lab di<br />
offrire, a Voi clienti, attraverso continue innovazioni, la migliore diagnostica possibile.<br />
Innanzitutto <strong>IDEXX</strong> Vet·Med·Lab è dal 2006 uno dei pochi laboratori autorizzati dalla<br />
Commissione Europea all'analisi degli anticorpi contro la rabbia, valida per il passaporto<br />
europeo.<br />
Dopo il test per la lipasi canina specifica del pancreas (Spec cPL ® ) è stato introdotto<br />
recentemente anche lo stesso test per il gatto, lo Spec fPL TM . Questo esame permette una<br />
diagnostica per pancreatite felina sicura e sensibile, oltre che rapida, non dovendo più<br />
inviare il campione negli Stati Uniti.<br />
Sotto il nuovo nome di Cardiopet TM proBNP è a Vostra disposizione il parametro di<br />
screening cardiologico Nt-proBNP ulteriormente migliorato da <strong>IDEXX</strong>.<br />
La Real-time PCR permette di fornirVi degli esiti più sicuri ed accurati nell'ambito della<br />
diagnostica delle malattie infettive.<br />
Molte di queste innovazioni non sarebbero state possibili senza l'inserimento del Vet·Med·Lab<br />
nel gruppo di laboratori <strong>IDEXX</strong>.<br />
Grazie alla cooperazione intra-aziendale di tutti i settori diagnostici, <strong>IDEXX</strong> è finalmente in<br />
grado di offrire a Voi clienti programmi di analisi personalizzati per il Vostro ambulatorio -<br />
che si tratti di laboratori esterni, di apparecchiature interne all'ambulatorio o di test rapidi.<br />
Siamo lieti della collaborazione avviata e restiamo sempre a Vostra disposizione per qualsiasi<br />
domanda, come per suggerimenti o critiche.<br />
Ringraziamo sentitamente il Prof. George Lubas per il prezioso contributo alla stesura di<br />
questo manuale!<br />
I nostri migliori saluti,<br />
Dott.ssa Angela Cappeller Sergio Rotondo Dott.ssa Sabine Loewer<br />
Operation Manager Sales Manager Key Account Manager
<strong>IDEXX</strong> Vet·Med·Lab, 1. Nuova versione 2009<br />
Indice Generale<br />
1 Indice Alfabetico I<br />
2 Istruzioni di carattere generale 1<br />
2.1. Istruzioni di carattere generale . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1<br />
2.1.1 Fatturazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .8<br />
2.2 Istruzioni generali sul prelievo e conservazione dei campioni . . . . . . . . . . . . . . . . . . .9<br />
2.3 Istruzioni di carattere generale per gli esami microbiologici . . . . . . . . . . . . . . . . . . .16<br />
2.4 Istruzioni di carattere generale per le analisi di biologia molecolare (PCR) . . . . . . . .18<br />
2.5 Istruzioni di carattere generale per esami istologici . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .21<br />
2.6 Istruzioni di carattere generale per esami parassitologici . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .23<br />
2.7 Gestione di qualità . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .24<br />
2.8 Abbreviazioni /Legenda . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .25<br />
2.9 Tabella di conversione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .27<br />
3 Profili ematobiochimici 29<br />
3.1 Profili di ricerche generiche . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .29<br />
3.2 Programmi di ricerca speciali /Profili d'organo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .30<br />
3.3 Profili specie-specifici . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .41<br />
4 Ematologia 51<br />
4.1 Ematologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .51<br />
4.2 Parametri della coagulazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .53<br />
4.3 Gruppi sanguigni . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .55<br />
4.4 Parassiti del sangue e batteri emotropi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .56<br />
5 Chimica clinica 57<br />
6 Tossicologia e rilevazione dei farmaci 97<br />
6.1 Farmaci . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .97<br />
6.2 Tossicologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .98<br />
6.3 Screening per droghe e farmaci . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .99<br />
7 Malattie gastrointestinali, epatiche e pancreatiche 101<br />
7.1 Malattie gastrointestinali . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .101<br />
7.2 Malattie epatiche . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .103<br />
7.3 Malattie del pancreas esocrino . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .104
Indice Generale<br />
8 Malattie renali e delle vie urinarie 107<br />
8.1 Analisi del sangue . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .107<br />
8.2 Analisi dell'urina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .108<br />
9 Malattie muscolari, scheletriche, articolari 112<br />
9.1 Malattie muscolari infettive . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .112<br />
9.2 Malattie muscolari non infettive . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .113<br />
9.3 Malattie ossee non infettive . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .114<br />
9.4 Malattie articolari infettive . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .114<br />
9.5 Malattie articolari non infettive . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .115<br />
10 Malattie del sistema nervoso centrale 116<br />
10.1 Malattie infettive del sistema nervoso centrale (in ordine alfabetico) . . . . . . . . . . .116<br />
10.2 Malattie non infettive del sistema nervoso centrale . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .121<br />
11 Malattie cutanee 122<br />
11.1 Malattie cutanee allergiche o infettive . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .122<br />
11.2 Malattie cutanee non infettive . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .124<br />
12 Endocrinologia 125<br />
12.1 Ormoni / Patologie del surrene . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .125<br />
12.2 Ormoni / Patologie della tiroide . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .136<br />
12.3 Ormoni sessuali / Gravidanza . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .144<br />
12.4 Altri ormoni . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .148<br />
13 Malattie invettive 149<br />
14 Immunologia e allergie 217<br />
14.1 Malattie autoimmuni . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .217<br />
14.2 Allergie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .222<br />
Indice Generale<br />
15 Esami di biologia molecolare 228<br />
15.1 Cenni generali sulla PCR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .228<br />
15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .231<br />
15.3 Malattie ereditarie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .256<br />
15.4 Determinazione del sesso negli uccelli . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .280<br />
15.5 Test genetico di paternità . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .281<br />
16 Microbiologia 284<br />
16.1 Esami batteriologici . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .284<br />
16.1.1 Costi e durata degli esami . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .284<br />
16.1.2 Esami batteriologici generali . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .285<br />
16.2 Esami delle feci . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .287<br />
16.3 Esami micologici . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .291<br />
16.3.1 Costi e durata degli esami . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .291<br />
16.3.2 Esami micologici generali . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .292<br />
16.4 Autovaccini . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .295<br />
17 Parassitologia 296<br />
17.1 Endoparassiti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .296<br />
17.2 Ectoparassiti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .298<br />
18 Istologia 299<br />
18.1 Esami istologici e citologici . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .299<br />
18.2 Liquidi biologici . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .300
1 Indice Alfabetico<br />
A<br />
α-amilasi. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 62<br />
Acetilcolina-recettore (Ac) . . . . . . . . . . . 218<br />
Acidi biliari . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 57<br />
Acidi biliari-test di stimolazione . . . . . . . . 58<br />
Acidi grassi non esterificati . . . . . . . . . . . 59<br />
Acido β-idrossibutirrico . . . . . . . . . . . . . . 57<br />
Acido lattico . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 60<br />
Acido urico . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 61<br />
Aciduria L-2 idrossiglutarica . . . . . . . . . . 258<br />
ACTH . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 131<br />
Actinobacillus pleuropneumoniae<br />
(APP) - (Ac) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 149<br />
Adenovirus canino . . . . . . . . . . . . . . . . 176<br />
Adenovirus equino 1 (DNA) . . . . . . . . . . 149<br />
ADH (vasopressina). . . . . . . . . . . . . . . . 148<br />
Albumina. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 62<br />
Aldosterone . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 135<br />
Allergeni singoli -<br />
Profilo base solo cane e gatto . . . . . . . 224<br />
Allergeni singoli -<br />
Profilo esteso cane, gatto e cavallo . . . 225<br />
Allergie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 222<br />
Allergie alimentari . . . . . . . . . . . . . . . . . 226<br />
ALP (Fosfatasi alcalina) . . . . . . . . . . . . . . 63<br />
ALP dopo inattivazione termica . . . . . . . . 64<br />
ALT (GPT) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 64<br />
Ammoniaca. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 65<br />
Ammonio (Test di tolleranza all'ammonio) 65<br />
Analisi dei calcoli urinari . . . . . . . . . . . . 110<br />
Analisi del liquido cefalorachidiano<br />
(liquor) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 119<br />
Analisi di sequenza . . . . . . . . . . . . . . . . 283<br />
Anaplasma (Ehrlichia) phagocytophilum<br />
(Ac) (cane, cavallo) . . . . . . . . . . . . . . . 172<br />
Anaplasma spp.<br />
(DNA, rilevazione di più specie) . 171, 232<br />
Anaplasmosi . . . . . . . . . . . . . . . . . 149, 170<br />
Anemia emolitica autoimmune . . . . . . . . 221<br />
Anemia infettiva equina . . . . . . . . . . . . . 150<br />
Anticorpi 2-M . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 219<br />
Anticorpi anti-A<br />
del gruppo sanguigno (gatto) . . . . . . . . . 55<br />
Anticorpi antinucleari (ANA). . . . . . . . . . 217<br />
aPTT (tempo di trombo-plastinaparziale<br />
attivato) . . . . . . . . . . . . . . . . . . 53<br />
Arsenio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 98<br />
Arterite Virale Equina (EVA,<br />
Equine Viral Arteritis) . . . . . . 150, 151, 232<br />
Artrite/ encefalite caprina (CAE) . . . . . . . 151<br />
Assorbimento - microscopia . . . . . . . . . 288<br />
AST (GOT) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 66<br />
Aujeszky (Ac) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 152<br />
Autopsie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 299<br />
Autovaccini contro agenti virali . . . . . . . 295<br />
Autovaccino E. Coli . . . . . . . . . . . . . . . . 294<br />
Autovaccino Pseudomonas aeruginosa . 294<br />
Autovaccino Stafilococchi . . . . . . . . . . . 294<br />
B<br />
β-carotene . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 66<br />
Babesia - rilevazione diretta . . . . . . . . . . 155<br />
Babesia (Ac) (cavallo) . . . . . . . . . . . . . . 155<br />
Babesia canis (Ac) . . . . . . . . . . . . . . . . 154<br />
Babesia felis (DNA) (gatto) . . . . . . 156, 233<br />
Babesia spp. (DNA). . . . . . . . . . . . . . . . 156<br />
Babesia spp. (DNA) (cane) . . . . . . 154, 233<br />
Babesia spp. (DNA) (cavallo). . . . . 155, 233<br />
Babesie - rilevazione diretta . . . . . . . . . . 153<br />
Babesiosi (cane)/ Piroplasmosi . . . . . . . 152<br />
Babesiosi (cavallo)/ Piroplasmosi. . . . . . 155<br />
Babesiosi (gatto)/ Piroplasmosi . . . . . . . 156<br />
Bartonella spp. (DNA) . . . . . . . . . . . . . . 157<br />
Batteriologia, coltura aerobica . . . . . . . . 110<br />
BHV 1 (Ac) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 187<br />
BHV 1 (Ac) (Markervirus) . . . . . . . . . . . 187<br />
Bilirubina (diretta) . . . . . . . . . . . . . . . . . . 66<br />
Bilirubina (totale) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 67<br />
BLAD . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 259<br />
Border Disease (Ac) . . . . . . . . . . . . . . . 157<br />
Borna (Ac) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 158<br />
Borna (RNA) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 158<br />
Borrelia (Ac) (IgG). . . . . . . . . . . . . . . . . 160<br />
Borrelia (Ac) (IgG) (cane e cavallo) . . . . 159<br />
Borrelia (Ac) (IgM) . . . . . . . . . . . . . . . . 160<br />
Borrelia burgdorferi sensu lato (DNA) . . 234<br />
Borrelia Quant C6 ® quantitativo<br />
(Ac) (cane) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 161<br />
Borrelia-Screening C6 qualitativo (Ac) . . 160<br />
Borreliosi. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 158<br />
Bromuro . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 97<br />
BRSV (Ac) (bovino). . . . . . . . . . . . . . . . 161<br />
Brucella abortus (Ac) . . . . . . . . . . . . . . 162<br />
Brucella canis (Ac) . . . . . . . . . . . . . . . . 162<br />
Brucella melitensis (Ac). . . . . . . . . . . . . 162<br />
Brucella ovis (Ac) . . . . . . . . . . . . . . . . . 162<br />
Brucella suis (Ac) . . . . . . . . . . . . . . . . . 162<br />
Brucellosi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 161<br />
BVD - MD (Diarrea virale bovina) . . . . . . 162<br />
BVD (Ac). . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 163<br />
BVD-MD (Ag) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 163<br />
C<br />
1 Indice Alfabetico<br />
Cadmio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 98<br />
CAE . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 151<br />
Calcio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 68<br />
Calicivirus (Ac) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 163<br />
Calicivirus (RNA) (gatto) . . . . . . . . . . . . 163<br />
Candidatus Mycoplasma haematoparvum<br />
(DNA). . . . . . . . . . . . . . 199, 200, 248,250<br />
Candidatus Mycoplasma haemominutum<br />
(DNA) . . . . . . . . . . . . . 199, 201, 249, 250<br />
Candidatus Mycoplasma turicensis (DNA)251<br />
Cardiopet TM proBNP (Nt-proBNP)<br />
(cane e gatto) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 67<br />
Carenza di fosfofruttochinasi . . . . . . . . . 259<br />
Carenza di piruvatochinasi . . . . . . . . . . . 260<br />
Cecità notturna nel Briard. . . . . . . . . . . . 260<br />
CECoV (RNA) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 167<br />
Check-up . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29<br />
Check-up completo . . . . . . . . . . . . . . . . . 29<br />
Check-up di base . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29<br />
Chlamydophila (Ac) . . . . . . . . . . . . . . . . 165<br />
Chlamydophila felis (DNA) . . . . . . . 235<br />
Chlamydophila psittaci (DNA). . . . . . . . . 236<br />
Chlamydophila spp. (DNA) . . . . . . . 164, 235<br />
CHV . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 187,188<br />
Cimurro. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 165<br />
Cimurro (Ac) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 166<br />
Cimurro canino (CDV) (RNA) . . . . . 166, 237<br />
Circovirus (infezioni da) . . . . . . . . . 167, 253<br />
Circovirus suino 2 (PVC-2) (DNA) . . . . . 238<br />
Cistatina C . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 69<br />
Cistina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 69<br />
Cistinuria del cane Terranova . . . . . . . . . 261<br />
CK (Creatinchinasi) . . . . . . . . . . . . . . . . . 71<br />
CLAD . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 261<br />
I II
1 Indice Alfabetico<br />
Clearance della creatinina esogena . . . . 107<br />
Cloro. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 70<br />
Clostridium spp. - coltura quantitativo . . 287<br />
Cobalto . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 98<br />
Colesterolo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 72<br />
Colinesterasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 73<br />
"Collie Eye Anomaly" (CEA) . . . . . . . . . . 262<br />
Colorazione sauro del mantello. . . . . . . . 262<br />
Conta leucocitaria differenziale . . . . . . . . . 51<br />
Conta leucocitaria differenziale (rettili) . . . 52<br />
Conta leucocitaria differenziale (uccelli) . . 52<br />
Coronavirus (infezione da) . . . . . . . . . . . 167<br />
Coronavirus bovino (Ag) . . . . . . . . . . . . 167<br />
Coronavirus canino CECoV (RNA) . . . . . 167<br />
Coronavirus felino/FIP, FECV . . . . . 180, 182<br />
Coronavirus TGEV (RNA). . . . . . . . . . . . 185<br />
Cortisolo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 126<br />
Creatinina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 74<br />
Criptosporidi (Ag) . . . . . . . . . . . . . . . . . 297<br />
Cromo. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 98<br />
CRP (proteina C-reattiva) . . . . . . . . . . . . 74<br />
D<br />
Definizione generale<br />
di malattie ereditarie. . . . . . . . . . . . . . . 257<br />
Dermatofiti/ funghi cutanei . . . . . . . . . . . 292<br />
Determinazione del momento<br />
della monta nella cagna. . . . . . . . . . . . 145<br />
Determinazione del momento<br />
della monta nella cavalla . . . . . . . . . . . 147<br />
Determinazione del sesso negli uccelli . . 281<br />
Determinazione del gruppo sanguigno<br />
(cane, gatto) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 55<br />
Diagnostica allergologica. . . . . . . . . . . . 222<br />
Diarrea virale bovina . . . . . . . . . . . . . . . 162<br />
Digossina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 97<br />
Dirofilaria . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 169, 241<br />
Dirofilaria immitis<br />
(Macrofilaria) (Ag) . . . . . . . . . . . . . . . 169<br />
Dirofilariosi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 168<br />
DNA-Fingerprinting-<br />
Identificazione genetica . . . . . . . . . . . . 283<br />
E<br />
EBL. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 196<br />
Ectoparassiti . . . . . . . . . . . . . . . . . 298, 299<br />
Ehrlichia canis (Ac) . . . . . . . . . . . . . . . . 172<br />
Ehrlichia canis (DNA). . . . . . . . . . . 172, 239<br />
Ehrlichia spp. (DNA, rilevazione<br />
di più specie) (cane, gatto) . . . . . 171, 239<br />
Ehrlichia/Anaplasma -rilevazione diretta . 171<br />
Ehrlichiosi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 170<br />
Ehrlichiosi monocitaria equina . . . . . . . . 173<br />
EHV . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 188<br />
EHV 1/2/4/5 (DNA) . . . . . . . . . . . . 189, 246<br />
EHV 1/4 (Ac). . . . . . . . . . . . . . . . . 189, 245<br />
Elastasi (cane). . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 288<br />
Elettroforesi sieroproteica. . . . . . . . . . . . . 75<br />
Elettroforesi urinaria. . . . . . . . . . . . . . . . 109<br />
Emobartonellosi/ Micoplasmi emotropi<br />
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 199, 200, 248<br />
Emocolture, aerobia ed anaerobia . . . . . 286<br />
Emoparassiti e batteri emotropi<br />
(microscopia) . . . . . . . . . . . . . . . . 56, 298<br />
Encefalita da puntura di zecca (Meningoencefalite<br />
primaverile) (RNA) . . . . 174, 240<br />
Encefalite da puntura di zecca (Ac) . . . . 174<br />
Encefalite da puntura di zecca (RNA) . . . 174<br />
Encefalite da puntura di zecca/<br />
Meningoencefalite primaverile (TBE). . . 174<br />
Encefalite-artrite caprina (CAE, Caprine<br />
Arthritis Encephalitis) . . . . . . . . . . . . . 151<br />
Encefalitozoonosi/Nosematosi . . . . . . . . 175<br />
Encefalopatia epatica. . . . . . . . . . . . . . . 121<br />
Encephalitozoon cuniculi (Ac) (coniglio). 175<br />
Encephalitozoon cuniculi (Ag/spore) . . . 175<br />
Endometrite contagiosa equina, CEM<br />
(Contagious equine metritis),<br />
Taylorella equigenitalis . . . . . . . . . 284, 285<br />
Endoparassiti (cane/gatto/suino/<br />
volatili/animali esotici) . . . . . . . . . . . . . 296<br />
Endoparassiti (cavallo). . . . . . . . . . . . . . 297<br />
Endoparassiti (rettili) . . . . . . . . . . . . . . . 296<br />
Endoparassiti (ruminanti). . . . . . . . . . . . 296<br />
Enterotossina di Clostridium perfringens 288<br />
Epatite contagiosa canina . . . . . . . . . . . 176<br />
Esame colturale, aerobia . . . . . . . . . . . . 285<br />
Esame colturale, anaerobia . . . . . . . . . . 286<br />
Esami delle feci - profili d'organo . . . . . . 290<br />
Esami istologici della cute . . . . . . . . 30, 288<br />
Escrezione frazionata degli elettroliti (FE)<br />
(cavallo) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 78<br />
Estradiolo (17-β) . . . . . . . . . . . . . . . . . . 144<br />
Estrone solfato . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 147<br />
EVA. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 150, 151, 232<br />
F<br />
Fattore di von Willebrand di tipo 1,2,3<br />
(test genetico) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 269<br />
Fattore di von-Willebrand (Ag VWF)<br />
(solo cane) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 54<br />
Fattore IX (solo cane). . . . . . . . . . . . . . . . 54<br />
Fattore VIII (solo cane). . . . . . . . . . . . . . . 54<br />
Fattori reumatici (test di Waaler-Rose) . . 220<br />
Febbre maculosa delle montagne rocciose<br />
(RMSF) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 209<br />
Febbre Q . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 177<br />
FeLV (Ag) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 179<br />
G<br />
1 Indice Alfabetico<br />
FeLV (Virus della leucemia felina)<br />
(infezione da) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 178<br />
FeLV/FIV + FIP-Screening . . . . . . . . . . . . 41<br />
FeLV-progenoma (DNA) . . . . . . . . . . . . . 180<br />
FeLV-progenoma (Virus della leucemia<br />
felina) (DNA) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 240<br />
Fenobarbitale . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 97<br />
Ferro . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 78<br />
FHV. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 190, 246<br />
Fibrinogeno . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 54<br />
Filaria spp. (DNA) . . . . . . . . . . . . . 169, 241<br />
FIP (Peritonite Infettiva Felina)/Infezione<br />
da Coronavirus felino. . . . . . . . . . . . . . 180<br />
FIP/Coronavirus (Ac) . . . . . . . . . . . . . . 181<br />
FIP/Coronavirus felino, FECV (RNA) 182, 242<br />
FIP-Screening . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 41<br />
FIP-Screening aggiuntivo . . . . . . . . . . . . . 41<br />
FIV (Ac). . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 184<br />
FIV (Virus dell'immunodeficienza felina)<br />
(infezione da) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 183<br />
FIV-progenoma (DNA) . . . . . . . . . . 245, 185<br />
Folati . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 78<br />
Fosfati. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 79<br />
Fruttosamine . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 80<br />
FT4 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 137, 142<br />
FT4 (in equilibrio dialitico) . . . . . . . 136, 137<br />
fTLI (gatto) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 90<br />
Fucosidosi. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 263<br />
γ-GT . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 80<br />
Gangliosidosi del cane, GM1 . . . . . . . . . 263<br />
Gangliosidosi del gatto, GM1 e GM2 . . . 264<br />
Gastroenterite trasmissibile del suino<br />
(TGE) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 185<br />
Germi fecali - coltura semiquantitativo . . 287<br />
III IV
1 Indice Alfabetico<br />
Giardia (Ag) (cane, gatto) . . . . . . . 103, 297<br />
H<br />
GLDH . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 81<br />
Glucosio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 82<br />
Haemobartonella felis. . . . . . 199, 201, 249<br />
HCM (Cardiomiopatia ipertrofica),<br />
mutazioni A31P, A74T, R820W . . . . . . . 265<br />
Helicobacter spp. (DNA,<br />
rilevazione di più specie) . . . . . . . . . . . 244<br />
Herpesvirus bovino<br />
(IBR/ IPV/ IBP) (infezione da) . . . . . . . . 187<br />
Herpesvirus canino 1 CHV 1 (DNA) 187, 188<br />
Herpesvirus equino 1 EHV-1 (DNA) 188, 189<br />
Herpesvirus equino 1+4<br />
EHV-1 (DNA) + 4EHV-4 (DNA) . . 189, 245<br />
Herpesvirus equino 2 EHV-2 (DNA) 189, 246<br />
Herpesvirus equino 4 EHV-4 (DNA) . . . . 189<br />
Herpesvirus equino 5 EHV-5 (DNA) 189, 246<br />
Herpesvirus felino 1 FHV 1 (DNA) . 190, 246<br />
Ipertermia maligna canina<br />
(predisposizione genetica) . . . . . . . . . . 266<br />
Ipertermia maligna suina<br />
(predisposizione genetica) . . . . . . . . . . 267<br />
Ipertiroidismo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 142<br />
Ipoadrenocorticismo . . . . . . . . . . . . . . . 134<br />
Iposensibilizzazione - flaconi seguenti . . 227<br />
Iposensibilizzazione<br />
(cane, gatto, cavallo) . . . . . . . . . . . . . . 227<br />
Ipotiroidismo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 136<br />
Isoeritrolisi neonatale . . . . . . . . . . . . . . . 221<br />
L<br />
La diagnostica biologicomolecolare<br />
delle malattie ereditarie . . . . 258<br />
LDH . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 83<br />
Leishmania (Ac) . . . . . . . . . . . . . . . . . . 194<br />
Leishmania rilevazione diretta. . . . . 193, 194<br />
Leishmania spp.<br />
(DNA, rilevazione di più specie) . . 194, 247<br />
Liquor . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 32, 300<br />
Listeria (Ac) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 197<br />
Listeria monocytogenes (DNA). . . . 197, 248<br />
Listeriosi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 196<br />
Lupus eritematoso sistemico (LES) . . . . 217<br />
M<br />
Macrofilarie/ Microfilarie . . . . . . . . 168, 197<br />
Maedi-Visna (Ac). . . . . . . . . . . . . . . . . . 197<br />
Magnesio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 85<br />
Malattia da accumulo di glicogeno<br />
di tipo IV . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 268<br />
Malattia da accumulo di rame . . . . . . . . 268<br />
Malattia di von Willebrand . . . . . . . . 54, 269<br />
Malattie articolari infettive . . . . . . . . . . . 114<br />
Malattie cutanee endocrine. . . . 30, 299, 124<br />
Malattie ossee non infettive . . . . . . . . . . 114<br />
Manganese . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 85<br />
MDR1 - disturbo (resistenza farmacologia<br />
multipla/ ipersensibilità all'ivermectina). 270<br />
1 Indice Alfabetico<br />
Microfilarie - rilevazione diretta. . . . . . . . 169<br />
Miopatia congenita<br />
del Labrador Retriever . . . . . . . . . . . . . 271<br />
Miosite dei muscoli masticatori/<br />
Miosite eosinofilica . . . . . . . . . . . . . . . 219<br />
Miotonia congenita<br />
dello Schnauzer nano. . . . . . . . . . . . . . 271<br />
Misurazione degli antiepilettici . . . . . . . . 121<br />
Molibdeno . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 98<br />
Morbo coitale maligno . . . . . . . . . . 198, 215<br />
Morva (Burkholderia mallei) . . . . . . . . . . 198<br />
Mucopolisaccaridosi di tipo VII . . . . . . . 272<br />
Mycoplasma turicensis . . . . . 199, 201, 249<br />
Mycoplasma felis (DNA) . . . . . . . . 202, 249<br />
Mycoplasma haemocanis (DNA) . . 200, 250<br />
Mycoplasma haemofelis (DNA) . . . 201, 244<br />
Mycoplasma hyopneumoniae (Ac)<br />
(suino) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 201<br />
Mycoplasma spp. (DNA,<br />
rilevazione di più specie) . . . . . . . . . . . 202<br />
Herpesvirus rettili - RHV . . . . . . . . . . . . 191<br />
HYPP . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 266<br />
Leishmaniosi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 193<br />
Leptospira (Ac) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 195<br />
I<br />
IBR/ IPV . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 187<br />
Identificazione di ectoparassiti . . . . . . . 298<br />
IGF I (Somatomedina) . . . . . . . . . . . . . . 148<br />
Immunoglobuline G (IgG) (cane e gatto). . 83<br />
Infezione da Helicobacter . . . . . . . . . . . . 244<br />
Infezione da Rotavirus . . . . . . . . . . 209, 210<br />
Influenza virale equina (RNA) . . . . 191, 192<br />
Influenza virale suina (Ac) . . . . . . . . . . . 192<br />
Leptospira spp.<br />
(DNA, rilevazione di più specie) . . 195, 247<br />
Leptospirosi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 194<br />
Leucemia felina . . . . . . . 178, 179, 180, 240<br />
Leucodistrofia a cellule globose . . . . . . . 267<br />
Leucosi bovina enzootica (EBL) . . . . . . . 196<br />
Lieviti e muffe . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 292<br />
Lieviti in campioni di feci (quantitativo) . 293<br />
Lipasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 83<br />
Lipasi pancreatica specifica canina<br />
(Spec cPL<br />
Insulina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 148<br />
Iperadrenocorticismo . . . . . . . . . . . . . . 125<br />
Ipersensibilità verso l'ivermectina. . . . . . 270<br />
® ) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 84<br />
Lipasi pancreatica specifica felina<br />
(Spec fPLTM Megabatteri - rilevazione diretta . . . 198, 290<br />
Meningoencefalite primaverile . . . . 174, 198<br />
N<br />
Neorickettsia risticii (DNA) cavallo . . . . . 173<br />
Miastenia grave . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 218<br />
Micoplasmi emotropi (Emobartonelle)<br />
-rilevazione diretta . . . . . . . . . . . . . . . . 200<br />
Micoplasmi emotropi<br />
(Microscopia) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 56<br />
Micoplasmi emotropi canini:<br />
Mycoplasmahaemocanis e<br />
Cand. M. haematoparvum (DNA)<br />
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 199, 200, 248<br />
Micoplasmi emotropi felini:<br />
Mycoplasma haemofelis,<br />
Candidatus M. haemominutum e<br />
Neospora caninum (Ac) (cane) . . . 202, 203<br />
Nichel . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 98<br />
Nozioni generali. . . . . . . . . . . . . . . 281, 282<br />
Nozioni genetiche di base . . . . . . . . . . . 257<br />
Nutridexx Test alimentare (cane, gatto) . . 226<br />
O<br />
OLWS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 272<br />
Ormoni tiroidei -<br />
determinazioni singole . . . . . . . . . . . . . 136<br />
Cand.M. turicensis (DNA) . . 199, 201, 249 Ormoni tiroidei - test funzionali . . . 140, 142<br />
) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 84<br />
Microbiologia. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 284 Osmolalità urinaria. . . . . . . . . . . . . . . . . 110<br />
Liquido sinoviale . . . . . . . . . . . . . . . 37, 302<br />
Microfilaria (microscopia) . . . . . . . . . . . . 56<br />
V VI
1 Indice Alfabetico<br />
P<br />
Papilloma-autovaccino/autovaccino<br />
Sarcoide equino. . . . . . . . . . . . . . . . . . 295<br />
Parainfluenza-virus (Ac) (bovino) . . . . . . 204<br />
Parametri aspecifici per la<br />
diagnosi del morbo di Cushing. . . . . . . 133<br />
Paratubercolosi (Ac) (bovini) . . . . . . . . . 204<br />
Parvovirosi/ Panleucopenia . . . . . . . . . . 204<br />
Parvovirus (Ac) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 206<br />
Parvovirus (Ag) (cane, gatto) . . . . . . . . 205<br />
Parvovirus FPV (Feline Parvovirus), CPV2<br />
(Canine Parvovirus) (DNA). . . . . . 205, 252<br />
PBFD (DNA) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 253<br />
PCR (Polymerase Chain Reaction) . . . . . 228<br />
Peso specifico urinario . . . . . . . . . . . . . 108<br />
Peste equina africana AHSV (Ac) . . . . . . 206<br />
Piombo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 98<br />
Piroplasmosi . . . . . . . . . . . . . . . . . 152, 207<br />
PKD (Polycystic Kidney Disease) . . . . . . 273<br />
PMSG/eCG . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 147<br />
Poliartrite reumatoide. . . . . . . . . . . . . . . 220<br />
Polyomavirus aviario<br />
(Virus della BFD) (DNA) . . . . . . . . . . . . 254<br />
Profilo cutaneo 2 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 30<br />
Profilo cutaneo 3 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 30<br />
Profilo cutaneo 4 (solo cane) . . . . . . . . . . 30<br />
Profilo cutaneo 5 (solo cavallo) . . . . . . . . 30<br />
Profilo cutaneo 6 (cane, bovino) . . . . . . . 30<br />
Profilo cutaneo 7 (cane). . . . . . . . . . . . . . 30<br />
Profilo diarrea B (cane, gatto) . . . . . . . . . 31<br />
Profilo diarrea C (cane/gatto) . . . . . . . . . 289<br />
Profilo diarrea E (solo cane). . . . . . 105, 230<br />
Profilo elettrolitico . . . . . . . . . . . . . . . . . . 31<br />
Profilo emoparassitario I (solo cane) . . . . 31<br />
Profilo emoparassitario II (solo cane) . . . . 31<br />
Profilo emoparassitario III (solo cane) . . . 32<br />
Profilo epatico 1 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 32<br />
Profilo epatico 2 (solo cane) . . . . . . . . . . 32<br />
Profilo generale (cane, gatto) . . . . . . . . . . 29<br />
Profilo geriatrico (cane, gatto) . . . . . . . . . 29<br />
Profilo geriatrico per cavalli . . . . . . . . . . . 43<br />
Profilo geriatrico senza quadro ematico . . 29<br />
Profilo LCR 1. . . . . . . . . . . . . . . . . . 33, 300<br />
Profilo LCR 2. . . . . . . . . . . . . . . . . . 33, 300<br />
Profilo parziale di ricerca di rame . . . . . . . 48<br />
Profilo per bovini . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 47<br />
Profilo per cavalli. . . . . . . . . . . . . . . . . . . 43<br />
Profilo per compravendita . . . . . . . . . . . . 99<br />
Profilo per furetti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 45<br />
Profilo per puledri. . . . . . . . . . . . . . . . . . . 44<br />
Profilo per versamenti cavitari 1 . . . . 35, 301<br />
Profilo per versamenti cavitari 2 . . . . 35, 301<br />
Profilo PU/PD (poliuria/polidipsia) . . 36, 107<br />
Profilo renale . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36, 107<br />
Profilo rendimento cavalli . . . . . . . . . . . . 36<br />
Profilo ridotto per bovini. . . . . . . . . . . . . . 47<br />
Profilo S (microelementi ed elettroliti) 44, 47<br />
Profilo sinoviale 1 . . . . . . . . . . . . . . 37, 302<br />
Profilo sinoviale 2 . . . . . . . . . . . . . . 37, 302<br />
Profilo sinoviale 3 . . . . . . . . . . . . . . 37, 302<br />
Profilo tiroideo 1 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 38<br />
Profilo tiroideo 2 (solo cane) . . . . . . . . . . 38<br />
Profilo tiroideo 3 (solo cane) . . . . . . . . . . 38<br />
Profilo trasfusione emergenza (cane) . . . 39<br />
Profilo trasfusione emergenza (gatto) . . . 39<br />
1 Indice Alfabetico<br />
Programma di ricerca<br />
per disturbi della fertilità 2 . . . . . . . . . . . 48<br />
Programma di ricerca<br />
per disturbi della fertilità 3 . . . . . . . . . . . 48<br />
Programma di ricerca<br />
per le anemie (cane, gatto) . . . . . . . . . . 40<br />
Programma di ricerca per le anemie. . . . . 51<br />
Proteine totali . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 87<br />
PRRS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 211<br />
Psittacosi . . . . . . . . . . . . . . . 164, 207, 235<br />
PT (Test di Quick, tempo di<br />
tromboplastina,tempo di protrombina) . . 53<br />
Q<br />
Q-Febbre (Ac) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 177<br />
Quadro ematico completo . . . . . . . . . . . . 51<br />
Quadro ematico completo (rettili) . . . . . . . 52<br />
Quadro ematico completo (uccelli). . . . . . 52<br />
Quadro ematico parziale . . . . . . . . . . . . . 51<br />
Quadro ematico parziale (rettili) . . . . . . . . 52<br />
Quadro ematico parziale (uccelli) . . . . . . . 51<br />
Quadro generale dei costi e della<br />
durata degli esami batteriologici . . . . . . 284<br />
Profilo LCR 3. . . . . . . . . . . . . . . . . . 33, 301<br />
Profilo trasfusione stoccaggio (cane) . . . . 39<br />
Potassio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 86<br />
PRA (Atrofia retinica progressiva) . . . . . 274<br />
Profili cutanei . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 30<br />
Profilo coagulativo . . . . . . . . . . . . . . . . . . 54<br />
Profilo coagulativo esteso . . . . . . . . . . . . 54<br />
Profilo completo di ricerca di rame. . . . . . 48<br />
Profilo completo per bovini. . . . . . . . . . . . 46<br />
Profilo Leishmania sierologia . . . . . . . . . 33<br />
Profilo Leishmania PCR (solo cane) . . . . . 33<br />
Profilo malattie respiratorie cavalli - PCR . 44<br />
Profilo malattie respiratorie puledri - PCR . 44<br />
Profilo malattie trasmesse<br />
da artropodi 1 (solo cane) . . . . . . . . . . . 34<br />
Profilo malattie trasmesse<br />
da artropodi 2 (su zecca). . . . . . . . . . . . 34<br />
Profilo trasfusione stoccaggio (gatto) . . . . 40<br />
Profilo vie respiratorie<br />
superiori gatto 1 - PCR . . . . . . . . . . . . 42<br />
Profilo vie respiratorie<br />
superiori gatto 2 - PCR . . . . . . . . . . . . . 42<br />
Profilo volatili 1 (PCR) . . . . . . . . . . . . . . . 50<br />
Profilo volatili 2 (PCR) . . . . . . . . . . . . . . . 50<br />
Profilo volatili 3 (PCR) . . . . . . . . . . . . . . . 50<br />
Quadro generale dei costi e della<br />
durata degli esami micologici . . . . . . . . 291<br />
R<br />
Rabbia - Rilevazione di anticorpi per il<br />
trasporto di animali . . . . . . . . . . . . . . . 207<br />
Rabbia (Ac) (NT) . . . . . . . . . . . . . . . . . . 208<br />
Rame . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 88<br />
Profilo completo per cavalli . . . . . . . . . . . 43 Profilo micoplasmi emotropi gatto - PCR . 42<br />
Profilo volatili 4 (PCR) . . . . . . . . . . . . . . . 50 Rapporto cortisolo/creatinina<br />
Profilo completo per gatto . . . . . . . . . . . . 41 Profilo Monitoraggio Cushing (solo cane) . 34<br />
Profilo zecche 1 - sierologia (solo cane) . 40<br />
(cane, gatto) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 129<br />
Profilo completo per rettili . . . . . . . . . . . . 45 Profilo muscolare . . . . . . . . . . . . . . . . . . 34<br />
Profilo zecche 2 - sierologia (solo cane) . 40<br />
Rapporto FT4/colesterolo . . . . . . . . . . . . 139<br />
Profilo completo per suini . . . . . . . . . . . . 49 Profilo occhi gatto 1 - PCR . . . . . . . . . . . 42<br />
Progesterone . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 145<br />
Rapporto proteine/creatinina urinarie . . . 108<br />
Profilo conigli/ cavie . . . . . . . . . . . . . . . . 45 Profilo occhi gatto 2 - PCR . . . . . . . . . . . 42<br />
Programma di ricerca<br />
Reticolociti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 51<br />
Profilo cutaneo 1 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 30 Profilo P . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 42<br />
per disturbi della fertilità 1 . . . . . . . . . . . 48<br />
VII VIII
1 Indice Alfabetico<br />
Rhodococcus equi (infezione da)/<br />
Rodococcosi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 208<br />
Ricerca delle uova di Trematodi . . . . . . . 297<br />
Richieste di parametri singoli (qualitativo)100<br />
Rickettsiosi: Febbre maculosa<br />
delle montagne rocciose (RMSF) . . . . . 209<br />
Rilevazione di ectoparassiti nel<br />
campione di biopsia cutanea . . . . . . . . 299<br />
Rotavirus (Ag). . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 210<br />
Rotavirus (infezione da) . . . . . . . . . . . . . 209<br />
S<br />
Salmonella abortus equi (Ac). . . . . . . . . 210<br />
Salmonella - coltura qualitativo. . . . . . . . 287<br />
Sangue occulto . . . . . . . . . . . . . . . . . . 289<br />
Sarcoptes (Ac) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 210<br />
SCID nel cane Jack Russell Terrier . . . . . 277<br />
SCID nel cavallo arabo. . . . . . . . . . . . . . 277<br />
Scrapie (predisposizione genetica). . . . . 279<br />
Screening carcinoma a cellule T<br />
(TCC) (solo cane) . . . . . . . . . . . . . . . . 111<br />
Screening insetti per cavalli . . . . . . . . . . 226<br />
Screening per anabolizzanti . . . . . . . . . . . 99<br />
Screening per antinfiammatori . . . . . . . . . 99<br />
Screening per droghe e farmaci . . . . . . . 100<br />
Screening per FANS. . . . . . . . . . . . . . . . 100<br />
Screening per glucocorticoidi. . . . . . . . . 100<br />
Screening per sedativi/tranquillanti . . . . . 100<br />
Screening per sostanze dopanti rilevanti . . 99<br />
Screening per stimolanti . . . . . . . . . . . . . 99<br />
Screening per uccelli . . . . . . . . . . . . . . . . 50<br />
Sedimento urinario . . . . . . . . . . . . . . . . 108<br />
Selenio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 88<br />
Sindrome respiratoria e riproduttiva<br />
del suino (PRRS). . . . . . . . . . . . . . . . . 211<br />
Sodio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 89<br />
IX<br />
T<br />
Spec cPL ® (cane) . . . . . . . . . . . . . . . . . . 84<br />
Spec fPL (gatto) . . . . . . . . . . . . . . . . . 84<br />
Stomatite vescicolare. . . . . . . . . . . . . . . 211<br />
T3 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 137<br />
T4 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 137, 142<br />
T4-Autoanticorpi . . . . . . . . . . . . . . . . . . 140<br />
Tallio (Peli) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 98<br />
Tallio (siero, peli, urina) . . . . . . . . . . . . . 124<br />
Tallio (Urina) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 98<br />
Tempo di trombina. . . . . . . . . . . . . . . . . . 53<br />
Test a basse dosi di desametasone<br />
(Test di screening, LDDS, Low-Dose-<br />
Dexamethason-Suppression) . . . . . . . . 126<br />
Test ad alte dosi di desametasone<br />
(Test di soppressione, HDDS, High-Dose-<br />
Dexamethason-Suppression) (cane). . . 130<br />
Test Allercept. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 224<br />
Test combinato di soppressione con<br />
desametasone e di stimolazione<br />
con TRH (cavallo) . . . . . . . . . . . . . . . . 132<br />
Test di Coombs diretto. . . . . . . . . . . . . . 221<br />
Test di paternità. . . . . . . . . . . . . . . . . . . 282<br />
Test di screening . . . . . . . . . . . . . . . . . . 224<br />
Test di soppressione con T4. . . . . . . . . . 142<br />
Test di stimolazione con ACTH<br />
(cane, gatto, cavallo) . . . . . . . . . . . . . . 128<br />
Test di stimolazione con ACTH 2<br />
determinazioni del cortisolo . . . . . . . . . 134<br />
Test di stimolazione con GnRH. . . . . . . . 146<br />
Test di stimolazione con hCG . . . . . . . . 146<br />
Test di stimolazione con TRH . . . . . . . . 143<br />
Test di stimolazione con TRH (cane) . . . 141<br />
Test di stimolazione con TRH (cavallo). . 141<br />
Test di stimolazione TSH (cane) con<br />
rhTSH (TSH umano ricombinante) . . . . 140<br />
V<br />
Test di tolleranza all'ammonio. . . . . . . . . 121<br />
Test funzionali per la diagnosi<br />
dell'iperadrenocorticismo . . . . . . . . . . . 126<br />
Testosterone . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 145<br />
Tireoglobulina-Ac (solo cane) . . . . . . . . 139<br />
TLI (cane) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 90<br />
TLI (gatto) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 90<br />
Toxoplasma (rilevazione diretta) . . . . . . . 212<br />
Toxoplasma (Ac) . . . . . . . . . . . . . . . . . . 213<br />
Toxoplasma gondii (DNA). . . . . . . . 213, 255<br />
Trichomonadi (infezione da) . . . . . . . . . . 214<br />
Trigliceridi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 91<br />
Tripanosomiasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 215<br />
Tritrichomonas foetus . . . . . . 214, 215, 256<br />
Troponina I . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 91<br />
Trypanosoma equiperdum (Ac) . . . . . . . 215<br />
Trypanosoma evansi (Ac) . . . . . . . . . . . 216<br />
TSH canino (cane). . . . . . . . . . . . . . . . . 138<br />
Urea-N (BUN) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 92<br />
Urine chimico-fisico. . . . . . . . . . . . . . . . 108<br />
Uveite equina ricorrente (ERU) . . . . . . . . 195<br />
Vermi polmonari . . . . . . . . . . . . . . . . . . 297<br />
Virologia generale . . . . . . . . . . . . . . . . . 289<br />
Virologia generale -<br />
microscopia elettronica . . . . . . . . . . . . 102<br />
Virus della leucosi bovina. . . . . . . . . . . . 196<br />
Virus Respiratorio Sinciziale Bovino 161, 216<br />
Vitamina A. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 93<br />
Vitamina B1 (tiamina) . . . . . . . . . . . . . . . 93<br />
Vitamina B12 (cobalamina) . . . . . . . . . . . 94<br />
Vitamina B2 (riboflavina) . . . . . . . . . . . . . 94<br />
Vitamina B6 (piridossina). . . . . . . . . . . . . 94<br />
Vitamina D3 (1,23-di-OH) . . . . . . . . . . . . 95<br />
Vitamina D3 (25-OH) . . . . . . . . . . . . . . . 95<br />
X<br />
Z<br />
1 Indice Alfabetico<br />
Vitamina E (tocoferolo) . . . . . . . . . . . . . . 95<br />
Vitamina H (biotina). . . . . . . . . . . . . . . . . 95<br />
X-SCID . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 278<br />
Zinco. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 96<br />
X
2.1. Istruzioni di carattere generale<br />
Contenitori per campioni e materiale di spedizione<br />
Siamo lieti di mettere a Vostra disposizione, gratuitamente*, le nostre provette con relativi<br />
contenitori protettivi per il trasporto di campioni biologici, i moduli per la richiesta di analisi,<br />
le etichette con codici a barre e le scatole e lettere di vettura per l'invio di materiale ai nostri<br />
laboratori. Potete trasmetterci la Vostra ordinazione per Fax al numero 0049 7141 648 3323.<br />
I costi per le diverse modalità di invio del materiale li potete trovare sul modulo d'ordine<br />
Telefax. I contenitori protettivi vengono utilizzati più volte per motivi ecologici. Vetro e altro<br />
materiale fragile non sono ammessi per il trasporto del materiale.<br />
* escluse le buste termostatiche e le bottiglie per emocoltura.<br />
Provetta K3 EDTA<br />
Contiene acido etilendiamminotetracetico<br />
come anticoagulante.<br />
Il sangue EDTA serve alla determinazione<br />
del quadro ematologico (emocromo: solo<br />
valutazione strumentale delle cellule ematiche;<br />
emogramma: valutazione strumentale<br />
e morfologica delle cellule ematiche), alla<br />
rilevazione di alcuni organismi patogeni con<br />
microscopia o con il metodo PCR e alla<br />
ricerca di malattie genetiche.<br />
Il plasma EDTA viene ottenuto centrifugando<br />
il sangue EDTA.<br />
Provetta per sierare<br />
Viene utilizzata per centrifugarvi<br />
il sangue al fine di ottenere siero,<br />
che viene poi trasferito nella<br />
provetta per il siero.<br />
Le microsfere in plastica contenute<br />
nella provetta aumentano la superficie<br />
di contatto per la centrifu-gazione e<br />
rinforzano il legame<br />
del reticolo fibrinico, consentendo in<br />
questo modo di velocizzare la formazione<br />
del coagulo.<br />
2 Istruzioni di carattere generale<br />
Provetta universale<br />
Senza anticoagulante. Viene<br />
utilizzata per la spedizione di<br />
secreti, latte, liquor, urina,<br />
puntato, prelievi bioptici e<br />
calami.<br />
Provetta con fluoruro di<br />
sodio (Na-fluoruro)<br />
Contiene l'anticoagulante<br />
NaF. Viene utilizzata per la<br />
determinazione del glucosio<br />
e dell'acido lattico.<br />
Provetta per il siero<br />
Senza anticoagulante.<br />
Viene utilizzata per la<br />
spedizione del siero o<br />
del plasma ottenuti<br />
dopo centrifugazione.<br />
Provetta per feci<br />
Contenitore per gli<br />
esami parassitologici e<br />
batteriologici di<br />
campioni di feci.<br />
1
2 Istruzioni di carattere generale<br />
2.1. Istruzioni di carattere generale<br />
® ®<br />
Provetta con citrato di sodio (Na-citrato)<br />
Contiene l'anticoagulante citrato di sodio. Viene utilizzata<br />
per ottenere plasma citrato per la diagnostica della<br />
coagulazione. È disponibile in volumi di riempimento da<br />
4,5 ml per grandi animali e da 2,7 ml per piccoli animali.<br />
Importante: Riempire esattamente fino all'orlo la provetta,<br />
(la quantità di sangue inserita non deve essere inferiore a<br />
2,5 - 3 ml altrimenti l'anticoagulante potrebbe alterare<br />
alcuni parametri ematici) quindi capovolgerla alcune volte e<br />
centrifugare. Con una pipetta di plastica trasferire il<br />
surnatante (= plasma citrato) in una provetta senza<br />
anticoagulante (provetta per siero). Non utilizzare pipette o<br />
provette di vetro!<br />
Inviare sempre e soltanto campioni congelati!<br />
Cyto-Brush<br />
Per il prelivo di campioni per<br />
le analisi tramite diagnostica<br />
molecolare, come p.es.<br />
tamponi congiuntivali o della<br />
mucosa orale.<br />
2<br />
Contenitore protettivo<br />
Contenitore protettivo per<br />
l'invio delle provette. Rende<br />
più sicura la Vostra<br />
spedizione; obbligatorio per<br />
la spedizione aerea.<br />
Tampone universale<br />
con terreno di trasporto<br />
Contenitore sterile con<br />
asta in ovatta per l'esame<br />
colturale di campioni<br />
batteriologici e micologici.<br />
Tampone universale senza<br />
terreno di trasporto<br />
Contenitore sterile con<br />
asta in ovatta specifica per<br />
la rilevazione di organismi<br />
patogeni tramite PCR. Non<br />
idoneo per esami colturali.<br />
Vetrini in contenitore protettivo<br />
Da usare in caso di spedizione di strisci<br />
ematici per conta leucocitaria e<br />
morfologia ematica, diagnostica degli<br />
emoparassiti e dei batteri emotropi nonché<br />
per campioni citologici .<br />
2.1. Istruzioni di carattere generale<br />
Provette per istologia<br />
Contenitori per la spedizione di<br />
campioni istologici; disponibili in<br />
tre dimensioni (20 ml, 50 ml, 120 ml),<br />
contengono formalina al 4%.<br />
Per i contenitori da 120 ml<br />
richiediamo il pagamento di<br />
una cauzione.<br />
Contenitore per la spedizione di<br />
campioni congelati<br />
Per la spedizione di campioni congelati.<br />
Richiedere i contenitori a tempo debito e tenerli<br />
nel congelatore per 24 ore prima dell'uso dopo<br />
aver tolto l'involucro di polistirolo!<br />
Per questi contenitori richiediamo il pagamento di<br />
una cauzione.<br />
Scatole e lettere di vettura per la spedizione<br />
Scatole e lettere di vettura a norma per la spedizione<br />
dei campioni biologici.<br />
Buste termostatiche<br />
Contenitore protettivo<br />
Per l'invio delle provette<br />
istologiche.<br />
Buste da utilizzare con i siberini. Prodotto a<br />
pagamento: per i prezzi, consultare il modulo<br />
d'ordine del materiale.<br />
2 Istruzioni di carattere generale<br />
Bottiglie per emocoltura<br />
Provette per feci di<br />
grandi animali<br />
Contenitore di raccolta<br />
(tappo rosso) inserito in<br />
contenitore protettivo.<br />
Riempire sempre il contenitore<br />
completamente<br />
fino all'orlo.<br />
Bottiglie speciali per l'esame colturale di<br />
campioni di sangue. Per le indicazioni<br />
su questo tipo di esame vedi Capitolo 16.<br />
Prodotto a pagamento: per i prezzi, consultare<br />
il modulo d'ordine del materiale.<br />
Provette per<br />
Cardiopet TM proBNP<br />
Provette specifiche per il<br />
plasma con EDTA per la<br />
misurazione del parametro<br />
cardiaco Cardiopet TM proBNP;<br />
contengono uno stabilizzante<br />
che mantiene il campione<br />
per 48 ore.<br />
Etichette con codice a barre<br />
Per la sicura identificazione dei Vostri<br />
campioni. I codici sono personalizzati,<br />
vengono inviati automaticamente al<br />
momento della registrazione del cliente,<br />
possono essere sucessivamente ordinati.<br />
3
2 Istruzioni di carattere generale<br />
2.1. Istruzioni di carattere generale<br />
Moduli di richiesta analisi<br />
Per una gestione ottimale delle richieste di analisi utilizziamo diversi moduli:<br />
1. Modulo di richiesta analisi "Cane" (color verde), "Gatto" (colore rosa) e "Animali Esotici"<br />
(colore viola): per analisi ematologiche, di chimica clinica (inclusi profili specifici), analisi<br />
sierologiche ed endocrinologiche, diagnostica delle allergie, ricerche tramite PCR ecc.<br />
2. Modulo di richiesta di analisi "Grossi animali" (di colore azzurro): per analisi ematologiche,<br />
di chimica clinica (inclusi profili specifici) analisi sierologiche ed endocrinologiche,<br />
diagnostica delle allergie, ricerche tramite PCR ecc.<br />
3. Modulo di richiesta per microbiologia (di colore giallo-ocra)<br />
4. Modulo di richiesta per istologia e citologia (di colore bianco con scritte verdi).<br />
5. Modulo di richiesta per la titolazione degli anticorpi contro la rabbia (di colore bianco)<br />
6. Modulo di richiesta per la diagnostica molecolare (di colore arancione)<br />
Compilare i moduli di richiesta di analisi sempre nel modo completo indicando:<br />
- Veterinario (timbro dell'ambulatorio), nome del proprietario, specie, sesso ed età<br />
dell'animale (per alcuni parametri forniamo degli intervalli di riferimento dipendenti dall'età).<br />
- Nel caso di fatturazione al proprietario dell'animale ricordarsi di:<br />
• indicare i dati completi del proprietario;<br />
• barrare la relativa casella "Fatturazione al proprietario dell'animale";<br />
• corredare il modulo della firma di quest'ultimo.<br />
- Annerire la casella relativa alle analisi desiderate (utilizzando una penna e non il<br />
pennarello). In caso di richiesta di analisi eseguibili nei nostri laboratori, ma non indicate<br />
nel modulo, annotarle a mano a chiare lettere in corrispondenza di uno spazio vuoto.<br />
4<br />
2.1. Istruzioni di carattere generale<br />
Identificazione dei campioni ed imballaggio<br />
Il metodo ottimale per identificare i campioni è l'uso dei codici a barre. I codici vengono<br />
registrati con il vostro nome/il nome del Vostro ambulatorio; quindi anche se dimenticaste di<br />
apporre il Vostro timbro, siamo in grado di individuare con sicurezza i campioni da voi inviati.<br />
In caso di discordanza fra timbro e codice a barre, fa sempre fede il codice a barre.<br />
Ogni serie di codici a barre, composta da 7 etichette (4 grandi per le provette e per il modulo,<br />
2 sottili per i vetrini e uno con lo spazio per i dati del paziente che potete tenere Voi), porta lo<br />
stesso numero. Siete pregati di attribuire ad ogni paziente un numero diverso, vale a dire una<br />
serie diversa di codici a barre. In caso di esami diversi da richiedere con moduli diversi, anche<br />
se si tratta dello stesso animale, Vi preghiamo di utilizzare codici a barre diversi.<br />
Per l'identificazione e l'imballaggio sicuro dei campioni Vi preghiamo di procedere come segue:<br />
- Apporre un codice a barre sul modulo di richiesta di analisi; il numero deve trovarsi sulla<br />
parte superiore del codice.<br />
- Utilizzare un codice a barre per la Vostra scheda del paziente! Questo rende più semplice<br />
la richiesta telefonica del referto, in particolare in caso di identificazione non chiara del<br />
paziente interessato. Se si fa uso di pacchetti software per la gestione d'ambulatorio,<br />
tramite i codici a barre è possibile assegnare automaticamente il risultato al paziente in<br />
questione.<br />
- Attaccare un codice a barre su ciascuna provetta (e non sul contenitore protettivo!).<br />
Nel caso di vetrini o di contenitori di piccole dimensioni utilizzare le etichette piccole.<br />
- Verificare che il codice a barre sulla provetta corrisponda a quello sul modulo di richiesta<br />
di analisi.<br />
- Assicurarsi che la provetta sia ben chiusa; inserirla nel contenitore protettivo che va<br />
richiuso in modo accurato. Vetro e altri materiali non infrangibili non sono consentiti per il<br />
trasporto dei campioni.<br />
- Utilizzare esclusivamente le scatole per la spedizione messe a disposizione da <strong>IDEXX</strong><br />
Vet·Med·Lab! I campioni di laboratorio sono materiale a rischio biologico e sottostanno<br />
pertanto a precise norme di trasporto.<br />
Servizio di corriere espresso<br />
2 Istruzioni di carattere generale<br />
I servizi di ritiro presso il mittente consentono un trasporto al laboratorio rapido e corretto<br />
dei campioni praticamente da tutta Italia. Potete ottenere informazioni sulle modalità di ritiro<br />
contattando direttamente il corriere espresso o chiamando il nostro Servizio Clienti al<br />
numero verde 800 011 822.<br />
5
2 Istruzioni di carattere generale<br />
2.1. Istruzioni di carattere generale<br />
Modalità di trasmissione del referto<br />
Vi preghiamo di informarci sempre immediatamente di qualsiasi cambiamento di indirizzo,<br />
di numero telefonico o di fax nonché dell'indirizzo di posta elettronica!<br />
Modalità di comunicazione<br />
del referto<br />
In caso di domande sulla trasmissione elettronica dei referti, Vi invitiamo a rivolgersi al<br />
nostro numero verde 800 011 822.<br />
La modalità di trasmissione da Voi richiesta viene memorizzata nella Vostra scheda dati cliente<br />
ed avviene in seguito automaticamente sempre nello stesso modo. Vi preghiamo quindi di<br />
comunicare telefonicamente o per fax eventuali richieste di cambiamento della modalità in uso.<br />
Richieste telefoniche<br />
Siamo a Vostra disposizione per qualunque chiarimento o informazione e per mettervi in<br />
contatto con i nostri consulenti clinici:<br />
Lun. - Ven.: 9.00- 19.00<br />
Sab.: 9.00 -13.00<br />
Numero verde: 800 011 822<br />
Telefono: 051 709 4701<br />
Fax: 051 709 4702<br />
Possiblità di avere anche<br />
i referti parziali<br />
Per fax Si Si<br />
Per posta No Si<br />
Per email Si Si<br />
Tramite piattaforma Internet<br />
di VML<br />
Email: vetmedlab-italia@idexx.com<br />
6<br />
Si No<br />
Possibilità di avere il conto spese per ogni referto<br />
2.1. Istruzioni di carattere generale<br />
Richieste di esami supplementari<br />
2 Istruzioni di carattere generale<br />
I campioni da Voi inviati vengono conservati di regola per 6-8 giorni (fanno eccezione i<br />
campioni microbiologici e le feci). Durante questo periodo di tempo, se siamo in possesso di<br />
materiale analitico sufficiente, si può presentare richiesta di ulteriori esami e profili.<br />
Per richieste di antimicogrammi supplementari viene addebitato un supplemento rispetto al<br />
prezzo dell'esame micologico.<br />
In caso di richiesta supplementare di ricerca di agenti patogeni tramite metodica PCR, non<br />
si può escludere che il materiale, se non inviato esclusivamente per questo tipo di esame e<br />
quindi già utilizzato per precedenti test diagnostici, sia stato contaminato e che possa quindi<br />
portare a degli esiti falsamente positivi.<br />
Per il test anticorpale contro la rabbia è necessario inviare un campione esclusivamente per<br />
questo tipo di analisi; non è perciò possibile richiedere ulteriori esami sullo stesso campione<br />
o aggiungere il test anticorpale contro la rabbia su campioni già utilizzati per altre analisi.<br />
7
2 Istruzioni di carattere generale<br />
2.1. Istruzioni di carattere generale<br />
2.1.1 Fatturazione<br />
I. Fatturazione<br />
Sono possibili due tipologie di fatturazione:<br />
1. Fattura intestata al veterinario che invia i campioni (fattura cumulativa):<br />
Emissione di una fattura cumulativa mensile. Se lo richiedete, possiamo inviarVi assieme<br />
al referto un preventivo provvisorio (conto spese), in cui tuttavia non sono contemplati<br />
eventuali sconti speciali. Questi ultimi appaiono solo sulla fattura.<br />
2. Fattura intestata al proprietario dell'animale (fattura indirizzata a privato):<br />
In questo caso Vi preghiamo di indicare sul modulo di richiesta di analisi:<br />
- l'indirizzo attuale completo del proprietario<br />
- di contrassegnare il relativo campo "Fatturazione a proprietario"<br />
- e (importante!) far firmare il modulo di richiesta al proprietario.<br />
Per indirizzare la fattura al proprietario dell'animale è indispensabile inviare il modulo sopra<br />
descritto completo dei tre dati indicati, riportati in modo ben leggibile. In mancanza di queste<br />
indicazioni, o in caso di incomprensione dei dati riportati, le prestazioni vengono<br />
automaticamente addebitate al veterinario.<br />
In caso di fatturazione al proprietario dell'animale, viene applicata una maggiorazione del<br />
prezzo del 40 % (vedi Listino prezzi per proprietari).<br />
Tenere presente che, in caso di fatturazione diretta al proprietario dell'animale, il laboratorio è<br />
tenuto, su richiesta, ad inviare una copia del referto delle analisi al proprietario stesso.<br />
II. Richiesta aggiuntiva<br />
Per richieste di antimicogrammi supplementari viene addebitato un supplemento rispetto al<br />
prezzo dell'esame micologico.<br />
III. Storno<br />
Se desiderate annullare una richiesta di analisi già inoltrata, Vi preghiamo di informarci il più<br />
tempestivamente possibile, dal momento che in caso di analisi già avviate siamo purtroppo<br />
costretti ad addebitarne il costo.<br />
IV. Prezzi<br />
Per i prezzi attualmente validi fare riferimento ai nostri listini prezzi: Listino prezzi per veterinari<br />
(IVA esclusa) e Listino prezzi per proprietari (IVA compresa). In entrambi i casi non sono<br />
inclusi i costi di trasporto.<br />
8<br />
2.2 Istruzioni generali sul prelievo e conservazione dei campioni<br />
Preparazione dei campioni necessari per gli esami di laboratorio<br />
1. Preparazione del paziente<br />
L'affidabilità dei risultati degli esami dipende anche dalla preparazione del paziente. Al momento<br />
della raccolta del campione, il paziente deve essere a digiuno da 10 - 12 ore, nella misura in<br />
cui le condizioni dell'animale lo permettono. In caso contrario, alcuni parametri possono<br />
risultare alterati (cfr. Tabella al punto 2.2, pag. 12).<br />
Per la determinazione del TLI, dell'ammoniaca e degli acidi biliari, l'animale deve<br />
tassativamente essere a digiuno.<br />
Prima del prelievo del sangue, il paziente non deve aver effettuato sforzi fisici; il prelievo deve<br />
essere eseguito in modo tranquillo e rapido. Sforzi o agitazione possono portare fra l'altro a<br />
livelli elevati di CK, LDH, acido lattico, glucosio e cortisolo nonché ad un aumento dei leucociti<br />
in circolazione.<br />
2. Tecnica del prelievo<br />
Per evitare l'emolisi, prima della venopuntura la circolazione del sangue deve venire bloccata<br />
solo per il breve intervallo di tempo necessario alla raccolta del campione. Cercare di<br />
"pompare o aspirare violentemente" il sangue dalla vena alla siringa può falsare i risultati.<br />
Durante il prelievo, per prevenire una rottura degli eritrociti, occorre evitare una depressione<br />
troppo accentuata all'interno della siringa. Il sangue non deve essere immesso a spruzzo<br />
dentro la provetta. Si consiglia di lasciarlo scorrere lungo la parete della stessa (se si impiega<br />
una siringa ed ago, togliere l'ago dalla siringa ed immettere il sangue nella provetta dal cono<br />
della siringa.) Evitare di stantuffare dalla cannula dell'ago le ultime gocce di sangue. Dopo il<br />
prelievo, le provette contenenti anticoagulante vanno capovolte delicatamente, senza agitarle.<br />
Smaltire la cannula o l'ago utilizzati per il prelievo di sangue (gli oggetti appuntiti non possono<br />
essere inviati con il corriere o per posta; inoltre vi è pericolo di lesioni per il personale<br />
incaricato al disimballaggio).<br />
3. Che tipo di materiale serve per quale analisi?<br />
2 Istruzioni di carattere generale<br />
Per ogni analisi e parametro del presente catalogo viene indicato se la determinazione richieda<br />
siero o sangue intero con anticoagulante e di che tipo. La maggior parte delle analisi condotte<br />
sul siero possono essere eseguite anche su plasma. Le eccezioni vengono indicate di seguito<br />
e sono inoltre espressamente contrassegnate nei moduli di richiesta delle analisi. Anche la<br />
quantità di campione necessaria viene chiaramente indicata. Per alcuni campioni possono<br />
essere necessarie specifiche precauzioni (p.es. provette non di vetro per lo Zinco e per i<br />
parametri della coagulazione, protezione dalla luce per alcune vitamine...). Vi preghiamo di<br />
fare anche riferimento all'attuale listino in ordine alfabetico "Quale materiale per quale esame".<br />
9
2 Istruzioni di carattere generale<br />
2.2 Istruzioni generali sul prelievo e conservazione dei campioni<br />
Plasma<br />
Per plasma si intende la parte liquida del sangue resa incoagulabile con l'aggiunta di anticoagulanti.<br />
Il plasma è più semplice da ottenere rispetto al siero. La quantità ottenuta è maggiore ed il<br />
pericolo di emolisi minore. Nel ricavare il plasma si presti attenzione al corretto rapporto con<br />
l'anticoagulante; in caso contrario sussiste il pericolo di emolisi. Evitare di discostarsi considerevolmente<br />
dalla quantità di sangue indicata sulla provetta, sia per eccesso che per difetto. Appena<br />
terminato il prelievo, la provetta deve venire capovolta più volte delicatamente per miscelare<br />
l'anticoagulante con il sangue. Subito dopo centrifugare il sangue per 5 - 10 minuti ad un basso<br />
numero di giri (3500 giri/min.).<br />
Gli anticoagulanti più usati sono EDTA (acido etilendiamminotetracetico), eparina e citrato di<br />
sodio.<br />
I seguenti parametri non possono tuttavia venire determinati su plasma EDTA:<br />
- K, Ca, Mg, ferro, ALP, glucosio, acido lattico.<br />
Per alcuni parametri è necessario l'uso di un inibitore particolare della coagulazione:<br />
- Per i parametri della coagulazione: plasma citrato (congelato)<br />
o di uno stabilizzante specifico:<br />
- Per il Cardiopet TM proBNP: provette specifiche in cui immettere plasma con EDTA.<br />
Siero<br />
Per siero si intende la parte liquida del sangue ottenuta dalla coagulazione della fibrina e<br />
dei globuli (plasma senza fibrina).<br />
Il processo per ricavare il siero è più complesso rispetto a quello per ottenere il plasma.<br />
L'intervallo di tempo prima che inizi la coagulazione varia a seconda dell'individuo e della<br />
specie animale.<br />
Per ottenere il siero occorre lasciare il sangue fino a coagulazione completa in un contenitore<br />
privo di anticoagulanti. Per velocizzare il processo può venire utilizzato un attivatore<br />
della coagulazione (p.es. provetta per sierare con microsfere; le provette per sierare con<br />
gel separatore non possono essere utilizzate per alcuni particolari parametri, p.es.<br />
digossina, fenobarbitale, insulina).<br />
Dopodiché staccare delicatamente con una spatolina pulita i coaguli aderenti al bordo<br />
della provetta e centrifugare la provetta per 5 - 10 minuti ad un basso numero di giri<br />
(3500 giri/min). Immediatamente dopo asportare il siero con una pipetta. Il siero ricavato<br />
