ГОСУДАРСТВЕННОЕ МЕДИЦИНСКОЕ УЧЕБНОЕ ЗАВЕДЕНИЕ

Ориентировочная карта для самостоятельного изучения студентами
учебной литературы при подготовке к занятию.
Содержание
и
последовательность действий
1. Практическое изучение
определения пировиноградной
кислоты в биологических
жидкостях.
2. Изучение аэробного
окисления глюкозы.
3. Клиническое значение
определения пировиноградной
кислоты в биообъектах.
Указания к учебным действиям
1.1. Определение пировиноградной
кислоты в моче.
2.1. Этапы аэробного окисления
глюкозы.
2.2 Окислительное
декарбоксилирование пирувата.
2.2.1. Мультиферментный
пируватдегидрогеназный комплекс –
особенности функционирования при
участии трех ферментов и пяти
коферментов. Суммарное уравнение
процесса.
2.3. Сравнительная характеристика
биоэнергетики аэробного и анаэробного
окисления глюкозы.
2.4. Эффект Пастера – переключение из
анаэробного на аэробное окисление
глюкозы, особенности регуляции.
2.5. Челночные механизмы окисления
гликолитического НАДН. Малатаспартатный
шунт транспорта
восстановительных
эквивалентов
гликолитического НАДН в митохондрии в
аэробных условиях.
3.1. Причины и последствия
пируватэмии.
Задание для индивидуальной самостоятельной работы студентов.
Подготовить реферат на тему: ”Участие водорастворимых витаминов в
углеводном обмене и их клиническое применение”.
Алгоритм лабораторной работы.
Количественное определение пировиноградной кислоты в моче.
Принцип метода: пировиноградная кислота (ПВК) при взаимодействии с 2,4-
динитрофенилгидразином (2,4-ДФГ) в щелочной среде образует окрашенный
комплекс жѐлто-оранжевого цвета. Интенсивность окраски прямо пропорциональная
количеству ПВК.
Ход работы.
(Использовать сухую посуду). В первую пробирку наливают 0,5 мл мочи; во
вторую – 0,5 мл стандарта. Потом в обе пробирки добавляют по 1 мл раствора 2,4-
ДФГ; и через 5 минут – по 4 мл концентрированного раствора KOH.
Перемешивают и через 5 минут определяют оптическую плотность (экстинкцию)
растворов на ФЕК, в кювете на 5 мм с синим светофильтром. По величинам
24