Tese de Mestrado - Isabella versao final corrigida - UFF

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4.2 Alterações no microambiente da lesão muscular 4.2.1 Coloração de picrosírius Confirmadas as diferenças entre as lesões musculares nas diferentes linhagens passamos para um estudo mais minucioso das alterações observadas. Esse estudo é essencial para sabermos os possíveis mecanismos contribuindo para regeneração muscular. O primeiro fator abordado foi alteração do microambiente quanto à produção de colágeno. Este componente da matriz extracelular exerce papel importante durante o processo de reparo, influenciando na migração de leucócitos e no curso da regeneração, para uma resolução cicatricial ou mais fisiológica. Para visualização do colágeno escolhemos a coloração de picrosirius que marca em vermelho as fibras colágenas. A lesão muscular em 1dpi com bupivacaína mostrou uma expressão discreta de colágeno entre as fibras musculares tanto na linhagem C57BL6 (Figura 12A) como BALB/c (Figura 12E), porém intenso depósito de colágeno próximo aos vasos no camundongo BALB/c (Figura 12E). Após 4 dias de inoculação com bupivacaína essa diferença era bem evidente. Enquanto os camundongos C57BL6 (Figura 12B) apresentavam maior regeneração, com várias fibras com nucleação central e discreta deposição de colágeno, os camundongos BALB/c (Figura 12F) apresentavam grandes áreas com mionecrose e aumento na deposição de colágeno em relação ao ponto anterior. 42
Em 8 (Figuras 12C e G) e 12 dpi (Figuras 12D e 12H) não foi encontrada diferença na expressão de colágeno entre as miofibras em duas linhagens A quantificação do colágeno utilizado o programa Analysis foi realizada somente dentro das áreas de lesão, evitando quantificar vasos e as fácias musculares. Os resultados apresentados na figura 13 mostram que em 1 dpi não existe diferença na média da expressão de colágeno. Contudo, 4dpi após inoculação (Figura 13B) foi observado que o percentual da área de lesão ocupada por colágeno no BALB/c era 5,2 vezes maior do que no camundongo C57BL6 (p
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