corrisponde a circa il 30 % del sangue totale prelevato.In particolare, per la determinazione<br />
di parametri a rischio di emolisi (cfr. tabella al paragrafo 2.2, pag. 12), occorre separare<br />
il siero completamente dal coagulo ematico.<br />
10<br />
2.2 Istruzioni generali sul prelievo e conservazione dei campioni<br />
Sangue intero<br />
Si sconsiglia la spedizione di sangue intero dato l'alto rischio di emolisi durante il<br />
trasporto, con conseguente falsificazione di vari parametri analitici. In particolare, il<br />
glucosio ematico viene degradato quasi del tutto, dal momento che il metabolismo<br />
delle cellule ematiche non viene interrotto.<br />
Sangue EDTA<br />
Per la determinazione del quadro eritrocitario, leucocitario e piastrinico e del gruppo<br />
sanguigno, ma anche per analisi PCR, è necessario rendere il sangue non coagulabile<br />
tramite l'uso di EDTA. Il sangue EDTA va conservato in frigorifero fino al momento della<br />
spedizione. A causa della conservazione si può verificare un aumento dei valori MCV<br />
ed ematocrito.<br />
Strisci ematici<br />
Nel sangue, già 4 - 6 ore dopo il prelievo, ha luogo un invecchiamento cellulare. Per una<br />
corretta interpretazione della conta leucocitaria è quindi importante inviare insieme al<br />
sangue anche uno striscio ematico eseguito almeno entro due ore dal prelievo, utilizzando<br />
il sangue intero prima che sia stato messo a contatto con l'anticoagulante.<br />
Lo striscio ematico è indispensabile anche per il rilievo di parassiti ematici e di batteri<br />
emotropi.<br />
Tecnica di preparazione dello striscio<br />
Istruzioni per la corretta preparazione<br />
di uno striscio ematico<br />
Angolo di inclinazione:<br />
30° - 45°<br />
2 Istruzioni di carattere generale<br />
• Pipettare 1 goccia di sangue sull'estremità destra di un<br />
vetrino portaoggetto.<br />
• Appoggiare un secondo vetrino (p.es. vetrino coprioggetto<br />
o vetrino con bordi levigati) sul vetrino portaoggetto<br />
secondo un angolo di 45° e metterlo a contatto con la<br />
goccia di sangue.<br />
• Grazie alla forza capillare il sangue si distribuisce sul<br />
bordo del secondo vetrino.<br />
• Far slittare rapidamente il secondo vetrino verso sinistra<br />
lungo il vetrino portaoggetto secondo un angolo di<br />
30° - 45°.<br />
• Lo striscio deve apparire regolare e senza soluzioni di<br />
continuità, distribuito su 2/3 della lunghezza del vetrino e<br />
risultare più sottile sulle sue parti terminali.<br />
• Lasciare asciugare lo striscio all'aria (non utlizzare fissanti<br />
né coloranti).<br />
11
2 Istruzioni di carattere generale<br />
2.2 Istruzioni generali sul prelievo e conservazione dei campioni<br />
4. Volume del campione<br />
Per la maggior parte dei parametri ematici di chimica clinica è necessario un volume di 30 µl.<br />
Ad esso si deve aggiungere un volume di perdita di 200 µl.<br />
5. Fattori di disturbo che possono condurre a falsi risultati<br />
Emolisi: Per emolisi si intende la liberazione del contenuto degli eritrociti attraverso la<br />
distruzione della membrana eritrocitaria (p.es.: potassio, ferro ed emoglobina<br />
g colorazione rossa).<br />
Cause: anemia emolitica, errori preanalitici (cfr. le istruzioni tecniche sul prelievo,<br />
capitolo 2.2, pag. 9).<br />
Nei campioni emolitici è probabile che i parametri indicati nella tabella (vedi sotto)<br />
vengano falsificati .<br />
Lipemia: Per lipemia si intende una colorazione biancastra del siero o del plasma dovuta alla<br />
presenza di grassi (lipidi) e chilomicroni.<br />
Cause: presenza elevata di trigliceridi (cfr. capitolo 5), alimentazione, forte<br />
affaticamento.<br />
Al fine di evitare una lipemia dovuta all'alimentazione, al momento del prelievo<br />
l'animale deve essere a digiuno da 12 ore.<br />
Nei campioni lipemici è probabile che i parametri indicati nella tabella (vedi sotto)<br />
vengano falsati.<br />
Interferenza Parametro Tipo di alterazione<br />
Emolisi α-Amilasi, Albumina, ALT, AST, Bilirubina, Calcio,<br />
CK, Colesterolo, Creatinina, Ferro, Fosfati, Fruttosamina,<br />
γ-GT, LDH, Lipasi, Magnesio, Potassio, Proteine<br />
totali, Emoglobina, MCHC<br />
Bilirubina, Calcio, Creatinina, Folati, Fosfatasi<br />
alcalina, γ-GT, Glucosio, Lipasi, Ematocrito<br />
Conta degli eritrociti<br />
Lipemia ALT, AST, Bilirubina, Calcio, Colesterolo, Creatinina,<br />
Fosfatasi alcalina, Fosfati, Glucosio, Proteine totali,<br />
Trigliceridi, Emoglobina, MCHC<br />
Emolisi e lipemia possono influenzare i valori ottenuti anche nei dosaggi ormonali e nei<br />
test sierologici.<br />
12<br />
Albumina, Amilasi , Potassio, Sodio ¯<br />
-<br />
¯<br />
-<br />
2.2 Istruzioni generali sul prelievo e conservazione dei campioni<br />
6. Campioni congelati<br />
Per alcuni esami specifici è necessaria la spedizione di campioni congelati:<br />
Coagulazione: Plasma citrato<br />
ADH, Ammoniaca, ACTH, Paratormone: Plasma EDTA<br />
Insulina: Siero - si prega di non utilizzare provette per<br />
sierare con gel<br />
IGF I: Siero<br />
2 Istruzioni di carattere generale<br />
I campioni devono venire inviati in speciali contenitori portaprovette, che possono essere<br />
richiesti al laboratorio. Questi devono venire posti nel congelatore la notte prima della<br />
spedizione (privati dell'involucro di polistirolo). Quindi vi si possono inserire i campioni,<br />
anch'essi congelati, per essere inviati al laboratorio. Assicuratevi che i campioni raggiungano<br />
il laboratorio ancora congelati, evitando la spedizione a ridosso del fine settimana. Campioni<br />
congelati a -20° C si mantengono congelati nei contenitori portaprovette a temperature<br />
esterne di 18 - 21°C per circa 12 ore. A temperature esterne più elevate quest'intervallo di<br />
tempo diminuisce.<br />
Attenzione: non congelare il sangue intero! Per ottenere il siero/plasma<br />
centrifugare il campione subito dopo il prelievo!<br />
7. Preparazione dei campioni per la diagnostica della coagulazione<br />
Attenzione:<br />
Altezza esatta di<br />
riempimento<br />
Provetta Na-citrato:<br />
Presso <strong>IDEXX</strong> Vet·Med·Lab sono<br />
disponibili provette Na-citrato di due<br />
diversi volumi:<br />
da 2,7 ml per piccoli animali<br />
da 4,5 ml per grossi animali<br />
®<br />
BD Vac<br />
9NC 0.10<br />
BD Diagnostics - Preanalytical Systems 8011715<br />
Belliver Industrial Estate, Plymouth. PL6 7BP.UK.<br />
2.7ml<br />
®<br />
BD Vac<br />
9NC 0.12<br />
Provetta da 2,7 ml Provetta da 4,5 ml<br />
BD Diagnostics - Preanalytical Systems 388385<br />
Belliver Industrial Estate, Plymouth. PL6 7BP.UK.<br />
4.5ml<br />
13
2 Istruzioni di carattere generale<br />
2.2 Istruzioni generali sul prelievo e conservazione dei campioni<br />
Preparazione dei campioni per la diagnostica della coagulazione<br />
1. Bloccare la vena solo brevemente e con delicatezza (< 30 sec).<br />
2. La prima parte del sangue prelevato dovrebbe essere eliminata oppure utilizzata per<br />
ottenere siero.<br />
3. La provetta con citrato deve venire riempita esattamente fino al punto indicato in modo che<br />
sia garantito il rapporto di miscelazione di una parte di citrato su nove parti di sangue<br />
(diluizione 1:10). Se non si usa il sistema Vacutainer ®, occorre riempire la provetta fino<br />
al margine superiore dell'etichetta.<br />
4. Capovolgere rapidamente la provetta più volte.<br />
5. Controllare il campione: i campioni coagulati non sono idonei all'analisi!<br />
6. La centrifugazione della provetta con citrato deve avvenire il più presto possibile dopo il<br />
prelievo del sangue e comunque non oltre le 2 ore (5 min. a 3500 giri/min.).<br />
7. Togliere pipettando il surnatante (plasma citrato) e trasferire il campione in una provetta<br />
senza anticoagulante (provetta per siero); non utilizzare contenitori con EDTA o eparina o<br />
un'altra provetta con citrato. Non utilizzare pipette o provette di vetro.<br />
8. La determinazione di singoli fattori della coagulazione non viene eseguita giornalmente;<br />
pertanto, in caso di richiesta contemporanea di test di screening e di singoli fattori della<br />
coagulazione, si consiglia di distribuire il campione in due provette distinte.<br />
9. Congelare e conservare il campione in congelatore (-20°C) fino al trasporto.<br />
10. Spedire negli contenitori per materiale congelato messi a disposizione da <strong>IDEXX</strong><br />
Vet·Med·Lab, che prima dell'uso devono essere stati posti (senza involucro di polistirolo)<br />
per 24 ore nel congelatore. I campioni devono raggiungere il laboratorio ancora congelati.<br />
Vi preghiamo di osservare le istruzioni di carattere generale per i campioni congelati<br />
(cfr. pag. 13).<br />
8. Preparazione dei campioni per il Cardiopet TM proBNP<br />
Le provette che mettiamo a disposizione per il Cardiopet TM proBNP permettono di inviare i<br />
campioni a <strong>IDEXX</strong> Vet·Med·Lab senza temere il deterioramento.<br />
Maeriale richiesto: 0,3 -1 ml di plasma con EDTA.<br />
1. Prelevare il sangue con una siringa standard<br />
2. Depositare il prelievo in una provetta con EDTA, capovolgere ripetutamente e<br />
delicatamente la provetta in modo da favorire il legame tra campione ed anticoagulante<br />
3. Subito dopo, centrifugare il campione in modo da ottenere il plasma con EDTA<br />
4. Prelevare il plasma e versarlo nella provetta Cardiopet TM proBNP facendo attenzione a<br />
non eccedere nella quantità di campione inserito.<br />
5. Capovolgere ripetutamente e delicatamente la provetta prima della spedizione.<br />
Attenzione: il campione deve arrivare al laboratorio entro le 48 ore dal prelievo!<br />
14<br />
2.2 Istruzioni generali sul prelievo e conservazione dei campioni<br />
9. Analisi del liquor / analisi del puntato<br />
2 Istruzioni di carattere generale<br />
In condizioni fisiologiche il liquor ha un aspetto limpido. Già durante il prelievo fare attenzione<br />
che non abbia luogo contaminazione ematica dovuta alla punzione. Il liquor e gli altri tipi di<br />
puntato devono essere trasferiti in provette sterili. In caso di richiesta contemporanea di diversi<br />
tipi di esami (p.es. batteriologici e citologici), Vi preghiamo di inviarci il materiale da analizzare<br />
in due provette distinte in modo da consentirci di valutare parallelamente i campioni il più<br />
rapidamente possibile.<br />
Il liquor, non diversamente da altri tipi di puntato, è un liquido biologico molto instabile. Già<br />
un intervallo dopo il prelievo di 30 min. - 4 ore può alterare seriamente i risultati analitici.<br />
Pertanto è indispensabile che l'esame citologico del liquor (e/o dei puntati), come pure l'analisi<br />
del liquor per il conteggio cellulare, si svolgano entro quest'intervallo di tempo. In caso di<br />
esame citologico preparare uno striscio cellulare del sedimento (centrifugare a 1000 giri/min.<br />
per 3 - 5 min., eliminare parte del surnatante e del residuo, agitare e preparare uno striscio<br />
come quello ematico asciugandolo semplicemente all'aria).<br />
15
2 Istruzioni di carattere generale<br />
2.3 Istruzioni di carattere generale per gli esami microbiologici<br />
1. Raccolta di campioni batteriologici<br />
Momento del prelievo<br />
Il prelievo del campione deve avvenire possibilmente prima dell'inizio di una terapia antibiotica. Nel<br />
caso di un controllo terapeutico si consiglia di mantenere un intervallo di tempo sufficiente tra la<br />
somministrazione dell'antibiotico ed il prelievo. In caso di materiale da autopsia, eseguire il prelievo<br />
sempre immediatamente dopo il decesso.<br />
Punto del prelievo<br />
Sono idonei al prelievo i punti sospettati di contenere gli organismi patogeni da rilevare. In caso di<br />
affezioni purulente, otiti ed ascessi si consiglia il prelievo nella zona intermedia fra tessuto malato e<br />
sano, non essendo generalmente possibile creare una coltivazione batterica a partire dal pus.<br />
Tecnica del prelievo<br />
Prelevare i campioni per gli esami batteriologici evitando ogni contaminazione esterna (p.es. il<br />
contatto con il pavimento o il tavolo). Anche dopo il prelievo evitare contaminazioni dovute a<br />
manipolazione successiva (p.es. travasando o imballando il campione).<br />
Materiale per esami batteriologici<br />
- Tampone: I tamponi sono particolarmente indicati per la raccolta di campioni da superfici diverse. Se<br />
possibile, utilizzare tamponi con terreno di trasporto. Se si usano tamponi asciutti sussiste il<br />
pericolo di non riuscire più in laboratorio a creare colture, soprattutto in caso di germi<br />
particolarmente sensibili. Se la superficie da cui raccogliere il campione è molto asciutta, per<br />
facilitare la raccolta del campione si può inumidire il tampone con una soluzione isotonica<br />
salina sterile.<br />
- Urina: Spedire i campioni di urina in provette senza anticoagulante. L'urina prelevata per cistocentesi<br />
(o eventualmente con catetere) è da preferirsi. L'urina raccolta per minzione spontanea è a<br />
rischio di contaminazione da parte di germi presenti sulle superfici corporee o nell'ambiente,<br />
per cui si consiglia di scartare le prime urine o di praticare una buona disinfezione cutanea.<br />
Campioni di urina raccolti dall'ambiente (dalla lettiera del gatto, dal tavolo di medicazione)<br />
non sono idonei per le analisi. Al posto di un campione di urina può venire inviato anche un<br />
sistema colturale (Uricult ®) inumidito con urina.<br />
- Prelievi bioptici, parti di organi: Spedire in provetta sterile e senza anticoagulante. In caso di ritardi<br />
nella spedizione inviare le parti di organi congelate senza interruzione della catena del freddo.<br />
Indicare chiaramente sul modulo di richiesta esami che si tratta di un campione congelato.<br />
Una volta scongelato, evitare di ricongelare il campione.<br />
- Liquidi biologici: (liquido sinoviale, liquor, puntato prelevato da cavità corporee, latte, ecc.): Spedire in<br />
provetta sterile e senza anticoagulante. Se è richiesta una coltura anaerobica, ridurre al minimo<br />
possibile il contatto con l'ossigeno dell'aria (scegliere un contenitore di grandezza idonea).<br />
- Feci: Spedire in provetta sterile e senza anticoagulante. Fare attenzione che la quantità sia<br />
sufficiente. In caso di campioni raccolti dal suolo sussiste il rischio di contaminazione<br />
con germi dell'ambiente. Se è richiesta una coltura anaerobica, ridurre al minimo possibile<br />
il contatto con l'ossigeno dell'aria (scegliere un contenitore di grandezza idonea).<br />
16<br />
2.3 Istruzioni di carattere generale per gli esami microbiologici<br />
- Colture ematiche: Richiedere per tempo al laboratorio la relativa bottiglia per emocoltura. Non è<br />
possibile effettuare colture da campioni ematici di routine. Al momento della raccolta del<br />
campione assicurarsi che la procedura di prelievo sia completamente sterile. Conservare<br />
la bottiglia riempita a temperatura ambiente (senza raffreddare) ed inviarla<br />
tempestivamente al laboratorio.<br />
2. Raccolta di campioni micologici<br />
Momento, sede e tecnica del prelievo<br />
Per l'esame colturale di lieviti e funghi sono valide le stesse istruzioni relative agli esami<br />
batteriologici. I tamponi con terreno di trasporto sono idonei anche per i campioni micologici.<br />
In caso di prelievo di campioni dalle mucose si faccia attenzione alla presenza di<br />
patine membranose o purulente, in cui eventuali microrganismi patogeni possono venire<br />
rilevati con estrema facilità.<br />
Per la rilevazione di dermatofiti si consiglia prima del prelievo la disinfezione del punto di<br />
raccolta con alcool al 70% per evitare che le colture micologiche a crescita lenta vengano<br />
inibite dai batteri concomitanti. Il campione deve essere raccolto nella zona intermedia tra<br />
tessuto malato e sano e inviato al laboratorio in una provetta asciutta.<br />
Se si richiede un esame batteriologico e micologico dello stesso campione, si consiglia la<br />
seguente procedura: dapprima ricavare un tampone per l'esame batteriologico e trasferirlo<br />
nel terreno di trasporto, quindi disinfettare il punto di raccolta con alcool al 70% e prelevare<br />
il campione per l'esame micologico (inserire in una provetta sterile).<br />
Materiale per esami micologici<br />
2 Istruzioni di carattere generale<br />
I materiali di elezione sono raschiati cutanei profondi o peli prelevati con pinzetta. Peli<br />
tagliati non costituiscono un materiale adatto. Per l'identificazione qualitativa possono<br />
venire inviati anche terreni di coltura preparati e incubati in ambulatorio. Per l'esame<br />
micologico quantitativo sulle feci è necessario un campione di feci; il solo tampone di<br />
feci non è sufficiente.<br />
17
2 Istruzioni di carattere generale<br />
2.4 Istruzioni di carattere generale per le analisi di biologia molecolare (PCR)<br />
Materiale da analizzare<br />
Per la PCR si raccomandano campioni in cui si suppone che l'agente patogeno sia contenuto<br />
in quantità sufficiente. Occorre pertanto, prima del prelievo, appurare:<br />
- se l'animale si trovi o meno ancora nella fase viremica/batteriemica<br />
- se l'agente patogeno abbia già raggiunto o meno il suo organo bersaglio e, in caso<br />
affermativo, a seconda della sintomatologia, appurare quale sia il luogo più probabile in<br />
cui risiede l'agente patogeno<br />
- se esista un organo in cui l'agente risiede anche in fasi di latenza, al di fuori delle fasi<br />
acute della malattia (come ad es. i leucociti per l'EHV-1).<br />
Materiali per la ricerca di agenti patogeni tramite PCR<br />
- Tamponi:<br />
Per il prelievo di tamponi utilizzare tamponi sterili e asciutti; inviarli al laboratorio senza<br />
terreno di trasporto in una provetta senza anticoagulante. Attenzione: questi campioni non<br />
sono idonei per un esame batteriologico!<br />
In caso di richiesta contemporanea di esame batteriologico e di esame tramite biologia<br />
molecolare, prelevare ed inviare 2 tamponi separati.<br />
- Liquidi biologici:<br />
(sinovia, liquor, puntato delle cavità corporee, umore acqueo, urina ecc.):<br />
Spedire in provette sterili e senza anticoagulante. In base ai parametri richiesti, sono<br />
necessari 0,5- 2 ml di materiale. Per i campioni di urina si richiedono 5 ml. Se si è sicuri<br />
che il campione arriverà al laboratorio non più tardi di due giorni dopo il prelievo, allora il<br />
campione va conservato ad una temperatura dai +2° C ai +8°C e inviato senza congelarlo. Se<br />
invece non si può escludere che il campione arrivi più tardi, allora occorre congelarlo e<br />
inviarlo congelato senza interruzione della catena del freddo (utilizzando p.es. i contenitori<br />
per materiale congelato). Indicare chiaramente sul modulo di richiesta esami che si tratta<br />
di un campione congelato.<br />
Una volta scongelato, evitare assolutamente di ricongelare il campione.<br />
Per il rilievo di organismi intracellulari (p.es. Listeria) si dovrebbe tuttavia evitare il congelamento<br />
del campione, mantenendolo quindi ad una temperatura dai +2° C ai +8° C.<br />
- Prelievi bioptici, parti di organi, materiale abortivo:<br />
Spedire in una provetta sterile senza anticoagulante, che contenga una quantità di soluzione<br />
isotonica salina sterile sufficiente a coprire il campione. Se non siete sicuri che il campione<br />
arrivi al laboratorio non più tardi di due giorni dopo il prelievo, inviate il materiale congelato<br />
senza aggiunta di NaCl e senza interruzione della catena del freddo. Indicare chiaramente<br />
sul modulo di richiesta che si tratta di un campione congelato.<br />
Evitare uno scongelamento ed un ulteriore congelamento.<br />
(Attenzione: gli esami su campioni tissutali richiedono un giorno di esecuzione in più).<br />
- Sangue EDTA, sangue citrato:<br />
La quantità di campione varia in base al tipo di esame ed eventualmente anche in base alla<br />
fase della malattia. Non inviate in nessun caso campioni congelati. Non inviate sangue con<br />
eparina!<br />
18<br />
2.4 Istruzioni di carattere generale per le analisi di biologia molecolare (PCR)<br />
- Feci:<br />
Spedire in provette sterili senza anticoagulante. Di solito sono sufficienti 2 g di materiale.<br />
Materiali per i test genetici con diagnostica molecolare (malattie ereditarie, test di paternità,<br />
DNA-Fingerprinting)<br />
Il materiale standard per gli esami genetici di malattie ereditarie è costituito da 0,5-2 ml di<br />
sangue EDTA o, in alcuni casi, da un tampone della mucosa della guancia.<br />
I tempi di trasporto non costituiscono un fattore critico per l'attendibilità dell'esito.<br />
Il materiale standard per test del DNA e test di paternità è costituito da sangue EDTA<br />
(almeno 0,5 ml) o da un tampone prelevato dalla mucosa della guancia.<br />
È possibile scaricare il modulo di richiesta specifico per la diagnostica molecolare dal sito<br />
www.idexx.it.<br />
Indicazioni per il prelievo di tamponi dalla mucosa orale<br />
2 Istruzioni di carattere generale<br />
1. Prima del prelievo il paziente non dovrebbe aver assunto né cibo né bevande (ad eccezione<br />
dell'acqua) da almeno 30 minuti.<br />
2. Con un tampone sterile (meglio ancora con un "Cytobrush") strofinare vigorosamente<br />
entrambe le guance interne avanti e indietro per almeno 10 volte. Durante la procedura far<br />
roteare il tampone su se stesso.<br />
3. Identificare chiaramente (dati del proprietario) il contenitore protettivo, per evitare possibili<br />
scambi di campione!<br />
4. Lasciar asciugare il tampone all'aria a temperatura ambiente per almeno 1- 2 minuti,<br />
lasciando il tampone appoggiato al tavolo, dopo averlo spinto per alcuni centimetri nel<br />
contenitore protettivo.<br />
5. Dopo l'asciugatura spingere il tampone in fondo al contenitore protettivo.<br />
6. Tenere quindi il campione in ambiente fresco (5- 8° C) e asciutto o inviare immediatamente<br />
al laboratorio.<br />
Non toccate in nessun caso il tampone, in quanto il contatto con materiale estraneo potrebbe<br />
falsare l'esito o rendere impossibile la valutazione.<br />
19
2 Istruzioni di carattere generale<br />
2.4 Istruzioni di carattere generale per le analisi di biologia molecolare (PCR)<br />
Misure precauzionali per il trattamento del campione<br />
A causa dell'elevata sensibilità del metodo PCR Vi preghiamo durante il prelievo di seguire<br />
attentamente le seguenti indicazioni:<br />
- In generale durante il prelievo sarebbe opportuno indossare dei guanti per evitare qualsiasi<br />
contaminazione del campione.<br />
- Per questo tipo di analisi sarebbe necessario prelevare un campione da utilizzare<br />
esclusivamente a questo scopo.<br />
- Utilizzare provette e strumenti sterili, evitando possibili contaminazioni attraverso manipolazioni<br />
successive del campione (ad es. nel travasarlo o nel confezionarlo)!<br />
- Se siete sicuri che il campione arriverà al laboratorio non più tardi di due giorni dopo il prelievo,<br />
inviatelo non congelato, conservandolo fino al momento della spedizione ad una temperatura<br />
dai +2° C ai +8° C.<br />
- Se non è possibile evitare un tempo di trasporto più lungo, inviate il campione congelato (ad<br />
eccezione di sangue EDTA e sangue citrato), assicurandovi che la catena del freddo non venga<br />
interrotta (utlizzando p.es. i contenitori per materiale congelato)! Se ciò non fosse possibile,<br />
allora è preferibile inviare il materiale non congelato. Una volta scongelato, evitare a<br />
ssolutamente di ricongelare il campione.<br />
Richiesta di esami supplementari<br />
Attenzione: in caso di richiesta supplementare di ricerca di agenti patogeni tramite metodica PCR,<br />
non si può escludere che il materiale, se non inviato esclusivamente per questo tipo di esame e<br />
quindi già utilizzato per precedenti test diagnostici, sia stato contaminato e che possa quindi portare<br />
a degli esiti falsamente positivi.<br />
20<br />
2.5 Istruzioni di carattere generale per esami istologici<br />
Presso <strong>IDEXX</strong> Vet·Med·Lab vengono eseguiti i seguenti esami istologici:<br />
- Esami istopatologici di neoplasie, frammenti di pelle, materiale bioptico prelevato da organi<br />
e materiale ottenuto con biopsia ad ago sottile, nonché di alterazioni generali dei tessuti,<br />
come pure di organi o parti di organi ricavati da interventi chirurgici o autopsie.<br />
- Esami citologici di puntato con ago sottile da materiali liquidi organici (p.es. liquido<br />
sinoviale o pleurico, ascite, urina) e da strutture/masse solide (p.es. ghiandole mammarie,<br />
reni, fegato, tiroide, linfonodi).<br />
- Esami citologici di strisci vaginali (citologia vaginale).<br />
- Esami citologici di midollo osseo.<br />
Importanti istruzioni per una preparazione ottimale del campione:<br />
- Compilare il modulo di richiesta degli esami istologici e citologici (moduli di colore bianco)<br />
ed indicare i dati anamnestici completi. Più informazioni verranno fornite più l'istopatologo<br />
sarà in grado di dare indicazioni utili per la diagnosi.<br />
- In caso di spedizione di materiale dermatologico compilare anche la parte posteriore del<br />
modulo.<br />
- Fissare i campioni senza provocare schiacciamenti. Inserire il materiale in una quantità<br />
sufficiente di fissativo (si consiglia la formalina al 4%; la formalina a concentrazioni<br />
superiori al 10% non permette una fissazione idonea del campione!) ed in contenitori non<br />
troppo piccoli, in modo da arrestare lo svolgersi di processi autolitici nei tessuti ed in<br />
particolare nella parte centrale del campione. Campioni di grandi dimensioni devono<br />
essere tagliati o lamellati; se l'analisi non è urgente possono anche venire prefissati per<br />
più giorni prima della spedizione.<br />
- Utilizzare contenitori con aperture a collo largo: immerso nel fissativo il campione si<br />
indurisce e al momento del prelievo possono verificarsi artefatti da schiacciamento<br />
(contenitori per spedizione contenenti formalina al 4 % possono venire richiesti al nostro<br />
laboratorio).<br />
- Imballare in modo da evitare la fuoriuscita di liquidi! I contenitori con formalina devono<br />
essere rinchiusi in un altro contenitore protettivo. Richiudere bene i contenitori,<br />
avvolgendoli eventualmente in fogli di carta a forte potere assorbente.<br />
Biopsia Tru-cut ®<br />
2 Istruzioni di carattere generale<br />
Sono in commercio i relativi sistemi di biopsia con diametro compreso fra 0,3 e 1 mm. Il materiale<br />
ottenuto viene fissato nella formalina come un campione di tessuto e trattato come un campione<br />
istologico.<br />
Il vantaggio rispetto ad un esame istologico vero e proprio consiste nel mantenimento delle strutture<br />
tumorali ed organiche originarie. Mentre per le neoplasie è sufficiente un piccolo diametro, per i<br />
campioni di organi si deve ricorrere ad una biopsia di diametro maggiore.<br />
In caso di sospetto linfoma, evitare per quanto possibile di utilizzare il linfonodo sottomandibolare per<br />
la biopsia Tru-cut o per il campionamento citologico, perché l'intensa attività/iperplasia reattiva che vi<br />
ha luogo può impedire il riconoscimento di processi neoplastici.<br />
21
2 Istruzioni di carattere generale<br />
2.5 Istruzioni di carattere generale per esami istologici<br />
Aspirato con ago sottile di masse o liquidi<br />
Per la punzione si consiglia un ago di 18 - 22 G e di corrispondente lunghezza. Per una<br />
punzione sicura e ripetuta si consiglia l'uso di un supporto di aspirazione (impugnatura<br />
supplementare per siringhe e/o pistola aspirante). Altrimenti, utilizzare siringhe da 5 - 10 ml.<br />
Il prelievo del materiale avviene tramite una breve aspirazione a cannula inserita e con lo<br />
stantuffo della siringa sollevato di circa 2 ml. Se necessario si ripete la punzione più volte,<br />
sempre con una nuova cannula. Evitare tuttavia di campionare più volte con forza a raggiera o<br />
di aspirare in modo continuo per un lungo periodo di tempo, dal momento che ciò può portare<br />
a contaminazione eccessiva di sangue. In caso di punzione di masse in genere, il materiale<br />
dovrebbe trovarsi nella sola cannula e non essere visibile nel corpo della siringa. Dopo aver<br />
leggermente ridotto la depressione ed estratta quindi la cannula, il materiale ottenuto deve<br />
venire rapidamente disposto su un vetrino portaoggetti, distribuendolo in modo simile ad uno<br />
striscio ematico. Una quantità ridotta di materiale può essere disposta a stella con la punta<br />
della cannula. Per il prelievo dei linfonodi si suggerisce di evitare l'aspirazione: è sufficiente<br />
l'ago infissione. Le cellule linfoidi, in particolare quelle reattive o blastiche, sono molto delicate.<br />
I liquidi devono prima venire centrifugati a 1500 giri/min. per 5 minuti (il trattamento minimo è<br />
di 3 minuti a 800 giri/min.). Dopo aver asportato con una pipetta il surnatante, stendere su un<br />
vetrino il sedimento (il sedimento assieme ad una residua parte di surnatante liquido deve essere<br />
delicatamente agitato per ottenere una sospensione cellulare) come per uno striscio ematico.<br />
Lo striscio ottenuto viene quindi asciugato all'aria e, una volta essiccato, può essere inserito<br />
nel relativo contenitore protettivo e inviato al nostro laboratorio. Non coprire mai con un vetrino<br />
di copertura o con un secondo vetrino portaoggetto e non utilizzate fissanti né coloranti.<br />
Per l'anamnesi, è particolarmente importante, soprattutto negli esami citologici, l'indicazione<br />
del sito di prelievo.<br />
Informazioni sul prezzo<br />
In caso di campioni tissutali di grandi dimensioni, di tumori multipli o di più campioni diversi di<br />
un unico animale, nonché in caso di campioni ricavati da più di 5 biopsie cutanee dello<br />
stesso animale, a causa dell'aumentato volume di lavoro con numero sensibilmente maggiore<br />
di preparati e tagli e di diverse interpretazioni e diagnosi, viene addebitato un supplemento di<br />
prezzo (cfr. Listino prezzi).<br />
In caso di domande Vi invitiamo a contattare il nostro numero verde 800 011 822<br />
22<br />
2.6 Istruzioni di carattere generale per esami parassitologici<br />
Prelievo ed invio del campione<br />
Il campione di feci per un esame parassitologico deve, se possibile, venire prelevato direttamente<br />
dal retto. In caso di campioni non rettali devono essere utilizzate feci fresche. La raccolta di feci<br />
dal suolo può dare luogo ad una contaminazione secondaria.<br />
Per ottenere un risultato significativo è necessaria una quantità minima del campione (indicata<br />
per ogni singolo esame).<br />
I campioni devono venire inviati al laboratorio immediatamente dopo il prelievo in confezioni<br />
chiuse ermeticamente ed infrangibili, se possibile refrigerati.<br />
Se la spedizione di campioni subisce ritardi, il materiale di analizzare deve essere conservato in<br />
frigorifero. In questo modo non viene compromessa la vitalità delle larve e si impedisce l'ulteriore<br />
sviluppo di oocisti e uova.<br />
Inviare i parassiti, o le loro parti espulse insieme alle feci, in stato naturale (non fissati con<br />
formalina!) o in una piccola quantità di soluzione salina fisiologica in una provetta distinta dal<br />
campione di feci.<br />
Interpretazione dei referti parassitologici<br />
2 Istruzioni di carattere generale<br />
Ogni procedura presenta i suoi limiti di rilevazione. Solo un referto positivo (rilevazione diretta<br />
dell'agente patogeno) ha funzione di prova, un referto negativo non esclude però un'infezione<br />
parassitaria. Talvolta sono necessari esami seriali per la rilevazione dell'agente patogeno.<br />
L'espulsione dei vari stadi di sviluppo dei parassiti ha luogo in modo intermittente ed in alcuni<br />
casi anche in quantità modesta: per questo motivo si consiglia di analizzare un campione di<br />
feci collettivo di 3 giorni. Negli allevamenti (eccezioni: suini da ingrasso e volatili) si deve<br />
raccogliere a random un numero rappresentativo di campioni (non campioni collettivi di più<br />
animali!).<br />
La rilevazione degli stadi di sviluppo dei parassiti è possibile solo in caso di infestazioni palesi<br />
(le infestazioni nei primi e negli ultimi stadi non vengono rilevate!). Questo è molto importante<br />
per determinate infestazioni parassitarie, in cui i sintomi si verificano già nel periodo di<br />
prepatenza.<br />
23
2 Istruzioni di carattere generale 2 Istruzioni di carattere generale<br />
2.7 Gestione di qualità 2.8 Abbreviazioni/Legenda<br />
Gestione di qualità presso <strong>IDEXX</strong> Vet·Med·Lab<br />
A partire da giugno 2003 l'elevato standard diagnostico di <strong>IDEXX</strong> Vet·Med·Lab è stato confermato<br />
dall'accreditamento secondo le norme internazionali DIN EN ISO/IEC 17025. Il consiglio tedesco di<br />
accreditamento ("Deutsche Akkreditierungsrat") conferisce questo riconoscimento dopo aver<br />
sottoposto i candidati ad esame scrupoloso da parte di organismi esterni indipendenti. In questo<br />
catalogo le analisi accreditate sono contrassegnate da un "(1)" che segue l'indicazione del metodo di<br />
analisi. Le analisi non accreditate sono invece riconoscibili grazie alla dicitura "(2)".<br />
Tuttavia la gestione di qualità inizia ben prima che davanti all'analizzatore: le informazioni e la<br />
consulenza che offriamo ai nostri clienti in tutti i problemi preanalitici sono un presupposto<br />
fondamentale per ottenere in seguito referti corretti ed affidabili.<br />
Per poter gestire tutto il materiale che riceviamo, i metodi impiegati vengono adattati, ogni volta che<br />
sia necessario, alla specie animale in questione. Le procedure che utilizziamo vengono validate nel<br />
corso dell'intero svolgimento e la significatività dei loro risultati viene controllata regolarmente.<br />
Tramite la partecipazione a studi interlaboratorio nazionali ed internazionali rimettiamo sempre alla<br />
prova la qualità delle nostre prestazioni analitiche.<br />
Per poter coprire l'intera gamma delle richieste, alcune analisi vengono da noi inviate in subappalto<br />
a laboratori associati qualificati. I parametri interessati da questa misura vengono contrassegnati in<br />
questo catalogo dalla dicitura (3), situata subito dopo l'indicazione del metodo analitico. Su richiesta<br />
mettiamo ovviamente a Vostra disposizione i nominativi dei laboratori che operano in collaborazione<br />
con noi.<br />
Anche agendo con la più assoluta accuratezza, i risultati analitici sono per loro natura sottoposti ad<br />
un'incertezza di misurazione. Tramite controlli regolari perseguiamo l'obiettivo di ridurre questi scarti<br />
al minimo possibile. Su richiesta siamo pronti ad informarVi sulle incertezze di misurazione che è<br />
possibile si verifichino nei nostri risultati.<br />
È nostra intenzione presentare i referti in modo chiaro e strutturato. Per questo motivo a volte<br />
rinunciamo ad indicare dei dettagli, quali p.es. la precisa denominazione del procedimento analitico<br />
o la data dell'esame. Se necessario, potete comunque richiedere presso di noi queste informazioni.<br />
Un contributo importante per migliorare la qualità delle nostre prestazioni è rappresentato dalla<br />
scrupolosa considerazione con cui facciamo seguito alle lamentele dei nostri clienti. Per questo<br />
motivo Vi siamo sempre grati per qualunque Vostro suggerimento o critica.<br />
CP Plasma in sodio citrato<br />
CP cong. Plasma in sodio citrato congelato<br />
EB Sangue EDTA<br />
EP Plasma EDTA<br />
EP cong. Plasma EDTA congelato<br />
HB Sangue in eparina<br />
HP Plasma in eparina<br />
HP cong. Plasma in eparina congelato<br />
NaF Sangue in fluoruro di sodio<br />
P Plasma<br />
Pu Puntato<br />
S Siero<br />
S cong. Siero congelato<br />
U Urina<br />
Va Varie<br />
Ag Antigene<br />
Ac Anticorpo<br />
(1) L'analisi è accreditata<br />
(2) L'analisi non è accreditata<br />
(3) L'analisi viene eseguita in un<br />
laboratorio associato<br />
p.i. post-infezione<br />
p.inj. post-iniezione<br />
PO per os (per via orale)<br />
IM intramuscolo<br />
EV endovena<br />
p.c. Peso corporeo<br />
* con stabilizzatore<br />
24 25
2 Istruzioni di carattere generale 2 Istruzioni di carattere generale<br />
2.8 Abbreviazioni/Legenda 2.9 Tabella di conversione<br />
AAS Spettrofotometria di assorbimento<br />
atomico<br />
AES Spettrometria di emissione<br />
atomica<br />
cELISA ELISA competitivo<br />
CF Test di fissazione del complemento<br />
CLIA Chemioilluminescenza<br />
ECLIA Elettrochemioilluminescenza<br />
EIA Dosaggio immunoenzimatico<br />
ELISA Dosaggio di immunoassorbimento<br />
enzimatico<br />
GCMS Gascromatografia-spettrometria<br />
di massa<br />
HI Test di inibizione<br />
dell'agglutinazione ematica<br />
HPLC Cromatografia liquida ad alta<br />
risoluzione<br />
IA Immunodosaggio<br />
ICP Plasma ad accoppiamento induttivo<br />
IFT Test di immunofluorescenza<br />
MAT Reazione di microagglutinazione<br />
NT Test di neutralizzazione del virus<br />
PAS Acido periodico di Shiff<br />
PCR Reazione a catena della polimerasi<br />
RIA Dosaggio radioimmunologico<br />
Unità SI → unità convenzionali / unità convenzionali → Unità SI<br />
Parametri moltiplicare per ® Unità SI<br />
Unità convenz. ¬ dividere per<br />
Acido folico ng/ml 2,27 nmol/l<br />
Acido lattico mg/dl 0,11 mmol/l<br />
Acido urico mg/dl 59,485 µmol/l<br />
ACTH pg/ml 0,2202 pmol/l<br />
Albumina g/dl 10 g/l<br />
Aldosterone pg/ml 2,77 pmol/l<br />
Ammoniaca µg/dl 0,5872 µmol/l<br />
Bilirubina mg/dl 17,104 µmol/l<br />
Calcio mg/dl 0,2495 mmol/l<br />
Colesterolo mg/dl 0,02586 mmol/l<br />
Cortisolo µg/dl 27,6 nmol/l<br />
Creatinina mg/dl 88,4 µmol/l<br />
Digossina µg/l 1,28 nmol/l<br />
Emoglobina g/dl 0,621 mmol/l<br />
Estradiolo ng/l 3,671 pmol/l<br />
Fenobarbitale µg/ml 4,31 µmol/l<br />
Ferro µg/dl 0,1791 µmol/l<br />
Fibrinogeno mg/dl 0,01 g/l<br />
FT3 ng/l 1,54 pmol/l<br />
FT4 ng/dl 12,87 pmol/l<br />
Glucosio mg/dl 0,0555 mmol/l<br />
Insulina µU/ml 6 pmol/l<br />
Magnesio mg/dl 0,411 mmol/l<br />
Piombo µg/l 0,00483 µmol/l<br />
Primidone mg/l 4,58 µmol/l<br />
Progesterone ng/ml 3,18 nmol/l<br />
26 27
2 Istruzioni di carattere generale<br />
2.9 Tabella di conversione<br />
Unità SI → unità convenzionali / unità convenzionali → Unità SI<br />
Parametri moltiplicare per ® Unità SI<br />
Unità convenz. ¬ dividere per<br />
Proteine totali g/dl 10 g/l<br />
Rame µg/dl 0,157 µmol/l<br />
T3 µg/l 1,54 nmol/l<br />
T4 µg/dl 12,87 nmol/l<br />
Testosterone pg/ml 0,00347 nmol/l<br />
Trigliceridi mg/dl 0,0114 mmol/l<br />
Urea mg/dl 0,1665 mmol/l<br />
Urea-N (BUN) mg/dl 0,3561 mmol/l<br />
Vitamina A mg/l 3,49 µmol/l<br />
Vitamina B12 pg/ml 0,738 pmol/l<br />
Vitamina C mg/l 5,678 µmol/l<br />
Zinco µg/l 0,0153 µmol/l<br />
28
3.1 Profili di ricerche generiche<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Check-up completo 1 ml S + 1 ml EB + striscio ematico (+ NaF)<br />
Reni<br />
Urea-N (BUN), Creatinina, Sodio, Potassio, Fosfati<br />
Fegato<br />
Bilirubina (totale), ALT (GPT), ALP (fosfatasi alcalina), γ-GT, AST (GOT), GLDH,<br />
Proteine totali, Albumina, Globuline (cane, gatto),Rapporto albumina/globuline (solo gatto)<br />
Pancreas<br />
Glucosio, α-amilasi (no gatto), Lipasi (solo cane), Colesterolo, Fruttosamine (solo cane e gatto)<br />
Muscoli<br />
CK (creatininchinasi), LDH, Calcio, Magnesio<br />
Metabolismo<br />
Trigliceridi<br />
Ematologia<br />
Quadro ematico completo (emocromo + conta leucocitaria differenziale)<br />
Check-up 1 ml S (+ NaF)<br />
come per "Check-up completo", ma senza Quadro ematico completo<br />
Check-up di base 1 ml S + 0,5 ml EB (+ NaF)<br />
come per "Check-up completo", ma con Quadro ematico parziale<br />
(senza conta leucocitaria differenziale)<br />
Profilo generale<br />
(cane, gatto)<br />
come per "Check-up completo" + Elettroforesi sierica<br />
Profilo geriatrico<br />
(cane, gatto)<br />
come per "Check-up completo" + T4<br />
Profilo geriatrico senza<br />
quadro ematico<br />
1,5 ml S + 0,5 ml EB + striscio ematico (+ NaF)<br />
1 ml S + 0,5 ml EB + striscio ematico (+ NaF)<br />
1 ml S (+ NaF)<br />
come per "Profilo geriatrico", ma senza Quadro ematico completo<br />
3 Profili ematobiochimici<br />
29
3 Profili ematobiochimici<br />
3.2 Programmi di ricerca speciali/ Profili d'organo (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Profilo cutaneo 1 Tessuto in formalina + tampone<br />
Esame istologico + Esame batteriologico (coltura aerobica)<br />
Profilo cutaneo 2 Tessuto in formalina + raschiato cutaneo<br />
Esame istologico + Esame micologico<br />
Profilo cutaneo 3 Tessuto in formalina + tampone + raschiato cutaneo<br />
Esame istologico + Esame batteriologico (coltura aerobica) + Esame micologico<br />
Profilo cutaneo 4<br />
(solo cane)<br />
Esame istologico + Anticorpi anti-Sarcoptes<br />
Profilo cutaneo 5<br />
(solo cavallo)<br />
Esame istologico + Autovaccino Sarcoide equino (in caso di diagnosi di sarcoide equino /<br />
eseguibile anche con referto diagnostico di papilloma equino)<br />
Attenzione Per la produzione del vaccino sono necessari circa 3 - 5 g<br />
di tessuto<br />
Profilo cutaneo 6<br />
(cane, bovino)<br />
Esame istologico + Autovaccino per Papilloma (in caso di diagnosi di papilloma)<br />
Attenzione Per la produzione del vaccino sono necessari circa 3 - 5 g di<br />
tessuto. Per l'ordinazione di vaccini per altre specie animali<br />
prendere accordi con il laboratorio.<br />
Profilo cutaneo 7<br />
(cane)<br />
Esame istologico + Test allergologico(Test di screening Allercept ®)<br />
30<br />
Tessuto in formalina + 1 ml S<br />
Tessuto in soluzione fisiologica (NaCl) + tessuto in formalina<br />
Tessuto in soluzione fisiologica (NaCl) + tessuto in<br />
formalina<br />
Tessuto in formalina + 0,5 ml S, HP, EP<br />
3.2 Programmi di ricerca speciali/ Profili d'organo (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Profilo diarrea B<br />
(cane, gatto)<br />
TLI, Folati, Vitamina B12<br />
Attenzione Effettuare la determinazione a digiuno (da almeno 6 ore)<br />
Profilo diarrea C<br />
(cane, gatto)<br />
Profilo diarrea E<br />
(cane, gatto)<br />
Profilo elettrolitico 1 ml S<br />
cfr. → capitolo 16, Microbiologia<br />
cfr. → capitolo 16, Microbiologia<br />
Calcio, Magnesio, Fosfati, Sodio, Potassio, Cloro<br />
Attenzione Non inviare assolutamente siero emolitico; non inviare sangue/<br />
plasma in EDTA/eparina!<br />
Profilo emoparassitario I<br />
(solo cane)<br />
Ehrlichia canis (Ac), Leishmania (Ac),<br />
Babesia canis (Ac),<br />
Emoparrassiti e batteri emotropi - microscopia<br />
Profilo emoparassitario II<br />
(solo cane)<br />
3 ml S<br />
Ehrlichia canis (Ac),<br />
Leishmania (Ac),<br />
Babesia canis (Ac),<br />
Dirofilaria immitis (Macrofilaria) (Ag),<br />
Microfilaria (Test di Knott)<br />
Borrelia-Screening (Ac, C6 qualitativo)<br />
Feci (almeno una provetta piena)<br />
Feci (almeno una provetta piena)<br />
2 ml S + 1 ml EB + striscio ematico<br />
3 ml S + 1 ml EB<br />
3 Profili ematobiochimici<br />
31
3 Profili ematobiochimici<br />
3.2 Programmi di ricerca speciali/ Profili d'organo (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Profilo emoparassitario III<br />
(solo cane)<br />
Anaplasma/Ehrlichia spp. - DNA (PCR),<br />
Babesia spp. - DNA (PCR),<br />
Emoparassiti batteri emotropi - microscopia,<br />
Quadro ematico parziale (senza conta leucocitaria differenziale)<br />
Profilo epatico 1 1 ml S<br />
Urea-N (BUN), ALT (GPT), ALP (fosfatasi alcalina),<br />
AST (GOT), γ-GT, GLDH, Acidi biliari, Bilirubina (totale), Albumina<br />
Profilo epatico 2<br />
(solo cane)<br />
come per il "Profilo epatico I" + Quadro ematico parziale<br />
(senza conta leucocitaria differenziale), PT (Test di Quick), aPTT, Elettroforesi sieroproteica<br />
n Liquor<br />
Indicazioni per il prelievo:<br />
- rilevazione/esclusione di infiammazioni del sistema nervoso centrale<br />
- conferma della diagnosi di "Epilessia idiopatica"<br />
- prima dell'esecuzione di una mielografia<br />
Controindicazioni per il prelievo:<br />
- aumento della pressione intracranica, p.es. in caso di edema cerebrale, idrocefalo,<br />
emorragia cerebrale.<br />
Fisiologicamente il liquor è cristallino; l'intorbidimento è indice di una pleocitosi (soprattutto in<br />
presenza di infiammazione, ma anche di neoplasie, traumi, danni vascolari o necrosi). Anche in<br />
caso di aumento del tenore proteico si devono prendere in considerazione in sede di diagnosi<br />
differenziale: infiammazioni, neoplasie, malattie degenerative e vascolari.<br />
32<br />
3 ml EB + striscio ematico<br />
1 ml S + 1 ml EB + 1 ml CP congelato<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
capitolo 13, Malattie infettive<br />
3.2 Programmi di ricerca speciali/ Profili d'organo (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Profilo LCR 1 ca. 1 ml liquor<br />
Conta cellulare (leucociti, eritrociti), Proteine totali<br />
Attenzione La conta cellulare deve avvenire il più presto possibile (fino ad un max.<br />
di 4 ore dopo il prelievo), in quanto in un ambiente povero di proteine<br />
come il liquor si sviluppa rapidamente un processo di lisi cellulare. Non<br />
si può quindi escludere che il trasporto non influenzi i risultati analitici.<br />
Profilo LCR 2 ca. 3 ml liquor<br />
Profilo LCR 1 + Esame citologico<br />
Attenzione La conta cellulare deve avvenire il più presto possibile (fino ad un max.<br />
di 4 ore dopo il prelievo), in quanto in un ambiente povero di proteine<br />
come il liquor si sviluppa rapidamente un processo di lisi cellulare. Non<br />
si può quindi escludere che il trasporto non influenzi i risultati analitici.<br />
Profilo LCR 3 ca. 3 ml liquor<br />
Profilo LCR 2 + Esame batteriologico (coltura aerobica + anaerobica)<br />
Attenzione La conta cellulare deve avvenire il più presto possibile (fino ad un<br />
max. di 4 ore dopo il prelievo), in quanto in un ambiente povero di<br />
proteine come il liquor si sviluppa rapidamente un processo di lisi<br />
cellulare. Non si può quindi escludere che il trasporto non influenzi<br />
i risultati analitici.<br />
Profilo Leishmania<br />
sierologia<br />
In caso di presenza di germi patogeni verranno eseguiti<br />
automaticamente differenziazione ed antibiogramma; questi<br />
sono compresi nel prezzo.<br />
Leishmania (Ac)- IFT, Elettroforesi sierica (comprese proteine totali)<br />
Profilo Leishmania PCR<br />
(solo cane)<br />
1,5 ml S<br />
0,2 ml S + puntato/ biopsia in fisiologica<br />
3 Profili ematobiochimici<br />
Leishmania spp. (DNA)- PCR, Elettroforesi sierica (comprese proteine totali)<br />
33
3 Profili ematobiochimici<br />
3.2 Programmi di ricerca speciali/ Profili d'organo (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Profilo malattie trasmesse<br />
da artropodi 1<br />
(solo cane)<br />
Babesia spp. (DNA) - PCR<br />
Ehrlichia/Anaplasma spp. (DNA) - PCR<br />
Profilo malattie trasmesse<br />
da artropodi 2<br />
(su zecca)<br />
Babesia spp. (DNA) - PCR<br />
Ehrlichia/Anaplasma spp. (DNA) - PCR<br />
Borrelia burgdorferi sensu lato (DNA) - PCR<br />
Encefalite da puntura di zecca (RNA) - PCR<br />
Profilo Monitoraggio<br />
Cushing<br />
(solo cane)<br />
Urea-N (BUN), Creatinina, Potassio, Glucosio, ALT (GPT), ALP (fosfatasi alcalina)<br />
Test di stimolazione dell'ACTH: 2 determinazioni del cortisolo<br />
Profilo muscolare 1 ml S<br />
CK (creatininchinasi), LDH, AST (GOT), Calcio<br />
cfr. → capitolo 12.1, Endocrinologia<br />
Attenzione Non inviare assolutamente siero emolitico!<br />
34<br />
2 ml EB<br />
Zecca<br />
2 x 0,5 ml S e 1 ml S (+ NaF)<br />
3.2 Programmi di ricerca speciali/ Profili d'organo (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Profilo per versamenti<br />
cavitari 1<br />
Esame citologico, Proteine totali, Peso specifico<br />
Attenzione Già poche ore dopo il prelievo i risultati analitici possono venire<br />
sensibilmente influenzati (p.es. tramite lisi cellulare); se necessario,<br />
inviare il materiale refrigerato. Per l'esame citologico preparare<br />
eventualmente anche uno striscio cellulare del sedimento (centrifugare<br />
a 1500/giri min. per 3 - 5 minuti).<br />
Profilo per versamenti<br />
cavitari 2<br />
ca. 3 ml versamento<br />
ca. 3 ml puntato + eventuale tampone<br />
3 Profili ematobiochimici<br />
Esame citologico, Proteine totali, Peso specifico, Esame batteriologico (coltura aerobica +<br />
anaerobica)<br />
Attenzione Già poche ore dopo il prelievo i risultati analitici possono venire<br />
sensibilmente influenzati (p.es. tramite lisi cellulare); se necessario,<br />
inviare il materiale refrigerato. Per l'esame citologico preparare<br />
eventualmente anche uno striscio cellulare del sedimento (centrifugare<br />
a 1500/giri min. per 3 - 5 minuti).<br />
In caso di presenza di germi patogeni verranno eseguiti automaticamente<br />
differenziazione ed antibiogramma; questi sono compresi nel prezzo.<br />
35
3 Profili ematobiochimici<br />
3.2 Programmi di ricerca speciali/ Profili d'organo (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Profilo PU/PD<br />
(poliuria, polidipsia)<br />
(cane, gatto)<br />
Quadro ematico completo, Creatinina, Calcio, Sodio,<br />
Potassio, Glucosio, Fruttosamine, ALT (GPT), ALP (fosfatasi alcalina),<br />
Acidi biliari, Proteine totali, Albumina,<br />
Esame chimico fisico urine, Sedimento urinario,<br />
Rapporto proteine/creatinina,<br />
Rapporto cortisolo/creatinina (solo cane),<br />
T 4 (solo gatto)<br />
Profilo renale 1 ml S<br />
Urea-N (BUN), Creatinina, Proteine totali, Sodio, Potassio, Calcio, Fosfati<br />
Profilo rendimento<br />
cavalli<br />
Urea-N (BUN), Na, K, fosfati, bilirubina, γ-GT,<br />
AST (GOT), glucosio, CK, LDH, acido lattico<br />
36<br />
1 ml S + 1 ml EB + striscio ematico + 10 ml U<br />
2 ml S + 0,5 ml EB + NaF<br />
3.2 Programmi di ricerca speciali/ Profili d'organo (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
n Liquido sinoviale<br />
Il liquido articolare di solito si presenta chiaro e povero di materiale cellulare. In caso di<br />
malattie articolari la determinazione del tipo cellulare e del tenore proteico può aiutare a<br />
chiarire la natura e l'origine della patologia. Si può differenziare tra malattie con cause<br />
traumatiche, processi infiammatori acuti o infettivi e malattie articolari degenerative .<br />
Profilo sinoviale 1 1 ml liquido sinoviale<br />
Conta cellulare, Proteine totali,<br />
Colore, Viscosità, Torbidità<br />
Profilo sinoviale 2 2 ml liquido sinoviale<br />
Profilo sinoviale 1 + Esame citologico<br />
Attenzione Già poche ore dopo il prelievo i risultati analitici possono<br />
venire sensibilmente influenzati (p.es. tramite lisi cellulare);<br />
se necessario, inviare il materiale refrigerato. Per l'esame<br />
citologico preparare eventualmente anche uno striscio<br />
cellulare del sedimento (centrifugare a 1500/giri min. per<br />
3 - 5 minuti).<br />
Profilo sinoviale 3 2 ml liquido sinoviale + eventuale tampone<br />
Conta cellulare, Proteine totali,<br />
Colore, Viscosità, Torbidità<br />
3 Profili ematobiochimici<br />
Attenzione Già poche ore dopo il prelievo i risultati analitici possono<br />
venire sensibilmente influenzati (p.es. tramite lisi cellulare); se<br />
necessario, inviare il materiale refrigerato. Per l'esame citologico<br />
preparare eventualmente anche uno striscio cellulare del sedimento<br />
(centrifugare a 1500/giri min. per 3 - 5 minuti).<br />
In caso di presenza di germi patogeni verranno eseguiti<br />
automaticamente differenziazione ed antibiogramma; questi<br />
sono compresi nel prezzo.<br />
37
3 Profili ematobiochimici<br />
3.2 Programmi di ricerca speciali/ Profili d'organo (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Profilo tiroideo 1 2 ml S<br />
Per la diagnosi di ipo- ipertiroidismo e per la valutazione<br />
Cane del beneficio terapeutico di una terapia tiroidea<br />
Tiroxina (T 4), (cfr. → capitolo 12, Endocrinologia).<br />
T 4 libero (fT 4), TSH<br />
Gatto<br />
Tiroxina (T 4), T 4 libero (fT 4)<br />
Cavallo<br />
Tiroxina (T 4), T 4 libero (fT 4), T 3<br />
Profilo tiroideo 2<br />
(solo cane)<br />
Per la diagnosi di ipotiroidismo autoimmune e come screening<br />
in caso di razze predisposte.<br />
TSH, T 4 libero (fT 4), (cfr. → capitolo 12, Endocrinologia).<br />
Tireoglobulina (Ac)<br />
Profilo tiroideo 3<br />
(solo cane)<br />
Per la valutazione del beneficio terapeutico di una terapia<br />
tiroidea.<br />
TSH, T 4 libero (fT 4) (cfr. → capitolo 12, Endocrinologia).<br />
38<br />
2 ml S<br />
1 ml S<br />
3.2 Programmi di ricerca speciali/ Profili d'organo (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Profilo trasfusione<br />
emergenza<br />
(cane)<br />
Quadro ematico completo,<br />
Proteine totali,<br />
Leishmania (Ac) - IFT,<br />
Ehrlichia canis (Ac) - IFT,<br />
Babesia canis (Ag) - microscopia<br />
Profilo trasfusione<br />
emergenza<br />
(gatto)<br />
Quadro ematico completo,<br />
Proteine totali,<br />
FIV (Ac) - ELISA,<br />
FeLV (Ag) - ELISA,<br />
Mycoplasma haemofelis - microscopia<br />
Profilo trasfusione<br />
stoccaggio<br />
(cane)<br />
Quadro ematico completo,<br />
Proteine totali, Albumina, Urea-N (BUN),<br />
ALP, ALT (GPT), aPTT, PT, Fibrinogeno,<br />
Leishmania (Ac) - IFT,<br />
Ehrlichia canis (Ac) - IFT,<br />
Babesia canis (Ac) - IFT,<br />
Rickettsia rickettsii (Ac) - IFT,<br />
Urine chimico-fisico,<br />
Sedimento urinario,<br />
Endoparassiti<br />
1 ml EB + 2 ml S + striscio ematico<br />
1,5 ml EB + 1 ml S + striscio ematico<br />
3 Profili ematobiochimici<br />
0,5 ml EB + 4 ml S + 1,5 ml CP congelato +<br />
10 ml U + 10 g feci<br />
39
3 Profili ematobiochimici<br />
3.2 Programmi di ricerca speciali/ Profili d'organo (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Profilo trasfusione<br />
stoccaggio<br />
(gatto)<br />
Quadro ematico completo,<br />
Proteine totali, Albumina, Urea-N (BUN),<br />
ALP, ALT (GPT), aPTT, PT, Fibrinogeno,<br />
FIV (Ac) - ELISA,<br />
FeLV (Ag) - ELISA,<br />
FIP/Coronavirus (Ac) - IFT,<br />
Mycoplasma haemofelis-microscopia,<br />
Urine chimico-fisico,<br />
Sedimento urinario,<br />
Endoparassiti<br />
Profilo zecche 1 -<br />
sierologia<br />
(solo cane)<br />
Borrelia-Screening (Ac, C 6 qualitativo),<br />
Anaplasma (Ehrlichia) phagocytophilum (Ac)<br />
Profilo zecche 2 -<br />
sierologia<br />
(solo cane)<br />
Come "Profilo zecche 1" + Ehrlichia canis (Ac), Babesia canis (Ac)<br />
Programma di ricerca<br />
per le anemie<br />
(cane, gatto)<br />
Quadro ematico completo (emocromo + conta leucocitaria differenziale), Reticolociti,<br />
Bilirubina totale, LDH, Proteine totali<br />
40<br />
1,5 ml EB + 3 ml S + 1,5 ml CP congelato +<br />
10 ml U + 10 g feci<br />
1 ml S<br />
2 ml S<br />
1 ml S + 1 ml EB + striscio ematico<br />
3.3 Profili specie-specifici/ Gatto<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Profilo completo<br />
per gatto<br />
Reni<br />
Urea-N (BUN), Creatinina,<br />
Sodio, Potassio, Fosfati<br />
Fegato<br />
Proteine totali, Bilirubina (totale),<br />
ALT (GPT), ALP (fosfatasi alcalina),<br />
AST (GOT), GLDH, γ-GT<br />
Pancreas<br />
Glucosio, Fruttosamine, Colesterolo<br />
Muscoli<br />
CK, LDH, Calcio, Magnesio<br />
Metabolismo<br />
Trigliceridi<br />
Ematologia<br />
Quadro ematico completo (emocromo + conta leucocitaria differenziale)<br />
Sierologia<br />
FeLV (Ag), FIV (Ac),<br />
FIP/Coronavirus (Ac)<br />
Elettroforesi sieroproteica<br />
FIP-Screening 1 ml S + 1 ml EB + striscio ematico<br />
FIP/Coronavirus (Ac),<br />
ALT (GPT), Bilirubina (totale),<br />
Elettroforesi sieroproteica,<br />
Quadro ematico completo (emocromo + conta leucocitaria differenziale)<br />
FIP-Screening aggiuntivo 1 ml S + 1 ml EB + striscio ematico<br />
Come "FIP-Screening", senza FIP/Coronavirus (Ac)<br />
FeLV/FIV +<br />
FIP-Screening<br />
come per Screening FIP + FeLV (Ag) + FIV (Ac)<br />
2 ml S + 1 ml EB + striscio ematico (+ NaF)<br />
2 ml S + 1 ml EB + striscio ematico<br />
3 Profili ematobiochimici<br />
41
3 Profili ematobiochimici<br />
3.2 Programmi di ricerca speciali / Profili d'organo (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Profilo P P<br />
(app. g.enterico e<br />
pancreas)<br />
Folati, Vitamina B 12 , Spec.fPL TM<br />
Profilo occhi gatto 1 -<br />
PCR<br />
Chlamydophila felis,<br />
Mycoplasma felis,<br />
Herpesvirus felino (FHV 1)<br />
Profilo occhi gatto 2 -<br />
PCR<br />
Chlamydophila felis,<br />
Herpesvirus felino (FHV 1)<br />
Profilo vie respiratorie<br />
superiori gatto 1 - PCR<br />
Chlamydophile felis,<br />
Calicivirus felino (FCV),<br />
Herpesvirus felino (FHV 1),<br />
Mycoplasma felis<br />
Profilo vie respiratorie<br />
superiori gatto 2 - PCR<br />
Chlamydophile felis,<br />
Calicivirus felino (FCV),<br />
Herpesvirus felino (FHV 1)<br />
Profilo micoplasmi<br />
emotropi gatto - PCR<br />
Mycoplasma haemofelis,<br />
Cand. Mycoplasma haemominutum,<br />
Cand. Mycoplasma turicensis<br />
42<br />
2 ml S<br />
Tampone (congiuntivale, corneale)<br />
Tampone (congiuntivale, corneale)<br />
Tampone faringeo + tampone oculare<br />
Tampone faringeo + tampone oculare<br />
0,5 ml EB<br />
3.3 Profili specie-specifici / Cavallo<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Profilo completo per<br />
cavalli<br />
Reni<br />
Urea-N (BUN), Creatinina,<br />
Sodio, Potassio, Fosfati<br />
Fegato<br />
Bilirubina (totale), Proteine totali<br />
ALP (fosfatasi alcalina), γ-GT,<br />
AST (GOT), GLDH, Albumina<br />
Metabolismo<br />
Glucosio, Colesterolo, Trigliceridi<br />
Muscoli<br />
CK, LDH, Calcio, Magnesio<br />
Elementi in tracce<br />
Zinco, Rame, Selenio<br />
Ematologia<br />
Quadro ematico completo (emocromo + conta leucocitaria differenziale)<br />
Profilo per cavalli 3 ml S + 1 ml EB<br />
Come "Profilo completo per cavalli" senza Quadro ematico completo<br />
Profilo geriatrico per<br />
cavalli<br />
Reni<br />
Fosfati, Urea-N (BUN), Creatinina,<br />
Fegato<br />
AST (GOT), GLDH, Bilirubina (totale), γ-GT<br />
Muscoli<br />
Calcio<br />
Metabolismo<br />
Glucosio, Trigliceridi<br />
Elementi in tracce<br />
Zinco, Selenio<br />
Elettroforesi sieroproteica<br />
3 Profili ematobiochimici<br />
3 ml S + 1 ml EB + striscio ematico (+ NaF)<br />
3 ml S + 1 ml EB + striscio ematico (+ NaF)<br />
Ematologia<br />
Quadro ematico completo (emocromo + conta leucocitaria differenziale)<br />
43
3 Profili ematobiochimici<br />
3.3 Profili specie-specifici / Cavallo<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Profilo per puledri 3 ml S + 1 ml EB + striscio ematico (+ NaF)<br />
Reni<br />
Urea-N (BUN), Creatinina, Sodio, Potassio<br />
Fegato<br />
Bilirubina (totale), Proteine totali, ALP (fosfatasi alacalina), γ-GT, AST (GOT)<br />
Muscoli<br />
Calcio, Magnesio, CK<br />
Metabolismo<br />
Glucosio, Trigliceridi<br />
Elementi in tracce<br />
Ferro<br />
Ematologia<br />
Quadro ematico completo (emocromo + conta leucocitaria differenziale)<br />
Altro<br />
IgG sieriche<br />
Profilo S (microelementi<br />
ed elettroliti)<br />
Microelementi<br />
Zinco, Rame, Selenio<br />
Elettroliti<br />
Sodio, Potassio, Calcio, Magnesio, Fosfati, Cloro<br />
Profilo malattie<br />
respiratorie cavalli-PCR<br />
EHV-1, EHV-4,<br />
Arterite virale equina, Influenza virale equina<br />
Profilo malattie<br />
respiratorie puledri -<br />
PCR<br />
EHV-1, EHV-4,<br />
Arterite virale equina<br />
Influenza virale equina,<br />
Rhodococcus equi<br />
44<br />
3 ml S<br />
Tampone nasale<br />
Tampone nasale, tracheale<br />
3.3 Profili specie-specifici /Altri animali d'affezione / Rettili<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Profilo conigli/ cavie 1 ml S + 0,5 ml EB + striscio ematico<br />
Reni<br />
Urea-N (BUN), Creatinina, Fosfati<br />
Fegato<br />
Proteine totali, GLDH<br />
γ-GT, AST (GOT)<br />
Muscoli<br />
CK, LDH, Calcio<br />
Metabolismo<br />
Glucosio, Trigliceridi<br />
Ematologia<br />
Emogramma completo (emocromo + conta leucocitaria differenziale)<br />
Profilo completo per rettili 0,5 ml S + 0,5 ml HB + striscio ematico<br />
Reni<br />
Acido urico, Urea-N (BUN), Fosfati<br />
Fegato<br />
ALT (GPT), AST (GOT)<br />
Proteine totali,<br />
Albumina, Glucosio<br />
Muscoli<br />
LDH, Calcio, CK<br />
Ematologia<br />
Quadro ematico completo<br />
(Leucociti, Eritrociti, Emoglobina,<br />
Ematocrito, Conta leucocitaria differenziale)<br />
Profilo completo per rettili 0,5 ml S<br />
come per il "Profilo completo per rettili", ma senza Quadro ematico completo<br />
Profilo per furetti 1 ml S + 0,5 ml EB + striscio ematico<br />
Quadro ematico completo,<br />
Urea-n (BUN), Creatinina, Proteine totali,<br />
Albumina, Globuline, γ-GT, AST (GOT),<br />
Glucosio, CK, LDH, Trigliceridi, Calcio<br />
3 Profili ematobiochimici<br />
45
3 Profili ematobiochimici<br />
3.3. Profili specie-specifici/ Bovino<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Profilo completo per<br />
bovini<br />
Reni/ Metabolismo proteico<br />
Urea-N (BUN), Creatinina,<br />
Proteine totali, Sodio,<br />
Cloro, Potassio, Fosfati<br />
Fegato<br />
Bilirubina totale, ALP (fosfatasi alcalina),<br />
AST (GOT), Colinesterasi,<br />
γ-GT, GLDH, Acidi biliari,<br />
Metabolismo<br />
Glucosio, Fruttosamine,<br />
Colesterolo, Trigliceridi,<br />
Acido ß-idrossibutirrico<br />
Muscoli<br />
CK, Calcio, Magnesio<br />
Tiroide<br />
T 4<br />
Microelementi<br />
Zinco (S + Peli),<br />
Rame, Selenio,<br />
Manganese (EP + Peli),<br />
Sodio (U)<br />
Vitamine<br />
Biotina, Folati, Vitamina A,<br />
ß-carotene, Vitamina B1,<br />
Vitamina B 12, Vitamina E<br />
46<br />
3 ml S + 2 ml EB + 10 ml U + Peli (+ NaF)<br />
3.3. Profili specie-specifici/ Bovino<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Profilo per bovini 3 ml S, 2 ml EB (+ NaF)<br />
Reni/ Metabolismo proteico<br />
Urea-N (BUN), Creatinina, Proteine totali,<br />
Sodio, Cloro, Potassio, Fosfati<br />
Fegato<br />
Bilirubina totale, ALP (fosfatasi alcalina), AST (GOT),<br />
Colinesterasi, γ-GT, GLDH, Acidi biliari<br />
Metabolismo<br />
Glucosio, Fruttosamine,<br />
Colesterolo, Acido ß-idrossibutirrico<br />
Muscoli<br />
CK, Calcio, Magnesio<br />
Microelementi<br />
Zinco, Rame, Selenio,<br />
Vitamine<br />
ß-carotene<br />
Profilo ridotto per bovini 1 ml S (+ NaF)<br />
Reni/ Metabolismo proteico<br />
Urea-N (BUN), Proteine totali, Fosfati<br />
Fegato<br />
AST (GOT), γ-GT<br />
Metabolismo<br />
Glucosio, Colesterolo<br />
Muscoli<br />
CK, Calcio, Magnesio<br />
Attenzione Non inviare assolutamente siero con emolisi; non inviare<br />
sangue con EDTA /eparina!<br />
Profilo S (microelementi<br />
ed elettroliti)<br />
Microelementi<br />
Zinco, Rame, Selenio<br />
3 ml S + 1 ml EB<br />
Elettroliti<br />
Sodio, Potassio, Calcio, Magnesio, Fosfati, Cloro<br />
3 Profili ematobiochimici<br />
47
3 Profili ematobiochimici<br />
3.3. Profili specie-specifici/ Bovino<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Programma di ricerca<br />
per disturbi della<br />
fertilità 1<br />
Reni/Metabolismo delle proteine<br />
Urea-N (BUN), Proteine totali,<br />
Sodio, Potassio, Fosfati<br />
Fegato<br />
AST (GOT)<br />
Muscoli<br />
Calcio, Magnesio<br />
Programma di ricerca<br />
per disturbi della<br />
fertilità 2<br />
come per il "Programma di ricerca per disturbi della fertilità 1" + ß-carotene<br />
Programma di ricerca<br />
per disturbi della<br />
fertilità 3<br />
come per il "Programma di ricerca per disturbi della fertilità 2" + Vitamina E, Selenio<br />
Profilo completo di<br />
ricerca di rame<br />
Rame, Zinco, Selenio, Molibdeno<br />
Profilo parziale di<br />
ricerca di rame<br />
Rame, Molibdeno<br />
48<br />
1 ml S<br />
3 ml S<br />
3 ml S<br />
3 ml EB<br />
3 ml EB<br />
3.3 Profili specie-specifici / Suino<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Profilo completo<br />
per suini<br />
Reni<br />
Urea-N (BUN), Creatinina,<br />
Sodio, Cloro, Potassio, Fosfati<br />
Fegato<br />
Bilirubina totale, Bilirubina diretta,<br />
Proteine totali, ALP (fosfatasi alcalina),<br />
γ-GT, AST (GOT), GLDH<br />
Pancreas<br />
α-amilasi, Lipasi, Colesterolo<br />
Muscoli<br />
CK, LDH, Calcio<br />
Metabolismo<br />
Trigliceridi<br />
Elementi traccia<br />
Zinco, Rame, Selenio<br />
3 ml S + 1 ml EB + striscio ematico<br />
3 Profili ematobiochimici<br />
Ematologia<br />
Quadro ematico completo (emocromo + conta leucocitaria differenziale)<br />
49
3 Profili ematobiochimici<br />
3.3 Profili specie-specifici / Volatili<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Profilo volatili 1 (PCR) 0,5 ml EB, Penne<br />
PBFD, Polyomavirus<br />
Profilo volatili 2 (PCR) 0,5 ml EB, Penne + Tampone, Feci<br />
Come per "Profilo volatili 1" + Chlamydophila psittaci<br />
Profilo volatili 3 (PCR) 1 ml EB, Penne<br />
Come per "Profilo volatili 1" + Determinazione del sesso<br />
Profilo volatili 4 (PCR) 1 ml EB, Penne + Tampone, Feci<br />
Come per "Profilo volatili 1" + Chlamydophila psittaci + Determinazione del sesso<br />
Screening per uccelli 0,5 ml S<br />
AST (GOT), Acidi biliari,<br />
Proteine totali, Albumina,<br />
Acido urico, CK, LDH,<br />
Fosfati, Calcio, Potassio<br />
50
4.1 Ematologia<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Leucociti, Eritrociti, Emoglobina, Ematocrito,<br />
MCV, MCH, MCHC, Piastrine<br />
Conta leucocitaria<br />
differenziale<br />
Granulociti basofili,<br />
Granulociti eosinofili,<br />
Granulociti neutrofili banda,<br />
Granulociti neutrofili segmentati,<br />
Linfociti, Monociti,<br />
Anisocitosi,<br />
Policromasia<br />
Quadro ematico completo 1 ml EB + striscio ematico (1)<br />
Quadro ematico parziale + Conta leucocitaria differenziale<br />
Reticolociti 0,5 ml EB Citometria a flusso,<br />
microscopia (1)<br />
Il numero di reticolociti nel cane e nel gatto è un indice della capacità rigenerativa del midollo<br />
osseo in presenza di anemia.<br />
Nel caso del gatto con numero di reticolociti elevato, si indica il numero di reticolociti aggregati.<br />
Nel gatto soltanto i reticolociti aggregati sono indice di una rigenerazione attiva a differenza<br />
dei reticolociti puntati.<br />
Programma di ricerca<br />
per le anemie<br />
Quadro ematico parziale<br />
(uccelli)<br />
Leucociti, Eritrociti, Ematocrito, Emoglobina<br />
1 ml S + 1 ml EB + striscio ematico<br />
cfr. → capitolo 3.2, Programmi di ricerca speciali<br />
4 Ematologia<br />
Quadro ematico parziale 1 ml EB Citometria a flusso (1)<br />
0,5 ml EB + striscio ematico Citometria a flusso,<br />
microscopia (1)<br />
0,5 ml EB/ HB + striscio ematico Conta in camera, Fotometria,<br />
Centrifugazione (1)<br />
51
4 Ematologia 4 Ematologia<br />
4.1 Ematologia 4.2 Parametri della coagulazione<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Conta leucocitaria<br />
differenziale (uccelli)<br />
Granulociti basofili, Granulociti eosinofili,<br />
Eterofili, Linfociti, Monociti, Anisocitosi, Policromasia<br />
Quadro ematico completo<br />
(uccelli)<br />
Quadro ematico parziale + Conta leucocitaria differenziale<br />
Quadro ematico parziale<br />
(rettili)<br />
Leucociti, Eritrociti, Ematocrito, Emoglobina<br />
Conta leucocitaria<br />
differenziale (rettili)<br />
Granulociti basofili, Granulociti eosinofili, Eterofili, Linfociti,<br />
