ГОСУДАРСТВЕННОЕ МЕДИЦИНСКОЕ УЧЕБНОЕ ЗАВЕДЕНИЕ

1. Колориметр включить в сеть за 15 мин. до начала измерений. Во время
прогревания кюветное отделение должно быть открыто.
2. Выставить необходимый для измерения цветной светофильтр.
3. Установить минимальную чувствительность колориметра.
4. Перед измерением проверить установку стрелки колориметра на “0” при закрытом
кюветном отделении.
5. По ходу светового луча поместить кювету с раствором.
6. Закрыть крышку кюветного отделения.
7. Снять показатели по шкале колориметра.
8. Выключить прибор из сети.
Порядок работы с использованием водяной бани:
1. Установить баню на подставку или стол.
2. Уровень воды в бане должен быть не более 2/3 объема посуды.
3. Окунуть в баню штатив для пробирок.
4. На сложной вилке бани установить переключение мощности в положение
“700 В.А.”, что отвечает ускоренному нагреванию. Вилку вставить в электрическую
сеть.
5. После закипания води переключатель перевести в положение “350 В.А.”, что
отвечает рабочему режиму.
6. Во время работы поддерживать нужный уровень воды в бане.
Алгоритм лабораторной работы.
1. Изучение термолабильности ферментов.
Слюну развести в 5 раз (1 мл слюны + 4 мл воды). 2 мл разведенной слюны
кипятить 5 минут. В 3 пробирки налить по 10 кап. 1% раствора крахмала. В первую
пробирку прибавить 10 кап. воды (контроль), во вторую – 10 кап. охлажденной
прокипяченной слюны, в третью – 10 кап. разведенной слюны.
Все пробирки поместить в водяную баню или термостат при температуре 38 0 С на
10 минут. После этого выполнить качественные реакции на крахмал и продукты его
гидролиза (глюкозу и мальтозу).
Реакция на крахмал: к 5 кап. исследуемого раствора добавить 1 кап. раствора
Люголя (КІ 3 ). В присутствии крахмала появляется синяя окраска
Реакция Фелинга: к 5 кап. исследуемого раствора добавить 3 кап. раствора
Фелинга (CuSO 4 + NaOH), подогреть. В присутствии глюкозы или мальтозы выпадает
желтый осадок гидрата закиси меди или красный осадок закиси меди.
2. Изучение зависимости активности ферментов от рН среды.
Слюну развести в 10 раз (1 мл слюны + 9 мл воды). В 3 пробирки налить по 1 мл
буферных растворов с рН 3; 7,4; 14. В каждую пробирку отмерять по 1 мл разведенной
слюны, по 1 мл 1% раствора крахмала, перемешать и инкубировать 10 мин. при
температуре 38 0 С. После этого под контролем индикаторной бумаги нейтрализовать
содержание пробирки с рН 3 - раствором щелочи, а содержание пробирки с рН 14 –
раствором 0,1н HCl.
Результат опыта выявить с помощью раствора Люголя, добавляя его по 1-2 кап. в
каждую пробирку, размешать, отметить окраску и сделать выводы.
6