BAġKENT ÜNĠVERSĠTESĠ TIP FAKÜLTESĠ Biyokimya Anabilim ...

1. Kontrol grubu: salin uygulanan grup (KONT) (n=7)2. Grup I: 550 mg /kg APAP (i.p., tek doz ) (n=7)3. Grup 2: 25 mg/ kg EGCG (i.p., 7 gün) (n=7)4. Grup 3: 25 mg/kg polifenon 60 (i.p., 7 gün) (n=8)5. Grup 4: 25 mg/kg EGCG (i.p., 7 gün) + 550 mg/kg APAP (EGCG sonrası 8.gün, i.p., tek doz ) (n=8)6. Grup 5: 25 mg/kg polifenon 60 (i.p., 7 gün) + 550 mg/kg APAP (polifenon 60 nsonrası 8. gün, i.p., tek doz) (n=7)APAP salin içinde (8 ml/kg) taze olarak hazırlandı ve uygulama bir gece açlık sonrası,sabah i.p. tek doz olarak gerçekleştirildi. EGCG ve Polifenon 60 çözeltileri salin içinde(8ml/kg) taze olarak hazırlanarak her sabah aynı saatde i.p. uygulandı.Son uygulamadan 24 saat sonra anestezi altında (50 mg/kg ketamin; 7 mg/kg ksilazin)bütün gruplarda intrakardiak kan alımı ve sakrifikasyon işlemi sonrası, karaciğer veböbrekler izole edildi. İzole edilen karaciğer ve böbrek dokuları ve 3000g‟de 15 dksantrifügasyon sonrası elde edilen serum örnekleri analize kadar – 86 ◦ C de, histopatolojikinceleme için karaciğer sol lobundan ve böbrekden alınan dokular gluteraldehit içinde fikseedilip saklandı.3.3. Serum Biyokimyasal Parametrelerinin ÖlçümüSerum aspartat aminotransferaz (AST), alanin aminotransferaz (ALT) aktiviteleri UVyöntem ile kan-üre nitrojen (BUN) kinetik uv yöntem ve kreatinin derişimleri Jaffé kinetikyöntemi ile Roche diagnostik reaktifleri kullanılarak Roche Hitachi modüler PP sisteminde(Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Germany) analiz edilmiştir.3.4. Doku MDA ve GSH DeriĢimlerinin SaptanmasıDoku örnekleri 0,15 M potasyum klorür (KCl) içinde cam-cam homojenizatörkullanılarak (1/10, w/v) homojenize edildi.Doku örneklerinde MDA derişimi Buege ve Aust‟un yöntemi ile saptandı (60). YöntemMDA‟nın tiyobarbitürik asit ile yaptığı kompleksin kolorimetrik olarak ölçümü32