ГОСУДАРСТВЕННОЕ МЕДИЦИНСКОЕ УЧЕБНОЕ ЗАВЕДЕНИЕ

2. Оценка по биохимическим показателям нарушений липидного обмена при
патологических состояниях.
Алгоритм лабораторной работы.
Количественное определение холестерола в крови по Ильку.
Принцип метода: Холестерол при взаимодействии с уксусным ангидридом в
присутствии концентрированных серной и уксусной кислот образует продукты реакции
сине-зеленого цвета. Интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству
холестерола.
Ход работы.
Пробирки и микропипетки должны быть сухими. В две центpифужные мерные
пробирки наливают по 2 мл реактива Илька (Осторожно, концентрированные
кислоты!!!); потом в одну из них отмеряют 0,1 мл стандартного раствора холестерола,
а во вторую - 0,1 мл исследуемой сыворотки. Содержание пробирок осторожно
стряхивают для перемешивания и оставляют на 20 минут. Потом растворы
фотометриpуют на ФЭК при красном светофильтре (λ = 630-690 нм). По величинам
оптической плотности (экстинкции) стандарта и сыворотки составляют пропорцию и
рассчитывают концентрацию холестерола в исследуемой сыворотке.
В норме концентрация холестерола (общего) в сыворотке взрослого человека
составляет 3,1 – 5,2 ммоль/л (120-250 мг%). Эфиpосвязанный холестерол сыворотки
составляет 2/3 общего холестерола.
Тема 17. Исследование превращений аминокислот
(трансаминирование, дезаминирование, декарбоксилирование).
Актуальность темы.
В процессе декарбоксилирования аминокислот в тканях образуются активные
соединения – биогенные амины (ГАМК, дофамин, гистамин, серотонин, норадреналин,
адреналин), и амины – эндогенные токсины (путресцин, кадаверин) при гниении
белков в кишечнике.
В процессе дезаминирования аминокислот образуются кетокислоты, которые
могут использоваться в процессе трансаминирования для синтеза заменимых
аминокислот.
Аланинаминотрансфераза (АлАТ) является гепатоспецифическим ферментом,
аспартатаминотрансфераза (АсАТ) является кардиоспецифическим ферментом. Эти
ферменты используются для энзимодиагностики заболеваний печени и миокарда.
Цель и исходный уровень знаний.
Общая цель:
1. Усвоить принцип метода и оценку клинического значения определения
активности АлАТ и АсАТ.
2. Воспроизвести в эксперименте процесс переаминирования с использованием
глутаминовой и пировиноградной кислот.
Конкретные цели:
1. Трактовать биохимические закономерности внутриклеточного метаболизма
аминокислот: процессы тpансаминирования, дезаминирования,
36