Monociti, Azurrofili, Anisocitosi, Policromasia<br />
Quadro ematico completo<br />
(rettili)<br />
Quadro ematico parziale + Conta leucocitaria differenziale<br />
0,5 ml EB/ HB + striscio ematico Microscopia (1)<br />
0,5 ml EB/ HB + striscio ematico (1)<br />
0,5 ml HB + striscio ematico<br />
0,5 ml HB + striscio ematico Microscopia (1)<br />
0,5 ml HB + striscio ematico<br />
Attenzione Gli eritrociti e le piastrine di uccelli e rettili sono nucleati. Per<br />
questo motivo non è possibile eseguire un conteggio cellulare<br />
strumentale automatico.<br />
Se nel sangue di rettili viene utilizzato EDTA come anticoagulante,<br />
è possibile che si verifichi una lisi degli eritrociti. Pertanto l'eparina<br />
è l'anticoagulante di scelta!<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
cascata della coagulazione<br />
PT<br />
(Test di Quick, tempo<br />
di tromboplastina,tempo<br />
di protrombina)<br />
Indicazione Test di screening se si sospetta un disturbo del sistema<br />
estrinseco e del tratto finale comune, p.es. in caso di carenza<br />
del fattore VII, avvelenamento da cumarinici, epatopatie e DIC.<br />
aPTT<br />
(tempo di tromboplastina-parzialeattivato)<br />
Superficie esterna<br />
Sistema<br />
intrinseco<br />
aPTT<br />
F Xll<br />
F Xl<br />
F lX<br />
F Vlll<br />
Tratto finale comune<br />
0,5 ml CP cong. Coagulometria (1)<br />
0,5 ml CP cong. Coagulometria (1)<br />
Indicazione Test di screening se si sospetta un disturbo del sistema<br />
intrinseco e del tratto finale comune, p.es. in caso di emofilia<br />
(carenza del fattore VIII o IX), avvelenamento da cumarinici,<br />
epatopatie, DIC o somministrazione di eparina.<br />
Tempo di trombina 0,5 ml CP cong. Coagulometria (1)<br />
Indicazione In caso di sospetto di carenza di fibrinogeno o di disturbi della<br />
formazione di fibrina, come per il monitoraggio di una terapia<br />
fibrinolitica o di una terapia eparinica<br />
FX<br />
Tromboplastina tissutale<br />
F Vll<br />
Protrombina Trombina<br />
Fibrinogeno Fibrina<br />
Tempo di trombina<br />
52 53<br />
Sistema<br />
estrinseco<br />
PT<br />
(Quick-Test)
4 Ematologia 4 Ematologia<br />
4.2 Parametri della coagulazione 4.3 Gruppi sanguigni<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Fibrinogeno 0,5 ml CP cong. Coagulometria (1)<br />
Indicazione DIC, epatopatia, carenza di fibrinogeno<br />
Trattandosi di una proteina della fase acuta, il valore del<br />
fibrinogeno può risultare elevato in caso di infiammazione.<br />
Profilo coagulativo 1 ml CP cong. Coagulometria (1)<br />
Fibrinogeno, aPTT, PT, Tempo di trombina<br />
Profilo coagulativo<br />
esteso<br />
Come per "Profilo coagulativo" + d-dimeri + Antitrombina III<br />
Indicazione Diagnosi dell'emofilia A (carenza del fattore VIII)<br />
Indicazione Diagnosi dell'emofilia B (carenza del fattore IX)<br />
Fattore di von-Willebrand<br />
(Ag VWF) (solo cane)<br />
Fattore di von Willebrand<br />
di tipo 1,2,3 (test genetico)<br />
3 ml CP cong. Coagulometria (1)<br />
Fattore VIII (solo cane) 0,5 ml CP cong. Coagulometria (1)<br />
Fattore IX (solo cane) 0,5 ml CP cong. Coagulometria (1)<br />
1 ml CP cong. Test immunologico di torbidità (1)<br />
Il fattore di von Willebrand media l'adesione delle piastrine<br />
all'endotelio dei vasi sanguigni ed è la proteina di trasporto del<br />
fattore VIII. La sindrome di von Willebrand è stata descritta in<br />
molte razze, tuttavia colpisce soprattutto i Dobermann e gli<br />
Scotch Terrier.<br />
Il test è indicato in presenza di un tempo prolungato di<br />
sanguinamento della mucosa; anche l'aPTT può risultare<br />
prolungato.<br />
1 ml EB PCR (3)<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Determinazione del<br />
gruppo sanguigno<br />
(cane, gatto)<br />
Cani Per il cane attualmente si conoscono 13 gruppi sanguigni<br />
che vengono denominati DEA (Dog erythrocyte antigene) 1.1,<br />
1.2, ecc. Non esistono alloanticorpi naturali rilevanti a livello<br />
clinico. Il gruppo sanguigno che viene testato è il DEA 1.1,<br />
dal momento che una trasfusione di sangue da un animale<br />
DEA 1.1 positivo ad un soggetto DEA 1.1 negativo provoca<br />
un'intensa formazione di anticorpi, che nell'arco di 1- 2<br />
settimane dà luogo ad emolisi ritardata. In caso di una seconda<br />
trasfusione di sangue da un animale DEA 1.1 positivo ad un<br />
animale DEA 1.1 negativo, già sensibilizzato, sussiste inoltre<br />
il pericolo di una reazione trasfusionale emolitica acuta.<br />
Gatti Per quanto riguarda il gatto si conoscono i gruppi sanguigni A,<br />
B e AB. Il gruppo sanguigno A è il gruppo maggiormente<br />
rappresentato (96%). Il gruppo B varia in base alla razza ed<br />
è frequente p.es. nel Devon Rex o nel British Shorthair<br />
(20- 45%). Il gruppo AB è molto raro. Nel gatto esistono<br />
alloanticorpi contro gli altri gruppi sanguigni; pertanto si<br />
consiglia prima di una trasfusione di determinare il gruppo<br />
sanguigno del donatore e quello del ricevente. Inoltre nel<br />
gatto esiste il pericolo di isoeritrolisi neonatale, se gattini di<br />
gruppo A (o AB) vengono partoriti da una fattrice di gruppo B.<br />
Attenzione Inviare sangue fresco: il sangue analizzato non deve essere<br />
più vecchio di 3 giorni.<br />
Anticorpi anti-A del<br />
gruppo sanguigno<br />
(gatto)<br />
0,5 ml EB Reazione di agglutinazione (1)<br />
1 ml EB (3)<br />
I gatti con gruppo sanguigno B presentano fisiologicamente<br />
titoli relativamente elevati di anticorpi anti-A. Il test permette di<br />
rilevare questi titoli, utili per valutare l'eventuale rischio di una<br />
isoeritrolisi neonatale in gattini con gruppo sanguigno A o AB<br />
nati da madri con gruppo B. Nel colostro e nel latte sono<br />
presenti anticorpi anti-A che, dopo la poppata, vengono assorbiti<br />
dall'intestino dei neonati durante le prime 24 - 48 ore di vita.<br />
Gli anticorpi causano una grave anemia emolitica che può<br />
portare a morte i gattini nel giro di pochi giorni.<br />
Attenzione capitolo 3.2, Programmi di ricerca speciali → Profilo<br />
trasfusione emergenza e Profilo trasfusione stoccaggio<br />
54 55
4 Ematologia<br />
4.4 Parassiti del sangue e batteri emotropi<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Emoparassiti e batteri<br />
emotropi (microscopia)<br />
Micoplasmi emotropi<br />
(ex Haemobartonelle)<br />
Microfilaria<br />
(microscopia)<br />
Dirofilaria immitis<br />
(Macrofilaria) (Ag)<br />
56<br />
0,5 ml EB + striscio ematico Microscopia (1)<br />
Esame microscopico su striscio ematico colorato con Giemsa,<br />
in particolare alla ricerca di Babesia, Ehrlichia, Anaplasma ed<br />
Hepatozoon. Un'identificazione diretta dell'agente patogeno può<br />
avvenire solo nella fase parassitemica o batteriemica e non è<br />
pertanto sempre possibile.<br />
cfr. → capitolo 3.2, Programmi di ricerca speciali<br />
Profilo emoparassitaro I, II e III per il cane<br />
→ capitolo 13, Malattie infettive<br />
0,5 ml EB + striscio ematico Microscopia (1)<br />
Esame microscopico su striscio ematico colorato con Giemsa.<br />
Rispetto al metodo PCR, la microscopia presenta una sensibilità<br />
ed una specificità nettamente inferiori.<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
1 ml EB Test di Knott (1)<br />
La rilevazione delle microfilarie avviene con microscopio ottico<br />
dopo arricchimento (test di Knott). Il prelievo di sangue capillare<br />
va effettuato preferibilmente dopo le ore 18:00. La rilevazione<br />
è possibile a partire da 6 mesi post infezione. La sensibilità è<br />
di circa il 60%. Un'identificazione diretta dell'agente patogeno<br />
perciò non è sempre possibile! Risultati negativi si possono<br />
anche avere in presenza di un'infezione con parassiti adulti<br />
dello stesso sesso.<br />
cfr → Kapitel 13, Infektionskrankheiten<br />
1 ml S, EP, HP ELISA (1)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Acido b-idrossibutirrico 0,3 ml S, EP, HP Fotometria (1)<br />
Indicazione Acetonemia<br />
Localizzazione Liquidi organici (siero, latte, urina)<br />
Aumento - chetosi<br />
- tossicosi da gravidanza (ovini)<br />
- diabete mellito (con chetoacidosi)<br />
- febbre<br />
- inanizione<br />
Acidi biliari 0,3 ml S, EP, HP Fotometria (1)<br />
Indicazione Epatopatie<br />
Localizzazione Sintetizzati dal colesterolo nel fegato, gli acidi biliari sono<br />
responsabili della digestione e dell'assorbimento dei lipidi<br />
dall'intestino (i lipidi raggiungono l'intestino assieme alla bile,<br />
dove una piccola parte viene espulsa con le feci, la maggior<br />
parte viene invece riassorbita e riportata al fegato).<br />
Aumento Aumento specifico<br />
In caso di epatopatie l'eliminazione degli acidi biliari è<br />
compromessa, con conseguente accumulo e disturbi della<br />
funzionalità dovuti alle loro proprietà tossiche.<br />
Malattie epatiche e dei dotti biliari con colestasi intraepatica o<br />
postepatica, in particolare:<br />
- epatite<br />
- epatosi croniche<br />
- shunt portosistemico<br />
Aumento non specifico<br />
- fisiologico fino a 24 ore dopo un pasto ricco di grassi<br />
- ipertiroidismo<br />
- iperadrenocorticismo<br />
- diabete mellito<br />
Attenzione Effettuare la determinazione a digiuno!<br />
5 Chimica clinica<br />
57
5 Chimica clinica 5 Chimica clinica<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Acidi biliari-test di<br />
stimolazione<br />
2 x 0,3 ml S, EP, HP Fotometria (1)<br />
Indicazione Accertamenti su disturbi della funzionalità epatica<br />
Sospetto di shunt portosistemico<br />
Principio del test In condizioni fisiologiche la concentrazione di acidi biliari nel<br />
sangue aumenta dopo l'assimilazione di cibo ricco di grassi.<br />
In presenza di un disturbo della funzionalità epatica o di uno<br />
shunt, tale aumento risulta anormalmente elevato.<br />
Esecuzione del test 1. Primo prelievo di sangue = valore basale degli acidi biliari<br />
(a digiuno!)<br />
2. Pasto di carico (ricco di grassi)<br />
3. Secondo prelievo di sangue 2 ore dopo il pasto = valore<br />
postprandiale<br />
oppure<br />
1. Primo prelievo di sangue = valore basale degli acidi biliari<br />
(a digiuno!)<br />
2. Somministrazione di Takus ® (Pharmacia) 0,3 µg/kg p.c. IM<br />
3. Secondo prelievo di sangue 20 min. p.inj. = valore<br />
post-stimolazione<br />
Valutazione Valore basale < 20 µmol/l e valore postprandiale < 40 µmol/l<br />
= fisiologico<br />
Valore basale < 20 µmol/l e valore postprandiale 20 - 40<br />
µmol/l = valore limite<br />
Valore postprandiale > 40 µmol/l = patologico<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Acidi grassi non<br />
esterificati<br />
Fattori di interferenza Emolisi, lipemia, ittero<br />
0,5 ml EP, HP refrigerati Fotometria (2)<br />
Gli acidi grassi non esterificati o liberi (FFA free fatty acid o<br />
NEFA non esterified fatty acids) nel sangue sono ritenuti un<br />
buon indicatore del bilancio energetico nel bovino (soltanto per<br />
un lungo periodo di tempo). Gli acidi grassi liberi compaiono<br />
nel sangue quando la bovina è costretta a ricorrere alle sue<br />
riserve energetiche per espletare le normali funzioni corporee.<br />
Ne consegue che concentrazioni elevate di NEFA nel plasma<br />
sono sintomo di un apporto di energia insufficiente e non<br />
rispondente alle esigenze dell'animale. Studi sul campo hanno<br />
permesso di riconoscere una relazione lineare fra diverse<br />
malfunzioni/patologie (p.es. ritenzione della placenta, chetosi,<br />
dislocazione dell'abomaso e mastite) e valori elevati di NEFA<br />
nella bovina nella fase di asciutta.<br />
Inoltre è stata riscontrata una stretta correlazione tra la<br />
concentrazione di NEFA nel plasma e di NEFA nei follicoli.<br />
In caso di concentrazioni elevate di NEFA nel plasma si è<br />
osservata un'influenza negativa sullo sviluppo dei follicoli.<br />
58 59
5 Chimica clinica 5 Chimica clinica<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Acido lattico 0,3 ml NaF (plasma) Fotometria (1)<br />
Indicazione Controllo dello stato di allenamento (cavallo), miopatie<br />
Localizzazione Si forma nel tessuto (muscolatura) attraverso la degradazione<br />
anaerobica del glucosio oppure viene prodotto in eccesso dai<br />
batteri intestinali in caso di foraggi ricchi di carboidrati<br />
Aumento - incremento della glicolisi anaerobica<br />
- disturbi della metabolizzazione dell'acido lattico nel fegato<br />
(p.es. in seguito a shock)<br />
- ustioni<br />
- leucosi<br />
- nei neonati nelle prime 24 ore di vita<br />
- forte affaticamento fisico<br />
- torsioni, strangolamenti e rotture dell'intestino (cavallo),<br />
postoperatorio<br />
Fattori di interferenza Sangue intero<br />
Attenzione Per la misurazione dell'acido lattico è necessario utilizzare provette<br />
con l'aggiunta di inibitori della glicolisi. Si raccomanda il prelievo<br />
in provette con floruro di sodio (NaF). La centrifugazione della<br />
provetta e la separazione del plasma dovrebbe avvenire<br />
possibilmente entro i 15 minuti dal prelievo.<br />
Per distinguere la provetta con plasma dalle altre consigliamo di<br />
identificarla, scrivendo p.es. "Plasma NaF". Il siero non è idoneo<br />
per questo esame.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Acido urico 0,3 ml S, EP, HP Fotometria (1)<br />
Indicazione Bronzing-syndrome nel Dalmata<br />
Urolitiasi da urati<br />
Localizzazione Dalmata<br />
Livelli di acido urico: ca. 2 mg/dl<br />
Eliminazione: 400 - 600 mg/d di urato<br />
Altre razze canine<br />
Nel fegato l'acido urico viene metabolizzato in allantoina<br />
dall'enzima uricasi, e si ottengono:<br />
Livelli di acido urico: < 1 mg/dl<br />
Eliminazione: < 100 mg/d di urato<br />
Uccelli<br />
Negli uccelli la determinazione dell'acido urico nel sangue è più<br />
importante della determinazione dell'urea o della creatinina. In<br />
questi animali l'acido urico è un indicatore della funzionalità<br />
renale e aumenta in caso di danni all'epitelio renale (provocati<br />
da carenza di vitamina A, infezioni, privazione di acqua, ecc.).<br />
Soprattutto in caso di gotta vengono misurati livelli<br />
sensibilmente elevati di acido urico.<br />
60 61
5 Chimica clinica 5 Chimica clinica<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Albumina 0,3 ml S, EP, HP Fotometria (1)<br />
Indicazione Epatopatie<br />
Nefropatie<br />
Determinazione del rapporto A/G (diagnosi di FIP)<br />
Localizzazione Sintetizzata nel fegato<br />
Abbassamento - carenza proteica (alimentare)<br />
- anoressia<br />
- malassorbimento<br />
- epatopatie<br />
- perdite glomerulari e renali (nefrosi, sindrome nefrotica)<br />
- enteropatia proteino-disperdente<br />
- FIP<br />
- ustioni<br />
- perdite ematiche<br />
- versamenti cavitari<br />
- ipoadrenocorticismo<br />
- patologie del sistema nervoso centrale<br />
- carenza relativa da iperidratazione<br />
- ipergammaglobulinemia<br />
Aumento - disidratazione<br />
a-amilasi 0,3 ml S, EP, HP Cinetica enzimatica, Fotometria (1)<br />
Indicazione Patologie del pancreas esocrino<br />
Localizzazione Pancreas, fegato, intestino tenue, tiroide (nel cane: reni)<br />
Aumento - pancreatite acuta (cfr. anche la lipasi pancreatica specifica<br />
nel cane e nel gatto)<br />
- necrosi pancreatica<br />
- tumore pancreatico<br />
- occlusione del dotto pancreatico<br />
- nefropatie<br />
- epatopatie (carcinoma)<br />
- ileo, peritonite, colecistite, patologie dell'intestino tenue<br />
- iperadrenocorticismo<br />
- farmaci (p.es. glucocorticoidi)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
ALP (Fosfatasi alcalina) 0,3 ml S, HP Cinetica enzimatica, Fotometria (1)<br />
Indicazione Epatopatie<br />
Iperadrenocorticismo<br />
Osteopatie<br />
Localizzazione Fegato (legata alla membrana nell'epitelio dei dotti biliari),<br />
mucosa dell'intestino tenue, ossa, reni, placenta, milza,<br />
leucociti, eritrociti<br />
Aumento Fisiologico<br />
- crescita<br />
Aumento specifico epatico<br />
- epatopatie con colestasi intraepatica od extraepatica<br />
(nel gatto e nei ruminanti reazione molto lenta)<br />
- neoplasie epatiche<br />
- intossicazione epatica<br />
- pancreatite<br />
Aumento aspecifico<br />
- iperadrenocorticismo (soprattutto nel cane)<br />
- ipertiroidismo<br />
- diabete mellito<br />
- iperparatiroidismo<br />
- rimaneggiamento osseo<br />
- osteopatie<br />
- neoplasie<br />
- gravidanza (in particolare nel gatto)<br />
- farmaci (p.es. glucocorticoidi, anticonvulsivanti,<br />
barbiturici, diversi antibiotici)<br />
Fattori di interferenza Emolisi, EDTA, grave lipemia e bilirubinemia<br />
Attenzione Gli animali giovani presentano valori sensibilmente più<br />
elevati degli animali adulti!<br />
62 63
5 Chimica clinica 5 Chimica clinica<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
ALP dopo inattivazione<br />
termica<br />
Indicazione Diagnosi della sindrome di Cushing nel cane:<br />
Determinazione della frazione indotta dagli steroidi (frazione<br />
termostabile) dell'ALP:<br />
attraverso la somministrazione di glucocorticoidi endogeni o<br />
esogeni viene indotta soprattutto la frazione stabile al calore<br />
dell'enzima, mentre l'ALP delle ossa, del fegato e dei reni è<br />
termolabile. L'ALP termostabile può essere rilevata riscaldando<br />
il siero a 65° C.<br />
Fattori di interferenza Emolisi, EDTA, lipemia e bilirubinemia gravi<br />
Indicazione Epatopatie<br />
Localizzazione Fegato (citoplasmatica) (soprattutto nel cane e nel gatto),<br />
reni, muscolatura cardiaca e scheletrica (soprattutto in<br />
cavallo, bovino, suino ed ovino)<br />
Aumento Soprattutto in presenza di epatopatie dovute a:<br />
- epatite acuta<br />
- riacutizzazione di un'epatite cronica<br />
- degenerazione e necrosi delle cellule epatiche<br />
(acuta e cronica)<br />
- danni ipossici<br />
- fibrosi o cirrosi epatica (riacutizzazione)<br />
- ostruzione extraepatica del dotto biliare<br />
- colangite, colangioepatite<br />
- lipidosi epatica<br />
- amiloidosi epatica<br />
- disturbi del deflusso venoso (fegato da stasi)<br />
- in caso di processi circoscritti (p.es. tumori, ascessi)<br />
spesso non aumentata o solo lievemente aumentata<br />
- in caso di necrosi acuta dovuta a tossine o farmaci:<br />
(caduta rapida dopo l'aumento)<br />
- farmaci (p.es. anticonvulsivi, glucocorticoidi)<br />
- febbre (aumento modesto)<br />
Fattori di interferenza Emolisi<br />
0,5 ml S, HP Cinetica enzimatica,<br />
Fotometria (1)<br />
ALT (GPT) 0,3 ml S, EP, HP Cinetica enzimatica,<br />
Fotometria (1)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Ammoniaca 1 ml EP congelato Fotometria (1)<br />
Indicazione Epatopatie<br />
Epatoencefalopatie<br />
Localizzazione Prodotto (tossico) del metabolismo delle proteine, sintetizzato<br />
nell'intestino, metabolizzato ad urea nel fegato<br />
Aumento - shunt portosistemico<br />
- epatopatie gravi croniche (fibrosi, cirrosi)<br />
- epatopatie gravi acute (epatite acuta, necrosi cellulare<br />
epatica acuta)<br />
- uremia<br />
- iperammoniemia primaria (rara)<br />
Attenzione Prelievo del sangue in contenitori prerefrigerati, da richiudere<br />
immediatamente, centrifugare; inviare il plasma congelato!<br />
Determinazione da effettuare a digiuno (da 12 ore)!<br />
Ammonio (Test di<br />
tolleranza all'ammonio)<br />
2 x 1 ml EP congelato Fotometria (1)<br />
Principio del test Attraverso la somministrazione di cloruro di ammonio viene<br />
prodotta nell'intestino una grande quantità di ammoniaca, che<br />
viene quindi metabolizzata ad urea nel fegato. In caso di<br />
disturbi della funzionalità epatica questo meccanismo non<br />
funziona correttamente ed è possibile rilevare nel sangue<br />
quantità elevate di ammoniaca.<br />
Esecuzione del test 1. Primo campione di sangue = valore a digiuno<br />
2. Somministrazione di cloruro di ammonio 100 mg/kg p.c.<br />
diluito in acqua PO (sonda gastrica)<br />
3. Secondo prelievo di sangue 30 min. dopo la<br />
somministrazione = valore dopo stimolazione<br />
Valutazione Valore fisiologico: nessun aumento/lieve aumento oltre<br />
l'intervallo di riferimento<br />
Valore limite: 100 - 120 µmol/l<br />
Valore patologico: 120 µmol/l<br />
Attenzione Prelievo del sangue in contenitori prerefrigerati, da richiudere<br />
immediatamente, centrifugare; inviare il plasma congelato!<br />
Determinazione da effettuare a digiuno (da 12 ore)!<br />
64 65
5 Chimica clinica 5 Chimica clinica<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
AST (GOT) 0,3 ml S, EP, HP Cinetica enzimatica, Fotometria (1)<br />
Indicazione Miopatie: tutte le specie animali<br />
Epatopatie: equino, bovino, ovino, caprino, suino,<br />
(cane, gatto)<br />
Localizzazione Soprattutto nella muscolatura cardiaca e scheletrica e nel<br />
fegato (citoplasmatica e mitocondriale)<br />
Aumento - epatopatie<br />
- miopatie (eventualmente anche cardiomiopatie)<br />
(per una differenziazione determinare anche CK/ALT)<br />
- farmaci (p.es. anticonvulsivi, estrogeni)<br />
- allenamento<br />
Fattori di interferenza Emolisi<br />
b-carotene 2 ml S, EP, HP HPLC (3)<br />
Indicazione - problemi di fertilità in bovino, equino e suino<br />
(calore silente, ovulazione ritardata, ritorno in calore dopo<br />
la monta, morte embrionale)<br />
- aumentata predisposizione alle infezioni neonatali<br />
Localizzazione Provitamina A (eccezione: il gatto non è in grado di trasformare<br />
il ß-carotene in vitamina A).<br />
L'organo principale di immagazzinamento del ß-carotene è il<br />
fegato.<br />
Abbassamento - dovuto all'alimentazione (p.es. foraggio immagazzinato per<br />
un lungo periodo di tempo)<br />
Bilirubina (totale) 0,3 ml S, EP, HP Fotometria (1)<br />
Indicazione - colestasi<br />
- epatopatie<br />
- anemia, emolisi<br />
Localizzazione Si forma principalmente dalla degradazione dell'emoglobina<br />
(bilirubina I, bilirubina non coniugata), cui segue poi la<br />
coniugazione (bilirubina II, bilirubina coniugata, bilirubina diretta)<br />
nel fegato (nel cane anche nei reni)<br />
Fattori di interferenza Emolisi, lipemia, luce<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Bilirubina (diretta) 0,3 ml S, EP, HP Fotometria (1)<br />
Cardiopet TM proBNP<br />
(Nt-proBNP)<br />
(cane e gatto)<br />
Dalla bilirubina totale e dalla bilirubina diretta (coniugata) può<br />
venire calcolata la bilirubina indiretta (non coniugata).<br />
Il BNP è un peptide natriuretico prodotto dalle cellule mioendocrine<br />
del cuore al momento in cui si verifica un'aumentata<br />
distensione della parete cardiaca. Si tratta di una risposta<br />
molto sensibile, precoce e veloce ai cambiamenti della pressione<br />
sanguigna. Il BNP favorisce l'escrezione renale di sodio<br />
ed acqua e agisce direttamente sulla muscolatura liscia delle<br />
pareti vasali (vasodilatazione), diminuendo così la pressione<br />
intracardiaca. Il proBNP si divide nelle sue parti biolocamente<br />
attive: BNP e Nt-proBNP. Di queste due la molecola Nt-pro BNP<br />
risulta più facile da misurare in laboratorio, in quanto è stabile<br />
nel tempo e presente in concentrazioni più elevate nel sangue.<br />
La concentrazione di Nt-proBNP è correlata alla concentrazione<br />
di BNP.<br />
Indicazioni: - differenziazione tra patologia respiratoria e cardiaca<br />
- screening per animali anziani e/o razze predisposte<br />
- screening preanestetico<br />
- conferma di sospetto in caso di sintomatologia non chiara<br />
- Per cani e gatti > 6 anni e razze predisposte a patologie<br />
cardiache<br />
Fattori di interferenza: - Sangue intero<br />
- Emolisi<br />
- Lipemia<br />
1 ml EP ELISA (1)<br />
In presenza di azotemia prerenale e/o renale potrebbe<br />
verifi-carsi un significativo aumento della concentrazione di<br />
NT-proBNP. La concentrazione di NT-proBNP dovrebbe essere<br />
quindi interpretata con cautela in pazienti disidratati e in<br />
quelli con BUN e creatinina elevati.<br />
Attenzione Inviare plasma in EDTA nelle provette apposite (cfr. Capitolo 2.2,<br />
Preparazione dei campioni per il Cardiopet TM proBNP)<br />
66 67
5 Chimica clinica 5 Chimica clinica<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Calcio 0,3 ml S, HP Fotometria (1)<br />
Indicazione vedi sotto<br />
Localizzazione Soprattutto nelle ossa<br />
Aumento - iperparatiroidismo primario/terziario<br />
- ipervitaminosi D<br />
- ipoadrenocorticismo<br />
- acidosi<br />
- neoplasie (linfomi, adenocarcinomi)<br />
- tumori osteolitici<br />
- osteomielite<br />
- osteoporosi<br />
- nefropatie<br />
- iperalbuminemia<br />
(aumento della parte legata alle proteine)<br />
- ipercalcemia maligna<br />
Abbassamento - ipoparatiroidismo<br />
- iperparatiroidismo secondario (renale)<br />
- nefropatie<br />
- ipoalbuminemia<br />
- ipovitaminosi D<br />
- pancreatite (necrotizzante)<br />
- tetania<br />
- eclampsia<br />
- paresi uterina<br />
- malassorbimento<br />
- ipercalcitonismo<br />
- intossicazione da glicole etilenico<br />
Fattori di interferenza Lipemia, emolisi, EDTA<br />
Attenzione In caso di valori delle sieroproteine devianti dalla norma occorre<br />
tener conto della frazione alterata di calcio legata alle proteine e<br />
correggere il valore del calcio sierico totale come segue:<br />
Valore corretto del calcio (mg/dl) =<br />
Valore del calcio sierico (mg/dl) - Sieroalbumine (g/dl) + 3,5<br />
Valore corretto del calcio (mmol/l) =<br />
(Valore del calcio sierico (mmol/l) x 4 - Sieroalbumine (g/dl) +<br />
3,5) : 4<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Cistatina C 1 ml S, EP, HP Nefelometria (3)<br />
Indicazione Insufficienza renale<br />
La cistatina C è un polipeptide prodotto costantemente da<br />
tutte le cellule nucleate dell'organismo, che viene filtrato completamente<br />
a livello glomerulare e riassorbito a livello tubulare.<br />
In questo modo è adatta, come avviene per la creatinina,<br />
a fungere da marcatore per l'individuazione di insufficienza<br />
renale.<br />
cfr. → capitolo 8, Malattie renali e delle vie urinarie,<br />
Clearance della creatinina esogena<br />
Cistina 5 ml U HPLC (3)<br />
Indicazione Cistinuria, Urolitiasi da cistina<br />
Localizzazione La cistinuria è un disturbo ereditario del riassorbimento della<br />
cistina (ma anche di altri aminoacidi come p. es. lisina,<br />
ornitina e arginina) nei tubuli renali prossimali. La cistina non<br />
è solubile nell'urina acida e neutra (pH 5,5 - 7,0), quindi un<br />
aumento della sua concentrazione può portare, con questi<br />
valori di pH, alla precipitazione di cristalli di cistina oppure alla<br />
formazione di calcoli di cistina nei reni o nella vescica. I sintomi<br />
clinici vengono spesso osservati soltanto in presenza di<br />
un'urolitiasi grave o di infezioni batteriche delle vie urinarie<br />
(ematuria, disuria).<br />
La cistinuria è stata descritta in molte razze: Boxer, Cairn<br />
Terrier, Welsh Corgi, Pastore tedesco, Dogge danese, Irish<br />
Terrier, Terranova, Scotch Terrier, Mastino inglese, Bullmastiff,<br />
Basenji, Chihuahua, Bichon Frise.<br />
Nel Terranova e nel Landseer è disponibile un test genetico,<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare/ Malattie<br />
ereditarie<br />
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5 Chimica clinica 5 Chimica clinica<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Cloro 0,3 ml S, EP, HP Elettrodi ioni selettivi (1)<br />
Indicazione Disturbi dell'equilibrio elettrolitico<br />
Localizzazione Il cloro è l'anione più importante della spazio extracellulare.<br />
Nell'equilibrio fisiologico acido-base il comportamento della<br />
concentrazione del cloro nel siero è in funzione della<br />
concentrazione del sodio<br />
Aumento - disidratazione (perdita di liquidi, ridotta assunzione di<br />
liquidi)<br />
- aumento dell'assunzione di cloruro di sodio<br />
- diabete mellito (dopo terapia insulinica)<br />
- diabete insipido<br />
- mineralcorticoidi (ritenzione di sodio)<br />
- nefropatie<br />
- acidosi<br />
- diarree dell'intestino tenue<br />
Abbassamento - aumento della perdita di cloruro di sodio (vomito, diarrea,<br />
sudorazione)<br />
- assunzione insufficiente di cloruro di sodio<br />
- aumento dell'assunzione di acqua<br />
- ipoadrenocorticismo<br />
- diuresi osmotica (p.es. diabete mellito)<br />
- insufficienza cardiaca congestizia (edema)<br />
- nefropatia<br />
- diuretici d'ansa (p.es. furosemide), antagonisti<br />
dell'aldosterone (p.es. spironolattone)<br />
- calo della pressione colloidosmotica (ipoalbuminemia)<br />
- alcalosi metabolica<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
CK (Creatinchinasi) 0,3 ml S, EP, HP Cinetica enzimatica, Fotometria (1)<br />
Indicazione Miopatie primarie e secondarie<br />
Localizzazione Muscolatura scheletrica, muscolatura cardiaca, cervello,<br />
vescica urinaria (gatto)<br />
Aumento - miopatie<br />
- miosite (infettiva, immunomediata, endocrina)<br />
- iniezioni intramuscolari<br />
- forte affaticamento fisico<br />
- tetano<br />
- miopatia da sforzo<br />
- miopatia da carenza<br />
- shock<br />
- ostruzione della vescica (gatto)<br />
Fattori di interferenza Emolisi, bilirubinemia<br />
Attenzione Nel cane i valori della CK sono in funzione dall'età. Cuccioli neonati<br />
possono presentare valori cinque volte più elevati<br />
dei cani adulti.<br />
70 71
5 Chimica clinica 5 Chimica clinica<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Colesterolo 0,3 ml S, EP, HP Cinetica enzimatica, Fotometria (1)<br />
Indicazione Malattie metaboliche (ed endocrine)<br />
Localizzazione Assunto per via alimentare o sintetizzato nel fegato. I suoi<br />
derivati sono gli ormoni steroidi e gli acidi biliari<br />
Aumento - postprandiale<br />
- dovuto all'alimentazione<br />
- ipotiroidismo<br />
- diabete mellito<br />
- iperadrenocorticismo<br />
- sindrome nefrotica<br />
- epatopatie<br />
- colestasi extraepatica<br />
- sindrome iperlipemica (p.es. predisposizione di razza<br />
nello Schnauzer nano e nel Beagle)<br />
- pancreatite acuta, necrosi pancreatica<br />
- ipercolesterolemia idiopatica nei Dobermann e Rottweiler<br />
- lipidosi dei puledri<br />
- farmaci (p.es. glucocorticoidi)<br />
Abbassamento - malassorbimento<br />
- funzione epatica ridotta (p.es. cirrosi epatica, shunt<br />
portosistemico)<br />
- cachessia<br />
- insufficienza pancreatica esocrina<br />
- enteropatia proteino-disperdente<br />
- ipertiroidismo<br />
Fattori di interferenza Emolisi, lipemia<br />
Attenzione Effettuare la determinazione a digiuno!<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Colinesterasi 0,3 ml S, EP, HP Cinetica enzimatica, Fotometria (1)<br />
Indicazione Epatopatie<br />
Intossicazione da organofosforici<br />
Prima della somministrazione di rilassanti muscolari, se<br />
sussiste l'indicazione anamnestica di un'epatopatia<br />
Localizzazione Cervello, nervi, eritrociti; sintetizzata nel fegato<br />
Abbassamento - epatopatie gravi<br />
- avvelenamento con esteri organofosforici e con<br />
alchilfosfati (ad es. Parathion, E-605)<br />
- medicazione con derivati dell'acido carbaminico<br />
(neostigmina)<br />
- grave carenza proteica<br />
- cachessia<br />
- infezioni croniche<br />
Aumento - nefropatie<br />
- enteropatia essudativa<br />
72 73
5 Chimica clinica 5 Chimica clinica<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Creatinina 0,3 ml S, EP, HP Fotometria (1)<br />
Indicazione Nefropatie<br />
Localizzazione La creatinina è un prodotto del metabolismo muscolare<br />
endogeno (gli animali giovani presentano concentrazioni<br />
sieriche più basse rispetto ad animali adulti dotati di buona<br />
muscolatura). L'eliminazione avviene principalmente<br />
attraverso la filtrazione glomerulare.<br />
Aumento indipendente dall'alimentazione!<br />
Abbassamento - Cachessia<br />
Fattori di interferenza Emolisi<br />
CRP<br />
(proteina C-reattiva)<br />
Indicazione Infiammazioni<br />
Localizzazione Proteina della fase acuta<br />
Aumento specifico<br />
- nefropatie (con la perdita funzionale di almeno il<br />
70 % dei nefroni)<br />
- azotemia postrenale<br />
Aumento non specifico<br />
- disidratazione<br />
- squilibrio elettrolitico<br />
- insufficienza cardio-circolatoria<br />
- ipoadrenocorticismo<br />
- ipoalbuminemia<br />
- farmaci (p.es. corticosteroidi, tetracicline, cimetidina,<br />
cefalosporine, trimetoprim)<br />
- chetoacidosi diabetica<br />
- catabolismo tissutale (febbre, trauma muscolare, miosite)<br />
cfr. → capitolo 8, Malattie renali e delle vie urinarie, Clearance<br />
della creatinina esogena<br />
1 ml S Turbidimetria (2)<br />
Aumento - infezioni batteriche particolarmente acute<br />
- riacutizzazioni di infezioni croniche<br />
- infarto del miocardio<br />
- tumori maligni<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Elettroforesi<br />
sieroproteica<br />
Indicazione Diagnostica delle disproteinemie p.es. diagnosi e valutazione<br />
dell'andamento di infiammazioni/infezioni, epatopatie, carenza<br />
di anticorpi, gammopatie ecc.<br />
Rapporto albumina/globuline<br />
Aumento - ipogammaglobulinemia (p.es. animali neonati (rara) con<br />
insufficiente assunzione di colostro)<br />
- immunodeficienza congenita<br />
- immunodeficienza acquisita (p.es. cimurro nei neonati,<br />
infezione da Parvovirus canino, FeLV, FIV)<br />
Abbassamento - cfr. aumento del contenuto globulinico<br />
- cfr. abbassamento del contenuto albuminico<br />
- cfr. FIP<br />
Albumina<br />
Abbassamento - carenza proteica (alimentare)<br />
- anoressia<br />
- malassorbimento<br />
- epatopatie<br />
- perdite renali (nefrosi, sindrome nefrosica)<br />
- enteropatia proteino-disperdente<br />
- FIP<br />
- ustioni<br />
- perdite ematiche<br />
- versamenti cavitari<br />
- ipoadrenocorticismo<br />
- patologie del sistema nervoso centrale<br />
- carenza relativa da iperidratazione<br />
- ipergammaglobulinemia<br />
Aumento - disidratazione<br />
0.3 ml S Fotometria (1)<br />
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5 Chimica clinica 5 Chimica clinica<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
a-1-globuline<br />
Aumento - infiammazioni acute e subacute (p.es. epatite acuta)<br />
- febbre<br />
- lesioni tissutali, postoperatorio<br />
- neoplasie maligne (p.es. leucemia linfatica cronica)<br />
- glomerulonefrite, amiloidosi renale<br />
- artrite reumatoide<br />
- malattie infettive (cfr. albumine)<br />
- ipertiroidismo<br />
- ustioni<br />
- reticolosi<br />
- postinfettivo<br />
- terapia citostatica<br />
- lupus eritematoso<br />
- endocardite batterica<br />
- gravidanza<br />
- fisiologico nei neonati<br />
Abbassamento - enterite essudativa<br />
- sindrome nefrosica<br />
- epatopatia grave<br />
a-2-globuline<br />
Aumento - infiammazioni acute<br />
- ustioni<br />
- postoperatorio<br />
- tumori maligni<br />
- leucemia linfatica (leucosi)<br />
- fegato grasso<br />
- occlusione delle vie biliari<br />
- sindrome nefrosica<br />
- (pielonefrite cronica, nefrite interstiziale)<br />
- (insufficienza renale avanzata)<br />
- iperlipoproteinemia<br />
- lupus eritematoso<br />
- gravidanza<br />
Abbassamento - (epatite virale acuta)<br />
- epatite cronica attiva<br />
- sindrome nefrosica<br />
- anemia emolitica<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
a-globuline<br />
Aumento - infiammazioni acute<br />
- epatopatie<br />
- colestasi<br />
- neoplasie (in particolare del fegato)<br />
- piodermiti<br />
- sindrome nefrosica<br />
- linfosarcoma<br />
- lupus eritematoso<br />
- gravidanza<br />
- perdite ematiche croniche, emolisi<br />
Abbassamento - postoperatorio<br />
- anemie emolitiche<br />
- coagulopatie, emofilia<br />
- patologie autoimmuni<br />
g-globuline<br />
Aumento - infiammazioni subacute e croniche<br />
- neoplasie (carcinomi epatici, linfosarcomi)<br />
- malattie infettive (FIP, FIV, leishmaniosi, ehrlichiosi)<br />
- patologie autoimmuni (lupus eritematoso sistemico,<br />
artrite reumatoide)<br />
- glomerulonefrite, amiloidosi renale<br />
- piodermite<br />
- ustioni<br />
- leucosi mieloidi<br />
- epatopatie<br />
- nefropatie<br />
- insufficienza cardiaca con fenomeni di stasi<br />
(in particolare nel caso di stasi epatica)<br />
- ipotiroidismo<br />
Abbassamento - nefrosi, sindrome nefrosica<br />
- leucosi linfatica<br />
- ipogammaglobulinemia e agammaglobulinemia<br />
- immunosoppressione (p.es. terapia di lungo periodo<br />
con corticosteroidi, iperadrenocorticismo)<br />
76 77
5 Chimica clinica 5 Chimica clinica<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Escrezione frazionata<br />
degli elettroliti (FE)<br />
(cavallo)<br />
La determinazione della FE è uno degli esami diagnostici di laboratorio<br />
utili a chiarire la presenza di un disturbo della funzionalità<br />
dei tubuli renali: infatti l'escrezione elettrolitica ed il suo corrispondente<br />
valore FE aumentano con la perdita della capacità di<br />
riassorbimento tubulare. Uno squilibrio nell'equilibrio elettrolitico<br />
può anche compromettere il metabolismo muscolare, di modo<br />
che questo test può essere utilizzato anche per un diagnostico<br />
differenziale nel caso di problemi muscolari. Vengono esaminate<br />
le frazioni di escrezione di Na, K, P e Cl.<br />
Indicazione Diagnosi differenziale di anemie, malattie da carenza di ferro<br />
Localizzazione Assunto per via alimentare, utilizzato per formare l'emoglobina<br />
Aumento - anemia emolitica<br />
- epatopatie<br />
- emocromatosi<br />
Abbassamento - perdita cronica di sangue<br />
- animali giovani nutriti esclusivamente con latte<br />
- infezioni<br />
- neoplasie<br />
- nefropatie<br />
Fattori di interferenza Emolisi<br />
Indicazione Controllo dell'efficienza dell'assorbimento dell'intestino tenue<br />
Rilevazione di sovraproliferazione batterica nell'intestino<br />
Disturbi del quadro ematologico<br />
Disturbi del sistema immunitario<br />
Localizzazione Sotto forma di acido tetraidrofolico, coenzima per la sintesi dei<br />
corpi purinici<br />
Aumento - disbiosi<br />
- insufficienza pancreatica<br />
2 ml S + 5 ml U Fotometria (1)<br />
Ferro 0,3 ml S, HP Fotometria (1)<br />
Folati 1 ml S, EP, HP ECLIA (1)<br />
Abbassamento - disturbi di assorbimento del digiuno (malassorbimento)<br />
- inibizione della sintesi microbica dell'acido folico da parte<br />
dei sulfamidici<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Fosfati 0,3 ml S, EP, HP Fotometria (1)<br />
Indicazione Osteopatie<br />
Nefropatie<br />
Ipoparatiroidismo, iperparatiroidismo<br />
Vedi sotto<br />
Localizzazione Soprattutto nel sistema scheletrico e negli eritrociti<br />
Aumento - animali giovani<br />
- nefropatie (rapporto di filtrazione glomerulare limitato)<br />
- ipoparatiroidismo primario<br />
- ipervitaminosi D<br />
- iperparatiroidismo secondario<br />
- dovuto all'alimentazione<br />
- tumori osteolitici<br />
- ipertiroidismo (gatto)<br />
- farmaci (p.es. anabolizzanti, furosemide)<br />
- trauma dei tessuti molli<br />
- acidosi<br />
- ostruzione postrenale<br />
Abbassamento - iperparatiroidismo primario<br />
- malassorbimento<br />
- farmaci (p.es. glucocorticoidi, insulina)<br />
- ipercalcemia maligna<br />
- ipovitaminosi D<br />
- osteomalacia<br />
- collasso puerperale<br />
- sindrome di Fanconi<br />
- iperadrenocorticismo<br />
- alcalosi<br />
Fattori di interferenza Emolisi, sangue intero<br />
Attenzione Gli animali in crescita presentano valori dei fosfati sensibilmente<br />
superiori a quelli degli animali adulti.<br />
78 79
5 Chimica clinica 5 Chimica clinica<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Fruttosamine 0,3 ml S, EP, HP Fotometria (1)<br />
Indicazione Differenziazione tra iperglicemia temporanea e prolungata<br />
Monitoraggio terapeutico del diabete mellito<br />
Localizzazione Le fruttosamine sono proteine sieriche glicosilate per la via<br />
non insulino-dipendente.<br />
La loro presenza è proporzionale alla concentrazione di<br />
glucosio ematico nelle ultime 1 - 3 settimane.<br />
Aumento - diabete mellito<br />
- iperglicemia persistente di altra origine<br />
Fattori di interferenza Emolisi, forte bilirubinemia<br />
Attenzione Un'ipoalbuminemia può portare a bassi livelli di fruttosamine.<br />
In caso di presenza contemporanea di ipo- ed ipertiroidismo<br />
possono venire misurati valori erroneamente elevati (ipotiroidismo)<br />
o erroneamente bassi (ipertiroidismo).<br />
g-GT 0,3 ml S, EP, HP Fotometria (1)<br />
Indicazione Epatopatie<br />
Colestasi (in equini, bovini, suini e ovini è più indicato<br />
dell'ALP)<br />
Assunzione di colostro nel vitello<br />
Localizzazione Fegato (legata alla membrana nell'epitelio del dotto biliare),<br />
reni, pancreas, intestino tenue<br />
Aumento Aumento specifico<br />
- Epatopatie con colestasi (intraepatica o extraepatica)<br />
Fattori di disturbo Emolisi<br />
Aumento non specifico<br />
- pancreatite/enterite con coinvolgimento del fegato<br />
- colica (cavallo)<br />
- diabete mellito<br />
- insufficienza cardiaca destra<br />
- leucosi<br />
Attenzione Reazione molto lenta nel gatto!<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
GLDH 0,3 ml S, EP, HP Cinetica enzimatica, Fotometria (1)<br />
Indicazione Epatopatie<br />
Localizzazione Fegato (forma mitocondriale, centrolobulare)<br />
Aumento Aumenti di modesta entità sono privi di significato patologico,<br />
mentre un aumento di 3 volte è significativo a livello clinico,<br />
soprattutto nelle seguenti malattie:<br />
Fattori di interferenza Emolisi<br />
- colestasi<br />
- ipossemia<br />
- epatite acuta<br />
- necrosi delle cellule epatiche<br />
- epatite cronica<br />
- fibrosi epatica e cirrosi epatica<br />
- intossicazione<br />
- fegato da stasi in seguito a cardiomiopatia congestizia<br />
Attenzione Nel cavallo si assiste ad incrementi di media entità dell'attività<br />
enzimatica anche senza modificazioni epatiche!<br />
80 81
5 Chimica clinica 5 Chimica clinica<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Glucosio 0,3 ml S Fotometria (1)<br />
Indicazione Diabete mellito<br />
Insulinoma<br />
Aumento Aumento primario<br />
- diabete mellito<br />
Aumento secondario<br />
- postprandiale (fino a 150 mg/dl)<br />
- stress (nel gatto fino a 400 mg/dl)<br />
- iperadrenocorticismo<br />
- ipertiroidismo<br />
- acromegalia<br />
- malattie del sistema nervoso centrale<br />
- convulsioni<br />
- pancreatite<br />
- trauma grave<br />
- farmaci (p.es. glucosio, glucocorticoidi, ACTH,<br />
progestinici, morfina, adrenalina, diuretici tiazidici)<br />
Abbassamento Abbassamento primario<br />
- iperinsulinismo, insulinoma<br />
Fattori di interferenza Emolisi, sangue intero<br />
Abbassamento secondario<br />
- glicosuria renale<br />
- epatopatie<br />
- malattia da accumulo di glicogeno<br />
- malassorbimento<br />
- carenza alimentare<br />
- sindrome ipoglicemica idiopatica (razze nane)<br />
- ipotiroidismo<br />
- setticemia<br />
- ipoadrenocorticismo<br />
- policitemia grave<br />
- ipoglicemia neonatale<br />
- ipoglicemia del cane da caccia<br />
- sindrome paraneoplastica<br />
- farmaci (p.es. ß-bloccanti, antistaminici)<br />
Attenzione Utilizzare sangue in NaF oppure siero completamente privo di<br />
emolisi/eritrociti, non usare sangue intero!<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Immunoglobuline G (IgG)<br />
(cane e gatto)<br />
Indicazione Miopatie, (epatopatie)<br />
Il mancato trasferimento delle IgG colostrali è uno dei principali<br />
fattori predisponenti alle malattie infettive nei puledri. La determinazione<br />
di IgG nel sangue di un puledro di un giorno (in<br />
caso di puledri a rischio già a partire dalla 9° - 12° ora di vita)<br />
consente una diagnosi precoce e l'avvio di misure preventive.<br />
LDH 0,3 ml S, EP, HP Cinetica enzimatica, Fotometria (1)<br />
Localizzazione In tutti i tessuti, in particolare nella muscolatura, nel fegato,<br />
negli eritrociti<br />
Aumento - miopatie della muscolatura scheletrica e cardiaca<br />
- epatopatie<br />
- necrosi cellulari<br />
- emolisi<br />
- (tumori maligni)<br />
Fattori di interferenza Emolisi, sangue intero<br />
Lipasi 0,3 ml S, HP Cinetica enzimatica, Fotometria (1)<br />
Indicazione Patologie del pancreas esocrino<br />
Localizzazione Nel pancreas, nella mucosa gastrica<br />
Aumento - pancreatite acuta (cfr. anche lipasi pancreatica specifica)<br />
- necrosi pancreatica<br />
- occlusione del dotto pancreatico in seguito a tumore<br />
del pancreas<br />
- nefropatie<br />
- epatopatie (carcinoma)<br />
- (ileo, peritonite, colecistite)<br />
- (farmaci, p.es. glucocorticoidi)<br />
- iperadrenocorticismo<br />
Fattori di interferenza Emolisi, bilirubinemia, lipemia<br />
0,5 ml S, EP, HP Elettroforesi a zone (1)<br />
82 83
5 Chimica clinica 5 Chimica clinica<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Lipasi pancreatica<br />
specifica canina<br />
(Spec cPL ® )<br />
Questo immunoassay misura esclusivamente la lipasi nel<br />
sangue che viene sintetizzata dalle cellule degli acini del<br />
pancreas esocrino. Per questo motivo è attualmente il test<br />
diagnostico meno invasivo più affidabile per diagnosticare una<br />
pancreatite. È caratterizzato da elevate specificità (> 95 %)<br />
e sensibilità (> 95 %).<br />
Alterazioni infiammatorie del pancreas provocano un aumento<br />
della lipasi pancreatica specifica canina; l'assunzione di<br />
alimenti al contrario non ne altera i valori. Diversamente dalla<br />
lipasi, questa lipasi pancreatica specifica non è influenzata<br />
da nefropatie, epatopatie, gastriti, morbo di Cushing o<br />
assunzione di corticosteroidi.<br />
Indicazione Dolore addominale, vomito, sospetto di pancreatite acuta,<br />
pancreatite cronica, approfondimenti in seguito ad una lipasi<br />
elevata<br />
Localizzazione Nel pancreas<br />
Lipasi pancreatica specifica<br />
felina (Spec fPL TM )<br />
Come per lo Spec cPL ® del cane, anche lo Spec fPL TM del<br />
gatto rileva esclusivamente la lipasi pancreatica specifica.<br />
Il test è ideale sia per la diagnosi delle patologie croniche, che<br />
nel gatto si presentano più frequentemente, che delle patologie<br />
acute. Il test è caratterizzato da buone sensibilità (83%) e<br />
specificità (86%).<br />
Indicazione: Letargia, calo dell'appetito, disidratazione, perdita di peso,<br />
ittero, diabete mellito, patologie epatiche e del tratto<br />
gastrointestinale.<br />
Localizzazione: Pancreas<br />
1 ml S ELISA (1)<br />
0,5 ml S ELISA (1)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Magnesio 0,3 ml S, HP Cinetica enzimatica, Fotometria (1)<br />
Indicazione Disturbi dell'equilibrio elettrolitico<br />
Localizzazione Presente soprattutto nelle ossa e in tutti i tessuti, il magnesio è<br />
importante per il metabolismo energetico della cellula e per la<br />
trasmissione dello stimolo neuromuscolare (una diminuzione<br />
porta a spasmi, un aumento a paralisi flaccide)<br />
Aumento - ipoadrenocorticismo<br />
- insufficienza renale nella fase anurica/oligurica<br />
Abbassamento - malassorbimento<br />
- tetania<br />
- disturbi della funzionalità renale<br />
- ipoparatiroidismo<br />
- farmaci (p.es. aminoglicosidi, amfotericina B, insulina)<br />
- ipercalcemia, ipercaliemia<br />
Fattori di disturbo Emolisi, iperbilirubinemia, EDTA<br />
Manganese 0,5 ml S, Peli<br />
Bovini: 3 ml EB, Peli<br />
Indicazione Deficit di accrescimento<br />
Disturbi della fertilità<br />
Aborti, mortinatalità<br />
Disturbi della deambulazione<br />
Abbassamento - dovuto all'alimentazione<br />
84 85<br />
ICP-AES (1)<br />
ICP-MS (1)
5 Chimica clinica 5 Chimica clinica<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Potassio 0,3 ml S, HP Elettrodi ioni selettivi (1)<br />
Indicazione Disturbi del bilancio elettrolitico<br />
L'ipocaliemia porta a paralisi della muscolatura liscia e striata<br />
(depressione del tratto ST nell'ECG)<br />
L'ipercaliemia porta a sintomi neuromuscolari e a danneggiamento<br />
del miocardio<br />
Localizzazione per il 96 - 98 % nello spazio intracellulare<br />
Aumento - riduzione dell'eleminazione di potassio<br />
- ipoadrenocorticismo (un rapporto sodio/potassio < 27:1 è<br />
a favore del morbo di Addison)<br />
- nefropatie (fase oligurica/anurica)<br />
- rottura della vescica, ostruzione post-renale<br />
- chetoacidosi diabetica<br />
- danni tissutali (fuoriuscita di potassio di origine<br />
intracellulare)<br />
- ipossia<br />
- emolisi (in particolare nell'Akita Inu e nel Shiba Inu)<br />
- acidosi<br />
- iatrogeno<br />
Abbassamento - alimentazione povera di potassio<br />
- aumento dell'eleminazione di potassio<br />
(vomito/diarrea cronici)<br />
- aumento della diuresi<br />
- epatopatie croniche<br />
- iperadrenocorticismo (abbassamento lieve)<br />
- farmaci (p.es. glucocorticoidi, diuretici, insulina)<br />
- nefropatie (fase poliurica)<br />
- alcalosi<br />
Fattori di interferenza Emolisi, (lipemia), EDTA, iperproteinemia estrema<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Proteine totali 0,3 ml S, EP, HP Fotometria (1)<br />
Indicazione Epatopatie<br />
Patologie gastrointestinali<br />
Nefropatie<br />
FIP<br />
Disidratazione<br />
Iperidratazione<br />
Localizzazione Sintetizzate nel fegato, fatta eccezione per le immunoglobuline<br />
Aumento - in primo luogo globuline!<br />
- disidratazione<br />
- malattie infettive croniche<br />
(p.es. ehrlichiosi, FIP, leishmaniosi)<br />
- infezioni batteriche croniche<br />
- parassitosi (p.es. Demodex, Dirofilaria, Sarcoptes)<br />
- neoplasie<br />
- mieloma multiplo<br />
- malattie autoimmunitarie<br />
- emolisi<br />
Abbassamento - malassorbimento<br />
- maldigestione<br />
- carenze alimentari (alimentazione povera di proteine)<br />
- epatopatie croniche<br />
- nefropatie (in particolare sindrome nefrosica)<br />
- enteropatia proteino-disperdente<br />
- perdite ematiche<br />
- versamenti cavitari<br />
- ipoadrenocorticismo<br />
- ustioni<br />
- abbassamento relativo dovuto a iperidratazione<br />
cfr. anche → Elettroforesi sieroproteica<br />
Fattori di interferenza Emolisi<br />
Attenzione Gli animali giovani presentano fisiologicamente concentrazioni<br />
proteiche più basse!<br />
86 87
5 Chimica clinica 5 Chimica clinica<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Rame 0,5 ml S, Peli<br />
Bovini: 3 ml EB, HB, Peli<br />
Indicazione Specialmente nei ruminanti: diminuzione della produttività,<br />
ritardo della crescita, alterazione del vello (ovini), atassia<br />
enzootica (agnelli), epatopatie, anemia emolitica.<br />
Localizzazione Componente di molti enzimi, importante per l'ematopoiesi<br />
Immagazzinamento nel fegato<br />
Aumento - malattia da accumulo di rame (Bedlington Terrier,<br />
West Highland-White Terrier, Cocker Spaniel e Pinscher)<br />
(raramente aumento, da confermare tramite istologia)<br />
- ostruzione delle vie biliari<br />
- dovuto all'alimentazione (avvelenamento da rame,<br />
soprattutto negli ovini; ma non sempre!)<br />
Abbassamento - carenza primaria di Cu dovuta a ridotta assunzione<br />
- carenza secondaria di Cu (disturbi dell'assorbimento dovuti<br />
ad antagonisti del Cu, p.es. il molibdeno)<br />
Selenio 0,5 ml S,<br />
Peli<br />
ICP-AES (1)<br />
ICP-AES (2)<br />
ICP-MS (1)<br />
ICP-AES (1)<br />
ICP-AES (2)<br />
ICP-MS (1)<br />
Indicazione Disturbi dell'equilibrio del selenio,<br />
rallentamento della crescita, morte embrionale, riduzione<br />
delle prestazioni, disturbi della fertilità, aumento della<br />
predisposizione alle malattie, diminuzione della risposta<br />
immunitaria<br />
Localizzazione Il selenio è un antiossidante, svolge funzioni metaboliche nella<br />
sintesi delle prostaglandine ed è coinvolto nel metabolismo<br />
degli steroidi e del colesterolo<br />
Abbassamento - dovuto all'alimentazione<br />
- aumento del fabbisogno (crescita, affaticamento, elevata<br />
produzione di latte)<br />
- carenza di vitamina E<br />
- antagonisti del selenio (zinco, zolfo)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Sodio 0,3 ml S, EP, HP Elettrodi ioni selettivi (1)<br />
Indicazione Disturbi del bilancio elettrolitico<br />
Localizzazione Spazio intracellulare ed extracellulare (il sodio è responsabile<br />
dell'osmolalità dello spazio extracellulare)<br />
Aumento - disidratazione (perdita di liquidi, riduzione dell'assunzione<br />
dei liquidi)<br />
- aumento dell'assunzione di sale<br />
- iperadrenocorticismo<br />
- (vomito, diarrea)<br />
- febbre<br />
- diabete mellito (dopo terapia insulinica)<br />
- diabete insipido<br />
- mineralcorticoidi (ritenzione di sodio)<br />
- nefropatie, ostruzione postrenale<br />
Abbassamento - aumento della perdita di sali (vomito, diarrea, sudorazione)<br />
- assunzione insufficiente di sali<br />
- aumento dell'assunzione d'acqua<br />
- ipoadrenocorticismo<br />
- diuresi osmotica (p.es. diabete mellito)<br />
- insufficienza cardiaca congestizia (edema)<br />
- nefropatia<br />
- diuretici d'ansa (p.es. furosemide), antagonisti<br />
dell'aldosterone (p.es. spironolattone)<br />
- riduzione della pressione colloidosmotica (ipoalbuminemia)<br />
Fattori di interferenza Lipemia, iperproteinemia estrema<br />
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5 Chimica clinica 5 Chimica clinica<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
TLI cane<br />
TLI gatto<br />
1 ml S, (EP, HP)<br />
1 ml S, EP, HP<br />
Il test dell'immunoreattività tripsino-simile (TLI, Trypsin-Like-<br />
Immunoreactivity) misura gli enzimi tripsina e tripsinogeno<br />
specifici del pancreas nel sangue. L'integrazione orale con<br />
enzimi del pancreas non influisce sul risultato del test.<br />
Alterazioni infiammatorie di singoli tratti del pancreas, come<br />
anche una precedente assunzione di alimenti, possono<br />
condurre ad un aumento della concentrazione serica di TLI<br />
e quindi ad un'interpretazione scorretta del test.<br />
Prima del prelievo gli animali devono essere tenuti a digiuno<br />
per almeno 6 ore.<br />
Si tenga conto del fatto che un'EPI dovuta all'occlusione dei<br />
condotti escretori del pancreas non viene rilevata da questo<br />
test (in alternativa consigliamo in questo caso la determinazione<br />
dell'elastasi fecale canina 1).<br />
Indicazione Insufficienza pancreatica esocrina (EPI)<br />
Localizzazione Nel pancreas<br />
Aumento - pancreatite acuta (di breve durata)<br />
- riacutizzazione di una pancreatite cronica recidiva (per un<br />
chiarimento diagnostico consigliamo la determinazione della<br />
lipasi pancreatica specifica)<br />
Abbassamento - insufficienza pancreatica esocrina<br />
Fattori di interferenza Emolisi<br />
CLIA (1)<br />
RIA (3)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Trigliceridi 0,3 ml S, EP, HP Cinetica enzimatica, Fotometria (1)<br />
Indicazione Disturbi del metabolismo<br />
Localizzazione Assunti per via alimentare (lipidi esogeni) o formati<br />
nelle cellule epatiche (lipidi endogeni)<br />
Aumento Iperlipemia primaria (congenita)<br />
- iperlipemia idiopatica (con frequenza familiare p.es.<br />
nello Schnauzer nano e nel Beagle)<br />
- iperlipemia dei puledri<br />
- sindrome di lipomobilizzazione (bovino)<br />
Iperlipemia secondaria (acquisita)<br />
- iperlipemia postprandiale:<br />
fino a 12 ore dopo sono possibili valori elevati<br />
- diabete mellito<br />
- ipotiroidismo<br />
- iperadrenocorticismo<br />
- somministrazione di glucocorticoidi<br />
- colestasi<br />
- pancreatite acuta, necrosi pancreatica<br />
- enteropatia essudativa<br />
- sindrome nefrosica<br />
- (digiuno negli animali obesi)<br />
Fattori di interferenza Assunzione di alimenti (lasciare a digiuno per 12 ore!)<br />
Forte affaticamento<br />
Troponina I 0,5 ml S CLIA (1)<br />
Indicazione Diagnosi di danni (acuti) del muscolo cardiaco<br />
Localizzazione Muscolo cardiaco, (muscolatura scheletrica)<br />
Aumento Cardiomiopatie con danni delle cellule del muscolo cardiaco<br />
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5 Chimica clinica 5 Chimica clinica<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Urea-N (BUN)<br />
Urea-N (BUN) (mg/dl)<br />
x 2,14 = Urea (mg/dl)<br />
Indicazione Nefropatie (Epatopatie)<br />
Localizzazione È un prodotto del metabolismo delle proteine nel fegato<br />
L'eliminazione avviene principalmente attraverso i reni<br />
Aumento dipendente dall'alimentazione!<br />
Abbassamento abbassamento specifico<br />
- epatopatie gravi<br />
- shunt portosistemico<br />
Fattori di interferenza (Emolisi)<br />
0,3 ml S, EP, HP Cinetica enzimatica, Fotometria (1)<br />
aumento specifico<br />
- nefropatie (con la perdita funzionale di almeno il 75 %<br />
dei nefroni)<br />
- azotemia postrenale<br />
aumento aspecifico<br />
- dopo un pasto ricco di proteine<br />
- disidratazione<br />
- insufficienza cardio-circolatoria<br />
- emorragia gastro-intestinale<br />
- aumento del metabolismo, p.es. febbre, infezioni<br />
- traumi muscolari, forte affaticamento fisico<br />
- farmaci (p.es. glucocorticoidi, tetracicline, tiroxina)<br />
- ipertiroidismo<br />
- ipoadrenocorticismo<br />
abbassamento aspecifico<br />
- dieta povera di proteine<br />
- dovuto a steroidi anabolici<br />
- poliuria/polidipsia grave (p.es. iperadrenocorticismo,<br />
diabete insipido)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Vitamina A 1 ml S, EP, HP HPLC (3)<br />
Indicazione Cheratinizzazione metaplastica dell'epitelio<br />
Aumentata predisposizione alle infezioni<br />
Sintomi oculari vari<br />
Disturbi della fertilità<br />
Osteopatie<br />
Neuropatie<br />
Localizzazione Forma attiva = retinolo<br />
trasformato dal ß-carotene (ad eccezione del gatto).<br />
L'organo principale di riserva è il fegato<br />
Abbassamento - dovuto all'alimentazione<br />
- carenza di proteine di trasporto<br />
- diarrea<br />
- infezioni e parassitosi (aumento del consumo)<br />
- epatopatie (disturbi di immagazzinamento)<br />
- disturbi di assimilazione del carotene<br />
(elevato tenore di nitrati, carenza di fosfati e vitamina E)<br />
Aumento - dovuto all'alimentazione<br />
Attenzione Inviare il campione protetto dalla luce e refrigerato!<br />
Vitamina B1 (tiamina) 1 ml EB HPLC (3)<br />
Indicazione Disturbi del sistema nervoso centrale<br />
Localizzazione Coenzima nel metabolismo dei chetoni<br />
(trasformazione di piruvato in Acetil-CoA)<br />
Abbassamento - batteri produttori della tiaminasi<br />
- dovuto all'alimentazione (alimentazione esclusiva con<br />
pesce crudo)<br />
- CCN (necrosi corticale nella pecora)<br />
Attenzione Inviare sangue con EDTA protetto dalla luce!<br />
92 93
5 Chimica clinica 5 Chimica clinica<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Vitamina B2 (riboflavina) 2 ml EB HPLC (3)<br />
Indicazione Inibizione della crescita, disturbi della fertilità<br />
Malattie della pelle e del corno<br />
Anemia<br />
Riduzione dell'immunità<br />
Congiuntivite/cheratite<br />
Miopatie<br />
Localizzazione Coinvolta nei processi ossidativi<br />
Abbassamento - dovuto all'alimentazione<br />
Attenzione Inviare sangue con EDTA protetto dalla luce!<br />
Vitamina B6 (piridossina) 1 ml S, EP, HP HPLC (3)<br />
Indicazione Anemia, dimagrimento (gatto, cavallo, bovino)<br />
Convulsioni (gatto)<br />
Disturbi della crescita, diarrea, atrofia muscolare (suino)<br />
Localizzazione Coenzima del metabolismo degli aminoacidi<br />
Il gatto presenta un fabbisogno particolarmente elevato<br />
Abbassamento - farmaci (p.es. penicillamina)<br />
- dovuto all'alimentazione (equiseto o "coda di cavallo")<br />
Attenzione Inviare il campione protetto dalla luce!<br />
Vitamina B12 (cobalamina) 1 ml S, EP, HP ECLIA (1)<br />
Indicazione Patologie gastrointestinali<br />
Localizzazione Metabolizzazione dell'acido propionico<br />
Risintesi della metionina<br />
Abbassamento - disturbi di assorbimento dell'intestino, insufficienza<br />
pancreatica (mancanza del fattore intrinseco)<br />
- riduzione dell'assunzione di cobalto<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Vitamina D3 (1,25-di-OH)<br />
Vitamina D3 (25-OH)<br />
1 ml S, EP, HP<br />
1 ml S, EP, HP<br />
Indicazione Osteopatie<br />
Localizzazione Viene sintetizzata nella pelle a partire dal 7-deidrocolesterolo<br />
oppure assorbita nell'intestino tenue per via alimentare. Nel<br />
fegato viene idrossilata in 25-idrossicolecalciferolo, nei reni<br />
trasformata in 1,25-diidrossicolecalciferolo.<br />
Abbassamento - epatopatie<br />
- nefropatie<br />
- eccesso di fosfati<br />
- crescita rapida<br />
- carenza di luce UV<br />
- diarrea cronica<br />
Aumento - iatrogeno (somministrazione di una dose 10 volte superiore<br />
rispetto a quella necessaria)<br />
- dovuto all'alimentazione<br />
Vitamina E (tocoferolo) 1 ml S, EP, HP HPLC (3)<br />
Indicazione Miopatie<br />
Ritenzione della placenta, disturbi della fertilità<br />
Malattia del grasso giallo (Yellow Fat Disease) (cavallo, gatto)<br />
Potente antiossidante<br />
Abbassamento - basso contenuto vitaminico nell'alimentazione (cattivo<br />
immagazzinamento o denaturazione)<br />
- tenore elevato di acidi grassi insaturi<br />
- carenza di vitamina A e di carotene<br />
- aumento del fabbisogno (prestazioni, affaticamento,<br />
epatopatia)<br />
- carenza di selenio<br />
Vitamina H (biotina) 1 ml S, EP, HP Dosaggio a legame enzimatico (3)<br />
Indicazione Patologie cutanee, del mantello e del corno<br />
Disturbi della crescita<br />
Disturbi della fertilità<br />
Localizzazione Coinvolta in numerosi processi di carbossilazione<br />
Sintetizzata nell'intestino<br />
Abbassamento raro<br />
- dovuto all'alimentazione<br />
94 95<br />
RIA (3)<br />
RIA (3)
5 Chimica clinica<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Zinco 0,5 ml S, EP, HP<br />
Peli<br />
Uccelli E' sufficiente una quantità di siero nettamente inferiore<br />
(< = 400 µl)<br />
Indicazione Paracheratosi ed ipercheratosi della cute<br />
Disturbi delle prestazioni, della fertilità e della crescita<br />
Disturbi della cicatrizzazione delle ferite<br />
Riduzione della risposta immunitaria<br />
Intossicazione da zinco negli uccelli<br />
Localizzazione Svolge un ruolo nel metabolismo delle proteine, dei lipidi e<br />
della vitamina A e nella risposta immunitaria<br />
Abbassamento - dovuto all'alimentazione<br />
- antagonisti dello zinco<br />
- riduzione dell'assorbimento dello zinco<br />
Aumento (negli uccelli) - voliere zincate<br />
Per valori dello zinco > 2000 µg/l sussiste il sospetto di<br />
un'intossicazione da zinco.<br />
Attenzione Non utilizzare Vacutainer o provette di vetro per il siero!<br />
96<br />
ICP-AES (1)<br />
ICP-AES (2)<br />
ICP-MS (1)
6.1 Farmaci<br />
6 Tossicologia e rilevazione dei farmaci<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Bromuro 0,5 ml S, EP, HP ICP-MS (1)<br />
Test di controllo del livello di sostanza attiva nel corso di una<br />
terapia con bromuro di potassio. Il prelievo dei campioni<br />
ematici deve avvenire poco prima della somministrazione del<br />
farmaco, 1 mese ca. e 4 mesi ca. a partire dall'inizio della<br />
terapia o dal momento in cui viene modificato il protocollo. In<br />
seguito eseguire analisi di controllo ogni 6 - 9 mesi.<br />
Digossina 1 ml S Fotometria (1)<br />
Test di controllo del livello di sostanza attiva nel corso di una<br />
terapia con digossina. Il prelievo dei campioni ematici deve<br />
avvenire 8 ore dopo la somministrazione del farmaco e almeno<br />
a 10 giorni di distanza dall'inizio della terapia o dal momento<br />
in cui viene modificato il protocollo.<br />
Attenzione non utilizzare provette per sierare contenenti gel separatore!<br />
Fenobarbitale 1 ml S Fotometria (1)<br />
Test di controllo del livello di sostanza attiva nel corso di una<br />
terapia con fenobarbitale. Il prelievo dei campioni ematici deve<br />
avvenire dopo 4 - 6 ore dalla somministrazione del farmaco, in<br />
caso di una sola misurazione; se le misurazioni effettuate sono<br />
due, il prelievo del secondo campione ematico deve avvenire<br />
poco prima della somministrazione del farmaco. Le misurazioni<br />
vanno effettuate almeno a 10 giorni di distanza dall'inizio della<br />
terapia o dal momento in cui viene modificato il protocollo.<br />
Attenzione non utilizzare provette per sierare contenenti gel separatore!<br />
97
6 Tossicologia e rilevazione dei farmaci<br />
6.2 Tossicologia<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Arsenio 0,5 ml S/U ICP-MS (1)<br />
Cadmio 0,5 ml S ICP-MS (1)<br />
Cobalto 0,5 ml S ICP-MS (1)<br />
Cromo 1 ml S ICP-MS (1)<br />
Molibdeno 1 ml S ICP-MS (1)<br />
Nichel 0,5 ml S/U ICP-MS (1)<br />
Piombo 0,5 ml EB ICP-MS (1)<br />
Tallio 0,5 ml S ICP-MS (1)<br />
Tallio (Urina) 0,5 ml U ICP-AES (1)<br />
Tallio (Peli) Peli ICP-AES (1)<br />
Ulteriori elementi sono eseguibili su richiesta.<br />
98<br />
6.3 Screening per droghe e farmaci<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Profilo per compravendita 20 ml S/U GC/MS, LC/MS (3)<br />
Screening per glucocorticoidi (cfr. sotto) + Screening per FANS (cfr. sotto) +<br />
Isoxsuprina, Teofillina, Acepromazina<br />
Screening per sostanze<br />
dopanti rilevanti<br />
Glucocorticoidi compreso cortisolo, FANS,<br />
Stimolanti, Sedativi/tranquillanti<br />
Steroidi anabolizzanti, Narcotici,<br />
Antidepressivi triciclici e altri<br />
Attenzione I valori limite di misurazione potrebbero essere più elevati rispetto<br />
ai valori singoli<br />
Screening per<br />
anabolizzanti<br />
Nandrolone, Boldenone, 17-α-metiltestosterone,<br />
Mesterolone, Fluossimesterone<br />
Attenzione Questo esame viene eseguito solo su urine!<br />
Screening per<br />
antinfiammatori<br />
Screening per glucocorticoidi (cfr. sotto) + Screening per FANS (cfr. sotto)<br />
Screening per stimolanti 10 ml S/U GC/MS, EIA (3)<br />
Teofillina, Teobromina,<br />
Anfetamine, Caffeina, Cocaina<br />
6 Tossicologia e rilevazione dei farmaci<br />
20 ml S/U GC/MS, LC/MS (3)<br />
10 ml U GC/MS, LC/MS (3)<br />
15 ml S/U GC/MS, LC/MS (3)<br />
99
6 Tossicologia e rilevazione dei farmaci<br />
6.3 Screening per droghe e farmaci<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Screening per FANS 10 ml S/U GC/MS, LC/MS (3)<br />
Fenilbutasone, Flunixin meglumine,<br />
Acido meclofenamico, Ketoprofene,<br />
Vedaprofene, Salicilato, Acido Flufenamico,<br />
Diclofenac, Naproxene, Paracetamolo, Meloxicam e altri<br />
Screening per<br />
glucocorticoidi<br />
Cortisolo esogeno ed endogeno, Betametasone,<br />
Flumetasone, Prednisolone, Desametasone, Triamcinolone<br />
Screening per<br />
sedativi/tranquillanti<br />
Fenotiazine, Benzodiazepine,<br />
Detomidina, Romifidina, Xilazina,<br />
Medetomidina e altri<br />
Screening per droghe e<br />
farmaci<br />
Screening per FANS (cfr. sopra) + Analgesici, Antidepressivi,<br />
Antiepilettici, Antiflogistici, Barbiturici, ß-bloccanti,<br />
Glucocorticoidi, Farmaci cardiaci, Anestetici locali,<br />
Sedativi, Stimolanti, Simpaticomimetici<br />
Richieste di parametri<br />
singoli (qualitativo)<br />
100<br />
10 ml S/U LC/MS (3)<br />
10 ml S/U GC/MS, EIA (3)<br />
10 ml S/U GC/MS, LCMS, EIA (3)<br />
10 ml S/U<br />
In caso di sospetto concreto della somministrazione di una<br />
particolare sostanza non compresa fra quelle elencate (varie<br />
droghe o farmaci) si prega di mettersi in contatto con il nostro<br />
laboratorio per informarsi sulle possibilità di rilevazione!<br />
P.es. Procaina, Cimetidina, Furosemide ecc.
