ГОСУДАРСТВЕННОЕ МЕДИЦИНСКОЕ УЧЕБНОЕ ЗАВЕДЕНИЕ

МИНИСТЕРСТВО ОХРАНЫ ЗДОРОВЬЯ УКРАИНЫ 

ЦЕНТРАЛЬНЫЙ МЕТОДИЧЕСКИЙ КАБИНЕТ 

ПО ВИСЩЕМУ МЕДИЦИНСКОМУ ОБРАЗОВАНИЮ 

ГОСУДАРСТВЕННОЕ МЕДИЦИНСКОЕ УЧЕБНОЕ ЗАВЕДЕНИЕ 

МЗ УКРАИНЫ 

“УКРАИНСКАЯ МЕДИЦИHСКАЯ СТОМАТОЛОГИЧЕСКАЯ 

АКАДЕМИЯ” 

БИОЛОГИЧЕСКАЯ И БИООРГАНИЧЕСКАЯ 

ХИМИЯ 

УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКОЕ ПОСОБИЕ 

ДЛЯ СТУДЕHТОВ ІІ КУРСА СТОМАТОЛОГІЧЕСКОГО ФАКУЛЬТЕТА 

(МОДУЛИ II-ІІІ) 

Полтава – 2011

УДК 54:616.31(07) 

Авторы: д.м.н., профессор К.С. Непорада, д.м.н., профессор Л.М. Тарасенко, 

к.б.н., доцент В.К. Григоренко, к.м.н., доцент Л.Г. Нетюхайло, к.б.н. М.В. Білець, 

к.м.н.О.Є. Омельченко., Н.М. Слободяник, 

Методические разработки по биологической и биоорганической химии 

(ІІ-V модули) для самостоятельной работы студентов медицинского факультета. – 

Полтава, 2011. – 113 с. Русским языком. 

Методические разработки для самостоятельной работы студентов по 

биологической и биоорганической химии (І-V модули) высших медицинских заведений 

образования ІV уровня аккредитации подготовлены в соответствии с программой 

“Биологическая и биоорганическая химия”, которая составлена сотрудниками опорной 

кафедры биоорганической, биологической и фармакологической химии 

Национального медицинского университета имени О.О. Богомольца (заведующий 

кафедры – член-корреспондент АМН Украины, заслуженный деятель науки и техники 

Украины, профессор Ю.И. Губский). Учебный материал структурирован на 3 

модуля, что отвечает стандартам учебы, согласно основ Болонского процесса, и 

способствует повышению качества подготовки студентов. Учебное пособие 

рассчитано на 2-х часовые занятия, содержит последовательность и указания к 

учебным действиям, перечень практических навыков и видов индивидуальных, 

самостоятельных работ, а также список обязательной и дополнительной литературы. 

Рецензенты: заведующая кафедрой медицинской и биоорганической химии 

Харьковского Национального медицинского университета, кандидат 

фармацевтических наук, профессор Сырова Г.О. 

заведующая кафедрой химии и методики преподавания химии 

Полтавского Национального педагогического университета имени 

В.Г. Короленка, доктор педагогических наук, профессор Шиян Н.І. 

2

ПАМЯТКА СТУДЕНТУ! 

Дисциплина “БИОЛОГИЧЕСКАЯ И БИООРГАНИЧЕСКАЯ ХИМИЯ” 

структурирована на 3 модуля: 

Модуль 1. Биологически важные классы биоорганических 

соединений. Биополимеры и их структурные компоненты. 

Модуль 2. Общие закономерности метаболизма. 

Метаболизм углеводов, липидов, аминокислот и его регуляция. 

Модуль 3. Молекулярная биология. Биохимия межклеточных 

коммуникаций. Биохимия тканей и физиологических функций. 

Учебный план по дисциплине “Биологическая и биоорганическая химия” 

для студентов стоматологического факультета 

Структур 

а навчальної 

дисципліни 

Кредит 

и ECTS 

Модуль 1 



Кількість годин, з них 

Всього, Аудиторних 

годин/кредиті 

Практ. СРС 

Лекц. 

в 

занять 

270 20 130 120 

9,0 

Рік 

навча 

ння 

75/2,5 10 40 25 1 

105/3,5 10 40 55 2 

90/3,0 50 40 2 

Вид 

контролю 

Текущий и 

итоговый 

(стандартизиров 

анный) 




анный) 




анный) 

Примітка: 

1 кредит ECTS – 30 годин 

Аудиторна робота – 55% 

СРС – 45% 

3

МОДУЛЬ 2 

ОБЩИЕ ЗАКОНОМЕРНОСТИ МЕТАБОЛИЗМА 

МЕТАБОЛИЗМ УГЛЕВОДОВ, ЛИПИДОВ, АМИНОКИСЛОТ 

И ЕГО РЕГУЛЯЦИЯ. 

Тема 1. Предмет и задачи биохимии. Цель и методы проведения 

биохимических исследований, их клинико-диагностическое 

значение. Исследование строения и физико-химических свойств 

белков-ферментов. 

Актуальность темы. 

Биохимия – фундаментальная наука и учебная дисциплина, которая изучает 

химический состав живых организмов и химические превращения биомолекул. Только 

знание молекулярных механизмов функционирования организма обеспечивает 

глубокое понимание механизмов патогенеза, биохимической диагностики, 

профилактики и лечения важнейших заболеваний человечества. Знания биохимии 

необходимы для изучения физиологии, микробиологии, фармакологии, общей 

патологии и клинических дисциплин. Без крепкого фундамента теоретических 

дисциплин невозможное формирование высококвалифицированного врача. 

Ферменты это биологические катализаторы реакций обмена веществ. Белковая 

природа ферментов обусловливает их высокую лабильность в зависимости от многих 

факторов. Так, в зависимости от температуры тела человека, а также от рН 

внутренней среды организма активность ферментов может изменяться, что приводит 

к развитию патологических процессов. 

Цель и исходный уровень знаний. 

Общая цель. 

Изучение химического состава живых организмов и химических реакций 

биомолекул, которые входят в состав этих организмов. Изучить физико-химические 

свойства белков-ферментов. 

Конкретные цели: 

1. Анализировать этапы и закономерности становления биохимии как медикобиологической 

науки и учебной дисциплины. 

2. Объяснять принципы и основы методов биохимических исследований 

функционального состояния организма человека в норме и при патологии. 

3. Анализировать механизмы регуляции основных метаболических процессов; 

4. Трактовать биохимические закономерности строения и функционирования 

разных классов ферментов; 

5. Анализировать физико-химические свойства белков-ферментов. 

Исходный уровень знаний-умений. Знать строение белков, классификацию и 

структуру протеиногенных аминокислот. 

4

Ориентировочная карта для самостоятельного изучения студентами 

учебной литературы при подготовке к занятию. 

Содержание 

и Указания к учебным действиям 

последовательность действий 

Контроль исходного уровня 

знаний. 

1. Определение биохимии как 

биологической науки. Задачи 

биохимии. 

1.1. Биохимия как наука. 

1.2. Задачи биохимии. 

1.3. Основные этапы развития биохимии. 

1.4. Значение биохимии для диагностики и 

лечения основных заболеваний человека. 

2. Разделы биохимии. 2.1. Статическая биохимия. 

2.2. Динамическая биохимия. 

2.3. Функциональная биохимия. 

2.4. Клиническая биохимия как раздел 

биохимии. 

3. Практическое изучение 

физико-химических свойств 

белков-ферментов. 

4. Ферменты как 

биологические катализаторы 

реакций обмена веществ. 

3.1. Доказать белковую природу ферментов 

биуретовой реакцией, реакцией Фоля. 

Объяснить принципы метода. 

3.2. Объяснить термолабильность 

ферментов на примере определения 

активности амилазы слюны, которая 

предварительно нагрета или охлаждена и 

предварительно не обработана. 

3.3. Изучить зависимость активности 

амилазы слюны от рН среды. 

4.1. Физико-химические свойства белковферментов. 

4.2. Электрохимические свойства, 

растворимость. 

4.3. Термодинамическая стабильность 

белковых молекул ферментов; денатурация. 

5. Строение ферментных 5.1. Апофермент, кофермент 

белков. Простые и сложные (простетическая группа). Олигомерные белки- 

ферменты. 

ферменты, мультиэнзимные комплексы. 

5.2. Мембранно-ассоциируемые ферменты. 

Индивидуальная самостоятельная работа студентов. 

Подготовить реферат из истории развития биохимии: 

а) направления развития биохимии; 

б) основополагающие открытия в отрасли структуры и функциональной роли 

белков. 

Правила работы в биохимической лаборатории. 

1. Лабораторные исследования начинать после инструктажа преподавателя, строго 

придерживаясь методики (алгоритма) исследований. 

2. При проведении лабораторных исследований быть внимательным, аккуратным и 

точным. 

3. Работу с опасными реактивами проводить под вытяжкой. 

4. Придерживаться инструкций к работе на приборах и оборудовании. 

Порядок работы на ФЭК: 

5

1. Колориметр включить в сеть за 15 мин. до начала измерений. Во время 

прогревания кюветное отделение должно быть открыто. 

2. Выставить необходимый для измерения цветной светофильтр. 

3. Установить минимальную чувствительность колориметра. 

4. Перед измерением проверить установку стрелки колориметра на “0” при закрытом 

кюветном отделении. 

5. По ходу светового луча поместить кювету с раствором. 

6. Закрыть крышку кюветного отделения. 

7. Снять показатели по шкале колориметра. 

8. Выключить прибор из сети. 

Порядок работы с использованием водяной бани: 

1. Установить баню на подставку или стол. 

2. Уровень воды в бане должен быть не более 2/3 объема посуды. 

3. Окунуть в баню штатив для пробирок. 

4. На сложной вилке бани установить переключение мощности в положение 

“700 В.А.”, что отвечает ускоренному нагреванию. Вилку вставить в электрическую 

сеть. 

5. После закипания води переключатель перевести в положение “350 В.А.”, что 

отвечает рабочему режиму. 

6. Во время работы поддерживать нужный уровень воды в бане. 

Алгоритм лабораторной работы. 

1. Изучение термолабильности ферментов. 

Слюну развести в 5 раз (1 мл слюны + 4 мл воды). 2 мл разведенной слюны 

кипятить 5 минут. В 3 пробирки налить по 10 кап. 1% раствора крахмала. В первую 

пробирку прибавить 10 кап. воды (контроль), во вторую – 10 кап. охлажденной 

прокипяченной слюны, в третью – 10 кап. разведенной слюны. 

Все пробирки поместить в водяную баню или термостат при температуре 38 0 С на 

10 минут. После этого выполнить качественные реакции на крахмал и продукты его 

гидролиза (глюкозу и мальтозу). 

Реакция на крахмал: к 5 кап. исследуемого раствора добавить 1 кап. раствора 

Люголя (КІ 3 ). В присутствии крахмала появляется синяя окраска 

Реакция Фелинга: к 5 кап. исследуемого раствора добавить 3 кап. раствора 

Фелинга (CuSO 4 + NaOH), подогреть. В присутствии глюкозы или мальтозы выпадает 

желтый осадок гидрата закиси меди или красный осадок закиси меди. 

2. Изучение зависимости активности ферментов от рН среды. 

Слюну развести в 10 раз (1 мл слюны + 9 мл воды). В 3 пробирки налить по 1 мл 

буферных растворов с рН 3; 7,4; 14. В каждую пробирку отмерять по 1 мл разведенной 

слюны, по 1 мл 1% раствора крахмала, перемешать и инкубировать 10 мин. при 

температуре 38 0 С. После этого под контролем индикаторной бумаги нейтрализовать 

содержание пробирки с рН 3 - раствором щелочи, а содержание пробирки с рН 14 – 

раствором 0,1н HCl. 

Результат опыта выявить с помощью раствора Люголя, добавляя его по 1-2 кап. в 

каждую пробирку, размешать, отметить окраску и сделать выводы. 

6

Тема 2. Определение активности ферментов. Единицы измерения 

каталитической активности ферментов. Исследование 

ферментативных процессов по типу реакций основных классов 

ферментов. Исследование механизма действия ферментов и 

кинетики ферментативного катализа. 


Количественное определение активности ферментов в биологическом материале 

используется для диагностики разных болезней. Так при остром панкреатите 

повышается активность амилазы в крови и моче. 



Анализировать изменение активности фермента амилазы в биологических 

жидкостях. Изучение международной классификации ферментов по типу реакций. 

Изучение механизмов действия ферментов и кинетики ферментативного катализа. 

Знать методы определения активности ферментов, а также уметь интерпретировать 

эти методы. 


1. Количественно определять активность амилазы в моче за Вольгемутом, трактовать 

полученные результаты. 

2. Трактовать международную классификацию и номенклатуру ферментов по типу 

реакций. 

3. Анализировать механизмы действия ферментов. 

4. Объяснить методы определения активности ферментов 

5. Объяснить кинетику ферментативного катализа. 

Исходный уровень знаний-умений: знать постепенный гидролиз молекулы 

крахмала к мальтозе через стадию декстринов. Знать типы химических реакций. Знать 

биологическую роль и структуру ферментов, физико-химические свойства белков. 






1. Практическое изучение 1.1. Определение активности амилазы 

определения амилазы слюны. слюны. 

2. Методы определения 2.1. На конкретных примерах объясните 

активности ферментов. 

принципы методов определения активности 

ферментов: 

а) по количеству продукта, который 

образуется под действием фермента за 

единицу времени; 

б) по количеству потраченного субстрата 

за единицу времени; 

в) спектрофотометрические методы 

определения активности ферментов и 

визуализация результатов ферментативной 

реакции. 

7

3. Международная 

классификация и номенклатура 

ферментов по типу реакций. 

2.2. Единицы измерения активности и 

количества ферментов: 

а) международные единицы; 

б) катал; 

в) удельная активность фермента. 

