Tierärztliche Hochschule Hannover Einfluss unterschiedlicher ...

1 Einleitung
Die erfolgreiche Weiterentwicklung der In-vitro-Produktion (IVP) von Rinderembryonen, bestehend
aus den drei methodischen Schritten der In-vitro-Maturation (IVM), In-vitro-Fertilisation
(IVF) und In-vitro-Kultur (IVC) hat in den letzten Jahren Embryonen in großer Zahl verfügbar
gemacht. Bei Verwendung von Kumulus-Oozyten-Komplexen (KOK) aus Schlachthofovarien
liegen die Effizienzen für die einzelnen Schritte bei 60-95 % für die IVM (ADONA
et al. 2008), 70-90 % für die IVF (WRENZYCKI et al. 2007) und 25-40 % für die IVC (KES-
KINTEPE und BRACKETT 1996, RIZOS et al. 2003). In Kombination mit der Ovum-Pick-Up
(OPU)-Technologie zur Gewinnung von Eizellen von lebenden Tieren liegen die Entwicklungsraten
zu einem transfertauglichen Embryo an Tag 7 ebenfalls bei 25-40 %. Somit steht
mit der kombinierten OPU-/IVP-Technologie ein alternatives Verfahren zu den klassischen
MOET-Programmen (Multiple Ovulation and Embryo Transfer, Superovulation mit anschließendem
Embryotransfer) zur Verfügung (PIETERSE et al. 1991b). Nach dem Transfer von IVP-
Embryonen auf Empfängertiere werden bei frisch transferierten Embryonen Trächtigkeitsraten
von ca. 50 % (WRENZYCKI 2007) erziehlt, beim Transfer tiefgefrorener Embryonen durchschnittlich
40 % (GALLI et al. 2001, LAZZARI et al. 2002, WRENZYCKI 2007).
Trotz der enormen Verbesserung der IVP-Systeme weisen in vitro produzierte Embryonen
nach wie vor eine schlechtere Qualität auf als in vivo gewonnene (NIEMANN et al. 2002, RI-
ZOS et al. 2002). Während die Qualität der Oozyte sich hauptsächlich auf die Anzahl der sich
entwickelnden Blastozysten auswirkt (RIZOS et al. 2002), beeinflussen die Kulturbedingungen
die Blastozysten hinsichtlich ihrer Genexpressionsmuster (WRENZYCKI et al. 2007, GAD
et al. 2012), ihrer Fähigkeit, eine Trächtigkeit zu induzieren und ihrer Gefriertauglichkeit (LO-
NERGAN et al. 2001, RIZOS et al. 2003).
Die für die IVP verwendeten KOK werden routinemässig aus Schlachthofovarien oder durch
die transvaginale, ultraschallgeleitete Follikelpunktion (OPU) gewonnen und nach morphologischen
Kriterien ausgewählt. Die Entwicklungskompetenz der Oozyten bis zur Blastozyste ist
hierbei durch den Zyklusstand des Tieres, die follikuläre Entwicklungsphase sowie die Follikelgröße
beeinflusst. Im Gegensatz zu fertilen Schlachttieren haben OPU-Spendertiere aufgrund
des ein bzw. zwei Mal wöchentlich durchgeführten OPU keinen physiologischen Zyklus (GIB-
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