7 Malattie gastrointestinali, epatiche e pancreatiche<br />
7.1 Malattie gastrointestinali<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Profilo diarrea B<br />
(cane, gatto)<br />
TLI, Folati, Vit. B 12<br />
Profilo diarrea C<br />
(cane, gatto)<br />
Profilo diarrea E<br />
(solo cane)<br />
Germi fecali - coltura<br />
semiquantitativo<br />
Salmonella - coltura<br />
qualitativo<br />
Clostridium spp. -<br />
coltura quantitativo<br />
Enterotossina di<br />
Clostridium perfringens<br />
3 ml S<br />
Feci (almeno 1 provetta piena) (1)<br />
cfr. → capitolo 16, Microbiologia<br />
Feci (almeno 1 provetta piena) (1)<br />
cfr. → capitolo 16, Microbiologia<br />
Feci, tampone rettale Esame colturale (1)<br />
cfr. → capitolo 16, Microbiologia<br />
Feci, tampone rettale Esame colturale (1)<br />
cfr. → capitolo 16, Microbiologia<br />
Feci Esame colturale (1)<br />
cfr. → capitolo 16, Microbiologia<br />
Feci ELISA (2)<br />
cfr. → capitolo 16, Microbiologia<br />
101
7 Malattie gastrointestinali, epatiche e pancreatiche 7 Malattie gastrointestinali, epatiche e pancreatiche<br />
7.1 Malattie gastrointestinali 7.2 Malattie epatiche<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Folati 1 ml S, EP, HP ECLIA (1)<br />
Vitamina B12<br />
(cobalamina)<br />
cfr. → capitolo 5, Chimica clinica<br />
cfr. → capitolo 5, Chimica clinica<br />
cfr. → capitolo 16, Microbiologia<br />
Attenzione Per non avere il risultato dell'esame falsamente positivo,<br />
nei 3 giorni precedenti il prelievo evitare di alimentare<br />
l'animale con carne.<br />
Virologia generale -<br />
microscopia elettronica<br />
Endoparassiti<br />
(cane/gatto/suino/volatili/<br />
coniglio/animali domestici<br />
di piccola taglia)<br />
1 ml S, EP, HP ECLIA (1)<br />
Sangue occulto Feci (1/3 provetta) Cromatografia (2)<br />
Feci (almeno 1/2 provetta) Microscopia elettronica (3)<br />
Rilevazione e classificazione dei virus eliminati con le feci per<br />
mezzo di microscopia elettronica.<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive per la rilevazione di<br />
Coronavirus, Rotavirus e Parvovirus.<br />
Feci (almeno 1/2 provetta) Flottazione (1)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Attenzione Per le analisi di parassiti nelle feci, si prega di prendere il<br />
materiale da analizzare in diversi punti del campione fecale!<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Endoparassiti<br />
(cavallo/ruminanti)<br />
Giardia (Ag)<br />
(cane, gatto)<br />
n Parvovirosi/ Panleucopenia<br />
Parvovirus (Ag)<br />
(cane, gatto)<br />
Parvovirus (Ac)<br />
(cane, gatto)<br />
n Infezione da Rotavirus<br />
n Infezione da Helicobacter<br />
Feci (almeno 1 provetta piena) Flottazione, sedimentazione,<br />
metodo dell'imbuto di Baermann (1)<br />
cfr. → capitolo 17, Parassitologia<br />
Feci (2-3 grammi) ELISA (1)<br />
Criptosporidi (Ag) Feci (2-3 grammi) ELISA (1)<br />
Feci (5-10 grammi), Immunocromatografia (1)<br />
tampone rettale Feci (cane) EIA (1)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
0.5 ml S HI (1)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Rotavirus (Ag) Feci, biopsia gastrica PCR (1)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Helicobacter spp. (DNA) Feci, biopsia gastrica PCR (1)<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
102 103
7 Malattie gastrointestinali, epatiche e pancreatiche 7 Malattie gastrointestinali, epatiche e pancreatiche<br />
7.3 Malattie del pancreas esocrino 7.3 Malattie del pancreas esocrino<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Profilo epatico 1 1 ml S<br />
Urea-N (BUN), Bilirubina totale, ALT (GPT), ALP, γ-GT,<br />
GLDH, AST (GOT), Acidi biliari, Albumina<br />
Profilo epatico 2<br />
(cane, gatto)<br />
Come "Profilo epatico 1" + Quadro ematico parziale, PT,<br />
aPTT, Elettroforesi sieroproteica<br />
n Epatite Contagiosa Canina<br />
n Leptospirosi<br />
1 ml S + 1 ml EB + 1 ml CP congelato + striscio<br />
ematico<br />
Adenovirus (Ac) (cane) 0,5 ml S CF (3)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Leptospira (Ac) 1 ml S MAT (1)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Leptospira spp. (DNA) 2 ml EB, 5 ml U, umore acqueo, corpo vitreo real time-PCR (1)<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Profilo diarrea B<br />
(cane, gatto)<br />
TLI, Folati, Vit. B 12<br />
Profilo diarrea C<br />
(cane, gatto)<br />
Profilo della diarrea E<br />
(solo cane)<br />
3 ml S<br />
Feci (almeno 1 provetta piena) (1)<br />
cfr. → capitolo 16, Microbiologia<br />
Feci (almeno 1 provetta piena) (1)<br />
cfr. → capitolo 16, Microbiologia<br />
TLI (cane) 1 ml S, (EP, HP) CLIA (1)<br />
cfr. → capitolo 5, Chimica clinica<br />
fTLI (gatto) 1 ml S, EP, HP RIA (3)<br />
cfr. → capitolo 5, Chimica clinica<br />
Spec cPL ® (cane) 1 ml S ELISA (1)<br />
cfr. → capitolo 5, Chimica clinica<br />
Spec fPL (gatto) 0.5 ml S ELISA (1)<br />
cfr. → capitolo 5, Chimica clinica<br />
104 105
7 Malattie gastrointestinali, epatiche e pancreatiche<br />
7.3 Malattie del pancreas esocrino<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Elastasi Feci (5-10 grammi) ELISA (1)<br />
cfr. → capitolo 16, Microbiologia<br />
Folati 1 ml S, EP, HP ECLIA (1)<br />
Vitamina B12<br />
(cobalamina)<br />
Assorbimento -<br />
microscopia<br />
106<br />
cfr. → capitolo 5, Chimica clinica<br />
1 ml S, EP, HP ECLIA (1)<br />
cfr. → capitolo 5, Chimica clinica<br />
Feci (5-10 grammi) Esame microscopico (2)<br />
cfr. → capitolo 16, Microbiologia
8.1 Analisi del sangue<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Urea-N (BUN), Creatinina,<br />
Proteine totali, Sodio,<br />
Potassio, Calcio,<br />
Fosfati<br />
Leptospira spp.<br />
(DNA)<br />
Clearance della<br />
creatinina esogena<br />
Profilo PU/PD<br />
(poliuria/polidipsia)<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Quadro ematico completo, Creatinina,<br />
Calcio, Sodio, Potassio, Glucosio,<br />
Fruttosamine, ALT (GPT), ALP,<br />
Acidi biliari, Proteine totali, Albumina,<br />
Esame chimico fisico delle urine,<br />
Sedimento urinario, Rapporto Proteine/Creatinina urinarie,<br />
Rapporto Cortisolo/Creatinina urinarie (cane),<br />
T4 (gatto)<br />
8 Malattie renali e delle vie urinarie<br />
Profilo renale 1 ml S (1)<br />
0,5 ml EB, 5 ml U, umore acqueo, corpo vitreo PCR (1)<br />
Leptospira (Ac) 1 ml S MAT (1)<br />
4 x 0.5 ml S Fotometria (1)<br />
Questa procedura serve per valutare la funzionalità di filtrazione<br />
glomerulare dei reni. Il calcolo si basa sulla velocità di eliminazione<br />
della creatinina (marcatore esogeno somministrato a tal scopo) dal<br />
siero. Dopo il prelievo per la determinazione della concentrazione<br />
sierica della creatinina basale endogena e quindi l'iniezione della<br />
creatinina marcatrice, vengono prelevati 3 campioni successivi<br />
nell'arco di 3 - 8 ore. Per avere istruzioni precise sull'esecuzione<br />
del test, siete pregati di contattare il nostro laboratorio.<br />
1 ml S + 1 ml EB + striscio ematico + 10 ml U<br />
107
8 Malattie renali e delle vie urinarie 8 Malattie renali e delle vie urinarie<br />
8.2 Analisi dell'urina 8.2 Analisi dell'urina<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Urine chimico-fisico 5 ml U Cartine urinarie, Refrattometro (1)<br />
pH, Proteine, Glucosio,Nitriti, Corpi chetonici, Sangue,<br />
Bilirubina, Urobilinogeno, Peso specifico<br />
Peso specifico urinario 0,2 ml U Refrattometro (1)<br />
Sedimento urinario 5 ml U Microscopia (1)<br />
Leucociti, Eritrociti Lo stoccaggio dell'urina dà luogo ad alterazioni cellulari e a<br />
Cellule epiteliali, proliferazione di batteri. Fino al momento della spedizione<br />
Cristalli, Cilindri conservare l'urina in frigorifero. Il raffreddamento può tuttavia<br />
provocare la formazione di cristalli, che non erano presenti<br />
originariamente nell'urina<br />
Escrezione frazionata<br />
degli elettroliti (FE)<br />
(cavallo)<br />
Rapporto proteine/<br />
creatinina urinarie<br />
In caso di risultato positivo della rilevazione di nitrati o di<br />
rilevazione di batteri nel sedimento, consigliamo di procedere<br />
anche ad un esame batteriologico. Per questo esame occorre<br />
una seconda spedizione di urina prelevata sterilmente.<br />
cfr. → cap. 5, Chimica clinica<br />
Indicazione Nefropatie, differenziazione delle proteinurie<br />
Questo test si basa sulla buona correlazione che sussiste fra il<br />
rapporto proteine/creatinina urinarie e l'eliminazione di proteine<br />
nel giro di 24 ore e serve ad individuare la causa della proteinuria.<br />
Vista la sua elevata sensibilità può essere impiegato per la<br />
rilevazione precoce di glomerulopatie. La creatinina è utilizzata<br />
esclusivamente come parametro di riferimento.<br />
Aumento Proteinuria renale, proteinuria postrenale<br />
Aumento elevato: glomerulonefrite, amiloidosi renale<br />
Aumento modesto: nefrite interstiziale, nefropatie croniche<br />
Fattori di disturbo Piuria, ematuria<br />
2 ml S + 5 ml U Fotometria (1)<br />
1 ml U Fotometria (1)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Elettroforesi urinaria<br />
(SDS-Page)<br />
5 ml U Elettroforesi SDS-Page (3)<br />
Indicazione Differenziazione ulteriore della proteinuria<br />
Con questa procedura analitica si possono valutare sia la<br />
struttura generale delle proteine urinarie che l'eliminazione di<br />
singole proteine con peso molecolare definito. La quantità e la<br />
composizione delle proteine contenute nell'urina forniscono<br />
informazioni sulla localizzazione e sulle dimensioni del danno<br />
renale (differenziazione tra danno glomerulare e tubulare). È<br />
possibile identificare la proteinuria extrarenale.<br />
Fisiologico Proteine > 67.000 D vengono trattenute dalla membrana basale<br />
glomerulare, una quantità ridotta viene filtrata a livello glomerulare.<br />
Proteine < 40.000 D passano attraverso la membrana basale, la<br />
maggior parte viene riassorbita a livello tubulare.<br />
Proteinuria prerenale Aumento di proteine micromolecolari<br />
Indicazione di: proteine Bence-Jones, mioglobina,<br />
emoglobina, α 1-microglobulina<br />
Proteinuria glomerulare Aumento di proteine macromolecolari<br />
Filtrazione glomerulare: difettosa<br />
Riassorbimento tubulare: intatto<br />
Soltanto in caso di superamento della capacità di riassorbimento<br />
delle proteine tubulari → Proteinuria glomerulare.<br />
Indicazione di: albumina ed eventuali IgG<br />
Proteinuria tubulare Aumento di proteine micromolecolari<br />
Filtrazione glomerulare: intatta<br />
Riassorbimento tubulare: difettoso<br />
Indicazione di: albumina, α 1-microglobulina<br />
Proteinuria glomerulo-tubulare Aumento di proteine micromolecolari e macromolecolari<br />
Filtrazione glomerulare: difettosa<br />
Riassorbimento tubulare: difettoso<br />
Indicazione di: IgG, albumina, α 1-microglobulina<br />
Proteinuria postrenale Aumento di proteine macromolecolari > 250.000 D<br />
(emorragie post-glomerulari ed infiammazioni delle vie<br />
urinarie)<br />
Indicazione di: IgG, albumina<br />
108 109
8 Malattie renali e delle vie urinarie<br />
8.2 Analisi dell'urina<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Osmolalità urinaria 2 ml U Abbassamento del punto<br />
di congelamento (3)<br />
Abbassamento - insufficienza renale cronica<br />
- (insufficienza renale acuta)<br />
Analisi dei calcoli urinari Calcoli urinari Spettrometria ad infrarossi (2)<br />
Batteriologia, coltura<br />
aerobica<br />
110<br />
Vengono rilevate la grandezza, la forma, l'aspetto e la<br />
composizione chimica dei calcoli (spettrometria ad infrarossi)<br />
U (sterili) Esame colturale (1)<br />
La coltura aerobica consente la rilevazione della maggior parte<br />
delle specie di germi patogeni. Nel caso dell'esame batteriologico<br />
dell'urina vengono indicati e valutati il tipo e il numero di germi<br />
presenti. Eseguendo inoltre un test di rilevazione degli inibitori<br />
si ottengono informazioni sull'eliminazione di sostanze<br />
antibatteriche con l'urina.<br />
cfr. → capitolo 16, Microbiologia<br />
8.2 Analisi dell'urina<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Screening carcinoma<br />
a cellule T (TCC)<br />
(solo cane)<br />
8 Malattie renali e delle vie urinarie<br />
1 ml U Test di agglutinazione su latex (2)<br />
L'analisi è un test di screening nel cane con predisposizione<br />
(p.es. genetica) per i tumori delle vie urinarie. In caso di tumori<br />
già diagnosticati è opportuno eseguire il test solo in mancanza<br />
di ematuria.<br />
I carcinomi a cellule transizionali (TCC, Transitional Cell<br />
Carcinoma) costituiscono nel cane la maggior parte delle<br />
neoplasie maligne del tratto urinario inferiore. Essi appaiono<br />
sotto forma di tumori singoli o multipli e in stato avanzato<br />
sono caratterizzati da metastasi nei linfonodi locali ed in altri<br />
organi.Tramite un test di agglutinazione su latex vengono<br />
rilevati nell'urina i complessi proteici associati con il carcinoma<br />
a cellule transizionali (sensibilità 90 %; specificità 78 %).<br />
Attenzione Sono possibili risultati erroneamente positivi nei seguenti casi:<br />
- ematuria<br />
- forte proteinuria<br />
- forte glicosuria<br />
- piuria<br />
Stabilità dei campioni: 48 ore (se in questo arco di tempo non può<br />
essere garantito l'arrivo dei campioni al laboratorio, si prega di<br />
inviare campioni congelati).<br />
111
9 Malattie muscolari, scheletriche, articolari 9 Malattie muscolari, scheletriche, articolari<br />
9.1 Malattie muscolari infettive 9.2 Malattie muscolari non infettive<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Toxoplasmosi<br />
Toxoplasma<br />
(rilevazione diretta)<br />
Toxoplasma gondii<br />
(DNA)<br />
n Infezione da Neospora<br />
Neospora caninum (Ac)<br />
(cane)<br />
Feci Flottazione (1)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
PCR (1)<br />
Toxoplasma (Ac) 1 ml S, EP, HP IFT (1)<br />
1 ml S, EP, HP IFT (3)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Profilo muscolare 1 ml S<br />
CK, LDH, AST (GOT),<br />
Calcio<br />
n Miastenia grave<br />
n Miosite dei muscoli masticatori<br />
n HYPP<br />
cfr. → capitolo 3, Programmi di ricerca speciali/Profili d'organo<br />
Acido lattico 0,3 ml NaF (plasma) Fotometria (1)<br />
cfr. → capitolo 5, Chimica clinica<br />
Vitamina E (tocoferolo) 2 ml S, EP, HP HPLC (3)<br />
cfr. → capitolo 5, Chimica clinica<br />
Selenio 0,5 ml S, Peli ICP-AES (1, 2)<br />
ICP-MS (1)<br />
cfr. → capitolo 5, Chimica clinica<br />
Acetilcolina-recettore (Ac) 1 ml S, EP, HP RIA (3)<br />
cfr. → capitolo 14, Immunologia e allergie<br />
Anticorpi 2-M 2 ml S ELISA (3)<br />
cfr. → capitolo 14, Immunologia e allergie<br />
HYPP 1 ml EB PCR (1)<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
112 113
9 Malattie muscolari, scheletriche, articolari 9 Malattie muscolari, scheletriche, articolari<br />
9.3 Malattie ossee non infettive<br />
9.4 Malattie articolari infettive<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Malattie ossee non infettive<br />
Vitamina D3 (1.25-di-OH)<br />
Vitamina D3 (25-OH)<br />
n Malattie articolari infettive<br />
cfr. → capitolo 5, Chimica clinica<br />
Profilo sinoviale 1 1 ml liquido sinoviale<br />
Conta cellulare, Proteine totali,<br />
Colore,Viscosità, Torbidità<br />
Profilo sinoviale 2 2 ml liquido sinoviale<br />
Profilo sinoviale I + Esame citologico<br />
Attenzione Già poche ore dopo il prelievo i risultati analitici possono<br />
venire sensibilmente influenzati (p.es. tramite lisi cellulare); se<br />
necessario, inviare il materiale refrigerato. Per l'esame citologico<br />
preparare eventualmente anche uno striscio cellulare del<br />
sedimento (centrifugare a 1500/giri min. per 3 - 5 minuti).<br />
Profilo sinoviale 3 2 ml liquido sinoviale<br />
Profilo sinoviale II + Esame batteriologico<br />
(coltura aerobica ed anaerobica)<br />
1 ml S, EP, HP RIA (3)<br />
1 ml S, EP, HP RIA (3)<br />
Attenzione Già poche ore dopo il prelievo i risultati analitici possono<br />
venire sensibilmente influenzati (p.es. tramite lisi cellulare); se<br />
necessario, inviare il materiale refrigerato. Per l'esame citologico<br />
preparare eventualmente anche uno striscio cellulare del<br />
sedimento (centrifugare a 1500/giri min. per 3 - 5 minuti).<br />
In caso di presenza di germi patogeni verranno eseguiti<br />
automaticamente differenziazione ed antibiogramma; questi<br />
sono compresi nel prezzo.<br />
9.4 Malattie articolari infettive<br />
9.5 Malattie articolari non infettive<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Borreliosi<br />
Borrelia burgdorferi<br />
sensu lato (DNA)<br />
Borrelia C6 qualitativo<br />
(Ac)<br />
Borrelia Quant C6 ®<br />
quantitativo (Ac)<br />
(solo cane)<br />
n Poliartrite reumatoide<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
Borrelia (Ac) 1 ml S, EP, HP ELISA (1)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Borrelia (Ac) 1 ml S, EP, HP Immunoblot (1)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Fattori reumatici 1 ml S Test di Waaler-Rose (1)<br />
cfr. → capitolo 14, Immunologia e allergie<br />
n Lupus eritematoso sistemico<br />
(LES o SLE: Systemic Lupus Erythematosus)<br />
Anticorpi antinucleari<br />
(ANA)<br />
1 ml S, EP, HP ELISA (1)<br />
1 ml S ELISA (1)<br />
1 ml S, EP, HP IFT (1)<br />
cfr. → capitolo 14, Immunologia e allergie<br />
114 115<br />
PCR (1)
10 Malattie del sistema nervoso centrale 10 Malattie del sistema nervoso centrale<br />
10.1 Malattie infettive del sistema nervoso centrale (in ordine alfabetico) 10.1 Malattie infettive del sistema nervoso centrale (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Borna<br />
Borna (Ac) 1 ml S, EP, HP, Liquor IFT (3)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Borna (RNA) 1 ml liquor, p.m. dalla retina PCR (3)<br />
n Borreliosi<br />
Borrelia burgdorferi<br />
sensu lato (DNA)<br />
Borrelia-Screening<br />
qualitativo (Ac)<br />
Borrelia Quant C6 ®<br />
quantitativo (Ac)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
n Encefalite-artrite caprina (CAE, Caprine Arthritis Encephalitis)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
PCR (1)<br />
Borrelia (Ac) 1 ml S, EP, HP ELISA (1)<br />
Borrelia (Ac) 1 ml S, EP, HP Immunoblot (1)<br />
1 ml S, EP, HP ELISA (1)<br />
1 ml S ELISA (1)<br />
CAE (Ac) 1 ml S, EP, HP ELISA (3)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Encefalite da puntura di zecca/Meningoencefalite primaverile<br />
Encefalite da puntura<br />
di zecca (RNA)<br />
Encefalite da puntura<br />
di zecca (Ac)<br />
n Encefalitozoonosi/Nosematosi<br />
Encephalitozoon<br />
cuniculi<br />
n FIP, Peritonite infettiva felina<br />
FIP/Coronavirus felino,<br />
FECV (RNA)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
FIP/Coronavirus (Ac) 1 ml S, EP, HP IFT (1)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
n Herpesvirus Canino (CHV) (infezione da)<br />
0,5 ml liquor, zecca PCR (1)<br />
1 ml S CF (3)<br />
1 ml S, EP, HP e/o<br />
3 ml U IFT (1)<br />
CHV 1 (DNA) PCR (1)<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
CHV 1 (Ac) 1 ml S NT (1)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
real time-PCR (1)<br />
116 117
10 Malattie del sistema nervoso centrale 10 Malattie del sistema nervoso centrale<br />
10.1 Malattie infettive del sistema nervoso centrale (in ordine alfabetico) 10.1 Malattie infettive del sistema nervoso centrale (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Herpesvirus Equino (EHV) (infezione da)<br />
EHV 1/2/4/5 (DNA) PCR (1)<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
EHV 1/4 (Ac) 1 ml S NT (1)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
n Herpesvirus Felino (FHV) (infezione da)<br />
FHV 1 (DNA) real time-PCR (1)<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
FHV 1 (Ac) 1 ml S NT (3)<br />
n Maedi-Visna<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Maedi/Visna (Ac) 1 ml S, EP, HP ELISA (3)<br />
n Neospora (infezioni da)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Neospora caninum (Ac) 1 ml S, EP, HP IFT (3)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Toxoplasmosi<br />
Toxoplasma -<br />
rilevazione diretta<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Toxoplasma gondii (DNA) real time-PCR (1)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
Toxoplasma (Ac) 1 ml S, EP, HP IFT (1)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
n Analisi del liquido cefalorachidiano (liquor)<br />
Si prega di tener conto che già 4 ore dopo il prelievo i risultati dell'esame possono venire<br />
sensibilmente influenzati. (Per gli esami citologici può venire eventualmente preparato uno<br />
striscio cellulare del sedimento; centrifugare a 1000 giri/min per 5 minuti). Tramite la PCR<br />
possono venire rilevati nel liquor diversi agenti patogeni.<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
Profilo LCR 1 ca. 1 ml liquor<br />
Conta cellulare (leucociti, eritrociti), Proteine totali<br />
Feci Flottazione (1)<br />
Attenzione La conta cellulare deve avvenire il più presto possibile (fino ad un<br />
max. di 4 ore dopo il prelievo), in quanto in un ambiente povero di<br />
proteine come il liquor si sviluppa rapidamente un processo di lisi<br />
cellulare. Non si può quindi escludere che il trasporto non influenzi<br />
i risultati analitici.<br />
118 119
10 Malattie del sistema nervoso centrale<br />
10.1 Malattie infettive del sistema nervoso centrale (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Profilo LCR 2 ca. 3 ml liquor<br />
Come per "Profilo LCR 1" + Esame citologico<br />
Attenzione La conta cellulare deve avvenire il più presto possibile (fino ad un max.<br />
di 4 ore dopo il prelievo), in quanto in un ambiente povero di proteine<br />
come il liquor si sviluppa rapidamente un processo di lisi cellulare. Non<br />
si può quindi escludere che il trasporto non influenzi i risultati analitici.<br />
Profilo LCR 3 ca. 3 ml liquor<br />
Come per "Profilo LCR 2" + Esame batteriologico (aerobia + anaerobia)<br />
Attenzione La conta cellulare deve avvenire il più presto possibile (fino ad un max.<br />
di 4 ore dopo il prelievo), in quanto in un ambiente povero di proteine<br />
come il liquor si sviluppa rapidamente un processo di lisi cellulare. Non<br />
si può quindi escludere che il trasporto non influenzi i risultati analitici.<br />
120<br />
In caso di presenza di germi patogeni verranno eseguiti<br />
automaticamente differenziazione ed antibiogramma; questi<br />
sono compresi nel prezzo.<br />
10.2 Malattie non infettive del sistema nervoso centrale<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Encefalopatia epatica<br />
Ammoniaca 1 ml EP congelato Fotometria (1)<br />
cfr. → capitolo 5, Chimica clinica<br />
Attenzione Il sangue va prelevato in contenitori prerefrigerati, da chiudere<br />
immediatamente. Centrifugare il plasma e inviare congelato!<br />
Eseguire la determinazione con animale a digiuno da 12 ore!<br />
Test di tolleranza<br />
all'ammonio<br />
Per l'esecuzione ed l'interpretazione<br />
cfr. → capitolo 5, Chimica clinica<br />
n Misurazione degli antiepilettici<br />
10 Malattie del sistema nervoso centrale<br />
2 x 1 ml EP congelato Fotometria (3)<br />
Bromuro 0,5 ml S, EP, HP ICP-MS (1)<br />
cfr. → capitolo 6, Tossicologia e rilevazione dei farmaci<br />
Fenobarbitale 1 ml S Fotometria (1)<br />
cfr. → capitolo 6, Tossicologia e rilevazione dei farmaci<br />
121
11 Malattie cutanee 11 Malattie cutanee<br />
11.1 Malattie cutanee allergiche o infettive 11.1 Malattie cutanee allergiche o infettive<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Diagnostica allergologica.<br />
cfr. → capitolo 14, Immunologia e allergie<br />
n Sarcoptes<br />
Sarcoptes (Ac) 1 ml S ELISA (1)<br />
n Ectoparassiti<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Ectoparassiti Tessuto in formalina Microscopia (1)<br />
cfr. → capitolo 17, Parassitologia<br />
Ectoparassiti Raschiato cutaneo Microscopia (1)<br />
n Microbiologia<br />
Esame colturale<br />
(aerobia)<br />
Dermatofiti/<br />
funghi cutanei<br />
cfr. → capitolo 17, Parassitologia<br />
Tampone, tessuto ecc. Esame colturale (1)<br />
cfr. → capitolo 16, Microbiologia<br />
Raschiato cutaneo, peli (1)<br />
cfr. → capitolo 16, Microbiologia<br />
Lieviti e muffe Tampone ecc. (1)<br />
cfr. → capitolo 16, Microbiologia<br />
Attenzione I tamponi auricolari vengono da noi sottoposti di regola anche ad<br />
esame micologico, senza che sia necessaria una richiesta apposita.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Leishmaniosi<br />
Leishmania spp. (DNA) real time-PCR (1)<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
Leishmania (Ac) 1 ml S, EP, HP IFT (1)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
122 123
11 Malattie cutanee<br />
11.2 Malattie cutanee non infettive<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Anticorpi antinucleari<br />
(ANA)<br />
n Malattie cutanee endocrine<br />
cfr. → capitolo 12, Endocrinologia<br />
cfr. → capitolo 14, Immunologia e allergie<br />
Vitamina H (biotina) 1 ml S, EP, HP Dosaggio a legame enzimatico (3)<br />
Esami istologici<br />
della cute<br />
cfr. → capitolo 5, Chimica clinica<br />
Tallio (siero, peli, urina) 0,5 ml S, U, Peli ICP-MS (1)<br />
Zinco (siero, peli) 0,5 ml S, EP, HP, Peli ICP-AES (1)<br />
ICP-AES (2)<br />
ICP-MS (1)<br />
124<br />
1 ml S, EP, HP IFT (1)<br />
cfr. → capitolo 5, Chimica clinica<br />
cfr. → capitolo 18, Istologia
12.1. Ormoni / Patologie del surrene<br />
n Iperadrenocorticismo (morbo di Cushing)<br />
Il morbo di Cushing è una delle malattie endocrine più comuni del cane, mentre è raro nel<br />
gatto.<br />
La malattia colpisce di norma animali anziani (con più di 6 anni d'età), senza una significativa<br />
predilezione di sesso. Esiste una predisposizione di razza per Barbone, Bassotto, Beagle,<br />
Boxer, Terrier, Pastore tedesco e Labrador.<br />
A seconda dell'eziologia il morbo di Cushing viene suddiviso in:<br />
12 Endocrinologia<br />
a. Morbo di Cushing ipofisario (PDH, Pituitary Dependent Hyperadrenocorticism)<br />
A causa di un adenoma ipofisario (raramente ad un adenocarcinoma) si ha un aumento<br />
della secrezione di ACTH persistente che provoca a sua volta un'iperplasia corticosurrenalica<br />
bilaterale e di conseguenza un aumento della secrezione di cortisolo. A questa forma si<br />
devono ca. l'80- 85 % dei casi di morbo di Cushing nel cane.<br />
b. Morbo di Cushing surrenalico da tumore adrenocorticale<br />
(FAT, Functional Adrenocortical Tumor)<br />
Nel 15- 20 % dei casi un adenoma autonomo o un adenocarcinoma corticosurrenalico<br />
sono la causa di un'eccessiva produzione di cortisolo.<br />
c. Morbo di Cushing iatrogeno<br />
In seguito a somministrazione esogena per un lungo periodo di glucocorticoidi insorgono<br />
i sintomi tipici della malattia.<br />
L'eccessiva produzione di cortisolo dà luogo ad aumento della gluconeogenesi, soppressione<br />
immunitaria, azione antinfiammatoria, catabolismo proteico e accresciuta lipolisi.<br />
I sintomi più frequenti sono:<br />
PU/PD<br />
Polifagia<br />
Adiposità addominale<br />
"Addome pendulo"<br />
(epatomegalia, debolezza muscolare, accumulo di grasso intraddominale)<br />
Rarefazione del mantello fino ad alopecia<br />
(dopo la tosatura i peli quasi non crescono più)<br />
Cute sottile<br />
Respiro ansimante<br />
Lieve debolezza muscolare, atrofia muscolare<br />
Nel caso del cavallo il morbo di Cushing rappresenta l'unica endocrinopatia frequente e<br />
significativa ed è considerata una malattia del "cavallo vecchio". È dovuta ad una disfunzione<br />
della parte intermedia dell'ipofisi.<br />
Sintomi clinici caratteristici sono: irsutismo, ipotrofia muscolare, distribuzione anomala del<br />
grasso corporeo, debolezza, polidipsia/poliuria e laminite ricorrente.<br />
Per la diagnosi della sindrome di Cushing sono disponibili diversi parametri aspecifici come<br />
pure test funzionali endocrinologici.<br />
125
12 Endocrinologia 12 Endocrinologia<br />
12.1. Ormoni / Patologie del surrene<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Metodo<br />
Cortisolo 0,5 ml S, (EP), (HP) ECLIA (1)<br />
A causa della sua secrezione episodica nel caso del cane e<br />
dell'estrema dipendenza dallo stress nel caso del gatto, la<br />
determinazione di un solo valore del cortisolo non è indicata<br />
per la diagnosi del morbo di Cushing.<br />
Nel caso del cavallo con morbo di Cushing il livello di cortisolo<br />
rientra generalmente nella norma, dal momento che nel<br />
contesto della malattia è soprattutto il ritmo circadiano della<br />
secrezione ad essere alterato.<br />
n Test funzionali per la diagnosi dell'iperadrenocorticismo<br />
Test a basse dosi<br />
di desametasone<br />
(Test di screening, LDDS,<br />
Low-Dose-Dexamethason-<br />
Suppression)<br />
2 determinazioni del cortisolo<br />
3 determinazioni del cortisolo<br />
2 x 0,5 ml S, (EP), (HP) ECLIA (1)<br />
3 x 0,5 ml S, (EP), (HP) ECLIA (1)<br />
Principio del test L'ACTH prodotta dall'ipofisi stimola, sotto controllo ipotalamico,<br />
la secrezione corticosurrenalica di cortisolo. L'aumento del<br />
livello di cortisolo dà luogo, attraverso un meccanismo di<br />
feedback negativo, ad una diminuzione della secrezione di<br />
ACTH. Lo stesso accade nel caso della somministrazione<br />
esogena di desametasone.<br />
Fisiologia Dopo circa 2- 3 ore si arriva, per effetto del meccanismo di<br />
feedback negativo, ad una soppressione della secrezione di<br />
ACTH che dura per circa 24- 48 ore. La corticale del surrene<br />
produce meno cortisolo e il livello sierico di cortisolo diminuisce.<br />
Morbo di Cushing surrenalico I tumori corticosurrenalici producono autonomamente<br />
cortisolo. Il desametasone inibisce la secrezione di ACTH,<br />
senza però dar luogo ad una diminuzione della secrezione di<br />
cortisolo. Il livello di cortisolo non diminuisce o si riduce solo<br />
in maniera insignificante.<br />
Morbo di Cushing ipofisario Rispetto ad animali sani, la somministrazione di desametasone<br />
a pazienti con sindrome di Cushing non ha nessuna influenza o<br />
quasi sull'ipofisi. La secrezione di ACTH non viene inibita, o lo<br />
è solo per breve tempo, dopodiché la sua produzione riprende,<br />
stimolando in questo modo anche la secrezione corticosurrenalica<br />
del cortisolo. Il livello di cortisolo non diminuisce, se<br />
non in misura irrilevante o solo per breve tempo.<br />
12.1 Ormoni / Patologie del surrene<br />
La sensibilità di questo test è pari all'85- 95 %, la sua specificità si aggira sul 70-75 %.<br />
Esecuzione del test (cane/gatto) 1. primo prelievo = valore basale del cortisolo<br />
2. iniezione di desametasone 0,01 mg/kg p.c. EV (cane)<br />
iniezione di desametasone 0,1 mg/kg p.c. EV (gatto)<br />
3. secondo prelievo 8 ore p.inj. = valore di soppressione<br />
(eventualmente ulteriore prelievo a 4 ore p.inj.)<br />
Interpretazione (cane/gatto) - valore a 4 ore p.inj. e a 8 ore p.inj. < 1,0 µg/dl:<br />
fisiologico<br />
- valore a 4 ore p.inj. e a 8 ore p.inj. > 1,4 µg/dl:<br />
sospetto di Cushing (ipofisario o surrenalico)<br />
- valore a 4 ore p.inj. < 1,4 µg/dl e valore a 8 ore p.inj.<br />
>1,4 µg/dl<br />
oppure<br />
valore a 4 ore p.inj. < 50 % del valore basale e valore a<br />
8 ore p.inj. >1,4 µg/dl:<br />
sospetto di Cushing (ipofisario più probabile, ma<br />
surrenalico non da escludersi)<br />
- valore a 8 ore p.inj. < 50 % del valore basale ma<br />
>1,4 µg/dl:<br />
sospetto di Cushing (ipofisario più probabile, ma<br />
surrenalico non da escludersi)<br />
Esecuzione del test (cavallo) 1. primo prelievo (alle ore 17) = valore basale del cortisolo<br />
2. iniezione di desametasone 0,04 mg/kg p.c. IM<br />
3. secondo prelievo 19 ore p.inj. = valore di soppressione<br />
(alle ore 12)<br />
(eventualmente ulteriore prelievo 15 ore p.inj. (alle ore 8))<br />
Attenzione Contrassegnare le provette con le scritte "prelievo 1"<br />
e "prelievo 2"<br />
Interpretazione (cavallo) Il cavallo sano sopprime a valori di cortisolo inferiori a<br />
1,0-0,5 µg/dl. Se i valori a 15 e 19 ore p.inj. sono superiori a<br />
1,0 µg/dl si ha una disfunzione della parte intermedia dell'ipofisi.<br />
La soppressione prolungata può essere rappresentata determinando<br />
i valori a 15 e a 19 ore p.inj. Il cavallo con morbo di<br />
Cushing ha una soppressione molto meno consistente e spesso<br />
la soppressione prolungata manca del tutto.In caso di laminite<br />
si consiglia di procedere a una determinazione dell'ACTH.<br />
Il test di soppressione con desametasone nel caso di cane, gatto e cavallo è il test di scelta<br />
per la diagnosi di un iperadrenocorticismo.<br />
126 127
12 Endocrinologia 12 Endocrinologia<br />
12.1. Ormoni / Patologie del surrene 12.1. Ormoni / Patologie del surrene<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Test di stimolazione con ACTH<br />
(cane, gatto, cavallo)<br />
2 determinazioni del cortisolo 1 x 3 ml urina CLIA (1)<br />
Principio del test Con questo test è possibile controllare l'intensità di secrezione<br />
della corticale dei surreni. Cane, gatto: il test di stimolazione<br />
con ACTH è il test di scelta per la diagnosi di una sindrome<br />
di Cushing iatrogena, per il controllo terapeutico di un cane<br />
con iperadrenocorticismo, come pure per la diagnosi di un<br />
ipoadrenocorticismo<br />
Esecuzione del test 1. primo prelievo = valore basale del cortisolo<br />
2. iniezione di ACTH (p.es. Synacthen ®) EV/IM0,<br />
125 mg/animale per il gatto; 0,25 mg/animale per il<br />
cane (0,125 mg = 12,5 UI; 0,25 mg = 25 UI)<br />
3. secondo prelievo 1 ora p.inj. = valore di stimolazione<br />
Interpretazione (cane) valore basale < 0,5- 2 µg/dl e valore di stimolazione<br />
< 0,5 - 2 µg/dl:<br />
sindrome di Cushing iatrogena o sospetto di morbo di Addison<br />
Esecuzione del test (cavallo) 1. primo prelievo = valore basale del cortisolo alle ore 9<br />
2. iniezione di 1,0 mg = 100 UI ACTH EV (p.es. Synacthen ®)<br />
3. secondo prelievo 2 ore p.inj. = valore di stimolazione<br />
Interpretazione (cavallo) Nel cavallo sano il livello di cortisolo aumenta dell'80 % circa.<br />
Nel cavallo affetto da morbo di Cushing si ha un aumento di<br />
gran lunga superiore. Il cavallo affetto da ipoadrenocorticismo<br />
ha in genere valori basali di cortisolo molto bassi ed una<br />
secrezione di cortisolo scarsa o nulla dopo stimolazione.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Rapporto cortisolo/creatinina (cane, gatto)<br />
1 determinazione<br />
2 determinazioni<br />
3 determinazioni<br />
1 x 3 ml urina CLIA (1)<br />
2 x 3 ml urina CLIA (1)<br />
3 x 3 ml urina CLIA (1)<br />
Principio del test Gli animali con morbo di Cushing hanno un elevato livello di<br />
cortisolo sierico e un'aumentata secrezione di cortisolo<br />
nell'urina. La creatinina serve da parametro di riferimento<br />
relativo, dal momento che il livello di cortisolo nell'urina può<br />
aumentare anche in caso di un aumento non patologico del<br />
metabolismo (p.es. stress). Questo test di screening si<br />
contraddistingue per un'elevata sensibilità (95- 99%) ed è perciò<br />
particolarmente indicato per l'esclusione di un morbo di Cushing.<br />
Tuttavia, dal momento che possono risultare valori patologici<br />
anche nel caso di altre malattie, come p.es. diabete mellito,<br />
diabete insipido, piometra, ipercalcemia, patologie renali ed<br />
epatiche, questo test ha una bassa specificità (20- 77 %).<br />
È quindi consigliabile eseguire, in caso di un valore elevato<br />
del rapporto cortisolo/creatinina, un test funzionale (p.es. test<br />
di soppressione con desametasone a basso dosaggio). L'urina<br />
deve essere prelevata in condizioni il più possibile prive di<br />
stress: è bene che sia il proprietario stesso a raccogliere<br />
l'urina del mattino nell'ambiente consueto dell'animale tramite<br />
minzione spontanea.<br />
Esecuzione del test a. per la diagnosi di Cushing (test di screening)<br />
1° giorno: prelievo urina del mattino = 1° campione<br />
(2° giorno: prelievo urina del mattino = 2° campione;<br />
quest'ultimo consigliato per minimizzare l'influenza di<br />
un'oscillazione giornaliera)<br />
b. per la diagnosi differenziale di un Cushing ipofisario o<br />
surrenalico (si tenga conto, al momento dell'interpretazione,<br />
della bassa specificità del test)<br />
1° giorno: prelievo urina del mattino = 1° campione<br />
(2° giorno: prelievo urina del mattino = 2° campione;<br />
quest'ultimo consigliato per minimizzare l'influsso di<br />
un'oscillazione giornaliera)<br />
- somministrazione di desametasone: 3 dosi di 0,1 mg/kg<br />
p.c. PO a intervalli di 8 ore<br />
3° giorno: prelievo urina del mattino = 3° campione<br />
Interpretazione - Rapporto cort./creat. 4- 10 x 10- 6: fisiologico, nel caso di<br />
una sola determinazione<br />
- Rapporto cort./creat. 11- 16 x 10- 6: valore limite<br />
- Rapporto cort./creat. > 16 x 10- 6: sospetto di Cushing<br />
128 129
12 Endocrinologia 12 Endocrinologia<br />
12.1. Ormoni / Patologie del surrene 12.1. Ormoni / Patologie del surrene<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Interpretazione con - calcolare il valore medio dei rapporti dei primi 2 giorni,<br />
3 determinazioni quindi procedere per l'interpretazione come sopra.<br />
- il rapporto del 3° giorno serve per la diagnosi differenziale<br />
tra Cushing ipofisario e surrenalico:<br />
rapporto cort./creat. < 50 % del valore medio del rapporto<br />
dei primi 2 giorni: Cushing ipofisario<br />
rapporto cort./creat. > 50 % del valore medio del rapporto<br />
dei primi 2 giorni: Cushing surrenalico o ipofisario<br />
Test ad alte dosi di desametasone<br />
(Test di soppressione, HDDS, High-Dose-Dexamethason-Suppression) (cane)<br />
2 determinazioni del cortisolo 2 x 0,5 ml S, (EP), (HP) ECLIA (1)<br />
Principio del test Il test si basa sul fatto che nel caso di Cushing ipofisario il<br />
feedback negativo non viene eliminato completamente, mentre<br />
nel caso di Cushing surrenalico la secrezione dei glucocorticoidi<br />
non è influenzabile, vale a dire un basso dosaggio di<br />
desametasone (0,01 mg/kg) nel caso di Cushing ipofisario o<br />
surrenalico non provoca affatto, o solo in misura insufficiente,<br />
un crollo del livello di cortisolo, mentre alti dosaggi di desametasone<br />
(0,1 mg/kg) provocano nella maggior parte dei casi<br />
una netta soppressione del valore del cortisolo nel Cushing<br />
ipofisario, ma nessuna soppressione o quasi nel Cushing<br />
surrenalico. Attenzione: circa il 15- 20 % degli animali con<br />
Cushing ipofisario reagisce anche ad alti dosaggi con<br />
soppressione insufficiente del cortisolo.<br />
Esecuzione del test (cane) 1. primo prelievo = valore basale del cortisolo<br />
2. iniezione di desametasone 0,1 mg/kg p.c. EV<br />
3. secondo prelievo 8 ore dopo la somministrazione di<br />
desametasone = valore di soppressione<br />
Interpretazione valore di soppressione < 50 % del valore basale<br />
ovvero < 1.4 µg/dl:<br />
Cushing ipofisario<br />
valore di soppressione < 50 % del valore basale<br />
ovvero < 1.4 µg/dl:<br />
Cushing surrenalico<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
ACTH 1 ml EP congelato CLIA (1)<br />
A causa dell'instabilità dell'ormone è necessario procedere alla<br />
centrifugazione del sangue EDTA direttamente subito dopo il<br />
prelievo, prelevare quindi con pipetta il plasma EDTA e congelarlo.<br />
Anche la spedizione al laboratorio deve avvenire sotto<br />
congelamento a temperature particolarmente basse, in modo<br />
che il campione arrivi ancora congelato in laboratorio.<br />
Principio del test (cane) La determinazione di ACTH serve a distinguere il Cushing ipofisario<br />
da quello surrenalico. Nel caso di tumori corticosurrenalici<br />
la secrezione di ACTH a causa del feedback negativo viene<br />
soppressa, mentre nel Cushing ipofisario si ha un'eccessiva<br />
secrezione di ACTH.A causa dell'emissione discontinua di<br />
ACTH e della suscettibilità allo stress l'interpretazione del test<br />
è spesso difficile.<br />
Interpretazione (cane) - livello di ACTH 9- 67 pg/ml: fisiologico<br />
- livello di ACTH < 10 pg/ml: sospetto di Cushing<br />
surrenalico oppure sospetto<br />
di ipoadrenocorticismo<br />
secondario<br />
- livello di ACTH 45- 450 pg/ml: sospetto di Cushing<br />
ipofisario o di ipoadrenocorticismo<br />
primario<br />
- livello di ACTH > 450 pg/ml: sospetto di ipoadrenocorticismo<br />
primario.<br />
Principi del test (cavallo) Questo test di determinazione del livello di ACTH endogeno<br />
è indicato quando per raggiungere il cavallo sia necessario<br />
percorrere grandi distanze o come alternativa al test di<br />
soppressione con desametasone nel caso di cavalli con<br />
laminite. Il prelievo deve preferibilmente essere eseguito fra<br />
le 8 e le 10 del mattino in condizioni prive di stress.<br />
Interpretazione (cavallo) Nel caso di cavallo con morbo di Cushing i valori possono<br />
essere di gran lunga più alti (> 100 pg/ml). La determinazione<br />
dell'ACTH è adatta entro certi limiti anche per controlli<br />
terapeutici o per seguire il decorso della malattia.<br />
130 131
12 Endocrinologia 12 Endocrinologia<br />
12.1. Ormoni / Patologie del surrene 12.1. Ormoni / Patologie del surrene<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Test combinato di soppressione con desametasone e di<br />
stimolazione con TRH (cavallo)<br />
4 determinazioni del cortisolo 4 x 0,5 ml S, (EP), (HP) ECLIA (1)<br />
Indicato per la diagnosi più approfondita di una sindrome di Cushing equina nei pazienti con valori limite<br />
nel test di soppressione con desametasone<br />
Esecuzione del test 1. primo prelievo = valore basale del cortisolo<br />
2. iniezione di 40 µg/kg p.c. di desametasone EV<br />
3. secondo prelievo 3 ore p.inj. = 1° valore di soppressione<br />
del cortisolo<br />
4. iniezione di 1 mg TRH EV<br />
5. terzo prelievo 30 min. p.inj. = valore di stimolazione del<br />
cortisolo<br />
6. quarto prelievo 21 ore p.inj. = 2° valore di soppressione<br />
del cortisolo<br />
Interpretazione Nel cavallo sano si constata già dopo 3 ore un'evidente<br />
soppressione con desametasone e nessuna stimolazione con<br />
TRH, mentre il paziente con morbo di Cushing non mostra<br />
nessuna soppressione, ma al contrario un'evidente<br />
stimolazione >= 66 %.<br />
Sindrome metabolica/ pre-Cushing (cavallo)<br />
Se il sospetto diagnostico di morbo di Cushing equino non viene confermato, si deve<br />
procedere alla diagnosi differenziale con una "sindrome metabolica".<br />
Questa colpisce cavalli di età media fino a età avanzata con i sintomi clinici della laminite e<br />
dell'adiposità. I referti di laboratorio di questi cavalli mostrano di regola un'iperglicemia e<br />
contemporaneamente elevate concentrazioni di insulina ("insulino-resistenza"). L'ACTH rientra<br />
nella norma.<br />
Insulina, 1 ml S congelato cfr. → cap. 12.4, Altri ormoni<br />
Glucosio, 1 ml S, NaF cfr. → cap. 5, Chimica clinica<br />
n Parametri aspecifici per la diagnosi del morbo di Cushing<br />
Alcuni parametri biochimici, come anche le modificazioni urinarie e del quadro ematologico,<br />
possono fornire indizi della presenta di un Cushing, ma una diagnosi è possibile solo sulla<br />
scorta dei test funzionali elencati qui sopra o di tecniche di diagnostica per immagine. Nel<br />
caso di un Cushing possono intervenire le alterazioni seguenti:<br />
Aumento - ALP, ALP termostabile (dopo inattivazione termica) attraverso<br />
glucocorticoidi endogeni o esogeni viene indotta soprattutto<br />
la frazione termostabile dell'enzima, mentre l'ALP presente<br />
nel fegato, nel rene e nell'osso è termolabile. L'ALP termostabile<br />
può essere individuata riscaldando il siero a 65°.<br />
- ALT<br />
- trigliceridi<br />
- glucosio<br />
- acidi biliari<br />
- insulina- glucosio (urina)<br />
- proteine (urina)<br />
Diminuzione - urea<br />
- T 4<br />
- peso specifico (urina)<br />
Quadro ematologico tipico "leucogramma da stress":leucocitosi, neutrofilia (senza<br />
deviazione a sinistra), linfopenia, eosinopenia, monocitosi,<br />
trombocitosi<br />
132 133
12 Endocrinologia 12 Endocrinologia<br />
12.1. Ormoni / Patologie del surrene 12.1. Ormoni / Patologie del surrene<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Ipoadrenocorticismo (cane)<br />
L'ipoadrenocorticismo è un'alterazione endocrina relativamente rara, e la causa può risiedere<br />
nel corticosurrene (ipoadrenocorticismo primario, morbo di Addison) o in una riduzione della<br />
secrezione di ACTH o di CRH (ipoadrenocorticismo secondario). In caso di ipoadrenocorticismo<br />
primario ad essere coinvolta è, in genere, la sintesi dei mineralcorticoidi e glucocorticoidi,<br />
nell'ipoadrenocorticismo secondario di norma solo quella dei glucocorticoidi.<br />
La malattia mostra una predisposizione per cani di sesso femminile (circa 70 %) e colpisce<br />
soprattutto animali di mezza età e di taglia medio-grande.<br />
La forma di ipoadrenocorticismo più frequente in medicina veterinaria è tuttavia quella<br />
iatrogena, a seguito di somministrazioni di glucocorticoidi esogeni per un lungo periodo o<br />
all'assunzione di Mitotane (o,p' - DDD) all'interno di una terapia del morbo di Cushing.<br />
In sede di diagnosi di laboratorio, oltre all'eventuale insorgenza di alterazioni aspecifiche come<br />
lieve anemia, azotemia, ipercalcemia e/o ipoglicemia, è relativamente frequente la variazione<br />
del rapporto Na/K (solo in caso di inibizione della sintesi dei mineralcorticoidi). Di norma il<br />
rapporto si aggira sui valori 27:1 - 40:1, mentre nell'ipoadrenocorticismo vengono rilevati per<br />
lo più valori sotto 27:1.<br />
La determinazione singola del valore del cortisolo è indicata solo per escludere un<br />
ipoadrenocorticismo, dal momento che anche animali sani possono presentare un valore del<br />
cortisolo < 0,5 µg/dl.<br />
Test di stimolazione con ACTH<br />
2 determinazioni del cortisolo 2 x 0,5 ml S, (EP), (HP) ECLIA (1)<br />
Esecuzione del test cfr. qui sopra<br />
Diminuzione Il valore basale è generalmente < 0,5- 2 µg/dl<br />
e il valore di stimolazione è generalmente < 0,5- 2 µg/dl<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Aldosterone 0,5 ml S refrigerato RIA (3)<br />
La determinazione singola dell'aldosterone ha un significato<br />
limitato per la diagnosi. L'interpretazione dovrebbe essere<br />
preceduta da una stimolazione con ACTH.<br />
cfr. → Test di stimolazione con ACTH<br />
Indicazione carenza selettiva di aldosterone (iponatriemia e ipercaliemia<br />
con valore del cortisolo basale normale ovvero con valori di<br />
cortisolo fisiologici in seguito a test di stimolazione con<br />
ACTH), iperaldosteronismo primario.<br />
Localizzazione prodotto nella zona glomerulosa del corticosurrene,<br />
regolato dal sistema renina-angiotensina-aldosterone e<br />
dalla concentrazione di potassio nel siero.<br />
Aumento ovvero stimolazione eccessiva:<br />
iperaldosteronismo primario:<br />
iperfunzione del corticosurrene<br />
(iperaldosteronismo secondario:<br />
disturbi nella riduzione dell'aldosterone)<br />
Diminuzione ovvero stimolazione ridotta o assente:<br />
ipoaldosteronismo<br />
134 135
12 Endocrinologia 12 Endocrinologia<br />
12.2. Ormoni / Patologie della tiroide 12.2. Ormoni / Patologie della tiroide<br />
n Ipotiroidismo<br />
L'ipotiroidismo primario del cane può essere provocato da una tiroidite linfocitaria, da un'atrofia<br />
follicolare idiopatica o più raramente da una neoplasia della tiroide. Forme secondarie (carenza<br />
di TSH) o terziarie (carenza di TRH) sono state descritte più raramente. La sintomatologia<br />
clinica è dovuta a una carenza degli ormoni tiroidei circolanti.<br />
Cani di razze grandi e medio-grandi presentano una predisposizione.<br />
I seguenti parametri di laboratorio aspecifici possono suggerire la presenza di ipotiroidismo:<br />
- aumento del colesterolo sierico<br />
- anemia da lieve a moderata (in genere normociticanormocromica,<br />
raramente microcitica-ipocromica)<br />
- aumento delle fruttosamine<br />
- eventualm. aumento degli enzimi epatici<br />
- eventualm. aumento della creatinchinasi<br />
Nel gatto l'ipotiroidismo si presenta molto raramente.<br />
Nel cavallo le malattie primarie della tiroide sono rare, ma sono state descritte.<br />
L'ipotiroidismo insorge spesso in collegamento al morbo di Cushing equino.<br />
n Ormoni tiroidei - determinazioni singole<br />
Attenzione Sono possibili abbassamenti aspecifici dovuti a malattie<br />
non-tiroidee (NTI, non thyroid illness) o a farmaci.<br />
NTI:<br />
diabete mellito, iperadrenocorticismo, ipoadrenocorticismo,<br />
patologie renali, patologie epatiche, infezioni acute, patologie<br />
neuromuscolari, piodermie, ipoproteinemia, insufficienza<br />
cardiaca congestizia ecc.Cani che presentano una malattia<br />
non-tiroidea non dovrebbero essere sottoposti al test.<br />
In caso di sospetto iperadrenocorticismo, si deve innanzitutto<br />
verificare quest'ultimo.<br />
Farmaci:<br />
FANS, glucocorticoidi, anticonvulsivanti, sulfamidici ecc.<br />
Questi farmaci non devono venire somministrati per circa<br />
4- 6 settimane prima dell'esecuzione del test.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
T4 0,5 ml S, (EP), (HP) EIA (1)<br />
Il T 4 totale si compone di una frazione libera e di una frazione<br />
legata alle proteine. Nella misurazione sono comprese entrambe<br />
le frazioni. Il T 4 endogeno viene prodotto esclusivamente nella<br />
tiroide ed è perciò un parametro significativo per diagnosticare<br />
un ipertiroidismo nel gatto, o per escludere un ipotiroidismo<br />
nel cane, dato che solo pochissimi cani ipotiroidei mostrano<br />
concentrazioni di T 4 comprese nell'intervallo di riferimento.<br />
Valori di T 4 normali in cani ipotiroidei possono essere rilevati<br />
nella fase iniziale di ipotiroidismo. Inoltre esistono rari casi<br />
di cani ipotiroidei (circa l'1,5%) che sviluppano anticorpi T 4<br />
responsabili di misurazioni erroneamente elevate del T 4. Per<br />
questi cani consigliamo la determinazione dell'FT 4 in equilibrio<br />
dialitico e/o la rilevazione dei T 4 -Autoanticorpi. Farmaci e<br />
malattie NTI possono influenzare la misurazione del T 4<br />
(cfr. qui sopra).<br />
FT4 0,5 ml S, (EP), (HP) ECLIA (1)<br />
Viene misurata soltanto la frazione libera del T 4.<br />
Attenzione: sono possibili abbassamenti aspecifici dovuti a<br />
malattie non-tiroidee (NTI) o a farmaci (cfr. qui sopra).<br />
FT4 (in equilibrio dialitico) 1 ml S, (EP), (HP) RIA (3)<br />
In equilibrio dialitico l'FT 4 viene separato dalle sieroproteine<br />
e dal T 4 legato alle proteine, per venir quindi misurato nel<br />
dialisato. Il risultato è indipendente tanto dalla concentrazione<br />
di proteine che legano il T 4 quanto dalla presenza di T 4-Autoanticorpi.<br />
T3 0,5 ml S, (EP), (HP) ECLIA (1)<br />
Il T 3 si forma principalmente attraverso la deiodazione del T 3 a<br />
livello intracellulare. Se la sintesi di T 4 diminuisce, spesso si<br />
ha a scopo compensatorio un aumento della trasformazione<br />
di T 4 in T 3. È possibile perciò ottenere, anche in presenza di<br />
un ipotiroidismo, dei valori di T 3 compresi nell'intervallo di<br />
riferimento. Ne consegue che il T 3 non è di grande utilità nella<br />
diagnosi di un ipotiroidismo canino.La triiodotironina libera<br />
non legata alle proteine (FT 3) ha un ruolo subordinato nella<br />
diagnosi dell'ipotiroidismo degli animali domestici.<br />
136 137
12 Endocrinologia 12 Endocrinologia<br />
12.2. Ormoni / Patologie della tiroide 12.2. Ormoni / Patologie della tiroide<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
TSH canino (cane) 0,5 ml S, (EP), (HP) CLIA (1)<br />
Un abbassamento del livello del T 4 porta, data la mancanza del<br />
meccanismo di feedback negativo, ad un'aumentata secrezione di<br />
TSH.<br />
Interpretazione Valori di T 4 e FT 4 bassi, aumento del TSH canino →<br />
ipotiroidismo primario. Nel 20 (- 40) % circa dei cani ipotiroidei<br />
il TSH resta compreso nell'intervallo di riferimento (sensibilità<br />
63- 82 %). Cani eutiroidei possono presentare valori elevati di<br />
TSH canino, p.es. nella fase iniziale di un ipotiroidismo, nel<br />
periodo di recupero successivo ad una NTI o in seguito a<br />
somministrazione di sulfamidici.<br />
Interpretazione dei risultati del T4- e del TSH canino<br />
Valori rilevati Interpretazione / ulteriori valutazioni<br />
TSH canino elevato<br />
e T 4 ridotto<br />
TSH canino elevato<br />
e T 4 normale<br />
TSH canino normale<br />
e T 4 ridotto<br />
Molto probabile ipotiroidismo<br />
Molto probabile assenza di ipotiroidismo (eccezione: presenza di T 4 -<br />
Autoanticorpi)<br />
→ determinare FT 4 in equilibrio dialitico; determinare la presenza di<br />
T 4 -Autoanticorpi; verificare eventuali NTI e anamnesi<br />
farmacologica<br />
→ nuova misurazione dopo guarigione o sospensione dei farmaci<br />
possibilità di ipotiroidismo; verificare eventuali NTI e anamnesi<br />
farmacologica<br />
→ nuova misurazione dopo guarigione o sospensione<br />
dei farmaci<br />
→ test di stimolazione con TSH<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Rapporto FT4/colesterolo<br />
(Valore K)<br />
(solo cane)<br />
Calcolo del valore K secondo Larsson.<br />
Spesso il cane ipotiroideo presenta a digiuno un livello elevato<br />
di colesterolo nel siero. Per mezzo della formula di calcolo di<br />
Larsson, che include il valore dell'FT 4, si può ricorrere al livello<br />
di colesterolo come indizio della presenza di un ipotiroidismo.<br />
Si tenga tuttavia conto del fatto che l'ipotiroidismo non è<br />
necessariamente accompagnato da un'ipercolesterolemia,<br />
così come d'altra parte esistono ipercolesterolemie di origine<br />
diversa (alimentazione, patologie epatiche).<br />
Formula di Larsson K = 0,7 x FT 4 (pmol/l) - colesterolo sierico (mmol/l)<br />
Fattori di conversione da unità convenzionali in unità SI:<br />
FT 4 in unità conv. X 12,78 = unità SI<br />
Colesterolo in unità conv. X 0,02 = unità SI<br />
Interpretazione K = < -4 ⇒ sospetto di ipotiroidismo<br />
K = -4 –1 ⇒ zona grigia<br />
K = > 1 ⇒ intervallo fisiologico<br />
Tireoglobulina-Ac<br />
(solo cane)<br />
0,5 ml S, (EP), (HP) Cinetica enzimatica,<br />
ECLIA (1)<br />
0,3 ml S, (EP), (HP) ELISA (2)<br />
Nel corso di un ipotiroidismo insorto a seguito di una tiroidite<br />
linfocitaria si formano anticorpi contro la tireoglobulina. Essi<br />
sono importanti non tanto per la diagnosi di un ipotiroidismo<br />
quanto per l'eziologia della malattia. Si tenga conto che fino al<br />
15% di tutti i cani sani e fino al 25% di tutti i cani con malattie<br />
non tiroidee possono presentare anticorpi anti-tireoglobulina.<br />
Concentrazioni elevate di anticorpi possono, anche in certe<br />
condizioni, essere segni premonitori di una tiroidite linfocitaria,<br />
nel qual caso si consiglia di effettuare controlli a intervalli<br />
regolari. Se il tessuto tiroideo viene più o meno completamente<br />
distrutto nel corso della malattia, si può avere anche un calo<br />
della concentrazione di anticorpi in seguito alla mancanza<br />
dello stimolo antigenico.<br />
138 139
12 Endocrinologia 12 Endocrinologia<br />
12.2. Ormoni / Patologie della tiroide<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
T4-Autoanticorpi 1,5 ml S RIA (3)<br />
Come per gli anticorpi anti-tireoglobulina, anche i T 4 -Autoanticorpi<br />
possono comparire all'interno di una tiroidite<br />
linfocitaria. Essi possono interferire con la misurazione del<br />
T 4, dando luogo a valori di T 4 erroneamente elevati (salvo che<br />
in caso di test in equilibrio dialitico).<br />
Indicazione Concentrazioni di T 4 comprese nell'intervallo di riferimento o<br />
superiori ad esso, in presenza di evidenti sintomi clinici di un<br />
ipotiroidismo.<br />
Limitazione Anche cani eutiroidei possono presentare T 4 -Autoanticorpi,<br />
così come cani ipotiroidei possono essere negativi per<br />
quest'esame.<br />
n Ormoni tiroidei - Test funzionali<br />
Test di stimolazione TSH (cane) con rhTSH (TSH umano ricombinante)<br />
2 determinazioni del T4<br />
3 determinazioni del T4<br />
2 x 0,5 ml S, (EP), (HP) EIA (1)<br />
3 x 0,5 ml S, (EP), (HP) EIA (1)<br />
Principio del test In seguito a somministrazione di TSH la tiroide viene<br />
massivamente stimolata. La successiva misurazione di T 4<br />
dà informazioni sulla capacità funzionale della tiroide.<br />
Esecuzione del test 1. Primo prelievo: valore basale della tiroxina<br />
2. Iniezione di 75 µg rhTSH EV oppure IM<br />
3. Prelievo dopo 6 ore: valore dopo stimolazione della tiroxina<br />
Interpretazione Livello di T 4 post-TSH > 2.5 µg/dl normale<br />
Livello di T 4 post-TSH < 1,5 µ/dl ipotiroidismo<br />
Livello intermedio: zona grigia (inizio di<br />
ipotiroidismo, NTI, farmaci)<br />
Il test di stimolazione con TSH, dal momento che viene influenzato molto meno dalle cosiddette<br />
NTI e dai farmaci, è il procedimento goldstandard per la diagnosi di un ipotiroidismo. Dovrebbe<br />
essere effettuato solo con animali che non soffrono di una NTI e che non assumono farmaci.<br />
Altrimenti può essere impiegato solo per escludere un ipotiroidismo. Un punto svantaggioso è<br />
costituito dal prezzo elevato del TSH umano ricombinante (attualmente non reperibile in Italia).<br />
12.2. Ormoni / Patologie della tiroide<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Test di stimolazione con TRH (cane)<br />
2 determinazioni del T4<br />
3 determinazioni del T4<br />
Con questo test si determina l'incremento di T 4 nel siero.<br />
Attenzione La stimolazione può venire compromessa da malattie non<br />
tiroidee o da farmaci (cfr. → Ormoni tiroidei - determinazioni<br />
singole). Inoltre, anche cani sani possono presentare in<br />
determinate condizioni una stimolazione insufficiente. Per<br />
tali ragioni si consiglia di ricorrere al test di stimolazione<br />
con TRH solo per escludere un ipotiroidismo.<br />
Esecuzione del test 1. Primo prelievo = valore basale della tiroxina<br />
2. Iniezione di TRH (tireotropina) (200 µg per animale)<br />
EV (p.es. Thyroliberin ® (Merck), non reperibile in Italia)<br />
3. (eventualmente prelievo dopo 2 ore = primo valore dopo<br />
stimolazione)<br />
4. Prelievo dopo 4 ore = secondo valore dopo stimolazione<br />
Interpretazione - Stimolazione nell'intervallo eutiroideo<br />
(valore di stimolazione del T 4 > 1,5 µg/dl) → eutiroidismo<br />
Test di stimolazione con TRH (cavallo)<br />
2 determinazioni del T4<br />
3 determinazioni del T4<br />
2 x 0,5 ml S, (EP), (HP) EIA (1)<br />
3 x 0,5 ml S, (EP), (HP) EIA (1)<br />
- Stimolazione modesta o nulla<br />
(valore basale e di stimolazione del T 4 < 1,5 µg/dl) →<br />
ipotiroidismo<br />
2 x 0,5 ml S, (EP), (HP)<br />
3 x 0,5 ml S, (EP), (HP)<br />
EIA (1)<br />
EIA (1)<br />
Esecuzione del test 1. Primo prelievo = valore basale della tiroxina<br />
2. Iniezione di TRH (1 mg per un cavallo, 0,5 mg per un pony) EV<br />
(3. Prelievo dopo 2 ore = primo valore dopo stimolazione)<br />
4. Prelievo dopo 4 ore = secondo valore dopo stimolazione<br />
Interpretazione Cavalli con tiroide normale presentano:<br />
- (dopo 2 ore incremento del T 4 di un fattore 1,5)<br />
- dopo 4 ore incremento significativo del T 4 di un fattore 2<br />
- picco massimo dopo 4 -10 ore<br />
140 141
12 Endocrinologia 12 Endocrinologia<br />
12.2. Ormoni / Patologie della tiroide<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Ipertiroidismo<br />
L'ipertiroidismo è un disturbo endocrino che colpisce prevalentemente il gatto ed è provocato<br />
per lo più da un adenoma della tiroide. I casi di carcinoma della tiroide sono rari; essi tuttavia<br />
sono spesso causa dell'ipertiroidismo nel cane, malattia peraltro rara. A essere colpiti sono<br />
prevalentemente animali anziani. La sintomatologia clinica è provocata da un eccesso di<br />
ormoni tiroidei in circolo.<br />
La diagnosi dell'ipertiroidismo viene fatta in primo luogo sulla scorta dell'aumento della<br />
concentrazione di T 4. Dal momento che all'inizio della malattia o in casi poco gravi le<br />
concentrazioni di T 4 e di FT 4 possono essere ancora poco o nulla elevate, si può ricorrere<br />
al test di soppressione con T 3 per una conferma della diagnosi.<br />
L'ipertiroidismo è estremamente raro nel cavallo.<br />
n Ormoni tiroidei - determinazioni singole<br />
T4 0,5 ml S, (EP), (HP) EIA (1)<br />
cfr. → Ipotiroidismo<br />
FT4 0,5 ml S, (EP), (HP) ECLIA (1)<br />
cfr. → Ipotiroidismo<br />
n Ormoni tiroidei - test funzionali<br />
Test di soppressione con T4<br />
2 determinazioni del T4 2 x 0,5 ml S, (EP), (HP) EIA (1))<br />
Principio del test Nel gatto sano la secrezione di T4 viene chiaramente<br />
soppressa dopo somministrazione di T 3, nel gatto ipertiroideo<br />
invece, a causa della secrezione autonoma di T 4, non si ha<br />
nessuna soppressione o si ha una soppressione molto ridotta.<br />
Esecuzione del test 1. Primo prelievo = valore basale della tiroxina<br />
2. Somministrazione di liotironina (p.es. Ti Tre ® (Teofarma))<br />
7 x 25 µg a intervalli di 8 ore PO<br />
3. Secondo prelievo 2- 4 ore dopo l'ultima somministrazione =<br />
valore di soppressione<br />
Interpretazione - soppressione > 50 % del valore basale ⇒ eutiroidismo<br />
- soppressione < 50 % del valore basale ⇒ ipertiroidismo<br />
12.2. Ormoni / Patologie della tiroide<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Test di stimolazione con TRH<br />
2 determinazioni del T4<br />
3 determinazioni del T4<br />
2 x 0,5 ml S, (EP), (HP) EIA (1)<br />
3 x 0,5 ml S, (EP), (HP) EIA (1)<br />
Principio del test Con questo test si determina l'incremento di T 4 nel siero. In<br />
caso di normale funzionalità tiroidea, all'iniezione di TRH fa<br />
seguito un incremento del TSH e di conseguenza anche del T 4.<br />
In caso di animali ipertiroidei il TSH viene soppresso a causa<br />
del livello elevato di T 4; non si ha perciò alcun incremento,<br />
o solo un incremento modesto, di TSH e T 4.<br />
Attenzione La stimolazione può eventualmente venire compromessa da<br />
malattie non tiroidee o da farmaci (cfr. → Ormoni tiroidei -<br />
determinazioni singole).<br />
Esecuzione del test 1. Primo prelievo = valore basale della tiroxina<br />
2. Iniezione di TRH (100 µg per animale) EV<br />
(p.es. Thyroliberin ® (Merck) non reperibile in Italia)<br />
3. Secondo prelievo dopo 4 ore = valore dopo stimolazione<br />
Calcolo della stimolazione relativa (%)<br />
stimolazione = T 4 dopo la stimolazione - valore basale del T 4 x 100<br />
valore basale del T 4<br />
Interpretazione Stimolazione > 60 % del valore basale =eutiroidismo<br />
Stimolazione < 50 % del valore basale =sospetto di<br />
ipertiroidismo<br />
Stimolazione 50- 60 % del valore basale = zona grigia<br />
142 143
12 Endocrinologia 12 Endocrinologia<br />
12.3. Ormoni sessuali / Gravidanza<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
progesterone ng/ml<br />
estradiolo<br />
Anestro<br />
lunghezza in funzione<br />
della razza<br />
progesterone<br />
Proestro<br />
x = 9 giorni<br />
(6- 11 giorni)<br />
Estro<br />
x = 9 giorni<br />
(3- 21 giorni)<br />
settimane giornirecettive<br />
per cani maschi<br />
> 90 % delle cellule superficiali<br />
settimane<br />
Andamento degli ormoni durante il ciclo sessuale della cagna<br />
Estradiolo (17-b) 0,5 ml S, (EP), (HP) ECLIA (1)<br />
Indicazione Determinazione della fase del ciclo (cane, cavallo)<br />
Diagnosi di disturbi del ciclo (cane, cavallo)<br />
Diagnosi di un tumore a cellule di Sertoli (cane)<br />
ovulazione<br />
fecondazione<br />
Metaestro<br />
ca. 2 mesi<br />
Nella cagna le concentrazioni di estradiolo oscillano fortemente<br />
a seconda della fase del ciclo (ca. 5-10 ng/l nell'anestro fino<br />
a 50-100 ng/l nel proestro). In combinazione con una determinazione<br />
del progesterone si può ricorrere alla valutazione<br />
dell'estradiolo per la diagnosi di disturbi del ciclo.<br />
Nel cane maschio la determinazione dell'estradiolo serve<br />
a riconoscere il tumore delle cellule del Sertoli<br />
nascita<br />
prolattina<br />
(in cagne che allattano)<br />
estradiolo ng/l<br />
12.3 Ormoni sessuali / Gravidanza<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Determinazione del momento della monta nella cagna<br />
Determinazione del Da iniziare quando si ha una percentuale fra l'85 e il 90 % di<br />
livello di progesterone cellule superficiali oppure, senza citologia vaginale, a partire<br />
dal (3°-) 6° fino all'8° giorno del calore (variabile a seconda<br />
della durata dei calori precedenti) fino ad arrivare a valori da<br />
4 a 10 ng/ml.<br />
Monta Un giorno e tre giorni dopo essere arrivati a questi valori.<br />
Interpretazione L'andamento del livello ormonale può essere nella cagna molto<br />
diverso da un individuo all'altro!Il livello di progesterone nell'anestro<br />
e nel proestro è < 1,0 ng/ml. Al 10° giorno circa del proestro la<br />
luteinizzazione preovulatoria delle ovaie fa salire il valore del<br />
progesterone a 2,0 ng/ml circa. Il giorno successivo il valore si<br />
aggira sui 3,0 ng/ml circa e il giorno dell'ovulazione sui<br />
4,0- 8,0 ng/ml circa. Il momento migliore per la monta è circa<br />
2- 3 giorni dopo l'ovulazione.Nel caso che non si disponga di<br />
nessuna anamnesi riguardo a cicli/gravidanze precedenti, si<br />
consiglia di effettuare una prima misurazione fra il 6° e l'8° giorno<br />
del calore. Se il valore è inferiore a 1,0 ng/ml, si devono effettuare<br />
ulteriori misurazioni a distanza di 3- 4 giorni, fino a che non venga<br />
misurato un valore di 1- 8 ng/ml. A seconda della concentrazione si<br />
possono eseguire determinazioni ulteriori a distanza di 1- 3 giorni.<br />
Progesterone 0,5 ml S, (EP), (HP) CLIA (1)<br />
Fattrice Il progesterone viene sintetizzato dalle cellule luteali dei corpi<br />
(non specifico della gravidanza) lutei. Valori di progesterone >= 1 ng/ml fra il 18° e il 21°<br />
giorno depongono a favore di un corpo luteo funzionante, dove<br />
corpi lutei gravidici presentano di regola valori notevolmente<br />
più alti.<br />
Testosterone 0,5 ml S, (EP), (HP) ECLIA (1)<br />
Indicazione Differenziazione fra animali castrati e criptorchidi, controllo del<br />
livello di androgeni.Una determinazione singola del testosterone<br />
spesso non è sufficientemente indicativa. Per confermare la<br />
diagnosi si può ricorrere ad un test di stimolazione con hCG.<br />
144 145
12 Endocrinologia 12 Endocrinologia<br />
12.3. Ormoni sessuali / Gravidanza<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Test di stimolazione con hCG<br />
2 determinazioni del testosterone<br />
3 determinazioni del testosterone<br />
2 x 0,5 ml S, (EP), (HP) EIA (1)<br />
3 x 0,5 ml S, (EP), (HP) EIA (1)<br />
Esecuzione del test 1. Primo prelievo = valore basale del testosterone<br />
(cane, gatto) 2. Iniezione di 50 UI di hCG/kg p.c. EV<br />
3. Prelievo 1 ora p.inj. = valore dopo stimolazione<br />
Esecuzione del test (cavallo) 1. Primo prelievo (la mattina) = valore basale del testosterone<br />
2. Iniezione di 5.000-10.000 UI di hCG per animale EV<br />
3. Prelievo 1 ora p.inj. = primo valore dopo stimolazione<br />
4. Eventualmente prelievo 24 ore p.inj. = secondo valore<br />
dopo stimolazione<br />
Interpretazione Una stimolazione assente o minima depone contro la presenza<br />
di un tessuto testicolare funzionante; una forte stimolazione<br />
(cinque volte tanto) depone a favore di un tessuto testicolare<br />
funzionante.In caso di risultati incerti nel test di stimolazione<br />
con hCG si può procedere ad una misurazione singola<br />
dell'estrone solfato. In cavalli con meno di 3 anni d'età, come<br />
anche negli asini, questo esame è tuttavia non determinante.<br />
Valori >= 0,4 ng/ml sono da considerarsi sospetti.<br />
Test di stimolazione con GnRH<br />
(solo cavallo)<br />
2 determinazioni del testosterone 2 x 0,5 ml S, (EP), (HP) EIA (1)<br />
Questo test ha luogo con stimolazione a livello dell'ipotalamo,<br />
vale a dire sottopone contemporaneamente a controllo anche<br />
la funzione dell'asse ipotalamo-ipofisario. Viene spesso impiegato<br />
per la diagnosi di maschi subfertili.<br />
Esecuzione del test 1. Primo prelievo (la mattina) = valore basale del testosterone<br />
2. Iniezione di 0,04 mg GnRH per cavallo EV<br />
(ad es. Receptal ®)<br />
3. Prelievo 1 ora p.inj. = valore dopo stimolazione<br />
Interpretazione Una stimolazione assente o minima depone contro la presenza di<br />
un tessuto testicolare funzionante; una forte stimolazione depone a<br />
favore di un tessuto testicolare funzionante.<br />
12.3. Ormoni sessuali / Gravidanza<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Determinazione del momento della monta nella cavalla<br />
PMSG/eCG 1 ml S, (EP), (HP) ELISA (3)<br />
Questo ormone specifico della gravidanza viene prodotto dalle<br />
coppe endometriali fra il 45° e il 90° giorno di gravidanza. Il<br />
culmine della secrezione dell'ormone viene raggiunto fra il 60°<br />
e il 75° giorno. Se la fattrice riassorbe, allora le coppe endometriali<br />
restano funzionanti per settimane e la rilevazione del<br />
PMSG è erroneamente positiva. In caso di risultato positivo del<br />
test si consiglia un controllo successivo dopo il 100° giorno.<br />
< 20 mlU/ml non depone a favore di una<br />
gravidanza<br />
20- 80 mlU/ml zona grigia:<br />
gravidanza non da escludere<br />
> 80 mlU/ml depone a favore di una gravidanza<br />
Estrone solfato 1 ml S, 5 ml U RIA (3)<br />
L'estrone solfato è un ormone specifico della gravidanza, che<br />
viene prodotto da una placenta intatta. Un livello di estrone solfato<br />
sufficientemente elevato è perciò contemporaneamente indice<br />
di un feto vivo. La determinazione va effettuata a partire dal<br />
100° giorno di gravidanza.Dal momento che non in tutte le<br />
cavalle al 100° giorno dopo l'ultima monta/inseminazione è<br />
rilevabile un livello elevato di estrone solfato, si consiglia in<br />
caso di esito incerto del test un controllo successivo dopo<br />
2- 4 settimane. Se il test rimane negativo in cavalle evidentemente<br />
gravide da più di 120 giorni, ciò può essere indizio di<br />
un danno al feto. In tal caso si consigliano un'esplorazione<br />
rettale-palpatoria e/o un esame ecografico.<br />
Valori sierici < 3 ng/ml non depone a favore di una<br />
gravidanza<br />
3 – 20 ng/ml zona grigia<br />
> 20 ng/ml depone a favore di una gravidanza<br />
Valori urinari < 0,05 µg/ml non depone a favore di una<br />
gravidanza<br />
< 3,5 µg/ml zona grigia<br />
> 3,5 µg/ml depone a favore di una gravidanza<br />
146 147
12 Endocrinologia<br />
12.4. Altri ormoni<br />
Nome del test Quantità/Materiale<br />
Osservazioni<br />
Metodo<br />
ADH (vasopressina) 1 ml EP congelato RIA (3)<br />
Indicazione Diabete insipido<br />
In caso di diabete insipido si può, con la determinazione dell'ADH,<br />
distinguere tra la forma centrale (mancanza assoluta di ADH)<br />
e la forma nefrogenica (diminuzione della risposta degli epiteli<br />
del tubulo renale).<br />
Diminuzione - diabete insipido centrale<br />