3.1. Объяснить принцип международной 

классификации и номенклатуры ферментов. 

3.2. Назвать шесть классов ферментов и 

объяснить типы катализированных реакций. 

4. Механизмы действия 4.1. Термодинамические закономерности 

ферментов. 

ферментативного катализа. 

4.2. Активные центры ферментов. Отличия 

строения активных центров у простых и 

сложных ферментов. 

4.3 Ферментативное превращение 

субстратов при каталитическом действии 

фермента на примере действия 

химотрипсина и ацетилхолинестеразы. 

Последовательность этапов каталитического 

5. Кинетика ферментативных 

реакций. 

процесса. 

5.1. Зависимость скорости реакций от 

концентрации фермента, субстрата, рН и 

температуры. 

5.2. Константа Михаелиса-Ментен, ее 

смысловое значение. 


Сделать реферативный доклад по теме: ”Роль поджелудочной железы в 

возникновении гиперамилаземии и гиперамилазурии”, «Механизм действия 

ферментов»: 


Количественное определение активности амилазы. 

Принцип определения активности амилазы по Вольгемуту: 

Метод основан на способности амилазы расщеплять (гидролизовать) крахмал. 

Находят такое разведение слюны, которое расщепляет 2 мг крахмала (в 2 мл 0,1% 

раствора крахмала) за 30 минут при t=38 0 С . Потом рассчитывают количество 

крахмала, которое расщепляется 1 мл неразведенной слюны. 

В норме активность амилазы слюны – 160-320 ус.ед. 

Ход работы. 

В 10 пробирок наливают по 1 мл воды. В 1-ю пробирку добавляют 1 мл слюны, 

разведенной в 10 раз, перемешивают. Набирают в пипетку 1 мл смеси и переносят ее 

в 2-ю пробирку, из нее – таким же образом в 3-м и т.д до 10-и пробирке. Из 10-и 

пробирки 1 мл смеси выливают. Во все пробирки доливают по 1 мл воды и по 2 мл 

крахмала, перемешивают и оставляют в термостате на 30 минут при t=38 0 С. Через 

30 минут пробирки вынимают и добавляют по 1 капли раствора Люголя, 

перемешивают. Жидкость в пробирках окрашивается в желтоватый, розовый и 

фиолетовый цвета. Отмечают последнюю пробирку с желтым цветом, где гидролиз 

крахмала прошел полностью и проводят расчет. 

Расчет: 

8

Отмечают пробирку, где гидролиз крахмала прошел полностью. Например, 

желтый цвет появился в 4-й пробирке, где слюна разведена в 160 раз. 

Соответственно, 1/160 мл слюны расщепляет 2 мл 0,1% раствора крахмала, а 1 мл 

неразведенной слюны будет расщеплять Х мл 0,1% раствора крахмала: 

1/160 мл - 2 мл 

1мл - Х мл 

21 

160 

Х= 

= 320 мл 0,1% раствора крахмалю. 

1 

Таким образом, амилазная активность слюны равняется 320 у.е. 

Тема 3. Исследование регуляции ферментативных процессов. 

Актуальность темы. Протекание биохимических реакций в организме возможно 

только при условии присутствия каталитически активных форм ферментов. 

Существует несколько путей регуляции активности ферментов: изменение 

каталитической активности фермента, изменение количества фермента. Благодаря 

активации или торможению активности ферментов увеличивается или уменьшается 

скорость биохимических реакций, которые лежат в основе процессов 

жизнедеятельности. Нарушение регуляции активности ферментов приводит к 

развитию патологических процессов в организме человека. 

Цель и начальный уровень знаний-умений. 

Общая цель: изучить регуляцию ферментативных процессов. 


1. Анализировать механизмы регуляции основных метаболических процессов. 

2. Анализировать пути и механизмы регуляции ферментативных процессов как 

основы обмена веществ в организме в норме и при патологиях. 

Исходный уровень знаний-умений: знать 

активные центры. 

свойства ферментов, их строение, 



Содержание и 

Указания к учебным действиям 


1. Практическое изучение 1.1. В тетрадь протоколов опытов выписать 

специфичности, торможения и алгоритм лабораторной работы. 

активации ферментов. 

2. Специфичность действия 


3. Регуляция 

ферментативных процессов. 

2.1. Объясните биологическую значимость 

специфичности действия ферментов, чем она 

обусловлена? Какие виды специфичности 

ферментов известны Вам? Приведите примеры. 

3.1. Регуляция активности ферментов путем 

изменения каталитической активности 

фермента: 

а) алостерическая регуляция активности 

ферментов; 

б) ковалентная модификация ферментов; 

в) активация ферментов путем 

9

4. Ингибиторы, активаторы 


ограниченного протеолиза; 

г) действие регуляторных белковэффекторов 

(кальмодулина, протеиназ, 

протеиназных ингибиторов, циклических 

нуклеотидов). 

3.2. Регуляция активности ферментов путем 

изменения количества фермента. 

4.1. Обратимое и необратимое 

ингибирование ферментов. 

4.2. Физиологически активные соединения и 

ксенобиотики как обратимые (конкурентные и 

неконкурентные) и необратимые ингибиторы 


5.1. На примере изоферментов 

5. Изоферменты – 

множественные молекулярные лактатдегидрогеназы (ЛДГ), креатинфосфокиназы 

формы белков, результат 

экспрессии разных генов. 

объясните значение их определения в клинике. 

5.2. Проферменты, их биологическая роль и 

значение. 


Подготовить реферативное сообщение на тему: “Протеиназы. Протеиназные 

ингибиторы”. 


1. Специфичность ферментов. 

Слюну развести в 5 раз ( 1 мл слюны + 4 мл воды). В 2 пробирки налить по 5 кап. 

разведенной слюны. В первую пробирку добавить 10 кап. 1% раствора крахмала, во 

вторую – 10 кап. 1% раствора сахарозы. Обе пробирки поместить на 10 мин. в 

термостат при температуре 38 0 С, после чего выполнить реакцию Фелинга на 

углеводы. 

Реакция Фелинга: к 5 кап. исследуемой смеси прибавить 3 кап. раствора 

Фелинга (CuSO 4 + NaOH), подогреть. В присутствии глюкозы или мальтозы выпадает 

желтый осадок гидрата закиси меди или красный осадок закиси меди. 

2. Влияние активаторов и ингибиторов на активность амилазы слюны. 

В 3 пробирки налить по 1 мл слюны, разведенной в 10 раз (1 мл слюны + 9 мл 

воды). В первую пробирку добавить 1 кап. 1% раствора хлорида натрия, во вторую – 

1 кап. 1% раствора сернокислой меди, в третью – 1 кап. воды, потом в каждую 

пробирку добавить по 5 кап. 1% раствора крахмала, перемешать и оставить при 

комнатной температуре на 4-5 минут. Провести реакцию на крахмал с реактивом 

Люголя (КІ 3 ). 

Реакция на крахмал: к 5 кап. исследуемой смеси добавить 1 кап. раствора 

Люголя. В присутствии крахмала появляется синяя окраска. 

3. Исследовать влияние фосфакола и ионов кальция на активность 

холинестеразы. 

Принцип метода. Холинестераза катализирует реакцию гидролиза 

нейромедиатора – ацетилхолина с образованием холина и уксусной кислоты. В крови 

человека содержится два вида холинестеразы. В сыворотке содержится 

неспецифическая псевдохолинестераза, которая расщепляет не только ацетилхолин, 

но и другие эфиры холина. В эритроцитах содержится специфическая, истинная 

ацетилхолинестераза, которая расщепляет лишь ацетилхолин. 

10

Фосфорорганические соединения (ФОС, фосфакол) являются необратимыми 

ингибиторами холинестеразы и ацетилхолинестеразы, поскольку ковалентно 

связываются с активным центром фермента и тормозят его активность. Препараты 

ФОС являются высокотоксичными ядами для насекомых (пестициды) и теплокровных 

животных. Механизм тормозного действия заключается в связывании с ОН-группой 

серина в активном центре фермента. 

Рост концентрации ионов Са 2+ в нервном окончание является непосредственным 

биохимическим сигналом, что активирует выход ацетилхолина через 

пресинаптическую мембрану, его взаимодействие с холинорецепторами 

постсинаптической мембраны и расщепления медиатора в синаптической щели 

ацетилхолинестеразой. Поэтому ионы кальция являются мощным активатором 

холинестеразы. 

Метод количественного определения холинестеразы основан на титровании 

щелочью уксусной кислоты, что высвободилась в процессе гидролиза ацетилхолина. 

Количество щелочи, которое израсходовано на титрование является мерой 

активности фермента. 

Ход работы. Три пробирки заполняют реактивами по таблице. 

Содержание пробирок 

№ пробирки 

1 2 3 

Сыворотка крови, мл 0,5 0,5 0,5 

Раствор CaCl 2 , капель --- 5 --- 

Раствор фосфакола, капель --- --- 5 

Инкубация при комнатной температуре, 5 минут 

2%-ной раствор ацетилхолина 1,5 1,5 1,5 

Инкубация 10 минут 

Фенолфталеин, капель 2 2 2 

Количество 0,1 М NaOH, 

которое израсходовано на 

титрование 

По результатам проведенного эксперимента сделать выводы. 

Тема 4. Медицинская энзимология. 


Уменьшение концентрации или полное отсутствие какого-нибудь фермента в 

живой системе является результатом генетической неспособности к его биосинтезу и 

проявляется специфической патологией. В настоящее время известно около 150 

таких энзимопатий (в обмене простых и сложных белков, в обмене углеводов, липидов 

и азотистых оснований). 

Изменение активности ферментов в тканях может служить критерием 

биохимической диагностики, а изучение динамики этих изменений указывает на 

эффективность лечения. 

Чистые ферменты и их смеси широко используются как лекарственные препараты 

в терапии, хирургии, офтальмологии и других областях медицины. 



Объяснить изменения хода ферментативных процессов и накопления 

промежуточных продуктов метаболизма при врожденных (наследственных) и 

приобретенных пороках метаболизма – энзимопатиях. 

11


1. Анализировать изменения активности индикаторных ферментов плазмы крови при 

патологии определенных органов и тканей. 

2. Объяснить применение ферментных препаратов и ингибиторов ферментов как 

фармакологических препаратов при определенных патологических состояниях. 

Исходный уровень знаний-умений: 

1. Знать строение глутарата, пирувата и α-аминокислот. 

2. Знать принцип колориметрии и порядок работы на ФЕК. 


учебной литературы при подготовке. 




1. Практическое изучение 1.1. В тетрадь протоколов записать 

определения активности АсАТ и АлАТ в алгоритм лабораторной работы. 

сыворотке крови. 

2. Медицинская энзимодиагностика. 2.1. Современные аспекты 

энзимодиагностики: клеточные, 

секреторные та экскреторные 

ферменты. 

2.2. Изоферменты в 

энзимодиагностике, 

тканевая 

специфичность распределения 


2.3. Изменение активности 

ферментов плазмы и сыворотки крови 

как диагностические показатели 

развития патологических процессов в 

организме. 

2.4. Применение энзимодиагностики 

в кардиологии, гепатологии, 

нефрологии, урологии, онкологии, 

пульмонологии, ортопедии, и тому 

подобное (примеры). 

3. Энзимопатология. 3.1. Нарушение протекания 

ферментативных 

процессов: 

наследственные и приобретенные 

энзимопатии. 

3.2. Врожденные пороки 

метаболизма и их клинико-лабораторное 

исследование. 

4. Энзимотерапия в медицинской 

практике. 

4.1. Использование ферментов в 

качестве лекарственных средств. 

4.2. Фармакологическое 

применение ферментов желудочнокишечного 

тракта; свертываемой и 

фибринолитической системы крови, 

каликреин-кининовой и ренинангиотензиновой 

систем. 

5. Применение ингибиторов 5.1. Ингибиторы ферментов как 

ферментов в медицине. 

лекарственные средства. 

12


Подготовить реферативное сообщение по теме: 

1. Энзимопатология. 

2. Энзимодиагностика заболеваний миокарда, печени. 

3. Энзимотерапия. 


Количественное определение активности АсАТ и АлАТ в сыворотке крови. 

Принцип метода: определяется оптическая плотность раствора гидразона 

кетоглутарата и пирувата, которые образуются при взаимодействии аланина (или 

аспартата) с кетоглутаратом. Определение проводят в 1 см кювете при длине волны λ 

– 500-530 нм. При определении АсАТ – пируват образуется путем 

декарбоксилирования оксалоацетата. 

Реактивы: 

1. Эталонные 2 мМ раствора пирувата. 

2. 1 мМ раствор 2,4-динитрофенилгидразина в 1 М НCl. 

3. Раствор NаОН (16 ч. в 1000 мл Н 2 О). 

4. Субстрат АсАТ: а) 0,1 мМ раствор аспартата; 

б) 0,2 мМ раствор кетоглутарата; 

в) фосфатный буфер рН-7,4. 

5. Субстрат АлАТ: а) 0,2 мМ раствор аланина; 

б) 0,2 мМ раствор кетоглутарата; 

в) фосфатный буфер рН-7,4. 

Реактивы, 

последовательность 

действия 

Определение активности АсАТ. 

Опытная проба 

Контроль 

Реактив 4 0,25 мл 0,25 мл 

Физраствор --- 0,05 мл 

Сыворотка крови 0,05 мл --- 

Инкубация до 60 мин. 

При t = 23 о С + + 

Реактив 2 0,25 мл 0,25 мл 

Перемешиваем и 

оставляем на 20 мин. 

+ + 

при t = 23 о С 

Раствор щелочи 2,5 мл 2,5 мл 

Перемешиваем и через 10 мин. определяем оптическую плотность опытной 

пробы против контроля в кювете 1см при длине волны λ – 500-530 нм. 

Определение активности АлАТ проводят по той же схеме, но вместо реактива 4, 

берут реактив 5. 

