ГОСУДАРСТВЕННОЕ МЕДИЦИНСКОЕ УЧЕБНОЕ ЗАВЕДЕНИЕ

Алгоритм лабораторной работы.
Количественное определение глюкозы в крови натощак.
Принцип метода: глюкоза при взаимодействии с ортотолуидином образует продукт
сине-зеленого цвета. Интенсивность окраски прямопропорциональна количеству
глюкозы.
В норме концетрация глюкозы крови:
3,3 – 5,5 ммоль/л.
Ход работы.
В сухую пробирку вносят 2,0 мл ортотолуидинового реактива (отмеряют
центрифужной мерной пробиркой) и добавляют к нему микропипеткой фильтрат крови
– 0,2 мл (фильтрат получают путем смешивания 0,2 мл крови с 1,8 мл 3% раствора
трихлоруксусной кислоты со следующим фильтрованием).
В другую сухую пробирку вносят 2,0 мл ортотолуидинового реактива и 0,2 мл
стандартного раствора глюкозы (4,5 ммоль/л).
Пробирки помещают на 8 минут в кипящую водяную баню; потом охлаждают и
содержание пробирок фотометрируют на ФЭК в 5 мм кювете при красном
светофильтре (длина волны = 620 нм).
По величинам экстинкций рассчитывают концентрацию глюкозы в крови.
Пример расчета:
экстинкция фильтрата - 0,28
экстинкция стандарта - 0,25
концентрация глюкозы в фильтрате - Х
концентрация глюкозы в стандарте – 4,5 ммоль/л
4,5 ммоль/л - 0,25
Х - 0,28
Х =
4,5
0,28
0,25
= 5,0 ммоль/л
Тема 13. Исследование механизмов метаболической и
гормональной регуляции обмена углеводов. Сахарный диабет.
Актуальность темы.
Регуляция обмена углеводов, на всех этапах их синтеза и распада,
обеспечивается нейрогуморальным путем. Инсулин, модифицируя разные пути
метаболизма углеводов, уменьшает уровень глюкозы в крови. Соматотропный,
адренокортикотропный, тиреотропный гормоны, тироксин, адреналин,
глюкокортикоиды и глюкагон вызывают гипергликемию.
В то же время, углеводный обмен регулируется разными факторами, которые
влияют на активность ферментов концентрацией: субстратов, метаболитов,
коферментов, наличием или отсутствием кислорода.
Цель и исходный уровень знаний.
Общая цель.
Знать интеграцию всех этапов обмена углеводов и контроль содержания глюкозы
в крови, что достигается путем тесного взаимодействия нейрогенных и гуморальных
28