Attenzione Inviare assolutamente materiale congelato!<br />
IGF I (Somatomedina) 2 ml S congelato RIA (3)<br />
Indicazione Nanismo<br />
Acromegalia<br />
Localizzazione L'IGF-I (somatomedina C) viene sintetizzata nel fegato. La sua<br />
secrezione è fortemente correlata a quella dell'ormone della<br />
crescita (GH, Growth Hormone). Dal momento che la secrezione<br />
di IGF-I non presenta alcuna pulsatilità, il valore di IGF-I è più<br />
indicato per la diagnosi di una carenza dell'ormone della crescita<br />
di quanto non lo sia una determinazione diretta di quest'ultimo.<br />
Diminuzione - nanismo proporzionato<br />
(carenza congenita dell'ormone della crescita)<br />
Aumento - acromegalia<br />
Attenzione Inviare assolutamente siero congelato!Dal momento che i<br />
valori di riferimento dipendono dalle razze, non possiamo<br />
fornire alcun intervallo di riferimento. Per l'interpretazione<br />
siete pregati di metterVi in contatto con il laboratorio.<br />
Insulina 1 ml S congelato RIA (3)<br />
Indicazione Insulinoma (cane)<br />
Sindrome metabolica/ pre-Cushing (cavallo).Ripetuti livelli di<br />
glucosio ematico < 60 mg/dl in relazione con concentrazioni<br />
di insulina nell'intervallo superiore di riferimento o sopra di<br />
esso possono essere indizio di un insulinoma nel cane.<br />
Cavallo cfr. → cap. 12.1, Iperadrenocorticismo<br />
Attenzione Il paziente deve essere a digiuno al momento del prelievo. Il valore del glucosio<br />
deve essere < 60 mg/dl. In caso di determinazione contemporanea<br />
del glucosio consigliamo di ripartire il siero in due provette. Una provetta di<br />
siero deve essere inviata congelata per la determinazione dell'insulina. Per<br />
il congelamento si prega di ricorrere ad una provetta di siero senza gel di<br />
separazione.<br />
148
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
NdC - Per le diverse malattie riportate in questo capitolo, una volta eseguito l'accertamento<br />
diagnostico, se questo risulta positivo, occorre fare riferimento alle disposizioni sulle 'Principali<br />
malattie infettive degli animali domestici' riportate sul sito del Ministero della Salute italiano<br />
ed in particolare alla lista A e lista B<br />
(http://www.ministerosalute.it/alimenti/sanita/sanApprofondimento....).<br />
n Actinobacillus pleuropneumoniae (APP) (infezione da)<br />
Actinobacillus<br />
pleuropneumoniae<br />
(APP) - (Ac)<br />
n Adenovirus canino tipo 1<br />
vedi → Epatite contagiosa canina<br />
n Adenovirus equino tipo 1 (infezione da)<br />
Si tratta di una pleuropolmonite di grande importanza per<br />
l'economia, provocata dall'A. pleuropneumoniae (APP) che<br />
colpisce il suino. Ha vari sierotipi con gradi differenti di<br />
virulenza; colpisce animali di tutte le età. Se l'infezione viene<br />
superata, si crea una solida immunità. Gli anticorpi sono<br />
rilevabili a partire dal 7° giorno p.i. Grazie al colostro i suinetti<br />
da latte restano protetti dalla malattia fino a quando non<br />
arrivano alla pubertà.<br />
In circostanze particolari (giovani puledri con anticorpi materni in numero limitato o assenti,<br />
immunodepressione) l'Adenovirus equino 1 può dare luogo a malattie del tratto respiratorio.<br />
Si possono avere congiuntiviti, da catarrali a purulente, e scolo nasale.<br />
Adenovirus equino 1<br />
(DNA)<br />
n Anaplasmosi<br />
vedi → Ehrlichiosi<br />
13 Malattie infettive<br />
1 ml S ELISA (3)<br />
tampone corneale, congiuntivale PCR (1)<br />
149
13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Anemia infettiva equina<br />
Questa malattia, diffusa in tutto il mondo, è causata da un Lentivirus e colpisce solo gli equidi.<br />
Viene trasmessa attraverso il sangue infetto, attraverso punture di insetti ematofagi, per via<br />
iatrogena o per via intrauterina. I sintomi clinici rilevati nei cavalli sono febbre ricorrente,<br />
trombocitopenia, anemia, rapida perdita di peso ed edema delle parti declivi. Il decorso varia<br />
da acuto-letale fino a cronico-recidivante. Una volta infetti, i cavalli restano portatori del virus<br />
per tutta la vita.<br />
Anemia infettiva degli<br />
equini/ Test di Coggins<br />
(Ac)<br />
Nelle prime 2-3 settimane p.i. generalmente gli animali non<br />
mostrano ancora anticorpi rilevabili. In caso di dubbio il test va<br />
ripetuto ad intervalli di 3-4 settimane (se necessario, anche<br />
più di una volta). In rari casi possono passare fino a 60 giorni<br />
prima che si presenti una sieroconversione.<br />
Attenzione In Italia l'anemia infettiva è una malattia inserita nella lista B.<br />
n Arterite virale equina (EVA)<br />
L'EVA (Equine Viral Arteritis) è una malattia virale infettiva degli equini, causata dal virus<br />
dell'arterite equina (EAV, Equine Arteritis Virus). L'EAV è presente nelle popolazioni equine<br />
di tutto il mondo; negli ultimi anni la sua presenza è cresciuta, principalmente in seguito<br />
all'aumento del trasporto di cavalli ed all'impiego di sperma trasportato. La trasmissione del<br />
virus avviene prevalentemente attraverso lo sperma, ma è possibile anche per mezzo di altre<br />
secrezioni fisiologiche (soprattutto sotto forma di aerosol), di urina e di materiale abortivo.<br />
La maggior parte delle infezioni contratte naturalmente ha un decorso subclinico, riconoscibile<br />
solo dalla sieroconversione.<br />
Se compaiono sintomi clinici si tratta generalmente di:<br />
1 ml S Test di immunodiffusione in agar-gel (1)<br />
- febbre<br />
- depressione, anoressia<br />
- edema articolare, scrotale e prepuziale<br />
- congiuntivite ('pinkeye', occhio arrossato)<br />
- reazioni cutanee simili all'orticaria<br />
- aborti (soprattutto fra il 3° e il 10° mese)<br />
raramente in puledri giovani:<br />
- enteriti o polmoniti gravi<br />
Stalloni permanentemente infetti ospitano il virus nelle ghiandole sessuali accessorie e lo<br />
rilasciano assieme alle secrezioni genitali, mentre fattrici, cavalli castrati e stalloni prima della<br />
pubertà non sono portatori permanenti.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Arterite virale equina (Ac) 1 ml S NT (1)<br />
Arterite virale equina<br />
(RNA)<br />
Un'infezione pregressa da EAV non può essere diagnosticata in<br />
modo indiretto tramite la ricerca di anticorpi anti-EAV.Un titolo<br />
di anticorpi neutralizzanti di 1:4 o più elevato è considerato<br />
positivo secondo le convenzioni internazionali. Un aumento<br />
del titolo di almeno 2 diluizioni sull'esame di due campioni di<br />
siero prelevati a distanza di 3-4 settimane l'uno dall'altro è<br />
indicativo di un'infezione acuta.<br />
Attenzione In Italia l'EVA è una malattia inserita nella lista B.<br />
n Artrite encefalite caprina (CAE)<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
L'agente eziologico della CAE (Caprine Arthritis Encephalitis) della capra è un Lentivirus.<br />
Presenta una bassa contagiosità; la trasmissione avviene principalmente attraverso il latte,<br />
raramente per contatto diretto.<br />
Sintomatologia Colpisce soprattutto animali adulti fra i 2 e i 9 anni<br />
- artrite<br />
- cachessia<br />
- mastite<br />
- sintomi del sistema nervoso centrale<br />
Artrite/encefalite<br />
caprina (CAE) (Ac)<br />
Va real time-PCR (1)<br />
1 ml S, EP, HP ELISA (3)<br />
Gli anticorpi si formano in un periodo che va da poche<br />
settimane fino a parecchi anni p.i., pertanto un risultato<br />
negativo del test non esclude al 100 % un'infezione.<br />
Attenzione In Italia la CAE è una malattia inserita nella lista B.<br />
150 151
13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Aujeszky, malattia di<br />
La malattia di Aujeszky (pseudorabbia) è una malattia virale febbrile, con decorso acuto,<br />
provocata da un Herpesvirus. Essa colpisce soprattutto i suini. A seconda dell'età dell'animale<br />
il virus colpisce il sistema nervoso centrale, il tratto respiratorio o il tratto riproduttivo.<br />
Altre specie animali, ma non l'uomo, possono venire colpite dalla malattia in quanto ospiti finali.<br />
L'infezione del sistema nervoso centrale ha esito letale, e i cani ne sono particolarmente<br />
soggetti (la morte improvvisa del cane che vive in fattoria può segnalare la presenza di una<br />
malattia di Aujeszky nel patrimonio suino).<br />
Sintomatologia - febbre<br />
- disturbi del sistema nervoso centrale<br />
- scolo nasale, tosse (suini da ingrasso)<br />
- aborti<br />
Aujeszky (Ac) 1 ml S ELISA (3)<br />
Aujeszky (Ac) 1 ml S NT (3)<br />
Il test di virusneutralizzazione per la rilevazione di anticorpi<br />
Aujeszky viene svolto prevalentemente in caso di esportazione<br />
di cani.<br />
Si prega di indicare espressamente sul modulo di richiesta che si<br />
tratta di un'analisi per esportazione.<br />
Attenzione In Italia la malattia di Aujeszky è inserita nella lista B.<br />
n Babesiosi (cane)/ Piroplasmosi<br />
La piroplasmosi del cane viene causata in Europa prevalentemente dalle "grandi" Babesie del<br />
gruppo Babesia canis. A questo proposito sono da ricordare soprattutto B. canis canis e<br />
B. canis vogeli. I singoli ceppi di Babesia differiscono fra loro per la patogenicità. La specie<br />
altamente patogena B. canis rossi si trova principalmente in Africa meridionale, dove è<br />
responsabile in parte di infezioni ad alta patogenicità.<br />
Infezioni dovute alle "piccole" Babesie (B. gibsoni) sono rare in Europa. Nella Spagna<br />
nord-occidentale negli ultimi anni sono state segnalate, sempre più spesso, infezioni ad<br />
alta patogenicità dovute a "piccole" Babesie. Sono causate probabilmente da una specie di<br />
Babesia simile a quella dell'agente eziologico della babesiosi nell'uomo (B. microti-like<br />
ovvero Theileria annae).<br />
La distinzione fra Babesie "grandi" e "piccole" può essere significativa dal punto di vista<br />
terapeutico, in quanto le "piccole" Babesie non vengono eliminate dai farmaci abituali, in<br />
genere efficaci nei confronti della B. canis.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
La trasmissione delle Babesie avviene attraverso zecche del genere Rhipicephalus e<br />
Dermacentor. Il parassita è diffuso in tutta l'area mediterranea, in Ungheria, ex-Jugoslavia,<br />
Paesi balcanici e Grecia. La babesiosi canina era ritenuta una tipica malattia "da viaggio",<br />
collegata a viaggi in Paesi mediterranei, ma si hanno casi endemici anche in Italia,<br />
Germania, Austria e Svizzera.<br />
Sintomatologia A seconda della patogenicità del parassita e dello stato<br />
immunitario del cane il decorso della malattia varia da iperacuto<br />
a cronico. Dopo un periodo di incubazione compreso fra 3<br />
giorni e 5 settimane si sviluppano in genere i sintomi tipici<br />
della malattia:<br />
Babesie -<br />
rilevazione diretta<br />
- febbre (oltre i 40° C)<br />
- anemia emolitica, emoglobinemia ed emoglobinuria<br />
- ittero, bilirubinuria<br />
- epatomegalia e splenomegalia<br />
- DIC, coagulopatia da consumo<br />
- anoressia, apatia<br />
striscio ematico + 0,5 ml EB microscopia (1)<br />
La rilevazione dei merozoiti intraeritrocitari va effettuata con il<br />
microscopio ottico su striscio di sangue colorato con Giemsa,<br />
che è suggerito venga preparato con sangue capillare. In<br />
questo caso è molto probabile riuscire a distinguere Babesie<br />
"grandi" e "piccole". La parassitemia inizia ca. 5-10 giorni<br />
dopo l'infezione. In caso di infezione cronica le fasi di parassitemia<br />
si alternano a momenti di quiescenza e scomparsa dal<br />
circolo periferico del parassita, rendendo spesso difficile il<br />
rilievo diretto del parassita.<br />
Una rilevazione diretta del parassita non è quindi sempre<br />
possibile!<br />
152 153
13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Babesia canis (Ac) 0,5 ml S, EP, HP IFT (3)<br />
La rilevazione di anticorpi anti-Babesia per mezzo di IFT è<br />
possibile a partire dal 10°-14° giorno p.i.. Animali con meno di<br />
8 mesi di età sviluppano spesso un titolo anticorpale basso e<br />
dovrebbero essere testati sierologicamente ad almeno 3 mesi<br />
di età, in quanto potrebbero essere presenti anticorpi materni.<br />
Gli anticorpi materni si dimostrano ancora protettivi nei<br />
cuccioli fino ai due mesi di età.<br />
Il procedimento permette di rilevare anticorpi contro Babesia<br />
canis.<br />
Se è necessaria una rilevazione di anticorpi contro la specie<br />
Babesia gibsoni (p.es. a scopo di esportazione), è importante<br />
mettersi preliminarmente in contatto con il laboratorio. La<br />
richiesta deve essere indicata in modo specifico sul modulo.<br />
cfr. anche i seguenti esami → Parassiti del sangue e batteri emotropi - microscopia<br />
e profili → Profili emoparassitari, Profili zecche<br />
Babesia spp.(DNA)<br />
(cane)<br />
1 ml EB real time-PCR (1)<br />
Il test permette di rilevare Babesie sia grandi che piccole;<br />
l'esame comprende un'analisi sequenziale, in grado di differenziare<br />
tra: B. canis canis, B. canis vogeli, B. canis rossi,<br />
B. gibsonii e B. conradae.<br />
Rispetto all'identificazione con il microscopio ottico su striscio<br />
di sangue la PCR è nettamente più sensibile.La parassitemia<br />
inizia 5-10 giorni dopo l'infezione. In caso di infezione cronica<br />
le fasi parassitemiche si alternano a momenti di quiescenza e<br />
scomparsa dal circolo periferico del parassita, rendendo spesso<br />
difficile il rilievo diretto del parassita.<br />
Una rilevazione diretta del parassita non è quindi sempre<br />
possibile!<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Babesiosi (cavallo)/ Piroplasmosi<br />
Theileria (già Babesia) equi e Babesia caballi.<br />
La piroplasmosi è una malattia parassitaria del sangue negli equidi, che viene trasmessa da<br />
zecche. È ampiamente diffusa in America settentrionale e meridionale, come pure in Europa<br />
meridionale e orientale. In seguito all'aumento dei trasporti equini e all'ampliamento dell'area di<br />
diffusione dei vettori è tuttavia probabile che casi clinici o animali sieropositivi siano riscontrati<br />
in zone non tipiche.<br />
Il decorso della malattia varia da iperacuto a cronico. I sintomi clinici osservabili sono febbre,<br />
depressione, ittero ed emoglobinuria, in casi cronici anche febbre ricorrente e perdita di peso.<br />
Gli animali infetti possono restare portatori per molto tempo ed agire da fonte di infezione per<br />
le zecche.<br />
Attenzione In Italia la piroplasmosi del cavallo è inserita nella lista B.<br />
Babesia (Ac) (cavallo) 1 ml S, EP, HP IFT (3)<br />
Babesia (Ac) (cavallo) 1 ml S CF (3)<br />
Babesia -<br />
rilevazione diretta<br />
La tecnica CF (fissazione del complemento) per la rilevazione<br />
di anticorpi anti-Babesia viene utilizzata soprattutto per<br />
l'esportazione dei cavalli.<br />
Babesia (Ac) (cavallo) 1 ml S cELISA (3)<br />
Per l'esportazione dei cavalli negli USA.<br />
striscio ematico + 0,5 ml EB Microscopia (1)<br />
cfr. → Babesiosi (cane)<br />
Rilevazione microscopica degli stadi parassitari intraeritrocitari.<br />
154 155
13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Babesia spp. (DNA) 0,5 ml EB PCR (1)<br />
n Babesiosi (gatto)/ Piroplasmosi<br />
Rispetto all'identificazione con il microscopio ottico su striscio<br />
di sangue la PCR è nettamente più sensibile.<br />
La parassitemia inizia 5-10 giorni dopo l'infezione. In caso di<br />
infezione cronica le fasi parassitemiche si alternano a momenti<br />
di quiescenza e scomparsa dal circolo periferico del parassita,<br />
rendendo spesso difficile il rilievo diretto del parassita.<br />
Una rilevazione diretta del parassita non è quindi sempre<br />
possibile!<br />
cfr. anche → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
La babesiosi felina è un'infezione dei globuli rossi causata da Babesia felis. La patologia è<br />
caratterizzata da febbre, anoressia, letargia, anemia ed occasionalmente ittero, vomito, pica e<br />
sintomi respiratori. Si suppone che la babesiosi sia trasmessa da zecche, anche se il vettore non è<br />
ancora stato isolato. I merozoiti vengono trasmessi dalla puntura del vettore, si insinuano negli<br />
eritrociti dove si moltiplicano e infettano altri eritrociti. Spesso la piroplasmosi felina è stata<br />
osservata in concomitanza con altre infezioni come haemobartonellosi, FIV, FeLV, micoplasmosi.<br />
La diagnosi di babesiosi felina è possibile con l'identificazione dei parassiti negli eritrociti su<br />
striscio di sangue periferico. Tuttavia i piccoli piroplasmi possono essere morfologicamente<br />
indistinguibili. Inoltre un basso livello di parassitemia potrebbe renderne difficile l'identificazione.<br />
La PCR è una tecnica con un forte vantaggio per quanto riguarda la sensibilità.<br />
Babesia felis (DNA)<br />
(gatto)<br />
0,5 ml EB real time-PCR (1)<br />
La microscopia rappresenta ancora l'esame diagnostico<br />
standard per rilevare una babesiosi. La PCR mostra tuttavia<br />
notevoli vantaggi in termini di sensibilità. Casi acuti possono<br />
essere facilmente identificati tramite microscopia. La PCR<br />
viene principalmente utilizzata per gli esame di controllo dopo<br />
trattamento, per l'identificazione di portatori cronici o per<br />
differenziare la specie di Babesia.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Bartonellosi<br />
Bartonella spp. (DNA) 0,5 ml EB, puntato linfonodale, tampone real time-PCR (1)<br />
congiuntivale<br />
n Border Disease (ovini)<br />
Il test rileva Bartonella henselae, B. vinsonii, B. quintana e<br />
B. clarridgeiae. Gli animali domestici costituiscono un grande<br />
reservoir per l'infezione umana di Bartonella spp., in quanto la<br />
maggior parte delle Bartonelle presenta potenziale zoonotico.<br />
I gatti costituiscono il principale reservoir per Bartonella henselae,<br />
B. clarridgeiae e B. koehlerae. I cani possono infettarsi con<br />
B. vinsonii subsp. berkhoffii, B. henselae, B. clarridgeiae, B.<br />
washoensis, B. elizabethae e B. quintana. Un'infezione con<br />
Bartonella henselae nel gatto ha in linea di massima un decorso<br />
asintomatico. Al momento si discute se sia da mettere in rapporto<br />
con l'insorgenza di linfoadenopatie regionali o generalizzate.<br />
Un gatto infetto può restare batteriemico per mesi o<br />
addirittura anni, sebbene la quantità di batteri nel sangue sia<br />
soggetta a variazioni. La rilevazione dell'agente eziologico nel<br />
gatto è di notevole importanza quando in una persona vicina<br />
all'animale sussiste il sospetto di una "Malattia da graffio di<br />
gatto". Quest'ultima si sviluppa in più del 90 % dei casi come<br />
una linfoadenopatia benigna autolimitante e porta solo in casi<br />
rarissimi, soprattutto in soggetti immunodepressi, a complicazioni<br />
più gravi, come p.es. encefalopatia, artrite e polmonite.<br />
Il virus della Border Disease, appartenente al genere Pestivirus, è un virus a RNA e svolge un<br />
ruolo importante nelle infezioni intrauterine degli agnelli. Raramente sono colpiti animali adulti<br />
(pecora e capra), che però rilasciano il virus in grandi quantità. Il virus è strettamente imparentato<br />
con il virus BVD dei bovini e con il virus della peste suina europea.<br />
Il serbatoio principale del virus del Border Disease è costituito, però, dalle pecore. Se l'infezione<br />
avviene prima del 60° giorno di gravidanza e prima che entrino in azione le difese immunitarie del<br />
feto, si ha un aborto precoce. Nel caso di infezione fra il 50° e i 70° giorno di gravidanza si ha il<br />
quadro clinico tipico degli "hairy shakers" (tremore del vello). Nel caso di infezione fra il 60° e<br />
l'85° giorno di gravidanza si hanno gravi malformazioni del cervello e/o dello scheletro. Dopo l'85°<br />
giorno di gravidanza i feti sopravvivono senza aver contratto la malattia e sono in possesso di una<br />
quantità elevata di anticorpi. Pecore che sono state colpite dalla malattia acquistano un'immunità<br />
perenne e partoriscono agnelli sani.<br />
Border Disease (Ac) 0,5 ml S NT (3)<br />
156 157
13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Borna, malattia di (Borna Disease, BD)<br />
II virus della malattia di Borna (BDV, Borna Disease Virus) è l'agente eziologico di un'encefalomielite<br />
non purulenta che porta a disturbi neurologici e del comportamento. Se sono già comparsi<br />
evidenti sintomi clinici, allora la malattia ha, in genere, esito letale. La maggior parte dei casi<br />
clinici si presenta nella specie equina ed ovina, con particolare intensità in determinate regioni<br />
della Germania e della Svizzera. Il BDV può essere riscontrato anche nel bovino, nella capra,<br />
nel coniglio, nel cane e nell'uomo. Recenti ricerche hanno dimostrato che il BDV in linea di<br />
principio può presentarsi anche al di fuori delle aree endemiche e che il numero di infezioni<br />
asintomatiche è più alto di quanto non si ritenesse finora.<br />
Borna (Ac) 1 ml S, EP, HP, liquor IFT (3)<br />
Nelle zone endemiche la prevalenza può essere anche del 30%, in<br />
alcuni casi fino al 70%.Un esito anticorpale positivo nel sangue<br />
tramite IFT non è quindi sinonimo di malattia. Il rilievo di anticorpi<br />
nel liquor è in genere efficace solo in animali clinicamente malati.<br />
Borna(RNA) 1 ml liquor, p.m. dalla retina PCR (3)<br />
(inviare un bulbo intatto)<br />
Note In Italia la malattia di Borna non è una malattia soggetta a obbligo<br />
di denuncia.<br />
n Borreliosi<br />
Fino ad ora sono state rilevati in Europa 6 degli 11 genotipi di Borrelie (B. burgdorferi sensu stricto, B.<br />
afzelii, B. garinii, B. lusitaniae, B. bissettii e B. valaisiana) che vengono compresi nel gruppo B. burgdorferi<br />
sensu lato. Negli ultimi tempi si hanno inoltre sempre più spesso segnalazioni della presenza di<br />
una nuova specie B. spielmanii, probabilmente patogena per l'uomo. Per la maggior parte di queste<br />
specie non si dispone ancora di informazioni sicure sul loro significato patogenico negli animali.<br />
Alle nostre latitudini la trasmissione avviene principalmente per mezzo della zecca Ixodes ricinus. La<br />
diffusione delle Borrelie coincide quasi completamente con la diffusione dell'Ixodes, ne consegue<br />
perciò che in tutta la Germania (NdC, anche in Italia) si possono avere infezioni. Oltre all'uomo, è<br />
soprattutto il cane ad andare soggetto alla malattia. Le altre specie animali sembrano essere meno<br />
colpite da quest'infezione, sebbene nel caso del cavallo si discuta sulla possibile rilevanza clinica.<br />
Nell'uomo la malattia può essere suddivisa in tre fasi. All'inizio si ha la comparsa di un'infezione<br />
localizzata, per lo più nella forma di un eritema migrante (erythema migrans). Segue la<br />
disseminazione dell'infezione nell'organismo con un ampio spettro di varie manifestazioni cliniche.<br />
Spesso si hanno dei sintomi neurologici (p.es. meningoradicolite linfocitaria, meningite linfocitaria).<br />
Nel terzo stadio, quello cronico, prevalgono soprattutto artriti e dermatiti croniche. Raramente si<br />
arriva ad una cronicizzazione dei sintomi neurologici. Nel cane una suddivisione di questo tipo non<br />
è possibile o lo è solo in minima parte.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Sintomatologia Cani colpiti mostrano, a seconda dell'entità dell'infezione:<br />
- febbre<br />
- inappetenza, apatia<br />
- zoppia intermittente, mono<br />
- ed oligoartrite<br />
Borrelia burgdorferi<br />
sensu lato (DNA)<br />
Borrelia (Ac) (IgG)<br />
(cane e cavallo)<br />
In relazione alla borreliosi vengono riportati anche i seguenti<br />
sintomi:<br />
- miocardite<br />
- uveite, corioretinite, congiuntivite<br />
- nefrite, glomerulonefrite e insufficienza renale, soprattutto in<br />
determinate razze canine (p.es. Bovaro del Bernese,<br />
Labrador, Golden Retriever)<br />
- disturbi neurologici (paresi, spasmi)<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
PCR (1)<br />
1 ml S, EP, HP ELISA (1)<br />
La rilevazione di anticorpi anti-Borrelia IgG è possibile circa<br />
4-6 settimane p.i. Dal momento che il tasso di incidenza<br />
dell'infezione è relativamente alto nella popolazione canina,<br />
un titolo positivo non implica necessariamente una borreliosi<br />
attiva dal punto di vista clinico.Inoltre è possibile ottenere<br />
risultati erroneamente positivi per effetto di una reazione<br />
crociata, in caso di infezioni con altre spirochete e della<br />
presenza di anticorpi conseguenti ad una vaccinazione.Una<br />
rilevazione di anticorpi con risultato positivo o border line deve<br />
perciò venir confermata per mezzo di immunoblot (diagnosi a<br />
due tempi).Titoli di IgG elevati possono continuare a sussistere<br />
per molto tempo anche dopo una terapia clinica efficace, il<br />
che significa che questo metodo non è adatto per un controllo<br />
del successo di una terapia.<br />
158 159
13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Borrelia (Ac) (IgM)<br />
(cane)<br />
Borrelia-Screening C6<br />
qualitativo (Ac)<br />
1 ml S, EP, HP ELISA (1)<br />
Nell'uomo la rilevazione di anticorpi IgM anti-Borrelia è<br />
possibile di norma a partire da 3 settimane p.i. ed è indizio<br />
della presenza di una forma acuta.<br />
Nel cane sembra invece che le IgM persistano a lungo anche<br />
in assenza di una forma acuta. Inoltre in caso di reinfezione<br />
non sempre si ha una nuova risposta di tipo IgM. Di conseguenza<br />
la presenza di un titolo IgM positivo non implica<br />
necessariamente la presenza di una borreliosi acuta. Inoltre le<br />
reazioni crociate non possono venire completamente escluse.<br />
Borrelia (Ac) (IgG) 1 ml S, EP, HP Immunoblot (1)<br />
In caso di rilevazione di anticorpi con risultato positivo o<br />
border line tramite test ELISA si deve far seguire un Western<br />
Blot come test di conferma.<br />
1 ml S, EP, HP ELISA (1)<br />
La rilevazione qualitativa di anticorpi anti-Borrelia burgdorferi C 6<br />
è un nuovo metodo della diagnostica della borreliosi e dovrebbe<br />
essere impiegato come metodo di screening. Il vantaggio del<br />
procedimento consiste nella sua specificità. Infatti non sono<br />
mai state descritte reazioni crociate degli anticorpi nei confronti<br />
di altre spirochete e di anticorpi prodotti in seguito ad una vaccinazione.<br />
Vale a dire, un risultato positivo non ha più bisogno<br />
di essere confermato per mezzo di immunoblot ed è indice di<br />
un'infezione acuta da Borrelia.La rilevazione è spesso possibile<br />
già a 3 settimane di distanza dall'infezione. A tale proposito<br />
sembra che i livelli di anticorpi anti-C 6 nel sangue siano correlati al<br />
carico di Borrelia nell'animale. Aumentano in forte misura dopo<br />
l'infezione e ridiscendono nettamente in seguito ad una terapia.<br />
Ne consegue che gli animali trattati nei mesi precedenti con<br />
antibiotici efficaci contro la Borrelia (p.es. Doxiciclina,<br />
Amoxiciclina) dovrebbero essere testati secondo il metodo<br />
diagnostico a due tempi (ELISA + Immunoblot). Una terapia<br />
antibiotica iniziata poche settimane prima del prelievo non<br />
influisce sul test degli anticorpi C 6. Animali con borreliosi<br />
clinicamente manifesta possono rilevare una positività al test<br />
anche dopo terapia antibiotica.<br />
cfr. anche i seguenti profili → Profilo zecche 1 e 2, Profilo emoparassitario 2<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Borrelia Quant C6 ®<br />
quantitativo (Ac) (cane)<br />
Dal momento che i livelli di anticorpi anti-Borrelia burgdorferi C 6<br />
sembra siano correlati al carico di Borrelia nell'animale, si può<br />
ricorrere alla rilevazione quantitativa a conferma del successo<br />
di una terapia. A questo proposito si deve, subito dopo una<br />
rilevazione qualitativa positiva, determinare il valore basale per<br />
mezzo di ELISA quantitativo. Se l'animale mostra i sintomi<br />
clinici che riportano ad una borreliosi si deve procedere con la<br />
terapia. Se un secondo esame a distanza di 6 mesi rileva una<br />
caduta intorno al 50% del livello di anticorpi anti-Borrelia<br />
burgdorferi C 6 significa che la terapia ha avuto successo.<br />
Attenzione Il test può essere effettuato solo per il cane e solo su siero.<br />
n BRSV (infezione da)<br />
Il BRSV (Bovine Respiratory Syncytial Virus, virus respiratorio sinciziale bovino), appartenente<br />
al genere Pneumovirus della famiglia dei Paramyxovirus, è una delle concause della broncopolmonite<br />
enzootica nel bovino (come pure in altri ruminanti). Provoca infezioni clinicamente<br />
inapparenti con rilascio permanente o temporaneo del virus. In condizioni di particolare affaticamento<br />
o in presenza di altri agenti patogeni cresce la suscettibilità dell'animale per la malattia,<br />
che è accompagnata da febbre, sintomi delle vie respiratorie ecc.. La maggior parte dei bovini<br />
adulti possiede anticorpi sierici che proteggono dalla malattia, ma non dall'infezione che<br />
comporta moltiplicazione e diffusione del virus. Gli anticorpi materni vengono trasmessi<br />
attraverso il colostro. Particolarmente suscettibili sono tuttavia i vitelli di età compresa fra i<br />
2 e i 5 mesi. Di tanto in tanto capita che siano colpiti dalla malattia anche bovini giovani o<br />
animali adulti.<br />
BRSV (Ac) (bovino) 1 ml S ELISA (3)<br />
n Brucellosi<br />
1 ml S ELISA (1)<br />
Al genere Brucella appartengono le seguenti specie di particolare importanza: B. abortus<br />
(brucellosi bovina), B. melitensis (brucellosi della pecora e della capra), B. suis (brucellosi<br />
suina), B. ovis e B. canis. Non esiste una specie-specificità , poichè l'infezione può colpire anche<br />
altri animali o anche l'uomo. La trasmissione avviene per via sia orale che genitale; la fonte<br />
principale di infezione è costituita da animali infetti latenti escretori dell'agente patogeno.<br />
Sintomatologia - febbre<br />
- anoressia, apatia<br />
- aborti nell'ultimo terzo di gravidanza<br />
- infiammazioni dei testicoli e dell'epididimo<br />
- sterilità in animali maschi<br />
160 161
13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Brucella canis (Ac) 0,5 ml S Test di agglutinazione su vetrino (3)<br />
Rilevazione qualitativa di anticorpi,nessuna titolazione.<br />
Brucella canis (Ac) 0.5 ml S SAL (3)<br />
L'agglutinazione lenta per la rilevazione di anticorpi anti-<br />
Brucella canis viene eseguita soprattutto per l'esportazione di<br />
cani.<br />
Si prega di indicare espressamente sul modulo di richiesta che si<br />
tratta di un'analisi per esportazione.<br />
Brucella abortus (Ac) 1 ml S ELISA (3)<br />
Brucella suis (Ac) 0,5 ml S SAL (3)<br />
Brucella melitensis (Ac) 1 ml S ELISA (3)<br />
Brucella ovis (Ac) 1 ml S ELISA (3)<br />
Attenzione In Italia la brucellosi di bovino, suino, pecora e capra sono malatte<br />
inserite nella lista B.<br />
n BVD - MD (Diarrea virale bovina)<br />
L'agente eziologico della diarrea virale bovina (BVD, Bovine Viral Diarrhea) e della malattia<br />
delle mucose (MD, Mucosal Disease) del bovino è un Pestivirus della famiglia Flaviviridae. A<br />
seconda del loro comportamento in sede di coltura cellulare si distingue tra ceppi citopatogeni<br />
e non citopatogeni del virus (BVDV, Bovine Viral Diarrea Virus). In genere le infezioni da BVDV<br />
si sviluppano a livello subclinico. Tuttavia, a seconda della virulenza dell'agente eziologico e<br />
dello stato di salute dell'animale, l'infezione acuta può essere accompagnata anche da leucopenia,<br />
trombocitopenia, febbre, diarrea lieve, disturbi respiratori e/o immunodepressione.<br />
Infezioni ad opera di ceppi altamente virulenti sono piuttosto rare: esse portano soprattutto nei<br />
vitelli ad una malattia con morbidità e mortalità elevate, che viene detta Sindrome Emorragica.<br />
Il quadro clinico è caratterizzato da trombocitopenia grave ed emorragie in diversi organi.<br />
Sono tuttavia le infezioni intrauterine da BVDV ad avere da sempre la massima rilevanza. A<br />
seconda dello stadio della gravidanza possono dar luogo a morte fetale, aborti, mortinatalità,<br />
parti di vitelli non vitali, ma anche a parti di vitelli sani. In caso di infezione del feto fra il 40°<br />
e il 120° giorno di gravidanza con un ceppo non citopatogeno si acquisisce una tolleranza<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
immunitaria contro il virus: l'animale in questione rimane persistentemente infetto per tutta<br />
la vita e rilascia in continuazione elevate quantità di virus. Nella maggior parte dei casi<br />
nell'animale infetto si sviluppa, in seguito a mutazione del virus non citopatogeno, in età<br />
compresa fra i 6 mesi e i 2 anni, un virus citopatogeno che nel giro di 2 settimane porta ad<br />
una malattia delle mucose con esito mortale.<br />
Attenzione In Italia la diarrea virale bovina è una malattia soggetta a<br />
obbligo di denuncia.<br />
BVD-MD (Ag) 2 ml S, EB, HP ELISA (3)<br />
BVD (Ac) 1 ml S AGT (3)<br />
n CAE<br />
vedi → Arterite encefalite caprina<br />
n Calicivirus (infezione da)<br />
Il Calicivirus felino è un cofattore causante la rinotracheite felina. L'infezione ha luogo<br />
attraverso il contatto diretto con saliva o secreto nasale. Il periodo di incubazione è di<br />
3-5 giorni. A seconda dello stato immunitario l'infezione varia da forme inapparenti fino a<br />
forme acute. Animali che hanno superato l'infezione restano spesso per molto tempo<br />
escretori del virus.<br />
Sintomatologia - febbre<br />
- anoressia, apatia<br />
- congiuntivite<br />
- rinite<br />
- stomatite e ulcerazioni della mucosa orale<br />
- broncopolmoniti<br />
- "forma reumatica" con zoppia e gonfiore delle articolazioni<br />
Calicivirus (Ac) 1 ml S NT (3)<br />
Calicivirus (RNA)<br />
(gatto)<br />
Dopo circa 14 giorni p.i. è possibile rilevare anticorpi<br />
neutralizzanti. Non è possibile distinguere fra titoli infettivi e<br />
titoli vaccinali.<br />
Tampone: nasale, faringeo, oculare<br />
Malattia acuta/febbre: 1 ml EB real time-PCR (1)<br />
162 163
13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Chlamydophila (infezione da)<br />
In seguito a studi recenti la denominazione Chlamydia va adottata solo per Chl. suis e per<br />
Chl. trachomatis. Gli agenti infettivi noti finora come Chlamydia psittaci vengono distinti oggi in<br />
Chlamydophila abortus (ovino), caviae (cavia), psittaci (uccelli), felis (gatto) e pneumoniae.<br />
I Chlamydophila sono batteri intracellulari obbligati e pertanto diagnosticabili solo con difficoltà.<br />
L'infezione avviene di norma per via oronasale, ma negli ovini anche attraverso la monta.<br />
Sintomatologia I sintomi variano fortemente a seconda della specie animale e<br />
dell'individuo. Spesso si tratta di infezioni latenti.<br />
Ovino:<br />
- aborto<br />
Gatto:<br />
- congiuntivite<br />
- concausa della rinotracheite felina<br />
Uccelli:<br />
- scolo oculare e nasale<br />
- diarrea<br />
- dimagrimento<br />
Attenzione In Italia la psittacosi e le infezioni da Chlamydie dell'ovino<br />
sono malattie inserite nella lista B.<br />
Chlamydophila spp<br />
(DNA)<br />
a seconda della sintomatologia real time-PCR (1)<br />
Con l'analisi di un campione prelevato al momento della prima<br />
comparsa della sintomatologia si ottengono esiti più significativi.<br />
Trattandosi di un parassita intracellulare obbligato bisogna<br />
prestare attenzione a prelevare dei tamponi possibilmente<br />
ricchi di cellule. Un esito positivo alla PCR conferma il sospetto<br />
clinico della presenza di Chlamydia, un esito negativo, invece,<br />
non ne esclude la presenza. Il test PCR della regione genica<br />
16S rRNA per la rilevazione della cosiddetta Chlamydia psittaci<br />
non permette di distinguere l'una dall'altra Chlamydophila<br />
psittaci, Chl. abortus, Chl. felis e Chl. caviae. Per differenziare le<br />
specie di Chlamydophila citate sopra si può tuttavia prendere<br />
in considerazione l'adattamento delle singole specie ai loro<br />
animali ospiti: è così che si trova Chlamydophila psittaci negli<br />
uccelli, Chl. abortus soprattutto negli ovini, Chl. felis nei gatti e<br />
Chl. caviae nelle cavie.<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Chlamydophila (Ac) 0.5 ml S CF (3)<br />
n CHV<br />
vedi → Herpesvirus canino<br />
n Cimurro<br />
La rilevazione di anticorpi anti-Chlamydophila è possibile in<br />
tutte le specie animali ad eccezione degli uccelli; non è<br />
possibile invece una differenziazione delle singole specie di<br />
Chlamydophila.<br />
L'infezione da virus del cimurro nel cane è una malattia altamente contagiosa, con decorso<br />
variabile da acuto a subacuto o cronico. L'agente responsabile è un Morbillivirus, che oltre al<br />
cane colpisce anche rappresentanti selvatici dei Canidi, rappresentanti dei Mustelidi, dei<br />
Procionidi e foche. La trasmissione avviene per mezzo di goccioline di areosol. Il virus viene<br />
espulso assieme a tutti i secreti ed escreti. Il periodo di incubazione dura dai 3 ai 7 giorni.<br />
Sintomatologia A seconda del ceppo virale e dello stato immunitario il cimurro<br />
può presentarsi in forme notevolmente diverse, con una varietà<br />
di sintomi dovuta alle infezioni batteriche secondarie seguite<br />
all'azione immunodepressiva del virus:<br />
- febbre<br />
- sintomi gastrointestinali (vomito, diarrea)<br />
- sintomi respiratori (rinite, congiuntivite, tosse, polmonite)<br />
- sintomi del sistema nervoso centrale (spasmi, atassie,<br />
paresi)<br />
- dentatura da cimurro<br />
- ipercheratosi dei cuscinetti plantari (Hard Pad Disease),<br />
dermatite<br />
- encefalite del cane anziano 'old dog encephalitis'<br />
164 165
13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Cimurro canino (CDV)<br />
(RNA)<br />
real time-PCR (1)<br />
Fase febbrile: 2 ml EB<br />
Congiuntivite: tampone congiuntivale<br />
Sintomi del sistema<br />
nervoso centrale: 0,5 ml liquor<br />
Gastroenterite: tampone rettale<br />
Sintomi delle vie respiratorie: secreto nasale<br />
Il virus del cimurro canino (CDV, Canine Distemper Virus) si<br />
moltiplica a partire dall'8° giorno p.i. nelle cellule epiteliali di<br />
diversi organi (vie respiratorie, tratto digerente, tratto urogenitale,<br />
cute) e nel sistema nervoso centrale; è il luogo di<br />
replicazione del virus a determinare la sintomatologia clinica.<br />
Da questo momento in avanti è possibile rilevare il virus negli<br />
organi colpiti con metodo PCR.Ad eccezione delle forme<br />
con decorso cronico, l'escrezione del virus termina con la<br />
scomparsa dei sintomi clinici. Dopodiché il virus non è più<br />
rilevabile.<br />
Contrariamente a quanto succede per la rilevazione degli<br />
anticorpi, l'alta percentuale di animali vaccinati non rappresenta<br />
un problema decisivo per la diagnosi con PCR, in quanto il<br />
virus vaccinale è rilevabile solo fra gli 8 e i 21 giorni al<br />
massimo post vaccinazione e resta confinato al tessuto<br />
linfatico.<br />
Cimurro (Ac) 0.5 ml S NT (1)<br />
La rilevazione di anticorpi anti-cimurro nel cane per mezzo di<br />
test di neutralizzazione del virus può venire effettuata non<br />
prima di 10-14 giorni p.i. Non è possibile distinguere fra titoli<br />
anticorpali da infezione e da vaccinazione. Cani con forme<br />
acute di cimurro presentano generalmente un livello di<br />
anticorpi basso o nullo, è solamente nella forma cronica del<br />
cimurro che i titoli anticorpali crescono lentamente. In questi<br />
casi si consiglia di controllare l'aumento dei titoli nel giro di<br />
14 giorni. Per controllare lo stato vaccinale è sufficiente un<br />
singolo esame. Titoli anticorpali =1:100 nel test di<br />
neutralizzazione del virus sono considerati protettivi.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Circovirus (infezioni da)<br />
vedi → PBFD<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
n Coronavirus (infezione da)<br />
Coronavirus bovino (Ag) 5-10 g feci Immunocromatografia (1)<br />
I Coronavirus provocano diarrea nei vitelli neonati nel corso dei<br />
primi 14 giorni di vita. La malattia insorge per lo più in inverno,<br />
dal momento che il virus sopravvive meglio in clima freddo e<br />
umido. I bovini adulti sono in genere escretori asintomatici del<br />
virus e costituiscono perciò una fonte di infezione per animali<br />
giovani.<br />
Con il test antigenico viene rilevato il Coronavirus bovino.<br />
Sintomatologia - feci gialle e liquide 2 giorni p.i., per 3-6 giorni<br />
- apatia<br />
- anoressia<br />
- febbre<br />
- disidratazione<br />
Coronavirus canino<br />
CECoV (RNA)<br />
Coronavirus felino vedi → FIP<br />
Coronavirus suino vedi → Gastroenterite trasmissibile del suino<br />
tampone rettale, feci real time-PCR (1)<br />
Un tampone rettale va effettuato con la prima comparsa dei<br />
sintomi, dal momento che l'escrezione del virus decresce<br />
rapidamente dopo la prima settimana p.i.; dopo il 15° giorno p.i.<br />
non è più rilevabile alcun virus. Dal momento che un'infezione<br />
da CECoV (Canine Enteric Coronavirus) provoca una gastroenterite<br />
generalmente lieve e autolimitante, l'interesse principale<br />
della diagnostica PCR consiste nell'identificazione precoce di<br />
animali malati e di escretori del virus con infezione latente<br />
all'interno di un allevamento. Ovviamente la rilevazione di<br />
Coronavirus nelle feci non esclude il coinvolgimento di altri<br />
agenti patogeni nella diarrea.<br />
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13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Diarrea virale bovina<br />
vedi → BVD - MD<br />
n Dirofilariosi<br />
Dirofilaria immitis è il parassita responsabile della dirofilariosi cardiopolmonare. Oltre al cane<br />
e al gatto si è a conoscenza di infezioni cliniche in dingo, coyote, volpe rossa e grigia, lupo<br />
rosso, puzzola e furetto. In caso di constatata parassitemia (rilevazione di microfilarie) bisogna<br />
prendere in considerazione a scopi di diagnosi differenziale anche le microfilarie di altre Filarie,<br />
sia patogene (Dirofilaria repens) che non patogene (Dipetalonema reconditum/dracunculoides<br />
e Dipetalonema grassi). La trasmissione avviene attraverso puntura di zanzara (Culex, Aedes,<br />
Anopheles). D. immitis è endemica nella maggior parte delle regioni tropicali e subtropicali,<br />
come pure in tutta l'area mediterranea.<br />
Sintomatologia I sintomi della malattia variano a seconda della gravità<br />
dell'infezione.<br />
Forma acuta - Sindrome della vena cava: debolezza acuta, anoressia,<br />
dispnea, ascite, ittero, anemia emolitica, shock<br />
ipovolemico<br />
- Polmonite allergica: tosse, dispnea, anoressia,<br />
perdita di peso, cianosi<br />
Forma cronica - 1° stadio: stato di salute generale senza alcuna<br />
particolarità e nessun sintomo<br />
- 2° stadio: crollo delle prestazioni agonistiche, tosse<br />
sporadica, anemia<br />
- 3° stadio: letargia, tosse cronica, perdita di peso,<br />
dispnea, tachipnea, emottisi, sincope, anemia,<br />
rumori polmonari in fase inspiratoria,<br />
epatomegalia, ascite, insufficienza renale<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Filaria spp. (DNA) 1 ml EB PCR (1)<br />
Microfilarie -<br />
rilevazione diretta<br />
Dirofilaria immitis<br />
(Macrofilaria) (Ag)<br />
Tramite questo test PCR si possono differenziare le microfilarie<br />
rilevate con il test di Knott o sullo striscio ematico. In questo<br />
modo è possibile identificare con sicurezza se si tratta di una<br />
Filaria patogena o apatogena, in modo tale da scegliere il protocollo<br />
terapeutico appropriato.<br />
Con questa PCR è possibile differenziare anche le Filarie adulte<br />
prelevate ad es. da un nodulo sottocutaneo (Dirofilaria repens<br />
o Acanthocheilonema reconditum), dal cuore (Dirofilaria immitis)<br />
e dalla cavità peritoneale (Acanthocheilonema dracunculoides).<br />
Per ogni campione viene eseguita una PCR specifica per<br />
Dirofilaria immitis e una per Dirofilaria repens, oltre che una PCR<br />
"a 6 specie". Tramite quest'ultima vengono rilevate ulteriori<br />
4 specie, che sono tuttavia rare (Acanthocheilonema reconditum<br />
e A. dracunculoides, Brugia malayi e B. pahangi).<br />
1 ml EB Test di Knott (1)<br />
L'identificazione delle microfilarie avviene con il microscopio<br />
ottico dopo arricchimento (test di Knott). Questo procedimento<br />
non permette di differenziare le microfilarie della Dirofilaria<br />
immitis dalle microfilarie di altre specie; per questo motivo,<br />
in caso di esito positivo, si dovrebbe richiedere la PCR per la<br />
differenziazione. Si deve esaminare preferibilmente sangue<br />
capillare prelevato nella sera o nel tardo pomeriggio.<br />
L'identificazione delle microfilarie è possibile non prima di<br />
6 mesi (meglio: 7-9 mesi) p.i.Molte infezioni sono in forma<br />
occulta e spesso non è possibile, anche in presenza di<br />
infezione, rilevare alcuna microfilaria.<br />
1 ml S, EP, HP ELISA (1)<br />
La rilevazione degli antigeni di macrofilaria (Dirofilaria immitis) è<br />
possibile non prima di 5-6 mesi p.i. In alcuni casi<br />
(infestazione di modesta intensità, vermi già morti,<br />
localizzazioni ectopiche, filarie di solo sesso maschile ecc.)<br />
possono aversi risultati falsi negativi.<br />
cfr. anche i nostri profili → Parassiti del sangue e batteri emotropi - microscopia<br />
ematobiochimici e → Profilo emoparassitario II<br />
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13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n EBL<br />
vedi → Leucosi bovina enzootica<br />
n Ehrlichiosi<br />
Ai fini della rilevazione di un'ehrlichiosi o anaplasmosi è necessario distinguere fra le infezioni<br />
proprie delle zone tropicali e subtropicali, come l'ehrlichiosi (anaplasmosi) canina monocitaria<br />
o canina trombocitaria e la forma granulocitaria della malattia, frequente invece nelle regioni<br />
settentrionali.<br />
L'agente eziologico più importante dell'ehrlichiosi canina monocitaria è il batterio Ehrlichia canis.<br />
Il suo vettore di trasmissione in Europa è il Rhipicephalus sanguineus. E. canis è ampiamente<br />
diffusa nelle regioni tropicali e subtropicali e si trova in Europa in tutta l'area mediterranea. In<br />
Italia l'infezione è diffusa in tutta la penisola. Altre infezioni monocitarie, come p.es. quella da<br />
E. chaffeensis, sono diffuse prevalentemente negli Stati Uniti.<br />
In Europa meridionale si hanno inoltre infezioni con Anaplasma (E.) platys, le quali possono<br />
causare la cosiddetta trombocitopenia ciclica del cane.<br />
Di sempre maggiore importanza stanno diventando le infezioni da Anaplasma phagocytophilum,<br />
l'agente eziologico dell'anaplasmosi (ehrlichiosi) granulocitaria del cane. Questa forma è diffusa<br />
soprattutto in Europa centrale e settentrionale. Il vettore di trasmissione è l'Ixodes ricinus.<br />
Un'ehrlichiosi canina monocitaria dovuta ad un'infezione da E. canis può manifestarsi con un<br />
ampio spettro di sintomi clinici.<br />
Ad un periodo di incubazione che dura fino a 3 settimane segue lo stadio di malattia acuta della<br />
durata di 2-4 settimane. Questo è caratterizzato nella maggior parte dei casi da una sintomatologia<br />
clinica lieve ed aspecifica, sebbene ciò non escluda la possibilità anche di quadri clinici<br />
gravi comportanti un rischio per la vita dell'animale.<br />
Spesso i cani colpiti dalla malattia presentano febbre, anoressia, letargia, linfoadenopatia e<br />
splenomegalia. Si può riscontrare anche un'elevata tendenza al sanguinamento. Oltre a questo<br />
sono da considerare anche sintomi oculari e neurologici. Per mezzo della diagnostica di<br />
laboratorio si constata nella maggior parte dei casi la presenza di trombocitopenia, come pure<br />
di anemia lieve, leucopenia e ipergammaglobulinemia. I valori di ALT e di ALP sono elevati.<br />
Dopo una fase subclinica di durata variabile la malattia può passare in uno stadio cronico, non<br />
più influenzabile terapeuticamente. Per ragioni non ancora chiare, non tutti gli animali sviluppano<br />
la fase cronica.<br />
Lo stadio cronico è caratterizzato da una generale tendenza al sanguinamento. Si rilevano fra<br />
l'altro: edema, anoressia, perdita cronica di peso, sintomi neurologici e ingrossamento dei<br />
linfonodi. Si può avere anche una pancitopenia dovuta a ipoplasia del midollo osseo.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Ehrlichia/ Anaplasma -<br />
rilevazione diretta<br />
Ehrlichia spp.<br />
(DNA, rilevazione di<br />
più specie)<br />
(cane, gatto)<br />
Anaplasma spp.<br />
(DNA, rilevazione di<br />
più specie)<br />
striscio ematico + 1 ml EB microscopia (1)<br />
La rilevazione diretta dell'agente eziologico su striscio ematico è,<br />
in genere, possibile soltanto durante lo stadio acuto della malattia,<br />
con il microscopio ottico su striscio colorato con Giemsa, in<br />
condizioni ideali preparato con sangue capillare.<br />
Un esito negativo nella rilevazione diretta non esclude<br />
assolutamente un'infezione!<br />
2 ml EB, 0,5 ml liquor real time-PCR (1)<br />
Si tratta di un test più sensibile della rilevazione con il microscopio<br />
ottico su striscio ematico.In animali con sintomi clinici un esito<br />
positivo è a favore di un'infezione con uno o più dei seguenti agenti<br />
eziologici: E. canis, E. ewingii, E. chaffeensis.<br />
Un esito negativo nella rilevazione diretta tuttavia non esclude<br />
assolutamente un'infezione!<br />
È possibile richiedere una differenziazione delle singole specie<br />
ricorrerendo ad un'analisi sequenziale del prodotto PCR amplificato.<br />
A tale scopo siete pregati di mettervi in contatto preliminarmente con il<br />
laboratorio!<br />
2 ml EB, milza, midollo real time-PCR (1)<br />
Si tratta di un test più sensibile della rilevazione con il<br />
microscopio ottico su striscio ematico. In animali con sintomi<br />
clinici un esito positivo è a favore di un'infezione con uno o più<br />
dei seguenti agenti eziologici: A. phagocytophylum, A. platys.<br />
Un esito negativo nella rilevazione diretta tuttavia non esclude<br />
assolutamente un'infezione!<br />
È possibile richiedere una differenziazione tra A.<br />
phagocytophylum e A. platys ricorrerendo ad un'analisi<br />
sequenziale del prodotto PCR amplificato.<br />
A tale scopo siete pregati di mettervi in contatto<br />
preliminarmente con il laboratorio!<br />
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13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Ehrlichia canis<br />
(DNA)<br />
La rilevazione diretta con metodo PCR può venire eseguita già<br />
a partire dal 4°-6° giorno p.i. Si tratta di un test generalmente<br />
più sensibile della rilevazione con il microscopio ottico su<br />
striscio di sangue. Si consiglia tuttavia di farvi ricorso anche<br />
in questo caso soprattutto nella fase acuta della malattia, dal<br />
momento che negli stadi più avanzati spesso non si rileva<br />
alcun agente eziologico nel sangue. È importante ricordarsi<br />
che anche in questo caso un risultato negativo non basta a<br />
escludere con sicurezza un'infezione.<br />
Entro certi limiti è possibile eseguire con metodo PCR un<br />
controllo del successo di una terapia.<br />
La rilevazione di anticorpi anti-Ehrlichia canis è generalmente<br />
possibile a partire dal 14° giorno p.i. Alcuni cani mostrano<br />
tuttavia una sieroconversione solo dal 28° giorno p.i. Se<br />
nell'esame di due campioni di siero raccolti a distanza di 2-3<br />
settimane si constata un aumento di quattro volte del titolo,<br />
si ha a che fare con una forma acuta. Dal momento che i titoli<br />
restano elevati per mesi, un risultato positivo non è di per sé<br />
equivalente a una malattia clinicamente manifesta.<br />
È possibile avere reazioni crociate con altre specie di Ehrlichia.<br />
cfr. anche i nostri profili → Parassiti del sangue e batteri emotropi - microscopia<br />
ematobiochimici e → Profilo emoparassitario I e<br />
Anaplasma (Ehrlichia)<br />
phagocytophilum(Ac)<br />
(cane, cavallo)<br />
cfr. anche i nostri profili → Profilo zecche 1 e 2<br />
2 ml EB, biopsia splenica o osteo-midollare real time-PCR (1)<br />
Ehrlichia canis (Ac) 1 ml S, EP, HP IFT (1)<br />
1 ml S, EP, HP IFT (3)<br />
La rilevazione di anticorpi è di grande importanza diagnostica.<br />
Se nell'esame di due campioni di siero raccolti a distanza di<br />
2 - 3 settimane si constata un aumento di quattro volte dei<br />
titoli, questo indica la presenza di una forma patologica acuta.<br />
Al contrario, da una singola rilevazione con esito positivo non<br />
è possibile trarre alcuna conclusione dal momento che in aree<br />
endemiche sono state descritte sieroprevalenze di circa il<br />
20 %. Un titolo anticorpale non è perciò di per sé equivalente<br />
ad una malattia clinica.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Ehrlichiosi monocitaria equina<br />
L'ehrlichiosi monocitaria equina o Potomac horse fever (PHF) o colite equina da Ehrlichia è una<br />
malattia sistemica acuta del cavallo sostenuta da Neorickettsia risticii, precedentemente denominata<br />
Ehrlichia risticii. Si tratta di un parassita intracellulare obbligato della famiglia<br />
Rickettsiaceae. La malattia si riscontra più frequentemente lungo il corso di grossi fiumi e<br />
affluenti, soprattutto nel periodo estivo. Il DNA di N. risticii è stato identificato in mesocercarie<br />
e metacercarie in lumache acquatiche ed insetti acquatici; il cavallo si infetta bevendo l'acqua<br />
contaminata da N. risticii. È stata riportata anche la trasmissione transplacentare.<br />
La N. risticii infetta i monociti del sangue e ha una predilezione per la parete intestinale<br />
specialmente del grosso intestino.<br />
La malattia si manifesta con febbre, depressione, inappetenza, diarrea acquosa, disidratazione<br />
e spesso laminite. I cavalli con diarrea presentano leucopenia ed emoconcentrazione.<br />
Sono state riportate anche infezioni nel cane con una sintomatologia riconducibile a E. canis.<br />
Neorickettsia risticii<br />
(DNA) cavallo<br />
n EHV<br />
vedi → Herpesvirus equino (infezione da)<br />
n Emobartonellosi/ Micoplasmi emotropi<br />
1 ml EB, feci real time-PCR (1)<br />
Il test anticorpale non permettere di determinare se il cavallo è<br />
effettivamente infetto al momento del prelievo o se si tratta di<br />
anticorpi formatisi in seguito ad una precedente esposizione al<br />
patogeno. Il microrganismo parassita i monociti circolanti, è<br />
quindi possibile ricercare il parassita su uno striscio di sangue<br />
periferico; tuttavia solo una bassa percentuale di monociti<br />
risulta essere infetta, rendendo la microscopia un esame poco<br />
sensibile. Il rilievo dell'agente patogeno tramite PCR risulta<br />
essere più sensibile ed altamente specifico.<br />
vedi → Mycoplasma haemofelis, Candidatus Mycoplasma<br />
haemotoparvum, Candidatus Mycoplasma haemominutum,<br />
Candidatus Mycoplasma turicensis, Mycoplasma haemocanis<br />
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13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Encefalite da puntura di zecca/Meningoencefalite primaverile (TBE)<br />
L'agente eziologico dell'encefalite da puntura di zecca (TBE, Tick Borne Encephalitis; Meningoencefalite<br />
primaverile o Encefalite da zecca) è un Flavivirus che in Europa centrale viene<br />
trasmesso principalmente dalla zecca dura Ixodes ricinus. Come malattia clinica negli animali<br />
domestici è stata finora descritta soprattutto nel cane. Esistono anche descrizioni isolate nel<br />
cavallo e nei piccoli ruminanti. Zone endemiche per la meningoencefalite primaverile si trovano<br />
di norma in aree delimitate in diversi Paesi europei, p.es. Svizzera, Austria, Francia, Ungheria,<br />
Cechia, Slovacchia, Polonia, Russia e Slovenia. Anche Finlandia e Svezia meridionale sono<br />
interessate dall'infezione. In Germania si hanno delle zone di particolare concentrazione<br />
soprattutto in Baden-Württemberg, Baviera e Assia meridionale.<br />
La malattia presenta in genere un decorso acuto e progressivo. Sono possibili anche forme<br />
letali iperacute, come subacute o croniche.<br />
Spesso si hanno febbre, apatia, anoressia, alterazioni parziali del comportamento come p.es.<br />
apprensione o aggressività, attacchi convulsivi, paresi, atassia, iperestesia e iperalgesia.<br />
Encefalite da puntura<br />
di zecca (RNA)<br />
Encefalite da puntura<br />
di zecca (Ac)<br />
0,5 ml liquor, zecca PCR (1)<br />
In presenza di sintomi clinici appariscenti si consiglia di<br />
tentare una rilevazione diretta dell'agente patogeno nel liquor.<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
1 ml S CF (3)<br />
Il test di fissazione del complemento (CF) è indicato per la<br />
rilevazione di animali sieropositivi. In zone endemiche si deve<br />
presumere un tasso di incidenza fino al 30% per i cani, senza<br />
che si debba presentare necessariamente una sintomatologia<br />
clinica. Ne consegue che un risultato positivo della rilevazione<br />
non permette di trarre alcuna conclusione sulla presenza di<br />
una malattia clinica. Se nell'esame di due campioni di siero<br />
prelevati a distanza di 2-3 settimane si constata un aumento<br />
cospicuo del titolo, si ha a che fare con un'infezione acuta. È<br />
molto probabile che gli anticorpi che si legano al complemento<br />
rimangano rilevabili a lungo anche dopo esposizione. Se si ha<br />
un concreto sospetto clinico si consiglia in ogni caso<br />
un'analisi sul liquor.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Encefalitozoonosi/Nosematosi<br />
L'Encephalitozoon cuniculi è un parassita unicellulare intracellulare, che, oltre al coniglio,<br />
può colpire anche altri animali domestici e l'uomo.<br />
L'infezione avviene attraverso assunzione orale di spore espulse per via urinaria e in parte<br />
anche per via fecale.<br />
Sintomatologia Accanto a casi di infezione clinicamente inapparente, il<br />
decorso della malattia varia da acuto a cronico.<br />
Si osservano: - torcicollo, opistotono<br />
- paresi e paralisi<br />
- nistagmo<br />
- nefrite<br />
- polidipsia/poliuria<br />
- anoressia, apatia<br />
Encephalitozoon cuniculi<br />
(Ag/spore)<br />
Encephalitozoon cuniculi<br />
(Ac) (coniglio)<br />
3 ml U IFT (1)<br />
Il rilievo di spore nelle urine è possibile nella fase di eliminazione<br />
dell'infezione, in genere da 1 a 3 mesi p.i. Il test ha<br />
importanza diagnostica solo in caso di esito positivo, in quanto<br />
l'eliminazione avviene in modo intermittente e dipende<br />
dall'infestazione renale da parte di E.cuniculi. Il test sierologico<br />
per la ricerca anticorpale costituisce quindi il metodo<br />
diagnostico più sicuro.<br />
0,5 ml S, EP, HP IFT (1)<br />
Gli anticorpi sierici sono rilevabili a partire da 3-4 settimane<br />
p.i. e raggiungono titoli elevati a 8-12 settimane p.i., per poi<br />
ricadere gradualmente e con lievi oscillazioni. Si possono rilevare<br />
anticorpi fino a 3 anni dopo l'infezione. Gli anticorpi<br />
materni, invece, non sono più rilevabili già dalla sesta alla<br />
settima settimana di vita del giovane coniglio. Il test anticorpale<br />
non permette alcuna differenziazione tra animali con infezione<br />
attiva, infezione latente o conigli che hanno formato anticorpi<br />
ma che non sono più infetti.Un esito sierologico negativo<br />
è un indizio del fatto che E.cuniculi non è responsabile della<br />
situazione clinica del paziente. Se tuttavia si dovesse<br />
sviluppare una sintomatologia clinica compatibile con l'encefalitozoonosi,<br />
si consiglia di eseguire un nuovo controllo del<br />
titolo dopo un periodo di 3-4 settimane.<br />
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13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Endometrite contagiosa equina, CEM (Contagious equine metritis),<br />
Taylorella equigenitalis<br />
vedi → Capitolo 16, Microbiologia<br />
n Epatite contagiosa canina<br />
L'Adenovirus canino 1 (CAV 1, Canine Adenovirus) è l'agente eziologico della ICH (Infectious<br />
Canine Hepatitis) nel cane. Esso è strettamente imparentato con il sierotipo CAV 2,<br />
responsabile della cosiddetta "tosse dei canili". Il virus viene rilasciato attraverso tutti gli<br />
escreti e secreti del corpo, nell'urina anche fino a 6 mesi.<br />
Sintomatologia Le prime manifestazioni cliniche compaiono dopo un periodo<br />
di incubazione di 2-7 giorni e sono in relazione al grado di<br />
distruzione delle cellule dovuto alla replicazione del virus:<br />
- febbre<br />
- anoressia, apatia<br />
- tonsillite, faringite<br />
- epatomegalia<br />
- edema, ascite<br />
- diatesi emorragica<br />
- opacamento corneale, uveite<br />
Adenovirus (Ac) 0,5 ml S CF (3)<br />
n EVA<br />
vedi → Arterite virale equina<br />
Una rilevazione di anticorpi con risultato positivo è possibile a<br />
partire dal 10°-14° giorno p.i. Purtroppo non è possibile<br />
differenziare né fra anticorpi anti-CAV 1 e quelli anti-CAV 2, né<br />
fra titoli anticorpali da infezione e da vaccinazione. Un aumento<br />
dei titoli nel periodo di 10-14 giorni conferma la presenza di<br />
un'infezione.<br />
n Febbre maculosa delle montagne rocciose (RMSF)<br />
vedi → Rickettsiosi<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Febbre Q<br />
L'agente eziologico della febbre Q è Coxiella burnetii. La sua importanza per l'animale è in<br />
genere limitata, tuttavia gli animali colpiti rappresentano un pericolo per l'uomo in quanto fonte<br />
di infezione. Possono venirne colpiti, oltre ai ruminanti, anche cavallo, cane e gatto.<br />
Sintomatologia - febbre, apatia, inappetenza<br />
- congiuntivite<br />
- broncopolmonite<br />
- artriti<br />
- aborti<br />
Q- Febbre (Ac) 1 ml S CF (3)<br />
Attenzione In Italia la febbre Q è una malattia inserita nella lista B.<br />
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13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n FeLV (Virus della leucemia felina) (infezione da)<br />
Il FeLV (Feline Leucemia Virus) appartiene alla famiglia dei Retroviridae. Esistono diversi<br />
sottogruppi di FeLV, denominati rispettivamente FeLV-A, FeLV-B e FeLV-C. Le infezioni con<br />
FeLV-B e FeLV-C sono tuttavia possibili solo in combinazione con FeLV-A. La prevalenza del<br />
virus nella popolazione dei gatti in Europa varia a seconda delle Nazioni fra l'1 e il 18 %.<br />
La trasmissione avviene sia per via orizzontale, attraverso saliva o altri liquidi organici (fra<br />
cui sangue e urina), che per via verticale, attraverso la placenta o il latte materno. Il decorso<br />
dell'infezione varia in funzione sia dello stato immunitario dell'animale, sia della dose infettiva e<br />
della virulenza dell'agente. Solo una modesta percentuale di gatti infetti con FeLV si ammala<br />
di un'affezione associata a questo virus, la maggior parte degli animali coinvolti guarisce<br />
dall'infezione o riesce a confinarla. Pare quindi che un numero consistente di gatti infetti<br />
disponga di una buona risposta immunitaria tale da eliminare il virus prima che compaia la<br />
viremia (infezione abortiva). Una rilevazione dell'antigene FeLV nel sangue di questi gatti non è<br />
possibile. Una parte degli animali coinvolti sviluppa una viremia transitoria che può durare fino<br />
a 16 settimane, durante la quale si ha un'escrezione di virus, così da rendere possibile la<br />
rilevazione dell'antigene extracellulare nel sangue. In dipendenza delle difese dell'ospite si<br />
possono quindi probabilmente avere un'eliminazione del virus, un impedimento ad un'ulteriore<br />
moltiplicazione produttiva, o una viremia persistente.<br />
Anche se ne viene bloccata la replicazione, il DNA virale integrato può rimanere nelle cellule infette<br />
sotto forma di provirus (progenoma). In tal caso gli animali restano infetti in forma latente o in<br />
regressione. Una rilevazione dell'antigene extracellulare o intracellulare nel sangue, in genere, non<br />
è più possibile. A seconda del numero di cellule infette si può rilevare il progenoma virale nel<br />
midollo osseo o nel sangue per mezzo della PCR. Non si esclude una riattivazione del virus con<br />
annessa viremia. In alcuni animali è probabile che nel corso del tempo il virus venga eliminato<br />
completamente.<br />
Se un gatto infetto non è in grado di produrre un numero sufficiente di anticorpi neutralizzanti, si<br />
ha un incremento produttivo ininterrotto del virus (viremia permanente). In circa un terzo dei gatti<br />
coinvolti l'infezione ha un decorso progressivo di questo tipo. In questo caso gli animali coinvolti<br />
hanno una prognosi infausta e soccombono, di regola, nel giro di pochi anni ad una delle malattie<br />
associate al FeLV. Questi soggetti rilasciano generalmente il virus in grandi quantità e<br />
costituiscono una fonte di infezione per gli altri gatti. In una piccola percentuale dei gatti infetti<br />
l'infezione presenta un decorso atipico, con moltiplicazione del virus delimitata localmente, p.es.<br />
nella vescica, nell'occhio o nella ghiandola mammaria. Non è possibile rilevare questa forma<br />
con i procedimenti abituali della diagnostica di routine.<br />
In dipendenza del decorso si possono avere i seguenti sintomi:<br />
- Neoplasie: linfomi, leucemie, neoplasie mieloidi, fibrosarcomi<br />
- Malattie associate al FeLV febbre, anoressia, apatia, stomatite, gengivite, ascessi, sintomi<br />
respiratori, sintomi gastrointestinali<br />
- Soppressione del leucopenia, in particolare neutropenia, anemia non rigenerativa,<br />
midollo osseo trombocitopenia<br />
- Malattie immunomediate anemia emolitica autoimmune, glomerulonefrite, uveite,<br />
poliartrite<br />
- Disturbi della riproduzione aborti, mortinatalità, "fading kitten sindrome" (sindrome del<br />
gattino deperito)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
FeLV (Ag) 0,5 ml S, EB, HP ELISA (1)<br />
La rilevazione di antigene extracellulare (libero) FeLV-p27 è<br />
possibile a partire da circa 3 settimane p.i. e un risultato<br />
positivo indica in genere una viremia.<br />
D'altra parte non si può escludere del tutto la possibilità che in<br />
rari casi siano state rilevate solo particelle virali con replicazione<br />
difettosa e che di conseguenza il virus non si sia moltiplicato.<br />
Per distinguere una viremia transitoria da una persistente e<br />
trarne degli indizi prognostici si raccomanda di ripetere il test<br />
dopo 6 settimane.<br />
Se anche la ripetizione produce un risultato positivo, si ripeta<br />
un'altra volta il test dopo 10 settimane. In caso di ulteriore<br />
risultato positivo si tratta molto probabilmente di una viremia<br />
persistente.<br />
Se le ripetizioni del test danno un risultato negativo, è possibile<br />
che il virus sia stato eliminato o che l'infezione sia in uno<br />
stadio latente.<br />
In alternativa si può procedere, 6 settimane dopo aver ottenuto<br />
il primo risultato positivo, alla rilevazione di antigene p27<br />
intracellulare con metodo IFT. Se anche questo metodo dà un<br />
risultato positivo, è molto probabile che si tratti di un animale<br />
permanentemente infetto.<br />
Una vaccinazione non può provocare una viremia, per questo non<br />
sono possibili risultati falsi positivi in seguito ad una<br />
vaccinazione.<br />
cfr. anche i nostri profili → Profilo completo per gatti<br />
e le combinazioni → FeLV/FIV/FIP, FeLV/FIP, FeLV/FIV, FeLV/FIV + FIP-Screening<br />
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13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
FeLV-progenoma (DNA) 2 ml EB, midollo osseo PCR (1)<br />
n FHV<br />
vedi → Herpesvirus felino<br />
Per progenoma (o provirus) si intende il DNA virale integrato<br />
nel genoma della cellula ospite. Può venire rilevato con metodo<br />
PCR. Il test è altamente specifico e può pertanto venire<br />
impiegato a conferma di risultati analitici incerti ottenuti con<br />
altri procedimenti.Entro certi limiti è possibile rilevare per<br />
mezzo della PCR nel sangue o nel midollo osseo anche infezioni<br />
latenti o in regressione, per le quali in genere la rilevazione<br />
antigenica con metodo ELISA o IFT ha esito negativo.La sensibilità<br />
del test dipende tuttavia in forte misura dal numero delle<br />
cellule infette (carico provirale). Un risultato negativo perciò<br />
non è sufficiente a escludere con sicurezza l'infezione.<br />
Il procedimento non permette alcuna stima sulla capacità di<br />
replicazione del virus.<br />
n FIP (Peritonite Infettiva Felina)/Infezione da Coronavirus felino<br />
Le infezioni da Coronavirus felino (FCoV, Feline Corona Virus) sono molto diffuse nella<br />
popolazione dei gatti.<br />
Circa il 50 % dei gatti sono portatori di anticorpi contro il FCoV e in allevamenti e colonie si<br />
può arrivare fino al 100%. Il virus viene rilasciato con le feci, l'infezione avviene direttamente o<br />
indirettamente per via oronasale. Al momento non è possibile distinguere fra FCoV e i mutanti<br />
responsabili della FIP (Feline Infectious Peritonitis ) (la corrispondenza genetica è superiore al<br />
99%). Anche la teoria secondo la quale a livello esclusivamente intestinale sarebbero localizzati<br />
dei Coronavirus innocui, mentre a venir diffusi nel corpo sarebbero solo dei mutanti patogeni,<br />
non è più sostenibile. Dal momento che ad ogni replicazione del virus si verificano errori di<br />
trascrizione nel genoma, in linea di principio si può ottenere da qualunque Coronavirus una<br />
variante patogena.<br />
Ne consegue che uno dei fattori più importanti per l'insorgenza di una FIP è, oltre allo stato<br />
immunitario dell'animale, la convivenza di più animali in uno spazio ristretto. In una popolazione<br />
di questo genere si assiste ad un aumento dei Coronavirus dovuto alle continue reinfezioni<br />
reciproche. A causa dell'elevata carica virale che ne consegue per il singolo animale, aumenta<br />
allo stesso modo anche il rischio di mutazioni. L'emergere di varianti patogene e l'influenza di<br />
fattori immunodeppressivi favoriscono un forte aumento del virus nei macrofagi e una sua<br />
diffusione in tutti gli organi. La formazione di anticorpi non è sufficiente a eliminare l'agente<br />
patogeno, ma si formano gli immunocomplessi che portano alla sintomatologia tipica della<br />
malattia.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Sintomatologia In seguito alla deposizione di complessi antigene-anticorpo si<br />
possono sviluppare sia vasculite e polisierosite (forma<br />
essudativa) sia infiammazioni granulomatose (forma secca)<br />
I sintomi sono pertanto - febbre ricorrente resistente alla terapia<br />
assai diversificati: - apatia, anoressia<br />
- ascite, versamento toracico e pericardico<br />
- dispnea<br />
- glomerulonefrite<br />
- danni epatici<br />
- sintomi del sistema nervoso centrale<br />
- uveite<br />
La diagnosi di FIP è difficile e in genere impossibile da porre con certezza con l'animale in vita.<br />
Attraverso la combinazione di diversi metodi diagnostici si può accrescere la probabilità diagnostica<br />
di una FIP.<br />
FIP/Coronavirus (Ac) 0,5 ml S, EP, HP IFT (1)<br />