Для расчета активности строят калибровачный график с растворами 1 и 2. 

В сыворотке крови здорового человека активность: 

АсАТ = 0,1 – 0,45 мМ / г / л 

АлАТ = 0,1 – 0,68 мМ / г / л 

13

Тема 5. Исследование роли кофакторов и коферментных 

витаминов в каталитической активности ферментов. 


Ферменты как катализаторы принимают участие во всех без исключения 

биохимических процессах, которые лежат в основе жизнедеятельности живой 

материи. Коферменты входят в состав большинства ферментов и практически 

определяют активность последних. 

Коферментные (активные) формы водорастворимых витаминов принимают 

участие в регуляции жизненно важных биологических процессов, а также находят 

широкое применение в клинической практике для коррекции нарушений процессов 

метаболизма. 

Цель и исходный уровень знаний-умений. 

Общая цель: уметь трактовать биохимические закономерности 

функционирования витаминов (по их коферментным формам) как компонентов 

питания человека и регуляторов ферментативных реакций и обменных процессов. 

Уметь четко исследовать взаимосвязь патогенеза расстройств при разных 

гиповитаминозах с функционированием определенных звеньев обмена веществ. 

Конкретная цель: иметь четкое понятие о биологических функциях 

водорастворимых коферментных витаминов В 2 , РР, В 6 . Уметь писать формулы 

наиболее важных коферментов, и понимать принципы и цель определения в 

биологических жидкостях их предшественников. 

Исходный уровень знаний-умений. Интерпретировать механизмы участия 

витаминов в построении коферментов, которые катализируют биохимические реакции 

в организме (на примере НАД+). 






1. Практическое изучение 1.1. В тетрадь протоколов практических 

качественных реакций на занятий выписать алгоритм лабораторной 

витамины В 2 , РР, В 6 . 

работы. 

2. Небелковая часть сложных 


2.1. Определение понятия 

“коферменты”. Водорастворимые витамины 

как предшественники в биосинтезе 

коферментов. 

2.2. Определение понятия “кофакторы”, 

их влияние на структуру и каталитическую 

активность ферментов. 

3. Коферменты. 3.1. Строение и свойства коферментов. 

3.2. Классификация коферментов по 

химической природе. 

3.3. Классификация коферментов по 

типу реакции, которая катализуеться: 

а) коферменты, которые являются 

переносчиками протонов и электронов 

водорода; 

б) коферменты, которые являются 

переносчиками химических групп; 

в) коферменты синтеза, изомеризации и 

14

4. Характеристика и свойства 

коферментных форм витаминов 

В 2 , РР, В 6 . 

расщепления углерод-углеродных связей. 

4.1. Участие коферментных форм 

витаминов В 2 и РР в окислительновосстановительных 

реакциях. 

4.2. Влияние коферментных 

производных витаминов В 6 на отдельные 

звенья метаболизма. 


1. Создания схемы в электронном варианте по теме “Коферментные витамины”. 

2. Написание структурных формул коферментных витаминов и объяснения 

механизма образования их биологически активных (коферментных) форм. 


1) Качественная реакция на витамин B 2 . 

Принцип метода: реакция на витамин B 2 базируется на его способности легко 

восстанавливаться, при этом раствор B 2 желтого цвета, приобретает сначала розовый 

цвет, а затем обесцвечивается, так как образуется восстановленная форма B 2 . 

Ход работы: к 10 кап. витамина B 2 добавляют 5 кап. HCl и железную стружку. 

Наблюдают выделение пузырей водорода. Раствор постепенно окрашивается в 

розовый цвет, а затем обесцвечивается. 


Принцип метода: витамин B 6 при взаимодействии с раствором хлорного железа 

образует комплексную соль типа фенолята железа красного цвета. 

Ход работы: к 5 кап. витамина B 6 добавляют 5 кап. 1% раствора хлорного железа. 

Образуется комплекс красного цвета. 

Тема 6. Исследование роли кофакторов и коферментных 

витаминов в каталитической активности ферментов. 


Витамины принимают участие в регуляции жизненноважных процессов, в 

частности, они необходимы для функционирования цикла тpикаpбоновых кислот, 

биоэнеpгетических процессов и другое. Витамины находят широкое применение в 

клинической практике для коррекции разных нарушений обмена веществ. 

Принцип качественных реакций на витамины лежит в основе многих методов 

определения последних в биологических жидкостях и продуктах питания. 

Цель и исходный уровень знаний-умений. 


Уметь применять знание по биохимии для объяснения патогенеза расстройств при 

витаминной недостаточности, а также их профилактика и обоснования терапии 

заболеваний, в симптомокомплексе которых имеет место абсолютная или 

относительная недостаточность витаминов. 

Конкретные цели: трактовать роль витаминов и их биологически активных 

производных в механизмах катализа при участии основных классов ферментов. 

15

Анализировать пути и механизмы регуляции ферментативных процессов, как основы 

обмена веществ в организме в норме и при патологиях. 

Исходный уровень знаний-умений. Знать структуру биоорганических 

соединений, которые входят в состав витаминов. 






1. Практическое изучение 1.1. В тетрадь протоколов практических 

качественных реакций на занятий выписать алгоритм лабораторной 

витамины. 

работы. 

2. Теоретическое изучение 

коферментных витаминов. 

2.1. В тетрадь самоподготовки записать 

формулы витаминов, их биологическую роль 

и механизм действия. 

2.2. Дать определение понятий: 

"витамины", "антивитамины", "провитамины" 

(условия их превращения в витамины). 

Объясните клиническое применение 

витаминов и антивитаминов на конкретных 

примерах. 

2.3. Кофермент ацетилирования 

(Коэнзим-А) – производный пантотеновой 

кислоты. Биологические свойства витамина 

В 3 , механизм действия. 

2.4. Коферменты – производные 

фолиевой кислоты. Витамин Вс (фоллиевая 

кислота): биологические свойства, механизм 

действия. 

2.5. Липоевая кислота: кофермент в 

реакциях 

окислительного 

декарбоксилирования кетокислот и 

аэробного окисления глюкозы. 

2.6. Кофермент тиаминдифосфат. 

Витамин В 1 (тиамин): строение, 

биологические свойства, механизм действия. 

2.7. Кофермент карбоксибиотин. Витамин 

Н (биотин): биологические свойства, 

механизм действия. 

2.8. Коферменты – производные 

витамина В 12. Витамин В 12 (кобаламин): 

биологические свойства, механизм действия. 


Подготовка обзора научной литературы по выбранным темам: 

1. Роль витамина С в метаболизме соединительной ткани. 

2. Лечебное применение витамина С. 

3. Лечебное применение витамина В 12 . 



16

Принцип метода: в щелочной среде тиамин окисляется в тиохpом феppицианид 

калия. Тиохpом способный флуоресцировать синим цветом при ультрафиолетовом 

облучении раствора на флуоpоскопе. 

Ход работы: к 0,5 мл витаминов добавляют 5 кап. 5% раствора K 3 Fe(CN) 6 , 5 кап. 

30% раствора NaOH и 15 кап. бутанола (тщательным образом смешать!). Наблюдают 

синюю флуоресценцию на флуоpоскопе. 

2) Количественное определение витамина C в моче. 

Принцип метода: метод базируется на способности витамина C восстановливать 

2,6-дихлоpфенолиндофенол, который в кислой среде имеет красный цвет, а при 

восстановлении обесцвечивается. 

Ход определения: в колбочку отмеряют 10 мл мочи и 10 мл H 2 O, добавляют 20 

кап. 10% HCl и титруют 0,001н раствором 2,6-дихлоpфенолиндофенолом (ДНФ) до 

розового цвета. 

Расчет: 

0,088 А В 

X = 

, где X - содержание витамина C в мг/сут 

Б 

0,088 - количество витамина C, мг (эмпирическая величина) 

А - результат титрования, 0,001 н раствором ДНФ, мл 

Б- объем мочи, взятый для титрования (10 мл) 

B - суточный диурез (1500-2000 мл) 

Hоpма: 20 - 30 мг/сут. 

113,55 - 170,33 мкмоль/сут. 

Тема 7. Обмен веществ и энергии. Исследование 

функционирования цикла трикарбоновых кислот. 


Цикл трикарбоновых кислот является общим путем катаболизма органических 

веществ и важным этапом биологического окисления. Нарушение функционирования 

цикла трикарбоновых кислот приводит, прежде всего, к гипоэнергетическим 

состояниям и увеличению альтернативных путей использования ацетил-КоА, в 

частности кетогенеза. 



Изучить биохимические закономерности функционирования цикла трикарбоновых 

кислот и его регуляцию. 


1. Трактовать биохимические закономерности протекания обмена веществ. 

2. Трактовать биохимические закономерности функционирования цикла 

трикарбоновых кислот, его анаплеротических реакций и амфиболитическую роль. 

3. Объяснять биохимические механизмы регуляции процессов анаболизма и 

катаболизма. Объяснять биохимические механизмы регуляции цикла 

трикарбоновых кислот и его ключевую роль в обмене веществ и энергии. 

Исходный уровень знаний-умений: знать строение органических (ди- и 

трикарбоновых) 

кислот. 

17






1. Практическое изучение 1.1. Записать в тетрадь протоколовопытов 

метода алгоритм лабораторной работы. 

количественного 

определения лимонной кислоты. 

2. Метаболические пути. 2.1. Катаболизм как совокупность 

Определить 

понятия процессов расщепления биомолекул 

катаболические, анаболические и (глюкоза, аминокислоты, жирные кислоты до 

амфиболические 

пути конечных продуктов). 

метаболизма. 

2.2. Анаболизм как синтез биомолекул, 

необходимых для построения клеточных 

структур. 

3. Три общие стадии 3.1. Стадия 1 - распад сложных 

катаболизма биомолекул. макромолекул до простых компонентов. 

3.2. Стадия 2 - внутриклеточный 

катаболизм углеводов, липидов и 

аминокислот. 

3.3. Ацетил-КоА – общий конечный 

продукт второй стадии внутриклеточного 

метаболизма углеводов, липидов и 


3.4. Стадия 3 – окисление ацетил-КоА до 

конечных продуктов – СО 2 и Н 2 О. 

3.5. Общая характеристика ЦТК и 

система транспорта электронов в 

мембранах митохондрий (тканевое 

дыхание) и сопряжения с окислительным 

4. Общая характеристика 

цикла трикарбоновых кислот. 

5. Регуляция цикла 

трикарбоновых кислот 

фосфорилированием. 

4.1.Биохимическое значение цикла 

трикарбоновых кислот. 

4.2. Схема функционирования, 

последовательность реакций. 

4.3.Ферментативные реакции цикла 

трикарбонових кислот: характеристика 


4.4.Особенности функционирования 

α-кетоглутаратдегидрогеназного 

мультиэнзимного комплекса . 

4.5.Реакции 

субстратного 

фосфорилирования в цикле трикарбоновых 

кислот. 

4.6.Суммарный баланс молекул АТФ, 

которые образуются при функционировании 

цикла. 

4.7.Анаплеротические и амфиболические 

реакции цикла трикарбоновых кислот. 

5.1. Объясните биохимические механизмы 

регуляции цикла трикарбоновых кислот и его 

ключевую роль в обмене веществ и энергии. 

18


Количественное определение лимонной кислоты. 

Принцип метода: метод основывается на реакции взаимодействия лимонной 

кислоты с солями меди и железа при их одновременном присутствии. Продукты, 

которые образуются в реакции, имеют желто-зеленый цвет; интенсивность окраски 

пропорциональна количеству лимонной кислоты. 

Ход определения: В пробирку отмеряют 1 мл исследуемой сыворотки, добавляют 

7,5 мл воды, а затем 1мл 10% раствора сульфата меди и 0,5 мл 15% раствора 

железо-амонийнных квасцов в 5% азотной кислоте. Параллельно ставят стандарт: те 

же реактивы и в той же последовательности, но вместо сыворотки берем 1 мл 

раствора лимонной кислоты известной концентрации. Содержание пробирок 

(отдельно) перемешивают и через 5 минут определяют оптическую плотность 

растворов на ФЭК при синем светофильтре в 5 мм кювете. 

По найденным величинами оптической плотности стандарта и сыворотки 

составляем пропорцию и рассчитываем содержание лимонной кислоты в сыворотке. 

В норме концентрация лимонной кислоты в крови 88 - 156 мкмоль/л (1,7 - 3.0 мг%). 

Тема 8. Биоэнергетические процессы: биологическое окисление, 

окислительное фосфорилирование. Хемиосмотическая теория 

окислительного фосфорилирования. Ингибиторы и разобщители 

окислительного фосфорилирования. 


Биологическое окисление является конечным этапом распада углеводов, липидов 

и белков в живых организмах. Оно реализуется мультиэнзимными комплексами 

внутренних мембран митохондрий, сопровождается поглощением кислорода и 

выделением СО 2 , воды и энергии, которая частично аккумулируется в связях АТФ, что 

синтезируется. 

Гипоксии, и некоторые естественные и синтетические соединения нарушают 

биологическое окисление или окислительное фосфорилирование, что приводит к 

энергетическому кризису и необратимым изменениям в организме. 



Знать основы биоэнергетики тканей, механизмы развития энергодефицита и 

необратимых изменений в организме при гипоэнергетических состояниях. 


1. Трактовать роль биологического окисления, тканевого дыхания и 

окислительного фосфорилирования в генерации АТФ при аэробных условиях. 

2. Анализировать нарушение синтеза АТФ при условиях действия на организм 

человека патогенетических факторов химического, физического и 

биологического происхождения. 

Исходный уровень знаний-умений: знать особенности окислительновосстановительных 

реакций, уметь объяснить биологическую роль витаминов РР и В 2 

и ферментов І-го класса в этих реакциях. 

19






1. Практическое изучение 1.1. К какому классу и подклассу 

определения активности ферментов принадлежат эти ферменты? 

цитохромоксидазы митохондрий. 1.2. Записать в тетрадь протоколовопытов 

алгоритм лабораторной работы и 

объяснит принцип метода определения 

активности цитохромоксидазы митохондрий. 

2. Реакции биологического 2.1. Типы реакций (дегидрогеназная, 

окисления. 

оксидазная, оксигеназная) их биологическое 


3. Молекулярная организация 3.1. Компоненты дыхательной цепи как 

митохондриальной 

биологического окисления. 

цепи 

4. Окислительное 

фосфорилирование. 

5. Хемиосмотическая теория 

окислительного 

фосфорилирования – 

молекулярный механизм 

генерации АТФ в процессе 

биологического окисления. 

6. Ингибиторы и разобщители 

тканевого дыхания. 

окислительно-восстановительные пары 

кофакторов. 

3.2. Молекулярные комплексы 

внутренних мембран митохондрий. 

4.1. Освобождение энергии в 

дыхательной цепи и участки образования 

АТФ. 

4.2. Коэффициент окислительного 

фосфорилирования, пункты сопряжения. 

5.1. Электрохимический градиент 

протонов (Δμ Н+ ). Физико-химические 

составляющие электрохимического 

градиента протонов. 

6.1. Ингибиторы транспорта электронов 

(ротинон, амитал, цианиды, СО). 

6.2. Разобщители окислительного 

фосфорилирования (2,4-динитрофенол, 

гормоны щитовидной железы, свободные 

жирные кислоты). 

6.3. Нарушение синтеза АТФ в условиях 

действия на организм человека патогенных 

факторов химического, физического и 

биологического происхождения. 


Определение активности цитохромоксидазы – компонента дыхательной цепи 

митохондрий. 

Принцип метода. Цитохромы – сложные белки гемпротеины, относятся к классу 

ферментов – оксидо-редуктаз, собравшиеся во всех животных и растительных 

клетках. Благодаря тому, что атомы железа в цитохромах легко изменяют свою 

валентность, цитохромы является компонентами дыхательной цепи митохондрий и 

переносчиками электронов от восстановленного убихинона на кислород. В 

цитохромной системе передавать электроны на кислород может лишь цитохром а-а 3 – 

цитохромоксидазы в состав которой входит медь. 

20

Метод определения активности цитохромоксидазы основан на способности 

диметилпарафенилендиаминхлорида (ДПФД) быть донором электронов для 

цитохрома с. ДПФД неферментативно восстанавливает цитохром с, а сам окисляясь, 

превращается в красный пигмент, количественное образование которого является 

пропорциональным активности цитохромоксидазы митохондрий. 

Ход работы. Две пробирки: контрольную и опытную заполняют реактивами по 

таблице: 

Содержание пробирок 

Пробирка 

Контрольн 

ая 

Опытна 

я 

Фосфатный буфер, рН = 7,4 1,0 мл 1,0 мл 

Раствор цитохрома с 2 капли 2 капли 

Суспензия митохондрий 0,5 мл 0,5 мл 

Раствор ДПФД 0,5 мл 0,5 мл 

Этиловый спирт 1,0 мл --- 

Физраствор --- 1,0 мл 

Инкубация в термостате 5 мин. при 37 о С 

Результаты: появление красной окраски 

Добавление этилового спирта инактивирует цитохромоксидазу и ферментативное 

превращение цитохрома с. Пробирки помещают в термостат на 5 минут при 37 о С и 

наблюдают за появлением красной окраски. 

По результатам проведенного эксперимента сделать выводы. 

Тема 9. Исследование гликолиза – анаэробного окисления 

глюкозы. Глюконеогенез. 


Освобождение энергии солнца, аккумулированной в химических связях глюкозы, 

начинается при гликолизе в реакции субстpатного окислительного 

фосфоpилирования. В этом процессе часть энергии глюкозы трансформируется в 

энергию макроэргических фосфатных связей, которые используются на ресинтез АТФ, 

то есть форму энергии, доступную для использования всеми тканями при выполнении 

разных видов работы (синтеза, механической, транспорта веществ через мембраны). 

При напряженной работе мышц временно возникают анаэробные условия, и тогда 

основным процессом, что обеспечивает энергией мышцы, становится гликолиз – 

анаэробное окисление глюкозы. В норме конечный продукт гликолиза – молочная 

кислота, - быстро ресинтезируется в печени в глюкозу и гликоген и частично 

окисляется. 

Многие заболевания сопровождаются гипоксией тканей (сердечно-сосудистые 

заболевания, заболевания легких и др.), что приводит к накоплению в тканях 

молочной кислоты, развитию ацидоза, и, соответственно, расстройству обмена 

веществ и функций органов. Определение молочной кислоты в крови является тестом 

для оценки интенсивности гликолиза. Гиперлактатемия – маркер блока аэробных 

путей окисления глюкозы. 


21


Уметь использовать знания о анаэробном обмене углеводов для объяснения 

состояния организма в норме и при патологии, что сопровождаются гипоксией. 


1. Трактовать биохимические закономерности внутриклеточного метаболизма 

углеводов: анаэробный гликолиз. 

2. Уметь писать химизм реакций гликолиза. 

Исходный уровень знаний-умений: уметь писать строение углеводов 

(биоорганическая химия): глюкозы, фруктозы. Уметь писать строение спиртов, 

альдегидов, карбоновых кислот. 






1. Практическое изучение 1.1. Определение молочной кислоты 

метода определения молочной методом Уффельмана. 

кислоты. 

2. Анаэробный гликолиз. 

Биологическая роль, химизм, 

механизм регуляции. 

3. Теоретическое изучение 

процесса глюконеогенеза. 

2.1. Общая характеристика анаэробного 

окисления глюкозы. 

2.2. Последовательность реакций и 

ферменты гликолиза. 

2.3. Гликолитическая оксидоредукция: 

субстратное фосфорилирование и 

челночные механизмы окисления 

гликолитического НАДН. Эффект Пастера. 

2.4. Регуляция гликолиза. 

2.5. Спиртовое и другие виды брожения. 

2.6. Пути утилизации молочной кислоты. 

2.7. Причины и последствия 

гиперлактатемии. 

3.1. Какой процесс называется 

„глюконеогенез”? В каких тканях он активно 

проходит? 

3.2. Физиологичное значение 

глюконеогенеза. 

3.3. Метаболический путь 

глюконеогенеза; необратимые реакции 

гликолиза, реакции и ферменты, что 

позволяют их обойти. 

3.4. Компартментализация превращение 

пирувата в фосфоэнолпируват. 

3.5. Субстраты глюконеогенеза. Лактат и 

аланин как субстраты глюконеогенеза. 

3.6. Глюкозо-лактатный цикл (цикл Кори). 

3.7. Глюкозо-аланиновый цикл. 

3.8. Метаболическая и гормональная 

регуляция глюконеогенеза. Регуляторные 

ферменты. Болезнь Иценко-Кушинга 

(стероидный диабет). 

22

Задание для индивидуальной самостоятельной работы студентов. 

1. Написать ферментативные реакции превращения интермедиатов в гликолизе. 

2. Построить схему гликолиза. 

3. Создать схему регуляции обмена глюкозы. 


Определение конечного продукта анаэробного гликолиза – молочной кислоты 

методом Уффельмана. 

Принцип реакции. При взаимодействии комплексного соединения фенолята 

железа фиолетового цвета с молочной кислотой образуется лактат железа желтозеленого 

цвета. 

Ход работы: помещаем в пробирку 1 мл сыворотки крови, добавляем 5 капель 1% 

раствора FeCL 3 и 1,0 мл раствора фенола. Наблюдаем за появлением желтозеленого 

цвета. 

Тема 10. Исследование аеробного окисления глюкозы. 


Аэpобное окисление глюкозы играет важную роль в процессах жизнедеятельности 

как главный процесс энергообразования (особенно для нервной ткани, сердечной 

мышцы). При патологии которая сопpовождается гипоксией тканей (инсульт, инфаркт 

миокарда, облитерирующие заболевания сосудов, заболевания органов дыхания) 

нарушается аэробный обмен углеводов, это приводит к расстройству других видов 

обмена веществ и нарушению функций органов и тканей. 



Уметь использовать знание об аэpобном окислении глюкозы для объяснения 

энергетических процессов организма в норме и нарушении их в анаэробных условиях. 

Уметь использовать в клинике определения ПВК для оценки энергетического обмена 

человека. 



углеводов: аэробное окисление глюкозы. 

2. Анализировать изменения уровня ПВК в клинике для оценки энергетического 

обмена человека и обеспечения витамином В 1 . 

Исходный уровень знаний-умений: уметь писать структуры глюкозы, кетокислот. 

Знать строение холоферментов и роль коферментов. Знать энергетический обмен. 

23




и 


1. Практическое изучение 

определения пировиноградной 

кислоты в биологических 

жидкостях. 

2. Изучение аэробного 


3. Клиническое значение 

определения пировиноградной 

кислоты в биообъектах. 


1.1. Определение пировиноградной 

кислоты в моче. 

2.1. Этапы аэробного окисления 

глюкозы. 

2.2 Окислительное 

декарбоксилирование пирувата. 

2.2.1. Мультиферментный 

пируватдегидрогеназный комплекс – 

особенности функционирования при 

участии трех ферментов и пяти 

коферментов. Суммарное уравнение 

процесса. 

2.3. Сравнительная характеристика 

биоэнергетики аэробного и анаэробного 


2.4. Эффект Пастера – переключение из 

анаэробного на аэробное окисление 

глюкозы, особенности регуляции. 

2.5. Челночные механизмы окисления 

гликолитического НАДН. Малатаспартатный 

шунт транспорта 

восстановительных 

эквивалентов 

гликолитического НАДН в митохондрии в 

аэробных условиях. 

3.1. Причины и последствия 

пируватэмии. 


Подготовить реферат на тему: ”Участие водорастворимых витаминов в 

углеводном обмене и их клиническое применение”. 


Количественное определение пировиноградной кислоты в моче. 

Принцип метода: пировиноградная кислота (ПВК) при взаимодействии с 2,4- 

динитрофенилгидразином (2,4-ДФГ) в щелочной среде образует окрашенный 

комплекс жѐлто-оранжевого цвета. Интенсивность окраски прямо пропорциональная 

количеству ПВК. 


(Использовать сухую посуду). В первую пробирку наливают 0,5 мл мочи; во 

вторую – 0,5 мл стандарта. Потом в обе пробирки добавляют по 1 мл раствора 2,4- 

ДФГ; и через 5 минут – по 4 мл концентрированного раствора KOH. 

Перемешивают и через 5 минут определяют оптическую плотность (экстинкцию) 

растворов на ФЕК, в кювете на 5 мм с синим светофильтром. По величинам 

24

экстинкций стандарта и опыта рассчитывают содержание ПВК в суточном объеме 

мочи. 

В норме за сутки с мочой выделяется: 

10 – 25 мг (114 – 284 мкмоль) ПВК. 

Повышение экскреции отмечают при недостатке витамина B 1 и гипоксиях разного 

происхождения. 

Тема 11. Альтернативные пути обмена моносахаридов. 

Метаболизм фруктозы и галактозы. 


К альтернативным путям обмена моносахаридов относят пентозофосфатный и 

глюкуронатный пути обмена глюкозы, обмен фруктозы и галактозы. 

Пентозофосфатный путь обмена глюкозы – источник пентоз для синтеза 

нуклеотидов, нуклеиновых кислот, коферментов, кроме этого является источником 

восстановленного НАДФН, который используется при синтезе жирных кислот, 

холестерола, стероидных гормонов и других соединений. 

Фруктоза и галактоза включаются в путь обмена глюкозы. При нарушении 

превращения фруктозы и галактозы развивается фруктоземия и галактоземия. 


Общая цель: изучить альтернативные пути обмена моносахаридов. 

Конкретные цели: трактовать биохимические закономерности путей обмена 

моносахаридов, пентозофосфатный путь окисления глюкозы, путь уроновых кислот. 

Исходный уровень знаний-умений: уметь писать строение моносахаридов, 

гексуроновых кислот. 






1. Практическое изучение 1.1. Количественное определение пентоз в 

метода определения пентоз в сыворотке в крови. 

крови. 

2. Пентозофосфатный путь 2.1. Биологическое значение и особенности 

(ПФП) обмена глюкозы. 

функционирования пентозофосфатного пути в 

разных тканях. 

2.2. Последовательность ферментативых 

реакций ПФП: 

а) окислительная стадия; 

б) стадия изомерных превращений. 

2.3. Нарушение пентозофосфатного пути 

обмена глюкозы в эритроцитах: энзимопатия 

глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназы. 

3. Метаболизм фруктозы. 3.1. Метаболический путь и ферментативные 

реакции превращения фруктозы в организме 


3.2. Наследственные энзимопатии, связанные с 

25

генетическими дефектами синтеза ферментов 

метаболизма фруктозы – непереносимость 

фруктозы (фруктоземия). 

4. Метаболизм галактозы. 4.1. Метаболический путь и ферментативные 

реакции превращения галактозы в организме 


4.2. Наследственные энзимопатии, связанные с 

генетическими дефектами синтеза ферментов 

метаболизма галактозы – галактоземия. 

Задание для индивидуальной самостоятельной работы студентов: 

1. Построить схемы метаболических путей обмена углеводов. 

2. Оценивать состояние углеводного обмена по биохимическим показателям при 

патологических процессах. 

3. Клиническое значение галактозной пробы. 


1. Количественное определение пентоз в крови. 

Принцип метода: метод базируется на цветной реакции между пентозой 

(рибозой или дезоксирибозой) и орцином в кислой среде в присутствии Fe 3+ . При их 

взаимодействии образуется комплекс зеленого цвета. Интенсивность окраски зависит 

от количества пентоз. 