A causa dell'elevata incidenza dell'infezione la rilevazione di<br />
anticorpi contro il FCoV è difficile da giudicare. Un titolo positivo<br />
indica unicamente che l'animale in questione è entrato in contatto<br />
con dei Coronavirus. Nel gatto anche il Coronavirus canino<br />
e in casi isolati persino una vaccinazione contro la FIP possono<br />
provocare una sieroconversione. Perciò, in caso di sospetto<br />
clinico, una singola rilevazione di anticorpi non è assolutamente<br />
sufficiente per una diagnosi. In tal caso consigliamo di procedere<br />
con un "FIP-Screening": le alterazioni più frequenti sono<br />
iperproteinemia, ipergammaglobulinemia, diminuzione del<br />
rapporto albumina/globulina, aumento dei valori epatici,<br />
linfopenia, neutrofilia ed anemia.Allo stesso modo, un risultato<br />
negativo non è sufficiente a escludere una FIP, dal momento<br />
che l'incremento abnorme del virus dà luogo ad un eccesso di<br />
antigeni, per cui non è più possibile rilevare degli anticorpi<br />
liberi.La rilevazione di anticorpi può tuttavia, in animali sani,<br />
servire all'identificazione di soggetti sieropositivi, vale a dire di<br />
escretori potenziali del virus, che può essere di grande interesse<br />
se si intende costituire un allevamento sieronegativo.Si raccomanda<br />
di procedere alla determinazione degli anticorpi contro<br />
il Coronavirus anche prima di una vaccinazione contro la FIP.<br />
cfr. anche i nostri profili → Profilo completo per gatti, FIP-Screening<br />
e le combinazioni → FeLV/FIV/FIP, FIV/FIP e FeLV/FIP; FeLV/FIV + FIP-Screening<br />
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13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
FIP/Coronavirus felino,<br />
FECV (RNA)<br />
real time-PCR (1)<br />
Versamenti cavitari: 0,5 ml puntato<br />
Sintomi del sistema<br />
nervoso centrale: 0,5 ml liquor<br />
Febbre (fase viremica): 0,5 ml EB<br />
Identificazione escretori<br />
del virus: feci/tampone rettale<br />
Al momento non è ancora possibile distinguere per mezzo della PCR fra il virus della Peritonite<br />
Infettiva Felina (FIPV, Feline Infectious Peritonitis Virus) e il Coronavirus enterico felino (FECV,<br />
Feline Enteric Coronavirus) che in determinate circostanze può mutare nell'organismo in FIP.<br />
La rilevazione di Coronavirus felino (FCoV, Feline Corona Virus) nel puntato o nel liquor depone<br />
a favore della presenza di una FIP, specialmente quando anche i sintomi clinici e i risultati di<br />
altri procedimenti diagnostici di laboratorio (sierologia, biochimica clinica) indicano la stessa<br />
direzione.<br />
In rari casi si può assistere, in seguito a tumori o a processi infiammatori, ad un passaggio di<br />
Coronavirus enterici nel versamento. Ne consegue che una rilevazione con risultato positivo<br />
non significa sempre che siamo di fronte ad un gatto con FIP.<br />
Di contro, la rilevazione qualitativa di FCoV nelle feci attesta unicamente la presenza di<br />
un'infezione da FCoV e non dà alcuna indicazione sulla presenza di una FIP. La rilevazione<br />
qualitativa serve a identificare possibili escretori del virus; tuttavia in caso di risultato negativo<br />
il test deve essere ripetuto, in quanto l'escrezione del virus può avere carattere intermittente.<br />
La quantificazione dell'escrezione di virus nelle feci per mezzo della PCR (metodo in via di<br />
sviluppo) potrebbe fornire in futuro un prezioso mezzo diagnostico per l'identificazione di<br />
escretori "forti" all'interno di una popolazione felina, i quali rappresentano un pericolo per gli<br />
altri animali e sono essi stessi maggiormente soggetti, a causa dell'elevata carica virale, al<br />
rischio di sviluppare una FIP.<br />
L'infezione di monociti e di macrofagi costituisce un elemento importante nella patogenesi<br />
della FIP. La rilevazione di FCoV nella frazione di monociti-macrofagi del sangue EDTA (Buffy<br />
Coat) va perciò considerata molto specifica per una FIP.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n FIV (Virus dell'immunodeficienza felina) (infezione da)<br />
Il FIV (Feline Immunodeficiency Virus) è un Lentivirus della famiglia dei Retroviridae. La sua<br />
prevalenza all'interno della popolazione dei gatti in Europa si aggira a seconda delle nazioni fra<br />
lo 0,7 e l'11%. La trasmissione avviene soprattutto attraverso ferite da morso, ma sono state<br />
descritte anche infezioni attraverso il latte materno e si suppone la possibilità di trasmissione<br />
per via coitale o transplacentare. Similmente all'infezione da HIV nell'uomo, nonostante la<br />
formazione di anticorpi neutralizzanti non si arriva ad un'eliminazione del virus. A essere colpiti<br />
dalla moltiplicazione virale sono soprattutto i linfociti CD4+, provocando nel corso del tempo,<br />
accanto ad altri fattori, un'evidente immunodepressione.<br />
Sintomatologia L'Infezione da FIV può venir suddivisa in 4 fasi:<br />
Fase acuta Durata: da settimane a mesi<br />
- febbre<br />
- neutropenia<br />
- linfoadenopatia<br />
Fase asintomatica Durata: 3-7 anni<br />
Fase dei sintomi aspecifici Durata: variabile<br />
- febbre<br />
- linfoadenopatia<br />
- leucopenia, anemia, trombocitopenia<br />
- apatia, anoressia, cachessia<br />
- stomatite, gengivite, rinite, enterite<br />
- alterazioni del comportamento<br />
Fase conclamata Durata: fino ad 1 anno circa<br />
(simile all'AIDS umano) - infezioni opportunistiche<br />
- neoplasie<br />
- sintomi del sistema nervoso centrale<br />
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13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
FIV (Ac) 0,5 ml S, EP, HP ELISA (1)<br />
Come test di screening, la rilevazione di anticorpi anti-FIV<br />
costituisce il metodo di scelta per la diagnostica di routine. Il<br />
test in questione individua anticorpi contro la proteina del core<br />
virale p24 e la proteina transmembrana gp40. Circa il 95% dei<br />
gatti infetti mostra una sieroconversione dopo 2-4 settimane<br />
p.i. Tuttavia alcuni animali iniziano a formare anticorpi solo<br />
molto più tardi nel corso dell'infezione. Nella fase finale della<br />
malattia spesso non sono rilevabili anticorpi. Un risultato<br />
positivo con metodo ELISA come test di screening dovrebbe<br />
venire confermato con test Western Blot. Un esito positivo<br />
confermato segnala con ampio margine di sicurezza la<br />
presenza di un'infezione.Nei gatti con meno di 6 mesi di vita,<br />
è possibile che sussistano ancora anticorpi materni. In tal<br />
caso si consiglia di confermare il risultato positivo con una<br />
rilevazione del genoma provirale con metodo PCR o con un<br />
secondo test con metodo ELISA al momento in cui l'animale<br />
ha superato i 6 mesi d'età.<br />
cfr. anche i nostri profili → Profilo completo per gatti<br />
e le combinazioni → FeLV/FIV/FIP, FIV/FIP e FeLV/FIV; FeLV/FIV + FIP-Screening<br />
FIV (Ac) 0,5 ml S, EP, HP Western Blot (3)<br />
Vista la sua elevata specificità, il metodo costituisce un test di<br />
conferma di un risultato positivo da una rilevazione di anticorpi con<br />
metodo ELISA.Una differenziazione con gli anticorpi indotti da una<br />
vaccinazione (vaccino presente sul mercato negli USA) non è<br />
possibile.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
FIV-progenoma (DNA) 2 ml EB, midollo osseo PCR (1))<br />
La rilevazione di DNA provirale è altamente specifica e generalmente<br />
possibile a partire dal 5° giorno p.i. La sensibilità del<br />
test invece è in funzione del numero dei linfociti infetti. Oltre a<br />
questo, si suppone che non sia possibile riconoscere tutte le<br />
varianti del ceppo virale FIV, come pure tutti i sottotipi, a causa<br />
dell'elevato tasso di mutazione. Ne consegue che un risultato<br />
negativo non esclude con sicurezza un'infezione, mentre un<br />
risultato positivo la attesta con ampio margine di sicurezza.Si<br />
consiglia di praticare il test soprattutto come test di conferma<br />
in animali nei quali il risultato positivo di una rilevazione di<br />
anticorpi possa essere dovuto alla presenza di anticorpi materni,<br />
oppure per chiarire risultati divergenti o valori limite ottenuti<br />
con altri metodi.<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
n Gastroenterite trasmissibile del suino (TGE)<br />
L'agente responsabile della gastroenterite trasmissibile del suino (TGE, Transmissible Gastro<br />
Enteritis) è un Coronavirus suino (TGEV, Transmissible Gastro Enteritis Virus) che può<br />
provocare nei suini di tutte le età, ma in particolare in quelli in età da svezzamento, manifestazioni<br />
acute di diarrea. La moltiplicazione del virus ha luogo nell'epitelio dei villi di tutto<br />
l'intestino. In genere il virus viene espulso con le feci dal 1° al 7° giorno p.i. nel caso di suini<br />
da svezzamento e dal 3° al 7° giorno p.i. nel caso di suini da ingrasso. Sono stati tuttavia<br />
descritti periodi intermittenti per l'eliminazione nelle feci, fino a 18 mesi.<br />
Coronavirus TGEV (RNA) feci, tampone rettale, mucosa intestinale real time-PCR (1)<br />
La rilevazione del virus con metodo PCR permette di identificare<br />
escretori clinicamente inapparenti. Dal momento che l'espulsione<br />
del virus avviene a intervalli irregolari, in caso di risultato<br />
negativo della PCR con contemporaneo sospetto clinico<br />
bisognerebbe ripetere il test. Con lo stesso protocollo del test,<br />
è possibile rilevare anche il Coronavirus respiratorio suino<br />
(PRCV, Porcine Respiratory Coronavirus), un mutante del<br />
TGEV, responsabile di infezioni delle vie respiratorie in forma<br />
lieve o subclinica.<br />
Attenzione In Italia la gastroenterite trasmissibile (TGE) è una malattia inserita<br />
nella lista B.<br />
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13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Helicobacter (infezione da)<br />
Sul significato della patogenicità di Helicobacter negli animali si dispone al momento di risultati in<br />
parte contraddittori. Infatti è possibile isolare delle specie di Helicobacter dalla mucosa gastrica di<br />
cane e gatto con gastrite, vomito cronico o enterite. D'altronde una rilevazione tale è possibile anche<br />
in animali sani e ci sono buone ragioni per ritenere che l'incidenza dell'infezione nella popolazione<br />
di cani e di gatti si aggiri fra il 40 e il 100%. Sembra che si tratti principalmente di H. bizzozeronii e<br />
di H. felis. Nel gatto è stato rilevato anche H. pylori, ma molto raramente. Una differenziazione è<br />
possibile solo attraverso sequenziazione genomica. Fino a che punto gli animali domestici possano<br />
costituire una fonte di infezione significativa per l'uomo è altrettanto un tema controverso, sul quale<br />
negli ultimi tempi si discute con particolare interesse.<br />
Sintomatologia Considerati i dubbi esposti sopra, al momento i seguenti<br />
sintomi negli animali risultati positivi all'Helicobacter sono<br />
oggetto di discussione:<br />
- vomito<br />
- diarrea<br />
- ulcera gastrica<br />
- carcinoma gastrico<br />
Helicobacter spp.<br />
(DNA, rilevazione di più<br />
specie)<br />
feci, biopsia gastrica PCR (1)<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Herpesvirus bovino (IBR/ IPV/ IBP) (infezione da)<br />
L'Herpesvirus bovino 1 (BHV 1, Bovine Herpesvirus type 1) è responsabile nei bovini della<br />
formazione di due forme complesse sintomaticamente distinte, vale a dire di una forma respiratoria<br />
(IBR, Infectious Bovine Rhinotracheitis) e di una genitale (IPV, Infectious Pustolar Vulvovaginitis o<br />
IBP, Infectious Balanoposthitis). Come in tutte le infezioni da Herpesvirus, una volta infetti gli<br />
animali restano portatori del virus per tutta la vita e lo possono rilasciare in più momenti per via<br />
fecale o con le varie secrezioni.<br />
Sintomatologia - febbre<br />
- salivazione, scolo nasale<br />
- tosse<br />
- meningoencefalite (vitelli)<br />
- vaginite, balanopostite, aborti<br />
BHV 1 (Ac) 1 ml S, EP, HP ELISA (3)<br />
BHV 1 (Ac) (Markervirus) 2 ml S ELISA (3)<br />
E' un test per differenziare il virus naturale dal virus marker in<br />
animali trattati con vaccino marcato.<br />
Attenzione In Italia tutte le forme di infezione da BHV 1 sono inserite<br />
nella lista B.<br />
n Herpesvirus canino (CHV) (infezione da)<br />
L'Herpesvirus canino 1 (CHV 1, Canine Herpesvirus type 1) è responsabile nei cuccioli di una<br />
malattia sistemica con esito per lo più letale. Gli animali più anziani presentano in genere solo dei<br />
leggeri sintomi respiratori o infezioni genitali, che ne possono ridurre la fertilità; oppure restano<br />
clinicamente del tutto inapparenti, ma svolgono una funzione importante come escretori del virus.<br />
Il CHV 1 può anche essere rilevato nel contesto della cosiddetta "tosse dei canili". L'infezione<br />
avviene per via oronasale, nella maggior parte dei casi già nel canale del parto. Il periodo di<br />
incubazione è di 4-6 giorni. Gli animali che hanno superato l'infezione restano portatori del virus<br />
per tutta la vita.<br />
Sintomatologia - anoressia, apatia<br />
- salivazione e scolo nasale<br />
- lamenti<br />
- diarrea<br />
- sintomi del sistema nervoso centrale<br />
- aborti<br />
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13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
CHV 1 (DNA) Mortalità improvvisa dei cuccioli: PCR (1)<br />
tessuto epatico, polmonare, renale, splenico<br />
Infezioni genitali:<br />
tampone vaginale<br />
Aborti:<br />
materiale abortivo<br />
Sintomi delle vie respiratorie:<br />
tampone nasale e faringeo<br />
Se si verificano più casi di morte improvvisa fra cuccioli al di<br />
sotto delle tre settimane è nell'interesse degli allevatori effettuare<br />
una diagnostica differenziale con l'Herpesvirus. Il metodo di<br />
scelta per diagnosticare un'infezione da CHV 1 è in questo<br />
caso la rilevazione diretta dell'antigene.<br />
CHV 1 (Ac) 1 ml S NT (1)<br />
n Herpesvirus equino (EHV) (infezione da)<br />
Il test di neutralizzazione del virus è il metodo di scelta per<br />
l'identificazione di portatori subclinici. La rilevazione è possibile<br />
intorno alle 3-4 settimane p.i.In caso di infezione latente la<br />
rilevazione di anticorpi può essere negativa per diventare poi<br />
positiva in un momento successivo. In caso di sospetto clinico<br />
e titolo anticorpale negativo si consiglia di ricorrere alla PCR.<br />
Una vaccinazione può provocare sieroconversione. Una distinzione<br />
fra titoli anticorpali da infezione e da vaccinazione non è<br />
possibile.In caso di infezione acuta nei cuccioli si consiglia di<br />
ricorrere alla rilevazione diretta del virus per mezzo della PCR.<br />
Fino ad oggi sono state descritte negli equini nove specie di Herpesvirus (EHV, Equine Herpesvirus),<br />
cinque delle quali ricollegabili a manifestazioni cliniche. L'EHV 4 è considerato l'agente<br />
responsabile della rinopolmonite equina, ma anche l'EHV 1 può, soprattutto in animali giovani,<br />
dar luogo a malattie dell'apparato respiratorio. Entrambi i sierotipi possono essere coinvolti,<br />
insieme o separatamente, nella forma paretico-paralitica del sistema nervoso centrale, mentre<br />
l'aborto virale (tardivo) è provocato tipicamente dall'EHV 1. Per quanto riguarda l'EHV 2 e<br />
l'EHV 5, si suppone che siano responsabili di cheratiti, mentre l'EHV 3 è l'agente patogeno<br />
dell'esantema coitale. I cavalli che hanno contratto l'infezione rimangono portatori del virus<br />
per tutta la vita.<br />
Attenzione In Italia la rinopolmonite del cavallo è inserita nella lista B.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Herpesvirus equino 1<br />
EHV-1 (DNA)<br />
Herpesvirus equino 4<br />
EHV-4 (DNA)<br />
Herpesvirus equino 2<br />
EHV-2 (DNA)<br />
Herpesvirus equino 5<br />
EHV-5 (DNA)<br />
Sintomi delle vie respiratorie:<br />
tampone nasale / faringeo, secreto tracheale PCR (1)<br />
Malattia acuta/ febbre: 1 ml S, HP, EP<br />
Congiuntivite: tampone congiuntivale PCR (1)<br />
Aborto: liquido amniotico, endometrio, feto<br />
Sintomi del sistema nervoso centrale:<br />
0,5 ml liquor<br />
La rilevazione è possibile solo con materiale cellulare. Viene<br />
sempre effettuata una differenziazione fra EHV 1 e EHV 4.<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
Sintomi oculari: PCR (1)<br />
tampone corneale/ congiuntivale<br />
Sintomi delle vie respiratorie:<br />
tampone nasale, secreto nasale/ tracheale<br />
La rilevazione è da effettuarsi preferibilmente su tamponi<br />
congiuntivale e corneale contenenti elementi cellulari,<br />
eventualmente su tamponi nasali.<br />
Per il materiale cfr. EHV-2 PCR (1)<br />
EHV-1 e EHV-4 (Ac) 1 ml S NT (1)<br />
Una distinzione fra titoli anticorpali da infezione e da<br />
vaccinazione non è possibile. Una sieroconversione o un<br />
aumento dei titoli di almeno 3 diluizioni nel giro di 2-3<br />
settimane è suggestivo di un'infezione acuta.<br />
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13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Herpesvirus felino (FHV) (infezione da)<br />
L'Herpesvirus felino 1 (FHV 1, Feline Herpesvirus type 1) o virus della rinotracheite è uno<br />
degli agenti causali della rinotracheite del gatto. L'infezione avviene principalmente attraverso il<br />
contatto diretto con saliva o secreto nasale.<br />
Il periodo di incubazione è di 2-5 giorni. La maggior parte delle infezioni entra nella fase di<br />
convalescenza dopo un decorso della malattia di circa 1-3 settimane. Forme con decorso<br />
grave sono state osservate soprattutto nei cuccioli. Infezioni cliniche manifeste a carattere<br />
cronico sono relativamente rare. Un gran numero dei gatti infetti rimane infetto in forma latente<br />
anche dopo l'esposizione al virus e può rilasciare quest'ultimo a fasi intermittenti.<br />
Sintomatologia - febbre<br />
- anoressia, apatia<br />
- cheratocongiuntivite<br />
- rinite<br />
- broncopolmoniti<br />
- aborti (rari)<br />
FHV 1 (DNA) real time-PCR (1)<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
FHV 1 (Ac) 1 ml S NT (3)<br />
Il test di neutralizzazione del virus è il metodo di scelta per<br />
l'identificazione di portatori subclinici. La rilevazione è possibile<br />
a partire da 3-4 settimane circa p.i. Una distinzione fra titoli<br />
anticorpali da infezione e da vaccinazione, così come una<br />
differenziazione degli anticorpi materni, non è possibile. In caso<br />
di infezione acuta si consiglia di ricorrere alla rilevazione diretta<br />
del virus per mezzo della PCR.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Herpesvirus rettili (RHV) (infezione da)<br />
L'Herpesvirus dei rettili (RHV, Reptiles Herpes Virus) è responsabile di una grave infezione nelle<br />
testuggini. Tutte le specie possono essere colpite.<br />
La trasmissione avviene probabilmente tramite contatto diretto tra testuggini infette.<br />
Il virus provoca lesioni a carico della bocca e delle coane, rendendo le testuggine ammalate<br />
riluttanti a mangiare e a bere. I segni clinici sono caratterizzati da rinite con scolo nasale da<br />
sieroso a mucoso; nei casi tipici si manifestano stomatite necrotica, glossite e faringite. Si<br />
può avere dispnea e i sintomi respiratori possono essere accompagnati da congiuntivite. Altri<br />
sintomi clinici generici comprendono anoressia e cachessia. Alterazioni del sistema nervoso<br />
centrale possono portare a incoordinazione ed atassia.<br />
Gli animali possono avere infezioni senza segni clinici e l'Herpesvirus attivarsi solo in<br />
condizioni di stress del soggetto.<br />
Herpesvirus rettili -<br />
RHV (Ac)<br />
Herpesvirus rettili -<br />
RHV (DNA)<br />
n IBR/ IPV<br />
vedi → Herpesvirus bovino<br />
n Influenza virale equina<br />
La ricerca anticorpale ha la sua importanza nel rilevare animali<br />
portatori che, in seguito a stress, possono rilasciare il virus ed<br />
infettare altri soggetti. La ricerca degli aniticorpi viene svolta<br />
tramite test di virusneutralizzazione sierica.<br />
È possibile eseguire anche una ricerca diretta dell'agente<br />
patogeno tramite PCR.<br />
L'influenza equina è una malattia virale altamente contagiosa a decorso acuto che colpisce<br />
soprattutto il tratto respiratorio. Si distingue fra il ceppo A-equi 1 e A-equi 2.<br />
L'infezione si trasmette per mezzo di areosol.<br />
Sintomatologia - febbre<br />
- inappetenza<br />
- tosse e broncopolmonite<br />
0,2 ml S NT (3)<br />
Tampone buccale in soluzione fisiologica PCR (3)<br />
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13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Influenza virale equina<br />
(Ac)<br />
Si raccomanda l'esame di due campioni di siero prelevati a<br />
distanza di 14 giorni l'uno dall'altro<br />
Si è soliti distinguere i Praga, Miami, Fontainebleau, Kentucky e Solvalla.Una<br />
ceppi seguenti: distinzione fra titoli da infezione e da vaccinazione non<br />
è<br />
possibile.<br />
Influenza virale equina<br />
(RNA)<br />
Tramite esame PCR è possibile eseguire anche una ricerca<br />
diretta dell'agente patogeno.<br />
Attenzione In Italia l'influenza equina del cavallo è inserita nella lista B.<br />
n Influenza virale suina<br />
1 ml S NT (3)<br />
Tampone nasale, lavaggio tracheale real time-PCR (1)<br />
L'influenza suina è causata dal virus dell'influenza suina di tipo A (Orthomyxovirus). Possiede<br />
due antigeni superficiali che si presentano con una configurazione diversa e sono alla base<br />
della classificazione dei vari sottotipi. Un certo numero di sottotipi è responsabile di infezioni<br />
reciproche fra uomo, suino, uccelli ed eventualmente cavallo.<br />
Dal punto di vista clinico la diagnosi non è sicura. Una diagnosi probativa richiede la coltivazione<br />
del virus a partire da tamponi nasali o faringei, oppure la rilevazione dell'incremento di anticorpi<br />
dovuti all'infezione e specifici dei sottotipi, rilevazione da effettuarsi per mezzo di due esami sul<br />
sangue a distanza di 3 settimane.<br />
Influenza virale suina (Ac) 2 ml S Emoagglutinazione (3)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Leishmaniosi<br />
La leishmaniosi canina è provocata dall'infezione con il parassita Leishmania infantum (detto anche<br />
L. chagasi in America Centrale e Meridionale). Il cane può infettarsi anche, seppur raramente,<br />
con L. tropica. La trasmissione avviene per mezzo di pappatacei del genere Phlebotomus (per L.<br />
chagasi il genere Lutzomyia). Il parassita è diffuso in Europa su tutta l'area mediterranea e si<br />
trova in particolare nelle zone costiere e sulle isole maggiori.<br />
Sintomatologia Il periodo di incubazione può variare da settimane a mesi. Una<br />
differenziazione tra forma viscerale e forma cutanea, come per<br />
l'uomo, non è nella maggior parte dei casi possibile per il<br />
cane.<br />
I sintomi che si possono presentare sono di conseguenza assai diversificati:<br />
- dimagrimento<br />
- anoressia, apatia, enterite<br />
- ipercheratosi, alopecia (all'inizio periorbitale), dermatiti,<br />
fissurazioni dei polpastrelli<br />
- allungamento delle unghie, infiammazioni della matrice<br />
dell'unghia<br />
- pancitopenia<br />
- ingrossamento linfonodale<br />
- iperproteinemia, ipoalbuminemia,<br />
ipergammaglobulinemia<br />
- epato- e splenomegalia<br />
- glomerulonefrite<br />
- poliartriti<br />
- cheratocongiuntivite, uveite, irite, cecità<br />
- epistassi<br />
Attenzione In Italia la leishmaniosi è inserita nella lista B.<br />
Leishmania -<br />
rilevazione diretta<br />
striscio microscopia (1)<br />
La rilevazione diretta delle Leishmanie è significativa solo su puntato<br />
linfonodale o midollare o su campioni di biopsia cutanea (sensibilità<br />
del 30-50%). Una rilevazione su striscio ematico in genere non ha<br />
successo.<br />
Un risultato negativo della rilevazione diretta non esclude la presenza<br />
di un'infezione!<br />
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13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Leishmania spp.<br />
(DNA, rilevazione di<br />
più specie)<br />
La rilevazione con metodo PCR è significativa solo se effettuata<br />
sui materiali sopra indicati. Nonostante la sensibilità del test<br />
sia decisamente migliore, non possono essere esclusi risultati<br />
falsi negativi.Il metodo è consigliato soprattutto nel caso di<br />
animali sospetti che non presentano anticorpi rilevabili<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
Il riconoscimento di anticorpi anti-Leishmania (L. infantum)<br />
spesso ha successo solo dopo settimane p.i. (se non mesi).<br />
Spesso gli animali, se sono infetti asintomatici, non mostrano<br />
anticorpi specifici.<br />
cfr. anche i nostri → Parassiti del sangue e batteri emotropi - microscopia<br />
profili → Profilo emoparassitario I e II<br />
come pure → Profilo Leishmania<br />
n Leptospirosi<br />
Fra gli agenti responsabili della leptospirosi sono da menzionare i seguenti sierotipi: L. australis,<br />
L. autumnalis, L. canicola, L. copenagheni (icterohaemorragiae), L. grippotyphosa, L. pomona,<br />
L. saxkoebing, L. sejroe e L. tarassovi.<br />
La trasmissione avviene direttamente attraverso il contatto con animali escretori (urina) o<br />
indirettamente per mezzo di acqua contaminata. La Leptospira viene diffusa nell'organismo per<br />
via ematogena, localizzandosi in particolare nel fegato e nei reni.<br />
Sintomatologia Dopo un periodo di incubazione di 4-12 giorni possono<br />
presentarsi i sintomi seguenti:<br />
- febbre<br />
- anoressia, vomito, enterite<br />
- polidipsia/ poliuria<br />
- emolisi, ittero<br />
- diatesi emorragica<br />
- patologie croniche epatiche e renali<br />
- uveite, retinite<br />
Attenzione La leptospirosi è una zoonosi. In Italia inserita nella lista B.<br />
n Uveite equina ricorrente (ERU)<br />
Lesioni cutanee: biopsia cutanea real time-PCR (1)<br />
Linfoadenopatia: puntato linfonodale<br />
Rinite: tampone nasale<br />
Inoltre: biopsia osteo-midollare, epatica, splenica<br />
Leishmania (Ac) 1 ml S, EP, HP IFT (1)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
E' stato dimostrato che un'infezione intraoculare persistente da Leptospire costituisca<br />
l'eziologia dell'ERU (Equine Rrecurrent Uveitis) . Dal punto di vista diagnostico è rilevante<br />
soltanto la<br />
rilevazione di anticorpi o di antigeni nell'umore acqueo o nel materiale proveniente dal corpo<br />
vitreo! Un titolo anticorpale sierico non prova assolutamente che le Leptospire siano coinvolte<br />
in una malattia oculare!<br />
Leptospira (Ac) 1 ml S MAT (1)<br />
Leptospira spp.<br />
(DNA, rilevazione di<br />
più specie)<br />
La rilevazione di anticorpi anti-Leptospire con test di microagglutinazione<br />
(MAT) è generalmente il metodo di scelta per<br />
confermare un'infezione sospetta. Il test deve essere effettuato<br />
non prima di 14 giorni p.i. Nel cane vengono testate le nove<br />
sierovarietà sopra elencate, nel cavallo soltanto L. grippotyphosa,<br />
L. copenagheni, L. pomona, L. australis e L. autumnalis.<br />
In altre specie animali si saggiano le varietà sierologiche<br />
specifiche. Una distinzione fra titoli anticorpali da infezione e<br />
da vaccinazione è possibile solo entro certi limiti (a seconda<br />
del livello dei titoli). Il vaccino nel cane comprende solo<br />
L. canicola e L. copenagheni (icterohaemorragiae), tuttavia si<br />
possono avere reazioni crociate con altre sierovarietà.<br />
2 ml EB, 5 ml U, liquor, umore acqueo real time-PCR (1)<br />
La rilevazione diretta delle Leptospire nel sangue è possibile<br />
solo poco tempo dopo l'introduzione dell'agente patogeno.<br />
L'escrezione delle Leptospire inizia circa 7 giorni p.i. e può<br />
durare da mesi ad anni. La rilevazione nell'umore acqueo è<br />
indicata soprattutto per il cavallo.Con la PCR vengono rilevate<br />
tutte le sierovarietà, senza che sia possibile una loro<br />
differenziazione.<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
Un risultato negativo della rilevazione diretta non esclude la<br />
presenza di un'infezione!<br />
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13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Leucemia felina<br />
vedi → FeLV<br />
n Leucosi bovina enzootica (EBL)<br />
Il complesso della leucosi bovina (EBL, Enzootic Bovine Leukosis) si divide in quattro forme<br />
cliniche. Mentre la leucosi cutanea, la leucosi degli animali giovani e la reticolosi mastocitaria<br />
insorgono tutte spontaneamente, nella leucosi linfatica enzootica è un Retrovirus a scatenare la<br />
malattia. La trasmissione avviene generalmente già subito dopo la nascita attraverso il latte e il<br />
colostro.<br />
Una trasmissione orizzontale resta tuttavia pur sempre possibile.<br />
Sintomatologia - apatia, inappetenza<br />
- edema<br />
- anemia, linfocitosi<br />
- ingrossamento dei linfonodi<br />
- splenomegalia<br />
Virus della leucosi bovina<br />
(Ac)<br />
Attenzione In Italia la leucosi bovina enzootica è inserita nella lista B.<br />
n Listeriosi<br />
1 ml S ELISA (3)<br />
L'agente eziologico è Listeria monocytogenes. Le Listerie sono batteri del suolo diffusi in tutto<br />
il mondo, che si propagano ulteriormente attraverso i roditori con infezione latente. La quantità di<br />
batteri necessaria per produrre un'infezione è molto alta e si accumula soprattutto negli strati<br />
esterni e superficiali di foraggi da silos contaminati, come pure di altri mangimi animali. Listeria<br />
monocytogenes appartiene alla classe dei batteri intracellulari facoltativi (bastoncelli gram-positivi).<br />
Essa penetra e si moltiplica nei più svariati tipi di cellula, p.es. nei macrofagi, nelle cellule<br />
epiteliali o nei fibroblasti. La tossina citolitica listeriolisina è un fattore di virulenza determinante,<br />
evidentemente necessaria a L. monocytogenes per venire rilasciata dai fagosomi nel citoplasma.<br />
Se l'infezione dà luogo a manifestazioni cliniche, nel cavallo, nel bovino e nell'ovino si hanno<br />
soprattutto sintomi del sistema nervoso centrale, febbre, agitazione, disturbi della coordinazione<br />
e altri segni caratteristici di un'encefalite. È stata descritta anche una forma genitale dell'infezione,<br />
responsabile di aborti tardivi, nascite premature o nascita di puledri/ vitelli/ agnelli non vitali.<br />
Nel complesso, il ruolo della listeriosi non è stato ancora accertato definitivamente.<br />
Note In Italia la listeriosi non è una malattia inserita né nella lista A né B.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Listeria (Ac) 1 ml S CF (3)<br />
Listeria monocytogenes<br />
(DNA)<br />
n Macrofilarie/ Microfilarie<br />
vedi → Dirofilariosi<br />
n Maedi-Visna (infezione da)<br />
1 ml EB, 0,5 ml liquor, materiale abortivo o feci PCR (1)<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
Il virus Maedi-Visna è responsabile nella pecora di polmonite interstiziale o di un'encefalite<br />
demielinizzante. La Germania è uno dei Paesi più colpiti.<br />
Sintomatologia - dispnea, tosse<br />
- atassie, zoppia<br />
- calo della produzione di latte<br />
- cachessia<br />
- splenomegalia, eventualmente epatomegalia<br />
Maedi-Visna (Ac) 1 ml S, EP, HP ELISA (3)<br />
Gli anticorpi si formano dopo alcune settimane fino a parecchi<br />
anni p.i.<br />
Un risultato negativo non esclude al 100% un'infezione.<br />
Attenzione In Italia l'infezione da Maedi-Visna è inserita nella lista B.<br />
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13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Megabatteri (infezione da)<br />
I megabatteri (chiamati anche Macrorhabdus ornithogaster, Avian gastric yeast) sono dei lieviti<br />
capaci di provocare alterazioni infiammatorie nello stomaco ghiandolare degli uccelli. Sono<br />
stati isolati in diverse specie di uccelli, p.es. in pappagalli, passeracei, galline, anatre e<br />
cicogniformi. Negli psittacidi la malattia prende il nome di sindrome da dimagramento cronico<br />
("Going-light-Syndrome"). Si tratta di una malattia multifattoriale. Si dovrebbero escludere altre<br />
infezioni, parassitosi e tumori tramite diagnosi differenziale.<br />
Sintomatologia - vomito, rigurgito<br />
- diarrea<br />
- letargia<br />
- dimagrimento<br />
- rigonfiamento del piumaggio<br />
Megabatteri -<br />
rilevazione diretta<br />
n Meningoencefalite primaverile<br />
vedi → Encefalite da puntura di zecca<br />
n Morbo coitale maligno<br />
vedi → Tripanosomiasi<br />
n Morva (Burkholderia mallei)<br />
feci (5-10 grammi) microscopia (1)<br />
colorazione PAS<br />
Il rilascio dell'agente patogeno avviene a fasi intermittenti,<br />
pertanto si consiglia l'esame di un campione comune di<br />
5 giorni.<br />
Un risultato negativo nello striscio fecale non è sufficiente per<br />
escludere la presenza di un'infezione da Megabatteri.<br />
La morva, eradicata in Europa, è ancora presente solo in alcuni Paesi dell'Asia, dell'Africa e<br />
dell'America Meridionale. Il suo decorso va da acuto a cronico con formazione di noduli ed<br />
ulcere nelle mucose, nella cute e negli organi interni. La morva può essere trasmessa all'uomo.<br />
Morva (Ac) 1 ml S CF (3)<br />
Attenzione In Italia la morva è una malattia inserita nella lista B.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Mycoplasma haemofelis, Candidatus Mycoplasma haemominutum,<br />
Candidatus Mycoplamsa turicensis, Mycoplasma haemocanis e<br />
Candidatus Mycoplasma haematoparvum (infezione da)<br />
L'agente patogeno un tempo indicato come Emobartonella è stato riclassificato ed appartiene<br />
oggi al genere Mycoplasma. Il ceppo Ohio di Haemobartonella felis è stato ribattezzato come<br />
Mycoplasma haemofelis e il ceppo California come Candidatus Mycoplasma haemominutum. Anche<br />
Haemobartonella canis appartiene oggi al genere Mycoplasma sotto il nome di Mycoplasma<br />
haemocanis. Mycoplasma haemofelis sembra essere più patogeno di Candidatus Mycoplasma<br />
haemominutum ed in grado di provocare una malattia anche in gatti immunocompetenti.<br />
Un'infezione da Candidatus Mycoplasma haemominutum presenta generalmente un decorso lieve<br />
o subclinico. Se però sussiste contemporaneamente un'immunodepressione (p.es. in caso di<br />
infezione da FeLV), allora gli animali infetti possono sviluppare anche malattia con decorso<br />
più grave.<br />
Nel cane nella maggior parte dei casi le manifestazioni cliniche si presentano solo negli animali<br />
immunodeppressi, splenectomizzati o contemporaneamente infetti da altri agenti patogeni<br />
trasmessi dal vettore Rhipicephalus sanguineus o da altre zecche. I cani immuno-competenti<br />
possono essere cronicamente infetti senza manifestare sintomatologia.<br />
Le vie di trasmissione non sono ancora del tutto chiarite, anche se è probabile che zecche,<br />
pidocchi, pulci, trasfusioni di sangue e ferite da morso svolgano un ruolo significativo. Anche<br />
la trasmissione verticale è considerata probabile.<br />
Sintomatologia A seconda della patogenicità dell'agente patogeno e dello stato<br />
immunitario il decorso della malattia può variare da acuto a<br />
subclinico, fino a latente-cronico:<br />
- febbre (sopra i 40°)<br />
- anemia emolitica<br />
- ittero, bilirubinuria<br />
- epato- e splenomegalia<br />
- anoressia, apatia<br />
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13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Micoplasmi emotropi<br />
(Emobartonelle) -<br />
rilevazione diretta<br />
La rilevazione dell'agente epicellulare avviene per mezzo del<br />
microscopio ottico, su striscio di sangue colorato con Giemsa.<br />
La rilevazione diretta riesce in genere solo nella fase di malattia<br />
acuta. Il numero degli eritrociti infetti nel sangue periferico<br />
subisce tuttavia delle forti oscillazioni cicliche.<br />
Ne consegue che una rilevazione diretta non sempre è<br />
possibile!Dal momento che l'agente infettivo può essere<br />
facilmente scambiato con corpi di Howell-Jolly, corpi di Heinz<br />
o artefatti, si consiglia di confermare un eventuale risultato<br />
positivo per mezzo della PCR.<br />
cfr. anche i nostri → Parassiti del sangue e batteri emotropi - microscopia<br />
profili ed anche → Profilo emoparassitario I e II<br />
Micoplasmi emotropi<br />
canini: Mycoplasma<br />
haemocanis e Cand. M.<br />
haematoparvum (DNA)<br />
0,5 ml EB + striscio ematico Microscopia (1)<br />
1 ml EB real time-PCR (1)<br />
La probabilità di rilevazione di Micoplasmi emotropi aumenta<br />
se si ricorre alla PCR invece che alla rilevazione diretta su<br />
striscio ematico. La ricerca diretta dell'agente eziologico<br />
diventa importante in cani con anemia emolitica, soprattutto<br />
se immunodepressi e splenectomizzati e per uno screening<br />
dei donatori prima della trasfusione.<br />
Spesso l'agente infettivo non è rilevabile neppure in questo<br />
modo in stadi cronici o subclinici. A causa delle oscillazioni<br />
cicliche del numero degli eritrociti infetti la rilevazione non<br />
sempre è possibile neppure durante la fase acuta della<br />
malattia.<br />
Allo stesso modo, nel corso di una contemporanea terapia<br />
antibiotica la PCR dà luogo in genere a risultati negativi. Dal<br />
momento che il patogeno molto probabilmente non può mai<br />
venire eliminato del tutto, e che esistono portatori asintomatici,<br />
un risultato positivo non equivale automaticamente ad una<br />
malattia clinica. Per l'interpretazione si devono prendere in<br />
considerazione anche la sintomatologia clinica e il reperto<br />
ematologico.<br />
cfr. anche → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Micoplasmi emotropi<br />
felini: Mycoplasma<br />
haemofelis, Candidatus<br />
M. haemominutum e<br />
Cand. M. turicensis(DNA)<br />
La probabilità di rilevazione di Micoplasmi emotropi aumenta<br />
se si ricorre alla PCR invece che alla rilevazione diretta su<br />
striscio ematico.<br />
Tuttavia spesso l'agente infettivo non è rilevabile neppure in<br />
questo modo in stadi cronici o subclinici. A causa delle oscillazioni<br />
cicliche del numero degli eritrociti infetti la rilevazione non<br />
sempre è possibile neppure durante la fase acuta della<br />
malattia. Allo stesso modo, nel corso di una contemporanea<br />
terapia antibiotica la PCR dà luogo in genere a risultati negativi.<br />
Dal momento che il patogeno molto probabilmente non può<br />
mai venire eliminato del tutto, un risultato positivo non equivale<br />
automaticamente ad una malattia clinica. Per l'interpretazione<br />
si devono prendere in considerazione anche la sintomatologia<br />
clinica, il reperto ematologico e la patogenicità del ceppo<br />
identificato.<br />
cfr. anche → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
n Mycoplasma hyopneumoniae (infezione da)<br />
Il Mycoplasma hyopneumoniae è stato individuato nel 1965 come unico agente eziologico della<br />
polmonite enzootica (EP) del suino. Questa può presentarsi in svariate forme, da infezione subclinica<br />
fino a malattia acuta, con complicazioni dovute a germi secondari, e provoca in tutto il<br />
mondo gravi danni economici. La patogenesi della EP è a tutt'oggi non interamente chiarita.<br />
M. hyopneumoniae danneggia le ciglia presenti sulla superficie delle cellule broncopolmonari.<br />
Questa localizzazione rende difficile tanto una sua rimozione meccanica quanto un'efficace<br />
risposta immunitaria. Lo spostamento degli animali ha un suo ruolo nella trasmissione della<br />
malattia, ma un ruolo decisamente più significativo spetta alla trasmissione aerogena.<br />
L'isolamento e la coltura di M. hyopneumoniae sono ancora molto laboriosi e non è perciò<br />
diventato un procedimento diagnostico di routine. Particolarmente difficile nella EP è<br />
l'esclusione di infezioni latenti, dal momento che né le procedure sierologiche né quelle<br />
colturali forniscono risultati sicuri, che si tratti di un solo animale o di tutto l'allevamento. Oltre<br />
ai metodi sierologici e colturali è la PCR che può fornire un contributo decisivo alla diagnosi.<br />
Mycoplasma<br />
hyopneumoniae (Ac)<br />
(suino)<br />
0,5 ml EB real time-PCR (1)<br />
1 ml S ELISA (3)<br />
200 201
13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Mycoplasma spp.<br />
I Micoplasmi sono la più piccola specie di batteri della classe dei Mollicutes in grado di<br />
riprodursi autonomamente. Si tratta di batteri presenti a livello extracellulare, che costituiscono<br />
la causa di numerose malattie nell'uomo, nelle piante e negli animali (come p.es. congiuntivite<br />
nel gatto, polmonite enzootica nel maiale, malattie delle vie respiratorie, testa inclinata o torcicollo<br />
nel topo). In quanto batteri tipici della superficie cellulare e delle mucose in particolare, i<br />
Micoplasmi provocano in genere reazioni infiammatorie croniche. Spesso si osservano infezioni<br />
miste, di origine batterica o virale.<br />
Mycoplasma spp.<br />
(DNA, rilevazione di<br />
più specie)<br />
Mycoplasma felis<br />
(DNA)<br />
Infezioni da Micoplasma felino Mycoplasma felis del gruppo dei Micoplasmi viene associato<br />
a congiuntivite unilaterale o bilaterale, rinosinusite cronica,<br />
polmonite, pleurite e artrite. M. felis raramente provoca<br />
patologie delle vie respiratorie superiori. L'infezione può guarire<br />
spontaneamente dopo 2-4 settimane. Non è ancora chiaro se<br />
i Micoplasmi siano responsabili primari o secondari del<br />
manifestarsi dei sintomi sopra citati.<br />
n Neorickettsia risticii (infezione da)<br />
vedi → Ehrlichiosi monocitaria equina<br />
n Neospora (infezione da)<br />
tampone (oculare, nasale, genitale), PCR (1)<br />
secreto (oculare, nasale)<br />
congiuntivite: tampone congiuntivale real time-PCR (1)<br />
sintomi respiratori: tampone nasale, faringeo<br />
Neospora caninum è considerato l'agente abortivo più frequente nei bovini di tutto il mondo. Nel<br />
cane giovane è invece responsabile di malattie neuromuscolari. Il cane ed il coyote sono, fino<br />
ad oggi, gli unici ospiti finali noti, sebbene il cane possa essere anche un ospite inter-medio<br />
per Neospora caninum. In seguito all'ingestione di bradizoiti presenti nelle cisti dei tessuti degli<br />
ospiti intermedi (bovino, ovino, capra, cervo) gli ospiti finali iniziano dopo<br />
5 giorni p.i. a rilasciare oocisti per circa 2-3 settimane (addirittura fino a 4 mesi). I cani che<br />
vivono in campagna presentano sieroprevalenze più alte dei cani di città. Nel bovino e nel cane<br />
si possono avere infezioni sia verticali che orizzontali. Il cane si infetta più spesso nel periodo<br />
postnatale che prenatale. La maggior parte delle infezioni nei bovini invece ha luogo<br />
verticalmente.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Sintomatologia nel bovino:<br />
- aborto<br />
- ritenzione placentare<br />
- disturbi della fertilità<br />
- encefalomielite in vitelli nati vivi (debolezza, atassia,<br />
iperestensione e iperflessione degli arti, paresi puerperale,<br />
esoftalmo ecc.)<br />
Neospora caninum (Ac)<br />
(cane)<br />
nel cane:<br />
- atrofia muscolare<br />
- iperestensione spastica<br />
- paralisi<br />
- inclinazione permanente della testa<br />
- disfagia<br />
- incontinenza<br />
Forma generalizzata:<br />
- miosite<br />
- miocardite<br />
- dermatite ulcerativa<br />
- polmonite<br />
- meningoencefalite<br />
- alterazioni del comportamento (aggressività, indifferenza ...),<br />
in animali anziani e in malati cronici<br />
- cuccioli infetti per via intrauterina soffrono<br />
di una sindrome di poliradicolite-miosite<br />
1 ml S, EP, HP IFT (3)<br />
Il test va effettuato a partire dal 14° giorno p.i. Non si possono<br />
escludere del tutto possibili reazioni crociate con Toxoplasma<br />
gondii.<br />
Nel cane gli anticorpi contro N. caninum possono persistere per<br />
anni. Pertanto un titolo positivo non è di per sé equivalente ad una<br />
malattia clinica.<br />
202 203
13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Parainfluenza-virus di tipo 3 (infezione da)<br />
Il virus della parainfluenza di tipo 3 appartiene alla famiglia dei Paramyxoviridae.<br />
Un'infezione soltanto con questo virus ha generalmente un decorso non grave o inapparente.<br />
L'intervento di infezioni secondarie batteriche può tuttavia dar luogo a gravi patologie<br />
respiratorie. In particolare nei vitelli questo dà luogo a gravi broncopolmoniti (broncopolmonite<br />
enzootica, febbre da trasporto o Shipping Fever).<br />
Attenzione La parainfluenza è una zoonosi.<br />
Parainfluenza-virus (Ac)<br />
(bovino)<br />
n Paratubercolosi<br />
La paratubercolosi è un'infezione causata dal batterio acido-resistente Mycobacterium avium subsp.<br />
paratuberculosis, colpisce i ruminanti e viene chiamata anche malattia di Johne. Dopo un lungo<br />
periodo di incubazione, da 2 a 6 anni, gli animali cominciano a manifestare enterite cronica,<br />
diventano cachettici e muoiono.<br />
Paratubercolosi (Ac)<br />
(bovini)<br />
Attenzione In Italia la paratubercolosi è una malattia inserita nella lista B.<br />
n Parvovirosi/ Panleucopenia<br />
0,5 ml S HI (3)<br />
0,6 ml S, EP, HP ELISA (3)<br />
L'agente virale della parvovirosi canina (CPV, Canine Parvovirus) e quello della parvovirosi felina<br />
(FPV, Feline Parvovirus) sono strettamente imparentati. Le nuove varianti del CPV sono in grado di<br />
provocare una malattia anche nel gatto. La trasmissione avviene per via oronasale attraverso<br />
contatto con feci infette o con oggetti contaminati. Il decorso della malattia varia, a seconda dell'età<br />
e dello stato immunitario dell'animale, da clinicamente inapparente a iperacuto. La moltiplicazione<br />
del virus ha luogo in tutti i tessuti con alto tasso di divisione cellulare, in particolare mucosa<br />
intestinale, midollo osseo, tessuto linfatico e miocardio e nel gatto anche nel cervelletto e nella<br />
retina.<br />
Sintomatologia Animali gravidi:<br />
- aborti, mummificazione fetale<br />
Nei cuccioli si manifestano generalmente i sintomi seguenti:<br />
- febbre/ ipotermia<br />
- anoressia, apatia<br />
- vomito, diarrea (emorragica)<br />
- disidratazione<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Parvovirus (Ag)<br />
(cane, gatto)<br />
Parvovirus FPV, CPV2<br />
(DNA)<br />
- leucopenia<br />
- dispnea, sintomi cardiaci<br />
- ipoplasia cerebellare (gatto)<br />
- linfopenia<br />
feci (5- 10 grammi), tampone rettale Immunocromatografia (1)<br />
Feci (cane): EIA (1)<br />
La rilevazione diretta dell'antigene del Parvovirus nelle feci è<br />
possibile nel cane e nel gatto. L'escrezione del virus inizia 3-4<br />
giorni p.i. e dura per circa 7-10 giorni, ma in alcuni casi può<br />
durare anche molto di più. L'impiego di vaccini vivi attenuati<br />
può dar luogo nelle prime 4 settimane dopo la vaccinazione ad<br />
un rilascio di virus, e in questo caso una differenziazione del<br />
virus vaccinale da quello di campo non è possibile.<br />
Un risultato negativo nella rilevazione diretta non esclude la<br />
presenza di un'infezione!<br />
feci, tampone rettale real time-PCR (1)<br />
La rilevazione diretta del virus da feci o tampone rettale con<br />
metodo PCR è possibile nel cane e nel gatto. È molto importante<br />
precisare, al momento della richiesta di questo esame, se si<br />
tratta di un cane o di un gatto. Nel cane è di routine praticare<br />
una differenziazione fra ceppo vaccinale CPV 2 e ceppi selvatici<br />
CPV 2a e CPV 2b.Questo è di notevole interesse diagnostico,<br />
in quanto anche il virus vaccinale può venire rilasciato 2-12<br />
giorni dopo la vaccinazione. Il rilascio di virus di campo inizia<br />
invece 3-4 giorni p.i. e dura in genere 7-10 giorni. In alcuni<br />
casi questo periodo può essere più lungo. Un risultato negativo<br />
della PCR non esclude un'infezione.<br />
204 205
13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Parvovirus (Ac) 0,5 ml S HI (1)<br />
La rilevazione di anticorpi anti-Parvovirus nel cane e nel gatto<br />
per mezzo di test di inibizione dell'emoagglutinazione (HI) è<br />
possibile a partire da 4-6 giorni p.i.<br />
Una sieroconversione in animali non vaccinati dimostra la<br />
presenza di un'infezione. Non essendo però possibile una<br />
distinzione fra titoli anticorpali da infezione e da vaccinazione,<br />
e dal momento che la vaccinazione profilattica è ampiamente<br />
diffusa, si consiglia, se si vuole chiarire un sospetto di infezione,<br />
la rilevazione diretta del Parvovirus nelle feci.<br />
Un ridotto titolo anticorpale materno (generalmente fino a<br />
1:40) non è più in grado di proteggere da un'infezione, tuttavia<br />
può ancora interferire con una vaccinazione ("lacuna immunologica").<br />
Vaccinazioni troppo precoci possono rivelarsi inefficaci,<br />
se il virus vaccinale attenuato viene neutralizzato dagli anticorpi<br />
materni ancora presenti. Il tempo di emivita degli anticorpi<br />
materni è di circa 10 giorni. I titoli anticorpali materni nei<br />
cuccioli di una stessa figliata hanno generalmente lo stesso<br />
valore, per cui l'esame di un solo cucciolo permette di valutare<br />
il momento più opportuno per la prima vaccinazione di tutta la<br />
figliata.<br />
cfr. anche il nostro profili → Virologia generale - microscopia elettronica<br />
n PBFD<br />
vedi → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
n Peste equina africana (AHSV)<br />
La peste equina africana è una malattia virale grave da AHSV (African Horse Sickness Virus),<br />
altamente contagiosa, in genere di esito letale, propria del cavallo e dei solipedi affini nell'Africa<br />
meridionale. La malattia viene trasmessa da una mosca ematofaga. I sintomi clinici sono<br />
febbre alta, edema toracico e polmonare. La morte sopraggiunge dopo 3-5 giorni. L'analisi è<br />
richiesta soprattutto in caso di importazione dall'Africa.<br />
Peste equina africana<br />
AHSV (Ac)<br />
1 ml S CELISA (3)<br />
Attenzione In Italia la peste equina africana è una malattia inserita nella<br />
lista A.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Piroplasmosi<br />
vedi → Babesiosi<br />
n Polyomavirus aviario<br />
vedi → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
n PRRS<br />
vedi → Sindrome respiratoria e riproduttiva del suino<br />
n Psittacosi<br />
vedi → Chlamydophila<br />
n Rabbia - Rilevazione di anticorpi per il trasporto di animali<br />
Per il trasporto di animali domestici in alcuni Paesi dell'Unione Europea (Regno Unito, Irlanda,<br />
Svezia, Malta), come anche in alcuni Paesi non appartenenti all'Unione (p.es. Norvegia) vigono<br />
delle disposizioni particolari. Oltre all'obbligo di contrassegnare in modo univoco l'animale e<br />
di riportare le relative informazioni sul Passaporto europeo per animali da compagnia, prima<br />
dell'inizio del viaggio si è tenuti, una volta effettuata la vaccinazione, a far controllare il titolo<br />
anticorpale contro il virus della rabbia in uno dei laboratori autorizzati dalla commissione<br />
dell'Unione Europea.<br />
<strong>IDEXX</strong> Vet·Med·Lab dispone della relativa autorizzazione.<br />
Per poter effettuare l'esame, bisogna assolutamente rispettare alcuni principi.<br />
Utilizzate esclusivamente l'apposito modulo per la richiesta di rilevamento di anticorpi contro<br />
il virus della rabbia. Il modulo può essere scaricato in Internet sul sito www.idexx.it o venir<br />
richiesto direttamente a <strong>IDEXX</strong> Vet·Med·Lab chiamando il numero verde 800 011 822. Occorre<br />
compilare il modulo per intero e con i dati corretti. Se non vengono fornite tutte le informazioni,<br />
non possiamo inviare il risultato. Come materiale si deve ricorrere esclusivamente al siero, che<br />
non deve essere né emolitico né lipemico (sangue EDTA, sangue citrato e sangue con eparina<br />
possono portare in particolari circostanze a risultati erronei e non vengono perciò impiegati).<br />
Le provette devono essere contrassegnate in modo univoco. Siete pregati di seguire le indicazioni<br />
dell'apposito modulo. Il risultato, per iscritto, Vi sarà inviato per posta sotto forma di un certificato.<br />
È necessario considerare che il campione inviato può essere utilizzato solo per questo esame e<br />
che non sono possibili ulteriori richieste di altri esami sullo stesso materiale di analisi.<br />
Dal momento che le normative in materia di immigrazione dei singoli Stati possono essere<br />
soggette a variazioni bisogna assolutamente informarsi tempestivamente, prima di intraprendere<br />
il viaggio, sulle richieste del Paese in cui ci si intende recare.<br />
L'esame non è affatto indicato per chiarire un sospetto di rabbia. Perciò non inviateci materiale<br />
di animali sospetti!<br />
Si prega di considerare anche le relative normative legali.<br />
206 207
13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Rabbia (Ac) (NT) 1 ml S FAVN (1)<br />
L'analisi viene effettuata per mezzo di test di<br />
sieroneutralizzazione del virus con anticorpi fluorescenti<br />
(Flourescent Antibody Virus Neutralisation, FAVN) secondo<br />
le norme dell'O.I.E.<br />
n Rhodococcus equi (infezione da)/ Rodococcosi<br />
Il Rhodococcus equi è un coccobacillo gram-positivo intracellulare facoltativo, precedentemente<br />
conosciuto come Corynebacterium equi; è un agente patogeno diffuso in tutto il mondo e uno<br />
dei più importanti responsabili di patologie nei puledri da 1 a 6 mesi di età. La patologia si<br />
manifesta con febbre, broncopolmonite purulenta-granulomatosa caratterizzata dalla formazione<br />
di ascessi. Ca. il 50% dei puledri con forma polmonare mostra anche un'infezione intestinale<br />
che tuttavia raramente si manifesta con dei sintomi. Si possono inoltre sviluppare polisinoviti<br />
e artriti settiche e osteomieliti. La morbilità del Rhodococcusa è intorno all'80%, la mortalità<br />
varia dal 5 al 17%. La trasmissione avviene principalmente tramite inalazione e assunzione<br />
dell'agente patogeno per via orale. Oltre alla via di trasmissione onfalogena è stata descritta<br />
anche la forma intrauterina.<br />
L'insorgenza dei segni clinici nei puledri è spesso subdola rendendo la patologia riconoscibile<br />
solo dopo lo sviluppo di una grave forma ascessualizzante e quando la prognosi è peggiorata.<br />
La PCR permette di confermare il sospetto diagnostico, accorciare i tempi per la conferma del<br />
sospetto, prevenire la diffusione dell'agente patogeno, minimizzare l'esposizione dell'uomo a<br />
questo batterio.<br />
Il Rhodococcus raramente infetta l'uomo, ma è un patogeno importante in persone<br />
immunodepresse.<br />
Rhodococcus equi (DNA) tampone/ lavaggio tracheale, feci, tessuti real time-PCR (1)<br />
208<br />
La PCR, come ricerca diretta dell'agente patogeno, permette di<br />
- confermare il sospetto diagnostico<br />
- accorciare i tempi per la conferma del sospetto diagnostico<br />
- assicurare che la popolazione equina sia esente da R. equi<br />
- prevenire la diffusione dell'agente patogeno<br />
- minimizzare l'esposizione dell'uomo all'infezione<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Rickettsiosi: Febbre maculosa delle montagne rocciose (RMSF)<br />
La febbre maculosa delle montagne (RMSF, Rocky Mountain Spotted Fever) è una zoonosi di grande<br />
importanza. Il suo agente patogeno è Rickettsia rickettsii, che viene trasmesso attraverso le zecche.<br />
La malattia è diffusa in America settentrionale, centrale e meridionale. Nel cane l'infezione ha per lo<br />
più un decorso non grave, sebbene questo non escluda la possibilità di decorsi gravi e letali. Non<br />
sono state descritte forme croniche. Il periodo di incubazione va da 2 a 14 giorni.<br />
Sintomatologia - improvvisi attacchi di febbre alta<br />
- anoressia<br />
- vomito, diarrea<br />
- petecchie<br />
- formazione di edemi, soprattutto sullo scroto<br />
- rigonfiamenti articolari<br />
- mialgia<br />
- dispnea<br />
- emorragie oculari<br />
- disturbi neurologici<br />
spesso:<br />
- trombocitopenia<br />
In Europa Meridionale è diffusa Rickettsia conorii, l'agente della febbre bottonosa mediterranea<br />
(Fièvre Bouttoneuse) nell'uomo. Anche il cane può contrarre l'infezione. Gli animali colpiti dalla<br />
malattia presentano una sieroconversione. Per quanto riguarda l'insorgere di malattie clinicamente<br />
manifeste nel cane, al momento le opinioni sono molto discordi.<br />
Rickettsie (Ac)<br />
(cane)<br />
n Rotavirus (infezione da)<br />
13 Malattie infettive<br />
1 ml S (refrigerato) IFT (3)<br />
Un aumento di 4 volte del titolo anticorpale nell'esame di due<br />
campioni di siero (soggetti acuti e convalescenti) prelevati a<br />
distanza di circa 3 settimane, assieme ai sintomi clinici tipici,<br />
attesta la presenza di una RMSF.<br />
I Rotavirus colpiscono pressoché tutte le specie animali ed hanno una forte affinità per l'epitelio<br />
dell'intestino tenue. In seguito alla moltiplicazione del virus l'epitelio dei villi viene gravemente<br />
distrutto, con conseguente malassorbimento e ipersecrezione, che danno luogo a gravi diarree<br />
acquose soprattutto in giovani animali. L'infezione avviene per via orale, il serbatoio virale è dato<br />
dagli animali adulti.<br />
Sintomatologia Ad un periodo di incubazione di 1-2 giorni fanno seguito i sintomi<br />
clinici seguenti:<br />
- diarrea acquosa<br />
- vomito<br />
- disidratazione<br />
209
13 Malattie infettive 13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico) 13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Rotavirus (Ag) feci (5-10 grammi) Immunocromatografia (1)<br />
L'escrezione di virus nelle feci dura generalmente da 3 a 10<br />
giorni. Per mezzo di un immunodosaggio si rileva l'antigene<br />
superficiale del virus. L'esame è possibile per ogni specie animale.<br />
Un singolo risultato negativo del test, in presenza di un sospetto<br />
clinico, deve essere sempre confermato dall'esame di un secondo<br />
campione di feci.<br />
cfr. anche il nostro programma → Virologia generale - microscopia elettronica<br />
n Salmonella abortus equi (infezione da)<br />
La trasmissione dell'agente patogeno avviene principalmente per via orale, ma è anche possibile per<br />
via coitale. Al momento Salmonella abortus equi non svolge in Germania più alcun ruolo significativo<br />
come causa di aborti.<br />
Salmonella abortus equi<br />
(Ac)<br />
n Sarcoptes (infezione da)<br />
1 ml S Agglutinazione lenta (3)<br />
Sarcoptes canis è l'agente responsabile della rogna nel cane. Caratteristica tipica di questa malattia è<br />
il forte prurito, che risponde poco o affatto alla somministrazione di glucocorticoidi. All'inizio della<br />
malattia, prima che si passi ad una generalizzazione dei sintomi cutanei, le sedi di predilezione sono<br />
l'addome, lo sterno, la parte esterna degli arti e delle orecchie.<br />
La rilevazione degli acari nel raschiato cutaneo non è generalmente più possibile in casi cronici,<br />
dal momento che in seguito a sensibilizzazione è sufficiente anche un'infestazione limitata per<br />
mantenere l'infezione. La sensibilità del raschiato cutaneo viene valutata intorno al 30-50%.<br />
Sarcoptes (Ac) 0,5 ml S ELISA (1)<br />
La rilevazione di anticorpi anti-Sarcoptes canis nel cane è un<br />
procedimento con specificità (92,6%) e sensibilità (83,3%)<br />
elevate. La rilevazione è possibile circa 3- 4 settimane p.i.,<br />
sebbene in circa il 5-10% dei cani non si abbia formazione di<br />
anticorpi. Ne consegue che un risultato negativo non basta a<br />
escludere un'infezione.Data la lunga persistenza dei titoli<br />
anticorpali, un controllo terapeutico è purtroppo possibile solo<br />
entro certi limiti.<br />
cfr. anche il nostro screening → Ectoparassiti - raschiato cutaneo<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Sindrome respiratoria e riproduttiva del suino (PRRS)<br />
L'agente della sindrome respiratoria e riproduttiva del suino (PRRS, Porcine Reproductive and<br />
Respiratory Sindrome) è un Arterivirus dall'infettività elevata. La malattia è accompagnata<br />
da aborti e problemi della fertilità. Anche il verro può andare soggetto a disturbi dello stato<br />
generale di salute (in particolare ad inappetenza) ed espellere il virus con lo sperma.<br />
Un'infezione senza sintomatologia clinica è tuttavia ugualmente possibile.<br />
Attenzione In Italia la PRRS del suino è inserita nella lista B.<br />
PRRS (Ac) (suino) 1 ml S ELISA (3)<br />
n Stomatite vescicolare<br />
La rilevazione di anticorpi viene effettuata con metodo ELISA.<br />
Gli anticorpi sierici sono rilevabili a partire da una settimana<br />
p.i. e raggiungono i titoli massimi dopo 3-5 settimane. Anti<br />
corpi neutralizzanti contro il virus si sviluppano solo dopo<br />
4-8 settimane.Il numero minimo di campioni consigliato per<br />
allevamento è di 5-10.<br />
Si tratta di un'infezione altamente contagiosa di equidi, bovini e suini, che in rari casi può essere<br />
anche trasmessa all'uomo. Dal punto di vista clinico si assiste alla formazione di vesciche nella<br />
regione della bocca, della lingua, nella mammella e nella corona dello zoccolo. La trasmissione<br />
avviene attraverso contatto della pelle o delle mucose, oppure per mezzo di artropodi. L'area<br />
principale di diffusione è l'America.<br />
Attenzione In Italia la PRRS del suino è inserita nella lista B.<br />
Stomatite vescicolare<br />
(Ac) (cavallo)<br />
1 ml S NT (3)<br />
Attenzione In Italia la stomatite vescicolare è una malattia inserita nella lista A.<br />
210 211
13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Toxoplasmosi<br />
L'agente patogeno della toxoplasmosi, T. gondii, è diffuso in tutto il mondo. Sono importanti<br />
come ospiti definitivi il gatto e i felidi ad esso imparentati, mentre ospiti intermedi possono<br />
essere quasi tutti gli animali a sangue caldo, compresi gli uccelli e l'uomo.<br />
Casi di malattia clinica nel gatto sono estremamente rari e colpiscono al massimo soltanto<br />
animali molto giovani ed eventualmente immunodeppressi. Il gatto contrae l'infezione o<br />
attraverso l'ingestione di carne degli ospiti intermedi contenente cisti o attraverso feci di<br />
altri gatti contenenti oocisti.<br />
Nel gatto, dopo aver colonizzato praticamente quasi tutti gli organi, il parassita comincia a<br />
moltiplicarsi nell'epitelio intestinale. Nel caso di un'infezione con cisti muscolari, ha luogo dopo<br />
circa 3-9 giorni p.i. l'eliminazione di oocisti nelle feci per un periodo di tempo limitato. Nel<br />
caso invece di un'infezione con oocisti sporulate, l'eliminazione ha luogo nel 20% circa dei<br />
gatti dopo 18-35 giorni.<br />
Gli altri animali a sangue caldo e l'uomo contraggono l'infezione attraverso l'ingestione di<br />
oocisti provenienti da feci di gatto o attraverso l'ingestione di cisti muscolari, p.es. con la<br />
carne cruda o poco cotta.<br />
Anche qui, dopo una parassitemia di breve durata, vengono infestati quasi tutti gli organi,<br />
senza avere però l'eliminazione del parassita nelle feci.<br />
Sintomatologia Di norma il decorso dell'infezione è clinicamente inapparente,<br />
tuttavia si possono presentare i sintomi seguenti:<br />
- febbre<br />
- anoressia, apatia<br />
- polmonite<br />
- enterite<br />
- retinopatie<br />
- aborto (nell'uomo, nella pecora e nella capra)<br />
- encefaliti<br />
- ingrossamento linfonodale<br />
Toxoplasma -<br />
rilevazione diretta<br />
Attenzione La toxoplasmosi è una zoonosi.<br />
212<br />
feci Flottazione (1)<br />
La rilevazione diretta delle oocisti di Toxoplasma nelle feci per<br />
mezzo di flottazione è significativa solo nel gatto. Dal momento<br />
che l'eliminazione può avvenire in forma non permanente,<br />
ma intermittente, si raccomanda di procedere all'esame su un<br />
campione di feci collettivo di 3 giorni.Un risultato negativo<br />
della rilevazione diretta dei Toxoplasmi non esclude affatto la<br />
possibilità di un'infezione!<br />
In Italia la toxoplasmosi non è una malattia inserita nella lista A o B.<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
13 Malattie infettive<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Toxoplasma gondii (DNA) real time-PCR (1)<br />
Sintomi del sistema nervoso centrale: 0,5 ml liquor<br />
Aborto (cane/ piccoli ruminanti): tampone vaginale, placenta, feto<br />
Sintomi respiratori: lavaggio bronchiale<br />
Sintomi oculari (soprattutto gatto): umore acqueo<br />
Febbre: 0,5 ml EB<br />
La rilevazione con metodo PCR nelle feci non è possibile. Sulla<br />
scorta di altri campioni biologici la PCR può servire alla rilevazione<br />
di una malattia già presente. Non si dimentichi peraltro<br />
che anche un risultato positivo della PCR non sempre è<br />
probante di un'infezione acuta con T. gondii. L'agente patogeno<br />
è stato infatti rilevato sia nel liquor, sia nell'umore acqueo di<br />
animali clinicamente sani! Ne consegue che un eventuale risultato<br />
positivo deve essere sempre interpretato in relazione alle<br />
manifestazioni cliniche. Un risultato negativo non esclude con<br />
certezza la possibilità di un'infezione.<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
Toxoplasma (Ac) 1 ml S, EP, HP IFT (1)<br />
La rilevazione di anticorpi anti-Toxoplasmi nel gatto e nel cane<br />
con metodo IFT è generalmente il metodo di scelta per la<br />
conferma di un sospetto di infezione. Gli anticorpi IgG sono<br />
in genere rilevabili a partire da 2 settimane p.i. e possono<br />
persistere per anni. Per la determinazione di una toxoplasmosi<br />
attiva è quindi necessario misurare un aumento del titolo tra<br />
due campioni prelevati a distanza. Gli anticorpi IgM si possono<br />
rilevare a partire da 1-2 settimane p.i. e raggiungono il picco<br />
massimo a 3-6 settimane p.i. Nella maggior parte dei gatti<br />
scendono al di sotto del margine rilevabile a circa 12 settimane<br />
p.i. Un elevato titolo di anticorpi IgM, associato ad un titolo di<br />
IgG negativo o basso, rileva un'infezione acuta.<br />
213
13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Trichomonadi (infezione da)<br />
I Trichomonadi sono parassiti dei colombi e di altre specie di uccelli (polli, rapaci, pappagalli),<br />
presenti nella faringe, nell'esofago, nel gozzo e persino nello stomaco ghiandolare. Oltre a<br />
questi organi l'infestazione può coinvolgere anche il fegato, il cuore ed altri apparati. La malattia<br />
colpisce animali giovani, che la contraggono da animali adulti latentemente infetti. Nella parte<br />
posteriore del tratto intestinale di polli e uccelli acquatici si trovano altre specie di Trichomonas<br />
ritenute innocue.<br />
Sintomatologia - formazione di noduli caseari giallastri all'interno del becco<br />
e della gola ("mal giallo")<br />
- perdita dell'appetito<br />
- dimagrimento<br />
- difficoltà nell'assunzione di cibo e di liquidi<br />
Trichomonas -<br />
rilevazione diretta<br />
n Tritrichomonas foetus (infezione da)<br />
Un tampone del gozzo va effettuato con animali a digiuno.<br />
Per mezzo di un tampone umettato con soluzione fisiologica<br />
si deve strofinare la mucosa del gozzo, tenendo all'animale la<br />
testa allungata. Inviare il tampone in una provetta (senza<br />
mezzo di trasporto).<br />
Un risultato negativo non esclude con sicurezza la possibilità di<br />
un'infezione.<br />
Tritrichomonas foetus è un agente eziologico conosciuto e diffuso in tutto il mondo che<br />
sfolge un ruolo importante nell'allevamento estensivo dei bovini. Il patogeno unicellulare<br />
viene trasmesso alla bovina femmina durante la monta ed è responsabile della cosiddetta<br />
Tricomoniasi bovina (tra l'altro associata ad aborto precoce, piometra e disturbi della fertilità).<br />
La patologia è quesi stata estirpata in Europea centrale e occidentale grazie all'inseminazione<br />
artificiale, l'allevamento isolato dei tori e le regolari analisi dello sperma.<br />
Nei gatti il Tritrichomonas foetus abita il tratto digerente. Sono più frequentemente colpiti i gatti<br />
più giovani (< 1 anno d'età) provenienti da gattili o da case abitate da numerosi gatti. Gli<br />
animali infetti mostrano clinicamente diarrea cronica sanguinolenta e mucoide dell'intestino<br />
crasso con uno stato generale comunque buono.<br />
Un unico studio tramite tecnica PCR, eseguito nel 2006 presso l'<strong>IDEXX</strong> Vet·Med·Labor di<br />
Ludwigsburg, dimostrò la presenza di infezione da Tritrichomonas foetus in gatti giovani con<br />
diarrea resistente alla terapia (16% di gatti positivi).<br />
214<br />
tampone del gozzo Coltivazione,Microscopia (1)<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Tritrichomonas foetus feci (1 grammo) real time-PCR (1)<br />
n Tripanosomiasi<br />
L'agente eziologico può essere rilevato nelle feci di gatti infetti<br />
tramite esame microscopico, colturale o PCR. La metodica<br />
PCR si dimostra altamente sensibile e specifica, in quanto al<br />
microscopio si possono rilevare anche altri flagellati patogeni<br />
ed apatogeni che possono essere confusi con T. foetus. Una<br />
coltivazione colturale è molto lunga e laboriosa e può durare<br />
anche fino a 12 giorni.<br />
Per la ricerca di Tritrichomonas foetus tramite PCR viene richiesto<br />
1 grammo di feci fresche. Campioni congelati o secchi oppure<br />
campioni contenenti sabbia della lettiera, così come i tamponi<br />
rettali, non sono adatti per questo tipo di<br />
analisi.<br />
Alle nostre latitudini le infezioni da Tripanosoma sono praticamente irrilevanti per gli animali<br />
domestici.<br />
Tripanosoma -<br />
rilevazione diretta<br />
Trypanosoma equiperdum<br />
(Ac)<br />
13 Malattie infettive<br />
striscio ematico Microscopia (1)<br />
Una rilevazione diretta dell'agente patogeno non è sempre possibile!<br />
1 ml S CF (3)<br />
La diagnosi del morbo coitale maligno (Trypanosoma<br />
equiperdum) o "Durina" ha una certa importanza per il cavallo<br />
in<br />
relazione a richieste specifiche, come p.es. l'importazione.La<br />
malattia è probabilmente ancora molto diffusa, soprattutto in<br />
Asia e nell'Africa settentrionale e meridionale. L'Europa centrale<br />
viene al momento considerata libera da Trypanosoma<br />
equiperdum. La trasmissione ha luogo per via coitale. I segni<br />
clinici variano da manifestazioni infiammatorie dei genitali<br />
esterni<br />
con depigmentazione nello stallone e nella fattrice (macchie<br />
bianche ed esantematiche) fino a disturbi del sistema nervoso<br />
periferico.<br />
Attenzione In Italia l'infezione da Trypanosoma equiperdum è una malattia<br />
inserita nella lista B.<br />
215
13 Malattie infettive<br />
13.1 Malattie infettive (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Trypanosoma evansi (Ac) 0,5 ml S IFAT (3)<br />
n Uveite equina ricorrente (ERU)<br />
vedi → Leptospirosi<br />
n Virus della leucosi bovina<br />
vedi → Leucosi bovina enzootica<br />
n Virus Respiratorio Sinciziale Bovino<br />
vedi → BRSV (infezione da)<br />
216<br />
Il test per la rilevazione di anticorpi contro Trypanosoma evansi<br />
viene svolto prevalentemente in caso di esportazione di cani.<br />
Si prega di indicare espressamente sul modulo di richiesta che si<br />
tratta di un'analisi per esportazione.