Ход работы: 

В пробирку к 0,5 мл исследуемых растворов добавить 0,5 мл 1% оpцина 

(приготовленного на 0,1% растворе FeCl 3 в концентрированной HCl). Одновременно 

поставить стандарт: взять 0,5 мл раствора пентозы известной концентрации и 

добавить 0,5 мл орцинового реактива. 

Пробирки поместить в кипящую водяную баню на 40 минут. Потом вытянуть, 

прибавить по 5 мл воды; перемешать содержание пробирок и определить оптическую 

плотность растворов на ФЭК в кювете на 5 мм при красном светофильтре (λ = 665 нм). 

По величинами оптической плотности стандарта и исследуемого раствора 

составить пропорцию и рассчитать содержание пентоз. 

В норме концентрация пентоз: в крови – меньше 133 мкмоль/л (2мг%), 

в моче – в среднем около 250 мг/сут. 

Тема 12. Исследование катаболизма и биосинтеза гликогена. 

Регуляция обмена гликогена. 


Знание врачом биохимических механизмов синтеза и распада гликогена, как 

процессов регулирующих концентрацию глюкозы в крови, имеет важное значение для 

оценки состояния углеводного обмена, понимания патогенеза отдельных 

наследственных и ненаследственных заболеваний и их диагностики. 



Выучить и написать схемы биохимических процессов синтеза и распада гликогена, 

их регуляция и значение в патогенезе гликогенозов и агликогенозов. 


26

1. Трактовать функциональные особенности и биологическое значение синтеза и 

распада гликогена в тканях. 

2. Объяснять молекулярно-биологические основы наследственных энзимопатий 

связанных с обменом гликогена. 

Исходный уровень знаний-умений: уметь писать структуру мономеров и 

определять типы связей в молекулах наиболее распространенных гомо- и 

гетерополисахаридов. 






1. Практическое изучение 1.1. Выявление гликогена в печени. 

выявления гликогена в печени. 

2. Синтез гликогена и его 2.1. Структура гликогена и его 

нарушения. 

биологическая роль. 

2.2. Объясните механизмы биосинтеза 

гликогена (реакции, ферменты). 

2.3. Генетические нарушения 

ферментных систем синтеза гликогена, 

характеристика 

наиболее 

3. Катаболизм гликогена. 

Регуляция обмена гликогена. 

4. Метаболизм углеводных 

компонентов гликоконъюгатов. 

распространенных агликогенозов. 

3.1. Объясните биохимические 

механизмы распада гликогена в печени и 

мышцах: реакции, ферменты, 

биологическая роль. Чем отличается распад 

гликогена в печени и мышцах? 

3.2. Гормональная регуляция обмена 

гликогена: каскадный механизм ц-АМФзависимой 

регуляции активности 

гликогенфосфорилазы и гликогенсинтетазы. 

3.3. Генетические нарушения процесса 

распада гликогена (гликогенозы). 

4.1. Биосинтез О- и N- связанных 

гликопротеинов; 

значение 

гликозилтрансфераз и долихолфосфата. 

4.2. Биосинтез гликолипидов на примере 

образования олигосахаридных фрагментов 

детерминант групп крови человека системы 

АВ0. Ферменты катаболизма 

гликоконъюгатов. Генетические нарушения 

метаболизма гликоконъюгатов (ревматизм, 

гликозидозы, 

гликолипидозы). 

мукополисахаридозы, 


Создание схемы в электронном варианте: “Регуляция процессов синтеза и 

распада гликогена”. 

27


Количественное определение глюкозы в крови натощак. 

Принцип метода: глюкоза при взаимодействии с ортотолуидином образует продукт 

сине-зеленого цвета. Интенсивность окраски прямопропорциональна количеству 


В норме концетрация глюкозы крови: 

3,3 – 5,5 ммоль/л. 


В сухую пробирку вносят 2,0 мл ортотолуидинового реактива (отмеряют 

центрифужной мерной пробиркой) и добавляют к нему микропипеткой фильтрат крови 

– 0,2 мл (фильтрат получают путем смешивания 0,2 мл крови с 1,8 мл 3% раствора 

трихлоруксусной кислоты со следующим фильтрованием). 

В другую сухую пробирку вносят 2,0 мл ортотолуидинового реактива и 0,2 мл 

стандартного раствора глюкозы (4,5 ммоль/л). 

Пробирки помещают на 8 минут в кипящую водяную баню; потом охлаждают и 

содержание пробирок фотометрируют на ФЭК в 5 мм кювете при красном 

светофильтре (длина волны = 620 нм). 

По величинам экстинкций рассчитывают концентрацию глюкозы в крови. 

Пример расчета: 

экстинкция фильтрата - 0,28 

экстинкция стандарта - 0,25 

концентрация глюкозы в фильтрате - Х 

концентрация глюкозы в стандарте – 4,5 ммоль/л 

4,5 ммоль/л - 0,25 

Х - 0,28 

Х = 

4,5 

0,28 

0,25 

= 5,0 ммоль/л 

Тема 13. Исследование механизмов метаболической и 

гормональной регуляции обмена углеводов. Сахарный диабет. 


Регуляция обмена углеводов, на всех этапах их синтеза и распада, 

обеспечивается нейрогуморальным путем. Инсулин, модифицируя разные пути 

метаболизма углеводов, уменьшает уровень глюкозы в крови. Соматотропный, 

адренокортикотропный, тиреотропный гормоны, тироксин, адреналин, 

глюкокортикоиды и глюкагон вызывают гипергликемию. 

В то же время, углеводный обмен регулируется разными факторами, которые 

влияют на активность ферментов концентрацией: субстратов, метаболитов, 

коферментов, наличием или отсутствием кислорода. 



Знать интеграцию всех этапов обмена углеводов и контроль содержания глюкозы 

в крови, что достигается путем тесного взаимодействия нейрогенных и гуморальных 

28

факторов, главными среди которых являются гормоны, которые осуществляют гипо- и 

гипергликемическое влияние. 

Наиболее распространенным заболеванием основу которого составляет 

абсолютная или относительная инсулиновая недостаточность, является сахарный 

диабет. Каждый будущий врач должен хорошо усвоить механизмы гормональной 

регуляции обмена углеводов, так как данные знания объясняют биохимическую и 

клиническую диагностику, а также подходы к лечению патологических изменений 

обмена углеводов. 


1. Анализировать изменения уровня глюкозы крови, механизм ее гормональной 

регуляции (инсулин, глюкагон, адреналин), патологические проявления 

нарушений обмена глюкозы, сахарный диабет, голодание. 

Исходный уровень знаний-умений. 

Уметь писать формулы моно- и дисахаридов (биоорганическая химия). Знать 

эндокринные железы, которые принимают участие в регуляции обмена углеводов 

(биология, гистология). 






1. Практическое изучение 1.1. Принцип метода глюкозотолерантного 

глюкозотолерантного теста. теста. 

2. Гормоны-регуляторы 2.1. Механизмы гипогликемического 

обмена глюкозы, эффекты и эффекта инсулина. 

механизмы влияния на уровень 2.2. Механизм влияния на углеводный 


обмен глюкагона, адреналина, 

глюкокортикоидов. 

3. Глюкоземия: нормальное 3.1. Нормогликемия: механизмы ее 

состояние и его нарушение. поддержки. 

3.2. Гипогликемия: причины 

возникновения и последствия для организма. 

3.3. Гипергликемия – причины и 

осложнения. 

4. Сахарный диабет: 4.1. Клинико-биохимическая 

инсулинзависимый тип I и характеристика. 

инсулиннезависимый тип ІІ. 

4.2. Диагностические критерии сахарного 

диабета: 

а) глюкозотолерантный тест; 

б) двойная сахарная нагрузка. 

в) гликозилированный Нb А 1С . 

Индивидуальная самостоятельная работа студента: 

Подготовить реферативный доклад: “Метаболические изменения и осложнения 

при сахарном диабете”. 


Оральный глюкозотолерантный тест. 

Принцип метода: утром натощак определяют концентрацию глюкозы в крови, 

взятой из пальца. После этого пациенту дают выпить раствор глюкозы из расчета 1 г 

29

глюкозы на 1 кг веса тела. А затем, на протяжении 3-х часов, у него через каждый час 

берут кровь и определяют в ней концентрцию глюкозы ортотолуидиновым методом 

(см. предыдущее занятие). 

По найденным величинам строят сахарную кривую: по горизонтали откладывают 

время в часах, а по вертикали – концентрацию глюкозы в крови. 

В норме в крови здорового человека: 

1) Максимальное повышение уровня глюкозы наблюдается через 1 час после 

сахарной нагрузки; но не превышает “почечный порог”. 

2) ко второму часу уровень глюкозы в крови снижается ниже начального уровня. 

3) к третьему часу концентрация глюкозы в крови возвращается к норме. 

С, ммоль/л 

12,0 

10,0 

8,0 

6,0 

2 

4,0 1 

2,0 

1 2 3 час 

1 - сахарная кривая в норме; 

2 - сахарная кривая при скрытом сахарном диабете. 

Тема 14. Исследование катаболизма и биосинтеза 

триацилглицеролов и фосфолипидов. Установление молекулярных 

механизмов регуляции липолиза. 


Липиды в организме человека выполняют энергетическую, депонирующую, 

регуляторную и структурную функции, принимают участие в построении и 

функционировании биологических мембран клеток. Знания патохимии липидного 

обмена необходимы для понимания патогенеза наиболее распространенных 

заболеваний человека (атеросклероз, ожирение, стеатогепатит и др.) 

30



Уметь использовать знания о мобилизации жира из жировых депо, окислении 

липидов в тканях в клинике с целью объяснения патогенеза ряда заболеваний 

(отдельных эндокринных заболеваний, ожирения, наследственных болезней). 


1. Трактовать биохимические функции простых и сложных липидов в организме: 

участие в построении и функционировании биологических мембран клеток, 

запасная энергетическая функции, использование в качестве предшественников в 

биосинтезе биологически активных соединений липидной природы. 


липидов: катаболизм и биосинтез триацилглицеролов, фосфолипидов, 

гормональная регуляция липолиза. 


1. Знать классификацию липидов. 

2. Писать формулы глицерола, жирных кислот, триацилглицеролов, фосфолипидов. 






1. Практическое значение 1.1. Определение содержания общих 

определения общих липидов в липидов в сыворотке крови за методом 

сыворотке крови. 

Кункеля. 

2. Пути метаболизма простых 

липидов (триацилглицеролов). 

Механизмы регуляции. 

2.1. Биологические функции главных 

классов липидов: энергетическая, 

структурная, регуляторная. 

2.2. Катаболизм триацилглицеролов в 

адипоцитах жировой ткани: 

последовательность реакции, механизмы 

регуляции активности триглицеридлипазы. 

2.3. Нейрогуморальная регуляция липолиза 

с участием адреналина, норадреналина, 

глюкагона и инсулина. 

2.4. Окисление глицерола: ферментативные 

реакции, биоэнергетика. 

2.5. Биосинтез триацилглицеролов. 

2.6. Адипоциты жировой ткани и их роль в 

обмене липидов и биоэнергетических 

процессах в организме. 

2.7. Патохимия ожирения. 

3. Обмен сложных липидов. 3.1. Биологическая роль сложных 

липидов. 

3.2. Биосинтез фосфатидилхолина. 

3.3. Какие липотропные факторы 

(незаменимые компоненты еды) 

необходимы для синтеза 

фосфатидилхолина? 

3.4. Нарушение обмена сложных 

липидов – стеатоз печени. 

31

Индивидуальная самостоятельная работа студента: 

1.Подготовить реферат на тему «Ожирения». 

2.Подготовить реферативный доклад: „Биохимические механизмы развития 

стеатогепатита”. 

3. Создать схему гормональной регуляции липолиза. 

4.Построить схему и написать химические реакции катаболизма 

триацилглицеролов. 

5. Построить схему и написать химические реакции окисления глицерола. 

6. Построить схему и написать химические реакции биосинтеза 

триацилглицеролов. 

7. Объяснить молекулярные механизмы регуляции обмена липидов. 

Алгоритм лабораторной работы 

Количественное определение липидов по методу Кункеля. 

Принцип метода: водорастворимые комплексы липидов сыворотки крови при 

взаимодействии с водонасыщенным фенолом разрушаются с образованием 

свободных липидов. Вследствие этого сыворотка мутнеет; интенсивность помутнения 

зависит от количества липидов в сыворотке. 


К 1,6 мл реактиву Кункеля (водонасыщенного фенола) добавляют 0,2 мл 

исследуемой сыворотки, перемешивают, через 30 мин колориметрируют на ФЭК в 

кювете 3 мм с бесцветным светофильтром. (При очень большой мутности смесь 

разводят реактивом Кункеля в 2 раза и колориметрируют. Результат умножают на 2). 

Расчет: величину экстинкции умножают на 100. 

Hоpма составляет 35 - 45 единиц оптической плотности. 

Норма концентрации общих липидов в сыворотке крови 4 – 8 г/л. 

Кровь для анализа всех показателей обмена липидов берут через 12 часов после 

приема пищи (натощак). 

Клиническое значение анализа: у больных сахарным диабетом, липоидным 

нефрозом, острым или хроническим нефритом, атеросклерозом и некоторыми 

другими заболеваниями наблюдается выраженная гипеpлипидэмия. Часто она 

наблюдается при гиповитаминозах, ИБС, панкреатите, злоупотреблении алкоголем. 

Тема 15. В-окисление жирних и биосинтез жирных кислот. 

Кетоновые тела. 


Свободные жирные кислоты в плазму крови поступают после гидролиза 

триглицеридов жировой ткани и являются главными энергетическими субстратами 

для клеток. Определение жирных кислот в сыворотке крови имеет диагностическое 

значение. Гиперлипацидэмия наблюдается при сахарном диабете, при гиперсекреции 

адреналина и глюкокортикоидов, при нефрозах, голодании. Гиполипацидэмия 

отмечается при гипотиреозе, повышенной секреции инсулина. 

Кетоновые тела: ацетоуксусная кислота, β-гидроксимасляная кислота 

синтезируются в печени и выполняют энергетическую функцию. В норме они 

образуются в небольших количествах и окисляются в тканях до оксида углерода и 

32

воды. Моча здорового человека дает отрицательную реакцию на кетоновые тела. 

При сахарном диабете, базедовой болезни, голодании происходит усиленный распад 

жиров (и белков), в связи с чем в крови накапливаются кетоновые тела, 

обусловливая смещение pH крови в кислую сторону (ацидоз). Это приводит к 

развитию интоксикации организма (кетоз). 


Общая цель: изучить процесс β-окисления жирных кислот и пути использования 

ацетил-КоА в организме, а также биосинтез кетоновых тел и последствия кетоза. 


1. Трактовать биохимические закономерности метаболизма жирных кислот. 

2. Объяснять биохимические основы возникновения и развития нарушений обмена 


Исходный уровень знаний-умений: уметь писать строение жирных кислот, 

кетоновых тел. 






1. Практическое значение 1.1. Определение кетоновых тел в моче. 

определения кетоновых тел в 

моче. 

2. Окисление жирных кислот. 2.1. Окисление жирных кислот (β-окисление) 

а) активация жирных кислот; 

б) роль карнитина в транспорте жирных кислот в 

митохондрии; 

в) последовательность ферментативних реакций. 

2.2. Энергетика β-окисление жирных кислот. 

2.3. Окисление глицерола. 

3. Биосинтез жирных кислот. 3.1. Биосинтез высших жирных кислот, 

метаболические источники. 

3.2. Биосинтез насыщенных жирных кислот 

(пальмитата). 

3.3. Синтез малонил-КоА. 

3.4. Особенности строения синтетазы жирных 

кислот, ацилтранспортирующего белка. Источники 

НАДФН для биосинтеза жирных кислот. 

3.5.Регуляция биосинтеза жирных кислот. 

3.6.Элонгация насыщенных жирных кислот. 

3.7.Образование моно- и полиненасыщенных 

жирных кислот. Физиологичное значение. 

4. Обмен кетоновых тел. 4.1. Кетоновые тела. Реакции биосинтеза и 

утилизации кетоновых тел, их физиологичное 


4.2. Метаболизм кетоновых тел в условиях 

патологии. Механизмы избыточного роста 

содержания кетоновых тел при сахарном диабете и 

голодании. 

4.3. Последствия кетоза. 

33


Создать схемы: 

1. Транспорт и депонирование липидов. 

2. Подготовить реферативный доклад „Причины и последствия кетоза”, 

„Ацетонемический синдром у детей” (для педиатров). 


Выявление ацетона (кетоновых тел) в моче (реакциями с нитропрусидом натрия и 

хлоридом железа). Выявление кетоновых тел в моче экспресс-методом. Значение 

выявления кетоновых тел в крови и моче для медицины. 

Определение кетоновых тел в моче. 

Принцип метода: ацетон и ацетоуксусная кислота при взаимодействии с 

нитpопpуссидом натрия (Na 2 [Fe (CN) 6 NO]) в щелочной среде образуют продукты 

реакции оранжевого цвета. При подкислении ледяной ( 100% ) уксусной кислотой 

эти продукты приобретают вишневый цвет. 


В центpифужную пробирку наливают 0,5 мл исследуемой мочи, потом 0,5 

мл 10% раствора щелочи ( NaOH ) и 0,5 мл раствора нитpопpуссида натрия. При 

перемешивании развивается оранжевая расцветка. Добавление 0,5 мл ледяной 

уксусной кислоты вызывает вишневую окраску. 

В крови концентрация кетоновых тел равняется 

0,034-0,43 ммоль/л ( 1-2 мг% ). 

В норме в моче кетоновые тела не обнаруживаются. Они появляются при 

сахарном и стероидном диабете, при голодании, при недостатке углеводов в 

питании. 

Тема 16. Биосинтез и биотрансформация холестерола. 

Исследование нарушений липидного обмена: стеаторея, 

атеросклероз, ожирение, гиперлипопротеинемии. 


Наиболее распространенные заболевания человечества – сердечно-сосудистые 

болезни и их тяжелые осложнения – ишемическая болезнь сердца (ИБС), 

ишемическая болезнь мозга и нижних конечностей связанны с нарушением обмена 

холестерола и развитием атеросклероза. Ожирение – эпидемия 21-го века. Его 

патогенетическую основу составляет нарушение обмена триацилглицеролов. 

Сахарный диабет сопровождается развитием микро- и макроангиопатий, 

последние обусловленные расстройством обмена холестерола. 

Знания метаболизма липидов необходимы для усвоения этиологии, патогенеза, 

факторов риска атеросклероза и его метаболической и фармакологической 

коррекции. 


Общая цель: изучение метаболизма и биотрансформации холестерола 

необходимо для глубокого анализа разных форм патологии липидного обмена, 

которые составляют молекулярную основу наиболее распространенных заболеваний 

человечества. 

34


1. Трактовать биохимические закономерности регуляции биосинтеза холестерола и 

его биотрансформации: этерификация, образования желчных кислот, 

стероидных гормонов, витамина D 3 . 

2. Анализировать изменения в системе циркуляторних транспортных липидов при 

патологии обмена липидов (атеросклероз, ожирение, сахарный диабет). 

3. Объяснять биохимические основы развития патологии обмена липидов: 

генетических и приобретенных (атеросклероз, ожирение, сахарный диабет). 

Исходный уровень знаний-умений: знать строение и функции липидов, гормоны 

желез внутренней секреции. 






1. Практическое изучение 1.1. Определение содержания 

определения холестерола в холестерола в сыворотке крови. 

сыворотке крови по Ильку. 

2. Биосинтез холестерола. 2.1. Биологическая роль холестерола. 

2.2. Циркуляторный транспорт 

холестерола. Норма содержания 

холестерола в сыворотке крови. Транспорт 

холестерола, изменения в системе 

липопротеинов при патологии, их 

функциональное значение. 

2.3. Схема реакций синтеза холестерола. 

Ключевая реакция биосинтеза. 

2.4. Регуляция синтеза холестерола. 

3. Пути биотрансформации 3.1. Механизм этерификации 

холестерола. 


3.2. Биосинтез желчных кислот из 


3.3. Биосинтез стероидных гормонов из 


3.4. Образование витамина D 3 из 


4. Патология липидного 4.1. Механизмы развития атеросклероза. 

обмена. 

4.2. Механизмы развития ожирения. 

4.3. Нарушение липидного обмена при 

сахарном диабете (макроангиопатий, кетоз), 

механизмы их развития. 

4.4. Стеаторея, механизм развития. 

4.5. Клинико-биохимическая 

характеристика первичных и вторичных 

липопротеинэмий по классификации ВОЗ 


1. Создание схемы в электронном варианте по теме “Биосинтез холестерола и его 

регуляция”, “Транспорт липидов”. 

35

2. Оценка по биохимическим показателям нарушений липидного обмена при 

патологических состояниях. 


Количественное определение холестерола в крови по Ильку. 

Принцип метода: Холестерол при взаимодействии с уксусным ангидридом в 

присутствии концентрированных серной и уксусной кислот образует продукты реакции 

сине-зеленого цвета. Интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству 



Пробирки и микропипетки должны быть сухими. В две центpифужные мерные 

пробирки наливают по 2 мл реактива Илька (Осторожно, концентрированные 

кислоты!!!); потом в одну из них отмеряют 0,1 мл стандартного раствора холестерола, 

а во вторую - 0,1 мл исследуемой сыворотки. Содержание пробирок осторожно 

стряхивают для перемешивания и оставляют на 20 минут. Потом растворы 

фотометриpуют на ФЭК при красном светофильтре (λ = 630-690 нм). По величинам 

оптической плотности (экстинкции) стандарта и сыворотки составляют пропорцию и 

рассчитывают концентрацию холестерола в исследуемой сыворотке. 

В норме концентрация холестерола (общего) в сыворотке взрослого человека 

составляет 3,1 – 5,2 ммоль/л (120-250 мг%). Эфиpосвязанный холестерол сыворотки 

составляет 2/3 общего холестерола. 

Тема 17. Исследование превращений аминокислот 

(трансаминирование, дезаминирование, декарбоксилирование). 


В процессе декарбоксилирования аминокислот в тканях образуются активные 

соединения – биогенные амины (ГАМК, дофамин, гистамин, серотонин, норадреналин, 

адреналин), и амины – эндогенные токсины (путресцин, кадаверин) при гниении 

белков в кишечнике. 

В процессе дезаминирования аминокислот образуются кетокислоты, которые 

могут использоваться в процессе трансаминирования для синтеза заменимых 


Аланинаминотрансфераза (АлАТ) является гепатоспецифическим ферментом, 

аспартатаминотрансфераза (АсАТ) является кардиоспецифическим ферментом. Эти 

ферменты используются для энзимодиагностики заболеваний печени и миокарда. 


Общая цель: 

1. Усвоить принцип метода и оценку клинического значения определения 

активности АлАТ и АсАТ. 

2. Воспроизвести в эксперименте процесс переаминирования с использованием 

глутаминовой и пировиноградной кислот. 



аминокислот: процессы тpансаминирования, дезаминирования, 

36

декаpбоксилирования, объяснять биологическое действие образуемых биогенных 

аминов: серотонина, гистамина, гамма-аминомасляной кислоты. 

2. Написать уравнение реакции переаминирования глутаминовой и пировиноградной 

кислот. 

Исходный уровень знаний-умений: уметь писать формулы 20 аминокислот. 

Применять метод хроматографии для выявления аминокислот. 






1. Практическое изучение 1.1. Определение активности 

определения активности аминотрансфераз в сыворотке крови. 

аминотрансфераз в сыворотке 

крови. 

2. Пул свободных 2.1. Пути поступления свободных 

аминокислот в организме. аминокислот в ткани. 

2.2. Пути использования свободных 

3. Общие пути превращения 


аминокислот в тканях. 

3.1. Трансаминирования аминокислот: 

реакции и их биохимическое значение. 

3.2. Написать уравнение реакций 

переаминирования глутаминовой и 

пировиноградной кислот. 

3.3. Механизм действия 

аминотрансфераз. 

3.4. Прямое и непрямое 

дезаминирование свободных L- 

аминокислот в тканях. 

3.5. Декарбоксилирование L- 

аминокислот в организме человека. 

Физиологичное значение образованных 

продуктов. 

3.6. Окисление биогенных аминов. 


1. Строить схемы и писать биохимические реакции превращения аминокислот в 

метаболических процессах дезаминирования, трансаминирования и 

декарбоксилирования. 

2. Анализировать и трактовать молекулярные механизмы регуляции обмена 

аминокислот и отдельных метаболических путей. 

3. Подготовить реферативное сообщение: ”Клиническое значение определения 

аминотрансфераз”. 


1. Воспроизвести в эксперименте процесс трансаминирования, используя 

глутаминовую и пировиноградную кислоты. 

Принцип метода: заключается в том, что в процессе ферментативного переноса 

аминогруппы с глутаминовой кислоты на кетокислоту (ПВК) образуется аланин. О том, 

что проходит переаминирование, заключают по появлению аланина на хромотограме. 

37

Ход работы: в две пробирки отмеряют по 0,5 мл раствора глутаминовой кислоты, 

0,5 мл раствора ПВК, 1 мл раствора углекислого калия и 0,25 мл раствора 

монобромуксусной кислоты. 

В 1 пробирку (опыт) добавляют 0,5 мл свежей мышечной кашки, во вторую 

пробирку - мышечную кашку, которая предварительно прокипячена на протяжении 

1-2 минут. Обе пробирки ставят в термостат при t = 37 о С на 15 минут. Потом в каждую 

добавляют по 0,25 мл уксусной кислоты и кипятят 2-3 минуты до полного осаждения 

белков. Содержимое пробирок фильтруют. 

Фильтраты хроматографируют. С этой целью на линии старта двух полосок 

фильтровальной бумаги (опыт и контроль) наносят по капле фильтратов из пробирок, 

каждый раз подсушивая на воздухе. Полоски бумаги опускают в пробирки, на дне 

которых находится фенол, насыщенный водой. Пробирки в штативе помещают в 

термостат на 1 час при 35-40 о С. После этого полоски бумаги вынимают, отмечают 

линию фронта (финиш) растворителя, подсушивают 10-15 минут при 100 о С, а затем 

проявляют раствором нингидрина. Снова подсушивают. 

Для каждого определенного пятна вычисляют коэффициент Rf по формуле: 

Rf = 1/h 

где, 1- это расстояние от старта к центру пятна, 

h- расстояние от старта к финишу ( расстояние, которое прошел 

растворитель). 

На основе полученных данных делают вывод, хроматограму подклевывают к 

протоколу. 

Rf аминокислот (для фенола): 

Аспарагиновая к-та – 0,07 Аргинин – 0,41 

Глутаминовая к-та – 0,16 Тирозин – 0,52 

Цистеин – 0,19 Аланин – 0,55 

Глицин (гликокол) – 0,30 Фенилаланин – 0,78 

Метионин – 0,39 Лейцин – 0,79 

2. Определение активности аминотрансфераз. 

Принцип метода. Аминотрансферазы – ферменты которые содержат в качестве 

коферментов фосфопиридоксамин, катализируют обратный перенос аминогрупп с 

α-аминокислот на α-кетокислоты. Определение концентраци α-кетокислот, которые 

образуются при трансаминирование лежит в основе динитрофенилгидразинового 

метода определения активности трансаминаз. 

Ход работы. Определение аспартатаминотрансферазы (АсАТ). 