14.1 Malattie autoimmuni<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Lupus eritematoso sistemico (LES)<br />
Nel lupus eritematoso sistemico (LES) si ha formazione di autoanticorpi diretti contro numerose<br />
strutture, per lo più nucleari. Tuttavia possono essere anche colpiti eritrociti, fattori della<br />
coagulazione o immunoglobuline.<br />
Per quanto riguarda i cani, la malattia colpisce con particolare prevalenza le seguenti razze:<br />
Pastore tedesco, Barbone, Pastore scozzese Shetland, Beagle, Setter irlandese, Bobtail e<br />
Collie. Per quanto riguarda i gatti esiste una predisposizione di razza nelle razze Siamese,<br />
Persiano e Himalayano. Nel cane la LES può insorgere a tutte le età.<br />
Sintomatologia Nel gatto si presentano in genere, come nell'uomo, diversi<br />
complessi sintomatici contemporaneamente, mentre nel cane<br />
è un solo sintomo, nella maggioranza dei casi, ad avere la<br />
prevalenza<br />
- febbre<br />
- poliartriti<br />
- anemia emolitica, ittero, emoglobinuria<br />
- trombocitopenia, neutropenia<br />
- glomerulonefrite<br />
- degenerazione idropica della pelle e ipercheratosi<br />
- (lupus discoide)<br />
Anticorpi antinucleari<br />
(ANA)<br />
14 Immunologia e allergie<br />
1 ml S, EP, HP IFT (1)<br />
La rilevazione di anticorpi antinucleari (ANA, antinuclear<br />
antibodies) mediante immunofluorescenza è possibile sia<br />
nel cane che nel gatto. Vengono rilevati anticorpi di tipo IgG,<br />
ma solo il 70% circa degli animali sviluppa titoli anticorpali<br />
rilevabili. Un risultato positivo della rilevazione è da considerarsi<br />
probativo solo in collegamento con una sintomatologia clinica<br />
preesistente. Anche in animali clinicamente inapparenti possono<br />
essere infatti rilevati autoanticorpi, così come è possibile che<br />
essi si formino a seguito di altre malattie. Il prelievo di sangue<br />
deve in ogni caso avvenire nel corso di una fase acuta della<br />
malattia.Per la diagnosi del lupus discoide e di altre patologie<br />
cutanee immunomediate la ricerca di anticorpi circolanti non è<br />
indicata. In questi casi si consiglia di inviare una campione di<br />
biopsia cutanea per l'esame istologico.<br />
217
14 Immunologia e allergie 14 Immunologia e allergie<br />
14.1 Malattie autoimmuni 14.1 Malattie autoimmuni<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Miastenia grave<br />
Nella miastenia grave si ha un disturbo della trasmissione dello stimolo alle placche neuromuscolari,<br />
provocato da una riduzione dei recettori dell'acetilcolina. Nei cani e nei gatti<br />
è possibile distinguere due forme:<br />
1. Forma congenita: mancanza di recettori dell'acetilcolina. Questa forma colpisce soprattutto<br />
cani Jack Russel Terrier, Fox Terrier e Springer Spaniel, come il gatto Siamese. I sintomi<br />
compaiono nella maggior parte dei casi già all'età di 6-8 settimane.<br />
2. Forma acquisita: produzione di autoanticorpi contro i recettori dell'acetilcolina. La comparsa<br />
della malattia è segnalata con maggiore frequenza nelle seguenti razze canine: Pastore<br />
tedesco, Akita inu, Labrador Retriever, Golden Retriever, Bassotto, Bracco tedesco a pelo<br />
corto e Chihuahua, come pure nel gatto Somalo ed Abissino, con particolare predilezione<br />
per gli animali dai 2 ai 3 e dai 7 ai 9 anni d'età. La causa della comparsa degli autoanticorpi<br />
non è ancora chiarita. In collegamento ad una miastenia grave è stata anche descritta la<br />
contemporanea comparsa di neoplasie, in particolare di timomi.<br />
Sintomatologia Si possono distinguere tre forme:<br />
Forma focale<br />
- problemi di deglutizione<br />
- megaesofago<br />
- rigurgito<br />
- polmonite da aspirazione (ab ingestis)<br />
Forma acuta<br />
- debolezza muscolare acuta<br />
- dispnea<br />
Forma cronica<br />
- debolezza progressiva<br />
- megaesofago<br />
- rigurgito<br />
- polmonite da aspirazione (ab ingestis)<br />
Nella forma congenita non si ha megaesofago.<br />
Acetilcolina-Recettori-Ac 1 ml S, EP, HP RIA (3)<br />
La rilevazione di autoanticorpi circolanti mediante immunoprecipitazione<br />
(Radioimmunoassay) è il metodo di scelta per il<br />
chiarimento di una diagnosi di miastenia grave acquisita.<br />
Finora la rilevazione viene eseguita soltanto all'Università di<br />
San Diego in California (USA).In casi di miastenia grave<br />
acquisita generalizzata la sensibilità del test si aggira sul 98%<br />
circa. Per quanto riguarda la sensibilità nella forma focale non<br />
si dispone ancora di indicazioni precise. Sono stati descritti<br />
casi di sieronegatività.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Nella forma congenita il livello di anticorpi rilevabile è poco o<br />
nullo. In casi simili e in casi dubbi si consiglia di procedere<br />
al test con Tensilon ® (NdC, il principio attivo è l'edrofonio<br />
cloruro, non in commercio in Italia) o con Mestinon ® (NdC, il<br />
principio attivo è la piridostigmina bromuro, reperibile anche<br />
in Italia).<br />
Attenzione Una terapia con corticosteroidi a dosaggi immunosoppressivi<br />
per più di 7-10 giorni comporta una possibile<br />
negativizzazione dei titoli anticorpali. Farmaci anticolinesterasici<br />
(p.es. Mestinon ®) non interferiscono con il test.<br />
n Miosite dei muscoli masticatori/Miosite eosinofilica<br />
Anticorpi 2-M 2 ml S ELISA (3)<br />
Il test Anticorpi 2-M per la miosite dei muscoli masticatori (o<br />
miosite eosinofilica) permette il rilievo nel cane di anticorpi<br />
contro le fibre muscolari 2M, presenti solo nei muscoli<br />
masticatori.<br />
Si tratta di un test con elevate sensibilità e specificità. Un titolo<br />
anticorpale positivo è diagnostico per la miosite dei muscoli<br />
masticatori. Un titolo anticorpale negativo potrebbe aversi nella<br />
fase termine della miosite dei muscoli masticatori (con perdita<br />
di miofibre), nella polimiosite (in entrambi i casi si consiglia<br />
una biopsia muscolare) o se il cane è stato sottoposto a terapia<br />
con corticosteroidi a dosaggi immunosoppressivi per più di<br />
7-10 giorni.<br />
Attenzione Una terapia con corticosteroidi a dosaggi immunosoppressivi<br />
per più di 7-10 giorni comporta una possibile<br />
negativizzazione dei titoli anticorpali. Farmaci anticolinesterasici<br />
(p.es. Mestinon ®) non interferiscono con il test.<br />
218 219
14 Immunologia e allergie 14 Immunologia e allergie<br />
14.1 Malattie autoimmuni 14.1 Malattie autoimmuni<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Poliartrite reumatoide<br />
La poliartrite reumatoide fa parte delle poliartriti immunoreattive. Le artriti mediate immunologicamente<br />
sono le patologie articolari infiammatorie più frequenti nella prassi veterinaria dei<br />
piccoli animali. Comune ad esse è l'insorgenza in più articolazioni (minimo 2 - 6 articolazioni)<br />
e la presenza di sintomi generali. Tipiche dell'artrite reumatoide sono le alterazioni erosive alle<br />
articolazioni. Ad essere colpiti sono soprattutto cani fra i 5 e i 6 anni, con predilezione per le<br />
razze nane e toy. La causa risiede in un'abnorme produzione di antigeni-anticorpi contro le<br />
immunoglobuline endogene con conseguente deposito nelle articolazioni.<br />
Sintomatologia - inappetenza, apatia<br />
- febbre<br />
- andatura rigida, zoppie<br />
- incremento del liquido sinoviale<br />
(soprattutto articolazioni carpali e tarsali)<br />
- distruzione dell'osso subcondrale<br />
- deformazioni articolari in casi cronici<br />
La rilevazione di autoanticorpi circolanti mediante test di Waaler-Rose è il metodo di scelta<br />
nella medicina umana per il chiarimento di una diagnosi di artrite reumatoide. Con tale metodo<br />
si sfrutta la capacità di questi anticorpi di agglutinare in vitro eritrociti sensibilizzati.<br />
La rilevazione di fattori reumatici è tipica anche della medicina veterinaria, ma non altrettanto<br />
specifica, potendo questi presentarsi anche in altre malattie come p.es. LES, dirofilariosi,<br />
leishmaniosi, piometra ecc. Ne consegue che un risultato positivo è significativo solo in<br />
collegamento con un quadro clinico corrispondente, con alterazioni radiologiche e, se<br />
possibile, con una diagnosi del liquido sinoviale.<br />
La sensibilità è inferiore al 90%; risultati erroneamente negativi sono perciò pur sempre possibili.<br />
Il prelievo di sangue deve in ogni caso avvenire nel corso di una fase acuta della malattia.<br />
cfr. anche i nostri profili specifici → Profilo Sinoviale 1,2,3<br />
cfr. → capitolo 3, Programmi di ricerca speciali<br />
Fattori reumatici<br />
(test di Waaler-Rose)<br />
1 ml S, EB, EP Test di agglutinazione (1)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Anemia emolitica autoimmune<br />
I processi autoimmuni sono la causa più frequente di anemie emolitiche nel cane. Si è soliti<br />
distinguere fra una forma primaria idiopatica e una forma secondaria provocata da un'altra<br />
malattia primaria, come p.es. babesiosi, ehrlichiosi, dirofilariosi, infezioni batteriche e virali,<br />
neoplasie, LES o da farmaci, come p.es. penicillina, sulfonamidi e vaccini.<br />
Nei gatti le anemie immunologicamente mediate sono rare, di regola si tratta di malattie<br />
secondarie a seguito di un'infezione con FeLV o con micoplasmi emotropi (Haemobartonelle).<br />
La malattia colpisce soprattutto animali di età fra giovane e media. Sono state osservate<br />
predisposizioni di razza per Cocker americano, Springer Spaniel, Setter irlandese e Barbone.<br />
Sintomatologia - inappetenza, apatia, debolezza<br />
- febbre, dispnea<br />
- anemia, ittero, emoglobinuria<br />
- splenomegalia, eventualmente epatomegalia<br />
Test di Coombs diretto 1 ml EB Test di agglutinazione (1)<br />
n Isoeritrolisi neonatale<br />
Anticorpi anti-A<br />
del gruppo sanguigno<br />
(gatto)<br />
Il test di Coombs diretto (o test antiglobulina diretto) permette<br />
di rilevare gli anticorpi o il complemento sulla superficie degli<br />
eritrociti. Risultati erroneamente negativi sono possibili in caso<br />
di titoli anticorpali bassi. In caso di anemia emolitica secondaria,<br />
dovuta p.es. a babesiosi, il test di Coombs può egualmente<br />
dare un risultato positivo. Per porre una diagnosi si deve<br />
pertanto ricorrere anche alla rilevazione di sferociti nello striscio<br />
ematico ed alla lettura microscopica, se non addirittura<br />
macroscopica, dell'autoagglutinazione.<br />
1 ml EB (3)<br />
cfr. → capitolo 4.3, Gruppi sanguigni<br />
220 221
14 Immunologia e allergie 14 Immunologia e allergie<br />
14.2 Allergie 14.2 Allergie<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Allergie<br />
Per allergia si intende un'alterazione specifica, congenita o acquisita, della capacità di risposta<br />
del sistema immunitario nei confronti di sostanze esogene, di per sé non nocive, che vengono<br />
riconosciute come allergeni. La malattia è sempre preceduta da una fase di sensibilizzazione,<br />
durante la quale ha luogo un contatto ripetuto con uno o più allergeni.<br />
In linea di principio si possono distinguere quattro tipi di reazione di ipersensibilità, sebbene<br />
nella medicina veterinaria siano soprattutto il tipo I (ipersensibilità immediata) e il tipo IV<br />
(ipersensibilità ritardata) ad essere significativi.<br />
Dal punto di vista eziologico si distinguono negli animali le seguenti forme di allergia:<br />
- allergia a puntura di pulce o a saliva di pulce<br />
- atopia<br />
- reazioni allergiche cutanee a sostanze alimentari<br />
- dermatite allergica da contatto<br />
- reazioni allergiche cutanee a Stafilococchi o a Malassezie<br />
- reazioni allergiche ad allergeni di insetti<br />
L'allergia a puntura di pulce o a saliva di pulce è una delle allergie più frequenti nei cani e<br />
nei gatti. In questo caso si ha una sensibilizzazione nei confronti degli allergeni presenti nella<br />
saliva e probabilmente anche nei confronti dei prodotti di escrezione dei parassiti. Le reazioni<br />
allergiche non sono necessariamente localizzate nella regione della puntura di pulce, ma<br />
possono presentarsi in quasi ogni parte del corpo. La rilevazione della presenza di pulci non è<br />
sempre possibile.<br />
In animali sensibilizzati è sufficiente una puntura di pulce ogni 10-14 giorni per mantenere i<br />
sintomi.<br />
Meccanismi simili sono coinvolti probabilmente anche nell'infezione con acaro Sarcoptes<br />
(cfr.® Sarcoptes).<br />
Per atopia si intende una reazione di ipersensibilità di tipo I (immediata) agli allergeni più<br />
svariati dell'ambiente circostante. Nella maggior parte dei casi esiste alla base una predisposizione<br />
genetica. L'assunzione dell'allergene può avvenire per via aerogena o percutanea. Nei cani essa<br />
avviene principalmente attraverso la cute. Qui le cosiddette "cellule presentatrici di antigeni"<br />
provvedono a rendere gli allergeni riconoscibili per il sistema immunitario, dando luogo alla<br />
sintesi di anticorpi specifici di tipo IgE che si legano alla superficie dei mastociti. In seguito a<br />
rinnovato contatto con l'allergene gli anticorpi IgE si legano a ponte, provocando così la liberazione<br />
di istamina e di altre amine biogene da parte dei mastociti. Queste sono poi a loro volta<br />
responsabili delle tipiche reazioni allergiche come prurito, arrossamento della pelle o alopecia.<br />
La malattia colpisce i cani generalmente fra il primo e il terzo anno di vita. Alcune razze, come<br />
West Highland White Terrier, Bull Terrier, Chow-chow, Boxer, Pastore tedesco ed altri,<br />
presentano una predisposizione per le atopie.<br />
Nel gatto e nel cavallo (più raramente nel cane) si possono anche avere sintomi di tipo<br />
asmatico, come pure forme allergiche di rinite e congiuntivite.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Nelle allergie alimentari la reazione allergica immediata di tipo I con formazione di anticorpi<br />
IgE continua a svolgere una sua funzione, ma come cause scatenanti si possono avere anche<br />
allergie di tipo II, III e IV. In questo caso granulociti neutrofili ed eosinofili possono migrare<br />
nell'epidermide e liberare qui i mediatori dell'infiammazione. Oltre ai sintomi caratteristici della<br />
dermatite atopica possono aversi anche sintomi gastrointestinali.<br />
Data questa patogenesi, il chiarimento diagnostico di un'allergia alimentare per mezzo di<br />
rilevazione sierologica di IgE non è sempre sufficiente. In casi sospetti si consiglia comunque<br />
di ricorrere ad una dieta ad eliminazione (basata sui risultati sierologici) per 8-10 settimane<br />
seguita da test di provocazione.<br />
In condizioni ideali la dieta dovrebbe essere preparata dal proprietario dell'animale stesso e<br />
consistere unicamente di fonti proteiche (carne di cavallo, selvaggina, tacchino) e di carboidrati<br />
(patate). Non c'è motivo di temere carenze alimentari per un periodo di tempo inferiore ai<br />
3 mesi.<br />
La dermatite allergica da contatto è pure un'allergia di tipo ritardato. Tipica della dermatite da<br />
contatto è la comparsa dei sintomi in quelle stesse regioni del corpo (addome, testa, ecc.) che<br />
sono entrate in contatto con la materia responsabile dell'allergia. Anche qui la rilevazione di<br />
anticorpi IgE non è indicata, piuttosto si consiglia di allontanare le sostanze sospette<br />
dall'ambiente dell'animale.<br />
Reazioni allergiche ad antigeni di Stafilococchi o Malassezie sono probabilmente frequenti<br />
negli animali. Entrambi gli agenti appartengono d'altronde alla normale flora cutanea e non<br />
hanno in linea primaria un ruolo patogeno. Solo in caso di alterazioni dell'ambiente cutaneo<br />
dovute ad altre malattie può aversi una loro moltiplicazione eccessiva con conseguente<br />
sensibilizzazione dell'animale. La rilevazione sierologica di un'allergia da Stafilococchi o<br />
Malassezie non è possibile. In questi casi si consiglia di ricorrere all'esame colturale.<br />
Reazioni allergiche ad allergeni di insetti sono di importanza minore nel cane e nel gatto.<br />
Nel cavallo possono svolgere un certo ruolo nel contesto dell'eczema estivo.<br />
222 223
14 Immunologia e allergie 14 Immunologia e allergie<br />
14.2 Allergie 14.2 Allergie<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Test Allercept ®<br />
Questo procedimento identifica soltanto gli anticorpi IgE rilevanti per la reazione allergica, che<br />
sono in grado di legarsi a mastociti e granulociti basofili, ed offre in tal modo una sensibilità<br />
ed una specificità straordinarie.<br />
Test di screening 0,5 ml S, EP, HP ELISA (1)<br />
Allergeni singoli - Profilo<br />
base solo cane e gatto<br />
Il test di screening per cane, gatto e cavallo permette un<br />
orientamento iniziale senza costi eccessivi e può essere<br />
sempre integrato, se necessario, dalla determinazione dei<br />
singoli allergeni. Esso comprende tre gruppi:<br />
Cane e gatto:<br />
Acari e saliva di pulce / Alberi / Graminacee ed erbacee<br />
Cavallo:<br />
Acari e muffe / Alberi / Graminacee ed erbacee / Insetti<br />
0,5 ml S, EP, HP (per gruppo) ELISA (1)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Allergeni singoli - Profilo<br />
esteso cane, gatto e cavallo<br />
Acari, Muffe, Saliva di pulce<br />
(12 allergeni)<br />
• Penicillium notatum<br />
• Aspergillus fumigatus<br />
• Claspodorium herbarum<br />
• Alternaria alternata<br />
• Scarafaggio (Blatella germanica)<br />
• Saliva di pulce (solo cani e gatti)<br />
• Epitelio di gatto (solo cani)<br />
• Acarus siro (acaro della farina)<br />
• Lepidoglyphus (acaro delle derrate)<br />
• Tyrophagus putrescentiae (acaro del<br />
prosciutto crudo)<br />
• Dermatophagoides farinae (acaro della<br />
polvere di casa)<br />
• Dermatophagoides pteronyssinus<br />
(acaro della polvere di casa)<br />
0,5 ml S, EP, HP (per gruppo) ELISA (1)<br />
Alberi (12 allergeni)<br />
• Betulla (Betula)<br />
• Ontano (Alnus)<br />
• Quercia (Quercus)<br />
• Cipresso (Cupressus)<br />
• Nocciolo (Corylus)<br />
• Olmo (Ulmus)<br />
• Faggio (Fagus sylvatica)<br />
• Pioppo (Populus)<br />
• Acero (Acer)<br />
• Salice (Salix)<br />
• Olivo (Olea)<br />
• Cedro (Cedrus)<br />
Acari e Muffe senza saliva di pulce<br />
(6 allergeni)<br />
• Alternaria + Aspergillus<br />
• Cladosporium + Penicillium<br />
• Dermatophagoides farinae<br />
(acaro della polvere di casa)<br />
• Dermatophagoides pteronyssinus<br />
• (acaro della polvere di casa)<br />
• Tyrophagus putrescentiae<br />
(acaro del prosciutto crudo)<br />
• Acarus siro (acaro della farina)<br />
Alberi, Graminacee, Erbacee (8 allergeni)<br />
• Miscela di 6 graminacee:<br />
- erba mazzolina (Dactylis glomerata)<br />
- festuca dei prati (Festuca pratensis)<br />
- fienarola dei prati (Poa pratensis)<br />
- loglio comune (Lolium perenne)<br />
- codolina o coda di topo<br />
(Phleum pratense)<br />
- erba bambagiona o fieno bianco<br />
(Holcus lanatus)<br />
• Segala (Secale cereale)<br />
• Artemisia (Artemisia spp.)<br />
• Piantaggine (Plantago lanceolata)<br />
• Betulla (Betula)<br />
• Salice (Salix)<br />
• Ortica (Urtica dioica)<br />
• Romice crespo (Rumex crispus)<br />
Graminacee, Erbacee (12 allergeni)<br />
• Miscela di 6 graminacee:<br />
- erba mazzolina (Dactylis glomerata)<br />
- festuca dei prati o paleo (Festuca<br />
pratensis)<br />
- fienarola o gramigna dei prati<br />
(Poa pratensis)<br />
- loglio comune (Lolium perenne)<br />
- codolina o coda di topo (Phleum<br />
pratense)<br />
- erba bambagiona o fieno bianco<br />
(Holcus lanatus)<br />
• Agrostide o capellini (Agrostis alba)<br />
• Gramigna (Cynodon dactylon)<br />
• Cannarecchia o saggina (Sorghum<br />
halpense)<br />
• Romice crespo (Rumex crispus)<br />
• Artemisia (Artemisia spp.)<br />
• Piantaggine (Plantago lanceolata)<br />
• Farinaccio bianco (Chenopodium sp.)<br />
• Ortica (Urtica dioica)<br />
• Ambrosia (Ambrosia sp.)<br />
• Parietaria (Parietaria judaica)<br />
• Salsola erba-cali<br />
224 225
14 Immunologia e allergie<br />
14.2 Allergie<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Screening insetti<br />
per cavalli<br />
n Allergie alimentari<br />
Nutridexx Test alimentare<br />
(cane, gatto) (16 allergeni)<br />
Rilevazione di Ac IgE e IgG<br />
226<br />
3 ml S, EP, HP ELISA (1)<br />
- Simulium sp. (mosca nera)<br />
- Culex sp. (zanzara)<br />
- Tabanus sp. (tafano)<br />
- Stomoxis calcitrans (mosca cavallina)<br />
- Culicoides (moscerino)<br />
0,5 ml S, EP, HP ELISA (2)<br />
Cane:<br />
bovino, suino, agnello, anatra, pollo, tacchino, frumento, soia,<br />
orzo, riso, patata, mais, avena, latte vaccino, uovo, pesce bianco<br />
Gatto:<br />
bovino, agnello, suino, anatra, pollo, tacchino, coniglio,<br />
salmone, tonno, pesce bianco, frumento, soia, riso, mais,<br />
uovo, latte vaccino<br />
14.2 Allergie<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Iposensibilizzazione (cane, gatto, cavallo)<br />
Per la produzione di una soluzione iposensibilizzante è necessaria la ricetta del veterinario. Il set di<br />
partenza comprende 3 flaconi di soluzione iposensibilizzante (2 per la soluzione per gli insetti) in<br />
concentrazioni progressivamente crescenti ed è sufficiente per circa 6 mesi. Alla fornitura è accluso<br />
uno schema di dosaggio.<br />
n Iposensibilizzazione - flaconi seguenti<br />
14 Immunologia e allergie<br />
Di regola per ogni dosaggio di soluzione iposensibilizzante si possono richiedere 2-3 dosaggi<br />
successivi, senza che sia necessario inviare nuovo materiale.<br />
227
15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare<br />
15.1 Cenni generali sulla PCR 15.1 Cenni generali sulla PCR<br />
n PCR (Polymerase Chain Reaction)<br />
Il vantaggio diagnostico della PCR consiste nel fatto che è possibile, fra tutti gli acidi nucleici<br />
(DNA o RNA) contenuti in un campione, moltiplicare (amplificare) uno specifico segmento fino<br />
al punto da renderlo misurabile per la rilevazione o caratterizzarlo (sequenziarlo) per un'ulteriore<br />
identificazione. Quando si analizzano segmenti amplificati di acidi nucleici per la rilevazione di<br />
agenti patogeni si tratta di sequenze di DNA o di RNA specifiche per l'agente in questione,<br />
invece, quando si ricercano malattie genetiche, si tratta di porzioni di gene sulle quali è stata<br />
localizzata l'alterazione corrispondente (mutazione). Ad esempio se si vuole determinare il<br />
sesso degli uccelli, si amplifica una porzione di genoma che a causa di polimorfismi di<br />
sequenza ha una diversa composizione sul cromosoma sessuale maschile rispetto a quello<br />
femminile.<br />
Tecnica della PCR<br />
La tecnica della PCR consiste in tre fasi operative:<br />
Prima fase: il DNA da moltiplicare (amplificare) viene riscaldato ad una temperatura elevata<br />
(p.es. 94°C), fino a quando si scinde in due singoli filamenti complementari (denaturazione).<br />
Seconda fase: la temperatura viene fatta scendere fino a quando ad ogni singolo filamento<br />
stampo di DNA (DNA template) si riesce a fissare specificamente (ibridazione) un oligonucleotide<br />
complementare (primer). La regione di DNA stampo compreso fra i due primer costituisce il<br />
segmento DNA da amplificare.<br />
La specificità dei primer per il frammento genomico da rilevare viene assicurata confrontandone<br />
il grado di omologia con le informazioni sequenziali depositate in banche dati come p.es.<br />
GenBank o EMBL. I primer servono da punto di innesco per la DNA polimerasi termostabile<br />
(p.es. Taq polimerasi).<br />
Terza fase: i primer vengono allungati in modo stampo-dipendente con l'aiuto della DNA<br />
polimerasi in presenza di un forte eccesso molare di desossiribonucleotidi trifosfato (dNTPs).<br />
Si hanno così due nuovi filamenti doppi di DNA.<br />
Il prodotto della PCR creatosi nella fase di allungamento serve a sua volta da stampo per i<br />
primer oligonucleotidici anch'essi presenti in eccesso.<br />
Il ciclo di denaturazione-ibridazione-allungamento viene ripetuto tante volte, fino quando non si<br />
sia ottenuta la quantità di prodotto di reazione (copie identiche del segmento iniziale di DNA)<br />
necessaria per eseguire le analisi.<br />
Il campo di applicazione della PCR può essere ampliato attraverso diverse modifiche nel<br />
protocollo del test.<br />
Esse rendono possibili fra l'altro:<br />
- l'amplificazione di RNA per la rilevazione di virus a RNA o per la rilevazione di prodotti<br />
dell'espressione genica<br />
- un aumento della specificità e sensibilità grazie all'impiego di un'ulteriore specifica coppia<br />
di primer nella cosiddetta "nested PCR"<br />
- la quantificazione del DNA/RNA di partenza grazie all'impiego di standard interni, p.es.<br />
tramite "real time PCR".<br />
Interpretazione del test nella diagnosi di agenti patogeni<br />
Un risultato positivo della PCR indica che l'acido nucleico ricercato è presente nel materiale di<br />
analisi. Non è possibile affermare se l'agente così identificato sia vitale e in grado di riprodursi<br />
o meno. Non è neppure possibile, con le tecniche PCR abituali, stabilire la quantità in cui è<br />
presente l'acido nucleico nel campione. Sono tuttavia possibili metodi di PCR quantitativa:<br />
sono in preparazione nel nostro laboratorio per parametri particolarmente significativi. Si tenga<br />
presente che a causa dell'elevata sensibilità della tecnica PCR è sufficiente una contaminazione<br />
minima con l'acido nucleico ricercato per avere dei risultati falsi positivi.<br />
Un risultato negativo della PCR indica che al momento dell'esame il segmento di acido nucleico<br />
ricercato nel campione non era amplificabile, o perché non era presente o perché lo era in<br />
quantità limitata.<br />
In caso di utilizzo di campioni inadatti, di campioni contenenti inibitori (p.es. eparina) o di<br />
trattamento non appropriato del campione prima o durante il trasporto (p.es. se il campione<br />
viene scongelato e ricongelato più volte) si possono avere dei risultati falsi negativi. Nel corso<br />
di un'analisi PCR è tuttavia possibile riconoscere gli inibitori e, eventualmente, allontanarli. In<br />
questo modo è possibile evitare del tutto risultati erroneamente negativi dovuti ad inibitori. Se<br />
un allontanamento degli inibitori non fosse stato possibile, il risultato dell'esame lo segnala<br />
espressamente.<br />
Materiale per la diagnostica molecolare di agenti patogeni<br />
Per la PCR sono indicati campioni in cui si presume che l'agente patogeno sia contenuto in<br />
quantità sufficiente. Occorre pertanto, prima del prelievo, appurare:<br />
- se l'animale si trovi o meno ancora nella fase viremica/batteriemica<br />
- se l'agente patogeno abbia già raggiunto o meno il suo organo bersaglio e, in caso<br />
affermativo, a seconda della sintomatologia appurare quale sia il sito più probabile in<br />
cui esso risieda<br />
- se esista un organo in cui l'agente risiede anche nelle fasi di latenza, al di fuori delle fasi<br />
acute della malattia (come p.es. i leucociti per l'EHV-1).<br />
I materiali di analisi possibili sono:<br />
- Tamponi:<br />
Per il prelievo di tamponi utilizzare tamponi sterili e asciutti; spedirli al laboratorio senza<br />
terreno di trasporto in una provetta senza anticoagulante.<br />
Attenzione: questi campioni non sono adatti per un esame batteriologico!<br />
In caso di richiesta di esami batteriologici e di biologia molecolare nello stesso tempo<br />
si prega di prelevare e inviare sempre due tamponi distinti.<br />
- Liquidi biologici:<br />
(liquido sinoviale, liquor o liquido cefalorachidiano, puntato prelevato da cavità corporee,<br />
umore acqueo, urina ecc.):<br />
Spedire in provette sterili, senza anticoagulante.<br />
228 229
15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare<br />
15.1 Cenni generali sulla PCR 15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
A seconda dei parametri richiesti occorrono fra i 0,5 e i 2 ml di materiale. In caso di urina<br />
occorrono 5 ml di materiale. Se si è sicuri che il campione arriverà al laboratorio non più tardi<br />
di due giorni dopo il prelievo, allora il campione va conservato ad una temperatura compresa<br />
fra i + 2°C e i + 8°C e inviato senza congelarlo. Se invece non si può escludere che il<br />
campione arrivi più tardi, allora occorre congelarlo e inviarlo congelato senza interruzione della<br />
catena del freddo (utilizzare p.es. i contenitori per materiale congelato).<br />
Tuttavia in caso di rilevazione di organismi intracellulari (p.es. Listerie) bisogna evitare in<br />
generale il congelamento: è da preferirsi la conservazione a temperatura compresa fra i + 2°C<br />
e i + 8°C. Si prega di indicare chiaramente sul modulo di richiesta che si tratta di materiale<br />
congelato. Evitare assolutamente uno scongelamento e successivo ricongelamento del materiale.<br />
- Prelievi bioptici, parti di organi, materiale abortivo:<br />
Spedire in una provetta sterile senza anticoagulante, che contenga soluzione fisiologica in<br />
quantità sufficiente a ricoprire il campione. Se non siete sicuri che il campione arrivi al<br />
laboratorio non più tardi di due giorni dopo il prelievo, inviate il materiale congelato senza<br />
addizione di fisiologica e senza interruzione della catena del freddo. Si prega di indicare<br />
chiaramente sul modulo di richiesta che si tratta di materiale congelato. Evitare<br />
assolutamente uno scongelamento e successivo ricongelamento del materiale.<br />
- Sangue EDTA, sangue citrato:<br />
La quantità richiesta varia a seconda dei parametri di ricerca adottati ed eventualmente<br />
della fase della malattia. Si prega di non inviare in nessun caso campioni congelati. Si<br />
prega di non inviare sangue con eparina!<br />
- Feci:<br />
Spedire in provette sterili, senza anticoagulante. Di norma sono sufficienti 2 g di materiale.<br />
Materiale di analisi per la diagnosi genetica molecolare (malattie ereditarie, test di paternità,<br />
DNA-Fingerprinting)<br />
Il materiale standard per gli esami genetici di malattie ereditarie negli animali è costituito da<br />
sangue EDTA, in quantità fra i 0,5 e i 2 ml o, in alcuni casi, da un tampone della mucosa della<br />
guancia. Il tempo necessario per il trasporto non è rilevante ai fine di un esito attendibile.<br />
Il materiale standard per test del DNA e test di paternità è costituito da sangue EDTA (almeno<br />
0,5 ml) o da un tampone prelevato dalla mucosa della guancia.<br />
Potete richiederci l'apposito modulo di richiesta o scaricarlo direttamente da www.idexx.it.<br />
Indicazioni per il prelievo di tamponi dalla mucosa della guancia<br />
1. Prima del prelievo il paziente non dovrebbe aver assunto nè cibo nè bevande (ad eccezione<br />
dell'acqua) da almeno 30 minuti.<br />
2. Con un tampone sterile (meglio ancora con un "Cytobrush") strofinare vigorosamente<br />
entrambe le guancie interne avanti e indietro per almeno 10 volte. Durante la procedura far<br />
roteare il tampone su se stesso.<br />
3. Identificare chiaramente (dati del proprietario) il contenitore protettivo, per evitare possibili<br />
scambi di campione!<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
4. Lasciar asciugare il tampone all'aria a temperatura ambiente per almeno 1-2 minuti,<br />
lasciando il tampone appoggiato al tavolo, dopo averlo spinto per alcuni centimetri nel<br />
contenitore protettivo.<br />
5. Dopo l'asciugatura spingere il tampone in fondo al contenitore protettivo.<br />
6. Tenere quindi il campione in ambiente fresco (5-8° C) e asciutto o inviare immediatamente<br />
al laboratorio.<br />
Non toccate in nessun caso il tampone, in quanto il contatto con materiale estraneo potrebbe<br />
falsare l'esito o rendere impossibile la valutazione.<br />
Misure precauzionali nel trattamento del campione<br />
A causa dell'elevata sensibilità del metodo PCR vi preghiamo di attenervi assolutamente alle<br />
seguenti direttive per il prelievo del materiale:<br />
- indossate regolarmente i guanti durante il prelievo del materiale, per evitare contaminazioni.<br />
- prelevate il campione per questo tipo di esame separatamente dagli altri eventuali campioni.<br />
- usate provette e strumenti sterili, evitando possibili contaminazioni del campione<br />
attraverso manipolazioni successive (p.es. nel travasare o nel confezionare il campione)!<br />
- se siete sicuri che il campione arriverà al laboratorio non più tardi di due giorni dopo il<br />
prelievo, inviatelo non congelato, conservandolo fino al momento della spedizione ad una<br />
temperatura compresa fra i +2°C e i +8°C.<br />
- se non è possibile evitare un tempo di trasporto più lungo, inviate il campione congelato<br />
(ad eccezione di sangue EDTA e sangue citrato), assicurandovi che la catena del freddo<br />
non venga interrotta (utilizzare p.es. i contenitori per materiale congelato). Se ciò non<br />
fosse possibile, allora è preferibile inviare il materiale non congelato. Evitare assolutamente<br />
uno scongelamento e successivo ricongelamento del campione.<br />
Richieste supplementari<br />
Attenzione: in caso di richiesta supplementare di ricerca di agenti patogeni tramite metodica PCR,<br />
non si può escludere che il materiale, se non inviato esclusivamente per questo tipo di esame e<br />
quindi già utilizzato per precedenti test diagnostici, sia stato contaminato e che possa quindi portare<br />
a degli esiti falsamente positivi.<br />
230 231
15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare<br />
15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico) 15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Adenovirus equino 1<br />
(DNA)<br />
Anaplasma spp.<br />
(DNA, rilevazione di<br />
più specie)<br />
Arterite Virale Equina<br />
(EVA, Equine Viral Arteritis)<br />
(RNA)<br />
tampone corneale, congiuntivale PCR (1)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
2 ml EB, milza, midollo real time-PCR (1)<br />
In animali con sintomi clinici un esito positivo è a favore di<br />
un'infezione con uno o più dei seguenti agenti eziologici:<br />
A. phagocytophylum, A. platys.<br />
È possibile richiedere una differenziazione tra<br />
A. phagocytophylum e A. platys ricorrerendo ad un'analisi<br />
sequenziale del prodotto PCR amplificato.<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Materiale a seconda della sintomatologia real time-PCR (1)<br />
(vedi sotto)<br />
Esistono diversi tipi di materiale indicati per un'analisi di genetica<br />
molecolare dell'EVA:<br />
- sperma, liquido seminale (1 ml)<br />
- tampone vaginale, lavaggio vaginale (2-5 ml)<br />
- secreto nasale, lavaggio tracheale (2-5 ml)<br />
- S, EP, CP (1 ml)<br />
- EB, NaF (3 ml)<br />
- tessuto: linfonodale, splenico, (almeno 0,5 g)<br />
polmonare, placentale, fetale<br />
- (urina) (5 ml)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Attenzione In Italia l'arterite virale equina è una malattia soggetta a<br />
obbligo di denuncia.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Babesia felis (DNA)<br />
(gatto)<br />
Babesia spp. (DNA)<br />
(cane)<br />
Babesia spp. (DNA)<br />
(cavallo)<br />
0,5 ml EB real time-PCR (1)<br />
La microscopia rappresenta ancora l'esame diagnostico<br />
standard per rilevare una babesiosi. La PCR mostra tuttavia<br />
notevoli vantaggi in termini di sensibilità.<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
0,5 ml EB real time-PCR (1)<br />
Il test permette di rilevare Babesie sia grandi che piccole;<br />
l'esame comprende un'analisi sequenziale, in grado di<br />
differenziare tra: B. canis canis, B. canis vogeli, B. canis rossi, B.<br />
gibsonii e B. conradae.<br />
Rispetto all'identificazione con il microscopio ottico su striscio<br />
di sangue la PCR è nettamente più sensibile.La parassitemia<br />
inizia 5-10 giorni dopo l'infezione. In caso di infezione cronica<br />
le fasi parassitemiche si alternano a momenti di quiescenza e<br />
scomparsa dal circolo periferico del parassita, rendendo<br />
spesso difficile il rilievo diretto del parassita.<br />
Una rilevazione diretta del parassita non è quindi sempre<br />
possibile!<br />
0,5 ml EB PCR (1)<br />
Dal punto di vista sierologico un'infezione con Babesia spp. è<br />
rilevabile a partire da almeno 10-14 gg. p.i. In rari casi la sieroconversione<br />
può mancare del tutto. Nella fase iniziale dell'infezione<br />
è possibile rilevare l'agente patogeno al<br />
microscopio su striscio di sangue. Tuttavia, dal momento che<br />
spesso è solo una piccola percentuale degli eritrociti ad essere<br />
colpita, si possono avere dei risultati erroneamente negativi. La<br />
PCR è un metodo alternativo sensibile per ottenere chiarezza<br />
diagnostica in merito a un'infezione con Babesia anche prima<br />
della formazione di anticorpi specifici. È anche possibile,<br />
qualora sussista un particolare interesse, una differenziazione<br />
delle singole specie per mezzo di analisi sequenziale della<br />
PCR amplificato.<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
232 233
15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare<br />
15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico) 15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Bartonella spp. (DNA) 0,5 ml EB, puntato linfonodale, real time-PCR (1)<br />
tampone congiuntivale<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Borna (RNA) 1 ml liquor, retina PCR (3)<br />
(inviare un bulbo intatto)<br />
Borrelia burgdorferi<br />
sensu lato(DNA)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Zoppia: biopsia articolare PCR (1)<br />
Sintomi del sistema nervoso centrale: 0,5 ml liquor<br />
Altro: zecca<br />
Data l'elevata sieroprevalenza all'interno della popolazione<br />
canina, l'interpretazione dei risultati dei test sierologici è<br />
spesso problematica. Solo una crescita significativa del titolo<br />
o un titolo iniziale molto alto sono suggestivi di un'infezione<br />
acuta.In presenza di sintomi clinici la rilevazione dell'agente<br />
patogeno per mezzo di PCR costituisce un mezzo veloce - e<br />
molto informativo in caso di risultato positivo - per confermare<br />
un sospetto clinico. Un risultato negativo della PCR tuttavia<br />
non è sufficiente per escludere una borreliosi, dal momento<br />
che l'agente patogeno potrebbe essere localizzato altrove<br />
nell'organismo. È perciò necessaria una scelta critica del<br />
materiale di analisi!Nei cavalli provenienti da zone endemiche<br />
si hanno titoli anticorpali anti-B. burgdoferi, ma la rilevanza<br />
clinica dell'infezione è tuttavia oggetto di discussione. Sono<br />
state descritte zoppie, poliartrite e panuveite in connessione<br />
con l'infezione da Borrelie nel cavallo, una rilevazione<br />
dell'agente patogeno per mezzo di PCR sugli organi coinvolti<br />
è in linea di principio possibile.<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Calicivirus (RNA) (gatto) Tampone: nasale, faringeo, oculare real time-PCR (1)<br />
Malattia acuta: 1 ml EB<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Chlamydophila spp.<br />
(DNA)<br />
Chlamydophila felis<br />
(DNA)<br />
Congiuntivite: tampone congiuntivale real time-PCR (1)<br />
Sintomi delle vie respiratorie: tampone nasale, faringeo<br />
Aborto: tampone vaginale<br />
I risultati più significativi si ottengono prelevando il campione<br />
fin dalla prima comparsa dei sintomi. Dal momento che le<br />
Clamidie sono batteri intracellulari obbligati, occorre fare attenzione<br />
a ottenere campioni su tampone il più possibile ricchi di<br />
cellule. Un risultato positivo della PCR conferma il<br />
coinvolgimento delle Clamidie nel quadro clinico osservato, un<br />
risultato negativo invece non è sufficiente per escluderne il<br />
coinvolgimento.<br />
La PCR effettuata sulla regione genomica 16S rRNA per la<br />
rilevazione di quella che finora era chiamata Chlamydia psittaci<br />
non permette di differenziare fra loro Chlamydophila psittaci, Chl.<br />
abortus, Chl. felis e Chl. caviae. Per una differenziazione delle<br />
specie di Chlamydophila sopra elencate si può tuttavia anche<br />
prendere in considerazione l'adattamento delle singole specie<br />
ai loro animali ospiti: perciò si troverà Chlamydophila psittaci<br />
negli uccelli, Chl. abortus soprattutto negli ovini, Chl. felis nei<br />
gatti e Chl. caviae nelle cavie.<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Congiuntivite: tampone congiuntivale real time-PCR (1)<br />
Sintomi delle vie respiratorie: tampone nasale o faringeo<br />
Aborto: tampone vaginale<br />
La clamidiosi felina (polmonite felina) viene sostenuta dal<br />
batterio Chlamydophila felis. La clamidiosi è frequente e diffusa<br />
in tutto il mondo. Chl. felis è responsabile principalmente di<br />
una congiuntivite follicolare cronica con scolo oculare che<br />
può anche essere purulento. Questa forma oculare si presenta<br />
soprattutto in gattini tra le 5 e le 12 settimane d'età.<br />
Un'infiammazione polmonare è invece rara.<br />
Una real time-PCR sul gene ompA di Chl. felis permette di<br />
differenziarla specificamente da altre specie di Chlamydopila.<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
234 235
15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare<br />
15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico) 15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Chlamydophila psittaci<br />
(DNA)<br />
Gli uccelli infettati con Chlamydophila psittaci possono restare<br />
a lungo asintomatici o mostrare sintomi non specifici. Talvolta<br />
si assiste solo a distanza di anni all'insorgere di una clamidiosi.<br />
L'eliminazione dell'agente patogeno nelle feci inizia circa 3<br />
giorni p.i., ma può durare per mesi ed è spesso intermittente.<br />
Animali con una forma latente possono, in condizioni di<br />
immunodeppressione (stress, malattia), diventare nuovamente<br />
escretori dell'agente patogeno. La quantità di batteri così<br />
eliminati e la frequenza dell'eliminazione aumentano negli<br />
animali stressati o ammalati.<br />
Il tampone cloacale è il mezzo di identificazione più idoneo<br />
per l'identificazione di uccelli infetti, in particolare di portatori<br />
cronici, che rappresentano il principale pericolo di infezione<br />
per altri uccelli, oltre che una fonte di infezione per l'uomo<br />
(zoonosi!). Dato il ritmo intermittente con cui viene rilasciato<br />
l'agente patogeno, in caso di sospetto clinico e contemporaneo<br />
risultato negativo della PCR, il test deve essere ripetuto.<br />
Grazie al metodo della "real time-PCR", da poco introdotto<br />
nei nostri laboratori (consigliato dall'Istituto Friedrich Löffler,<br />
Centro di Riferimento Nazionale per la psittacosi) (NdC,<br />
assimilabile agli Istituti Zooprofilattici italiani) è oggi possibile<br />
la rilevazione specifica di Chlamydophila psittaci, differenziandola<br />
da altre specie di Chlamydophila.<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Attenzione In Italia la psittacosi è una malattia soggetta a obbligo di denuncia,<br />
mentre le altre infezioni da Chlamydophila sono soggette a obbligo<br />
di segnalazione.<br />
CHV 1<br />
tampone cloacale, feci real time-PCR (1)<br />
tampone congiuntivale<br />
vedi → Herpesvirus canino<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Cimurro canino (CDV)<br />
(RNA)<br />
Congiuntivite: tampone congiuntivale real time-PCR (1)<br />
Fase febbrile: 2 ml EB<br />
Sintomi del sistema nervoso centrale: 0,5 ml liquor<br />
Gastroenterite: tampone rettale<br />
Sintomi delle vie respiratorie: secreto nasale<br />
Il virus del cimurro canino (CDV, Canine Distemper Virus) si<br />
moltiplica a partire dall'8° giorno p.i. nelle cellule epiteliali<br />
di diversi organi (vie respiratorie, tratto digerente, tratto<br />
urogenitale, cute) e nel sistema nervoso centrale; è il luogo di<br />
replicazione del virus a determinare la sintomatologia clinica.<br />
A partire da questo momento è possibile rilevare il virus negli<br />
organi infettati con metodo PCR. Ad eccezione delle forme<br />
con decorso cronico, l'escrezione del virus termina con la<br />
scomparsa dei sintomi clinici. Dopodiché il virus non è più<br />
rilevabile.<br />
Contrariamente a quanto succede per la rilevazione degli<br />
anticorpi, l'alta percentuale di animali vaccinati non rappresenta<br />
un problema decisivo per la diagnosi con PCR, in quanto il<br />
virus vaccinale è rilevabile solo fra gli 8 e i 21 giorni al massimo<br />
post vaccinazione e resta confinato al tessuto linfatico.<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
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15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare<br />
15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico) 15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Circovirus suino 2<br />
(PVC-2) (DNA)<br />
Coronavirus canino<br />
CECoV (RNA)<br />
Coronavirus felino/FIP,<br />
FECV<br />
Linfonodi, polmone, fegato, milza, PCR (3)<br />
eventualmente tampone nasale<br />
Il Circovirus suino di tipo 2 (PVC-2) è stato descritto da non<br />
molto tempo (Canada 1998) a differenza del PCV-1, che è invece<br />
un Circovirus già noto da tempo e non patogeno. Il PVC-2<br />
provoca i sintomi più svariati nei maiali da ingrasso o in fase<br />
di svezzamento (p.es. rallentamento della crescita, dispnea,<br />
ingrossamento dei linfonodi, pallore, ittero, diarrea), il cui<br />
complesso è anche conosciuto come "sindrome deperimento<br />
multisistemico post svezzamento" (PMWS, Postweaning<br />
Multisystemic Wasting Syndrome). Un quadro clinico manifesto<br />
è stato finora riscontrato solo in combinazione con infezioni<br />
secondarie (PRRS, Porcine Reproductive and Respiratory<br />
Syndrome, sindrome respiratoria e riproduttiva del suino e PPV,<br />
Porcine Parvovirus, Parvovirus suino). Un'altra sindrome a cui<br />
viene collegato il Circovirus suino 2 è la "sindrome dermatite e<br />
nefropatia del suino" (PDNS, Porcine Dermatitis Nephropathy<br />
Syndrome). Si tratta probabilmente di una patologia da immunocomplessi,<br />
sulla quale peraltro ancora non si conosce molto.<br />
Anche sull'escrezione del virus si dispone di poche informazioni:<br />
è stato rilevato finora sperimentalmente nel secreto oculare, nella<br />
saliva e nelle feci. La trasmissione transplacentare, anche se<br />
possibile, non svolge probabilmente un ruolo importante. Il virus<br />
mostra un'affinità per il tessuto linfatico e porta ad un'immunodepressione,<br />
che è causa a sua volta di infezioni secondarie.<br />
Problemi di gestione dell'allevamento possono favorire l'insorgere<br />
della sindrome. La mortalità può superare l'80%. Si possono<br />
avere infezioni latenti.<br />
tampone rettale, feci real time-PCR (1)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
vedi → FIP/Coronavirus felino, FECV<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Coronavirus TGEV<br />
(Gastroenterite trasmissibile<br />
del suino) (RNA)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Attenzione In Italia la gastroenterite trasmissibile (TGE, Transmissible<br />
Gastro Enteritis) è una malattia soggetta a obbligo di denuncia.<br />
Dirofilaria<br />
Ehrlichia spp. (DNA,<br />
rilevazione di più specie)<br />
(cane, gatto)<br />
feci, tampone rettale, mucosa intestinale real time-PCR (1)<br />
vedi → Filaria spp.<br />
2 ml EB, 0,5 ml liquor real time-PCR (1)<br />
In animali con sintomi clinici un esito positivo è a favore di<br />
un'infezione con uno o più dei seguenti agenti eziologici: E.<br />
canis, E. ewingii, E. chaffeensis.<br />
È possibile richiedere una differenziazione delle singole specie<br />
ricorrerendo ad un'analisi sequenziale del prodotto PCR<br />
amplificato.<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Ehrlichia canis (DNA) 2 ml EB, biopsia splenica, midollo osseo real time-PCR (1)<br />
Con metodo PCR è possibile rilevare E. canis nel sangue già a<br />
partire dal 4° giorno p.i., vale a dire ben prima della comparsa<br />
dei primi anticorpi. Con questo metodo è anche possibile<br />
controllare la riduzione dell'agente patogeno sotto la soglia di<br />
rilevabilità in seguito a terapia antibiotica, mentre a causa della<br />
lunga persistenza degli anticorpi la sierologia è meno adatta ad<br />
un controllo terapeutico. Un risultato positivo alla PCR conferma<br />
il sospetto di un'infezione da E. canis, un risultato negativo<br />
invece non è sufficiente a escludere un'ehrlichiosi, essendo<br />
possibile che al momento del prelievo le Ehrlichie non si<br />
trovassero nel sangue, o che non lo fossero in misura<br />
sufficiente, o che fosse in corso un'infezione con altre<br />
specie di Ehrlichia.<br />
238 239
15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare<br />
15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico) 15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
EHV<br />
Encefalita da puntura di<br />
zecca (Meningoencefalite<br />
primaverile) (RNA)<br />
FeLV-progenoma<br />
(Virus della leucemia felina)<br />
(DNA)<br />
FHV 1<br />
vedi → Herpesvirus equino<br />
0,5 ml liquor, zecca PCR (1)<br />
Nel caso di animali provenienti da zone endemiche e con<br />
sintomi del sistema nervoso centrale, la rilevazione dell'agente<br />
patogeno con metodo PCR su liquor fornisce in aggiunta<br />
all'esame sierologico del liquor un'ulteriore possibilità di<br />
analisi. È anche possibile identificare il virus direttamente<br />
sulla zecca.<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
2 ml EB, midollo osseo PCR (1)<br />
Con il metodo "nested PCR" è possibile rilevare il DNA virale<br />
integrato nel genoma della cellula ospite, indicato come<br />
progenoma/provirus (o genoma provirale). La sua rilevazione<br />
è indicata soprattutto per la diagnosi di un'infezione latente o<br />
in regressione. Grazie alla sua elevata specificità la PCR può<br />
venire impiegata come test di conferma in caso di risultati<br />
incerti.Si tenga conto del fatto che la sensibilità del test<br />
dipende in misura notevole dal numero delle cellule infette<br />
(carico provirale). Ne consegue che un risultato negativo<br />
non esclude con sicurezza un'infezione.<br />
Questo procedimento non permette di fare alcuna considerazione<br />
sulla capacità di replicazione del virus.<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
vedi → Herpesvirus equino<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Filaria spp. (DNA) 1 ml EB PCR (1)<br />
Con l'aiuto di questo test PCR è possibile differenziare le<br />
microfilarie rilevate tramite il test di Knott o sullo striscio<br />
ematico. In questo modo è possibile identificare con sicurezza<br />
se si tratta di una Filaria patogena o apatogena, in modo tale<br />
da scegliere il protocollo terapeutico appropriato.<br />
Con la PCR è possibile differenziare anche le Filarie adulte<br />
prelevate ad es. da un nodulo sottocutaneo (Dirofilaria repens o<br />
Acanthocheilonema reconditum), dal cuore (Dirofilaria immitis) e<br />
dalla cavità peritoneale (Acanthocheilonema dracunculoides).<br />
Per ogni campione viene eseguita una PCR specifica per<br />
Dirofilaria immitis e una per Dirofilaria repens, oltre che una PCR<br />
"a 6 specie". Tramite quest'ultima vengono rilevate ulteriori 4<br />
specie, che sono tuttavia rare (Acanthocheilonema reconditum e<br />
A. dracunculoides, Brugia malayi e B. pahangi).<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
240 241
15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare<br />
15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico) 15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
FIP/Coronavirus felino,<br />
FECV (RNA)<br />
Versamenti cavitari: 0,5 ml puntato real time-PCR (1)<br />
Sintomi del sistema nervoso centrale: 0,5 ml liquor<br />
Febbre (fase viremica): 0,5 ml EB<br />
Identificazione escretori del virus: feci/ tampone rettale<br />
Al momento non è ancora possibile distinguere con la PCR<br />
fra virus della Peritonite Infettiva Felina (FIPV, Feline Infectious<br />
Peritonitis Virus) e Coronavirus Enterico Felino (FECV, Feline<br />
Enteric Coronavirus), che nell'organismo in determinate<br />
circostanze può mutare in FIPV.<br />
La rilevazione di Coronavirus felino (FCoV, Feline Coronavirus)<br />
nel puntato o nel liquor depone a favore della presenza di una<br />
FIP (Feline Infectious Peritonitis, peritonite infettiva felina),<br />
specialmente quando anche i sintomi clinici e i risultati di altri<br />
procedimenti diagnostici di laboratorio (sierologia, chimica<br />
clinica) indicano nella stessa direzione. Al contrario, la<br />
rilevazione qualitativa di FCoV nelle feci attesta unicamente la<br />
presenza di un'infezione da FCoV e non dà alcuna indicazione<br />
sulla presenza di una FIP. La rilevazione qualitativa serve a<br />
identificare possibili escretori del virus; in caso di risultato<br />
negativo tuttavia il test deve essere ripetuto, in quanto il<br />
rilascio del virus può avvenire con ritmo intermittente. La<br />
quantificazione dell'escrezione del virus nelle feci per mezzo<br />
della PCR (metodo in via di sviluppo) potrebbe fornire, in<br />
futuro, un prezioso mezzo diagnostico per l'identificazione<br />
di escretori "forti" all'interno di una popolazione felina, i quali<br />
rappresentano un pericolo per gli altri animali. L'infezione di<br />
monociti e di macrofagi costituisce un elemento importante<br />
della patogenesi della FIP. La rilevazione di FCoV nella frazione<br />
di monociti-macrofagi del sangue EDTA (Buffy Coat) va<br />
perciò considerata molto specifica per una FIP<br />
cfr. anche → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
FIV-progenoma (Virus<br />
dell'immunodeficienza<br />
felina) (DNA)<br />
Gastroenterite<br />
trasmissibile del suino<br />
Haemobartonella felis<br />
2 ml EB, midollo osseo PCR (1)<br />
Con il metodo "nested PCR" è possibile rilevare il DNA virale<br />
integrato nel genoma della cellula ospite, indicato come<br />
pro-genoma/provirus (o genoma provirale). La rilevazione di<br />
DNA provirale è altamente specifica e possibile in genere a<br />
partire dal 5° giorno p.i. La sensibilità del test dipende invece<br />
dal numero di linfociti infetti. Inoltre, a causa dell'alto tasso<br />
di mutazioni, è probabilmente impossibile individuare tutte le<br />
varianti di un ceppo FIV, o anche solo tutti i sottotipi meno<br />
frequenti in Europa (p.es. il sottotipo D). Pertanto un<br />
risultato negativo della rilevazione non esclude con sicurezza<br />
un'infezione, mentre un risultato positivo è in larga misura<br />
probante.Il metodo PCR può essere un'utile integrazione dei<br />
metodi sierologici, per controllare risultati incerti, sia positivi<br />
che negativi, ottenuti con test ELISA:<br />
- Negli animali infetti si hanno, nello stadio iniziale<br />
dell'infezione, risultati sierologici negativi, dal momento che<br />
gli anticorpi, pur essendo di norma rilevabili già a partire da<br />
2-4 settimane p.i., in alcuni animali si formano molto più<br />
tardi. È tuttavia possibile che a volte il titolo anticorpale resti<br />
anche nello stadio finale dell'infezione al di sotto della soglia<br />
di rilevabilità.<br />
- Nei gattini si deve tener conto dell'interferenza degli anticorpi<br />
materni (fino a 6 mesi dalla nascita): possono dar luogo a<br />
risultati sierologici positivi, che non implicano un'infezione<br />
dell'animale.<br />
cfr. anche → capitolo 13, Malattie infettive<br />
vedi → Coronavirus TGEV<br />
cfr. → Micoplasmi emotropi felini + Mycoplasma haemofelis +<br />
Candidatus M. haemominutum + Candidatus Mycoplasma<br />
turicensis<br />
242 243
15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare<br />
15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico) 15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Helicobacter spp.<br />
(DNA, rilevazione di<br />
più specie)<br />
Herpesvirus canino 1 -<br />
CHV 1 (DNA)<br />
feci, biopsia gastrica PCR (1)<br />
Sul significato patogeno di un'infezione da Helicobacter negli<br />
animali disponiamo al momento di risultati in parte contraddittori.<br />
Nel cane e nel gatto con gastrite, vomito cronico o enterite<br />
è possibile infatti isolare delle specie di Helicobacter dalla<br />
mucosa gastrica. Una tale rilevazione è d'altronde possibile<br />
anche in animali sani e ci sono buone ragioni per ritenere che<br />
il tasso di infezione nella popolazione dei cani e dei gatti si<br />
aggiri fra il 40 e il 100%.<br />
Una risultato positivo alla rilevazione del DNA di Helicobacter<br />
nei roditori (cavie da laboratorio) può essere differenziato<br />
ulteriormente distinguendo fra H. bilis, H. hepaticus e<br />
H. muridarium (richiesta di analisi da fare separatamente).<br />
cfr. anche → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Mortalità improvvisa fra i cuccioli: PCR (1)<br />
tessuto epatico, polmonare, renale e splenico<br />
Infezioni genitali: tampone vaginale<br />
Aborti: materiale abortivo<br />
Sintomi delle vie respiratorie: tampone nasale e faringeo<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Herpesvirus equino 1<br />
EHV-1 (DNA)<br />
Herpesvirus equino 4<br />
EHV-4 (DNA)<br />
Sintomi delle vie respiratorie: PCR (1)<br />
tampone nasale/faringeo/ secreto tracheale<br />
Malattia acuta/febbre: 1 ml S, HP, EP PCR (1)<br />
Congiuntivite: tampone congiuntivale<br />
Aborto: liquido amniotico, endometrio, feto<br />
Sintomi del sistema nervoso centrale: 0,5 ml liquor<br />
Nel caso delle infezioni da Herpesvirus la valutazione di risultati<br />
dei test sierologici è spesso particolarmente difficile per<br />
diversi motivi:<br />
1. A causa della persistenza virale propria degli Herpesvirus,<br />
dopo una prima infezione è sempre possibile che, in<br />
condizioni di stress, si abbia una riattivazione del virus e<br />
conseguente stimolazione della produzione di anticorpi.<br />
2. Dal momento che gli anticorpi del siero non portano ad<br />
un'immunità permanente, si possono avere delle reinfezioni<br />
anche con un titolo anticorpale elevato.<br />
3. Specialmente nelle forme respiratorie della malattia la<br />
produzione di anticorpi può essere insufficiente. In generale<br />
è l'immunità cellulare a svolgere il ruolo principale nella<br />
difesa immunitaria contro l'EHV, l'immunità umorale ha un<br />
ruolo subordinato. La diagnostica con metodo PCR ha il<br />
vantaggio di assicurare, grazie all'identificazione dell'agente<br />
patogeno direttamente sull'organo interessato, il nesso<br />
eziologico fra malattia acuta e infezione da Herpesvirus.<br />
Soprattutto in caso di aborto l'analisi del liquido amniotico<br />
e della mucosa uterina è il metodo di scelta. È possibile<br />
peraltro che i feti abortiti si rivelino negativi al virus anche<br />
in aborti dovuti a EHV (aborto dovuto a scarsa alimentazione<br />
del feto attraverso la placenta)!<br />
Un risultato positivo alla PCR sulle componenti cellulari del<br />
sangue non è una prova sufficiente di un coinvolgimento degli<br />
Herpesvirus nella malattia acuta, in quanto i virus possono<br />
persistere nei leucociti anche in seguito ad un'infezione<br />
precedente.<br />
La differenziazione tra EHV-1 ed EHV-4 è un procedimento di<br />
routine nel protocollo del test.<br />
244 245
15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare<br />
15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico) 15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Herpesvirus equino 2<br />
EHV-2 (DNA)<br />
Herpesvirus equino 5<br />
EHV-5 (DNA)<br />
Herpesvirus felino 1<br />
FHV 1 (DNA)<br />
Herpesvirus rettili - RHV<br />
(DNA)<br />
Influenza virale equina<br />
(RNA)<br />
Sintomi oculari: PCR (1)<br />
tampone corneale o congiuntivale<br />
Sintomi delle vie respiratorie:<br />
tampone nasale, secreto nasale o tracheale<br />
Anche in questo caso la PCR ha il vantaggio di identificare un<br />
nesso eziologico fra agente patogeno ed organo bersaglio.<br />
Tampone cfr. → EHV 2 PCR (1)<br />
La rilevazione specifica di EHV-5 con metodo PCR è possibile,<br />
la sua rilevanza clinica tuttavia non è ancora chiarita.<br />
Cheratocongiuntivite: real time-PCR (1)<br />
tampone dalla regione lesa della cornea/congiuntiva<br />
Rinotracheite: tampone nasale o faringeo<br />
Infezioni genitali: tampone vaginale<br />
Aborto: materiale abortivo<br />
Mentre gli animali con malattia acuta rilasciano grandi quantità<br />
di virus, l'escrezione dell'agente patogeno dagli animali con<br />
infezione cronica è modesta e intermittente. Grazie alla sua<br />
elevata sensibilità, la PCR offre un buon metodo di analisi per<br />
l'identificazione di questi escretori cronici del virus. Tuttavia,<br />
data la discontinuità dell'escrezione, in caso di risultato<br />
negativo è necessario ripetere il test.<br />
Tampone buccale in soluzione fisiologica PCR (3)<br />
La PCR permette la ricerca diretta dell'agente patogeno.<br />
cfr. anche → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Tampone nasale, lavaggio tracheale real time-PCR (1)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Leishmania spp.<br />
(DNA, rilevazione di più<br />
specie)<br />
Leptospira spp.<br />
(DNA, rilevazione di più<br />
specie)<br />
Particolarmente efficace è la PCR su puntato linfonodale e di<br />
midollo osseo. Uno dei vantaggi più notevoli della rilevazione<br />
dell'agente patogeno con metodo PCR consiste nella possibilità<br />
di identificare animali portatori sani, nei quali i titoli anticorpali<br />
spesso restano al di sotto della soglia di rilevabilità.La rilevazione<br />
dell'agente patogeno con metodo PCR su midollo osseo può<br />
anche essere impiegata a fini di controllo terapeutico.<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
La rilevazione dell'agente patogeno con metodo PCR viene<br />
effettuata su sangue nelle prime 2 settimane (eventualmente<br />
fino a due mesi) dopo l'infezione, ma a partire dalla seconda<br />
settimana p.i. si deve tuttavia privilegiare l'urina come materiale<br />
di analisi. Le Leptospire restano infatti rilevabili nell'urina per<br />
mesi, se non per anni, sebbene vengano rilasciate con ritmo<br />
intermittente. Rispetto ai metodi sierologici la PCR ha così il<br />
vantaggio di poter confermare un sospetto clinico già nelle<br />
primissime fasi dell'infezione, prima ancora della comparsa di<br />
anticorpi specifici (ca. 10 giorni p.i.). Permette inoltre di<br />
identificare escretori cronici, anche se vaccinati. Tuttavia, a<br />
causa del rilascio intermittente, in caso di risultato negativo è<br />
necessario ripetere il test.<br />
cfr. anche → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Attenzione La leptospirosi è una zoonosi.In Italia la leptospirosi è una malattia<br />
soggetta a obbligo di denuncia.<br />
Leucemia felina<br />
Lesioni cutanee: biopsia cutanea real time-PCR (1)<br />
Linfoadenopatia: puntato linfonodale<br />
Rinite: tampone nasale<br />
Inoltre: biopsia osteo-midollare, epatica, splenica<br />
2 ml EB, 5 ml U, liquor, umore acqueo real time-PCR (1)<br />
vedi → FeLV<br />
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15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare<br />
15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico) 15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Listeria monocytogenes<br />
(DNA)<br />
Attenzione In Italia la listeriosi è una malattia soggetta a obbligo di segnalazione.<br />
Micoplasmi emotropi<br />
canini<br />
Sintomi del sistema nervoso centrale: 0,5 ml liquor PCR (1)<br />
Aborto: materiale abortivo<br />
Setticemia: 1 ml EB<br />
Diarrea: feci<br />
Portatori cronici: feci<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
1 ml EB real time-PCR (1)<br />
Haemobartonella canis appartiene oggi al genere Mycoplasma<br />
sotto il nome di Mycoplasma haemocanis.<br />
Il gruppo dei micoplasmi emotropi canini comprende<br />
Mycoplasma haemocanis e Candidatus Mycoplasma<br />
haematoparvum. Si tratta di batteri Gram negativi epicellulari<br />
obbligati (capaci di sopravvivere solo su cellule vive).<br />
In genere nel cane l'infezione da Micoplasmi emotropi decorre<br />
in modo inapparente, a meno che l'animale non sia splenectomizzato<br />
o immunodepresso (p.es. in seguito a chemioterapia o<br />
trattamento immunosoppressivo con corticosteroidi). In questi<br />
casi l'infezione è in genere responsabile di anemia emolitica.<br />
Le zecche sono vettori di diversi tipi di patogeni: con il loro<br />
pasto possono trasmettere più di un agente patogeno. Di<br />
conseguenza anche una coinfezione, p.es. con Ehrlichia canis,<br />
può causare un'emoplasmosi clinicamente acuta in seguito a<br />
soppressione del sistema immunitario del cane.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Micoplasmi emotropi<br />
felini<br />
Mycoplasma felis<br />
(DNA)<br />
0,5 ml EB real time-PCR (1)<br />
Oggiogiorno sono conosciuti diversi agenti patogeni responsabili<br />
dell'anemia infettiva felina; questi, grazie alle nuove ricerce di<br />
biologia molecolare, sono da punto di vista tassonomico<br />
compresi nel gruppo dei Micoplasmi. Il "grande" micoplasma<br />
viene oggi definito Mycoplasma haemofelis, mentre quello<br />
"piccolo" Mycoplasma haemominutum. Entrambi venivano<br />
nominati, fino al 2001, Haemobartonella felis (da cui il nome<br />
"Emobartonellosi") o Eperythrozoon felis e classificati come<br />
Rickettsie, il precedente "isolato Ohio" corrisponde al<br />
Mycoplasma haemofelis, l'"isolato California" a Mycoplasma<br />
haemominutum, ora Candidatus Mycoplasma haemominutum.<br />
Nel 2005 è stato isolato un terzo agente eziologico, al quale<br />
è stato dato il nome Mycoplasma turicensis, ora Candidatus<br />
Mycoplasma turicensis. I tre patogeni vengono riuniti sotto la<br />
denominazione "Micoplasmi emotropi". Si tratta di batteri<br />
Gram negativi epicellulari obbligati (capaci di sopravvivere<br />
solo su cellule vive).<br />
In base alla patogenicità si differenziano:<br />
Elevata patogenicità: Mycoplasma haemofelis<br />
Moderata patogenicità: Candidatus Mycoplasma turicensis<br />
Bassa patogenicità: Candidatus Mycoplasma haemominutum<br />
Congiuntivite: tampone congiuntivale real time-PCR (1)<br />
Sintomi delle vie respiratorie:<br />
tampone nasale, tampone faringeo<br />
Infezione da Micoplasmi felini.<br />
Mycoplasma felis del gruppo dei Micoplasmi è associato a<br />
congiuntivite uni- o bilaterale, rinosinusite cronica, polmonite,<br />
pleurite e artrite. M. felis è raramente responsabile di patologie<br />
delle vie respiratorie superiori. L'infezione può regredire spontaneamente<br />
dopo 2-4 settimane. Non è ancora chiaro se i<br />
Micoplasmi siano causa primaria o secondaria dello sviluppo<br />
dei sintomi clinici sopra citati.<br />
248 249
15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare<br />
15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico) 15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Mycoplasma haemocanis<br />
(DNA)<br />
Mycoplasma haemofelis<br />
(DNA)<br />
Candidatus Mycoplasma<br />
haemominutum (DNA)<br />
Candidatus<br />
Mycoplasma<br />
haematoparvum (DNA)<br />
0,5 ml EB real time-PCR (1)<br />
M. haemocanis è altamente imparentato, se non addirittura<br />
identico, a M. haemofelis. Cani immunocompetenti possono<br />
essere cronicamente infetti, senza manifestare sintomi clinici.<br />
È stato tuttavia osservata un'anemia emolitica in cani<br />
splenectomizzati o immunodepressi, molto raramente anche<br />
in animali immunocompetenti.<br />
cfr. → Micoplasmi emotropi canini/felini<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
0,5 ml EB real time-PCR (1)<br />
cfr. → Micoplasmi emotropi canini/felini<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
0,5 ml EB real time-PCR (1)<br />
cfr. → Micoplasmi emotropi felini<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
0,5 ml EB real time-PCR (1)<br />
Candidatus Mycoplasma haematoparvum è altamente<br />
imparentato, se non addirittura identico, a Candidatus<br />
Mycoplasma haemominutum.<br />
cfr. → Micoplasmi emotropi canini/felini<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Candidatus<br />
Mycoplasma<br />
turicensis (DNA)<br />
Mycoplasma spp.<br />
(DNA, rilevazione di più<br />
specie)<br />
0,5 ml EB real time-PCR (1)<br />
cfr. → Micoplasmi emotropi felini<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
tampone (oculare, nasale, genitale) real time-PCR (1)<br />
secreto (oculare, nasale)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
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15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare<br />
15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico) 15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Neorickettsia risticii<br />
(DNA) (cavallo)<br />
Parvovirus FPV<br />
(Feline Parvovirus),<br />
CPV2 (Canine Parvovirus)<br />
(DNA)<br />
1 ml EB, feci real time-PCR (1)<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
feci, tampone rettale PCR (1)<br />
La rilevazione diretta del virus da feci o tampone rettale con<br />
metodo PCR è possibile nel cane e nel gatto. È molto importante<br />
precisare, al momento della richiesta di questo esame, se si<br />
tratta di un cane o di un gatto. Nel cane è di routine praticare<br />
una differenziazione fra ceppo vaccinale CPV 2 e ceppi selvatici<br />
CPV 2a e CPV 2b.Questo è di notevole interesse diagnostico,<br />
in quanto anche il virus vaccinale può venire rilasciato<br />
2-12 giorni dopo la vaccinazione. Il rilascio di virus di campo<br />
inizia invece 3-4 giorni p.i. e dura in genere 7-10 giorni. In<br />
alcuni casi questo periodo può essere più lungo. Un risultato<br />
negativo della PCR non esclude un'infezione.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
PBFD (DNA) Diarrea: tampone cloacale, feci PCR (1)<br />
Alterazioni del piumaggio: penne alterate<br />
Post mortem:<br />
reni, milza, fegato<br />
Forma cronica: 0,5 ml EB, penne<br />
L'agente responsabile della malattia del becco e delle penne<br />
degli psittacidi (PBFD, Psittacine Beak and Feather Disease)<br />
è un Circovirus che inizialmente si riproduce nel tessuto<br />
linfatico, nel tratto gastro-intestinale, nel fegato e in altri<br />
organi, tuttavia il suo organo bersaglio è l'epidermide.<br />
La forma acuta, che colpisce soprattutto uccelli che non<br />
hanno ancora abbandonato il nido, è caratterizzata da diarrea,<br />
talvolta da epatite e soprattutto da anomalie del piumaggio.<br />
Molti animali giovani superano la fase di malattia acuta,<br />
formano anticorpi e sviluppano un'infezione cronica.<br />
La forma cronica è caratterizzata principalmente dalla crescita,<br />
dopo la muta, di penne con deformazioni e da alterazioni al<br />
becco. Il fattore di maggior pericolo di introdurre il virus in un<br />
allevamento è costituito dagli animali con infezione latente o<br />
nella fase di incubazione. La PCR è il metodo di scelta per<br />
identificarli. Tuttavia, dal momento che un DNA virale inattivo<br />
rimane rilevabile nel sangue fino a tre mesi, un risultato<br />
positivo alla PCR non è sufficiente a provare la presenza di<br />
un'infezione acuta. Gli animali che hanno riportato un risultato<br />
positivo, ma che non presentano sintomi clinici, devono perciò<br />
essere isolati e sottoposti nuovamente al test dopo tre mesi.<br />
Se restano positivi anche la seconda volta, allora sono da<br />
considerarsi animali con infezione cronica, che costituiscono<br />
una fonte di infezione per altri uccelli.<br />
252 253
15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare<br />
15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico) 15.2 Rilevazione di agenti patogeni con metodo PCR (in ordine alfabetico)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Polyomavirus aviario<br />
(Virus della BFD)<br />
(DNA)<br />
RHV<br />
Diarrea: tampone cloacale, feci PCR (1)<br />
Alterazioni del piumaggio: penne alterate<br />
Post mortem:<br />
reni, milza, fegato<br />
Forma cronica: 0,5 ml EB, penne<br />
Una delle modalità più importanti di propagazione della malattia<br />
delle cocorite allo svezzamento (BFD, Budgerigar Fledgling<br />
Disease), malattia virale dovuta a un Polyomavirus, è, oltre al<br />
contagio verticale, anche la diffusione del virus per mezzo di<br />
animali con malattia asintomatica. Questi ultimi possono venire<br />
identificati rilevando il virus per mezzo di PCR su tamponi<br />
cloacali. Per identificare anche gli escretori intermittenti<br />
occorre tuttavia analizzare diversi campioni a distanza di tre<br />
mesi l'uno dall'altro. Se si osservano alterazioni del piumaggio,<br />
è possibile confermare la diagnosi clinica sospetta anche per<br />
mezzo di analisi PCR sulle penne alterate. Con uccelli giovani<br />
morti in seguito a forma iperacuta è possibile anche la<br />
rilevazione del virus da fegato, reni o milza.<br />
Rhodococcus equi (DNA) tampone/ lavaggio real time-PCR (1)<br />
tracheale, feci, tessuti<br />
La PCR, come ricerca diretta dell'agente patogeno, permette di<br />
- confermare il sospetto diagnostico<br />
- accorciare i tempi per la conferma del sospetto<br />
diagnostico-assicurare che la popolazione equina sia esente<br />
da R. equi<br />
- prevenire la diffusione dell'agente patogeno<br />
- minimizzare l'esposizione dell'uomo a questo batterio<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
vedi → Herpesvirus rettili<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Toxoplasma gondii<br />
(DNA)<br />
A causa dell'alta sieroprevalenza sia nel cane che nel gatto, la<br />
rilevazione di anticorpi nel siero è di relativa utilità per la diagnosi.<br />
Solo titoli elevati di IgM sono suggestivi della presenza di<br />
un'infezione acuta, che nel gatto di solito è accompagnata<br />
dall'escrezione di oocisti nelle feci. Dal momento che generalmente<br />
l'organismo non riesce a eliminare l'agente patogeno, la<br />
maggior parte degli animali infetti rimane sieropositivo (IgG) per<br />
tutta la vita e, a causa della continua esposizione all'antigene,<br />
spesso anche con titoli anticorpali alti. Questo rende inutile<br />
l'impiego dei controlli sul siero prelevati a distanza di tempo<br />
l'uno dall'altro per rilevare un aumento dei titoli per cercare di<br />
stabilire se la malattia è in atto.<br />
Si tenga conto del fatto che anche un risultato positivo della<br />
PCR non sempre è probante per un'infezione acuta con T. gondii.<br />
L'agente patogeno è stato infatti rilevato tanto nel liquor quanto<br />
nell'umore acqueo di animali clinicamente sani! La rilevazione<br />
di oocisti nelle feci di gatto con metodo PCR è problematica:<br />
infatti, a causa del robusto involucro delle oocisti, con i procedimenti<br />
chimici abituali di preparazione dei campioni di analisi<br />
l'estrazione di DNA toxoplasmico è praticamente impossibile.<br />
Per escludere per quanto possibile un'escrezione di oocisti, ad<br />
esempio in caso di gravidanza della proprietaria dell'animale,<br />
è necessario ricorrere a metodi classici come la sierologia o<br />
l'esame microscopico delle feci.<br />
cfr. anche → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Attenzione La toxoplasmosi è una zoonosi.<br />
Sintomi del sistema nervoso centrale: real time-PCR (1)<br />
0,5 ml liquor<br />
Aborti (cane/ piccoli ruminanti):<br />
tampone vaginale, placenta, feto (SNC)<br />
Sintomi respiratori: lavaggio bronchiale<br />
Sintomi oculari (soprattutto gatto): umore acqueo<br />
Febbre: 0,5 ml EB<br />
254 255
15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare<br />
15.3 Malattie ereditarie 15.3 Malattie ereditarie<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Tritrichomonas foetus Feci real time-PCR (1)<br />
Tritrichomonas foetus (sin.: Tritrichomonas suis) viene trasmesso<br />
durante la monta, raramente tramite il seme infetto e può avere<br />
un ruolo importante nell'allevamento estensivo dei bovini come<br />
causa di disturbi della fertilità e in alcuni casi di aborto. T. foetus<br />
non è strettamente specie-specifico: oltre a bovino e suino,<br />
anche il gatto fa parte degli animali sensibili al patogeno.<br />
Secondo Gookin et al. 2004 pare che la prevalenza di T. foetus<br />
nei gatti sia molto alta (34%).<br />
Nel gatto i Tritrichomonadi abitano il tratto digerente e possono<br />
provocare diarrea. T. foetus è stato rilevato anche in cani con<br />
diarrea (Gookin et al., 2005).<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Definizione generale di malattie ereditarie<br />
Le malattie ereditarie sono malattie dovute a mutazioni nel patrimonio genetico, che possono<br />
venire trasmesse dai genitori alla loro discendenza.<br />
n Nozioni genetiche di base<br />
Nel corso della riproduzione sessuale ogni discendente riceve un corredo cromosomico<br />
doppio, l'uno proveniente dalla madre e l'altro dal padre. Per questo motivo di un gene si hanno<br />
normalmente due esemplari, ovvero una coppia di alleli.<br />
- Se entrambi gli alleli presentano lo stesso carattere o la stessa anomalia, si parla di<br />
omozigosi per questo carattere o anomalia.<br />
- Se è solo uno dei due alleli a presentare il carattere o l'anomalia in questione, si parla<br />
di eterozigosi.<br />
È la forma dell'ereditarietà a determinare se e quando una determinata malattia genetica arrivi<br />
a manifestarsi fenotipicamente. Nel caso delle malattie ereditarie si parla di:<br />
- ereditarietà dominante quando è sufficiente l'anomalia su uno dei due alleli per portare ad<br />
una manifestazione clinica della malattia. È sufficiente, in altri termini, che o il padre o la<br />
madre trasmettano un gene mutato.<br />
- ereditarietà recessiva quando per avere una manifestazione clinica della malattia è<br />
necessario che entrambi gli alleli presentino la stessa anomalia. Questo significa che sia<br />
il padre sia la madre devono trasmettere un gene mutato. Se un animale possiede la<br />
corrispondente mutazione per una malattia ereditaria recessiva su un solo allele, non si<br />
ammalerà di quella patologia nel corso della sua vita. Tuttavia ne resterà portatore<br />
genetico e accoppiandosi con un altro portatore genetico della stessa malattia potrà<br />
generare una discendenza nella quale si manifesta la malattia in questione.<br />
- ereditarietà legata al cromosoma X quando il gene responsabile della malattia si trova sul<br />
cromosoma X: gli animali maschi vengono colpiti dalla malattia, mentre le femmine si limitano<br />
a trasmetterla o ne vengono a loro volta colpite quando il gene è presente in forma<br />
omozigotica.<br />
- ereditarietà autosomica quando il gene responsabile della malattia non si trova su un<br />
cromosoma sessuale, vale a dire se la malattia può insorgere allo stesso modo in animali<br />
maschi e femmine.<br />
256 257
15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare<br />
15.3 Malattie ereditarie 15.3 Malattie ereditarie<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n La diagnostica biologico-molecolare delle malattie ereditarie<br />
La diagnostica biologico-molecolare delle malattie ereditarie ha il vantaggio di poter scoprire<br />
anomalie genetiche (delezione, inserzione e sostituzione di basi) fin dalla primissima età, vale<br />
a dire prima ancora dell'insorgere di una malattia clinica, in modo da poter identificare per<br />
tempo, escludendoli dalla riproduzione, i portatori genetici, ovvero animali che possono<br />
trasmettere l'anomalia senza ammalarsi a loro volta. Nella diagnostica biologico-molecolare si<br />
amplifica con metodo PCR quel segmento del gene sul quale si può trovare la mutazione<br />
specifica responsabile della malattia in questione. Questo segmento di DNA viene poi analizzato,<br />
per vedere se esistono differenze specifiche rispetto alla sequenza genica di animali<br />
geneticamente sani.<br />
I risultati possono essere:<br />
1. L'animale è geneticamente sano in relazione alla malattia ereditaria analizzata. Nessuno<br />
dei due alleli presenta l'anomalia in questione. L'animale non può né ammalarsi né<br />
trasmettere alla progenie la predisposizione della malattia ereditaria.<br />
2. L'animale è eterozigote per l'anomalia in questione, vale a dire ha ricevuto un gene mutato<br />
dal padre o dalla madre. In caso di ereditarietà autosomica dominante si avrà una<br />
manifestazione fenotipica dell'anomalia genetica e l'animale si ammalerà. In caso di<br />
ereditarietà autosomica recessiva non si avrà la malattia clinica. In entrambi i casi gli<br />
animali trasmettono la mutazione genetica ai loro discendenti con una probabilità del 50%.<br />
3. L'animale è omozigote per l'anomalia in questione, vale a dire entrambi gli alleli presentano<br />
la mutazione. L'animale si ammalerà della malattia ereditaria e trasmetterà la mutazione a<br />
tutti i suoi discendenti.<br />
Aciduria L-2<br />
idrossiglutarica<br />
Test genetico possibile per Staffordshire Bull Terrier<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
1 ml EB, tampone della mucosa buccale PCR (3)<br />
La L-2-HGA (L-2-Hydroxyglutaracidurie) è una patologia<br />
neurodegenerativa progressiva con prevalenti manifestazioni<br />
neurologiche, caratterizzata da un aumento dei livelli di acido<br />
L-2-idrossiglutarico nelle urine, nel plasma e nel liquido<br />
cerebrospinale.<br />
I primi sintomi clinici si manifestano in genere dai 6 mesi<br />
all'anno di età (in alcuni casi anche sucessivamente).<br />
L-2-HGA è responsabile di molteplici difetti neurologici come<br />
ritardo psicomotorio (soprattutto nel primo anno di vita<br />
dell'animale), attacchi epilettici ed atassia. Gli animali colpiti<br />
mostrano un'andatura barcollante, tremori, rigidità muscolare<br />
sotto sforzo o agitazione e alterazioni del comportamento.<br />
Attenzione Si prega di indicare la razza sul modulo di richiesta specifico!<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
BLAD 1 ml EB PCR (3)<br />
La sindrome da deficit di adesione leucocitaria dei bovini<br />
(BLAD, Bovine Leukocyte Adhesion Deficiency) provoca<br />
un'immunodeficienza con esito letale nei vitelli e nei bovini<br />
giovani.<br />
Diffusione Bovini di razza Holstein-Frisian<br />
Sintomatologia - infezioni recidivanti del tratto respiratorio e gastrointestinale<br />
e del naso-faringe<br />
- basso peso alla nascita<br />
- ritardi nella guarigione delle ferite, necrosi, cancrena<br />
Laboratorio leucocitosi<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
Carenza di<br />
fosfofruttochinasi<br />
La fosfofruttochinasi (PFK, Phosphofructokinase) è un enzima<br />
che contribuisce al rifornimento energetico di eritrociti e mielociti.<br />
La carenza di fosfofruttochinasi muscolare è una malattia<br />
metabolica ereditaria, chiamata anche glicogenosi di tipo VII o<br />
sindrome di Tarui-Layzer ed è nota anche nell'uomo. Una<br />
mutazione puntiforme è responsabile di una ridotta produzione<br />
dell'enzima, che provoca a sua volta una miopatia metabolica<br />
ed emolisi cronica (iperbilirubinemia cronica, aumento del<br />
numero dei reticolociti con ematocrito normale). Questo porta<br />
in condizioni di stress a gravi crisi emolitiche (urina rosso-bruna<br />
dovuta ad emoglobinuria e iperbilirubinuria, ittero, anemia grave,<br />
apatia) e miopatie da stress (incapacità di muoversi, crampi).<br />
I cani colpiti dalla malattia presentano solo il 6- 22 % della<br />
normale attività eritrocitaria dell'enzima PFK e solo l'1- 4 %<br />
della sua normale attività muscolare. Non si dispone di una<br />
terapia. Se opportunamente assistiti e in condizioni di riposo,<br />
gli animali colpiti possono avere una vita media normale. Il test<br />
di genetica molecolare fornisce una diagnosi affidabile e<br />
permette di identificare portatori sani inapparenti della mutazione<br />
genica. Per evitare la nascita di animali ammalati, oltre che per<br />
ridurre la diffusione di questa malattia nelle razze in questione,<br />
occorre evitare che i portatori si accoppino fra di loro.<br />
Test genetico possibile per Springer Spaniel inglese, Cocker Spaniel americano e loro<br />
meticci<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
1 ml EB, tampone della mucosa orale PCR (3)<br />
258 259
15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare<br />
15.3 Malattie ereditarie 15.3 Malattie ereditarie<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Carenza di<br />
piruvatochinasi<br />
La carenza di piruvatochinasi (PK, Pyruvate kinase) è stata<br />
descritta in dettaglio nel cane Basenji e nel West Highland<br />
White Terrier, ed interessa peraltro anche altre razze canine<br />