В пробирку вносят 0,5 мл субстратно-буферной смеси для определения АсАТ, 

выдерживают в термостате при t =37 о С в течении 5 минут, добавляют 0,1 мл 

сыворотки и инкубируют при t =37 о С 60 минут. Потом добавляют 0,5 мл раствора 

динитрофенилгидразина и выдерживают в течении 20 минут при комнатной 

температуре. Добавляют 5 мл 0,4 М раствору NaOH, перемешивают и оставляют на 

10 минут. 

Измеряют оптическую плотность проб, которая исследуются при λ = 560 нм. 

Определение активности аланинаминотрансферазы (АлАТ). В пробирку вносят 

0,5 мл субстратно-буферной смеси для определения АлАТ, выдерживают в 

термостате при t =37 о С в течении 5 минут, добавляют 0,1 мл сыворотки и инкубируют 

при t =37 о С 30 минут. Потом добавляют 0,5 мл раствора динитрофенилгидрозина и 

выдерживают в течении 20 минут при комнатной температуре. Добавляют 5 мл 0,4 М 

раствору NaOH, перемешивают и оставляют на 10 минут. Измеряют оптическую 

38

плотность проб, которые исследуются. Контрольные пробы обрабатывают так, как 

опытные, но сыворотку добавляют после инкубации проб. 

Расчет активности ферментов проводят по калибровочному графику. При 

построении калибровочного графика на оси ординат откладывают значения 

оптической плотности, а на оси абсцисс содержание ПВК. 

Физиологические уровни: для АсАТ – 0,1-0,5, для АлАТ – 0,1-0,7 мкмоль ПВК на 

1 мл сыворотки за 1 час инкубации при t =37 о С. 

Тема 18. Исследование процессов детоксикации аммиака и 

биосинтеза мочевины. 


Понимание биохимических процессов, которые лежат в основе обезвреживания 

аммиака, а также правильная трактовка изменения концентрации мочевины в крови и 

моче, крайне необходимы практикующему врачу для правильной постановки диагноза, 

оценки состояния больного и динамического наблюдения за эффективностью 

назначенного лечения. Измерение содержания мочевины является важным 

показателем конечного этапа белкового обмена. В норме с мочой выделяется в 

среднем 25-30 г мочевины в сутки. При печеночной недостаточности синтез 

мочевины ослабляется, поэтому ее концентрация в крови уменьшается. 

При почечной или сердечно-сосудистой недостаточности выделение мочевины с 

мочой уменьшается, а уровень в крови повышается, в результате чего развивается 

уремия - отравление организма продуктами азотистого обмена. Количество мочевины 

в крови увеличивается также при усилении катаболизма белков (лучевая болезнь, 

злокачественные образования, интоксикации, лихорадка и др.). Анализ является 

обязательным при обследовании и оценки состояния больных с заболеваниями почек 

и печени. 



Уметь анализировать изменения концентрации мочевины в крови и 

интерпретировать полученные результаты. Освоить унифицированный метод 

количественного определения мочевины в крови. Изучить этапы биосинтеза 

мочевины. 


1. Трактовать метаболические закономерности образования и обезвреживания 

аммиака, циркуляторного транспорта аммиака, биосинтеза мочевины. 

2. Анализировать изменения в системах транспорта и обезвреживания аммиака при 

генетических аномалиях ферментов метаболизма аммиака. 

Исходный уровень знаний-умений: знать химическую структуру мочевины и 

веществ, которые принимают участие в процессах обезвреживания аммиака. 

39






1. Практическое изучение 1.1. Определение содержания мочевины 

определения содержания в сыворотке крови. 

мочевины в сыворотке крови. 

2. Образование аммиака и 2.1. Пути образования аммиака. 

процессы 

срочного 2.2. Объяснить молекулярные 

обезвреживания его в организме. механизмы токсического влияния аммиака 

на организм. 

2.3. Циркуляторный транспорт аммиака. 

2.4. Расскажите о 4 молекулярных 

механизмах срочного обезвреживания 

аммиака. Какие существуют пути 

использования организмом образованных 

азотистых продуктов? 

3. Биосинтез мочевины. 3.1. Какие процессы поставляют 

свободный аммиак на первом этапе синтеза 

мочевины? Hапишите реакции синтеза 

глутамина, каpбомаилфосфата? 

3.2. Дать общую характеристику 

процесса биосинтеза мочевины, химизм 

4. Клиническое значение 

исследования мочевины в крови 

и моче. 

реакций, названия ферментов. 

4.1. Первичные и вторичные 

гипераммониэмии (причины и последствия). 

4.2. Объясните изменения показателей 

обмена белков при уремии, печеночной и 

почечной недостаточности, лучевой 

болезни. 

4.3. Приведите цифровые значения 

содержания в норме в крови аммиака, 

мочевины, суточное выделения их с мочой. 

При заболевании, каких органов и систем 

врачу необходимо назначать анализ на 

содержание мочевины в крови и моче? 


1. Оценивать по биохимическим показателям нарушение процессов 

обезвреживания аммиака при врожденных и приобретенных пороках метаболизма. 

2. Подготовить схемы в электроном варианте: 

а) орнитиновый цикл обезвреживания аммиака; 

б) взаимосвязь процесса образования мочевины с дезаминированием, 

переаминированием аминокислот и энергетическим обменом. 

3. Взаимосвязь двух циклов Кребса (орнитинового и трикарбоновых кислот). 


Количественное определение содержания мочевины в крови с 

диацетилмонооксимом. 

Принцип метода: мочевина образует с диацетилмонооксимом комплекс розовокрасного 

цвета. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации мочевины в 

крови. 

40


1 пробирка – опыт 2 пробирка – стандарт 3 пробирка – контроль 

0,1 мл опыта 

0,1 мл стандарта 

0,1 мл воды 

2 мл рабочего раствора 2 мл рабочего раствора 2 мл рабочего раствора 

Кипятить 10 минут на водяной бане все пробирки, после охлаждения 

колориметрировать против контроля при λ=540 нм (зеленый светофильтр), кювета 5 мм 

Расчет: 

Е оп. 

Мочевина = --------- * 16,65 = ммоль/л, где Е оп. – экстинкция опытной пробы, 

Е ст. 

Е ст. – экстинкция стандартной пробы (в 1 мл 16,65 ммоль/л мочевины) 

Концентрация мочевины в сыворотке крови 3,3-8,3 ммоль/л 

Экскреция с мочой 20-30 г/сут 

Тема 19. Исследование путей использования аминокислот в 

биосинтетических процессах (биосинтез глутатиона, креатина и 

порфиринов). 


Креатинин – это конечный продукт обмена креатинфосфата тканей. Повышенная 

экскреция с мочой креатинина наблюдается у больных с лихорадкой, острыми 

инфекциями, при сахарном диабете. Креатинин – азотистый шлак, но благодаря 

азотовыделительной функции почек кровь от него очищается. При патологии почек, 

что сопровождается нарушением азотовыделительной функции, а также при острой 

сердечной недостаточности, креатинин накапливается в крови, а выделение его с 

мочой снижается. Поэтому количественное определение креатинина в крови и моче 

является одним из обязательных анализов при заболеваниях почек. Креатинфосфат 

применяют в клинике для лечения больных с сердечно-сосудистой недостаточностью. 

В результате обмена в организме гемоглобина, миоглобина, цитохромов и других 

гемопротеидов, в состав которых входят тетрапиррольные простетические группы, 

происходит образование пигментов – порфиринов. Существуют наследственные 

нарушения синтеза порфиринов – порфирии. В зависимости от места проявления 

специфического ферментного дефекта, различают эритропоэтические и печеночные 

порфирии. Основными клиническими проявлениями порфирий являются повышение 

чувствительности к свету, неврологические нарушения. 



Усвоить метод количественного определения креатинина в моче, уметь оценить 

результаты анализа. Знать цветную реакцию на креатин с пикриновой кислотой, уметь 

рассчитывать результаты анализа. 

Изучить процесс синтеза порфиринов. Уметь использовать знание о 

наследственных нарушениях обмена порфиринов. 


1. Объяснять биохимические механизмы образования креатина и креатинина. 

2. Анализировать клиническое значение нарушений обмена креатина и креатинина. 

3. Трактовать роль глутатиона в обмене органических пероксидов. 

41

4. Объяснять биохимические принципы регуляции обмена порфиринов, 

возникновения и развития наследственных нарушений синтеза порфиринов – 

порфирий. 

Исходный уровень знаний-умений: уметь писать строение аминокислот – 

предшественников синтеза креатина и глутатиона; уметь писать строение 

предшественников пиррольных колец порфиринов (глицина, сукцинил-КоА). Знать 

строение порфиринов. 






1. Практическое значение 1.1. Определение креатинина в моче. 

определения креатинина в моче. 

2. Обмен креатина. 2.1. Биологическая роль 

креатинфосфата. 

2.2. Биосинтез креатина. 

2.2.1. Предшественники биосинтеза 

креатина. 

2.2.2. Особенности второго этапа 

биосинтеза креатина – трансметилирование 

гликоциамина (гуанидинацетата). Источники 

СН 3 –групп. 

2.3. Реакция фосфорилирования 


3. Клинико-биохимическое 3.1. Клиническое значение определения 

значение нарушений обмена содержания креатина и креатинина в крови 


и моче. 

3.2. Клиническое значение определения 

креатинфосфокиназы. 

Изоформы 

креатинфосфокиназы. 

4. Глутатион. 4.1. Предшественники биосинтеза 

глутатиона. 

4.2. Роль глутатиона в обмене 

органических пероксидов. 

2. Метаболизм порфиринов. 2.1. Порфирины: структура, 

биологическая роль. 

2.2. Реакции биосинтеза 

протопорфирина IX; образование гема. 

2.3. Регуляция синтеза порфиринов. 

2.4. Наследственные нарушения обмена 

порфиринов 

(энзимопатии): 

эритропоэтическая порфирия, печеночные 

порфирии, неврологические нарушения, 

фотодерматиты. 


Подготовить реферат на тему: 

1. Современные биохимические методы исследования функции почек. 

2. Биологическая роль системы глутатиона в антиоксидантной защите. 


42

Количественное определение креатинина в моче. 

Принцип метода: креатинин при взаимодействии с пикриновой кислотой в 

щелочной среде образует окрашенные соединения, интенсивность окраски которых 

пропорциональна концентрации креатинина в моче. 

Экскреция креатинина: ♂ - 1,0-2,0 г/сут 

♀ - 0,8-1,8 г/сут 

Ход работы: 

В колбу объемом 100 мл наливают 1 мл мочи, 1 мл NaOH, 1,5 мл раствора 

пикриновой кислоты, перемешивают и оставляют на 10 минут. Потом доводят объем 

до 100 мл дист. водой. Параллельно выполняют контроль: 1 мл Н 2 О, 1 мл NaOH, 1,5 

мл пикриновой кислоты, перемешивают и доводят объем до 100 мл дист. водой. 

Фотометрируют против контроля на ФЭК с зеленым светофильтром в кювете на 

5 мм. С помощью калибровочного графика определяют количество креатинина в 1 мл 

моче и перечисляют его количество в моче за сутки (1500-2000). 

Калибровочный график количественного определения креатинина в 1 мл моче. 

Е 

0,25 

0,20 

0,15 

0,10 

0,5 1,0 1,5 2,0 С, мг/мл 

43

ИТОГОВЫЙ МОДУЛЬНЫЙ КОНТРОЛЬ. 

Модуль 2. ОБЩИЕ ЗАКОНОМЕРНОСТИ МЕТАБОЛИЗМА. 

“МЕТАБОЛИЗМ УГЛЕВОДОВ, ЛИПИДОВ, АМЫНОКИСЛОТ И ЕГО 

РЕГУЛЯЦИЯ”. 

Цель. 1. Применять знание общих закономерностей метаболизма в процессе 

последующей учебы и профессиональной деятельности для анализа 

патогенеза и клинической диагностики заболеваний, а также контроля 

медикаментозной терапии и обоснования метаболической терапии 

заболеваний. 

2. Использовать теоретические и практические навыки по биохимии и 

патохимии при изучении клинических дисциплин и в клинической биохимии. 

Перечень вопросов для итогового модульного контроля. 

І. Теоретическая подготовка. 

1. Биохимические компоненты клетки, их биохимические функции. Классы 

биомолекул. Иерархия биомолекул, их происхождение. 

2. Ферменты: определение; свойства ферментов как биологических катализаторов. 

3. Классификация и номенклатура ферментов, характеристика отдельных классов 


4. Строение и механизмы действия ферментов. Активный и аллостерический 

(регуляторный) центры. 

5. Кофакторы и коферменты. Строение и свойства коферментов; витамины как 

предшественники в биосинтезе коферментов. 

6. Коферменты: типы реакций, которые катализируют отдельные классы 

коферментов. 

7. Изоферменты, особенности строения и функционирования, значения в 

диагностике заболеваний. 

8. Механизмы действия и кинетика ферментативных реакций: зависимость скорости 

реакции от концентрации субстрата, рН и температуры. 

9. Активаторы и ингибиторы ферментов: примеры и механизмы действия. 

10. Типы ингибирования ферментов: обратимое (конкурентное, неконкурентное) и 

необратимое ингибирование. 

11. Регуляция ферментативных процессов. Пути и механизмы регуляции: 

аллостерические ферменты; ковалентная модификация ферментов. 

12. Циклические нуклеотиды (цАМФ, цГМФ) как регуляторы ферментативных реакций 

и биологических функций клетки. 

13. Энзимопатии – врожденные (наследственные) дефекты метаболизма углеводов, 

аминокислот, порфиринов, пуринов. 

14. Энзимодиагностика патологических процессов и заболеваний. 

15. Энзимотерапия – применение ферментов, их активаторов и ингибиторов в 

медицине. 

16. Принципы и методы выявления ферментов в биообъектах. Единицы измерения 

активности и количества ферментов. 

17. Обмен веществ (метаболизм) - общие закономерности протекания катаболических 

та анаболических процессов. 