(Cairn Terrier, Beagle, Barbone toy), il gatto e l'uomo. Una<br />
mutazione specifica nel gene che codifica per la piruvatochinasi<br />
impedisce la formazione di un enzima funzionale, che ha un<br />
ruolo importante nel metabolismo degli eritrociti. La carenza<br />
di quest'enzima ha per conseguenza la distruzione e decomposizione<br />
degli eritrociti. Gli animali colpiti sviluppano un'anemia<br />
emolitica cronica rigenerativa, mielofibrosi progressiva e<br />
osteosclerosi. L'attesa di vita dei soggetti affetti è notevolmente<br />
ridotta. La malattia si manifesta per lo più fra il 4° e il 12°<br />
mese d'età.<br />
Test genetico possibile per Cane: Basenji, Cairn Terrier, West Highland White Terrier<br />
Gatto: Abissino, Somalo<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
Attenzione Si prega di indicare la razza sul modulo di richiesta specifico!<br />
Cecità notturna nel<br />
Briard<br />
Diffusione Briard (Pastore della Brie)<br />
La causa della malattia è una delezione nel gene RPE65, che<br />
codifica per una proteina nello strato pigmentato della retina.<br />
Gli animali colpiti presentano sintomi di cecità notturna fin<br />
dalla più tenera età, mentre la facoltà visiva durante il giorno<br />
si riduce progressivamente nel corso degli anni.<br />
Sintomatologia cecità notturna, facoltà visiva ridotta durante il giorno<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
1 ml EB, tampone della mucosa orale PCR (3)<br />
1 ml EB, tampone della mucosa orale PCR (3)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Cistinuria del cane<br />
Terranova<br />
(predisposizione genetica)<br />
Test genetico possibile per Terranova, Landseer<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
Diffusione Setter irlandese<br />
Una mutazione del gene SCL3A1 nel cane Terranova provoca<br />
disturbi nel riassorbimento della cistina a livello dei tubuli<br />
renali. L'aumento dell'escrezione di cistina può dar luogo alla<br />
formazione di calcoli di cistina. Il test del DNA, che rileva la<br />
mutazione responsabile della malattia, da un lato permette di<br />
diagnosticare per tempo questo disturbo del riassorbimento in<br />
animali omozigoti, avviando così misure profilattiche per evitare<br />
la formazione dei calcoli, dall'altro permette di identificare<br />
portatori sani dell'allele della cistinuria. Questo ha un'importanza<br />
decisiva per l'allevamento, infatti i portatori eterozigoti non<br />
devono necessariamente essere esclusi dalla riproduzione,<br />
ma solo fatti accoppiare con animali geneticamente sani.<br />
CLAD 1 ml EB, tampone della mucosa orale PCR (1)<br />
La sindrome da deficit di adesione leucocitaria del cane<br />
(CLAD, Canine Leukocyte Adhesion Deficiency) è un'immunodeficienza<br />
con esito generalmente letale nel Setter irlandese.<br />
E' causata dalla mutazione di un gene che codifica una<br />
proteina dell'adesione leucocitaria, che porta a disturbi della<br />
funzione leucocitaria e quindi alla malattia.<br />
Sintomatologia - predisposizione a contrarre infezioni (onfaloflebite, febbre,<br />
gengivite, osteomielite, osteopatia soprattutto nella regione<br />
metafisaria e mascellare)<br />
- ingrossamento dei linfonodi periferici<br />
Laboratorio neutrofilia marcata<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
1 ml EB, tampone della mucosa buccale PCR (1)<br />
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15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare<br />
15.3 Malattie ereditarie 15.3 Malattie ereditarie<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
"Collie Eye Anomaly"<br />
(CEA)<br />
L'anomalia dell'occhio del Collie (CEA, Collie Eye Anomaly) o<br />
ipoplasia coroidale (CH, Choroidale Hypoplasie) è una patologia<br />
dell'occhio su base genetica causata da un'anormale sviluppo<br />
della coroide (membrana vascolare). Queste alterazioni della<br />
retina possono manifestarsi con diversi gradi di severità,<br />
cominciando con una lieve lesione della retina con disturbi<br />
della pigmentazione (forma lieve: ipoplasia corioretinica: CRH,<br />
chorioretinal hypoplasia), procedendo con "fori" più o meno<br />
grandi della retina a livello del disco ottico (coloboma), fino<br />
ad una completo distacco retinico ed emorragia intraoculare<br />
(forma grave), che possono portare alla cecità completa del<br />
cane colpito.<br />
In caso di CEA il grado di severità della malattia non varia nel<br />
corso della vita, un cane colpito da questa patologia non<br />
diventerà quindi cieco da anziano.<br />
Test genetico possibile per Border Collie, Collie a pelo lungo e a pelo corto, Whippet<br />
a pelo lungo, Lancashire Heeler, Pastore delle Shetland e<br />
Australian Sheperd<br />
Ereditarietà: autosomica recessiva<br />
Attenzione Si prega di indicare la razza sul modulo di richiesta specifico!<br />
Colorazione sauro<br />
del mantello<br />
Test genetico possibile per Cavallo (tutte le razze)<br />
Una mutazione nel gene MC1R (Melanocyte Stimulating<br />
Hormone Receptor, recettore dell'ormone stimolante i<br />
melanociti) è la causa probabile della colore sauro del cavallo.<br />
Sintomatologia mancata pigmentazione (marrone/ nero)<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
1 ml EB, tampone della mucosa orale PCR (3)<br />
1 ml EB PCR (3)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Fucosidosi 1 ml EB PCR (3)<br />
Test genetico possibile per Springer Spaniel inglese<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
Gangliosidosi del cane,<br />
GM1<br />
La fucosidosi è una malattia ereditaria autosomica recessiva<br />
del cane (soprattutto dello Springer Spaniel inglese) con esito<br />
letale. Negli animali colpiti si ha un accumulo di glicolipidi<br />
contenenti fucosio, glicopeptidi e oligosaccaridi nelle cellule di<br />
diversi organi, in quanto l'alfa-L-fucosidasi non è in grado di<br />
scinderli. Questi depositi sono localizzati nei linfonodi, nel<br />
pancreas, nel fegato, nei reni, nei polmoni e nel midollo osseo,<br />
ma soprattutto nel cervello e nel tessuto nervoso. Questo<br />
provoca gravi sintomi neurologici, fra cui incoordinazione dei<br />
movimenti, disturbi della memoria, disorientamento mentale,<br />
diversi gradi di depressione, disturbi della funzione visiva,<br />
sordità apparente e disturbi di deglutizione. I cani presentano<br />
spesso un mantello secco e ruvido e sono per lo più incapaci<br />
di riprodursi. Inoltre presentano perdita di peso e vomitano<br />
quello che ingeriscono.<br />
Appena nati gli animali non mostrano sintomi clinici, ma si<br />
manifestano fra i 4 e i 24 mesi di età (fino a 4 anni). La malattia<br />
ha un decorso cronico progressivo con esito letale. A causa<br />
dei problemi che peggiorano progressivamente, i cani colpiti<br />
vengono in genere soppressi.<br />
L'esame di biologia molecolare fornisce una diagnosi affidabile,<br />
soprattutto nei cuccioli, e permette di identificare portatori sani<br />
della mutazione genica clinicamente inapparenti. I portatori non<br />
devono accoppiarsi fra di loro, in modo da evitare l'eventuale<br />
nascita di animali malati e da ridurre la diffusione di questa<br />
malattia nella razza in questione.<br />
1 ml EB, tampone della mucosa orale PCR (3)<br />
Test genetico possibile per Beagle, Springer Spaniel inglese, Cane da acqua<br />
portoghese, Alaskan Husky<br />
262 263
15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare<br />
15.3 Malattie ereditarie 15.3 Malattie ereditarie<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Gangliosidosi del gatto,<br />
GM1 e GM2<br />
Le gangliosidosi sono malattie lisosomiali ereditarie autosomiche<br />
recessive. Provocano un accumulo di gangliosidi<br />
nei lisosomi dovuto alla mancanza degli enzimi necessari alla<br />
scomposizione dei gangliosidi stessi. Le gangliosidosi possono<br />
colpire diverse razze di cani e di gatti, come pure l'uomo.<br />
A seconda dei gangliosidi immagazzinati, vale a dire del<br />
particolare enzima mancante, le gangliosidosi vengono<br />
suddivise in due gruppi principali:<br />
Nelle gangliosidosi GM1 si ha una carenza di ß-galattosidasi,<br />
nella gangliosidosi GM2 è invece l'enzima ß-exosaminidasi a<br />
mancare. Entrambe le forme danno luogo a gravi malattie<br />
progressive del sistema nervoso centrale, caratterizzate in<br />
particolare da tremore e paralisi. Nella gangliosidosi GM2<br />
(gatto Burmese e Korat) i sintomi clinici compaiono un po'<br />
prima e peggiorano più velocemente che nella gangliosidosi<br />
GM1 (gatto Siamese e Korat). In entrambe le forme il quadro<br />
della malattia si manifesta nei primi mesi di vita.<br />
Nel gatto Korat si riscontrano tanto la gangliosidosi GM1 quanto<br />
la gangliosidosi GM2, ma è soprattutto la predisposizione per<br />
quest'ultima ad essere ampiamente diffusa nella popolazione<br />
dei gatti Korat e costituisce un grave problema per gli allevatori.<br />
Tutti gli animali andrebbero sottoposti ad analisi prima di essere<br />
inseriti in un allevamento, per stabilire se sono portatori sani<br />
di questa malattia. Solo animali non portatori devono essere<br />
ammessi alla riproduzione.<br />
Test genetico possibile con gatto Korat, Siamese, Burmese<br />
Sintomatologia - disturbi del sistema nervoso centrale<br />
- tremore<br />
- manifestazioni di paralisi<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
1 ml EB, tampone della mucosa orale PCR (3)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
HCM (Cardiomiopatia<br />
ipertrofica), mutazioni<br />
A31P, A74T, R820W<br />
La cardiomiopatia ipertrofica (HCM, hypertrophic cardiomyopathy)<br />
è la patologia cardiaca più frequentemente diagnosticata<br />
nel gatto. In seguito ad un'ipertrofia concentrica si possono<br />
avere i seguenti sintomi: disturbi del ritmo, che possono portare<br />
anche a morte cardiaca improvvisa, insufficienza cardiaca<br />
accompagnata da tachicardia, dispnea e congestione, come<br />
pure formazione di trombi. Questi ultimi vengono trascinati fino<br />
alla biforcazione dell'aorta nelle arterie degli arti posteriori e<br />
del bacino e possono provocare disturbi circolatori e<br />
conseguenti manifestazioni paralitiche negli arti posteriori.<br />
Nel gatto Maine Coon, che assieme al Persiano è particolarmente<br />
spesso colpito dall'HCM, si è riusciti nel 2005 a<br />
identificare nel gene MYBPC (cardiac myosin binding protein)<br />
la mutazione A31P come responsabile della forma primaria<br />
dell'HCM. Fino ad ora (aggiornamento di maggio 2008), a<br />
causa di pubblicazioni discrepanti, non è stato ancora<br />
possibile valutare con sicurezza l'ereditarietà. Dal momento<br />
che l'ereditarietà pare sia autosomica dominante, anche<br />
l'animale con un solo allele coinvolto potrebbe sviluppare la<br />
malattia. Nei gatti omozigoti la gravità della malattia è maggiore.<br />
Al contrario, per quanto riguarda la mutazione A74T nel gatto<br />
Maine Coon, secondo le ultime conoscenze (aggiornamento di<br />
maggio 2008) non esiste nessuna sicura correlazione causale<br />
con l'HCM.<br />
La mutazione R820W è stata fino ad ora dimostrata solo nel<br />
gatto Ragdoll e pare si tratti di una patologia autosomica<br />
recessiva.<br />
Non è tuttavia conosciuto quante mutazioni e su quali geni<br />
siano coinvolte nella manifestazione dell'HCM (nell'uomo sono<br />
stati fino ad ora descritte oltre 100 mutazioni!).<br />
Test genetico A31P e A74T Gatto Maine Coon, di razza o meticcio, nel quale si presume<br />
possibile per che con l'accoppiamento sia stata trasmessa la mutazione.<br />
Test genetico R820W Gatto Ragdoll, di razza o meticcio, nel quale si presume che<br />
possibile per con l'accoppiamento sia stata trasmessa la mutazione.<br />
Ereditarietà A31P autosomica dominante (?)<br />
Ereditarietà R320W autosomica recessiva<br />
1 ml EB, tampone della mucosa orale PCR (1, 3)<br />
Attenzione Si prega di indicare la razza sul modulo di richiesta specifico<br />
264 265
15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare<br />
15.3 Malattie ereditarie 15.3 Malattie ereditarie<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
HYPP 1 ml EB PCR (1)<br />
La paralisi periodica ipercaliemica (HYPP, hyperkalemic periodic<br />
paralysis) è una malattia muscolare del cavallo, dovuta<br />
probabilmente ad un disturbo del trasporto elettrolitico nella<br />
membrana delle cellule muscolari. La mutazione responsabile<br />
della malattia è localizzata sul gene che codifica per i canali del<br />
sodio nelle cellule muscolari. Dà luogo ad attacchi (indotti dal<br />
calcio) di paralisi dei muscoli scheletrici.<br />
Diffusione Quarterhorse americano e suoi incroci con altre razze<br />
Sintomatologia - aumento dei rumori respiratori, debolezza muscolare,<br />
tremore muscolare, collasso<br />
- durante l'addestramento: laringospasmo, ipossia,<br />
ipercapnia, aritmie<br />
Ereditarietà autosomica codominante (la manifestazione della malattia è<br />
più grave in un animale omozigote che in uno eterozigote)<br />
Ipersensibilità verso l'ivermectina<br />
Ipertermia maligna canina<br />
(predisposizione genetica)<br />
vedi → MDR1-disturbo<br />
Ereditarietà autosomica dominante<br />
1 ml EB, tampone della mucosa orale PCR (3)<br />
La sindrome detta ipertermia maligna è uno stato che interviene<br />
durante o dopo un'anestesia generale, caratterizzato da un<br />
improvviso anormale aumento della temperatura corporea fino a<br />
oltre 43° C e con un tasso di mortalità che può arrivare al 70%. La<br />
gravità dei sintomi è variabile. Presupposti di questa complicazione<br />
anestetica spesso letale sono la predisposizione genetica e<br />
l'applicazione di rilassanti muscolari depolarizzanti o di potenti<br />
anestetici inalatori (alotano, enfluorano, isofluorano, sevofluorano,<br />
metossifluorano, etere dietilico), detti anche sostanze "scatenanti".<br />
Affaticamento fisico, surriscaldamento, stati di anossia, di paura<br />
o di eccitazione psichica sono fattori che possono accelerare la<br />
comparsa dell'ipertermia maligna o renderla più grave.Tanto i<br />
portatori omozigoti quanto quelli eterozigoti possono venire<br />
colpiti da ipertermia maligna.<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Ipertermia maligna suina<br />
(predisposizione genetica)<br />
Test genetico possibile con tutte le razze suine<br />
Leucodistrofia a cellule<br />
globose<br />
La sindrome da ipertermia maligna del suino è causata da una<br />
mutazione nel gene che codifica per il recettore della rianodina<br />
nei muscoli scheletrici. Colpisce soprattutto razze suine con<br />
elevato sviluppo muscolare e ridotta componente di grassi. In<br />
condizioni di stress, o in caso di anestesia inalatoria, l'anomalia<br />
genetica provoca un aumento della liberazione del calcio dal<br />
reticolo sarcoplasmatico dei mielociti. Il calcio liberato in<br />
eccesso dà luogo a contratture muscolari, con conseguente<br />
aumento della glicolisi anaerobica, acidosi lattica e<br />
ipertermia.Soprattutto per gli allevatori è interessante sapere<br />
che il test di genetica molecolare permette di identificare tanto<br />
gli animali sani quanto i portatori di uno o due alleli patogeni.<br />
Non si dimentichi peraltro che l'ipertermia maligna del suino<br />
è una malattia poligenetica.<br />
La leucodistrofia a cellule globose (malattia di Krabbe) può<br />
colpire diverse razze di cani e di gatti, come l'uomo. Si tratta di<br />
una malattia lisosomiale ereditaria, nella quale in seguito alla<br />
mancanza di un enzima lisosomiale chiamato galattocerebrosidasi-<br />
ß-galattosidasi, si assiste ad un accumulo di cerebrosidi<br />
nel sistema nervoso centrale, che ha per conseguenza un<br />
demielinizzazione della sostanza bianca dello stesso.<br />
Nel West Highland White Terrier e nel Cairn Terrier la malattia<br />
presenta un'ereditarietà autosomica recessiva. Nei cani colpiti i<br />
primi sintomi compaiono generalmente nei primi 2-6 mesi di<br />
vita. Si osservano atassia, paresi degli arti posteriori, tremori<br />
(testa), anomalie del comportamento, diminuzione dei riflessi<br />
spinali e atrofia muscolare.<br />
Test genetico possibile con West Highland White Terrier, Cairn Terrier<br />
Sintomatologia disturbi del sistema nervoso centrale, in particolare atassia/<br />
paresi del piede, tremori del capo<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
1 ml EB PCR (3)<br />
1 ml EB, tampone della mucosa orale PCR (1)<br />
266 267
15 Esami di biologia molecolare 15 Esami di biologia molecolare<br />
15.3 Malattie ereditarie 15.3 Malattie ereditarie<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Malattia da accumulo<br />
di glicogeno di tipo IV<br />
Test genetico possibile per Gatto Norvegese<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
Malattia da accumulo<br />
di rame<br />
Diffusione Bedlington Terrier<br />
La malattia da accumulo di glicogeno di tipo IV (GSD IV,<br />
Glycogen Storage Disease type IV) è una delle tante forme<br />
presenti nell'eterogeneo gruppo delle malattie da metabolismo<br />
del glicogeno, denominate anche "glicogenosi".<br />
Nel caso della GSD IV si ha una carenza espressiva dell'enzima<br />
ramificante "Glycogen Branching Enzyms" (a-1,4-glucan-6glucosiltrasferasi),<br />
che risulta nell'accumulo in diversi organi di<br />
glicogeno anormale, presentante lunghe catene non ramificate.<br />
I segni clinici causati da questa mutazione sono caratterizzati<br />
da ipotonia muscolare e cirrosi.<br />
Nel gatto norvegese si conoscono due forme del GSD IV:<br />
nella prima forma i gattini muoiono già alla nascita o poco dopo.<br />
Nella seconda forma lo sviluppo del gatto si svolge normalmente<br />
nei primi 5-7 mesi, per poi degenerare e i gatti mostrano<br />
brividi febbrili, febbre alta, spasmi muscolari e atrofia muscolare<br />
progressiva. Dopo di che si presentano fenomeni di paralisi.<br />
Gli animali colpiti in genere muoiono all'età di 7-14 mesi.<br />
La malattia da accumulo di rame consiste in un disturbo<br />
nell'escrezione di rame che porta ad un suo deposito nel fegato<br />
con conseguente danneggiamento delle cellule epatiche. La<br />
rilevazione di questa malattia ereditaria avviene per mezzo di<br />
un marcatore microsatellite del DNA strettamente correlato alla<br />
mutazione genica responsabile della malattia.<br />
Sintomatologia gravi danni epatici, ipercinesia, a volte anemia emolitica<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
1 ml EB, tampone della mucosa orale PCR (3)<br />
1 ml EB, tampone della mucosa orale PCR (3)<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Malattia di<br />
von Willebrand<br />
Il fattore di von Willebrand (vWF, von Willebrand Factor) è<br />
una proteina che, oltre a mediare l'adesione delle piastrine al<br />
subendotelio di un vaso sanguigno leso, ha la funzione di<br />
trasportare il fattore VIII del sistema di coagulazione plasmatico,<br />
impedendone la scissione proteolitica prima del tempo.<br />
Quando il vWF funzionale è presente in concentrazione ridotta,<br />
o addirittura assente, si hanno disturbi della coagulazione di<br />
gravità variabile. Sintomi caratteristici sono sanguinamenti<br />
delle mucose e sanguinamento intenso dopo cambio della<br />
dentizione, calore o traumi. La malattia di von-Willebrand<br />
(vWD, von Willebrand Disease) si divide in tre tipi.<br />
vWD di tipo 1 Decorso piuttosto lieve nella maggior parte dei casi.<br />
L'ereditarietà è autosomica dominante a penetranza incompleta,<br />
vale a dire gli animali eterozigoti possiedono una concentrazione<br />
media di vWF e possono restare clinicamente inapparenti,<br />
mentre animali omozigoti presentano bassi livelli plasmatici di<br />
vWF e mostrano di conseguenza sintomi clinici più evidenti.<br />
Ereditarietà autosomica dominante a penetranza incompleta<br />
Test genetico possibile per Dobermann, Barbone, Manchester Terrier, Bovaro del Bernese,<br />
Pinscher tedesco, Welsh Corgie<br />
vWD di tipo 2 Decorso da lieve a grave con concentrazioni variabili di vWF.<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
Test genetico possibile per Drahthaar tedesco (cane da ferma tedesco a pelo duro)<br />
vWD di tipo 3 È la forma più grave della malattia. L'ereditarietà è autosomi<br />
ca recessiva. Negli animali omozigoti il vWF non è affatto<br />
rilevabile nel sangue e questi soffrono di gravi disturbi della<br />
coagulazione. Gli animali eterozigoti possiedono invece livelli<br />
plasmatici di VWF ridotti e sono portatori della malattia,<br />
senza però presentare generalmente alcun sintomo.<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
1 ml EB, tampone della mucosa orale PCR (3)<br />
Test genetico possibile per Terrier scozzese, Sheltie (cane da Pastore Shetland)<br />
Attenzione Si prega di indicare la razza sul modulo di richiesta specifico!<br />
268 269
15 Esami di biologia molecolare<br />
15.3 Malattie ereditarie<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
MDR1 - disturbo<br />
(resistenza farmacologia<br />
multipla/ ipersensibilità<br />
all'ivermectina)<br />
(predisposizione genetica)<br />
Negli anni '80 furono riportate le prime osservazioni nel<br />
Pastore scozzese (Collie) sugli effetti neurotossici da<br />
somministrazione di ivermectina. Scienziati tedeschi ed<br />
americani hanno identificato la causa di questa ipersensibilità<br />
in un'anomalia genetica nella formazione del trasportatore<br />
codificato dal gene MDR1 (Multiple Drug Resistance, gene<br />
della resistenza multipla ai farmaci). Si tratta di una mutazione<br />
nel gene MDR1. Il trasportatore codificato da questo gene<br />
costituisce una parte della barriera funzionale emato-encefalica<br />
e di regola impedisce il passaggio di sostanze tossiche nel<br />
tessuto nervoso. In seguito all'anomalia genetica nella<br />
formazione dell'MDR1, tale funzione protettiva viene meno<br />
con la conseguenza che elevate concentrazioni di sostanze<br />
tossiche possono penetrare nel tessuto nervoso. I cani colpiti<br />
presentano incoordinazione, tremore, vertigini, midriasi,<br />
salivazione, con possibile esito letale. Per quanto riguarda<br />
ivermectina e loperamide sono già stati osservati gravi effetti<br />
neurotossici dovuti al loro impiego terapeutico nei cani<br />
colpiti.Diversi altri farmaci possono provocare effetti collaterali<br />
neurotossici nei cani in questione, p.es. digossina, vincristina,<br />
vinblastina, doxorubicina, ciclosporina, grepafloxacina,<br />
sparfloxacina, ondansetrone, chinidina, ebastina e<br />
desametasone.<br />
Vengono colpiti solo animali omozigoti. Se in un allevamento si<br />
vuole impedire la nascita di portatori omozigoti dell'anomalia<br />
del gene MDR1, si deve fare attenzione che i due genitori non<br />
siano entrambi portatori del carattere.<br />
Diffusione (prevalenza) - Collie (~ 76 %)<br />
- Pastore delle Shetland (~ 58 %)<br />
- Pastore australiano (~ 30 %), Border Collie (~ 1 %)<br />
Negli USA l'anomalia è stata<br />
rilevata anche nelle seguenti English Shepherd, Whippet a pelo lungo, McNab, Old English<br />
razze canine: Sheepdog (Bobtail) e Silken Windhound<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
Attenzione Si prega di indicare la razza sul modulo di richiesta specifico!<br />
270<br />
1 ml EB, tampone della mucosa orale PCR (3)<br />
15.3 Malattie ereditarie<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Miopatia congenita del<br />
Labrador Retriever<br />
Test genetico possibile per Labrador Retriever<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
Sinonimi: Miopatia centronucleare (CNM, Centronuclear<br />
Myopathy), Miopatia ereditaria del Labrador Retriever (HMLR,<br />
Hereditary Myopathy of Labrador Retrievers), Miopatia del<br />
Labrador Retriever (LRM, Labrador Retriever Myopathie). La<br />
miopatia ereditaria è una debolezza muscolare generalizzata<br />
trasmessa in modo autosomico recessivo. La malattia delle<br />
cellule muscolari è tipicamente caratterizzata da una debolezza<br />
bilaterale delle estremità toraciche prossimali.<br />
I sintomi osservati nel Labrador Retriever sono: la testa tenuta<br />
bassa, la schiena arcuata, l'andatura scoordinata. Sotto sforzo si<br />
manifestano rapidamente fasi acute di debolezza fino al crollo,<br />
manifestazioni che svaniscono con il riposo. I primi sintomi si<br />
presentano già dalle 6 settimane ai 7 mesi d'età.<br />
Attenzione Si prega di indicare la razza sul modulo di richiesta specifico!<br />
Miotonia congenita<br />
dello Schnauzer nano<br />
La miotonia congenita è stata descritta, oltre che nello Schnauzer<br />
nano (nel quale è stata studiata a fondo), anche in altre<br />
razze canine (Chow-Chow, Staffordshire Bull Terrier, Alano), in<br />
altri animali domestici (gatto, cavallo, pecora, capra, topo) e<br />
nell'uomo. In seguito ad una mutazione nel gene che codifica<br />
per il canale ionico del cloro nelle membrane dei muscoli<br />
scheletrici, è ostacolato il passaggio degli impulsi elettrici nel<br />
muscolo, dando luogo ad anomalie dell'attività muscolare<br />
(ritardo del rilassamento muscolare). Gli animali colpiti<br />
mostrano sintomi clinici dopo poche settimane dalla nascita.<br />
La malattia non è accompagnata da dolori o convulsioni.<br />
Sintomatologia - ipertrofia muscolare, andatura rigida, andatura a salti di<br />
coniglio ("bunny hopping")<br />
- ingrossamento della lingua, disturbi della deglutizione,<br />
salivazione eccessiva<br />
- respirazione rumorosa, alterazioni del latrato<br />
- solo nello Schnauzer nano: accorciamento della mandibola,<br />
mancanza dei denti<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
15 Esami di biologia molecolare<br />
1 ml EB, tampone della mucosa orale PCR (3)<br />
1 ml EB, tampone della mucosa orale PCR (3)<br />
271
15 Esami di biologia molecolare<br />
15.3 Malattie ereditarie<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Mucopolisaccaridosi<br />
di tipo VII<br />
Test genetico possibile per Pastore tedesco<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
La mucopolisaccaridosi di tipo VII, già ampiamente nota per<br />
quanto riguarda uomo, gatto e topo, colpisce diverse razze<br />
canine e i loro meticci. È dovuta a una carenza dell'enzima<br />
ß-D-glucuronidasi, che contribuisce alla normale funzione<br />
cellulare, con conseguente accumulo lisosomiale progressivo di<br />
glu-cosamminoglicani in determinati tessuti. I sintomi sono assai<br />
diversificati e simili a quelli dell'uomo: comprendono deformazioni<br />
ossee, riduzione del peso corporeo, ritardo mentale, patologie<br />
oculari, patologie cardiache ed epatosplenomegalia.<br />
Gli animali colpiti spesso non sono più in grado, già all'età di<br />
sei mesi, di stare in piedi o di camminare; la malattia porta ad<br />
una morte prematura. L'analisi di biologia molecolare fornisce<br />
non solo una diagnosi affidabile degli animali colpiti, ma anche<br />
l'identificazione di portatori sani di questa malattia ereditaria.<br />
Per evitare la nascita di animali ammalati, oltre che per ridurre<br />
la diffusione di questa malattia nelle razze in questione,<br />
occorre evitare che i portatori si accoppino fra di loro.<br />
OLWS 1 ml EB PCR (3)<br />
La sindrome OLWS (Overo Lethal White Syndrome) è dovuta ad<br />
una mutazione 'mis-sense' (senza senso) nel gene per il recettore<br />
B dell'endotelina. Questo recettore è coinvolto nello sviluppo di<br />
determinate cellule del tubo neurale, che si trasformano poi in<br />
gangli intestinali. Se due portatori eterozigoti di quest'anomalia<br />
genetica si accoppiano fra loro è possibile che nascano dei puledri<br />
bianchi omozigoti, che nel giro di pochi giorni muoiono in seguito<br />
ad OLWS, un'anomalia dell'inner-vazione del tratto gastrointestinale<br />
(aganglionosi intestinale congenita). Tuttavia possono<br />
anche nascere dei puledri bianchi delle razze in questione<br />
geneticamente sani. Nei casi sospetti è sempre consigliabile un<br />
test di genetica molecolare.<br />
Diffusione American Paint Horse, Appaloosa, Pinto, Quarter Horse,<br />
Purosangue inglese, Miniatura americani, Mustang, Mezzo<br />
sangue Arabo<br />
Sintomatologia I puledri nascono completamente bianchi e sviluppano<br />
un'occlusione intestinale<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
272<br />
1 ml EB, tampone della mucosa orale PCR (3)<br />
15.3 Malattie ereditarie<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
PKD<br />
(Polycystic Kidney Disease)<br />
La malattia del rene policistico (PKD, polycystic kidney disease)<br />
è stata scoperta nel 1967 nel gatto Persiano. Si tratta di una<br />
malattia ereditaria diffusa in tutto il mondo e che colpisce circa<br />
il 38% dei gatti Persiani. La malattia progredisce lentamente<br />
nell'animale interessato e porta ad un'insufficienza renale<br />
terminale. I sintomi corrispondono in genere a quelli di<br />
un'insufficienza renale cronica di altra genesi e di conseguenza<br />
possono venire trattati solo con misure di supporto.<br />
Il test di genetica molecolare è un metodo migliore rispetto<br />
all'analisi ecografica e permette una diagnosi affidabile fin<br />
dalla primissima età, potendo identificare portatori sani della<br />
mutazione genica clinicamente inapparenti. Per evitare la<br />
nascita di animali ammalati, oltre che per ridurre, o addirittura<br />
debellare, la diffusione di questa malattia nelle razze in questione,<br />
occorre evitare che i portatori si accoppino fra di loro. Al<br />
momento si sta studiando la mutazione 307C>A nel gene<br />
felino PKD1 (GenBank Acc. Nr. AY612847)<br />
Test genetico possibile con Persiano, Siamese e Himalayano, Ragdoll, Europeo a pelo<br />
corto, American Shorthair, British Shorthair, Exotic Shorthair,<br />
Selkirk Rex e Scottish Fold<br />
Ereditarietà autosomica dominante<br />
15 Esami di biologia molecolare<br />
1 ml EB, tampone della mucosa orale PCR (1)<br />
Attentione Si prega di indicare la razza sul modulo di richiesta specifico<br />
273
15 Esami di biologia molecolare<br />
15.3 Malattie ereditarie<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
PRA<br />
(Atrofia retinica progressiva)<br />
L'atrofia retinica progressiva (PRA, Progressive Retinal Atrophy),<br />
che colpisce varie razze di cani e di gatti, è dovuta ad una<br />
degenerazione, ovvero ad una displasia dei fotorecettori della<br />
retina. Ci sono diverse forme di PRA che sono simili fra di loro<br />
per sintomatologia clinica (all'inizio cecità notturna, quindi riduzione<br />
della facoltà visiva anche di giorno e progressiva perdita<br />
della vista) e quadro oftalmologico (iperriflessia del tappeto<br />
lucido, assottigliamento dei vasi retinici, papilla pallida, focolai di<br />
depigmentazione nella parte non tappetale del fondo). Si distinguono<br />
soprattutto per la diversa età in cui insorgono i sintomi<br />
clinici. Sono causate da diverse mutazioni geniche,<br />
finora note solo in minima parte.<br />
cord1-PRA La cord1-PRA (distrofia coni-bastoncelli di tipo 1, Cone-rod<br />
dystrophy 1) è una patologia della retina dell'occhio. Costituisce<br />
una forma particolare della PRA, che si differenzia quindi sia<br />
per il decorso clinico che per la genetica dalle altre forme di<br />
PRA: mentre nella maggior parte delle altre malattie ereditarie<br />
si va incontro ad un'iniziale alterazione dei bastoncelli, seguita<br />
da un'alterazione dei coni della retina, la cord1-PRA è<br />
caratterizzata da un precoce danneggiamento dei coni della<br />
retina.<br />
I primi sintomi clinici della cord1-PRA possono comparire già<br />
all'età di 6 mesi, tuttavia alcuni cani colpiti da questa patologia<br />
genetica possono non presentare alcuna sintomatologia clinica<br />
evidente neppure in età avanzata.<br />
Test genetico possibile per Bassotto tedesco nano a pelo lungo e a pelo corto, Springer<br />
Spaniel inglese<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
prcd-PRA La malattia genetica prcd-PRA porta ad una degenerazione e<br />
alla morte delle cellule retiniche. I bastoncelli, uno dei due tipi<br />
di fotorecettori, specializzati nella ricezione dei segnali in<br />
situazioni di penombra, perdono per primi la loro normale<br />
funzionalità; ne consegue la comparsa della cecità notturna.<br />
Sucessivamente i coni, il secondo tipo di fotorecettori, perde<br />
via via la propria funzionalità nelle normali condizioni di<br />
luminosità ambientale. I cani colpiti diventano infine completamente<br />
ciechi.Generalmente i primi sintomi clinici si osservano<br />
già in giovane età, ma l'inizio della malattia può variare nelle<br />
diverse razze canine.<br />
274<br />
1 ml EB, tampone della mucosa orale PCR (3)<br />
15.3 Malattie ereditarie<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Test genetico possibile per Australian Cattle dog, American Cocker Spaniel, American<br />
Eskimo, Australian Shepherd, Australian Stumpy Tail Cattle<br />
dog, Barbone nano, Barbone toy, Bovaro del Entlebuch, Cane<br />
da acqua portoghese, Chesapeake Bay Retriever, Chinese<br />
Crested, English Cocker Spaniel, Golden Retriever, Kuvasz,<br />
Labrador Retriever, Lapphund finlandese, Lapphund svedese,<br />
Lapponian Herder, Mini Australian Sheperd, Nova Scotia<br />
Dock Tolling Retriever, Pumi, Silky Terrier, Wäller.<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
rcd1-PRA<br />
PRA nel Setter irlandese Nel Setter irlandese si è riusciti a identificare la mutazione<br />
genica responsabile di una forma iniziale della PRA, la<br />
displasia coni-bastoncelli di tipo 1 (rcd-1, rod-cone dysplasia<br />
type 1). L'ereditarietà è autosomica recessiva, vale a dire si<br />
ammalano solo animali con due alleli del gene mutato.L'rcd-1<br />
è rilevabile con esame oftalmologico a partire dal 4° mese di<br />
vita. Con l'analisi di biologia molecolare è invece possibile<br />
rilevare a qualsiasi età se l'animale è geneticamente sano, se<br />
è un portatore eterozigote o se è omozigote per l'anomalia in<br />
questione (e se quindi verrà colpito dalla malattia).<br />
Test genetico possibile per Setter irlandese<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
rcd2-PRA<br />
PRA nel Collie La displasia coni-bastoncelli di tipo 2 (rcd-2, rod-cone dysplasia<br />
type 2) è responsabile nel Collie di una forma di degenerazione<br />
retinica. Una displasia dei coni e dei bastoncelli porta ad una<br />
precoce cecità notturna, in genere evidente già all'età di 6<br />
settimane. Nella maggior parte dei casi il cane colpito perde<br />
completamente la vista entro l'anno di vita. È possibile visualizzare<br />
le alterazioni retiniche a partire dal 6° mese di vita, il test genetico<br />
può essere eseguito invece a qualsiasi età. La patologia è di<br />
tipo autosomico recessivo: per sviluppare la sintomatologia<br />
entrambi gli alleli devono essere mutati. Un portatore non<br />
svilupperà la malattia, ma trasmetterà il gene alterato alla<br />
progenie con un 50% di probabilità.<br />
Test genetico possibile per Collie<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
15 Esami di biologia molecolare<br />
275
15 Esami di biologia molecolare<br />
15.3 Malattie ereditarie<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
rcd3-PRA<br />
PRA nel Cardigan Welsh Corgie La mutazione genica responsabile della PRA nel Cardigan<br />
Welsh Corgi è la displasia coni-bastoncelli di tipo 3 (rcd-3).<br />
L'ereditarietà è autosomica recessiva, vale a dire si ammalano<br />
solo animali con due alleli del gene mutato.L'rcd-3 è rilevabile<br />
con esame oftalmologico a partire dalla sesta settimana di<br />
vita. Con l'analisi di biologia molecolare è invece possibile<br />
rilevare a qualsiasi età se l'animale è geneticamente sano, se<br />
è un portatore eterozigote o se è omozigote per l'anomalia in<br />
questione (e quindi se verrà colpito dalla malattia).<br />
Test genetico possibile con Welsh Corgie<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
rdAc-PRA<br />
Test genetico possibile con gatto Somalo e Abissino<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
L'atrofia retinica progressiva del gatto Abissino e Somalo<br />
(rdAc) è anch'essa una patologia della retina che progressivamente<br />
porta a cecità: inizialmente sono i bastoncelli a perdere<br />
la loro normale funzionalità, sucessivamente vengono coinvolti<br />
anche i coni retinici. I sintomi clinici compaiono in genere<br />
all'età di 1,5-2 anni. Nella fase finale della malattia, nella maggior<br />
parte dei casi all'età di 3-5 anni, i fotorecettori sono completamente<br />
danneggiati e il gatto diventa completamente cieco.<br />
Attenzione Si prega di indicare la razza sul modulo di richiesta specifico!<br />
276<br />
15.3 Malattie ereditarie<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
SCID nel cane<br />
Jack Russell Terrier<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
Diffusione Arabo<br />
L' immunodeficienza severa combinata (SCID, Severe<br />
Combined Immunodeficiency) è una malattia genetica che<br />
comprende una grande varietà di quadri clinici. Oltre che nel<br />
Jack Russel Terrier è stata descritta in diverse razze canine,<br />
nel cavallo (cfr. qui sotto), nel topo e nell'uomo. È dovuta ad<br />
una mutazione puntiforme, responsabile di una disfunzione nei<br />
linfociti B e linfociti T, che dà luogo a sua volta ad estrema<br />
linfopenia, agammaglobulinemia, displasia timica e aplasia linfoide<br />
periferica. I cani colpiti muoiono nei primissimi mesi di<br />
vita. Soltanto i cani che portano due alleli di questa mutazione<br />
nel loro genoma sviluppano la malattia. Il test genetico permette<br />
non solo di individuare cuccioli malati ma anche - cosa<br />
importante per l'inserimento in un allevamento - di separare<br />
chiaramente i portatori clinici inapparenti di SCID dagli altri<br />
animali. I portatori non devono necessariamente venire esclusi<br />
dall'allevamento, ma si deve impedire che si accoppino con<br />
animali portatori.<br />
SCID nel cavallo arabo 1 ml EB PCR (3)<br />
L'immunodeficienza severa combinata (SCID, severe combined<br />
immunodeficiency) dei puledri arabi è causata probabilmente<br />
dall'anomalia di una cellula staminale linfoide, che provoca un<br />
disturbo nella maturazione tanto dei linfociti B quanto dei linfociti<br />
T, dando luogo a linfopenia marcata.I puledri in questione<br />
manifestano la malattia all'età di un mese circa e, a causa<br />
della loro difesa immunitaria insufficiente, muoiono nei primi<br />
cinque mesi di vita per infezioni da germi opportunisti. Questa<br />
malattia<br />
ereditaria è dovuta ad una delezione nel gene che codifica la<br />
proteinachinasi DNA-dipendente. Soltanto puledri che contengono<br />
due alleli di questa mutazione nel loro genoma sviluppano la<br />
malattia. Il test genetico permette non solo di individuare puledri<br />
malati ma anche - cosa importante per l'inserimento in un allevamento<br />
- di separare chiaramente i portatori clinici inapparenti<br />
di SCID dagli altri animali.<br />
Sintomatologia Predisposizione a contrarre infezioni<br />
Ereditarietà autosomica recessiva<br />
15 Esami di biologia molecolare<br />
1 ml EB, tampone della mucosa orale PCR (3)<br />
277
15 Esami di biologia molecolare<br />
15.3 Malattie ereditarie<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
X-SCID 1 ml EB, tampone della mucosa orale PCR (3)<br />
Diffusione Welsh Corgi, Basset Hound<br />
La immunodeficienza severa combinata legata al cromosoma<br />
X (X-SCID, X-linked Severe Combined Immune Deficiency) nel<br />
cane è causata da un'anomalia nella catena y del recettore<br />
dell'interleuchina-2, la quale compromette nettamente la difesa<br />
immunitaria cellulare ed umorale. Ad essere colpiti dalla malattia<br />
sono solamente i cani maschi, le femmine sono invece<br />
soltanto portatrici del carattere. I cani colpiti dalla malattia,<br />
con il venire meno della protezione degli anticorpi materni, iniziano<br />
ad avere infezioni ricorrenti e croniche con germi opportunisti<br />
che, nella maggior parte dei casi, portano alla morte fra<br />
il terzo e il quarto mese di vita.<br />
Sintomatologia - disturbi dello sviluppo, displasia timica<br />
- predisposizione a contrarre infezioni, sviluppo difettoso<br />
dei linfonodi periferici<br />
Laboratorio linfopenia, bassi livelli di IgG e IgA, livello di IgM variabile<br />
Ereditarietà legata al cromosoma x<br />
278<br />
15.3 Malattie ereditarie<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Scrapie<br />
(predisposizione genetica)<br />
15 Esami di biologia molecolare<br />
1 ml EB PCR (1)<br />
La scrapie è una malattia afebbrile, cronica, progressiva e<br />
degenerativa del sistema nervoso centrale nelle pecore, più<br />
raramente nelle capre e nei bovini. Viene provocata dalla<br />
formazione di una glicoproteina endogena sulla superficie dei<br />
neuroni, che si piega in modo errato diventando così non più<br />
scomponibile. Questo dà luogo alla formazione di aggregati<br />
amiloidi che si accumulano nel tessuto, provocando in tal<br />
modo disturbi del sistema nervoso centrale. Nelle pecore la<br />
malattia viene trasmessa orizzontalmente e verticalmente.<br />
Decisivo per la disposizione di una pecora a contrarre la<br />
scrapie è il gene che codifica la proteina prionica (PrP, prion<br />
protein). Per mezzo del test di genetica molecolare di questo<br />
gene è possibile determinare il rischio per l'animale esaminato<br />
di contrarre la scrapie.Infatti, a seconda della specifica posizione<br />
di determinati amminoacidi nella proteina prionica, varia la<br />
predisposizione di una pecora a contrarre la malattia. In particolare<br />
sono gli amminoacidi in tre posizioni della proteina<br />
prionica a giocare un ruolo determinante nella disposizione<br />
(o resistenza) verso la scrapie.<br />
A seconda della posizione si possono avere qui i seguenti<br />
amminoacidi: alanina (A), istidina (H), glutammina (Q),<br />
arginina (R) o valina (V).<br />
Nel test genetico vengono analizzate tutte le varianti delle<br />
tre porzioni di gene corrispondenti che codificano questi<br />
amminoacidi (codoni 136, 154 e 171). La combinazione degli<br />
alleli dà origine a 15 genotipi, i quali in Gran Bretagna, ai fini<br />
del piano nazionale di selezione iniziato nel 1998, sono stati<br />
classificati in 5 categorie di rischio (vedi tabella sotto). La<br />
stessa classificazione è stata adottata dall'Unione Europea per<br />
elaborare i risultati delle analisi genetiche condotte da tutti<br />
gli Stati membri in base al Reg. 999/2001/CE e sucessive<br />
modifiche.<br />
279
15 Esami di biologia molecolare<br />
15.4 Determinazione del sesso negli uccelli<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Categoria Genotipo<br />
Classificazione dei genotipi secondo il National Scrapie Plan<br />
(NSP) britannico:<br />
NSP5 VRQ/VRQ, ARQ/VRQ, ARH/VRQ, VRQ/AHQ<br />
Molto suscettibile alla Scrapie<br />
NSP4 ARR/VRQ<br />
Suscettibile alla Scrapie<br />
NSP3 AHQ/AHQ, AHQ/ARH, AHQ/ARQ, ARH/ARH, ARH/ARQ,<br />
ARQ/ARQ<br />
Poco resistente alla Scrapie<br />
NSP2 ARR/AHQ, ARR/ARH, ARR/ARQ<br />
Resistente alla Scrapie<br />
NSP1 ARR/ARR<br />
Molto resistente alla Scrapie<br />
Metodo del test Sequenziazione diretta del DNA. È considerato il metodo più<br />
affidabile, in grado di riconoscere con sicurezza tutte le<br />
mutazioni note e anche quelle nuove.<br />
Test genetico possibile con tutte le razze ovine<br />
280<br />
15.5 Test genetico di paternità<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Nozioni generali<br />
Per la determinazione del sesso negli uccelli si ricava DNA dalla polpa della penna, dal sangue<br />
EDTA o dal guscio (membrana) dell'uovo. Si amplifica quindi una regione specifica del DNA<br />
con metodo PCR e si rileva nella sequenza genica dei cromosomi sessuali il polimorfismo<br />
specifico del sesso con due metodi, in parte distinti, di biologia molecolare. Si può così determinare<br />
il sesso in parecchie centinaia di specie aviarie (una lista delle specie è disponibile su<br />
richiesta nel nostro laboratorio). Per quanto riguarda gli uccelli corridori, una determinazione<br />
del sesso con questo metodo è possibile per il casuario, ma non per emù, struzzo, nandù e kiwi.<br />
Determinazione del sesso<br />
negli uccelli<br />
EB, penne, guscio (membrana dell'uovo) PCR (1)<br />
EB 2-3 gocce sono già sufficienti.<br />
15 Esami di biologia molecolare<br />
Penne Spedire una grossa penna o più penne piccole con calamo<br />
intatto. Le penne in crescita contengono molto più DNA delle<br />
penne già formate e sono perciò particolarmente adatte alla<br />
determinazione del sesso. Si possono tuttavia impiegare anche<br />
penne già formate o cadute da poco. L'appartenenza della penna<br />
ad un determinato individuo deve essere assicurata in modo<br />
univoco e si deve escludere ogni possibile contaminazione con<br />
materiale genetico estraneo (p.es. polvere della voliera, sabbia<br />
della gabbia). Se le penne fossero insanguinate, si prega di<br />
inviarle in una provetta sterile, eventualmente accorciandone<br />
l'estremità superiore. In caso di penne asciutte è possibile<br />
inviarle in un sacchetto di plastica ermeticamente chiuso.<br />
Guscio dell'uovo È possibile isolare il DNA dalla membrana dell'uovo, il guscio<br />
deve essere perciò il più possibile intatto. Ancora più indicata è<br />
una goccia di sangue ombelicale prelevata dal guscio con un<br />
tampone sterile. Si presti particolare attenzione all'attribuzione<br />
del guscio a ciascun rispettivo individuo.<br />
Attenzione - Il materiale di analisi va protetto da ogni contaminazione<br />
con polpa o sangue estraneo, o qualsiasi altro materiale<br />
contenente DNA, per evitare risultati dubbi o erronei.<br />
- Il materiale di analisi (sangue, polpa) può venire conservato<br />
a temperatura di frigorifero per parecchi giorni.<br />
- Se asciutte, le penne possono venire conservate a temperatura<br />
ambiente per più settimane.<br />
- I campioni di analisi vanno contrassegnati indicando la<br />
specie esatta (se possibile, con nome scientifico), il numero<br />
dell'anello di identificazione e la data del prelievo.<br />
Potete richiederci l'apposito modulo di richiesta o scaricarlo<br />
direttamente da www.idexx.it.<br />
281
15 Esami di biologia molecolare<br />
15.5 Test genetico di paternità<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Nozioni generali<br />
Un test genetico di paternità ha la funzione di chiarire se i genitori presunti di un animale sono<br />
i suoi genitori biologici. Il test di paternità con metodi di biologia molecolare viene effettuato<br />
ricorrendo all'analisi dei microsatelliti.<br />
Principio del test<br />
Il patrimonio genetico contiene un gran numero di segmenti di DNA, detti microsatelliti,<br />
composti da porzioni di DNA che si ripetono più volte. Il numero di tali ripetizioni, vale a dire<br />
la lunghezza del microsatellite, varia da individuo a individuo. Si ritiene che il genoma umano<br />
contenga circa 100.000 di tali loci genici microsatellitari. In questo modo ogni individuo<br />
possiede un proprio genoma inconfondibile, che non è comune a nessun altro individuo (ad<br />
eccezione dei gemelli monovulari).<br />
Un individuo eredita 50% del suo patrimonio genetico dalla madre e 50% dal padre. Questo<br />
significa che tutte le variazioni del genoma, come p.es. quelle contenute nelle sequenze microsatellitari<br />
ad alta variabilità, se non provengono dalla madre, devono essere state ereditate dal<br />
padre. Se nel patrimonio genetico di un individuo con madre nota si rilevano, per mezzo<br />
dell'analisi dei microsatelliti, almeno due sequenze che non compaiono né nel genoma della<br />
madre né in quello del presunto padre, allora si può escludere la paternità con assoluta sicurezza.<br />
Confrontando più di un locus genico microsatellitare la sicurezza della rilevazione aumenta. Per<br />
questo motivo si analizzano nel cavallo 17 microsatelliti, nel gatto 10 e nel cane 9, secondo<br />
le indicazioni dell'ISAG (International Society for Animal Genetics).<br />
Test di paternità 2 ml EB PCR (3)<br />
282<br />
Per il test di paternità ci occorrono un campione dell'individuo<br />
discendente e uno di ciascun genitore presunto. Si faccia<br />
attenzione a contrassegnare chiaramente i campioni di analisi.<br />
Esempio: in caso di madre nota e di due animali da prendere in<br />
considerazione come padri presunti, siete pregati di inviarci<br />
materiale di analisi tratto da:<br />
1. figlio in esame<br />
2. madre<br />
3. padre presunto A<br />
4. padre presunto B<br />
Potete richiederci l'apposito modulo di richiesta o scaricarlo<br />
direttamente da www.idexx.it.<br />
15.5 Test genetico di paternità<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
DNA-Fingerprinting-<br />
Identificazione genetica<br />
Test possibile con cavallo, cane, gatto<br />
15 Esami di biologia molecolare<br />
0,5 ml EB PCR (3)<br />
La "impronta digitale genetica" (DNA-Fingerprinting) è l'unica<br />
prova inalterabile e non soggetta a contraffazioni dell'identità di<br />
un individuo, molto più affidabile dell'identificazione del microchip<br />
innestato o del tatuaggio. Il test sfrutta l'elevata variabilità<br />
individuale del materiale genetico e permette un'identificazione<br />
sopra ogni dubbio anche dopo la morte del soggetto.I risultati<br />
della "impronta digitale genetica" vengono salvati su supporto<br />
elettronico nei nostri laboratori e possono essere forniti su<br />
richiesta in ogni momento (in caso di perdita o furto di un<br />
animale, danni a oggetti causati da animali ecc.). Il proprietario<br />
riceve un certificato contenente il profilo del DNA del suo<br />
animale. Ogni individuo possiede il suo genoma inconfondibile<br />
(ad eccezione dei gemelli monovulari), così, sulla scorta del<br />
profilo del DNA di due campioni di materiale inviati, è possibile<br />
affermare senz'ombra di dubbio se essi appartengano o no allo<br />
stesso animale (test di "Identificazione genetica"). Il test di<br />
identificazione genetica è il metodo di scelta per questioni di<br />
natura forense (danni a cose, furto di animali ecc.).<br />
Analisi di sequenza PCR (1)<br />
Per analisi di sequenza del DNA nella biologia molecolare e nella<br />
bioinformatica si intende un procedimento automatizzato e computerizzato<br />
di determinazione di porzioni caratteristiche, in particolare<br />
di geni, in un filamento di DNA. Oggetto dell'analisi sono<br />
le informazioni ottenute per mezzo della sequenziazione del DNA<br />
sulla successione e sulla posizione delle coppie di basi.<br />
Attraverso ricerche di omologia con le informazioni raccolte<br />
nelle banche dati internazionali di sequenze è possibile fare<br />
quindi delle asserzioni p.es. sul tipo di organismo dal quale<br />
sono stati isolati gli acidi nucleici o su anomalie (mutazioni)<br />
nella sequenza di acidi nucleici rispetto ad una sequenza<br />
standard.<br />
Questo metodo viene impiegato nello studio di molte malattie<br />
ereditarie, ma può essere anche utilizzato in casi particolari per<br />
caratterizzare e differenziare più esattamente prodotti della PCR<br />
ottenuti con procedimenti di analisi estesi a più specie. Tale<br />
differenziazione secondo la specie può essere effettuata solo<br />
previo accordo con il laboratorio.<br />
283
16 Microbiologia<br />
16.1 Esami batteriologici<br />
16.1.1 Costi e durata degli esami<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Quadro generale dei costi e della durata degli esami batteriologici<br />
Gli esami batteriologici prevedono un impiego di tempo e di materiale variabile a seconda della<br />
crescita batterica e del numero di differenziazioni praticate:<br />
1. coltura<br />
+ 2. eventuali differenziazioni (solo per rilevazione di batteri patogeni)<br />
+ 3. eventuale autobiogramma (eseguito automaticamente, solo su<br />
batteri patogeni)<br />
= Costo totale dell'esame<br />
Per i clienti italiani è stato definito un prezzo medio fisso, indipendente dal numero di germi<br />
patogeni rilevati e conseguenti tipizzazione ad antibiogramma!<br />
1. 1. Coltura batteriologica<br />
Coltura per:<br />
* La durata degli esami colturali batteriologici dipende dal tipo di germi da rilevare e dalla loro<br />
velocità di crescita. La maggior parte degli agenti patogeni per gli animali viene individuata<br />
all'interno degli intervalli di tempo indicati. In caso di particolari richieste i tempi di coltura<br />
necessari possono essere più lunghi (p.es. 7 giorni per la Nocardia).<br />
** Esportazione Canada: 14 giorni.<br />
Messa<br />
in coltura<br />
Batteriologia, specie aerobie (1) lunedì - sabato 2-3 gg.<br />
Durata* Compreso nel prezzo<br />
Tampone auricolare (1) lunedì - sabato 2-3 gg. coltura micologica (Malassezia)<br />
Tampone cervicale fattrice (1) lunedì - sabato 2-3 gg. coltura micologia, determinazione<br />
del numero di germi<br />
Tayorella equigenitalis (CEM)** (1) lunedì - sabato 7 gg.<br />
Campioni latte bovino (1) lunedì - sabato 2-3 gg. coltura micologica<br />
Campioni urina (1) lunedì - sabato 1-2 gg. rilevazione di inibitori, determinazione<br />
del numero di germi<br />
Batteriologia, specie anaerobie (1) lunedì - sabato 3-4 gg.<br />
Emocoltura, coltivazione (1)<br />
aerobia e anaerobia<br />
Patogeni intestinali da (1)<br />
campioni di feci<br />
lunedì - sabato 10 gg.<br />
lunedì - sabato 2-4 gg.<br />
Salmonelle (1) lunedì - sabato 2-3 gg.<br />
Rilevazione di Clostridi (1)<br />
nelle feci (quantitativa)<br />
lunedì - venerdì 2-3 gg.<br />
Micobatteri (3) lunedì - venerdì 8 sett.<br />
284<br />
16.1.2 Esami batteriologici generali<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Esame colturale, aerobia Tampone, liquidi organici, parti di tessuto ecc. Esame colturale (1)<br />
La coltura aerobica permette la rilevazione della stragrande<br />
maggioranza delle specie di agenti patogeni.<br />
Fasi dell'esame - Produzione di un preparato con colorazione di Gram e<br />
valutazione microscopica della presenza di batteri, funghi e<br />
cellule somatiche (in liquor, puntato)<br />
Casi particolari con<br />
16 Microbiologia<br />
- Messa in coltura del campione su terreno selettivo a<br />
seconda del tipo e delle richieste del materiale di analisi<br />
- Arricchimento dei batteri in brodo di arricchimento per la<br />
coltivazione di germi eventualmente già danneggiati o in<br />
caso di modesto contenuto batterico del tampone<br />
- Incubazione aerobica delle colture per almeno 48 ore (se<br />
necessario, tempi di incubazione più lunghi; in caso di<br />
campioni di urina un'incubazione di 24 ore è di regola<br />
sufficiente)<br />
- Valutazione quotidiana delle colture e ulteriore differenziazione<br />
dei batteri in caso di rilevazione di agenti patogeni o di<br />
patogeni facoltativi<br />
- tampone auricolare (1) L'esame dei tamponi auricolari comprende, oltre alla coltura<br />
aerobica per la rilevazione di batteri (vedi sopra), anche la<br />
preparazione di una coltura di lieviti per la rilevazione di<br />
Malassezie.<br />
- tampone cervicale, fattrice (1) L'esame dei tamponi cervicali nella fattrice comprende, oltre<br />
alla coltura aerobica per la rilevazione di batteri (vedi sopra),<br />
anche una diagnostica micologica ed una determinazione del<br />
numero di germi.<br />
Attenzione L'esame per la rilevazione di Tayorella equigenitalis (CEM;<br />
metrite contagiosa equina) deve essere richiesto separatamente.<br />
Il campione va inviato con mezzo di trasporto speciale e deve<br />
pervenire al laboratorio entro 48 ore dal momento del prelievo.<br />
- campioni di latte, bovini (1) L'esame comprende una coltura batteriologica aerobica, una<br />
coltura micologica, differenziazione dei germi (batteri) e<br />
antibiogramma a prezzo forfettario.<br />
- campioni urina (1) Nell'esame batteriologico dell'urina si indicano e si valutano la<br />
specie e il numero dei germi. Si effettua inoltre una rilevazione<br />
di inibitori che fornisce informazioni sull'escrezione di sostanze<br />
antibatteriche assieme all'urina.<br />
285
16 Microbiologia<br />
16.1.2 Esami batteriologici generali<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Esame colturale,<br />
anaerobia<br />
Una rilevazione di specie anaerobie in aggiunta alla coltura<br />
aerobica è raccomandabile nei seguenti materiali: materiale da<br />
ascesso, tamponi da ferita (ferite da morso!), liquidi organici<br />
(puntati, liquido sinoviale, liquor ecc.), tamponi di organi interni<br />
e di membrane sierose, paterecci.<br />
Fasi dell'esame - Messa in coltura del campione su terreno di arricchimento<br />
speciale<br />
- Arricchimento dei batteri in brodo nutritivo<br />
- Incubazione aerobica delle colture per almeno 72 ore<br />
(se necessario, tempi di incubazione più lunghi)<br />
- Valutazione delle colture e ulteriore differenziazione dei<br />
batteri in caso di rilevazione di agenti anaerobi patogeni<br />
o di patogeni facoltativi<br />
Emocolture,<br />
aerobia ed anaerobia<br />
In caso di batteriemia presente o sospetta si effettua un<br />
prelievo sterile di sangue al paziente e lo si travasa direttamente<br />
nella struttura veterinaria in un'apposita bottiglia per emocoltura,<br />
che è possibile ricevere (come tutto il set per il prelievo di<br />
sangue) su richiesta dal laboratorio. Le bottiglie vengono tenute<br />
in incubazione nel laboratorio per 10 giorni e sottoposte ad<br />
esame batteriologico di specie aerobie e anaerobie. Ogni crescita<br />
batterica viene segnalata da un sistema di rilevamento.<br />
Procedura - Utilizzate per ogni paziente una bottiglia per emocoltura<br />
distinta (la bottiglia è idonea per colture sia aerobiche sia<br />
anaerobiche)<br />
- Disinfettate con cura il punto del prelievo, in modo da evitare<br />
una contaminazione con germi cutanei<br />
- Effettuate il prelievo di sangue con la siringa o con il set<br />
apposito<br />
- Riempite la bottiglia per emocoltura con 3-10 ml<br />
(la quantità ottimale è di 8-10 ml) di sangue. Se non<br />
disponete del set per il prelievo di sangue, iniettate il sangue<br />
nella bottiglia attraverso il tappo di gomma<br />
- Se possibile cercare di ottenere e di inviare la coltura<br />
all'inizio della settimana<br />
- Conservate a temperatura ambiente (non in frigorifero) le<br />
bottiglie inoculate dopo il prelievo<br />
286<br />
Tampone, liquidi organici, parti di tessuto ecc. Esame colturale (1)<br />
Sangue in apposite bottiglie per Esame colturale (1)<br />
emocoltura<br />
16.2 Esami delle feci<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Germi fecali - coltura<br />
semiquantitativo<br />
Gli esami di campioni di feci o di tamponi rettali vengono<br />
effettuati con l'aiuto di terreno selettivo e procedimenti di<br />
arricchimento per la rilevazione di patogeni intestinali.<br />
L'esame colturale - Salmonelle<br />
comprende - specie termofile di Campilobatteri (Campylobacter jejuni,<br />
Campylobacter coli)<br />
- Yersinia enterocolitica<br />
- patogeni diversi a seconda delle specie animali ed<br />
enterobatteriacee patogene facoltative (p.es. Klebsiella,<br />
ceppi emolitici e mucoidi di E. coli, Proteus spp.)<br />
- Stafilococchi coagulasi<br />
- positivi (Staphylococcus aureus, Staphylococcus<br />
intermedius)<br />
- Pseudomonas aeruginosa<br />
- lieviti (rilevazione semiquantitativa in caso di proliferazione<br />
non fisiologica)<br />
Salmonella -<br />
coltura qualitativo<br />
Clostridium spp. -<br />
coltura quantitativo<br />
16 Microbiologia<br />
Feci, tampone rettale Esame colturale (1)<br />
In caso di animali carnivori si effettua inoltre una valutazione<br />
semiquantitativa della composizione della flora fecale. Un<br />
aumento quantitativo di batteri gram-positivi o gram-negativi<br />
può indicare la presenza di un dismicrobismo della flora<br />
dell'intestino crasso.<br />
Feci, tampone rettale Esame colturale (1)<br />
Esame colturale di campioni di feci esclusivamente per la rilevazione<br />
di Salmonelle. Come materiale di analisi possono<br />
essere utilizzati anche campioni collettivi di feci.<br />
Feci Esame colturale (1)<br />
Negli animali carnivori un aumento quantitativo dei Clostridi è<br />
suggestivo della presenza di un dismicrobismo. Diluendo<br />
opportunamente il campione di feci e procedendo quindi a<br />
coltura anaerobica su terreni selettivi si ottiene il numero di<br />
Clostridi per grammo di feci.<br />
287
16 Microbiologia<br />
16.2 Esami delle feci<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Enterotossina di<br />
Clostridium perfringens<br />
Nel cane e nel gatto l'enterotossina di Clostridium perfringens<br />
può provocare diarrea.<br />
Elastasi (cane) Feci (5-10 grammi) ELISA (1)<br />
Specie animale solo cane<br />
Rilevazione dell'elastasi-1 fecale del cane, prodotta nel pancreas e<br />
rilasciata nell'intestino assieme al secreto pancreatico nel corso dei<br />
processi digestivi.L'elastasi-1 canina è stabile nell'intestino ed è<br />
rilevabile per lunghi periodi di tempo senza alterazioni nei campioni<br />
di feci.<br />
cfr. → Malattie del pancreas esocrino<br />
Indicazione sospetto di insufficienza pancreatica esocrina<br />
Attenzione L'integrazione enzimatica non deve essere interrotta in quanto l'esito<br />
non viene falsato. Feci acquose possono dar luogo a diluizione ed a<br />
valori erroneamente bassi.<br />
Assorbimento -<br />
microscopia<br />
Rilevazione di componenti nutritive non digerite nelle feci: cristalli aghiformi<br />
di acidi grassi, grassi neutri, fibre muscolari, amido<br />
Specie animale L'esame è possibile su animali carnivori, onnivori e uccelli<br />
Indicazione Sospetto di maldigestione, p.es. dovuto a insufficienza<br />
pancreatica esocrina<br />
Fattori di disturbo - La composizione delle feci dipende dal tipo e dalla<br />
composizione dell'alimentazione. Perciò in caso di<br />
alimentazione con carne cruda è possibile rilevare cristalli<br />
aghiformi di acidi grassi e fibre muscolari.<br />
- Un passaggio intestinale accelerato in caso di diarrea porta<br />
ad un peggiore sfruttamento del nutrimento.<br />
288<br />
Feci ELISA (2)<br />
Feci (5-10 grammi) Esame microscopico (1)<br />
16.2 Esami delle feci<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Virologia generale Feci Microscopia elettronica (3)<br />
(almeno una provetta piena a metà)<br />
Profilo diarrea C<br />
(cane/gatto)<br />
Rilevazione e classificazione dei virus eliminati con le feci per<br />
mezzo della microscopia elettronica.<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive (rilevazione di Coronavirus,<br />
Rotavirus e Parvovirus)<br />
Sangue occulto Feci (1/3 di provetta) Cromatografia (2)<br />
Al fine di non falsare il risultato dell'esame, nei 3 giorni prima<br />
del prelievo si deve evitare di alimentare l'animale con carne.<br />
Feci (almeno una provetta per feci colma) (1)<br />
Esame batteriologico delle feci - esame colturale per la rilevazione di patogeni intestinali<br />
Esame micologico delle feci - (semiquantitativo, colturale)<br />
Esame parassitologico delle feci - rilevazione di uova di cestodi, uova di nematodi e oocisti<br />
coccidiche (flottazione)<br />
Giardia - rilevazione di antigene (test ELISA)<br />
16 Microbiologia<br />
289
16 Microbiologia<br />
16.2 Esami delle feci<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Esami delle feci - profili d'organo<br />
Profilo diarrea E<br />
(solo cane)<br />
Esame batteriologico delle feci Il profilo corrisponde al "Profilo diarrea C", ma comprende<br />
Esame micologico delle feci anche la determinazione dell'elastasi-1 fecale del cane.<br />
Esame parassitologico delle feci<br />
Giardia<br />
Elastasi-1 canina<br />
Megabatteri - rilevazione<br />
diretta (uccelli)<br />
290<br />
Feci (almeno una provetta per feci colma) (1)<br />
feci (5-10 grammi) microscopia (1)<br />
colorazione PAS<br />
Il rilascio dell'agente patogeno avviene a fasi intermittenti,<br />
pertanto si consiglia l'esame di un campione comune di<br />
5 giorni.<br />
Un risultato negativo nello striscio fecale non è sufficiente per<br />
escludere la presenza di un'infezione da Megabatteri.<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
16.3 Esami micologici<br />
16.3.1 Costi e durata degli esami<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Quadro generale dei costi e della durata degli esami micologici<br />
I costi generali per gli esami micologici vengono calcolati nel modo seguente:<br />
1. coltura<br />
+ 2. eventuali differenziazioni (solo per rilevazione di funghi patogeni,<br />
compresa nel prezzo)<br />
+ 3. eventuale autobiogramma (solo in caso di lieviti e su apposita<br />
richiesta, costo aggiuntivo)<br />
= Costo totale dell'esame<br />
Per gli esami micologici, a differenza di quanto avviene per l'antibiogramma nell'esame<br />
batteriologico, l'antimicogramma viene eseguito solo su richiesta, ad un costo aggiuntivo.<br />
1. Coltura batteriologica<br />
16 Microbiologia<br />
Coltura per: Messa in coltura Durata*<br />
Dermatofiti lunedì-venerdì 4 settimane<br />
Lieviti e muffe lunedì-sabato 2-3 gg.<br />
Lieviti in campioni di feci, quantitativo lunedì-venerdì 2-3 gg.<br />
* La durata degli esami colturali micologici dipende dal tipo di germi da rilevare e dalla loro<br />
velocità di crescita. La maggior parte dei funghi patogeni per gli animali viene individuata<br />
all'interno degli intevalli di tempo indicati. In caso di richieste particolari i tempi di coltura<br />
necessari possono essere più lunghi (p.es. 5 giorni per le Malassezie, 7 giorni per il<br />
Criptococcus neoformans).<br />
291
16 Microbiologia<br />
16.3.2 Esami micologici generali<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Dermatofiti/<br />
funghi cutanei<br />
Le dermatomicosi sono malattie da funghi limitate alla superficie<br />
cutanea. Fra le dermatomicosi più diffuse si contano quelle<br />
sostenute da Trichophyton e Microsporum.<br />
Materiale di analisi - Dal momento che i funghi cutanei penetrano nella pelle con<br />
le loro ife, un raschiato cutaneo profondo è il materiale di<br />
analisi ottimale<br />
- Anche peli prelevati con pinzetta sono un materiale adatto<br />
- I peli recisi non sono invece adatti<br />
- Si possono anche inviare colture micologiche già sottoposte<br />
a incubazione per l'identificazione delle specie patogene.<br />
Prelievo del materiale Il campione deve essere prelevato nel punto di passaggio fra<br />
tessuto cutaneo malato e tessuto cutaneo sano. Con una disinfezione<br />
preliminare del punto del prelievo per mezzo di alcool<br />
al 70% si impedisce il soffocamento delle colture micologiche<br />
da parte della flora batterica che le accompagna.<br />
Inviare i campioni in una provetta asciutta.<br />
Esame 1. Coltivazione colturale su terreno di coltura speciale<br />
2. Valutazione delle colture a intervalli regolari e differenziazione<br />
delle specie fungine in presenza di crescita di dermatofiti<br />
Attenzione I dermatofiti crescono molto lentamente. L'incubazione dei campioni<br />
può perciò durare fino a 4 settimane.<br />
Lieviti e muffe Tampone, liquidi organici ecc. Esame colturale (1)<br />
Lieviti e muffe possono essere coinvolti in diversi processi patogeni,<br />
come p.es. otiti, infezioni genitali, mastiti, infezioni dei sacchi aerei.<br />
Prelievo del materiale Utilizzate il tampone con mezzo di trasporto come per gli<br />
esami batteriologici. In caso di tamponi della mucosa della<br />
bocca, del nasofaringe o dei genitali si faccia attenzione a<br />
raccogliere il materiale da placche membranose o purulente,<br />
nelle quali l'eventuale agente patogeno è più facile da rilevare.<br />
Per diagnosticare un'aspergillosi negli uccelli il tampone dei<br />
sacchi aerei è il materiale più indicato.<br />
Esame 1. Coltivazione colturale su terreno di arricchimento speciale<br />
2. Valutazione delle colture e differenziazione delle specie<br />
fungine in presenza di crescita di lieviti e muffe patogeni o<br />
patogeni facoltativi.<br />
Attenzione Tamponi auricolari, tamponi cervicali di fattrici e campioni di latte<br />
vengono da noi sottoposti di norma anche a esame<br />
micologico, senza che sia necessaria una richiesta apposita.<br />
292<br />
Raschiato cutaneo, peli Esame colturale (1)<br />
16.3.2 Esami micologici generali<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Lieviti in campioni di feci<br />
(quantitativo)<br />
16 Microbiologia<br />
Feci Esame colturale (1)<br />
In seguito a diversi fattori immunosoppressivi o a terapie antibiotiche<br />
si può avere una proliferazione di lieviti che vivono<br />
nell'intestino - in particolare di specie di Candida - con<br />
conseguente diarrea. Per porre una diagnosi è indispensabile<br />
la rilevazione quantitativa dell'agente patogeno.<br />
Esame 1. Diluizione quantitativa del campione di feci<br />
2. Coltivazione colturale su terreno speciale<br />
3. Stima del numero delle colonie e calcolo del numero<br />
di lieviti per grammo di feci<br />
4. Identificazione delle specie<br />
293
16 Microbiologia<br />
16.4 Autovaccini<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n 16.4 Autovaccini contro agenti batterici<br />
Il materiale inviato viene messo in coltura in modo da poter quindi passare all'isolamento e alla<br />
differenziazione dei batteri. Il vaccino viene prodotto dopo la proliferazione del germe.<br />
Attenzione La produzione e il controllo del vaccino richiedono un periodo di<br />
tempo di circa 3 settimane.Se successivamente ad un<br />
"normale" esame batteriologico si desidera la produzione di un vaccino,<br />
siete pregati di comunicarcelo il più presto possibile.<br />
Per la produzione di un autovaccino occorre una ricetta del medico<br />
veterinario. Alla fornitura è accluso uno schema di dosaggio. Per<br />
ogni carico di autovaccino è normalmente<br />
possibile richiedere 1-2 soluzioni successive senza che sia necessario<br />
inviare nuovo materiale.<br />
Autovaccino E. Coli Feci (3)<br />
La somministrazione di autovaccino E. coli è da prendere in<br />
considerazione soprattutto negli animali che soffrono di diarrea<br />
cronica resistente alla terapia. Gli studi sull'argomento hanno<br />
mostrato che l'applicazione del vaccino porta spesso ad un<br />
miglioramento o alla guarigione della diarrea. Il vaccino viene<br />
fornito in forma di soluzione per somministrazione orale, che va<br />
somministrata giornalmente per 10 giorni consecutivi.<br />
Autovaccino Stafilococchi Tampone (3)<br />
Autovaccino<br />
Pseudomonas aeruginosa<br />
294<br />
È un vaccino impiegato su animali colpiti da piodermia da<br />
Stafilococchi resistente alla terapia.Il principio attivo viene<br />
somministrato per mezzo di 4 iniezioni sottocutanee.<br />
Tampone (3)<br />
L'impiego di autovaccini in caso di malattie<br />
otorinolaringoiatriche resistenti alla terapia causate da<br />
Pseudomonas aeruginosa ha dato buoni risultati. Il principio attivo,<br />
una volta prodotto, viene somministrato in una<br />
combinazione di soluzione orale e di iniezioni sottocutanee.<br />
16.4 Autovaccini<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Autovaccini contro agenti virali<br />
Papilloma-autovaccino /<br />
autovaccino Sarcoide<br />
equino<br />
16 Microbiologia<br />
3-5 g di tessuto in NaCl (3)<br />
Per la produzione del vaccino occorre una quantità sufficiente<br />
di materiale tissutale (un pezzo di almeno della grandezza di<br />
un'unghia), inviato in soluzione fisiologica sterile.<br />
Altri autovaccini (anche per vaccinazione materna o vaccinazione di<br />
tutto un allevamento) possono essere prodotti su richiesta.<br />
Vi preghiamo di concordare il tutto telefonicamente chiamando il<br />
numero verde 800 011 822.<br />
295
17 Parassitologia<br />
17.1 Endoparassiti<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n 17.1 Endoparassiti<br />
A causa del carattere intermittente dell'escrezione di parassiti, larve, uova ed oocisti si<br />
consiglia di esaminare un campione di feci collettivo di 3 giorni (campioni singoli sono<br />
sufficienti solo per i test ELISA). In un allevamento (fatta eccezione per volatili e suini da<br />
ingrasso) si dovrebbe ricorrere al prelievo ed all'esame di un numero rappresentativo di<br />
campioni singoli (e non campioni collettivi di feci di più animali!).<br />
Se possibile, prelevare le feci direttamente dal retto, altrimenti raccogliere feci fresche appena<br />
deposte.<br />
Il materiale di analisi deve essere spedito al laboratorio il più velocemente possibile, meglio<br />
se refrigerato, in contenitori ermeticamente chiusi.<br />
Parassiti o parti di parassiti espulsi assieme alle feci vanno inviati in una provetta allo stato nativo<br />
(non fissati in formalina!) oppure in soluzione salina fisiologica, separatamente dal campione di feci.<br />
Endoparassiti<br />
(cane/gatto/suino/volatili/<br />
animali esotici)<br />
Rilevazione di uova di Cestodi, uova di Nematodi e oocisti coccidiche,<br />
comprese le oocisti di Toxoplasma nel gatto<br />
Endoparassiti (rettili) almeno 5 gr. feci Preparato nativo, Flottazione (1)<br />
Rilevazione di - flagellati (trofozoiti e cisti), ciliati (trofozoiti e cisti), amebe<br />
(trofozoiti e cisti), uova di Trematodi, di Cestodi e uova di<br />
determinati Nematodi<br />
- oocisti coccidiche, uova di Cestodi, di Nematodi e di<br />
Pentastomidi<br />
Endoparassiti<br />
(ruminanti)<br />
Rilevazione di uova di Cestodi, uova di Nematodio<br />
oocisti coccidiche<br />
uova di Fasciola epatica e di Paramfistomidi<br />
larve di parassiti polmonari<br />
296<br />
almeno 5 gr. feci Flottazione (1)<br />
almeno 10 gr. feci Flottazione, Sedimentazione,<br />
Tecnica di Baermann (1)<br />
17.1 Endoparassiti<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Endoparassiti (cavallo) almeno 10 gr. Feci Flottazione, Tecnica di Baermann (1)<br />
Rilevazione di uova di Cestodi<br />
uova di Nematodi<br />
larve di parassiti polmonari e di Strongili<br />
Particolarità dell'interpretazione<br />
del test nel cavallo: - Strongili: sulla base delle uova non è possibile praticare<br />
una distinzione fra grandi e piccoli Strongili (ciatostomidi);<br />
tuttavia, in caso di rilevazione di Strongili dello stomaco e<br />
dell'intestino un trattamento è sempre indicato.<br />
Ricerca delle uova<br />
di Trematodi<br />
Criptosporidi (Ag)<br />
(rettili)<br />
17 Parassitologia<br />
- Anoplocefalidi: dal momento che le uova delle Tenie<br />
vengono espulse nelle feci in modo discontinuo e in<br />
quantità relativamente modesta, la sensibilità dei metodi<br />
coproscopici in questo caso non è sufficiente. La probabilità<br />
di una rilevazione aumenta se si esaminano ripetutamente<br />
più animali di un allevamento.<br />
Vermi polmonari almeno 5 gr. Feci Tecnica di Baermann (1)<br />
La sensibilità del metodo dipende in notevole misura dalla<br />
densità delle larve nelle feci e dal loro stato di attività. Per tale<br />
ragione è importante inviare materiale in quantità sufficiente.<br />
almeno 10 gr. Feci Sedimentazione (1)<br />
L'escrezione di uova è spesso assai modesta e soggetta a forti<br />
oscillazioni, soprattutto nei bovini, perciò è importante poter<br />
esaminare una quantità di feci sufficientemente grande. In caso<br />
di sospetto clinico di Fasciola hepatica e risultato coprologico<br />
negativo si consiglia un esame sierologico (rilevazione di<br />
anticorpi) su siero (cavallo e bovino) o su latte (solo bovino).<br />
Giardia (Ag) 2-3 gr. Feci ELISA (1)<br />
Criptosporidi (Ag) 2-3 gr. Feci ELISA (1)<br />
2-3 gr. Feci, lavaggio gastrico ELISA e colorazione (1)<br />
297
17 Parassitologia<br />
17.2 Ectoparassiti<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Ectoparassiti campione di tessuto in formalina Microscopia (1)<br />
n Emoparassiti e batteri emotropi<br />
- Babesie<br />
- Leishmanie<br />
- Microfilarie e Macrofilarie<br />
- Theilerie<br />
- Tripanosomi<br />
- Ehrlichie<br />
- Haemobartonelle<br />
cfr. → capitolo 13, Malattie infettive<br />
cfr. → capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
Inviare biopsie cutanee delle parti alterate.Dopo aver provveduto<br />
al sezionamento del preparato in serie si passa ad un esame<br />
mirato per la rilevazione di ectoparassiti. Un esame istologico<br />
può venire richiesto in un secondo momento (costi come per<br />
un esame istologico aggiuntivo)<br />
Ectoparassiti raschiato cutaneo Potassa caustica, microscopia (1)<br />
Radere il pelo al margine delle alterazioni cutanee o nelle sedi di<br />
predilezione degli ectoparassiti e raschiare a fondo con una<br />
lama da bisturi, fino a che non si siano provocate delle piccole<br />
emorragie capillari. Deporre il campione sul vetrino portaoggetti,<br />
farlo seccare o inviarlo in una provetta, senza lama.<br />
Identificazione di ectoparassiti Microscopia (1)<br />
298<br />
Inviare diversi ectoparassiti allo stato nativo o fissati in alcool<br />
al 70 %.
18.1 Esami istologici e citologici<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Si prega di tenere sempre presenti le istruzioni di carattere generale sugli esami istologici e<br />
citologici e sulle biopsie con ago sottile.<br />
cfr. → capitolo 2, Istruzioni di carattere generale<br />
Per quanto riguarda la valutazione di materiale agoaspirato preparare uno o più strisci<br />
immediatamente dopo il prelievo e l'eventuale centrifugazione, e farli asciugare all'aria, senza<br />
fissarli né colorarli. Inviare quindi gli strisci assieme al materiale restante non fissato il più<br />
rapidamente possibile.<br />
I campioni di tessuto vanno inviati sempre fissati in formalina (preferibile formalina al 4%,<br />
comunque non superiore al 10%).<br />
Campioni di grandi dimensioni vanno eventualmente tagliati o sezionati prima della messa in<br />
formalina, al fine di assicurarne la completa fissazione. È possibile anche effettuare una<br />
prefissazione di 1-3 giorni e inviare quindi il campione avvolto in materiale umido dentro un<br />
sacchetto ermeticamente chiuso, il tutto inserito in un ulteriore contenitore protettivo.<br />
Si prega di inviare campioni di tessuto o di aspirato accompagnati da più informazioni possibili<br />
e in particolare l'indicazione esatta dell'anamnesi e del luogo del prelievo (vedi modulo di<br />
richiestaspecifico).<br />
n Rilevazione di ectoparassiti nel campione di biopsia cutanea<br />
(esame mirato esclusivamente alla rilevazione di ectoparassiti su preparati sezionati in serie,<br />
senza descrizione del reperto)<br />
cfr. → capitolo 17, Parassitologia<br />
Ectoparassiti biopsia cutanea in formalina Microscopia (1)<br />
n Profili cutanei<br />
cfr. → capitolo 3, Programmi di ricerca speciali<br />
n Autopsie<br />
non vengono da noi praticate<br />
18 Istologia<br />
299
18 Istologia<br />
18.2 Liquidi biologici<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Liquor<br />
Indicazioni per il prelievo: - rilevazione/ esclusione di infiammazioni del sistema nervoso<br />
centrale<br />
- accertamento della diagnosi di "epilessia idiopatica"<br />
- prima dell'esecuzione di una mielografia<br />
Controindicazioni per il prelievo:- aumento della pressione intracranica, ad es. in caso di<br />
edema cerebrale, idrocefalo, emorragia cerebrale<br />
Allo stato fisiologico il liquor è limpido e trasparente, un'eventuale torbidità è suggestiva di una<br />
pleocitosi (soprattutto in caso di infiammazioni, ma anche in caso di neoplasie, traumi, danni<br />
vascolari o necrosi).<br />
Anche in caso di aumento del contenuto proteico va presa in considerazione la diagnosi<br />
differenziale di infiammazioni, neoplasie, malattie degenerative e vascolari.<br />
cfr.→ capitolo 15, Esami di biologia molecolare<br />
cfr.→ capitolo 13, Malattie infettive<br />
Profilo LCR 1 1 ml ca. di liquor microscopia (camera di conteggio),<br />
turbidimetria (1)<br />
Conta cellulare (leucociti, eritrociti), proteine totali<br />
Attenzione La conta cellulare deve essere effettuata il più rapidamente<br />
possibile (al massimo entro 4 ore dopo il prelievo), dal<br />
momento che nell'ambiente povero di proteine del liquor le<br />
cellule lisano molto velocemente. Non si può perciò escludere<br />
che i risultati dell'esame non vengano influenzati dal trasporto.<br />
Profilo LCR 2 3 ml ca. di liquor<br />
Profilo LCR 1 + Esame citologico<br />
Attenzione Il conteggio delle cellule deve essere effettuato il più<br />
rapidamente possibile (al massimo entro 4 ore dopo il prelievo),<br />
dal momento che nell'ambiente povero di proteine del liquor le<br />
cellule lisano molto velocemente. Non si può perciò escludere<br />
che i risultati dell'esame non vengano influenzati dal trasporto.<br />
300<br />
18.2 Liquidi biologici<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
Profilo LCR 3 3 ml ca. di liquor<br />
Profilo LCR 2 + Esame batteriologico (aerobi + anaerobi)<br />
Attenzione Il conteggio delle cellule deve essere effettuato il più rapidamente<br />
possibile (al massimo entro 4 ore dopo il prelievo), dal momento<br />
che nell'ambiente povero di proteine del liquor le cellule lisano molto<br />
velocemente. Non si può perciò escludere che i risultati dell'esame<br />
non vengano influenzati dal trasporto.<br />
In caso di presenza di germi patogeni verranno eseguiti<br />
automaticamente differenziazione ed antibiogramma; questi sono<br />
compresi nel prezzo.<br />
Profilo per versamenti<br />
cavitari 1<br />
Esame citologico, proteine totali<br />
Peso specifico<br />
Attenzione Già poche ore dopo il prelievo è possibile che i risultati<br />
dell'esame vengano notevolmente influenzati (in particolare in<br />
seguito a lisi cellulare), si consiglia quindi di inviare il materiale<br />
refrigerato. Per esami citologici si può eventualmente<br />
preparare uno striscio cellulare del sedimento (centrifugare<br />
per 3- 5 min. a 1500 giri/min.).<br />
Profilo per versamenti<br />
cavitari 2<br />
3 ml ca. di puntato Microscopia, fotometria (1)<br />
3 ml ca. di puntato + Microscopia, fotometria, coltura (1)<br />
eventuale tampone<br />
Esame citologico, proteine totali<br />
Peso specifico<br />
Esame batteriologico (aerobi + anaerobi)<br />
18 Istologia<br />
Attenzione Già poche ore dopo il prelievo è possibile che i risultati<br />
dell'esame vengano notevolmente influenzati (in particolare in<br />
seguito a lisi cellulare), si consiglia quindi di inviare il materiale<br />
refrigerato. Per esami citologici si può eventualmente preparare<br />
uno striscio cellulare del sedimento (centrifugare per 5 min. a<br />
1500 giri/min.).<br />
In caso di presenza di germi patogeni verranno eseguiti<br />
automaticamente differenziazione ed antibiogramma; questi<br />
sono compresi nel prezzo.<br />
301
18 Istologia<br />
18.2 Liquidi biologici<br />
Nome del test Quantità/Materiale Metodo<br />
Osservazioni<br />
n Liquido sinoviale<br />
Il liquido articolare è generalmente limpido e povero di cellule. In caso di malattie articolari la<br />
determinazione del tipo di cellule e del contenuto proteico può dare informazioni sul tipo e sulla<br />
genesi della malattia. È possibile distinguere fra cause traumatiche, processi infiammatori o<br />
infettivi acuti e malattie degenerative delle articolazioni.<br />
Profilo sinoviale 1 1 ml di liquido sinoviale microscopia (camera di conteggio),<br />
fotometria (1)<br />
Conta cellulare, proteine totali<br />
colore, viscosità, torbidi t à<br />
Profilo sinoviale 2 2 ml di liquido sinoviale Microscopia, fotometria (1)<br />
Profilo sinoviale 1 + Esame citologico<br />
Attenzione Già 4 ore dopo il prelievo è possibile che i risultati dell'esame<br />
vengano notevolmente influenzati. Per esami citologici si può<br />
eventualmente preparare uno striscio cellulare del sedimento<br />
(centrifugare per 5 min. a 1500 giri/min.).<br />
Profilo sinoviale 3 2 ml di liquido sinoviale Microscopia, fotometria, coltura (1)<br />
+ eventuale tampone<br />
Profilo sinoviale 2 + Esame batteriologico (aerobi + anaerobi)<br />
Attenzione Già 4 ore dopo il prelievo è possibile che i risultati dell'esame<br />
vengano notevolmente influenzati. Per esami citologici si può<br />
eventualmente preparare uno striscio cellulare del sedimento<br />
(centrifugare per 5 min. a 1500 giri/min.).<br />
In caso di presenza di germi patogeni verranno eseguiti<br />
automaticamente differenziazione ed antibiogramma; questi<br />
sono compresi nel prezzo.<br />
302