18. Общие стадии внутриклеточного катаболизма биомолекул: белков, углеводов, 


44

19. Цикл трикарбоновых кислот. Локализация, последовательность ферментативных 

реакций, значения в обмене веществ. 

20. Энергетический баланс цикла трикарбоновых кислот. Физиологичное значение 

реакций ЦТК. 

21. Субстратное фосфорилирование ЦТК. 

22. Реакции биологического окисления; типы реакций (дегидрогеназная, оксидазная, 

оксигеназная) и их биологическое значение. Тканевое дыхание. 

23. Ферменты биологического окисления в митохондриях: пиридин-, флавинзависимые 

дегидрогеназы, цитохромы. 

24. Последовательность компонентов дыхательной цепи митохондрий. Молекулярные 

комплексы внутренних мембран митохондрий. 

25. Окислительное фосфорилирование: пункты сопряжения транспорта электронов и 

фосфорилирования, коэффициент окислительного фосфорилирования. 

26. Хемиосмотическая теория окислительного фосфорилирования, АТФ-синтетаза 

митохондрий. 

27. Ингибиторы транспорта электронов и разобщители окислительного 

фосфорилирования. 

28. Микросомальное окисление: цитохром Р-450; молекулярная организация цепи 

переноса электронов. 

29. Аэробное и анаэробное окисление глюкозы, общая характеристика процессов. 

30. Анаэробное окисление глюкозы. Последовательность реакций и ферменты 

гликолиза. 

31. Аэробное окисление глюкозы. Этапы превращения глюкозы до СО 2 и Н 2 О. 

32. Окислительное декароксилирование пирувата. Ферменты, коферменты и 

последовательность реакций в мультиферментном комплексе. 

33. Гликолитическая оксидоредукция: субстратное фосфорилирование и челночные 

механизмы окисления гликолитического НАДН. 

34. Сравнительная характеристика биоэнергетики аэробного и анаэробного окисления 

глюкозы, эффект Пастера. 

35. Фосфоролитический путь расщепления гликогена в печени и мышцах. 

Регуляция активности гликогенфосфорилазы. 

36. Биосинтез гликогена: ферментативные реакции, физиологичное значение. 

Регуляция активности гликогенсинтазы. 

37. Механизмы реципрокной регуляции гликогенолиза и гликогенеза за счет 

каскадного цАМФ-зависимого фосфорилирования ферментных белков. 

38. Роль адреналина, глюкагона и инсулина в гормональной регуляции обмена 

гликогена в мышцах и печени. 

39. Генетические нарушения метаболизма гликогена (гликогенозы, агликогенозы). 

40. Глюконеогенез: субстраты, ферменты и физиологичное значение процесса. 

41. Глюкозо-лактатный (цикл Кори) и глюкозо-аланиновый циклы. 

42. Глюкоза крови (глюкоземия): нормогликемия, гипо- и гипергликемии, глюкозурия. 

Сахарный диабет – патология обмена глюкозы. 

43. Гормональная регуляция концентрации и обмена глюкозы крови. 

44. Пентозофосфатный путь окисления глюкозы: схема процесса и биологическое 


45. Метаболические пути превращения фруктозы и галактозы; наследственные 

энзимопатии их обмена. 

46. Катаболизм триацилглицеролов в адипоцитах жировой ткани: последовательность 

реакций, механизмы регуляции активности триглицеридлипазы. 

47. Нейрогуморальная регуляция липолиза при участии адреналина, норадреналина, 

глюкагона и инсулина. 

45

48. Реакции окисления жирных кислот (β-окисление); роль карнитина в транспорте 

жирных кислот в митохондрии. 

49. Энергетическая ценность β-окисления жирных кислот в клетках. 

50. Окисление глицерола: ферментативные реакции, биоэнергетика. 

51. Кетоновые тела. Реакции биосинтеза и утилизации кетоновых тел, 

физиологическое значение. 

52. Нарушение обмена кетоновых тел в условиях патологии (сахарный диабет, 

голодание). 

53. Биосинтез высших жирных кислот: реакции биосинтеза насыщенных жирных 

кислот (пальмитата) и регуляция процесса. 

54. Биосинтез моно- и полиненасыщенных жирных кислот в организме человека. 

55. Биосинтез триацилглицеролов и фосфоглицеридов. 

56. Метаболизм сфинголипидов. Генетические аномалии обмена сфинголипидов – 

сфинголипидозы. 

57. Биосинтез холестерина: схема реакций, регуляция синтеза холестерина. 

58. Пути биотрансформации холестерина: этерификация; образования желчных 

кислот, стероидных гормонов, витамина D 3 . 

59. Циркуляторный транспорт и депонирование липидов в жировой ткани. 

Липопротеинлипаза эндотелия. 

60. Липопротеины плазмы крови: липидный и белковый (апопротеины) состав. Гиперлипопротеинемии. 

61. Патологии липидного обмена: атеросклероз, ожирение, сахарный диабет. 

62. Пул свободных аминокислот в организме: пути поступления и использования 

свободных аминокислот в тканях. 

63. Трансаминирование аминокислот: реакции и их биохимическое значение, 

механизмы действия аминотрансфераз. 

64. Прямое и непрямое дезаминирование свободных L-аминокислот в тканях. 

65. Декарбоксилирование L-аминокислот в организме человека. Физиологичное 

значение образованных продуктов. Окисление биогенных аминов. 

66. Пути образования и обезвреживания аммиака в организме. 

67. Биосинтез мочевины: последовательность ферментных реакций биосинтеза, 

генетические аномалии ферментов цикла мочевины. 

68. Общие пути метаболизма углеродных скелетов аминокислот в организме 

человека. Глюкогенные и кетогенные аминокислоты. 

69. Биосинтез и биологическая роль креатина и креатинфосфата. 

70. Глутатион: строение, биосинтез и биологические функции глутатиона. 

71. Специализированные пути метаболизма циклических аминокислот – 

фенилаланина и тирозина. 

72. Наследственные энзимопатии обмена циклических аминокислот – фенилаланина 

и тирозина. 

73. Обмен циклической аминокислоты триптофана и его наследственные 

энзимопатии. 

74. Метаболизм порфиринов: строение гемма; схема реакций биосинтеза 

протопорфирина IX и гемма. 

75. Наследственные нарушения биосинтеза порфиринов, типы порфирий. 

76. Катаболизм гемоглобина и гемма (схема); образование и строение желчных 

пигментов. 

77. Патобиохимия и виды желтух; биохимическая диагностика желтух. 

46

ІІ. Практическая подготовка. 

1. Объяснить основные принципы определения активности ферментов на примере 

амилазы слюны (йод-крохмальные реакции Троммера и Фелинга) 

2. Доказать белковую природу ферментов биуретовой реакцией, реакцией Фоля, 

методом формилтитрования по Серенсену при последовательном гидролизе 

белка. Объяснить принципы методов. 

3. Объяснить термолабильность ферментов на примере определения активности 

амилазы слюны. 

4. Нарисовать график зависимости активнсоти фермента от рН среды по результатам 

определения активности пепсина и амилазы слюны. Объяснить его. 

5. Доказать абсолютную специфичности сахаразы (в реакціях с сахарозой и 

крахмалом) и относительную специфичность пепсина (в реакціях с фібрином и 

белком яйца). Какой еще существует вид специфичности? 

6. Объяснить влияние модуляторов на активность ферментов на примере 

определения активности холинэстеразы в присутствии хлорида кальция и 

фосфакола, на примере активнсоти амилазы слюны в присутствии хлорида 

натрия. 

7. Как можно доказать функционирование ЦТК? Принцип определения активности 

ферментов ЦТК. Доказать функционирование ЦТК по использованию ацетилКоА, 

по образованию СО 2 , по освобождению из промежуточных продуктов атомов 

водовода. 

8. Ингибирование ферментов ЦТК малоновой кислотой. Назовите типы 

ингибирования. Каким путем можно избавиться от негативного влияния малоновой 

кислоты? Нарисуйте график зависимости активности ферментов ЦТК от 

концентрации субстрата без малоновой кислоты и в ее присутствии. К какому 

классу и подклассу ферментов относятся ферменты ЦТК? 

9. Определение активности сукцинатдегидрогеназы, цитохромоксидазы митохондрий 

– ферментов дыхательной цепи. К какому классу ферментов они принадлежат? 

Объяснить принципы методов. Назвать ингибиторы ферментов дыхательной 

цепи, ингибиторы окислительного фосфорилирования. 

10. Исследовать процесс окислительного фосфорилирования в митохондриях, 

объяснить, на чем он основан. Какие фармакологические и физиологические 

соединения являються разобщителями дыхания и фосфорилирования? Объяснить 

биохимические механизмы их действия. 

11. Выявление глюкозы в растворах реакцией Троммера, Фелинга. Написать 

уравнение. 

12. Определение глюкозы в крови глюкозооксидазным методом (Городецкого). 

Написать уравнение реакции которая лежит в основе этого метода. Какова в норме 

концентрация глюкозы в крови человека? 

13. Определение глюкозы в крови методом Хагедорна-Йенсена. Объясните принцип. 

14. Выявление фруктозы реакцией Селиванова. Принцип метода. 

15. Выявление гликогена в печени. Как может быть использован гликоген печени? Где 

еще накапливается в организме человека гликоген? 

16. Определение конечного продукта анаэробного гликолиза – молочной кислоты 

методом Уффельмана. Принцип метода. 

17. Выявление ацетона (кетоновых тел) в моче (реакциями с нитропруссидом натрия и 

хлоридом железа). Выявление кетоновых тел в моче експресс-методом. Принципы 

методов. Значение выявления кетоновых тел в крови и моче для медицины. 

18. Выявление ацетона йодоформной реакцией. Написать эту реакцию. 

47

19. Определение содержания пировиноградной кислоты в биологических жидкостях 

колориметрическим методом. Объясните принцип. Как строится калибровочная 

кривая? 

20. Определение сиаловых кислот реактивом Гесса. Какое клиническое значение 

имеет определение концентрации сиаловых кислот в крови? 

21. Выявление холестерола методом Сальковского. Принцип метода. 

22. Выявление холестерола методом Либермана-Бурхарда. Принцип метода. Какая в 

норме концентрация холестерола в крови человека? 

23. Изучение кинетики действия липазы поджелудочной железы. Какие соединения в 

организме активируют липазу? Проиллюстрируйте ответ результатами 

практической работы. 

24. Воспроизведите в эксперименте процесс переаминирования с использованием 

глутаминовой и пировиноградной кислот. Использование метода хроматографии 

для оценки результатов. Напишите уравнение соответствующих реакций. 

25. Определение активности аланинаминотрансферразы и 

аспартатаминотрансферразы. Принцип метода. Значение определения этих 

ферментов для медицины. 

26. Определение мочевины в моче цветной реакцией с диацетилмонооксимом. 

Написать реакции образования мочевины в организме. 

27. Определение аммиака в моче. Принцип метода. 

28. Определение креатинина в моче цветной реакцией Яффе. При каких условиях 

наблюдается увеличение или уменьшение количества креатинина в моче? 

29. Выявление желчных пигментов в моче реакцией Гмелина. Поясните процесс 

образования желчных пигментов в организме. 

30. Выявление уробилина в моче реакцией Богомолова. Принцип метода. Когда 

уробилин присутствует среди желчных пигментов в моче? 

31. Качественная реакция на фенилпировиноградную кислоту (проба Фелинга). 

Принцип метода. При каком заболевании фенилпировиноградная кислота 

появляется в моче? 

48

МОДУЛЬ 3 

МОЛЕКУЛЯРНАЯ БИОЛОГИЯ. БИОХИМИЯ МЕЖКЛЕТОЧНЫХ 

КОММУНИКАЦИЙ. БИОХИМИЯ ТКАНЕЙ И ФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ 

ФУНКЦИЙ 

Тема 1. Исследование биосинтеза и катаболизма пуриновых и 

пиримидиновых нуклеотидов. Определение конечных продуктов их 

обмена. 


Структурными компонентами ДНК и РНК является пуриновые та пиримидиновые 

мононуклеотиды. Их биосинтез обеспечивает образование информационных молекул 

нуклеиновых кислот, необходимых для реализации генетической информации. 

Распад нуклеиновых кислот в тканях сопровождается образованием конечных 

продуктов. Характерным продуктом распада пуриновых нуклеотидов является 

мочевая кислота, избыточное образование которой способствует развитию подагры. 

Подагра может быть следствием недостаточной азотвыделительной функции 

почек, заболевания сердца, наследственных нарушений обмена пуринових 

нуклеотидов, а также избыточного употребления продуктов, богатых на 

нуклеопротеиды. 



Знать биохимическую динамику превращения нуклеотидов, основы их патохимии 

и биохимической диагностики. 


1. Анализировать последовательность реакций биосинтеза и катаболизма 

пиримидиновых нуклеотидов. 

2. Анализировать последовательность реакций биосинтеза и катаболизма 

пуриновых нуклеотидов, нарушение синтеза мочевой кислоты и биохимические 

основы развития подагры. 


1. Уметь проводить титрование (общая химия). 

2. Уметь писать строение азотистых оснований и мононуклеотидов. 






1. Практическое изучение 1.1. В тетрадь протоколов опытов 

количественного определения выписать алгоритм лабораторной работы. 

мочевой кислоты. 

2. Биосинтез пуринових 2.1. Схема реакций синтеза ИМФ и 

нуклеотидов. 

последовательность образования АМФ, ГМФ, 

АТФ, ГТФ. 

2.2. Регуляция биосинтеза пуриновых 

нуклеотидов по принципу отрицательной 

3. Биосинтез пиримидиновых 

нуклеотидов. 

обратной связи (ретроингибирование). 

3.1. Предшественники синтеза, реакции и 

регуляция. 

49

ГОСУДАРСТВЕННОЕ МЕДИЦИНСКОЕ УЧЕБНОЕ ЗАВЕДЕНИЕ

Create successful ePaper yourself

Delete template?

Save as template?